一种检测右兰索拉唑原料药有关物质的方法

摘要

本发明提供了一种检测右兰索拉唑原料药中有关物质的方法，本发明所述的方法采用小粒径核壳柱作为色谱柱，缓冲液是磷酸氢二钾水溶液或磷酸二氢钾水溶液与有机溶液的混合液，适当调节pH，同时以乙腈为有机相，采用液相色谱法测定右拉索拉唑原料药有关物质的含量。本发明提供的方法缓冲液配制简单，运行时间短，同时专属性好，柱子压力低，在普通的液相色谱仪器中同样可以使用。

权利要求

1.一种检测右兰索拉唑原料药有关物质的方法，其特征是：色谱柱：phenomenex Kinetax 2.6μm XB-C18,100F 4.6mm×50mm；

缓冲液：乙腈：10mmol/L磷酸氢二钾水溶液是约1:10，v/v；其中10mmol/L磷酸氢二钾水溶液的pH值是约6.5；

有机相：乙腈；

梯度程序：

时间min 缓冲液％，v/v 有机相％，v/v

0 5 95

2 25 75

7 25 75

12 67 33

18 67 33

检测波长：285nm；

流速：1.0ml/min；

柱温：25℃；

进样量：10μl；

运行时间：18min；

后运行：3min；

其中所述方法用于检测右兰索拉唑原料药中有关物质A、有关物质B、有关物质C和有关物质D。

说明书

一种检测右兰索拉唑原料药有关物质的方法

技术领域

[0001] 本发明属于医药化工领域，更具体地涉及一种检测右兰索拉唑原料药有关物质的方法。

背景技术

[0002] 右兰索拉唑，化学名为2-[[3-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲基亚磺酰基]-1H-苯并咪唑，其结构式如下：

[0003] 。

[0004] 右兰索拉唑是日本武田制药公司研发的质子泵抑制剂。质子泵抑制剂为苯并咪唑类衍生物，特异性和非竞争性的作用于H+/K+-ATP酶，治疗消化性溃疡。质子泵抑制剂多为脂溶性弱碱性，吸收入血后进入壁细胞分泌小管、小管泡腔中酸性环境后，活化产物一般为活性次磺酸和次磺酰胺，与H+－K+－ATP酶巯基偶联形成一个不可逆的共价二硫键，阻断H+－K+转运机制，从而抑制胃酸分泌。

[0005] 右兰索拉唑作为治疗食道炎的缓释胶囊于2009年1月30日已经在美国获得FDA批准上市，商品名为Dexlansoprazole；其原料药和胶囊制剂目前在市面上都是可以购买得到的。

[0006] 为了保证医药产品的质量可控、安全和有效，严格控制医药产品的质量标准是非常必要的。因而分析检测医药产品的质量贯通于整个医药生产流程和使用过程中。右兰索拉唑作为一种治疗食道炎用的新药也不例外。

[0007] 右兰索拉唑原料药中常见的已知有关物质分别是有关物质A、有关物质B、有关物质C和有关物质D，其结构分别如下：

[0008]

[0009]

[0010] 为了有效地控制右兰索拉唑原料药的有关物质，现有技术中已经公开了多种检测方法。

[0011] 在一篇现有文献中，刘秀霞、鲍佳加等(高效液相色谱法测定注射剂中兰索拉唑及其有关物质的方法[J]，中国药事(中国,武汉)(2013),16(7)：1079-1081)公开了使用安捷伦XDB-C8色谱柱，以PH为5.5的三乙胺溶液为缓冲液，甲醇为有机相对兰索拉唑及其有关物质进行分离检测。

[0012] 在另一篇现有文献中，夏桂民(兰索拉唑肠溶胶囊杂质的确认、测定和控制[J],药物分析(2012)，32(6)：1022-1027,1016)公开了以浓度为1.67％的三乙胺水溶液，pH 6.2，作为缓冲液；使用Diamond C18 chromatog.column(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱对兰索拉唑杂质晶型分析检测，该方法三乙胺浓度极高。

[0013] 在另一篇现有文献中，Pai,Nandini R.；Patil,Swapnali Suhas等(Development and validation of a rapid liquid chromatographic method for the analysis of Lansoprazole and its related production impurities.Journal of Chemical and Pharmaceutical Research(2013),5(7)：121-128)还公开了一种快速液相测定兰索拉唑及其有关物质的方法的开发和验证。该方法使用C18色谱柱，使用5μm,柱长250色谱柱，流动相为PH10.0的三乙胺水溶液。

[0014] 在另一篇现有文献中，Petkovska,R.；Cornett,C.；Dimitrovska等(Chemometrical approach in lansoprazole and its related compounds analysis by rapid resolution RP-HPLC method.Journal of Liquid Chromatography&Related Technologies(2008),31(14):2159-2173)还公开了采用快速分离高效液相色谱方法分析兰索拉唑及其有关物质的方法。该方法使用XDB C18，4.6mm×50mm,1.8μm为色谱柱，并且以乙腈和1％三乙胺水溶液为流动相，仅需要3min能分离5个相关物质。

发明内容

[0015] 发明概述

[0016] 现有技术所述的四种分析方法均采用了不同浓度的三乙胺水溶液作为液相色谱法的缓冲溶液。然而使用三乙胺作为流动相添加剂，在一定程度上影响色谱柱寿命，同时三乙胺气味较大，配制过程中难以忍受。因此在使用过程中即为不变，并且损害仪器设备，不是日常分析检测的首先方法。

[0017] 为了克服现有分析方法中使用三乙胺作为缓冲液带来的问题，如损害仪器和气味大等，本发明提供另外一种检测右兰索拉唑原料药有关物质的方法。

[0018] 本发明人通过多次尝试，最终决定采用小粒径核壳柱作为色谱柱，并以磷酸氢二钾水溶液作为缓冲液，适当调节pH，同时以乙腈为有机相，采用液相色谱法测定右拉索拉唑原料药有关物质的含量。本发明提供的方法缓冲液配制简单，运行时间短，同时专属性好，柱子压力低，在普通的液相色谱仪器中同样可以使用。

[0019] 术语定义

[0020] 术语“对称性”是指在HPLC检测中，用于考察峰型对称性的参数，体现色谱柱效能；在液相色谱法中，当对称性在0.8～1.2之间认为峰型较好。

[0021] 术语“约”在本发明中是指在所述数值的±10％以内。

[0022] 术语“v/v”是指体积比，“mmol/L”是指毫摩尔每升。

[0023] 发明详述

[0024] 本发明提供的一种检测右兰索拉唑原料药有关物质的方法，其特征是：缓冲液是磷酸氢二钾的水溶液或者是磷酸氢二钾水溶液与有机溶液的混合液，乙腈作为有机相，采用小粒径核壳柱作为色谱柱，在液相色谱系统中进行右兰索拉唑原料药有关物质的检测。

[0025] 本发明提供的方法是采用梯度洗脱的方法进行的，其中梯度洗脱程序是：

[0026]时间(min) 缓冲液(％，v/v) 有机相(％，v/v)
0 5 95
2 25 75
7 25 75
12 67 33
18 67 33

[0027] 本发明所述缓冲溶液是磷酸氢二钾溶液，浓度是约5mmol/L～20mmol/L，pH是约6.0～7.0；优选地，磷酸氢二钾溶液浓度是约10mmol/L，pH是约6.5。在一些实施例中，本发明所述的缓冲液是磷酸氢二钾水溶液和乙腈的混合液，其中磷酸氢二钾水溶液与乙腈的比例是约10:1，v/v。

[0028] 本发明提供的方法采用紫外检测器进行检测，检测波长是285nm。

[0029] 本发明提供的方法色谱柱的流速是约0.9ml/min～1.1ml/min；优选地可以是1.0ml/min。

[0030] 本发明提供的方法采用的小粒径核壳柱可以是phenomenex Kinetax 2.6μm XB-C18,100F 4.6mm×50mm；其中色谱柱的柱温是室温，优选是约20℃～35℃，更加优选的是约25℃。

[0031] 在一些实施例中，本发明所述的方法，其特征是：

[0032] 色谱柱：phenomenex Kinetax 2.6μm XB-C18,100F 4.6mm×50mm；

[0033] 缓冲液：乙腈：10mmol/L磷酸氢二钾水溶液(pH约6.5)是约1:10，v/v；

[0034] 有机相：乙腈；

[0035] 梯度程序：

[0036]时间(min) 缓冲液(％，v/v) 有机相(％，v/v)
0 5 95
2 25 75
7 25 75
12 67 33
18 67 33

[0037] 检测波长：285nm；

[0038] 流速：1.0ml/min；

[0039] 柱温：25℃；

[0040] 进样量：10μl；

[0041] 运行时间：18min；

[0042] 后运行：3min。

[0043] 本发明所述的分析方法更适合于检测右兰索拉唑原料药中有关物质A、有关物质B、有关物质C和有关物质D。

附图说明

[0044] 图1示实施例1中系统适应性溶液色谱图

[0045] 图2示实施例1中供试品溶液色谱图

[0046] 图3示实施例1中峰鉴别溶液色谱图

[0047] 图4示实施例2中系统适应性溶液色谱图

[0048] 图5示实施例3中系统适应性溶液色谱图

具体实施方式

[0049] 为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面进一步披露一些非限制实施例对本发明作进一步的详细说明。

[0050] 本发明所使用的试剂均可以从市场上购得或者可以通过本发明所描述的方法制备而得。

[0051] 本发明所使用的分析试剂及溶液符合中国药典2010版附录的要求，除另有说明外。

[0052] 兰索拉唑EP(欧洲药典)峰鉴别溶液、兰索拉唑对照品和兰索拉唑有关物质A对照品均购买于欧洲药品质量管理局(EDQM)。

[0053] 实施例1

[0054] 溶液配制：

[0055] 稀释剂：乙腈：0.1mol/L氢氧化钠溶液＝3：7；

[0056] 系统适用性溶液：取兰索拉唑对照品及兰索拉唑有关物质A对照品约25mg置于50ml量瓶中，加稀释剂至完全溶解并定容至刻度，取上述溶液1ml置于100ml量瓶中，用稀释剂定容至刻度，即得。

[0057] 供试品溶液：取右兰索拉唑原料药约25mg，置于50ml量瓶中，加稀释剂超声至完全溶解并定容至刻度，配制成浓度约为0.5mg/ml的供试品溶液摇匀，即得。

[0058] 峰鉴别溶液：取兰索拉唑EP峰鉴别溶液1mg，加入2ml稀释剂溶解。

[0059] 色谱条件：

[0060] 色谱仪器：安捷伦1200色谱仪；

[0061] 色谱柱：phenomenex Kinetax 2.6μm XB-C18,100F 4.6mm×50mm；

[0062] 缓冲液：乙腈：10mmol/L磷酸氢二钾水溶液(pH约6.5)是约1:10，v/v；

[0063] 有机相：乙腈；

[0064] 梯度程序：

[0065]时间(min) 缓冲液(％，v/v) 有机相(％，v/v)
0 5 95
2 25 75
7 25 75
12 67 33
18 67 33

[0066] 检测波长：285nm；

[0067] 流速：1.0ml/min；

[0068] 柱温：25℃；

[0069] 进样量：10μl；

[0070] 运行时间：18min；

[0071] 后运行：3min。

[0072] 按照中国药典2010版第二部附录ⅤD高效液相色谱法，取系统适应性溶液、供试品溶液和峰鉴别溶液，在所述色谱条件下进样检测，并记录色谱图。系统适应性溶液色谱图如图1、供试品溶液色谱图如图2和峰鉴别溶液色谱图如图3。记录各色谱图下色谱峰的峰面积、对称性和留时间，结果如表1。

[0073] 表1

[0074]

[0075]

[0076] 实施例2

[0077] 溶液配制：

[0078] 系统适应性溶液：如实施例1所示系统适应性溶液；

[0079] 色谱条件：

[0080] 色谱仪器：安捷伦1260色谱仪；

[0081] 色谱柱：phenomenex Kinetax 2.6μm XB-C18,100F 4.6mm×50mm；

[0082] 缓冲液：乙腈：10mmol/L磷酸氢二钾水溶液(pH约6.5)是约1:10，v/v；

[0083] 有机相：乙腈；

[0084] 梯度程序：

[0085]时间(min) 缓冲液(％，v/v) 有机相(％，v/v)
0 5 95
2 25 75
7 25 75
12 67 33
18 67 33

[0086] 检测波长：285nm；

[0087] 流速：1.1ml/min；

[0088] 柱温：25℃；

[0089] 进样量：10μl；

[0090] 运行时间：18min；

[0091] 后运行：3min。

[0092] 按照中国药典2010版第二部附录ⅤD高效液相色谱法，取系统适应性溶液在所述色谱条件下进样检测，并记录色谱图。系统适应性溶液色谱图如图4。记录各色谱图下色谱峰的峰面积、对称性和保留时间，结果如表2。

[0093] 表2

[0094]

[0095] 实施例3

[0096] 溶液配制：

[0097] 系统适应性溶液：如实施例1所示系统适应性溶液；

[0098] 色谱条件：

[0099] 色谱仪器：安捷伦1100色谱仪；

[0100] 色谱柱：phenomenex Kinetax 2.6μm XB-C18,100F 4.6mm×50mm；

[0101] 缓冲液：乙腈：10mmol/L磷酸氢二钾水溶液(pH约6.5)是约1:10，v/v；

[0102] 有机相：乙腈；

[0103] 梯度程序：

[0104]时间(min) 缓冲液(％，v/v) 有机相(％，v/v)
0 5 95
2 25 75
7 25 75
12 67 33
18 67 33

[0105] 检测波长：285nm；

[0106] 流速：1.0ml/min；

[0107] 柱温：30℃；

[0108] 进样量：10μl；

[0109] 运行时间：18min；

[0110] 后运行：3min。

[0111] 按照中国药典2010版第二部附录ⅤD高效液相色谱法，取系统适应性溶液在所述色谱条件下进样检测，并记录色谱图。系统适应性溶液色谱图如图5。记录各色谱图下色谱峰的峰面积、对称性和保留时间，结果如表3。

[0112] 表3

[0113]

[0114] 综上实施例1-3，

[0115] 实施例1、实施例2和实施例3分别采用不同的仪器不影响分析检测的有效性。

[0116] 在实施例1中，按所述方法测定系统适应性溶液、供试品溶液和峰鉴别溶液，检测结果和图谱显示右兰索拉唑与有关物质A、有关物质B、有关物质C、有关物质D以及其他有关物质既有良好的分离度；各杂质之间也具有良好的分离度。各色谱峰峰型良好，柱效高；色谱响应值高，可以有效检测各杂质的含量。

[0117] 实施例2所述分析方法的流速是1.1ml/min，对系统适应性溶液检测结果和图谱显示右兰索拉唑与有关物质A的分离度良好，具有良好的专属性。

[0118] 实施例3所述分析方法的柱温是30℃，对系统适应性溶液检测结果和图谱显示右兰索拉唑与有关物质A的分离度良好，具有良好的专属性。

[0119] 因此，本发明所述的分析方法检测右兰索拉唑原料药中有关物质具有优秀的专属性、灵敏度高、柱效好。

[0120] 本发明的方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明内。