神经酸和竹叶黄酮的组合物，其制备方法和应用

摘要

本发明提供含有神经酸与竹叶黄酮的药物组合物，所述药物的剂型是药剂学上可以接受的任何药物剂型，其中所述竹叶黄酮还包括其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中所述神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.2～5):1的比例组合，以及其制备方法包括将神经酸和竹叶黄酮与药学上可接受的药用载体混合而制成药剂学上可接受的任何药物制剂；本发明进一步提供了所述组合物在保护心脑血管、保护心脑组织、改善心脑缺血等方面的协同应用，以及在降低发生心肌梗死、脑卒中或心血管疾病导致的风险的应用。

权利要求

1.一种神经酸竹叶黄酮乳液，其处方量以重量百分比计，含有：神经酸               1.5%，竹叶黄酮             2.5%，卵磷脂               0.2%，三氯蔗糖             0.015%，纯化水               加至100%；

其制备方法，包括：

(1)配料：按配方称取神经酸、竹叶黄酮、甜味剂，加入纯化水中，搅拌混合分散均匀，定容至所需生产量；

(2)乳化：向(1)中配制好的液体中加入卵磷脂，在液体温度为35～65℃、搅拌转速大于

2000r/min的条件下，进行乳化操作5～35min,静置；

(3)灌装、灭菌：将乳液经500～1000目过滤，真空脱气,罐装,封口，并在85～135℃条件下灭菌4秒～35分钟；

(4)包装、检验，即得。

2.一种元宝枫籽油神经酸竹叶黄酮乳液，其处方量以重量百分比计，含有：神经酸含量≥5.0%的元宝枫籽油    2.5%，竹叶黄酮                        3.5%，卵磷脂                          3.5%，木糖醇                          7.5%，纯化水                          加至100%；

其制备方法，包括：

(1)配料：按配方称取元宝枫籽油、竹叶黄酮、甜味剂，加入纯化水中，搅拌混合分散均匀，定容至所需生产量；

(2)乳化：向(1)中配制好的液体中加入卵磷脂，在液体温度为35～65℃、搅拌转速大于

2000r/min的条件下，进行乳化操作5～35min,静置；

(3)灌装、灭菌：将乳液经500～1000目过滤，真空脱气,罐装,封口，并在85～135℃条件下灭菌4秒～35分钟；

(4)包装、检验，即得。

3.一种神经酸竹叶黄酮的软胶囊，其处方量以重量百分比计，含有：神经酸                 5%，竹叶黄酮               5%，大豆油                 加至100%；

其制备方法，包括：

称取处方量的神经酸加入大豆油，于35～65℃搅拌使神经酸完全溶解于大豆油中，再加入竹叶黄酮，高速搅拌形成混悬液，以此混悬液作为软胶囊的内容物,置软胶囊成型机中,采用模压法用明胶胶片包裹压制成软胶囊。

4.一种神经酸竹叶黄酮的软胶囊，其处方量以重量百分比计，含有：神经酸含量≥5.0%的元宝枫籽油          95%，竹叶黄酮                              5%；

其制备方法，包括：

称取处方量的竹叶黄酮加入元宝枫籽油，于35～65℃高速搅拌形成混悬液，以此混悬液作为软胶囊的内容物,置软胶囊成型机中,采用模压法用明胶胶片包裹压制成软胶囊。

5.一种复方神经酸竹叶黄酮片，其制备方法，包括：神经酸                  50g竹叶黄酮                100g预胶化淀粉            150g微晶纤维素              90g交联羧甲基纤维素钠      15g十二烷基硫酸钠          3g聚乙烯吡咯烷酮          3g硬脂酸镁                2g其制备方法，包括：

取以上处方量的神经酸研磨粉碎，过80目筛，与竹叶黄酮、预胶化淀粉、微晶纤维素和交联羧甲基纤维素钠混合均匀,用十二烷基硫酸钠和聚乙烯吡咯烷酮的30%乙醇溶液湿法制软材,30目筛制粒,烘干,整粒。加入硬脂酸镁,混匀,压制成1000片,即得；或者，其制备方法，包括：取神经酸50g、预胶化淀粉50g、20g微晶纤维素、5g交联羧甲基纤维素钠和3g十二烷基硫酸钠混合均匀,用1g聚乙烯吡咯烷酮的30%乙醇溶液湿法制软材,30目筛制粒,烘干,整粒,备用；另取竹叶黄酮100g、预胶化淀粉100g、70g微晶纤维素和10g交联羧甲基纤维素钠混合均匀,用2g聚乙烯吡咯烷酮的30%乙醇溶液湿法制软材,30目筛制粒,烘干,整粒。将两种颗粒和硬脂酸镁混匀,压制成1000片,即得。

6.神经酸与竹叶黄酮的以重量百分比计1:1的组合物在制备改善心肌缺血、保护心肌细胞的药物中的应用。

7.神经酸与竹叶黄酮的以重量百分比计1:1的组合物在制备保护脑组织、保护神经细胞、减轻脑组织水肿的药物中的应用。

8.权利要求3所述的神经酸竹叶黄酮的软胶囊在下述方面的应用：在制备改善心肌缺血、保护心肌细胞的药物中的应用；

在制备保护脑组织、保护神经细胞、减轻脑组织水肿的药物中的应用。

说明书

神经酸和竹叶黄酮的组合物，其制备方法和应用

技术领域

[0001] 本发明涉及一种健康品组合物，及其制备方法，具体是神经酸和竹叶黄酮的组合物，以及其制备方法和应用。本发明所述的健康品组合物，包括但不限于药物、医用食品、保健食品或功能食品、普通食品等。

背景技术

[0002] 神经酸，顺-15-二十四碳烯酸，是一种长链的单不饱和脂肪酸，是神经组织中生物膜的重要组成成分、脑甙髓质的标志性成分、脑神经纤维和神经细胞的核心天然成分，也是神经细胞特别是脑细胞、视神经细胞、周围神经生长、再发育和功能维持的必需的营养素，主要以鞘糖脂和鞘磷脂的形式存在于人体脑组织中，在髓鞘的生物合成中起重要作用，对通过神经细胞膜上的离子通道和受体来完成信息传递和信息加工起着重要的调节作用；研究表明，神经酸对心脑血管、脑组织有保护作用，神经酸也是各国科学家公认的世界上第一个，也是唯一一个能修复疏通受损大脑神经通路----神经纤维，并促使神经细胞再生的双效神奇物质；较高的血浆神经酸水平可以降低急性缺血性脑卒中的发生风险，神经酸的缺乏将会引起脑功能衰退、脑功能障碍、脑中风后遗症、老年痴呆、脑瘫、脑萎缩、记忆力减退、失眠健忘等脑疾病；神经酸在人体自身很难生成，需要通过体外摄取来补充。

[0003] 竹叶黄酮，是从禾本科刚竹属毛环竹的竹叶中提取出来的具有生理活性的生物黄酮，它是一种高效的生物抗氧化剂，是人体必需的营养素，具有保护心脑血管，改善心肌缺血、改善脑缺血、调节血脂,降低血液粘稠度的作用，具有防治心脑血管疾病，抗氧化、抗炎以及调节免疫的功能，当人体缺乏时，容易导致心脏和大脑功能不全、血管硬化等疾病的产生。

[0004] 神经酸已经被加工成各种保健食品，如软胶囊、片剂等，还没有发现神经酸和竹叶黄酮的复方组合物。

[0005] 神经酸对脑神经的修复与营养、脑组织的保护、防治脑血管疾病等良好的作用，然而不利的影响是，心脑血管疾病通常是相伴发生的，单独使用神经酸对心脑血管疾病的整体防治有很多不足。

发明内容

[0006] 发明人惊喜的发现，将竹叶黄酮与神经酸组合，一方面，不仅能增强神经酸在脑血管疾病的防治和保护作用，而且竹叶黄酮也弥补和加强了防、治心血管疾病的作用，达到了整体和全面防、治心脑血管疾病的协同作用，尤其在保护心脑血管、保护心脑组织、改善心脑缺血等方面的协同作用，以及在降低发生心肌梗死、脑卒中或心血管疾病导致的风险的作用；另一方面，神经酸能提高竹叶黄酮的稳定性，竹叶黄酮也能提高神经酸的稳定性。

[0007] 本发明的目的是提供一种含有神经酸与竹叶黄酮的药物组合物，所述药物的剂型是药剂学上可以接受的任何药物剂型，其中所述竹叶黄酮还包括其药学上可接受的盐或溶剂合物。

[0008] 本发明的另一个目的是提供上述药物组合物的制备方法；本发明还涉及上述药物组合物在药物中的应用、医药用途。

[0009] 本发明组合物包括两种组合方式：

[0010] 一种组合方式是将神经酸与竹叶黄酮以复方制剂的形式存在，并且所述药物的剂型是药剂学上可以接受的任何药物剂型。使用相应的药用载体或辅料，采用不同的制备工艺可制成不同的复方药物制剂。应当理解的，复方制剂是指将神经酸与竹叶黄酮作为药物活性成份而制成单独的制剂，可以是药剂学上能够接受的任何药物剂型，优选口服制剂，例如口服乳液剂、软胶囊剂、片剂(包括分散片、肠溶片、咀嚼片、口腔崩解片、泡腾片，等)、硬胶囊剂(包括肠溶胶囊)、颗粒剂、丸剂、微丸剂(包括肠溶微丸)、滴丸剂、干混悬剂、口服溶液剂、干糖浆剂、散剂、口服混悬液、以及口服的速释或缓释或控释等剂型，或者是注射剂或透皮吸收剂，注射用粉针剂( 包括注射用无菌灌装粉针剂、冻干粉针剂)、水溶液注射剂、注射剂还可以是以葡萄糖、氯化钠、果糖、转化糖、木糖醇或麦芽糖等作为渗透压调节剂的静脉注射使用( 包括静脉推注和静脉滴注) 的水溶液；还包括皮肤外用的软膏剂、凝胶剂、乳液剂、乳胶剂、贴剂，等等；也可以是以上各种剂型的速释、缓释、控释等剂型,例如口服的分散片、缓释片、缓释胶囊、肠溶片、泡腾片、口腔崩解片、异型片、胞腾颗粒,等等。特别地,按本领域已知方法制备,优选用于制备药剂学上使用的软胶囊剂、口服乳液剂、注射剂(包括注射用粉针剂和注射液)；

[0011] 另一种组合方式是将神经酸与竹叶黄酮分别制成单独的制剂,在使用时,患者可以先后依次用药,也可以将分开的神经酸的制剂与竹叶黄酮的制剂混合后同时用药,以最终达到使用本发明所述的组合药物的目的,必须的,为了方便患者用药和表示药物组合的特征,应当将两种单独的制剂包装在同一个药盒中；进一步的，神经酸与竹叶黄酮是单独制剂时，两者的药物剂型可以相同，也可以是不同的，如神经酸口服乳液和竹叶黄酮片药物组合物、神经酸软胶囊和竹叶黄酮胶囊药物组合物、神经酸片和竹叶黄酮片药物组合物、神经酸胶囊和竹叶黄酮胶囊药物组合物、神经酸胶囊和竹叶黄酮片药物组合物，也可以是以上各种剂型的速释、缓释、控释等剂型,例如口服的分散片、缓释片、缓释胶囊、肠溶片、泡腾片、口腔崩解片、异型片、胞腾颗粒,等等。特别地,按本领域已知方法制备,优选用于制备药剂学上使用的片剂(包括分散片、缓控释片、肠溶片、泡腾片、口腔崩解片、异型片)、胶囊剂(包括胃溶、肠溶、缓释胶囊)、口服溶液剂、注射剂(包括注射用粉针剂和注射液)等。

[0012] 应当理解,可同时或顺次给予本发明组合的化合物，这些组合化合物可以为同一或不同的药物组合物。如果顺次给药，第二种活性组分的延迟给药不应降低该活性成分组合之间的协同治疗作用或者协同的药物作用机理的效果。还应当理解，无论同时或顺次给药，神经酸和竹叶黄酮都可以以单独或任何组合形式给药，优选将神经酸和竹叶黄酮同时给药或以单独药剂形式顺次给药，最优选同时给药。

[0013] 优选以单一组合制剂形式给予本发明的药物组合。

[0014] 本发明还提供应用神经酸制备与竹叶黄酮同时或顺次给药用于治疗或预防心脑血管疾病的药物，尤其在保护心脑血管、保护心脑组织、改善心脑缺血等方面的协同作用，以及在降低发生心肌梗死、脑卒中或心血管疾病导致的风险的应用。

[0015] 本发明的另一方面提供神经酸与竹叶黄酮以协同作用的药物剂量的比率存在的本发明组合，或者优选以神经酸能保护竹叶黄酮在制剂中的稳定性或者提高该制剂在加工制备过程中的稳定性的剂量的比率存在于本发明组合，神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.2～5):1的比例组合，

[0016] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.5～2):1的比例组合，

[0017] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.6～1.9):1的比例组合，

[0018] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.7～1.8):1的比例组合，

[0019] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.8～1.7):1的比例组合，

[0020] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.9～1.6):1的比例组合，

[0021] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(1～1.5):1的比例组合，

[0022] 具体的，例如优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为0.2:1、0.3:1、0.4:1、0.5:1、0.6:1、0.7:1、0.8:1、0.9:1、1:1、1.1:1、1.2:1、1.3:1、1.4:1、1.5:1、1.6:1、1.7:1、1.8:1、1.9:
1、2:1、2.1:1、2.2:1、2.3:1、2.4:1、2.5:1、2.6:1、2.7:1、2.8:1、2.9:1、3:1、3.1:1、3.2:1、
3.3:1、3.4:1、3.5:1、3.6:1、3.7:1、3.8:1、3.9:1、4:1、4.1:1、4.2:1、4.3:1、4.4:1、4.5:1、
4.6:1、4.7:1、4.8:1、4.9:1、5:1，等等。

[0023] 所述竹叶黄酮还包括其药学上可接受的盐或溶剂合物，组合物中神经酸与竹叶黄酮的用量一般可采用其单独使用时显示治疗或预防作用效果的量是比较有利的。

[0024] 竹叶黄酮口服适用的剂量一般为成人每日50～2500mg水平给予该化合物，优选每日80～2000mg单次或分两次给予该化合物，例如50mg、80mg、100mg、150mg、200mg、250mg、250mg、300mg、400mg、500mg、600mg、800mg、1000mg、1500mg、1800mg、2000mg，以及给予有效剂量的神经酸，例如10mg、25mg、50mg、80mg、100mg、200mg、300mg、400mg、500mg、600mg、
800mg、1000mg、1200mg、1500mg、1600mg、1800mg、1900mg、2000mg、2200mg、2300mg、2500mg、
2800mg、3000mg、3200mg、3500mg、3800mg、4000mg，等等。

[0025] 应当理解的，本发明含有神经酸和竹叶黄酮的组合物，视需要还可以含有其它药物功效成分，例如丹参、川芎、银杏叶、红花或者他们的提取物。

[0026] 优选的，神经酸与竹叶黄酮的药物组合物，其中优选每单位制剂中含有50～4000mg神经酸和50～2500mg竹叶黄酮,

[0027] 优选每单位制剂中含有80～3000mg神经酸和80～2300mg竹叶黄酮，

[0028] 优选每单位制剂中含有100～2500mg神经酸和100～2000mg竹叶黄酮，

[0029] 优选每单位制剂中含有150～2300mg神经酸和150～1800mg竹叶黄酮，

[0030] 优选每单位制剂中含有200～2000mg神经酸和200～1500mg竹叶黄酮，

[0031] 优选每单位制剂中含有250～1800mg神经酸和250～1000mg竹叶黄酮，

[0032] 优选每单位制剂中含有300～1500mg神经酸和300～800mg竹叶黄酮，

[0033] 优选每单位制剂中含有350～1200mg神经酸和350～1000mg竹叶黄酮，

[0034] 优选每单位制剂中含有400～1000mg神经酸和400～800mg竹叶黄酮，

[0035] 优选每单位制剂中含有500～800mg神经酸和500～700mg竹叶黄酮，

[0036] 优选每单位制剂中含有50～500mg神经酸和50～1000mg竹叶黄酮，

[0037] 优选每单位制剂中含有80～450mg神经酸和80～800mg竹叶黄酮，

[0038] 优选每单位制剂中含有100～400mg神经酸和100～600mg竹叶黄酮，

[0039] 优选每单位制剂中含有120～350mg神经酸和150～550mg竹叶黄酮，

[0040] 优选每单位制剂中含有150～300mg神经酸和200～500mg竹叶黄酮，

[0041] 虽然可以以化学原料形式给予药物组合的活性组分，但优选以药用组合物形式给予。本发明药用组合物包含神经酸和竹叶黄酮，以及一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂的本发明的药物组合。这些载体必须是可接受的，既可与配方的其它组分相容，并对其接受者无毒。当单独给予该组合物的各个组分时，它们一般各自是药用组合物形式。除另有说明，本发明所指的组合物是指含有神经酸与竹叶黄酮的药物组合或其中神经酸与竹叶黄酮的各组分的药物组合的组合物。

[0042] 优选的，神经酸和竹叶黄酮的组合一般是单位剂量形式的具有一种或多种药学上可接受的载体的药用组合物，常用的单位制剂中含有的神经酸与竹叶黄酮的剂量在以上所述中已经明确。

[0043] 使用相应的、不同的药用载体和制备工艺，可以将本发明药物组合物制成不同的药物剂型。本领域内的技术人员可以理解到的是，这些药用载体是为了便于生产加工成各种剂型、确保药物的安全、有效与稳定等因素，以及根据不同的药物剂型和药物自身的理化性质来选用的。药用载体的选择使用是本发明领域内的技术人员熟知和显而易见的。

[0044] 应当理解，对于口服或注射剂，按照本领域熟知的方法，通常根据不同的药剂来选用或组合使用药用载体，可选择性的包括赋形剂或稀释剂，例如植物油、微晶纤维素、甘露醇、植脂末、乳糖、预胶化淀粉、淀粉、糊精、磷酸钙、磷酸氢钙、羟丙基甲基纤维素、蔗糖、右旋糖酐、泊洛沙姆、氯化钠、山梨醇、葡萄糖、果糖、水、聚乙二醇、丙二醇、甘油、环糊精及其衍生物，等等；对于口服固体制剂，还可以选择性的包括粘合剂，例如聚维酮( 聚乙烯吡咯烷酮)、甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟乙基纤维素、明胶、瓜耳胶、黄原胶，等等；还包括润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸、滑石粉、硬脂基富马酸钠、十二烷基硫酸钠，等等；还可选择性的包括崩解剂，例如羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、交联羧甲基淀粉钠、预胶化淀粉，等等；还可选择性的包括表面活性剂或助溶剂，例如十二烷基硫酸钠、聚山梨酯-80，等等；还可包括pH 值调节剂或缓冲剂或助溶剂，例如磷酸盐缓冲液、柠檬酸、柠檬酸钠、醋酸盐缓冲液、稀盐酸、乳酸、碳酸钠、氢氧化钠，碱性有机化合物，如精氨酸、赖氨酸、葡甲胺、氨丁三醇，等等；还可选择性的包括防腐剂，例如苯甲酸钠、山梨酸钾、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯，等等；还可选择性的包括稳定剂和抗氧剂，例如金属络合剂选用乙二胺四乙酸及其盐(依地酸钙钠、依地酸二钠) 等、亚硫酸钠、焦亚硫酸钠、维生素C、维生素E，等等；还可选择性的包括口味调节剂，例如麦芽糖醇、果糖、蔗糖、糖精钠、桔子香精、草莓香精，等等；另外还可包括其它常规的、恰当的添加剂。还应当理解，物剂型是片剂或胶囊剂时，可以是膜包衣的。用于膜包衣的材料，包括适合的包衣剂，例如羟丙甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙甲基纤维素邻苯二甲酸酯(肠溶包衣材料)，等等；还可包含增塑剂，例如聚乙二醇、柠檬酸三乙酯，等等；还可选择性的包括适宜的增溶剂，如聚山梨醇酯-80 ；还可包含适宜的色素，如二氧化钛、各种氧化铁、桃红色色素，等等。应当理解，上述“可选择性的包括”是指即可以视需要选择使用，也可以不使用。

[0045] 特别的，本发明所述神经酸与竹叶黄酮的药物组合物，神经酸与竹叶黄酮的化学成分在药剂释放形式上可以不同，例如竹叶黄酮可以缓释或控释的形式出现，而神经酸也可以缓释或控释的形式出现，以改善竹叶黄酮与神经酸在药物上的协同作用。

[0046] 本发明申请中，“组合物”是指所述的一种或多种化合物或其生理上/药学上可接受的盐或前药，与其它化学成分，例如生理上/药学上可接受的载体或赋形剂形成的混合物，药物组合物的目的是有利于药物的施用、携带、保存；这里所说的“给药”是指为了预防或者治疗疾病而向有机体（包括患者或健康人群）投送所述的化合物、其可药用的盐或其溶剂化物；所述“每单位制剂”是指最小包装或最小给药形式的制剂单元，如每一瓶口服乳液、每一瓶口服溶液、每一粒胶囊、每一粒片剂或丸剂、每一袋颗粒剂或粉剂、每一支注射剂或注射液、每一瓶注射剂或注射液、每一枚栓剂、每一瓶滴眼液、每一管软膏剂，等等。

[0047] 应当说明和理解的是，本发明所述的神经酸或竹叶黄酮既可以是纯品应用于本发明，也可以是含有神经酸或竹叶黄酮的非纯品应用于本发明，既可以是从动植物中提取的，也可以是化学合成的，例如优选的，神经酸含量大于5%的元宝枫籽油或蒜头果油作为神经酸的供体，直接应用于本发明，竹叶黄酮含量大于20%的竹叶提取物作为竹叶黄酮的供体，直接应用于本发明。

[0048] 进一步的，本发明还提供了神经酸与竹叶黄酮的药物组合物的制备方法，它包括将神经酸和竹叶黄酮与药学上可接受的药用载体混合而制成药剂学上可接受的任何药物制剂，优选口服制剂，例如口服乳液剂、软胶囊剂、片剂(包括分散片、肠溶片、咀嚼片、口腔崩解片、泡腾片，等)、硬胶囊剂(包括肠溶胶囊)、颗粒剂、丸剂、微丸剂(包括肠溶微丸)、滴丸剂、干混悬剂、口服溶液剂、干糖浆剂、散剂、口服混悬液、以及口服的速释或缓释或控释等剂型，或者是注射剂或透皮吸收剂，注射用粉针剂( 包括注射用无菌灌装粉针剂、冻干粉针剂)、水溶液注射剂、注射剂还可以是以葡萄糖、氯化钠、果糖、转化糖、木糖醇或麦芽糖等作为渗透压调节剂的静脉注射使用( 包括静脉推注和静脉滴注) 的水溶液；还包括皮肤外用的软膏剂、凝胶剂、乳液剂、乳胶剂、贴剂，等等；也可以是以上各种剂型的速释、缓释、控释等剂型,例如口服的分散片、缓释片、缓释胶囊、肠溶片、泡腾片、口腔崩解片、异型片、胞腾颗粒,等等。特别地,按本领域已知方法制备,优选用于制备药剂学上使用的软胶囊剂、口服乳液剂、注射剂(包括注射用粉针剂和注射液)；例如神经酸和竹叶黄酮与药用载体干粉混合、干法制粒混合(干法制粒机处理)、湿法制粒混合(以水或乙醇溶液湿法制粒)、液态或半固态混合(如软胶囊剂的内容物、滴丸滴液混合) 等，优选的药物剂型是片剂(包括分散片、肠溶片、咀嚼片、口腔崩解片、泡腾片等)、硬胶囊剂(包括肠溶胶囊)、软胶囊剂、颗粒剂、丸剂、微丸剂(包括肠溶微丸)、滴丸剂、干混悬剂、口服溶液剂、干糖浆剂、散剂、口服混悬液、以及口服的速释或缓释或控释等剂型，注射用粉针剂(包括注射用无菌灌装粉末、冻干粉针剂)、水溶液注射剂，注射剂还可以是以葡萄糖、氯化钠、果糖、转化糖、木糖醇或麦芽糖等作为渗透压调节剂的静脉注射使用(包括静脉推注和静脉滴注) 的水溶液，也可以是以上各种剂型的速释、缓释、控释等剂型,例如口服的分散片、缓释片、缓释胶囊、肠溶片、泡腾片、口腔崩解片、异型片、胞腾颗粒,等等。特别地,按本领域已知方法制备,优选用于制备药剂学上使用的片剂(包括分散片、缓控释片、肠溶片、泡腾片、口腔崩解片、异型片)、胶囊剂(包括胃溶、肠溶、缓释胶囊)、口服溶液剂、注射剂(包括注射用粉针剂和注射液)等；或者[0049] 本发明还提供神经酸和竹叶黄酮的药物组合物的制备方法，它包括将神经酸和竹叶黄酮分别与药学上可接受的药用载体混合制成单独的药物制剂，并且将两种单独的药物制剂包装在同一个药盒中，优选的药物剂型是口服制剂，例如口服乳液剂、软胶囊剂、片剂(包括分散片、肠溶片、咀嚼片、口腔崩解片、泡腾片，等)、硬胶囊剂(包括肠溶胶囊)、颗粒剂、丸剂、微丸剂(包括肠溶微丸)、滴丸剂、干混悬剂、口服溶液剂、干糖浆剂、散剂、口服混悬液、以及口服的速释或缓释或控释等剂型，或者是注射剂或透皮吸收剂，注射用粉针剂(包括注射用无菌灌装粉针剂、冻干粉针剂)、水溶液注射剂、注射剂还可以是以葡萄糖、氯化钠、果糖、转化糖、木糖醇或麦芽糖等作为渗透压调节剂的静脉注射使用( 包括静脉推注和静脉滴注)的水溶液；还包括皮肤外用的软膏剂、凝胶剂、乳液剂、乳胶剂、贴剂，等等；也可以是以上各种剂型的速释、缓释、控释等剂型,例如口服的分散片、缓释片、缓释胶囊、肠溶片、泡腾片、口腔崩解片、异型片、胞腾颗粒,等等。

[0050] 特别的，本发明提供一种含有神经酸、竹叶黄酮、乳化剂和水的乳液组合物，所述神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.2～5):1的比例组合，所述组合物中水的含量以重量比计大于65%，

[0051] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.5～2):1的比例组合，

[0052] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.6～1.9):1的比例组合，

[0053] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.7～1.8):1的比例组合，

[0054] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.8～1.7):1的比例组合，

[0055] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.9～1.6):1的比例组合，

[0056] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(1～1.5):1的比例组合，

[0057] 具体的，例如优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为0.2:1、0.3:1、0.4:1、0.5:1、0.6:1、0.7:1、0.8:1、0.9:1、1:1、1.1:1、1.2:1、1.3:1、1.4:1、1.5:1、1.6:1、1.7:1、1.8:1、1.9:
1、2:1、2.1:1、2.2:1、2.3:1、2.4:1、2.5:1、2.6:1、2.7:1、2.8:1、2.9:1、3:1、3.1:1、3.2:1、
3.3:1、3.4:1、3.5:1、3.6:1、3.7:1、3.8:1、3.9:1、4:1、4.1:1、4.2:1、4.3:1、4.4:1、4.5:1、
4.6:1、4.7:1、4.8:1、4.9:1、5:1，等等。

[0058] 进一步的，本发明上述的含有神经酸、竹叶黄酮、乳化剂和水的乳液组合物，其中乳化剂包括下述中的一种或多种：卵磷脂、多烯磷脂酰胆碱、蔗糖脂肪酸酯、单硬脂酸甘油酯、双硬脂酸甘油酯、聚甘油脂肪酸酯、硬酯酰乳酸钠、山梨醇酐脂肪酸酯，优选的乳化剂是卵磷脂，视需要还可以含有甜味剂，所述甜味剂选自木糖醇、甜菊糖甙、果糖、葡萄糖、蔗糖、三氯蔗糖、山梨糖醇、果葡糖浆、蛋白糖、阿斯巴甜、安赛蜜、水苏糖、纽甜、蜂蜜、多聚葡萄糖中的至少一种。

[0059] 进一步的，本发明提供一种含有神经酸、竹叶黄酮、乳化剂和水的乳液组合物的制备方法，它包括：将神经酸、竹叶黄酮、乳化剂和水混合而制成均匀的液体，其中水的含量以重量比计大于65%；特别的，本发明提供一种含有神经酸、竹叶黄酮、乳化剂和水的乳液组合物的制备方法，它包括：

[0060] (1)配料：按配方称取神经酸、竹叶黄酮，加入纯化水中，搅拌混合分散均匀，定容至所需生产量；

[0061] (2)乳化：向(1)中配制好的液体中加入乳化剂，在液体温度为35～65℃、搅拌转速大于2000r/min的条件下，进行乳化操作5～35min,静置；

[0062] (3)灌装、灭菌：将乳液经500～1000目过滤，真空脱气,罐装,封口，并在85～135℃条件下灭菌4秒～35分钟；

[0063] (4)包装、检验，即得本发明乳液组合物。

[0064] 特别的，本发明提供一种含有神经酸和竹叶黄酮的软胶囊，其中软胶囊的内容物含有神经酸、竹叶黄酮和可药用载体，所述神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.2～5):1的比例组合，

[0065] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.5～2):1的比例组合，

[0066] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.6～1.9):1的比例组合，

[0067] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.7～1.8):1的比例组合，

[0068] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.8～1.7):1的比例组合，

[0069] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(0.9～1.6):1的比例组合，

[0070] 优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为(1～1.5):1的比例组合，

[0071] 具体的，例如优选神经酸与竹叶黄酮以重量比为0.2:1、0.3:1、0.4:1、0.5:1、0.6:1、0.7:1、0.8:1、0.9:1、1:1、1.1:1、1.2:1、1.3:1、1.4:1、1.5:1、1.6:1、1.7:1、1.8:1、1.9:
1、2:1、2.1:1、2.2:1、2.3:1、2.4:1、2.5:1、2.6:1、2.7:1、2.8:1、2.9:1、3:1、3.1:1、3.2:1、
3.3:1、3.4:1、3.5:1、3.6:1、3.7:1、3.8:1、3.9:1、4:1、4.1:1、4.2:1、4.3:1、4.4:1、4.5:1、
4.6:1、4.7:1、4.8:1、4.9:1、5:1，等等；

[0072] 其中，可药用载体至少一种选自下列的物质:植物油、聚乙二醇200-700、甘油、丙二醇，植物油可选自以下物质中的一种或几种:大豆油、花生油、蓖麻油、菜籽油、玉米油、玉米胚芽油、大豆色拉油、菜籽色拉油、玉米色拉油、棕榈油、橄榄油、棉籽油、芝麻油、葵花籽油、辣椒油、油酸、油酸乙酯、氢化植物油、卵磷脂、豆磷脂、植物胚芽油、茶籽油。

[0073] 进一步的,本发明所述含有神经酸和竹叶黄酮的软胶囊,软胶囊的内容物视需要还可以含有乳化剂、助乳化剂、抗氧剂、稳定剂、分散剂等；其中乳化剂和助乳化剂可选自聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯(吐温类,如吐温-20、吐温-40、吐温-60、吐温-65、吐温-80、吐温-85等)、脱水山梨醇脂肪酸酯(司盘类,如司盘-20、司盘-40、司盘-60、司盘-65、司盘-80、司盘-85等)、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯烷芳基醚、聚氧乙烯烷基醚、月桂醇硫酸钠、二甲基异山梨酯中的一种或几种；抗氧剂和稳定剂可选自亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、硫脲、维生素C、二丁基苯酚(BHT)、叔丁基对羟基茴香醚(BHA)、特丁基对苯二酚(TBHQ) 、维生素E、乙二胺四乙酸盐中的一种或几种；分散剂可选自羧甲基淀粉钠、聚维酮、交联聚维酮、羧甲基纤维素钠、交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素中的一种或几种。

[0074] 本发明所述含有神经酸和竹叶黄酮的软胶囊的制备方法,可采用两种不同的制备方法,即:压制法和滴制法。

[0075] 压制法是指采用压制机将含有神经酸和竹叶黄酮的内容物用囊材胶片压制而包裹起来形成软胶囊的制备方法,内容物通常为含有神经酸和竹叶黄酮的的液态或软粘态,用不同的模具可压制成不同的形状和内容物含量,通常用自动旋转轧囊机或冲压式连续自动软胶囊生产机进行封囊制备；滴制法是指通过滴制机制备软胶囊的方法,在一定温度下,一般保持在45℃以上,利用囊材胶液与液态内容物为两相,使一定量的囊材胶液将定量的液态内容物包裹后,滴入另一种不相混溶的冷凝液中,囊材胶液接触冷凝液后,由于表面张力作用而使之形成球形,并逐渐凝固成胶丸。冷凝液可以是液体石蜡、甲基硅油、植物油、煤油中的任意一种。本领域内的技术人员应当熟知,软胶囊囊材的组成主要是胶料、增塑剂、附加剂和水,胶料一般为明胶、阿拉伯胶。优选采用压制法制备本发明含有神经酸和竹叶黄酮的软胶囊。

[0076] 应当说明和理解的是，本发明所述的神经酸或竹叶黄酮既可以是纯品应用于本发明，也可以是含有神经酸或竹叶黄酮的非纯品应用于本发明，既可以是从动植物中提取的，也可以是化学合成的，例如优选的，神经酸含量大于5%的元宝枫籽油或蒜头果油作为神经酸的供体，直接应用于本发明，竹叶黄酮含量大于20%的竹叶提取物作为竹叶黄酮的供体，直接应用于本发明。

[0077] 另一方面的，现已发现，神经酸与竹叶黄酮组合使用时，其显示出出乎意料的优点，尤其是该药物组合显示出优秀的、意想不到的在治疗或预防心脑血管疾病的作用，以及在降低发生心肌梗死、脑卒中或心血管疾病导致的风险的作用，以及在改善心肌缺血和改善脑缺血、保护心脑细胞的作用。

[0078] 优选的，本发明含有神经酸与竹叶黄酮的药物组合物,用于制备治疗或预防心脑血管疾病的药物中的应用，尤其在制备保护心脑血管、保护心脑组织、改善心脑缺血的药物中的应用，以及在制备降低发生心肌梗死、脑卒中或心血管疾病导致的风险的药物中的应用，以及在制备改善心肌缺血和改善脑缺血、保护心脑细胞的药物中的应用。

[0079] 因此，另一方面的，本发明提供一种改善心肌缺血和改善脑缺血、保护心脑细胞，以及在降低发生心肌梗死、脑卒中或心血管疾病导致的风险的药物组合物,它含有神经酸与竹叶黄酮，其中所述竹叶黄酮还包括其药学上可接受的盐或溶剂合物，所述神经酸也包括其药学上可接受的盐或溶剂合物。本领域技术人员可以理解的，这种改善心肌缺血和改善脑缺血、保护心脑细胞，以及在降低发生心肌梗死、脑卒中或心血管疾病导致的风险的药物组合物中，神经酸与竹叶黄酮的组合方式、每单位制剂中的剂量配比以及含量，与本发明前述的内容完全一样。

[0080] 具体实施方式 在本发明的实施过程中,本领域普通技术人员在不脱离本发明的范围和精神实质的基础上产生的各种实施方案和修饰是显而易见的并且是容易进行的。通过下面的实施例来对本发明的应用等做进一步具体说明,但并不表示实施例对本发明的限制。

[0081] 实施例1、神经酸竹叶黄酮乳液及其制备方法

[0082] 处方量以重量百分比计，含有：

[0083] 神经酸                 0.05%～2.5%，优选为1.5%，

[0084] 竹叶黄酮               0.5%～5.5%，优选为2.5%，

[0085] 卵磷脂                 0.5～3.5%，优选为0.2%，

[0086] 甜味剂                 0%～10%，优选为三氯蔗糖0.015%，

[0087] 纯化水                 加至100%；

[0088] 制备方法，它包括：

[0089] (1)配料：按配方称取神经酸、竹叶黄酮、甜味剂，加入纯化水中，搅拌混合分散均匀，定容至所需生产量；

[0090] (2)乳化：向(1)中配制好的液体中加入卵磷脂，在液体温度为35～65℃、搅拌转速大于2000r/min的条件下，进行乳化操作5～35min,静置；

[0091] (3)灌装、灭菌：将乳液经500～1000目过滤，真空脱气,罐装,封口，并在85～135℃条件下灭菌4秒～35分钟；

[0092] (4)包装、检验，即得神经酸竹叶黄酮乳液组合物。

[0093] 实施例2、元宝枫籽油神经酸竹叶黄酮乳液及其制备方法

[0094] 处方量以重量百分比计，含有：

[0095] 神经酸含量≥5.0%的元宝枫籽油    0.5%～10%，优选为2.5%，

[0096] 竹叶黄酮                        0.5%～5.5%，优选为3.5%，

[0097] 卵磷脂                          0.5%～5%，优选为3.5%，

[0098] 甜味剂                          0%～10%，优选为木糖醇7.5%，

[0099] 纯化水                          加至100%；

[0100] 制备方法：(1)配料：按配方称取元宝枫籽油、竹叶黄酮、甜味剂，加入纯化水中，搅拌混合分散均匀，定容至所需生产量；

[0101] (2)乳化：向(1)中配制好的液体中加入卵磷脂，在液体温度为35～65℃、搅拌转速大于2000r/min的条件下，进行乳化操作5～35min,静置；

[0102] (3)灌装、灭菌：将乳液经500～1000目过滤，真空脱气,罐装,封口，并在85～135℃条件下灭菌4秒～35分钟；

[0103] (4)包装、检验，即得元宝枫籽油神经酸竹叶黄酮乳液组合物。

[0104] 实施例3、神经酸竹叶黄酮的软胶囊及其制备方法

[0105] 处方量以重量百分比计，含有：

[0106] 神经酸                 0.05%～4.5%，优选为5%，

[0107] 竹叶黄酮               0.5%～5.5%，优选为5%，

[0108] 大豆油                 加至100%；

[0109] 制备方法，它包括：称取处方量的神经酸加入大豆油，于35～65℃搅拌使神经酸完全溶解于大豆油中，再加入竹叶黄酮，高速搅拌形成混悬液，以此混悬液作为软胶囊的内容物,置软胶囊成型机中,选择恰当的模具型号,采用模压法用明胶胶片包裹压制成软胶囊。

[0110] 其中，囊材胶片的制备,取明胶500g,阿拉伯胶80g,加入700蒸馏水,于室温下搅拌加速使明胶膨胀后加热至55～60℃,使其融熔并过滤,向滤液中加入75g聚乙二醇400、300g甘油、10g山梨醇,混合均匀,减压脱气至胶液透明无气泡,再涂于平坦的钢板上,使厚薄均匀,加热使表面水分蒸发,即为一弹性、韧性适宜的囊材胶片。

[0111] 实施例4、神经酸竹叶黄酮的软胶囊及其制备方法

[0112] 处方量以重量百分比计，含有：

[0113] 神经酸含量≥5.0%的元宝枫籽油          75%～98%，优选为95%，

[0114] 竹叶黄酮                              2%～25%，优选为5%；

[0115] 制备方法：称取处方量的竹叶黄酮加入元宝枫籽油，于35～65℃高速搅拌形成混悬液，以此混悬液作为软胶囊的内容物,置软胶囊成型机中,选择恰当的模具型号,采用模压法用明胶胶片包裹压制成软胶囊。

[0116] 其中，囊材胶片的制备,取明胶500g,阿拉伯胶80g,加入700蒸馏水,于室温下搅拌加速使明胶膨胀后加热至55～60℃,使其融熔并过滤,向滤液中加入75g聚乙二醇400、300g甘油、10g山梨醇,混合均匀,减压脱气至胶液透明无气泡,再涂于平坦的钢板上,使厚薄均匀,加热使表面水分蒸发,即为一弹性、韧性适宜的囊材胶片。

[0117] 实施例5.复方神经酸竹叶黄酮片

[0118] 处方: 神经酸            50g

[0119] 竹叶黄酮                100g

[0120] 预胶化淀粉              150g

[0121] 微晶纤维素              90g

[0122] 交联羧甲基纤维素钠      15g

[0123] 十二烷基硫酸钠          3g

[0124] 聚乙烯吡咯烷酮          3g

[0125] 硬脂酸镁                2g

[0126] 制备方法1:取以上处方量的神经酸研磨粉碎，过80目筛，与竹叶黄酮、预胶化淀粉、微晶纤维素和交联羧甲基纤维素钠混合均匀,用十二烷基硫酸钠和聚乙烯吡咯烷酮的30%乙醇溶液湿法制软材,30目筛制粒,烘干,整粒。加入硬脂酸镁,混匀,压制成1000片,即得复方神经酸竹叶黄酮片。

[0127] 制备方法2:取神经酸50g、50g预胶化淀粉、20g微晶纤维素、5g交联羧甲基纤维素钠和3g十二烷基硫酸钠混合均匀,用1g聚乙烯吡咯烷酮的30%乙醇溶液湿法制软材,30目筛制粒,烘干,整粒,备用。

[0128] 另取竹叶黄酮100g、100g预胶化淀粉、70g微晶纤维素和10g交联羧甲基纤维素钠混合均匀,用2g聚乙烯吡咯烷酮的30%乙醇溶液湿法制软材,30目筛制粒,烘干,整粒。将两种颗粒和硬脂酸镁混匀,压制成1000片,即得复方神经酸竹叶黄酮片。

[0129] 实施例6、本发明神经酸与竹叶黄酮组合物的稳定性研究

[0130] 完全按照实施例1的优选量配方，按所述制备方法制成神经酸竹叶黄酮乳液；

[0131] 另外，以竹叶黄酮的含量为0，其它成分与实施例1的优选量配方完全一样，采用同样的制备方法，得到神经酸乳液；

[0132] 以神经酸的含量为0，其它成分与实施例1的优选量配方完全一样，采用同样的制备方法，得到竹叶黄酮乳液。

[0133] 对三种乳液加热煮沸30min后冷却置室温，分别对比操作前后的神经酸及总黄酮含量的变化，分析和比较其稳定性。

[0134] 神经酸含量的测定：采用脂肪酸甲酯化的气相色谱-质谱联用测定：测定出脂肪酸甲酯的总离子流图，根据总离子流图分离出各个脂肪酸成分，其中，也包括神经酸，然后用峰面积归一化法得出各组分所占的质量分数，色谱峰相应的质谱图检索采用SHIMADZU公司的NIST107.Lib及NIST21.Lib谱库进行检索，并逐个解析各峰相应的质谱图，测定出样品中神经酸的质量分数，再进行换算得到神经酸的含量；

[0135] 总黄酮含量的测定：采用硝酸铝亚硝酸钠比色法,以芦丁为标样, 在510nm波长处测定。

[0136] 结果如下表1。

[0137] 表1

[0138]   比较内容 神经酸含量 总黄酮含量
神经酸竹叶黄酮乳液 下降0.32% 下降0.31%
神经酸乳液 下降2.21% --------
竹叶黄酮乳液 -------- 下降6.82%

[0139] 由表1可以看出，本发明神经酸竹叶黄酮乳液的稳定性显著高于神经酸乳液、竹叶黄酮乳液，显示出神经酸竹叶黄酮乳液具有良好的稳定性，相对于神经酸乳液和竹叶黄酮乳液，组合物十分显著地保护了神经酸和竹叶黄酮稳定性，神经酸含量和总黄酮含量的下降值显著优于神经酸乳液和竹叶黄酮乳液（p<0.001），表明本发明组合物种，神经酸能提高竹叶黄酮的稳定性，竹叶黄酮也能提高神经酸的稳定性。

[0140] 实施例7、神经酸与竹叶黄酮的组合物在改善心肌缺血方面的作用

[0141] 动物：SD大鼠，雌雄各半，体重160～190g。

[0142] 心肌缺血模型：取大鼠用乌拉坦腹腔注射麻醉，仰卧固定于手术台，暴露气管，开胸前插呼吸机，在胸骨左侧3、4肋骨处开胸，暴露心脏，在左心耳根部与肺部动脉圆锥间以手术针穿线结扎左冠状动脉，关闭胸腔，形成心肌缺血模型。

[0143] 实验方法：将大鼠随机分为模型对照组、给药组，其中给药组在正常喂饲基础上分别给予口服灌胃竹叶黄酮10mg/kg、神经酸10mg/kg、竹叶黄酮与神经酸的（1:1）组合物l0mg/kg，各给药组连续给药3天后，于第4天进行心肌缺血模型，造模成功后分别给予口服灌胃竹叶黄酮10mg/kg、神经酸10mg/kg、神经酸与竹叶黄酮的（1:1）组合物l0mg/kg,给药后180min，立即取下心脏，用生理盐水冲洗，称量全心重(g)，沿冠状沟剪去心房及各大血管，称心室重(g)，将心室置于冰箱中冷冻后，在心脏结扎线以下，平行于冠脉沟均匀地将心室部分横断切成5片，每片厚约 1～2mm，5片的重量为扎下区的重量(g)，然后置于硝基四氮唑蓝(N-BT)染液中，37℃水浴箱中恒温染色15min后取出，正常心肌染为暗蓝色，梗死区心肌则不着色或浅黄色。绘制每片心肌两面的梗死区、非梗死区及空腔范围。用剪纸法，测量每片心肌两面的梗死区及正常心肌的重量(mg)，称出5片的总重量即为心室总重量(mg)。分别计算全心梗死区、心室组梗死区、扎下区梗死区的心肌梗死百分比（%），组间比较用 t检验，结果见表2。

[0144] 表2 竹叶黄酮与神经酸的组合物对心肌缺血大鼠心肌梗死范围的影响

[0145] ( ，%，n=8)

[0146]组别 梗死区/全心 梗死区/心室 梗死区/扎下区
模型对照组 22.31±4.76 25.64±5.41 28.75±5.30
竹叶黄酮组 11.65±4.18 14.68±4.53 17.18±4.86
神经酸组 18.12±4.51 19.23±4.76 22.93±4.86
神经酸与竹叶黄酮的（1:1）组合物组 8.27±3.65 10.05±3.90 13.71±4.02

[0147] 结论：本发明神经酸与竹叶黄酮的组合物在SD大鼠心肌缺血的动物模型中，能显著降低梗死面积，表现出良好的改善心肌缺血、保护心肌细胞的作用；相对于模型对照组，神经酸与竹叶黄酮的组合物组具有非常显著差异，p<0.01；相对于竹叶黄酮组和神经酸组，也具有十分显著差异，p<0.05。显示出本发明药物组合物在改善心肌缺血、保护心肌细胞的突出作用。

[0148] 实施例8、神经酸与竹叶黄酮的组合物对缺血脑神经细胞损伤的保护作用

[0149] 采用闭夹大脑中动脉制作局部特定区域急性脑缺血大鼠模型，计算死亡神经细胞数，观察神经元的形态学变化，从细胞和分子水平研究神经酸与竹叶黄酮的组合物在保护神经元和防治脑缺血损伤的作用。

[0150] 方法： Wistar大白鼠，体重 150～200g，雌雄各半，随机分组，分为模型组、竹叶黄酮给药组、神经酸给药组、神经酸与竹叶黄酮组合物给药组，每组8只。

[0151] 首先对大鼠行10%水合氯醛麻醉(ip,350mg.Kg-1)后，用器械小心撬开颅骨，暴露并闭夹大脑中动脉造成局部特定区域急性脑缺血模型，以闭夹大脑中动脉侧为缺血侧(实验组)，另一侧不闭夹作为对照(对照组)。

[0152] 各组均在缺血前30min行腹腔内注射药物。所有标本均取材于有代表性的相关区域，并迅速经4%中性甲醛固定，常规脱水，石蜡包埋，HE染色及HSP70染色。HE染色后以神经元细胞出现核固缩，核碎裂，核溶解者判为神经元死亡，在每张切片中取5个高倍镜视野，统计死亡细胞占总细胞的百分比，取其平均值。

[0153] HSP70是HSP家族中的一种，分子量为70KDa，它的主要功能是保护各种应激所致的细胞损伤和凋亡，诱导HSP70高表达可减轻脑缺血所致的神经元损伤。

[0154] 实验分组：

[0155] （1）模型组：腹腔内注射等体积的不含药物的空白乳液；

[0156] （3）竹叶黄酮给药组：腹腔内注射等体积的竹叶黄酮乳液，竹叶黄酮给药量12mg/kg；

[0157] （4）神经酸给药组：腹腔内注射等体积的神经酸乳液，神经酸给药量12mg/kg；

[0158] （5）神经酸与竹叶黄酮组合物给药组：腹腔内注射等体积的神经酸竹叶黄酮(1:1)乳液，神经酸与竹叶黄酮组合物给药量12mg/kg。

[0159] 结果：见表 3。

[0160] 表3 神经酸与竹叶黄酮的组合物对脑组织形态学改变、

[0161] 神经细胞死亡率及HSP70的表达情况(n=8)

[0162]比较内容 形态学改变 神经细胞死亡率 HSP70灰度值（ ）
模型组 脑水肿+++ 51.6% 153.27±3.87
竹叶黄酮给药组 脑水肿++ 36.8% 143.38±4.61
神经酸给药组 脑水肿++ 28.7% 136.95±4.08
神经酸与竹叶黄酮组合物给药组 脑水肿+ 17.5% 112.19±4.15

[0163] 由表3可以看出，神经酸与竹叶黄酮的组合物对于大鼠脑缺血具有良好的保护作用，y以及保护脑组织、保护神经细胞、减轻脑组织水肿程度，在神经细胞死亡率、HSP70表达数据方面，与单独竹叶黄酮给药组、神经酸给药组，具有显著差异，p<0.05。表现出本发明组合物在保护心脑血管、保护心脑组织、改善心脑缺血、保护心脑细胞的作用。

[0164] 实施例9、实施例1至实施例5所述的神经酸与竹叶黄酮的组合物在下述方面的应用：

[0165] 在制备治疗或预防心脑血管疾病的药物中的应用；

[0166] 在制备保护心脑血管、保护心脑组织、改善心脑缺血的药物中的应用；

[0167] 在制备降低发生心肌梗死、脑卒中或心血管疾病导致的风险的药物中的应用；

[0168] 在制备改善心肌缺血和改善脑缺血、保护心脑细胞的药物中的应用。