抗微生物组合物

摘要

本发明涉及抗微生物组合物和涉及抗微生物组合物的消毒方法。它尤其涉及用于个人清洁、口腔护理或者硬表面清洁应用的抗微生物组合物。发现包含百里酚、选定的双环醇和载体的组合物提供了协同抗微生物作用。在一个优选的方面，所述组合物还包含1‑80%‑wt的一种或多种表面活性剂。

权利要求

1.抗微生物组合物，其包含：

i.0.001-5重量％的百里酚，ii.0.01-5重量％的一种或多种双环醇，和iii.载体；

其中所述一种或多种双环醇选自诺卜醇、二氢诺卜醇、桃金娘烯醇、二氢桃金娘烯醇和诺蒎醇；

并且其中所述载体包含水、乙醇、丙醇、异丙醇、乙二醇、丙二醇、二甘醇或其混合物。

2.根据权利要求1的抗微生物组合物，其中所述一种或多种双环醇选自诺卜醇、二氢诺卜醇、桃金娘烯醇和二氢桃金娘烯醇。

3.根据权利要求2的抗微生物组合物，其中所述双环醇是诺卜醇。

4.根据权利要求3的抗微生物组合物，其中所述双环醇为(-)-诺卜醇。

5.根据权利要求1-4中任一项的抗微生物组合物，其中所述百里酚以0.01-0.4重量％的浓度存在，并且所述一种或多种双环醇以0.05-1重量％的浓度存在。

6.根据权利要求1-4中任一项的抗微生物组合物，其包含1-80重量％的一种或多种表面活性剂。

7.根据权利要求6的抗微生物组合物，其中所述一种或多种表面活性剂选自阴离子型表面活性剂、非离子型表面活性剂、和阴离子型表面活性剂与非离子型表面活性剂的组合。

8.根据权利要求6的固体抗微生物组合物，其包含：a.0.05-5重量％的所述百里酚，b.0.05-5重量％的所述一种或多种双环醇，c.5-30重量％的水，和；

d.30-80重量％的所述一种或多种表面活性剂。

9.消毒表面的方法，其包括以下步骤a.将组合物施用于表面上，所述组合物包含i.0.001-5重量％的百里酚，ii.0.001-5重量％的一种或多种双环醇，和iii.载体；

其中所述一种或多种双环醇选自诺卜醇、二氢诺卜醇、桃金娘烯醇、二氢桃金娘烯醇和诺蒎醇；且b.从所述表面除去所述组合物。

10.根据权利要求9的方法，其中所述组合物是根据权利要求1-8中任一项的组合物。

11.根据权利要求9或10的方法，其中所述表面是皮肤表面。

12.根据权利要求9或10的方法，其中步骤(b)在步骤(a)开始之后2分钟至5秒开始。

13.根据权利要求9或10的方法，其中所述方法的消毒时间T少于300秒；其中T被定义为从所述组合物添加至微生物培养物的那一刻起直至每单位体积培养物的微生物数减少

100000倍所经历的时间。

14.根据权利要求9或10的方法，其中步骤(b)在步骤(a)开始之后1分钟至10秒开始。

15.根据权利要求9或10的方法，其中步骤(b)在步骤(a)开始之后30秒至10秒开始。

16.根据权利要求9或10的方法，其中步骤(b)在步骤(a)开始之后20秒至15秒开始。

17.根据权利要求9或10的方法，其中所述方法的消毒时间T少于60秒；其中T被定义为从所述组合物添加至微生物培养物的那一刻起直至每单位体积培养物的微生物数减少

100000倍所经历的时间。

18.根据权利要求9或10的方法，其中所述方法的消毒时间T少于15秒；其中T被定义为从所述组合物添加至微生物培养物的那一刻起直至每单位体积培养物的微生物数减少

100000倍所经历的时间。

19.根据权利要求13的方法，其中最初的微生物数超过100 000 000个微生物/毫升且其中所述组合物为液体组合物。

20.组合物用于改进手部卫生的用途，由此所述组合物包含i.0.001-5重量％的百里酚，ii.0.001-5重量％的一种或多种双环醇，和iii.载体；

其中所述一种或多种双环醇选自诺卜醇、二氢诺卜醇、桃金娘烯醇、二氢桃金娘烯醇和诺蒎醇。

21.组合物用于改进口腔卫生的用途，由此所述组合物包含i.0.001-5重量％的百里酚，ii.0.001-5重量％的一种或多种双环醇，和iii.载体；

其中所述一种或多种双环醇选自诺卜醇、二氢诺卜醇、桃金娘烯醇、二氢桃金娘烯醇和诺蒎醇。

说明书

抗微生物组合物

发明领域

[0001] 本发明涉及抗微生物组合物和涉及该抗微生物组合物的消毒方法。其特别涉及用于个人清洁、口腔护理或硬表面清洁应用的抗微生物组合物。

[0002] 发明背景

[0003] 清洁和消毒皂或清洁组合物对个体大有益处，因为正确使用通常可以使个体接触的细菌和病原体的数目减少。因此，此类组合物可例如在减少传染性疾病的发生和传播方面起到重要作用。

[0004] 包含基于氯的抗微生物剂诸如三氯生的杀菌和消毒皂组合物是已知的。此类组合物需要相当长的接触时间来提供有效的抗菌作用。在实践中，用户，特别是儿童，不会花费长时间来清洁，结果，使用此类组合物的清洁没有对表面或者局部感染提供于足够的预防或者提供足够的抗病保护。用户，尽管清洁了他的手，但通常很可能结果在他的皮肤上的除菌是相对不足的。因此，他可能引起另外的有生命和/或没有生命的表面的污染，有助于病原体扩散和随后的疾病。通常的用户，特别是儿童(他们在餐前用缓慢作用的抗微生物组合物在相对短的时间内清洗污染的手)处于感染疾病的风险中。

[0005] 类似地，在硬表面清洁领域中，例如地板，桌面或者器具清洁中，组合物中的抗微生物活性剂与基底的接触小于几分钟，其后该表面用水擦拭或者冲洗。这些短时间范围的清洁作用在提供期望的益处方面是无效的，因为通常用于此类产品中的大多数已知的抗微生物剂需要许多分钟至数小时来提供期望的微生物杀灭作用。

[0006] 所以，需要提供一种组合物，其在施用之后在相对短清洁时间期间，优选约30秒或更少，能够提供相对更有效的抗微生物作用。

[0007] 一类充分确认的抗微生物活性化合物是酚类化合物[P A Goddard and K A McCue in “Disinfection, Sterilisation and Preservation”, S S Block编, 第5版, Lippincott, Williams and Wilkins, Philadelphia, 2001 第255-282页.]。然而，并不是每一个酚类化合物都适合作为抗微生物剂。并且，许多酚类即使是抗微生物活性的，当施用于人或动物皮肤时，也可表现出不期望的副作用，诸如腐蚀性、恶臭及刺激性或感光性作用。

[0008] 百里酚的一个具体问题在于由于其嗅觉特性导致的其在制剂中的存在通常是容易察觉的。尽管它们的嗅觉特性(至少在一定程度上)在某些芳香组合物中是需要的，但一些用户认为当快速消毒中以有效浓度施用时太过浓烈。此外，较低浓度的气味性化合物(包括百里酚)或较少气味或无气味的抗微生物化合物的可得性使得生产商在以更低剂量赋予其组合物可替代的气味方面具有更大的灵活性。因此，需要提供可替代的抗微生物组合物和方法，其优选需要更低的百里酚浓度和/或具有更可接受的感官特性。

[0009] WO 2010/046238 A1描述了一种有效的抗微生物组合物，其提供快速的病原菌杀灭作用并且包含0.01-5 wt% 的百里酚、0.01-5 wt% 的萜品醇和载体。WO 2010/046238 A1还公开了一种表面消毒的方法，包括将上述组合物施用于表面的步骤。

[0010] WO 11/117424公开了用于体内治疗用途的病毒性抑制剂组合物，其包含(-)-香芹酮、香叶醇和其他必需油组分的组合。

[0011] GB 2 354 771公开了一种、两种或三种杀细菌剂与阴离子、阳离子、非阴离子或两性表面活性剂的组合。实施例公开了涉及5-氯-2-(2, 4-二氯苯氧基)苯酚、4-羟基-，丙酯苯甲酸，和反式-3,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-醇的组合。

[0012] M. Jalali-Heravi等人[J. Chromatography A, 第1218卷, 第2569-2576页 (2011)]记载了如由气相色谱和质谱测定的伊朗迷迭香精油组分。

[0013] K. Kirchner等人[Revista Brasileira de Farmacognosia, 第20(5)卷, 第692-699页 (2010)]记载了如由气相色谱和质谱测定的雪香兰属,金粟兰科(Hedyosmum brasiliense Miq.Chloranthaceae)的精油组分。在所述油中发现的各个组分的相对量基于从火焰电离检测器获得的未经校准的峰面积。还证实了针对某些细菌和真菌微生物的抗微生物活性。

[0014] FR 2 697 133公开了杀生物和/或抑制生物的组合物，其包含通式C15HxO的单氧化倍半萜烯(其中x为20至26)和芳族化合物。

[0015] 尽管抗微生物化合物和组合物是通常可得的，但仍不断需要发现可替代的抗微生物组合物和适合用于此类组合物中的活性化合物。具体地，鉴于当前消费者的习惯，提供快速抗微生物作用的可替代的组合物仍然是非常需要的。此类可替代物可减少对现有原材料的依赖性。并且，在抗微生物剂领域，可替代物的可得性可减少发生微生物对特定抗微生物化合物抗性或不敏感的风险。

[0016] 此外，仍不断需要减少此类抗微生物组合物中所需的活性成分的总量。这种需求可能例如是由于对成本效益的期望所推动的，因为此类组合物尤其与发展中国家相关。并且，出于环境原因，减量也是有益的。

[0017] 鉴于现有技术的上述问题和缺点，本发明的一个目的是提供可替代的抗微生物组合物。

[0018] 本发明的一个具体目的是提供需要更低剂计量的抗微生物化合物的此类组合物。

[0019] 类似地，本发明的一个目的是提供这样的抗微生物组合物，其中抗微生物活性化合物的嗅觉作用被降低或其中活性化合物有助于提供消费者可接受的或甚至消费者喜欢的气味。

[0020] 本发明的另一个具体目的是提供有助于在表面消毒方法中减少所需接触时间的抗微生物组合物。

[0021] 具体地，本发明的一个目的是提供在人体表面诸如皮肤和口腔的清洁过程中提供改进的消毒作用的抗微生物组合物。

[0022] 本发明的又一目的是提供清洁和/或消毒特别是表面的可替代方法。

[0023] 本发明的另一目的是提供具有减少的消毒时间的消毒方法。更具体地，本发明的一个目的是提供一种方法，其中该方法的消毒时间少于300秒，优选少于120秒，更优选少于60秒，甚至更优选少于15秒。

[0024] 具体地，本发明的一个目的是提供一种消毒方法，其在表面，特别是硬表面，或人体表面如皮肤和口腔的清洁过程中提供改进的消毒作用。

发明内容

[0025] 我们已经发现本发明可以满足上述一个或多个目的。因此，我们已发现，包含选定的双环醇和百里酚的组合物提供协同的抗微生物作用。与百里酚和α-萜品醇相比，此类组合物在相似或更低的浓度下提供相似或更有效的抗微生物作用。具体地，我们发现本发明的双环醇和百里酚的组合能够具有非常快速的抗微生物作用。例如，我们发现本发明的组合物在仅仅15秒的接触时间后可以实现彻底的微生物灭活。

[0026] 凭借双环醇连同百里酚的增强的抗微生物功效，所需百里酚量的减少也有利地有助于减少与较大量百里酚的存在相关的嗅觉缺点。

[0027] 因此，在第一方面，本发明提供一种抗微生物组合物，其包含：

[0028] i. 0.001-5重量%的百里酚，

[0029] ii. 0.01-5重量%的一种或多种双环醇，和

[0030] iii. 载体；

[0031] 其中所述一种或多种双环醇选自诺卜醇、二氢诺卜醇、桃金娘烯醇、二氢桃金娘烯醇和诺蒎醇，和其中所述载体包括水、乙醇、丙醇、异丙醇、乙二醇、丙二醇、二甘醇或其混合物。

[0032] 根据本发明的第二方面，提供表面消毒的方法，其包括以下步骤

[0033] a. 在所述表面上施用组合物，该组合物包含

[0034] i. 0.001至5重量%的百里酚，

[0035] ii. 0.001至5重量%的一种或多种双环醇，和

[0036] iii. 载体；

[0037] 其中所述一种或多种双环醇选自诺卜醇、二氢诺卜醇、桃金娘烯醇、二氢桃金娘烯醇和诺蒎醇；并且

[0038] b. 从所述表面除去所述组合物。

[0039] 特别优选的是在根据本发明的第二方面的方法中使用的组合物为根据本发明第一方面的组合物。

[0040] 在第三方面，本发明提供组合物用于改进卫生的用途，其中所述组合物包含[0041] i. 0.001至5重量%的百里酚，

[0042] ii. 0.001至5重量%的一种或多种双环醇，和

[0043] iii. 载体；

[0044] 其中所述一种或多种双环醇选自诺卜醇、二氢诺卜醇、桃金娘烯醇、二氢桃金娘烯醇和诺蒎醇。

[0045] 发明详述

[0046] 为避免疑义，本发明的一个方面的任何特征可用于本发明的任何其它方面。词语“包含”意图表示“包括”但不一定“由…组成”或“由…构成”。因此，术语“包含”是指不限于任何随后所述的要素，而是任选还包含具有主要或次要功能重要性的非指定要素。换言之，所列步骤或选项不需要穷举。无论何时使用词语“包括”或“含有”，这些术语意图等同于如上定义的“包含”。值得注意的是，以下描述中给出的实例旨在阐明本发明而不是意在将本发明限于那些实例本身。

[0047] 除了在实施例中，或另外明确指出，本说明书中表示物质量或反应条件、材料的物理性质和/或使用的所有数值应理解为被词语“约”修饰。除非另外说明，以形式“x-y”表示的数值范围应理解为包括x和y。当对于具体特征以形式“x-y”描述多个优选范围时，应理解还涵盖组合不同端点的所有范围。

[0048] 贯穿本说明书，术语消毒是指通过物理或化学方式减少给定介质内或给定表面上的活微生物的数目。通常，消毒涉及所述微生物的毁灭或灭活。有生命和无生命的介质和表面都是被考虑的。

[0049] 术语“杀微生物剂”是指能够杀灭一个部位的微生物、抑制其生长或控制其生长的化合物；杀微生物剂包括杀细菌剂、杀真菌剂和杀藻剂。术语“微生物”包括例如真菌(诸如酵母和霉菌)、细菌和藻类。

[0050] 所述抗微生物组合物包含百里酚、一种或多种选定的双环醇和载体。下面描述所述抗微生物组合物的各组分。

[0051] 本发明的组合物优选用于非治疗用途，且更特别优选用于清洁人体表面包括皮肤、头发或口腔或用于硬表面清洁应用。

[0052] 双环醇

[0053] 本发明的抗微生物组合物包含0.001-5重量%的一种或多种双环醇。该组合物包含优选0.005-4.5 wt-%，更优选0.01-4 wt-%，甚至更优选0.02-3 wt-%，再更优选0.03-2 wt-%，再更优选 0.04-1 wt-%，甚至更优选0.05-0.75 wt-%且再更优选0.1-0.5 wt-%的一种或多种双环醇。在意在施用前稀释的组合物中，所述一种或多种双环醇的最低优选浓度可以更高。例如，当用水和本发明的组合物洗手时，产生皂泡，通常是原组合物的50 wt%稀释液。类似地，在沐浴的情况下，通常稀释皂条或液体皂直至约8 wt%皂/水，相应于该产品的大约10倍稀释。因此，意在在使用后稀释的本发明组合物优选包含0.05-4.5 wt-%，更优选0.1-4 wt-%，甚至更优选0.2-3 wt-%，再更优选0.4-1 wt-%，再更优选0.5-1 wt-%的一种或多种双环醇。因此，所述抗微生物组合物中一种或多种双环醇的浓度优选使得当该组合物在使用过程中用合适的介质稀释或溶解时，稀释或溶解的混合物中的浓度仍足以是抗微生物有效的。

[0054] 所述双环醇可以是单一化合物或可以是以下详述的双环醇的混合物。在某些优选的实施方案中，优选双环醇的混合物，因为此类混合物可显示提高的对抗更广范围的微生物的抗微生物活性。另一方面，由于包括例如控制制剂的原因，优选如果本发明的组合物包含此类双环醇的混合物，所述混合物优选包含相对于该双环醇的总重量至少30重量%，更优选至少50重量%，甚至更优选至少70重量%且再更优选至少90重量%的一种双环醇。

[0055] 在所述双环醇的浓度范围低于它们的浓度下限时，将不能实现与百里酚组合时期望的快速作用的抗微生物动力学。在比双环醇的优选上限浓度更高的浓度下，当与百里酚组合时，尽管作用动力学没有损害，但本发明人已经发现，不同于其中感觉方面不是关键的治疗/杀虫/除草用途，在优选涉及个人清洁、口腔护理或硬表面清洁应用的本发明中，产品与手、口或其他身体部分接触，感觉方面包括嗅觉和皮肤感觉会有所损害。

[0056] 所述一种或多种双环醇选自诺卜醇、二氢诺卜醇、桃金娘烯醇、二氢桃金娘烯醇和诺蒎醇。

[0057] 表1中提供了一种或多种根据本发明的双环醇的结构的实例。

[0058] 表1

[0059]诺卜醇
二氢诺卜醇
桃金娘烯醇
二氢桃金娘烯醇
诺蒎醇

[0060] 诺卜醇还称为2-(6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-烯-2-基)-乙醇, 其具有两种立体异构体。二氢诺卜醇还称为2-(6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-基)-乙醇, 其具有4种立体异构体。桃金娘烯醇还称为(6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-烯-2-基)-甲醇并具有2种立体异构体。二氢桃金娘烯醇还称为(6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-基)-甲醇或桃金娘烷醇并具有4种立体异构体。诺蒎醇还称为6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-醇并具有4种立体异构体。

[0061] 考虑根据本发明的双环醇的全部立体异构体。随之，包含例如对映异构纯化合物、特定对映异构体的外消旋混合物、和不同立体异构体的其他混合物的组合物全部考虑在内。

[0062] 优选地，所述一种或多种双环醇选自诺卜醇、二氢诺卜醇、桃金娘烯醇、和二氢桃金娘烯醇，更优选选自诺卜醇、桃金娘烯醇和二氢桃金娘烯醇。更优选的是所述双环醇包含诺卜醇，甚至更优选的是其为诺卜醇。还更优选的是所述双环醇包含(–)-诺卜醇，甚至更优选的是其为(–)-诺卜醇。

[0063] (–)-诺卜醇还称为2-((1R,5S)-6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-烯-2-基)-乙醇，其具有以下结构：

[0064]

[0065] 如果在稍后的施用期间所述载体或溶解介质为水基的，则如果所述一种或多种双环醇为充分水溶性的，是有利的。如果所述双环醇可溶解至根据本发明的抗微生物组合物中所需的至少最小浓度，则它们为充分水溶性的。

[0066] 有利地，当以有效水平配制到本发明的组合物中时，本发明的一些化合物具有较弱的气味(与萜品醇的气味相比)或消费者更喜欢的气味。这种益处适用于例如诺卜醇，其具有温和的木质樟脑特有的气味。

[0067] 优选的双环醇的混合物也是优选的。

[0068] 不希望被理论束缚，据信本发明的双环醇与百里酚的组合的抗微生物作用的协同模式对于不同的各双环醇是相似的。

[0069] 合适的本发明的双环醇可以是商业来源的或经由合成化学方法获得。此类方法通常是本领域技术人员众所周知的。

[0070] 百里酚

[0071] 百里酚具有下述结构：

[0072]

[0073] 百里酚也被称为2-异丙基-5-甲基苯酚。

[0074] 本发明的抗微生物组合物包含0.001-5重量% 的百里酚。该组合物包含优选0.005-4.5 wt-%，更优选0.01-4 wt-%，甚至更优选0.02-3 wt-%，还更优选0.03-2 wt-%，再更优选0.04-1 wt-%，再更优选0.05-0.75 wt-%且甚至更优选0.1-0.5 wt-%的百里酚。在意在在施用前稀释的组合物中，出于与对于双环醇相同的原因，所述百里酚的最低优选浓度可以更高。因此，意图在使用时稀释的本发明的组合物优选包含0.05-4.5 wt-%，更优选
0.1-4 wt-%，甚至更优选0.2-3 wt-%，再更优选0.4-1 wt-%，且再更优选0.5-1 wt-%的百里酚。所述百里酚的任何浓度范围优选与上述指定的一种或多种双环醇的任何浓度范围组合。因此，本发明的抗微生物组合物例如包含：

[0075] a. 0.01-0.4重量%的所述百里酚；和

[0076] b. 0.05-1重量%的所述一种或多种双环醇。

[0077] 所述百里酚的优选浓度范围也是重要的，这是出于与所述一种或多种双环醇当用于个人清洁、口腔护理或硬表面清洁应用的产品时满足期望的快速作用抗微生物动力学同时不会感觉不愉快的优选浓度范围相同的原因。

[0078] 百里酚可以以纯化的形式添加到所述抗微生物组合物中。然而，百里酚是许多植物物种中天然存在的化合物。因此，或者，可以将衍生自此类含有百里酚的植物物种的植物油或植物提取物添加至抗微生物组合物中，同时确保百里酚以所需浓度存在于本发明的组合物中。例如，百里香油或百里香提取物天然包含百里酚。百里香油或者百里香提取物从百里香植物获得。百里香植物是指属于百里香属的植物，包括但不限于以下物种： 银斑百里香(Thymus vulgaris)、洋百里香(Thymus zygis)、Thymus satureoides、乳香百里香(Thymus mastichina)、Thymus broussonetti、Thymus maroccanus、苍白百里香(Thymus pallidus)、Thymus algeriensis、红花百里香(Thymus serpyllum)、Thymus pulegoide、和柠檬百里香(Thymus citriodorus)。

[0079] 载体

[0080] 本发明的抗微生物组合物包含载体。所述载体优选选自水、油、溶剂、无机微粒材料、淀粉、空气及其混合物。根据本发明第一方面的组合物的载体包括水、乙醇、丙醇、异丙醇、乙二醇、丙二醇、二甘醇、或其混合物。所述载体优选为组合物的0.1-99重量%。所述抗微生物组合物可以是固体、液体、凝胶、膏状或软固体的形式并且所述载体可以由本领域技术人员根据所述抗微生物组合物的形式来选择。

[0081] 无机微粒材料的实例包括粘土、滑石、方解石、白云石、二氧化硅和铝硅酸盐。油的实例包括矿物油、生物来源的油 (例如植物油)、以及石油来源的油和蜡。所述生物来源的油优选为甘油三酯基。所述载体油优选不是芳香油。因此，所述载体油优选不明显导致所述组合物的气味，更优选其不导致气味。溶剂的实例包括醇类、醚类和丙酮。淀粉可以是获自食物谷粒的天然淀粉或可以是改性淀粉。

[0082] 在某些优选的实施方案中，合适的溶剂包括例如水；二醇，包括乙二醇、丙二醇、二甘醇、二丙二醇、聚乙二醇和聚丙二醇；二醇醚；醇类，如甲醇、乙醇、丙醇、苯乙醇和苯氧丙醇；酮类，包括丙酮和甲基乙基酮；酯类，包括乙酸乙酯、乙酸丁酯、三乙酰柠檬酸酯和甘油三乙酸酯；碳酸酯类，包括碳酸亚丙酯和碳酸二甲酯；及其混合物。优选溶剂选自水、二醇、二醇醚、酯及其混合物。在某些优选实施方案中，合适的固体载体包括例如环糊精、二氧化硅、硅藻土、蜡、纤维素材料、碱金属和碱土金属 (例如钠、镁、钾)盐 (例如氯化物、硝酸盐、溴化物、硫酸盐)和木炭。

[0083] 当本发明的双环醇和/或百里酚被雾化或以其它方式分散为细雾时，空气可以例如被用作载体。

[0084] 特别优选的载体是水或者油/溶剂，甚至更优选作为水和油的混合物的载体。因此，在许多预期的应用如个人护理/清洗、口腔护理和硬表面清洁中，抗微生物组合物可以用含水基料或油/溶剂基料配制。具有含水基料(水是载体)的组合物还可以例如是凝胶形式的产品。具有纯油/溶剂基料的组合物可以例如是无水棒形式的产品或者含有推进剂的产品。

[0085] 因此，抗微生物组合物可以，例如，优选是纯油/溶剂基料上的抗微生物无水棒个人护理组合物，其中所述组合物具有小于0.01重量％的水含量，并且其中所述组合物优选不含水。或者，抗微生物组合物可以例如，优选为抗微生物推进剂可驱动的个人护理组合物，还包含推进剂。空气也可以用作推进剂，例如以压缩或液化空气的形式。

[0086] 然而，最优选的产品形式具有乳状液基料(水和/或油是载体)或稀释后能够形成乳液，例如用于洗手、洗脸、洗澡或者剃须应用的液体、固体、洗液或者半固体形式的皂产品；用于口腔护理应用的牙膏/牙粉或者用于硬表面清洁的条状或者液体形式的产品。如果产品包含乳状液基料，则其优选地还含有如下所述的一种或多种表面活性剂。

[0087] 表面活性剂

[0088] 本发明的抗微生物组合物优选包含1-80重量%的一种或多种表面活性剂。表面活性剂可例如有利地促进组合物的清洁效力或制剂稳定性。

[0089] 因此，本发明的抗微生物组合物优选包含

[0090] a. 0.001-5重量%的百里酚，

[0091] b. 0.001-5重量%的本发明的一种或多种双环醇，

[0092] c. 载体，和

[0093] d. 1-80重量%的一种或多种表面活性剂。

[0094] 特别优选所述抗微生物组合物包含1-80重量%的一种或多种表面活性剂、以及如上指定的更优选浓度的所述一种或多种双环醇和所述百里酚。

[0095] 通常，该表面活性剂可以选自众所周知的教科书中所述的表面活性剂，所述众所周知的教科书如“Surface Active Agents”第1卷，Schwartz & Perry，lnterscience 1949，第2卷，Schwartz，Perry & Berch，Interscience 1958，和/或由Manufacturing Confectioners  Company出版的目前版本的“McCutcheon's  Emulsifiers and 
Detergents”或者在“Tenside-Taschenbuch”，H.Stache，第2版，Carl Hauser Verlag，1981中；“Handbook of Industrial Surfactants” (第4版) Michael Ash and Irene Ash；
Synapse Information Resources, 2008。可以使用任何类型的表面活性剂，即阴离子型、阳离子型、非离子型、两性型离子型或者两性型表面活性剂。优选地，一种或多种表面活性剂是阴离子型表面活性剂，非离子型表面活性剂，或阴离子型和非离子型表面活性剂的组合。更优选地，一种或多种表面活性剂是阴离子型的。

[0096] 特别优选的表面活性剂是皂。皂是一种对于本发明的抗微生物组合物的个人清洗应用来说合适的表面活性剂。该皂优选是C8–C24皂，更优选C10–C20皂和最优选C12–C16皂。该皂可以具有或者可以不具有一个或多个碳-碳双键或者三键。该皂的阳离子可以例如是碱金属，碱土金属或者铵。优选地，该皂的阳离子选自钠、钾或者铵。更优选该皂的阳离子是钠或钾。

[0097] 该皂可以通过脂肪和/或脂肪酸的皂化获得。脂肪或者油可以是通常用于皂制造中的脂肪或者油，诸如动物脂(tallow)、动物脂硬脂(tallow stearines)、棕榈油、棕榈硬脂、大豆油、鱼油、蓖麻油、米糠油、向日葵油、椰子油、巴巴苏油、棕榈仁油、等等。在上述方法中，脂肪酸源自于选自下面的油/脂肪：椰子、米糠、落花生、动物脂、棕榈、棕榈仁、棉籽、大豆、蓖麻等。脂肪酸皂也可以是合成制备的(例如通过石油的氧化或者通过一氧化碳的费-托方法氢化)。可以使用树脂酸，诸如存在于妥尔油中的那些。环烷酸也是合适的。

[0098] 动物脂脂肪酸可以源自于各种动物来源。还包括其它类似的混合物，诸如来自于棕榈油的那些和来自于各种动物的脂肪和猪油的那些。

[0099] 典型的脂肪酸共混物由5-30%-wt的椰子脂肪酸和70-95%-wt的来自硬化米糠油的脂肪酸组成。源自于其它合适的油/脂肪诸如落花生、大豆、动物脂、棕榈、棕榈仁等的脂肪酸也可以以其它所需的比率来使用。所述皂当以本发明的固体形式存在时，其存在量优选是该组合物的30-80重量%，更优选50-80重量%，甚至更优选55-75重量%。所述皂当以组合物的液体形式存在时，存在量优选是该组合物的0.5-20重量%，更优选1-10重量%。

[0100] 其它优选的表面活性剂是脂肪酸甘氨酸盐和脂肪两性羧酸盐。脂肪甘氨酸盐是甘氨酸的盐的脂肪酸酰胺，包括例如椰油酰甘氨酸钠。脂肪两性羧酸盐是两性型表面活性剂，包括例如月桂两性乙酸钠(即，2-[1-(2-羟基乙基)-2-十一烷基-4,5-二氢咪唑-1-鎓-1-基]乙酸钠)。合适的表面活性剂的又另一种实例是羟乙磺酸盐的衍生物，包括酰基羟乙磺酸盐。

[0101] 本发明的抗微生物组合物在硬表面清洁应用中也是有用的。在此类应用中，当产品是液体形式时，优选的表面活性剂是非离子型表面活性剂，诸如C8–C22，优选C8–C16脂肪醇乙氧化物，包含1-8个环氧乙烷基团。当该产品对于硬表面清洁应用是固体形式时，表面活性剂优选选自伯烷基硫酸盐、仲烷基磺酸盐、烷基苯磺酸盐、乙氧化的烷基硫酸盐、或者醇乙氧化的非离子型表面活性剂。该组合物可以进一步包含阴离子型表面活性剂，诸如烷基醚硫酸盐，优选具有1-3个环氧乙烷基团的那些，其来自于天然的或者合成的来源和/或磺酸。特别优选的是月桂基醚硫酸钠。烷基聚葡萄糖苷也可以存在于该组合物中，优选碳链长度为C6-C16的那些。其它类型有用的表面活性剂包括阳离子型表面活性剂，诸如长链季铵化合物和两性型表面活性剂诸如甜菜碱类和烷基二甲基胺氧化物。在液体形式的硬表面清洁应用中，合适的表面活性剂浓度通常是组合物的约0.5-10重量%，优选1-5重量%。在固体组合物中，表面活性剂优选的存在量是组合物的5-40重量%，优选10-30重量%。

[0102] 本发明的抗微生物组合物在口腔护理组合物中例如在牙粉/牙膏中或者漱口产品中是有用的。在此类应用中，优选的表面活性剂在性质上是阴离子型、非离子型或者两性型，优选阴离子型或者两性型。阴离子型表面活性剂优选是碱金属烷基硫酸盐，更优选是月桂基硫酸钠(SLS)。也可以使用阴离子型表面活性剂的混合物。两性型表面活性剂优选是甜菜碱，更优选烷基酰胺基丙基甜菜碱(其中该烷基是直链的C10–C18链)，最优选椰油酰胺基丙基甜菜碱(CAPB)。也可以使用两性型表面活性剂的混合物。在口腔护理应用中，合适的表面活性剂浓度通常是总组合物的约2重量%-约15重量%，优选约2.2重量%-约10重量%，更优选约2.5-约5重量%。

[0103] 因此，高度优选的是，该抗微生物组合物包括皂、烷基硫酸盐或者直链烷基苯磺酸盐作为表面活性剂。更优选地，一种或多种表面活性剂选自皂、烷基硫酸盐和直链烷基苯磺酸盐。

[0104] 液体和固体组合物

[0105] 该抗微生物组合物可以是固体、液体、凝胶或者糊剂的形式。本领域技术人员可以通过选择一种或多种载体材料和/或表面活性剂来制备各种形式的组合物。本发明的抗微生物组合物对于清洁和护理，特别是对于皮肤清洁和皮肤护理是有用的。可以预期该抗微生物组合物可以用作免洗型(leave-on)产品或者用后洗去型产品，优选用后洗去型产品。本发明的抗微生物组合物还可以用于硬表面诸如玻璃，金属，塑料等的清洁和护理。

[0106] 特别优选的载体是水。当存在水时，其优选以组合物的至少1重量%，更优选至少2重量%，还更优选至少5重量%存在。当水是载体时，液体和固体组合物两者都是可能的。根据产品形式，可优选不同量的水。当水是载体时，优选的本发明的液体抗微生物组合物包含：

[0107] a. 0.01-5重量%的所述百里酚，

[0108] b. 0.05-5重量%的所述一种或多种双环醇

[0109] c. 10-99.9重量%的水，和；

[0110] d. 1-30重量%的所述一种或多种表面活性剂。

[0111] 所述液体抗微生物组合物可用于皮肤清洁，特别用于洗手或洗脸。

[0112] 当水是载体时，优选的本发明的固体抗微生物组合物包含：

[0113] a. 0.05-5重量%的所述百里酚，

[0114] b. 0.05-5重量%的所述一种或多种双环醇，

[0115] c. 5-30重量%的水，和；

[0116] d. 30-80重量%的所述表面活性剂。

[0117] 所述固体抗微生物组合物优选呈成型固体，更优选条状的形式。所述固体抗微生物组合物特别用于皮肤清洁，特别是用于洗手或洗脸。

[0118] 此类条形固体抗微生物组合物可例如是皂条。皂条组合物是众所周知的并且可类似于以下非限制性实例组合物，包含75.6 wt-%的无水钠皂、1.0 wt-% 的甘油、0.5 wt-%的碳酸钠、0.2 wt-%的EHDP (乙烷-1-羟基-1,1-二膦酸盐)酸、0.04 wt-%的EDTA (乙二胺四乙酸)四钠盐、8.5 wt-%的含水硅酸镁(滑石)、0.7 wt-%的氯化钠、0.05 wt-%的染料、0.75 wt-%的香料、0.05-10 wt-%的抗微生物剂(包括本发明的双环醇和百里酚)和补足至100 wt-%的水。

[0119] 或者，无机微粒材料也是合适的载体。当无机微粒材料是载体时，所述抗微生物组合物呈固体形式。优选所述无机微粒材料是滑石。当所述无机微粒材料是滑石时，所述固体抗微生物组合物特别用作滑石粉用于施用于面部或身体。

[0120] 根据另一替代方案，非水的溶剂是优选的载体。尽管可使用任何溶剂，醇是优选的溶剂。短链醇，特别是乙醇、丙醇和异丙醇，特别优选用作用于抗微生物湿巾(wipe)或抗微生物洗手液(hand sanitiser)组合物的载体。

[0121] 溶剂诸如乙醇和异丙醇通常本身显示抗微生物效力。然而，它们也是挥发性的并且在组合物施用期间可容易地蒸发。因此，在经过消毒所需的最短时期之前，它们在处理表面上的含量可甚至降低至抗微生物作用所需的最低水平以下。相反，本发明的百里酚和双环醇较少挥发得多并且可因此在它们施用于皮肤后产生长时间的抗微生物作用。

[0122] 其它成分

[0123] 所述组合物还可包含本领域技术人员已知的各种其它成分。此类其它成分包括但不限于：香料、颜料、防腐剂、润肤剂、防晒剂、乳化剂、胶凝剂、增稠剂、湿润剂(例如甘油、山梨糖醇)、多价螯合剂(例如EDTA)或聚合物 (例如用于结构化的纤维素衍生物诸如甲基纤维素)。

[0124] 本发明的百里酚和一些双环醇可有助于所述组合物的嗅觉性质。尽管这些化合物中的一些可用于例如香料组合物中，本发明涉及抗微生物组合物。因此，所述组合物优选不是香料组合物，尽管可存在其它香料组分。在此，香料组合物被定义为包含多种嗅觉组分的组合物，其中所述组合物的唯一目的是提供和谐的香味。

[0125] 本发明的协同效应

[0126] 本发明人令人惊讶地发现单独的本发明的一种或多种双环醇或单独的百里酚不各自提供快速的抗微生物动力学作用，而一种或多种双环醇和百里酚在选定浓度下的组合提供协同的抗微生物作用，这在其中抗微生物活性成分与表面的接触时间短(即大约少于5分钟，优选少于2分钟，还更优选少于1分钟且在许多情况下少于15秒)的冲洗过程中尤其重要。

[0127] 双环醇和百里酚的协同组合

[0128] 如果组合作用仅仅由于各成分独立具有的效果的累加，则认为两种或更多种活性化合物的抗微生物作用是累加的。相反，如果两种或更多种化合物的组合效果比基于累加假设预期的更强，则认为两种或更多种活性化合物的抗微生物作用是协同的。不希望被理论束缚，据信一种化合物的抗微生物作用可以被另一种化合物的作用增强，反之亦然。这种增强作用可例如是由于分子水平下抗微生物作用机制之间的协同相互影响。这种增强的抗微生物作用自身可通过例如以下事实显示：获得彻底的微生物杀灭所需的活性化合物的浓度更低，或者，在更短的时间内实现相同程度的微生物杀灭。

[0129] 包含两种或更多种活性化合物的抗微生物组合物是否能够实现协同的抗微生物作用可例如按照下面实施例1中概述的程序和使用其中的标准来确定。通常，协同抗微生物作用的证据可以在各成分单独使用时的最低杀生物浓度以下的浓度获得。然而，通常相信当一种或多种活性化合物的浓度提高至其最低杀生物浓度(单独使用时)以上时，仍可产生协同作用。

[0130] 本发明的抗微生物组合物优选包含在它们能够产生协同抗微生物作用的浓度下的本发明的一种或多种双环醇和百里酚。因此，所述抗微生物组合物中一种或多种双环醇和百里酚的浓度优选使得当该组合物在使用期间用合适的介质稀释或溶解时，(例如当用水和本发明的组合物洗手时)经稀释或溶解的混合物中的浓度仍足以是抗微生物有效的。即，为了能够产生协同抗微生物作用，所述组合物中一种或多种双环醇和百里酚的浓度(分别为C组合物, 醇, 和C组合物, 百里酚)优选使得在施用时，在给定的一种或多种双环醇在施用介质中的浓度(C介质, 醇)下，所述百里酚可以以至少最低介质浓度(C介质, 百里酚)使用或反之亦然 (即，使得在给定C介质, 百里酚下，可使用最低C介质，醇，足以提供协同抗微生物作用)。在此，施用介质是指其中期望发生抗微生物作用的介质。例如，在诸如洗手的个人护理用途中，所述组合物可以是固体皂条。在这种情况下，C组合物是指组分在皂条中的浓度，而C介质是指在皂泡中的浓度。
最低和最佳浓度可例如通过对实施例1描述的方案或通过下述标准之一来确定。通常优选本发明组合物中一种或多种双环醇和百里酚的浓度等于或高于施用介质中的最佳浓度，因为在许多典型用途中，所述组合物以纯的形式使用或经稀释以形成施用介质。

[0131] 令人惊讶地，本发明组合物中双环醇和百里酚的协同作用在很宽范围的浓度和浓度比率下发生。根据包括抗微生物组合物的类型、其预期应用(例如硬表面清洁剂、洁肤剂或洗手液)的因素，优选不同的浓度范围和比率。

[0132] 因此，当例如期望抗大肠杆菌的抗微生物作用时，实施例1的数据可用来确定优选介质浓度C介质。例如，如果期望在实施例1的特定介质中的彻底的微生物灭活且如果所述双环醇是(-)-诺卜醇且C介质, 醇选定为0.05 %(w/v)，则C介质, 百里酚优选是至少0.025 %(w/v)，反之亦然。类似地，如果C介质, 百里酚选定为0.0125% (w/v)，则C介质, 醇优选为至少0.075% (w/v)，反之亦然。

[0133] 或者，期望的抗微生物作用可通过选择所述一种或多种双环醇和所述百里酚的各自浓度的比来获得。鉴于上述关于预期抗微生物效力的考虑和其它考虑包括例如感官性能、溶解度、经济考虑，在一些用途中优选百里酚与双环醇的浓度比大于1，而在其它用途中优选百里酚与双环醇的浓度比小于1，其中所述浓度以%-wt表示。

[0134] 因此，如果期望百里酚与双环醇的浓度比小于1，则本发明的抗微生物组合物优选包含浓度比(百里酚：双环醇)为1:2 至1:12的一种或多种双环醇和百里酚，其中所述浓度以重量百分比表示。

[0135] 本发明的其它另外的优点在于据观察，用包含一种或多种双环醇和百里酚的本发明的组合物处理表面令人惊讶地能够在其后长期持续保护所述表面对抗微生物的生长。

[0136] 包含表面活性剂的效果

[0137] 如上所述的适用于冲洗过程的组合物有利地包括用于清洁作用的表面活性剂。进一步使发明人惊奇的是，尽管单独的表面活性剂在冲洗过程中存在的浓度下不提供快速的微生物杀灭，但当用包含一种或多种双环醇、百里酚和另外的表面活性剂的组合物清洗表面时，其在短时间内提供所述表面上活微生物计数减少程度方面的进一步改进。因此，尽管表面活性剂通常已知负责洗掉污物以及组合物中所用的抗微生物活性成分，但在本发明中，其提供非常有用的另外的益处，因为其增强仅包含双环醇和百里酚的组合的组合物的活微生物计数减少。

[0138] 然而，令人惊讶地发现，某些表面活性剂可降低抗微生物剂的活性。这可以例如在椰油酰甘氨酸盐和月桂两性乙酸盐的情况下发生。通常，清洁组合物中需要表面活性剂来获得良好的清洁结果。由于本发明的一个目的尤其是提供抗微生物清洁组合物，因此本发明的还一个目的是提供在此类表面活性剂存在下与百里酚组合后能够增强抗微生物作用的双环醇。发现特别是(-)-诺卜醇和顺式-桃金娘烷醇在与百里酚组合时显示增强的抗微生物作用。因此，本发明的组合物优选包含诺卜醇、桃金娘烷醇或其组合，更优选(-)-诺卜醇、顺式-桃金娘烷醇或其组合。更具体地，优选如果本发明的组合物包含选自椰油酰甘氨酸盐和月桂两性乙酸盐的表面活性剂，则双环醇包括诺卜醇、顺式-桃金娘烷醇或其混合物，更优选(-)-诺卜醇、顺式-桃金娘烷醇或其组合。

[0139] 本发明的方法

[0140] 根据第二方面，本发明涉及表面消毒的方法，其包括以下步骤

[0141] a. 在所述表面上施用组合物，该组合物包含

[0142] i. 0.001-5重量%的百里酚，

[0143] ii. 0.001-5重量%的一种或多种双环醇，和

[0144] iii. 载体；

[0145] 其中所述一种或多种双环醇选自诺卜醇、二氢诺卜醇、桃金娘烯醇、二氢桃金娘烯醇和诺蒎醇；且

[0146] b. 从所述表面除去所述组合物。

[0147] 优选地，所述表面为皮肤。因此，例如，使表面诸如手、脸、身体或口腔与本发明的组合物接触。如果所述表面是人或动物身体的表面，则所述方法优选是非治疗性的表面消毒方法。或者，所述表面是任何硬表面。通常，此类硬表面是通常需要清洁且优选还需要清洁或消毒的表面。此类表面可存在于许多家用或工业环境中，并且可例如包括厨房和浴室表面、桌面、地板、墙壁、窗户、器皿、餐具和陶器。此类表面可由许多不同的材料制成，包括例如塑料、木材、金属、陶瓷、玻璃、混凝土、大理石和涂漆表面。

[0148] 所述组合物可以通过本领域技术人员已知的任何合适的方式施用于表面。例如，在液体组合物的情况下，合适的方式可以是倾倒、滴落、喷雾或擦拭。

[0149] 以根据本发明第二方面的方法施用的组合物如上所述。特别优选的是所述组合物为根据本发明第一方面的组合物。

[0150] 所述方法优选包括在将组合物施用至表面之前或同时，用合适的溶剂优选水稀释或溶解所述组合物。如果所述组合物是固体组合物，此类溶解是特别优选的。或者，固体组合物还可例如以粉末的形式直接散布、擦拭或喷洒。

[0151] 根据本发明的第二方面的方法还包括从表面去除组合物的步骤。此处，去除组合物还包括部分去除组合物，因为痕量组合物可以残留在表面上。在许多典型情况(包括洗涤皮肤或清洗硬表面)下，如果部分组合物 - 特别是某些活性成分 - 残留在表面上是可接受的，有时甚至是期望的。因此，步骤b优选包括去除至少5重量％，更优选至少10重量％，甚至更优选至少25重量％，仍更优选至少50重量％，并且又更优选至少75重量％的组合物。优选地，去除组合物的步骤包括用合适的溶剂冲洗表面或用合适的擦拭物擦拭表面，更优选地，该步骤由用合适的溶剂冲洗表面或用合适的擦拭物擦拭表面组成。或者，去除步骤也可以包括蒸发部分组合物，例如，当组合物包含挥发性组分，例如溶剂时。

[0152] 用于冲洗表面的合适介质是水，但它也可以是例如水和醇的混合物。然后在预定的时间段之后，优选用足量的水冲洗，来除去任何可见的或者可感觉到的组合物残留。或者，可以使用醇擦拭物或者水/醇浸渍的擦拭物将表面擦拭到没有可见的抗微生物组合物。去除组合物(例如通过冲洗或擦拭表面)的步骤优选在表面上施用组合物的步骤开始后少于5分钟，更优选少于2分钟，甚至更优选少于1分钟，仍更优选少于30秒，又更优选少于20秒开始，因为根据本发明的组合物具有令人惊讶地快的抗微生物作用。即使部分微生物杀灭可以在施用根据本发明的组合物之后几乎瞬间发生，但优选在表面上施用组合物的步骤开始后至少5秒，优选至少10秒，更优选至少15秒开始从表面去除组合物的步骤，以便实现最佳抗微生物作用。将这些时间组合为时间间隔也是优选的。因此，特别优选的是，在表面上施用组合物的步骤(即步骤a)开始后2分钟至5秒，更优选在1分钟至10秒，甚至更优选30至
10秒，仍更优选20至15秒开始从表面去除组合物的步骤(即步骤b)。

[0153] 消毒时间

[0154] 施用组合物和冲洗或擦拭之间的这些时间优选与消毒时间有关，以便确保表面的最佳清洗和消毒。因此，本发明优选涉及一种方法，其中所述方法的消毒时间T少于300秒，优选少于120秒，更优选少于60秒，甚至更优选少于15秒；其中T被定义为从将组合物添加至微生物培养物的时刻直到微生物数目/单位体积培养物降低100 000倍所经过的时间；并且其中微生物的初始数目优选超过约100 000 000个微生物/毫升，并且其中所述组合物优选为液体组合物。

[0155] 该方法的消毒作用(如可以以消毒时间T的形式表示)优选根据如下所述的实施例1的方案来确定。该试验涉及其中使微生物培养物保持在悬浮液中的标准化试验环境。类似合适的试验是欧洲标准EN1276中所述的标准悬浮方法，条件是将消毒时间调整，以适应对于本领域技术人员清楚的上述标准。或者，如WO 2010/046238中所述的试验方法之一可以例如被施用以确立消毒作用。

[0156] 本领域技术人员也可以优选使用此类试验方法以确定根据本发明的抗微生物组合物中一种或多种双环醇和百里酚的最佳浓度。

[0157] 或者，由于所述方法针对表面消毒，所以消毒时间也可以通过涉及表面的试验方法来确定。因此，本发明优选涉及根据本发明的方法，其中所述方法的表面消毒时间T2少于60秒，优选少于15秒；其中T2被定义为从将组合物施用于待消毒表面的时刻开始的时间，其后微生物数目/单位面积降低10000倍(即降低4 log)；其中，微生物的初始数目优选超过
103，更优选105，甚至更优选107个微生物/平方厘米。此类试验可以例如如WO 2010/046238中所述，或如欧洲标准EN 13697:2001和EN 1500:1997中所述进行。

[0158] 本发明的用途

[0159] 本发明优选提供非治疗益处。因此，例如，本发明涉及本发明的抗微生物组合物用于更快速减少活微生物计数的用途。

[0160] 因此，根据本发明的第三方面，提供本发明的组合物用于改进卫生的用途。此类用途例如涉及包含一种或多种双环醇、百里酚和载体的抗微生物组合物用于减少活微生物计数，优选快速减少活微生物计数的用途。因此，此类用途优选是消毒方法中的用途。快速减少活微生物计数因此优选涉及消毒用途，由此消毒时间少于300秒，优选少于120秒，更优选少于60秒，甚至更优选少于15秒。在此，优选与如上所述的消毒时间T和T2类似地定义所述消毒。

[0161] 因此，提供本发明的组合物用于改进人体表面卫生的用途。此类表面包括例如皮肤、手和口腔。根据一个优选方面，本发明涉及本发明的组合物用于改进手部卫生的用途。根据另一优选方面，本发明涉及本发明的组合物用于改进口腔卫生的用途。

[0162] 本发明杀微生物剂组合物可用于通过在经受侵袭的区域上、之内或该处引入杀微生物有效量的该组合物来抑制微生物的生长。例如，在公共机构和工业应用领域，合适的区域包括例如：工业工艺用水，包括电泳沉积系统、冷却塔和空气清洗器；气体洗涤器；废水处理；装饰喷泉；逆向渗透过滤；超滤；压载水；蒸发冷凝器和热交换器；纸浆和纸处理流体和添加剂；矿物浆液；淀粉；塑料；乳剂；分散体；漆；乳胶；涂料，如清漆；建筑产品，如填补剂、填缝材料和密封剂；建筑粘合剂，如陶瓷粘合剂地毯底布粘合剂、和层合粘合剂；工业或消费用粘合剂；摄影用化学品；印刷流体；餐厅、医疗保健设备、学校、食品加工设备和农场中使用的住户和机构产品，包括清洁剂、消毒剂和杀菌剂、擦试物、皂、洗涤剂、地板蜡和洗衣漂洗水；化妆品；盥洗室用品；香波；金属加工流体；输送机润滑剂；液压流体；皮革和皮革加工产品；纺织品；纺织品和纺织品加工产品；木材和木材加工产品，如夹板、纸板、墙板、碎料板、叠层梁、定向刨花板、硬纸板、和木屑板；油和气体加工流体例如注入流体、压裂液、钻井泥浆和采出水；染料运输和储存系统；农业辅助剂保存；表面活性剂保存；医疗器械；诊断试剂保存；食品保存，例如塑料或纸食品包裹；食品、饮料和工业工艺巴氏消毒器；马桶；休闲用水；水池；和疗养池。

[0163] 优选地，本发明杀微生物剂组合物用于在区域上抑制微生物的生长，所述区域选自以下的一种或多种：矿物浆液、纸浆和纸处理流体以及添加剂、淀粉、乳液、分散体、漆、胶乳、涂料、建筑粘合剂(诸如陶瓷粘合剂)、地毯底布粘合剂、摄影用化学品、印刷流体、住户和机构产品，诸如清洁剂、消毒剂、杀菌剂、擦拭物、化妆品、盥洗室用品、香波、皂、洗涤剂、地板蜡、洗衣漂洗水、金属加工流体、织物产品、木材和木材产品、农业辅助剂保存、表面活性剂保存、诊断试剂保存、食物保存、食物、饮料以及工业处理巴氏灭菌器和油和气加工流体。

[0164] 应用领域

[0165] 鉴于以上内容，本发明的组合物可用于消毒、减少活微生物计数或改进卫生，尤其在表面。在优选的实施方案中，组合物特别适合施用于皮肤。例如，表面如手、脸、身体或口腔可以合适地与本发明的组合物接触。在其它优选的实施方案中，表面是任何硬表面。通常，此类硬表面是通常需要清洁并且也经常需要杀菌或消毒的表面。此类表面可以在很多住户或工业环境中找到，并且可以包括例如厨房和浴室表面、桌面、地板、墙壁、窗户、炊具、餐具和陶器。此类表面可以由许多不同的材料制成，例如塑料、木材、金属、陶瓷、玻璃、混凝土、大理石和油漆表面。在其它优选的实施方案中，所述组合物可用于此类消毒，在除了如前所述的表面以外的地点减少微生物数或改善卫生。

[0166] 在优选的实施方案中，本发明涉及用作家庭护理产品和个人护理产品或掺入家庭护理产品和个人护理产品的根据本发明的组合物。更优选地，本发明的该实施方案涉及作为家庭护理产品或个人护理产品的根据本发明的组合物。

[0167] “家庭护理产品”是用于处理、清洁、护理或调理家庭或任何其内容的产品。前述包括，但不限于，组合物、产品或其组合，其涉及以下或在以下中具有用途或应用：家庭和家庭内容(诸如衣服、织物和/或布纤维)的表面、家具和气氛的处理、清洗、清洁、护理或调理和所有上述产品的制造。“个人护理产品”是用于处理、清洁、护理或调理个人的产品。前述包括，但不限于，化学制品、组合物、产品或其组合，其涉及以下或在以下中具有用途或应用：个人(包括特别是皮肤、毛发和口腔)的处理、清洗、清洁或调理和所有上述的制造。家庭护理产品和个人护理产品是例如以大众市场品牌销售的产品，非限制性实例是皂条、除臭剂、香波和家庭表面消毒杀菌剂/消毒剂。

[0168] 本发明的另一个优选实施方案涉及用作工业和/或机构产品或掺入工业和/或机构产品的根据本发明的组合物。更优选地，本发明的该实施方案涉及作为工业和/或机构产品的根据本发明的组合物。工业和机构产品是例如以专业品牌销售的产品，非限制性实例是用于工业、机构、清洁卫生和医疗清洗、就地清洗、食品服务、兽医和农业产品。工业和/或机构产品还包括用于医疗办公室、医院和/或其它机构的用于人清洁的产品(诸如洗手液)。

[0169] 在另一个优选实施方案中，本发明还涉及家庭护理产品或个人护理产品的根据本发明的方法或用途。例如，根据本发明的方法 – 其包括在步骤a中施用根据本发明的组合物 - 可以是其中组合物是如上所述的用作家庭护理产品和个人护理产品或掺入家庭护理产品和个人护理产品的组合物的方法。类似地，在另一个优选实施方案中，本发明还涉及工业和/或机构产品的根据本发明的方法或用途。例如，根据本发明的方法 – 其包括在步骤a中施用根据本发明的组合物 - 可以是其中组合物是如上所述的用作工业和/或机构产品或掺入工业和/或机构产品的组合物的方法。

[0170] 用于在家庭护理或个人护理领域中使用的产品和/或方法通常不同于用于在工业和/或机构领域中使用的产品和/或方法。因此，例如，作为家庭或个人护理产品销售的产品将通常不作为用于工业和/或机构使用的产品销售，反之亦然。因此，本发明的某些实施方案，当付诸实践时，将涉及一个领域，而不涉及其它领域。实施例

[0171] 通过以下非限制性实施例示例本发明。

[0172] 实施例1: 抗微生物效力的评估

[0173] 材料

[0174] 从供应商如Sigma Aldrich, Alfa Aesar and TCI Fine Chemicals购买测试化合物作为精细化学品。以下实施例中使用的(–)-诺卜醇为98%纯(1R)-(–)-诺卜醇，即2-((1R,5S)-6,6-二甲基双环 [3.1.1]庚-2-烯-2-基)-乙醇, 其CAS号为[35836-73-8]。

[0175] 百里酚作为99.5％纯精细化学级购买(来自Sigma Aldrich)。

[0176] 包含约88 wt-%的(S)-α-萜品醇和12 wt-%的γ-萜品醇的萜品醇混合物购自Sigma Aldrich并在下文称为α-萜品醇或萜品醇，除非另有说明。

[0177] 评估抗微生物协同效应的一般方法

[0178] 可以通过测定最低杀生物浓度(MBC)来有效地比较抗微生物剂的效力。MBC定义为提供彻底杀灭(零细菌生长)的特定活性成分的最低绝对浓度。

[0179] 已经利用Fractional  Concentration and Fractional  Inhibitory Concentration (FIC)的概念广泛探究抑制性抗微生物剂在单独和混合物中的不同表现。
参见例如JRW Lambert和R Lambert, J. Appl. Microbiol 95, 734 (2003); T. 
Jadavji, CG Prober和R Cheung, Antimicrobial Agents and Chemotherapy 26, 91 (1984), 和WO 2004/006876。这些参数可如下定义：

[0180]

[0181] 。

[0182] 同样，部分杀生物浓度(Fractional Biocidal Concentration)(FBC)定义为：

[0183] 。

[0184] 抗微生物剂之间的相互作用可以是累加、协同或可能拮抗的，取决于所述组合的效力是否等于、高于或低于同样总浓度的各组分单独测试时所获得的效力。

[0185] 这些关系可通过对混合物中存在的所有组分的部分MBC值求和以得出“部分杀生物指数”来以数学形式表示：

[0186] ΣFBC = FBC(组分 1) + FBC(组分 2) + FBC(组分 3) + … 等

[0187] 使得

[0188] ΣFBC ≥ 1对应于累加或拮抗杀菌活性

[0189] ΣFBC < 1对应于协同杀菌活性。

[0190] 实验方法

[0191] 测试抗代表性致病菌生物体-革兰氏阴性大肠杆菌的抗微生物效力。整个实施例1中按照重量/体积百分比(%w/v)表示活性成分的浓度。

[0192] 细菌储存物

[0193] 将大肠杆菌(10536菌株)的过夜培养物制备50 ml总体积的TSB液体培养基中，在37℃生长约 18小时，并在150 rpm振荡。将1 ml该过夜大肠杆菌培养物转移至50 ml新鲜TSB液体培养基并在37℃以150rpm孵育约 4小时。将该培养物分成等体积并以4000 rpm离心15分钟，用无菌盐水(0.85% NaCl)洗涤，再离心一次，并重悬浮于盐水中，以得到对于该具体生物体等于约108个细胞/毫升的0.8 OD620的终浓度。此处，OD620表明在620 nm的波长在1.0 cm路径长度的比色皿中样品的吸光度。该细菌储存物被用于针对抗微生物活性剂进行测定(一式三份)。

[0194] 方案

[0195] 以下测定描述了使用横跨96孔微滴定板(MTP)的一半的6个稀释度测试8种材料。使用该方法，可以用一块完整稀释板测定16种活性剂(不重复)，在板列1-6和7-12两半重复该设置。

[0196] 在二甲亚砜(DMSO)中制备测试活性剂的1M溶液。通过在水中稀释DMSO溶液而制备所需终浓度1.11倍的活性剂的储存溶液，从而使得例如对于0.8% w/v的所需“测试中”浓度制备0.89% w/v溶液，以便允许当添加细菌悬浮液时进一步稀释活性剂(从270μl稀释至300 μl)，如下所述。

[0197] 将终浓度1.11倍的材料的等分试样(270 μl)沿一列(A1-H1)分配至MTP的孔中。该MTP标记为“筛选板”。

[0198] 在另一个标记为“稀释板”的MTP中，将来自DIFCO组合物的270μl D/E中和溶液添加至第1列。中和溶液的组成如下：酪蛋白的胰酶消化物，5.0g/L；酵母提取物，2.5 g/L；右旋糖，10 g/L，硫代乙醇酸钠，1.0 g/L，硫代硫酸钠，6.0 g/L；亚硫酸氢钠，2.5 g/L；聚山梨酯80，5.0 g/L；卵磷脂7.0 g/L；溴甲酚紫，0.02 g/L，pH值范围为7.6±0.2。

[0199] 将270μl胰蛋白胨稀释溶液添加至稀释MTP的所有剩余孔(第2-6列)。

[0200] 然后将细菌储存物(30 μl)添加至筛选板中制备的270 μl活性剂溶液，并使用具有8个吸头的多通道移液器混合以抽吸并将相同体积的细菌储存物平行分配至第A-H行的8个孔中。15秒的接触时间后，通过使用抽吸混合将30μl体积的混合物转移至制备的稀释板中的270μl D/E中和溶液中而淬灭混合物。在D/E中和溶液中恰好5分钟后，将30μl体积从稀释MTP的第1列转移至第2列并混合，然后将进一步30μl体积从第2列转移至第3列。通过将细菌跨越板连续稀释至第6列而重复该过程。

[0201] 将来自稀释MTP的各孔的30μl体积转移至胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)板上预先标记的区段，从最低细菌浓度(最高稀释度，第6列)开始到最高细菌浓度(第1列)。使TSA培养板放置约 2小时，从而使得30μl接种点可以干燥，然后将板颠倒并在37℃孵育过夜，然后以标记的稀释度计算细菌菌落，以确定活性剂对细菌生长的影响。

[0202] 计算结果

[0203] 通过首先确定其中细菌菌落的数目是可计算的TSA板区段获得平均细菌存活数NMBS(以Log CFU/ml表示)。从该区段中的菌落数，通过下式计算NMBS：

[0204] NMBS = log{ Ncol · 10DF · 100 / 3 }

[0205] 此处，Ncol为菌落计数，DF为取自MTP孔的对应于TSA板区段的稀释因子(即，DF的范围可以从淬灭的1到最高稀释度的6)。因子100/3是从接种点体积至1毫升的转化因子。

[0206] 一式三份进行每次测定试验。报道的平均细菌存活结果是此类一式三份的平均值，误差为相应的标准偏差。

[0207] 因此，约7的NMBS值对应于来自第五稀释孔(即DF = 5)的约3个菌落的计数。当细菌暴露于非杀生物剂材料时，通常观察到此类约7的计数。在TSA板的任何区段中没有观察到任何存活菌落的情况下，这被解释为完全杀灭并报道NMBS=0的值。

[0208] 验证

[0209] 通过在相同MTP上平行进行各试验测定和四次对照实验来验证所有试验结果。所有对照实验完全按照上述方案进行，但使用以下活性成分：

[0210] A 0.025 %(w/v) 百里酚

[0211] B 0.15 %(w/v) α-萜品醇

[0212] C 0.025 %(w/v) 百里酚 + 0.15 %(w/v) α-萜品醇

[0213] D 无活性组分。

[0214] 对照实验A、B和D验证试验测定但未显示细菌杀灭，而根据WO 2010/046238 A1包含百里酚和α-萜品醇的协同组合的对照实验 C通过显示彻底的微生物杀灭而验证了试验测定。

[0215] 根据上述方案但无活性组分的参考实验显示，在该方案的测试溶液中存在的浓度下( <5 % (w/v) )，DMSO不影响细菌生长，如表2中可见。

[0216] 表2

[0217]

[0218] 结果

[0219] 上述方法适用于评估本发明的双环醇的抗菌效力。表3显示单独和与百里酚组合的诺卜醇的抗菌活性。

[0220] 表3: 萜品醇及单独和与百里酚组合的双环醇和对比化合物的抗菌活性

[0221]

[0222] 比较例

[0223] 参数ΣFBC(其被用作根据本发明的组合物的协同抗微生物作用的量度)的测定首先需要测定相关活性剂的最低杀生物浓度(MBC)。如上所讨论，活性剂的MBC可以被定义为活性剂提供特定介质中零细菌存活的最低浓度。实施例(1:1)至(1:3)的数据表明，百里酚的MBC值为0.05% (w/v)。对于α-萜品醇，组合物(1:4)至(1:7)显示MBC为0.4% w/v。对诺卜醇已经进行了相同分析并总结在下表4中。这些MBC值构成了这些实施例中使用的具体介质中各自MBC的上边界。

[0224] 表4: 抗微生物组分的最低杀生物浓度

[0225]组分 MBC (% w/v)
百里酚 0.05
α-萜品醇 0.4
(-)-诺卜醇 0.15

[0226] 由表4中的数据清楚可见，(-)-诺卜醇是抗微生物有效的。

[0227] 协同相互作用

[0228] 测试的(-)-诺卜醇与百里酚的组合在实施例(1:10)和(1:11)中提供彻底的微生物杀灭。利用上述表4中列出的 MBC值，计算这些混合物中存在的组分的分数形式的MBC值和组合物的实验ΣFBC，以区别提供协同效应证据和累加杀生物效应的组合。在表5中给出该分析的结果。

[0229] 表5: 提供彻底细菌杀灭的组合物的二元化合物混合物之间的协同相互作用程度[0230]

[0231] 对于实施例(1:10)和(1:11)，ΣFBC值低于1，因此提供了根据设定标准的协同相互作用的证据。因此，这些实施例显示了当一起应用百里酚和根据本发明的双环醇时如何增强它们的抗微生物效力。此类协同效应允许降低实现完全杀灭所需的抗微生物剂浓度。例如，当独立测试时实现完全细菌杀灭需要0.05% w/v百里酚，但当与0.075 w/v的(-)-诺卜醇组合使用时其可以降低4倍至0.015%(w/v)。

[0232] 比较例

[0233] 比较例(1:12)显示包含百里酚和不是本发明的化合物(樟脑)的组合物在与本发明的实施例中所用的浓度相当的浓度下没有产生快速抗微生物作用。

[0234] 实施例2

[0235] 按照对于实施例1所述的相同的方案，测试包含双环醇(桃金娘烯醇或顺式-桃金娘烷醇) 和百里酚的本发明的组合物的抗微生物效力。结果呈现于表6中。

[0236] 表6:双环醇单独和与百里酚组合时的抗菌活性

[0237]

[0238] 通过如实施例1所述类似的推理，可以从表6中的数据确定桃金娘烯醇和顺式-桃金娘烷醇的MBC(参见表7)。类似地，计算ΣFBC值(使用实施例1的百里酚的MBC)。数据ΣFBC在表8中给出的实施例表明，桃金娘烯醇和顺式-桃金娘烷醇组合百里酚能够协同提供抗微生物作用。

[0239] 表7: 抗微生物组分的最低杀生物浓度

[0240]组分 MBC (% w/v)
桃金娘烯醇 0.15
顺式-桃金娘烷醇 0.30

[0241] 表8: 提供彻底细菌杀灭的组合物的二元化合物混合物之间的协同相互作用程度[0242]

[0243] 实施例3: 表面活性剂基料中效力的自动评估

[0244] 样品制备

[0245] 在这些实施例中，百里酚和本发明的双环醇的组合的效力在包含2.85%椰油酰甘氨酸钠和1.85 %月桂两性乙酸钠的表面活性剂清洁制剂中进行测试。这对应于洗手过程中含有5.7%椰油酰甘氨酸盐和3.7%月桂两性乙酸钠的典型未掺水制剂(neat formulation)的用水50％稀释的使用稀释液。制备溶液，从而使得表面活性剂组分和测试活性剂的浓度为最终所需浓度的1.1倍，以允许在测试中用细菌接种物稀释。将溶液通过人工逐滴添加氢氧化钠溶液调节至pH 10.0，如在环境温度用pH计所测量。在测试前最多24小时制备百里酚和/或本发明的双环醇的溶液。使用与实施例1和3中相同的百里酚和抗微生物醇。

[0246] 测试方法学

[0247] 在约1 x 108个细菌/mL的浓度，针对与实施例1中相同的细菌大肠杆菌(大肠杆菌- ATCC #10536)测定本发明组合的效力。

[0248] 使用标准微量滴定板测定法使用自动液体处理系统进行测试。将270μl表面活性剂测试溶液移液至微量滴定板(Nunc F Gamma Irradiated 96F未经处理的透明聚苯乙烯微量滴定板)的每个孔中，然后添加30μl细菌悬浮液。细菌暴露恰好15秒后，将30μl体积的细菌细胞取出并转移至270μl D/E淬灭溶液。在D/E淬灭溶液中5分钟后，在两个特定波长(450nm和590nm)依次对于各板测量光密度(OD)。这些提供抗微生物活性的双重检查，因为当观察细菌生长时OD450读数对于D/E淬灭的黄色是特异性的，而如果没有观察到细菌生长，则OD590对于保留的D/E淬灭的初始紫色是特异性的。时间零OD测量之后，然后将板在37℃孵育过夜(16小时)，然后重复OD测量。通过从时间零时的初始值减去在16小时的OD值计算ΔOD值。细菌生长被观察为OD450的增加和OD590的降低。为了鉴定抗细菌上有效的系统(防止孵育后可估量的细菌生长的系统)，已经采用以下OD读数的阈值变化：如果(1)。孵育后OD450增加小于0.2个吸光度单位(AU)和(2)。孵育后OD590降低小于0.35 AU。相反，当孵育后OD450增加超过0.1 AU且OD590降低超过0.1 AU时，对应于颜色从紫色迁移到黄色，则测试系统允许细菌生长且不会被视为有效。对于各测试系统已经在相同板中进行三次或四次重复测量。显示细菌生长或不生长的重复孔的数目也容易通过遵循颜色变化通过眼睛评估。出于比较目的，百里酚和萜品醇均单独及组合测试。

[0249] 通过用进一步表面活性剂溶液依次稀释液体以获得范围为0.2至0.025%的百里酚和0.5%至0.0675%的本发明的双环醇的一系列端点而生成以固定浓度比率的活性剂的单个组分和二元混合物的剂量响应。在每种情况下，以1:2.5的百里酚比双环醇的重量比重量比率评估二元混合物。

[0250] 表9:在模型表面活性剂溶液中单独和与百里酚组合的本发明的双环醇的抗细菌活性[0251]

[0252] 表10：单独的诺卜醇以及与百里酚的组合在模型表面活性剂溶液中的抗微生物活性。

[0253]

[0254] 表11: 抗微生物组分在2.85% 椰油酰甘氨酸钠 + 1.85 % 月桂两性乙酸钠溶液(pH 10)中的最低杀生物浓度

[0255]组分 MBC (% w/v)
百里酚 > 0.2
(–)-诺卜醇 > 0.5
顺式-桃金娘烷醇 > 0.5

[0256] 结果

[0257] 如表9中实施例(3:1)的结果所示，所用表面活性剂本身在所用浓度下对大肠杆菌是无抗微生物活性的。因此，任何抗微生物效力可归因于双环醇和/或百里酚。表11呈现如对于实施例1所述类似测定的MBC值。在指定表面活性剂的存在下，百里酚、(-)-诺卜醇和顺式-桃金娘烷醇具有比最高测试浓度更高的MBC。

[0258] 表10、11和12的结果显示，当与百里酚组合在比它们的MBC更低的浓度下在相同表面活性剂制剂(包含椰油酰甘氨酸盐和月桂两性乙酸盐)中测试时，都显示对大肠杆菌的15秒的杀菌效力(分别在所有4或3次重复试验中彻底杀灭)。

[0259] 因此，发现本发明的双环醇且特别是诺卜醇和桃金娘烷醇在表面活性剂(特别是椰油酰甘氨酸盐和月桂两性乙酸盐)的存在下，在与百里酚组合时，显示增强的抗微生物作用。