卟啉衍生物在制备检测炎症相关疾病试剂中的应用

摘要

本发明公开了一种卟啉衍生物在制备检测炎症相关疾病试剂中的应用，所述卟啉衍生物可以为四-对-磺酸基苯基卟啉。所述炎症相关疾病为类风湿性关节炎。卟啉衍生物具有稳定良好的光学、电化学特性以及优良的生物相容性，而相关疾病的体液或者尿液中的代谢物可以显著地改变卟啉衍生物的光学特性（包括紫外可见吸收光谱和荧光光谱等）以及电化学特性。利用这一特性，本发明首次提出卟啉衍生物在制备检测炎症相关疾病试剂中的应用，拓展了卟啉衍生物的新用途。

权利要求

1.四-对-磺酸基苯基卟啉在制备检测类风湿性关节炎试剂中的应用，其特征在于，利用四-对-磺酸基苯基卟啉的卟啉环状结构以及磺酸基基团同炎症代谢物中的特异性蛋白结合，配位，从而改变四-对-磺酸基苯基卟啉的光学以及电化学性质的原理，制备用于检测类风湿性关节炎的试剂。

说明书

卟啉衍生物在制备检测炎症相关疾病试剂中的应用

技术领域

[0001] 本发明涉及生物化学制药领域，具体涉及卟啉衍生物在制备检测炎症相关疾病(比如类风湿性关节炎)试剂中的应用。

背景技术

[0002] 众所周知，炎症是十分常见而又重要的基本病理过程，体表的外伤感染和各器官的大部分常见病和多发病(如疖、痈、肺炎、肝炎、肾炎等)都属于炎症性疾病，是具有血管系统的活体组织对损伤因子的防御性反应，而在这一过程中会相应的产生很多种类的代谢产物。类风湿性关节炎是其中的一种以关节病变为主的慢性全身自身免疫性疾病。主要临床表现为小关节滑膜所致的关节肿痛，继而软骨破坏、关节间隙变窄，晚期因严重骨质破坏、吸收导致关节僵直、畸形、功能障碍。本病多为一种反复发作性疾病，致残率较高，预后不良，目前还没有很好的根治方法。控制类风湿药物可以产生长久缓和、延后或停止病情的恶化，消炎及镇痛药能减轻痛楚及改善僵硬，但却不能阻止关节的伤害或减慢病情的恶化。多数情况下症状表现明显时已经是中晚期，因此寻找一种早期检测方法或许可以更好的根治此类疾病，也是未来临床医疗早期预防的努力方向。

[0003] 卟啉衍生物通常分为脂溶性卟啉化合物和水溶性卟啉化合物两种，这种物质具有一定的光敏性质,在紫外光或可见光作用下,能有效释放单线态氧。早期的卟啉是从含有卟啉化合物的天然产物中通过提取、分离、纯化等方法得到的，如血红素、叶绿素等。目前有两种途径得到目标卟啉分子：天然卟啉的结构修饰和卟啉化合物的全合成。天然卟啉的结构修饰虽然能很方便地进行结构的改造，但是受到结构本身的限制，同时外环官能基团的选择上也十分有限，此外，也限制了卟啉化合物的本身生理活性。因此，通常人们需要通过全合成的办法，来获得具有特定生理活性和功能的卟啉分子。本发明所应用的四-对-磺酸基苯基卟啉(TSPP)等，是一类水溶性的磺酸基类卟啉衍生物，具有稳定的荧光特性和良好的生物相容性。

发明内容

[0004] 本发明所解决的技术问题是：提供一种卟啉衍生物与炎症相关代谢物作用后的光学以及电化学特性的变化来实现类风湿性关节炎早期快速、高灵敏检测，具有广阔的应用价值和前景。

[0005] 为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：提供一种四-对-磺酸基苯基卟啉在制备检测类风湿性关节炎试剂中的应用，其特征在于，利用四-对-磺酸基苯基卟啉的卟啉环状结构以及磺酸基基团同炎症代谢物中的特异性蛋白结合，配位，从而改变四-对-磺酸基苯基卟啉的光学以及电化学性质的原理，制备用于检测类风湿性关节炎的试剂。

[0006] 本发明的有益效果是：与现有技术相比，本发明的优点如下：因为卟啉衍生物具有稳定良好的光学、电化学特性以及优良的生物相容性，而相关疾病的体液或者尿液中的代谢物可以显著地改变卟啉衍生物的光学特性(包括紫外可见吸收光谱和荧光光谱等)以及电化学特性。利用这一特性，本发明首次提出卟啉衍生物在制备检测炎症相关疾病试剂中的应用，拓展了卟啉衍生物的新用途。

附图说明

[0007] 图1为浓度为0.01mg/ml的TSPP的紫外可见吸收光谱

[0008] 图2为采用本发明所述卟啉衍生物——TSPP检测类风湿性关节炎实验中对照组与实验组紫外可见吸收峰峰值变化对比图

具体实施方式

[0009] 下面将结合说明书附图，对本发明作进一步的说明

[0010] 由于四-对-磺酸基苯基卟啉(TSPP)具有同多数卟啉衍生物相类似的卟啉环状结构以及磺酸基基团，而且所检测的相关代谢物中的蛋白等很容易同卟啉环结构以及磺酸基结合、配位，从而改变卟啉衍生物的光学以及电化学性质，下述实施例以四-对-磺酸基苯基卟啉(TSPP)为例对卟啉衍生物在制备检测炎症相关疾病试剂中的应用进行说明，其他结构类似的卟啉衍生物也同样可以应用于检测炎症相关疾病试剂的制备。

[0011] 下述实施例中正常实验模型组的体液(如血液)或者尿液取自正常的雄性DBA/1小鼠或其他正常对照组；炎症相关疾病实验模型组的体液或者尿液取自胶原诱导的早期CIA雄性DBA/1小鼠或其他炎症相关疾病实验模型组。

[0012] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。

[0013] 实施例1：利用TSPP光学特性检测类风湿性关节炎等炎症相关代谢物，具体步骤如下：

[0014] 1利用紫外可见分光光度计和荧光分光光度计表征TSPP(0.01mg/ml)的光学(紫外可见吸收光谱和荧光光谱)特性，得到标准液TSPP(0.01mg/ml)的紫外可见吸收峰峰值ATSPP(如图1所示)以及用515nm激发光激发得到的荧光发射峰峰值ITSPP。

[0015] 2取正常实验模型组的体液或者尿液以及炎症相关疾病实验模型组的体液或者尿液各10μl，分别滴加TSPP(0.01mg/ml)标准液，利用紫外可见分光光度计和荧光分光光度计表征混合溶液的光学(紫外可见吸收光谱和荧光光谱)特性，得到各混合溶液的紫外可见吸收峰峰值AUN以及用515nm激发光激发得到的荧光发射峰峰值IUN，分别计算标准液TSPP(0.01mg/ml)与正常实验模型组和炎症相关疾病实验模型组之间的变化值ΔA＝ATSPP-AUN以及ΔI＝ITSPP-IUN。

[0016] 3检测结果显示：正常实验模型组的紫外可见吸收峰峰值变化ΔANOR以及荧光发射峰峰值变化ΔINOR远远小于炎症相关疾病实验模型组紫外可见吸收峰峰值变化ΔAILL以及荧光发射峰峰值变化ΔIILL。

[0017] 实施例2：利用TSPP电化学特性检测类风湿性关节炎等炎症相关代谢物，具体步骤如下：

[0018] 1利用电化学工作站表征TSPP标准液(0.01mg/ml)的电化学特性，得到标准液的电化学差分脉冲伏安曲线(DPVTSPP)及对应的若干电化学峰。

[0019] 2取正常实验模型组的体液或者尿液以及炎症相关疾病实验模型组的体液或者尿液各10μl，分别滴加TSPP(0.01mg/ml)标准液，利用电化学工作站表征上述混合溶液的电化学特性，得到各混合溶液的电化学差分脉冲伏安曲线(DPVNOR和DPVILL)及对应的若干电化学峰。

[0020] 3结果发现，正常实验模型组的DPVNOR与标准液的DPVTSPP无明显区别，对应的电化学峰位置以及峰值无明显变化；而炎症相关疾病实验模型组的DPVILL与标准液的DPVTSPP明显不同，相应的许多电化学峰由于加入了炎症相关疾病实验模型组的体液或尿液而消失或者峰值变小。

[0021] 由以上具体实例结果表明：本方法采用的卟啉衍生物具有良好的光学特性和电化学特性，而炎症疾病模型动物以及患者的体液或者尿液可以显著的改变卟啉衍生物的光学特性(包括紫外可见光谱和荧光光谱等)以及电化学特性。本方法充分利用了卟啉衍生物的优良特性及其对炎症疾病体液和尿液产生的影响，简便易行、快速、特异性强，具有广阔的医学临床应用价值和前景。

[0022] 以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。