一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法

摘要

本发明公开了一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法，将从西兰花中提取的黄酮提取液与锌离子反应，然后将产物在有机溶剂中进行萃取、冷却、蒸发、析出晶体，得到西兰花黄酮锌配合物。本发明西兰花黄酮提取液与锌离子之间的产生协同作用，使得合成的金属配合物的效果并不仅仅只是黄酮提取液和锌离子各自活性的简单相加，而是大大的提高了原有的药理活性，DPPH自由基清除能力测试显示，本发明的黄酮锌配合物对DPPH自由基的IC50值仅为西兰花黄酮提取液的1/3‑1/4，即抗氧化能力提高了3‑4倍。

权利要求

1.一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：将西兰花黄酮提取液置于超声反应器中，设置温度为40-50℃，然后按照黄酮提取液与锌粉的质量比为4000~5000:1加入锌粉，然后向超声反应器中滴加摩尔浓度为0.5mol/L的酸溶液，所述酸溶液的加入量为使得锌粉完全反应，转变为锌离子，回流搅拌1.5-2.5h，冷却过滤，收集滤液，将滤液在有机溶剂中进行萃取，结晶，得到西兰花黄酮锌配合物；

所述西兰花黄酮提取液是指从西兰花中提取的黄酮类化合物。

2.根据权利要求1所述的一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法，其特征在于：所述西兰花黄酮提取液由以下方法制备而成：

1）将西兰花洗净切成条状，自然晾干后，于40-50℃烘箱中干燥至恒重，冷却，粉碎，过

80目筛，得到西兰花粉末，备用；

2）称取上述西兰花粉末，加入西兰花粉末重量15-25倍的乙醇溶液中，并置于超声波反应器中提取两次，所述超声波条件如下：超声功率180~220W，超声温度40-60℃，乙醇浓度

40-60%，每次超声30min，合并两次所得滤液，得到西兰花黄酮提取液。

3.根据权利要求1所述的一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法，其特征在于：所述西兰花黄酮提取液由以下方法制备而成：

1）将西兰花洗净切成条状，自然晾干后，于40-50℃烘箱中干燥至恒重，冷却，粉碎，过

80目筛，得到西兰花粉末，备用；

2）称取上述西兰花粉末，放入烧瓶中，加入西兰花粉末重量15倍的蒸馏水，混合均匀，加入纤维素酶进行酶解，酶解条件如下：纤维素酶用量为西兰花粉末重量的0.7~0.9%，酶解温度45~55℃，酶解pH=4.5~5.5，酶解时间50~70min；

3） 酶解后加入西兰花粉末重量25倍的质量浓度50%的乙醇溶液，并于60℃恒温浸提2次，每次50min，合并两次滤液，得到西兰花黄酮提取液。

4.根据权利要求1所述的一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法，其特征在于：所述锌粉的粒径为30-80nm。

5.根据权利要求1所述的一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法，其特征在于：所述酸溶液为盐酸、硫酸、硝酸或磷酸中的一种。

6.根据权利要求1所述的一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法，其特征在于：所述有机溶剂为氯仿、二甲基亚砜、乙酸乙酯、二氯甲烷或石油醚中的一种。

说明书

一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及西兰花金属配合物，具体涉及一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法。

背景技术

[0002] 西兰花又名花椰菜，绿菜花、青花菜，是十字花科芸薹属一年生植物甘蓝变种，西兰花营养丰富，被誉为“蔬菜皇后”，其不仅含有脂肪、蛋白质、多糖、维生素和胡萝卜素，还含有丰富的抗坏血酸和黄酮类物质，具有防癌、抗癌、抗氧化、抗肿瘤、保肝等作用，对高血压、心脏病也有预防和调节作用

[0003] 黄酮类物质是植物体内重要的天然化合物，具有明显的抗炎、抗菌、抗脂质过氧化、抗衰老、清除自由基、增加机体免疫力等作用。

[0004] 某些微量元素本身具有一定的生理活性，近年来大量的药理学研究结果表明,中草药有效成分，特别是黄酮类化合物的药理作用多是通过与生命必需元素之间的协同作用而产生。协同效应可使合成的配合物不仅具有比原中草药有效成分更高的清除超氧阴离子自由基能力、提高抗肿瘤活性，同时还可降低毒副作用，这对寻找新型、高效、低毒的金属基药物具有重要意义

[0005] 某些黄酮类化合物和金属元素形成金属配合物，有可能增加其疗效，甚至可以产生新的药理作用。因此，对黄酮金属配合物的研究，有助于黄酮类化合物的开发利用及寻找新药。

发明内容

[0006] 本发明的目的在于提供一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法。

[0007] 为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

[0008] 一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：

[0009] 将西兰花黄酮提取液置于超声反应器中，设置温度为40-50℃，然后按照黄酮提取液与锌粉的质量比为4000～5000:1加入锌粉，然后向超声反应器中滴加摩尔浓度为0.5mol/L的酸溶液，所述酸溶液的加入量为使得锌粉完全反应，转变为锌离子，回流搅拌
1.5-2.5h，冷却过滤，收集滤液，将滤液在有机溶剂中进行萃取，结晶，得到西兰花黄酮锌配合物；

[0010] 所述西兰花黄酮提取液是指从西兰花中提取的黄酮类化合物。

[0011] 所述西兰花黄酮提取液由以下方法制备而成：

[0012] 1)将西兰花洗净切成条状，自然晾干后，于40-50℃烘箱中干燥至恒重，冷却，粉碎，过80目筛，得到西兰花粉末，备用；

[0013] 2)称取上述西兰花粉末，加入西兰花粉末重量15-25倍的乙醇溶液中，并置于超声波反应器中提取两次，所述超声波条件如下：超声功率180～220W，超声温度40-60℃，乙醇浓度40-60％，每次超声30min，合并两次所得滤液，得到西兰花黄酮提取液。

[0014] 所述西兰花黄酮提取液由以下方法制备而成：

[0015] 1)将西兰花洗净切成条状，自然晾干后，于40-50℃烘箱中干燥至恒重，冷却，粉碎，过80目筛，得到西兰花粉末，备用；

[0016] 2)称取上述西兰花粉末，放入烧瓶中，加入西兰花粉末重量15倍的蒸馏水，混合均匀，加入纤维素酶进行酶解，酶解条件如下：纤维素酶用量为西兰花粉末重量的0.7～0.9％，酶解温度45～55℃，酶解pH＝4.5～5.5，酶解时间50～70min；

[0017] 3)酶解后加入西兰花粉末重量25倍的质量浓度50％的乙醇溶液，并于60℃恒温浸提2次，每次50min，合并两次滤液，得到西兰花黄酮提取液。

[0018] 所述锌粉的粒径为30-80nm。

[0019] 所述酸溶液为盐酸、硫酸、硝酸或磷酸中的一种。

[0020] 所述有机溶剂为氯仿、二甲基亚砜、乙酸乙酯、二氯甲烷或石油醚中的一种，所述有机溶剂应当使黄酮锌从水中萃取出来，因此需要加入过量的有机溶剂。

[0021] 所述西兰花黄酮提取液与锌离子形成配合物的制备过程中，所述锌离子以反应新生成的锌离子为佳，否则反应产率低，西兰花黄酮锌配合物的抗氧化能力也相对较小。

[0022] 本发明采用以上技术方案，将从西兰花中提取的黄酮提取液与锌离子反应，然后将产物在有机溶剂中进行萃取、冷却、蒸发、析出晶体，得到西兰花黄酮锌配合物。西兰花黄酮提取液与锌离子之间的产生协同作用，使得合成的金属配合物的效果并不仅仅只是黄酮提取液和锌离子各自活性的简单相加，而是大大提高了原有的药理活性，比如具有更高的抗氧化能力等。DPPH自由基清除能力测试显示，本发明的黄酮锌配合物对DPPH自由基的IC50值(DPPH自由基清除率达到50％时，所用的还原剂的浓度)仅为西兰花黄酮提取液的1/3-1/4，即抗氧化能力提高了3-4倍。同时，锌元素是维持机体正常生理功能和生化代谢所必需的微量元素，它不仅参与机体的各种代谢而且还在骨骼发育、生殖、免疫、生物膜稳定和基因表达等生理机能中担负重要角色，本发明的黄酮锌配合物在提高机体抗氧化性能的同时，还可以作为补锌剂，维持机体的正常生理功能。

具体实施方式

[0023] 一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：

[0024] 将西兰花黄酮提取液置于超声反应器中，设置温度为40-50℃，然后按照黄酮提取液与锌粉的质量比为4000～5000:1加入粒径为30-80nm的锌粉，然后向超声反应器中滴加摩尔浓度为0.5mol/L的酸溶液，所述酸溶液为盐酸、硫酸、硝酸或磷酸中的一种，所述酸溶液的加入量为使得锌粉完全反应，转变为锌离子，回流搅拌1.5-2.5h，冷却过滤，收集滤液，将滤液在过量有机溶剂(氯仿、二甲基亚砜、乙酸乙酯、二氯甲烷或石油醚)中进行萃取，结晶，得到西兰花黄酮锌配合物；

[0025] 所述西兰花黄酮提取液是指从西兰花中提取的黄酮类化合物。

[0026] 所述西兰花黄酮提取液由以下方法制备而成：

[0027] 1)将西兰花洗净切成条状，自然晾干后，于40-50℃烘箱中干燥至恒重，冷却，粉碎，过80目筛，得到西兰花粉末，备用；

[0028] 2)称取上述西兰花粉末，加入西兰花粉末重量15-25倍的乙醇溶液中，并置于超声波反应器中提取两次，所述超声波条件如下：超声功率180～220W，超声温度40-60℃，乙醇浓度40-60％，每次超声30min，合并两次所得滤液，得到西兰花黄酮提取液。

[0029] 进一步，所述西兰花黄酮提取液由以下方法制备而成：

[0030] 1)将西兰花洗净切成条状，自然晾干后，于40-50℃烘箱中干燥至恒重，冷却，粉碎，过80目筛，得到西兰花粉末，备用；

[0031] 2)称取上述西兰花粉末，放入烧瓶中，加入西兰花粉末重量15倍的蒸馏水，混合均匀，加入纤维素酶进行酶解，酶解条件如下：纤维素酶用量为西兰花粉末重量的0.7～0.9％，酶解温度45～55℃，酶解pH＝4.5～5.5，酶解时间50～70min；

[0032] 3)酶解后加入西兰花粉末重量25-倍的质量浓度50％的乙醇溶液，并于60℃恒温浸提2次，每次50min，合并两次滤液，得到西兰花黄酮提取液。

[0033] DPPH自由基清除能力测试：

[0034] 用无水乙醇将DPPH自由基配制成1.3×10-3mol/L的母液，使用时用无水乙醇稀释20倍，浓度为65μmol/L。取2mL样品溶液，加入65μmmol/LDPPH自由基乙醇溶液2mL，室温下避光静置30min后，于517nm处测吸光度。

[0035] DPPH自由基清除率按以下公式计算：

[0036] 清除率＝[1-(Ai-Aj)/A0]×100％

[0037] 式中：A0—2.0mL DPPH自由基溶液+2.0mL无水乙醇的吸光值；

[0038] Ai—2.0mL DPPH自由基溶液+2.0mL样品液的吸光值；

[0039] Aj—2.0mL无水乙醇+2.0mL样品液的吸光值。

[0040] DPPH自由基清除率越大，表明抗氧化能力越强。

[0041] 实施例1

[0042] 一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法，包括以下步骤：

[0043] 首先，制备西兰花黄酮提取液：

[0044] 1)将西兰花洗净切成条状，自然晾干后，于40℃烘箱中干燥至恒重，冷却，粉碎，过80目筛，得到西兰花粉末，备用；

[0045] 2)称取上述西兰花粉末，加入西兰花粉末重量15倍的乙醇溶液中，并置于超声波反应器中提取两次，所述超声波条件如下：超声功率180W，超声温度40℃，乙醇体积浓度40％，每次超声30min，合并两次所得滤液，得到西兰花黄酮提取液。

[0046] 然后，制备西兰花黄酮锌配合物：将西兰花黄酮提取液置于超声反应器中，设置温度为40℃，然后按照黄酮提取液与锌粉的质量比为4000:1加入粒径为30nm的锌粉，然后向超声反应器中滴加摩尔浓度为0.5mol/L的盐酸溶液，所述盐酸溶液的加入量为使得锌粉完全反应，转变为锌离子，回流搅拌2h，冷却过滤，收集滤液，将滤液在过量的有机溶剂氯仿中进行萃取，结晶，得到西兰花黄酮锌配合物。

[0047] 将本实施例制备的西兰花黄酮锌配合物与西兰花黄酮提取液进行DPPH自由基清除能力测试。

[0048] 表1抗氧化能力测试结果

[0049]还原剂 对DPPH自由基的IC50值(mg/ml)
维生素C 0.1110
西兰花黄酮提取液 0.1751
黄酮锌配合物 0.0502

[0050] DPPH自由基清除能力测试结果显示，本实施例的黄酮锌配合物对DPPH自由基的IC50值(DPPH自由基清除率达到50％时，所用的还原剂的浓度)远小于西兰花黄酮提取液，抗氧化能力提高了3.48倍。

[0051] 实施例2

[0052] 一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法，包括以下步骤：

[0053] 首先，制备西兰花黄酮提取液：

[0054] 1)将西兰花洗净切成条状，自然晾干后，于50℃烘箱中干燥至恒重，冷却，粉碎，过80目筛，得到西兰花粉末，备用；

[0055] 2)称取上述西兰花粉末，加入西兰花粉末重量25倍的乙醇溶液中，并置于超声波反应器中提取两次，所述超声波条件如下：超声功率220W，超声温度60℃，乙醇体积浓度60％，每次超声30min，合并两次所得滤液，得到西兰花黄酮提取液。

[0056] 然后，制备西兰花黄酮锌配合物：将西兰花黄酮提取液置于超声反应器中，设置温度为50℃，然后按照黄酮提取液与锌粉的质量比为5000:1加入粒径为80nm的锌粉，然后向超声反应器中滴加摩尔浓度为0.5mol/L的硫酸溶液，所述硫酸溶液的加入量为使得锌粉完全反应，转变为锌离子，回流搅拌2.5h，冷却过滤，收集滤液，将滤液在过量的有机溶剂二甲基亚砜中进行萃取，结晶，得到西兰花黄酮锌配合物。

[0057] 将本实施例制备的西兰花黄酮锌配合物与西兰花黄酮提取液进行DPPH自由基清除能力测试。

[0058] 表2抗氧化能力测试结果

[0059]还原剂 对DPPH自由基的IC50值(mg/ml)
维生素C 0.1110
西兰花黄酮提取液 0.1713
黄酮锌配合物 0.0499

[0060] DPPH自由基清除能力测试结果显示，本实施例的黄酮锌配合物对DPPH自由基的IC50值(DPPH自由基清除率达到50％时，所用的还原剂的浓度)远小于西兰花黄酮提取液，抗氧化能力提高了3.43倍。

[0061] 实施例3

[0062] 一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法，包括以下步骤：

[0063] 首先，制备西兰花黄酮提取液：

[0064] 1)将西兰花洗净切成条状，自然晾干后，于40℃烘箱中干燥至恒重，冷却，粉碎，过80目筛，得到西兰花粉末，备用；

[0065] 2)称取上述西兰花粉末，放入烧瓶中，加入西兰花粉末重量15倍的蒸馏水，混合均匀，加入纤维素酶进行酶解，酶解条件如下：纤维素酶用量为西兰花粉末重量的0.7％，酶解温度45℃，酶解pH＝4.5，酶解时间70min；

[0066] 3)酶解后加入西兰花粉末重量25倍的质量浓度50％的乙醇溶液，并于60℃恒温浸提2次，每次50min，合并两次滤液，得到西兰花黄酮提取液。

[0067] 然后，制备西兰花黄酮锌配合物：将西兰花黄酮提取液置于超声反应器中，设置温度为45℃，然后按照黄酮提取液与锌粉的质量比为4500:1加入粒径为50nm的锌粉，然后向超声反应器中滴加摩尔浓度为0.5mol/L的硝酸溶液，所述硝酸溶液的加入量为使得锌粉完全反应，转变为锌离子，回流搅拌2h，冷却过滤，收集滤液，将滤液在过量的有机溶剂乙酸乙酯中进行萃取，结晶，得到西兰花黄酮锌配合物。

[0068] 将本实施例制备的西兰花黄酮锌配合物与西兰花黄酮提取液进行DPPH自由基清除能力测试。

[0069] 表3抗氧化能力测试结果

[0070]还原剂 对DPPH自由基的IC50值(mg/ml)
维生素C 0.1110
西兰花黄酮提取液 0.1702
黄酮锌配合物 0.0561

[0071] DPPH自由基清除能力测试结果显示，本实施例的黄酮锌配合物对DPPH自由基的IC50值(DPPH自由基清除率达到50％时，所用的还原剂的浓度)仅为西兰花黄酮提取液的1/3，即抗氧化能力提高了3倍。

[0072] 实施例4

[0073] 一种西兰花黄酮锌配合物的制备方法，包括以下步骤：

[0074] 首先，制备西兰花黄酮提取液：

[0075] 1)将西兰花洗净切成条状，自然晾干后，于45℃烘箱中干燥至恒重，冷却，粉碎，过80目筛，得到西兰花粉末，备用；

[0076] 2)称取上述西兰花粉末，放入烧瓶中，加入西兰花粉末重量15倍的蒸馏水，混合均匀，加入纤维素酶进行酶解，酶解条件如下：纤维素酶用量为西兰花粉末重量的0.9％，酶解温度55℃，酶解pH＝5.5，酶解时间50min；

[0077] 3)酶解后加入西兰花粉末重量25倍的质量浓度50％的乙醇溶液，并于60℃恒温浸提2次，每次50min，合并两次滤液，得到西兰花黄酮提取液。

[0078] 然后，制备西兰花黄酮锌配合物：将西兰花黄酮提取液置于超声反应器中，设置温度为40℃，然后按照黄酮提取液与锌粉的质量比为4000:1加入粒径为65nm的锌粉，然后向超声反应器中滴加摩尔浓度为0.5mol/L的磷酸溶液，所述磷酸溶液的加入量为使得锌粉完全反应，转变为锌离子，回流搅拌2.5h，冷却过滤，收集滤液，将滤液在过量的有机溶剂二氯甲烷中进行萃取，结晶，得到西兰花黄酮锌配合物。

[0079] 将本实施例制备的西兰花黄酮锌配合物与西兰花黄酮提取液进行DPPH自由基清除能力测试。

[0080] 表4抗氧化能力测试结果

[0081]还原剂 对DPPH自由基的IC50值(mg/ml)
维生素C 0.1110
西兰花黄酮提取液 0.1729
黄酮锌配合物 0.0537

[0082] DPPH自由基清除能力测试结果显示，本实施例的黄酮锌配合物对DPPH自由基的IC50值(DPPH自由基清除率达到50％时，所用的还原剂的浓度)远小于西兰花黄酮提取液，抗