一种籼稻花药诱导培养改良培养基

摘要

本发明提供了一种籼稻花药诱导培养改良培养基，该培养基的配方由一定比例的KNO3、(NH4)2SO4、KH2PO4、CaCl2?2H2O、MgSO4?7H2O、氯化2-羟乙基三甲铵、Na2-EDTA、FeSO4?7H2O、MnSO4?4H2O、ZnSO4?7H2O、H3BO3、KI、肌醇、丙三醇、Na3C6H5O7?H2O、叶酸、甘氨酸、赖氨酸、脯氨酸、维生素B1、维生素B6、3-吡啶甲酸、蔗糖、植物凝胶、2，4-D、NAA、KT、水解蛋白、牛磺酸、生物素、甲基亚硝基脲和胰岛素所组成。本发明所述的培养基具有高效率地诱导籼稻花药愈伤组织的优点，可以大幅度地提高籼稻花药培养效率。

权利要求

1.一种籼稻花药诱导培养改良培养基，其特征在于该培养基的配方如下：

KNO3 3150～3450mg/L，(NH4)2SO4 330～410mg/L，KH2PO4 460～560mg/L，CaCl2∙2H2O 

220～270mg/L，MgSO4∙7H2O 210～260mg/L，氯化2-羟乙基三甲铵 225～275mg/L，Na2-EDTA 

70～80mg/L，FeSO4∙7H2O 50～60mg/L，MnSO4∙4H2O 8.0～10.0mg/L，ZnSO4∙7H2O 1.8～

2.2mg/L，H3BO3 5.0～6.0mg/L，KI 0.9～1.1mg/L，肌醇 45～55mg/L，丙三醇 2.5～3.5mg/L，Na3C6H5O7∙H2O 0.4～0.5mg/L，叶酸 0.4～0.5mg/L，甘氨酸 1.8～2.2mg/L，赖氨酸 1.3～

1.5mg/L，脯氨酸0.4～0.6g/L，维生素B1 1.8～2.2mg/L，维生素B6 1.8～2.2mg/L，3-吡啶甲酸 1.8～2.2mg/L，蔗糖 42～48g/L，植物凝胶 5～6g/L；

2，4-D 1.4～1.8mg/L，NAA 2.3～2.9mg/L，KT 0.9～1.1mg/L，水解蛋白 0.35～0.45g/L，牛磺酸 0.07～0.09mg/L，生物素 0.07～0.09mg/L，甲基亚硝基脲 1.8～2.2g/L，胰岛素 

7.0～9.0mg/L，PH 5.8-6.0。

说明书

一种籼稻花药诱导培养改良培养基

技术领域

[0001] 本发明涉及一种籼稻花药诱导培养改良培养基，具体涉及一种高效率地诱导籼稻花药愈伤组织的诱导培养基配方，属于农业科学技术领域。

背景技术

[0002] 花药培养育种，是将花粉培育成单倍体植株，再经染色体自然或人工加倍得到纯合二倍体的一种育种方法。这种染色体加倍产生的纯合二倍体，在遗传上非常稳定，不发生性状分离，因此，花培育种能极早稳定分离后代、缩短育种年限。在同一选择周期中，单倍体选择效率要比二倍体高得多。同时，花培加倍后的纯合二倍体植株，可排除杂合体中显性因子掩盖隐性因子造成的干扰，提高选择的准确性和可靠性。由于花粉植株是由单倍体直接加倍形成的，故隐性性状得以纯合表现。而且花粉植株表现丰富的多样性，如株高、生育期、育性及抗性等。这些性状相互交叉，组成了具有多种形态特征的花培株系，因此，花培育种既可充分利用植物的种质资源，又可获得性状的多样性。

[0003] 花培育种的这些显著优点，引起了世界各国育种工作者的浓厚兴趣。我国于20世纪70年代开始了花药培养育种，迄今己取得了巨大的成就，并处于世界领先地位。花药培养育种已与常规杂交育种、远缘杂交育种、诱变育种以及转基因技术相结合，发展形成了一套育种技术体系。花培育种是生物技术在农作物育种中应用最广泛、最有成效的方法之一，在传统农业向高技术农业的转化中发挥着纽带作用，是一种快速有效的育种途径。

[0004] 籼稻，栽培稻的一个亚种，是最先由野生稻驯化形成的栽培稻。籼稻和粳稻是我国自古以来栽培稻的两大类型，籼、粳稻在特征特性上存在明显的差别。籼稻的许多性状比粳稻更近似于普通野生稻，因而认为籼稻是基本型，而粳稻是变异型。籼稻是适宜于低纬度、低海拔湿热地区种植的栽培稻亚种，主要分布在中国和南亚、东南亚各国以及热带非洲，中国主要分布在淮河、秦岭以南地区和云贵高原的低海拔地区。

[0005] 籼、粳稻在生理生化性质上存在许多明显的差别，在花培培养力而言，粳稻培养效率较高，而籼稻培养力极低。与粳稻相比，籼稻的平均出愈率平均培养力只有0.5%左右，很难超过3%，绿苗率大多在20%以下，有些材料不能诱导出愈伤组织或者难以得到花粉植株。目前通过花培选育的籼稻品种不多，至20世纪末通过花药培养选育的品种仅5个，其中江西省农业科学院选育4个品种，推广面积也不大。

[0006] 不同的研究者针对提高籼稻花培效率进行了研究，其中通过对培养基进行优化，可使不同材料的籼稻的花药培养力有不同程度的提高。包括培养基的改良、附加成分的增减、单倍体的加倍技术、培养条件的改善等等，其目的都在于提高愈伤组织的诱导率和绿苗的分化率。其中培养基是花药培养的物质基础，直接关系到培养物的生长与分化，培养基组分是影响花培效率的一个很重要的因素。

[0007] 通过多年籼稻花药培养的摸索和实践，我们进一步优化了基本培养基配方，并且不断尝试加入一些提高籼稻花药诱导力的有机添加物并组合其种类搭配及浓度，最终摸索出了一种高效率地诱导籼稻花药诱导培养的培养基配方。我们的研究结果对于进一步推广和应用水稻单倍体育种和理论研究无疑有较大的现实意义和实用价值。

发明内容

[0008] 本发明提供了一种籼稻花药诱导培养基配方，该培养基的配方如下：

[0009] KNO3 3150～3450mg/L，(NH4)2SO4 330～410mg/L，KH2PO4 460～560mg/L，CaCl2∙2H2O 220～270mg/L，MgSO4∙7H2O 210～260mg/L，氯化2-羟乙基三甲铵 225～275mg/L，Na2-EDTA 70～80mg/L，FeSO4∙7H2O 50～60mg/L，MnSO4∙4H2O 8.0～10.0mg/L，ZnSO4∙7H2O 1.8～
2.2mg/L，H3BO3 5.0～6.0mg/L，KI 0.9～1.1mg/L，肌醇 45～55mg/L，丙三醇 2.5～3.5mg/L，Na3C6H5O7∙H2O 0.4～0.5mg/L，叶酸 0.4～0.5mg/L，甘氨酸 1.8～2.2mg/L，赖氨酸 1.3～
1.5mg/L，脯氨酸0.4～0.6g/L，维生素B1 1.8～2.2mg/L，维生素B6 1.8～2.2mg/L，3-吡啶甲酸 1.8～2.2mg/L，蔗糖 42～48g/L，植物凝胶 5～6g/L；

[0010] 2，4-D 1.4～1.8mg/L，NAA 2.3～2.9mg/L，KT 0.9～1.1mg/L，水解蛋白 0.35～0.45g/L，牛磺酸 0.07～0.09mg/L，生物素 0.07～0.09mg/L，甲基亚硝基脲 1.8～2.2g/L，胰岛素 7.0～9.0mg/L，PH 5.8-6.0。

[0011] 本发明所述的培养基具有高效率地诱导籼稻花药愈伤组织，可以大幅度地提高籼稻花药培养效率。下面的实施例以及对比实验可以清楚地反映本发明所述培养基的特点。

具体实施方式

[0012] 实施例1

[0013] 配制如下配方的培养基：

[0014] KNO3 3300mg/L，(NH4)2SO4 370mg/L，KH2PO4 510mg/L，CaCl2∙2H2O 245mg/L，MgSO4∙7H2O 235mg/L，氯化2-羟乙基三甲铵 250mg/L，Na2-EDTA 75mg/L，FeSO4∙7H2O 55mg/L，MnSO4∙4H2O 9.0mg/L，ZnSO4∙7H2O 2.0mg/L，H3BO3 5.5mg/L，KI 1.0mg/L，肌醇 50mg/L，丙三醇 
3.0mg/L，Na3C6H5O7∙H2O 0.45mg/L，叶酸 0.45mg/L，甘氨酸 2.0mg/L，赖氨酸 1.4mg/L，脯氨酸0.5g/L，维生素B1 2.0mg/L，维生素B6 2.0mg/L，3-吡啶甲酸 2.0mg/L，蔗糖 45g/L，植物凝胶 5.5g/L；

[0015] 2，4-D 1.6mg/L，NAA 2.6mg/L，KT 1.0mg/L，水解蛋白 0.4g/L，牛磺酸 0.08mg/L，生物素 0.08mg/L，甲基亚硝基脲 2.0g/L，胰岛素 8.0mg/L，PH 5.9。

[0016] 选取籼稻品种鸡嘴川和地谷作为花药培养花药供体，采集单核晚期花药作为供试材料，表面消毒后，6℃下低温预处理3天。预处理后，外植体灭菌（0.1%升汞溶液，15 min），抖药法接种花药于该诱导培养基中诱导愈伤组织，每个三角瓶接种50枚花药，在温度为28℃、湿度为60%-70%的环境下暗培养。愈伤组织形成后（长到2 mm左右），计算愈伤组织诱导率。

[0017] 实施例2

[0018] 配制如下配方的培养基（氯化2-羟乙基三甲铵添加浓度的优选）：

[0019] KNO3 3300mg/L，(NH4)2SO4 370mg/L，KH2PO4 510mg/L，CaCl2∙2H2O 245mg/L，MgSO4∙7H2O 235mg/L，Na2-EDTA 75mg/L，FeSO4∙7H2O 55mg/L，MnSO4∙4H2O 9.0mg/L，ZnSO4∙7H2O 
2.0mg/L，H3BO3 5.5mg/L，KI 1.0mg/L，肌醇 50mg/L，丙三醇 3.0mg/L，Na3C6H5O7∙H2O 
0.45mg/L，叶酸 0.45mg/L，甘氨酸 2.0mg/L，赖氨酸 1.4mg/L，脯氨酸0.5g/L，维生素B1 
2.0mg/L，维生素B6 2.0mg/L，3-吡啶甲酸 2.0mg/L，蔗糖 45g/L，植物凝胶 5.5g/L；

[0020] 2，4-D 1.6mg/L，NAA 2.6mg/L，KT 1.0mg/L，水解蛋白 0.4g/L，牛磺酸 0.08mg/L，生物素 0.08mg/L，甲基亚硝基脲 2.0g/L，胰岛素 8.0mg/L，PH 5.9。

[0021] 氯化2-羟乙基三甲铵的添加浓度设置以下8种：0；50mg/L；100mg/L；150mg/L；200mg/L；300mg/L；350mg/L；400mg/L。

[0022] 同样选取该两个籼稻品种作为花药供体，操作方法、培养方法同实施例1，计算愈伤组织诱导率。

[0023] 实施例3

[0024] 配制如下配方的培养基（凝固剂的优选）：

[0025] KNO3 3300mg/L，(NH4)2SO4 370mg/L，KH2PO4 510mg/L，CaCl2∙2H2O 245mg/L，MgSO4∙7H2O 235mg/L，氯化2-羟乙基三甲铵 250mg/L，Na2-EDTA 75mg/L，FeSO4∙7H2O 55mg/L，MnSO4∙4H2O 9.0mg/L，ZnSO4∙7H2O 2.0mg/L，H3BO3 5.5mg/L，KI 1.0mg/L，肌醇 50mg/L，丙三醇 
3.0mg/L，Na3C6H5O7∙H2O 0.45mg/L，叶酸 0.45mg/L，甘氨酸 2.0mg/L，赖氨酸 1.4mg/L，脯氨酸0.5g/L，维生素B1 2.0mg/L，维生素B6 2.0mg/L，3-吡啶甲酸 2.0mg/L，蔗糖 45g/L；

[0026] 2，4-D 1.6mg/L，NAA 2.6mg/L，KT 1.0mg/L，水解蛋白 0.4g/L，牛磺酸 0.08mg/L，生物素 0.08mg/L，甲基亚硝基脲 2.0g/L，胰岛素 8.0mg/L，PH 5.9。

[0027] 凝固剂设置为以下2种：植物凝胶 2.75g/L，琼脂 3.5g；琼脂 7g。

[0028] 同样选取该两个籼稻品种作为花药供体，操作方法、培养方法同实施例1，计算愈伤组织诱导率。

[0029] 实施例4

[0030] 配制如下配方的培养基（脯氨酸添加浓度的优选的优选）：

[0031] KNO3 3300mg/L，(NH4)2SO4 370mg/L，KH2PO4 510mg/L，CaCl2∙2H2O 245mg/L，MgSO4∙7H2O 235mg/L，氯化2-羟乙基三甲铵 250mg/L，Na2-EDTA 75mg/L，FeSO4∙7H2O 55mg/L，MnSO4∙4H2O 9.0mg/L，ZnSO4∙7H2O 2.0mg/L，H3BO3 5.5mg/L，KI 1.0mg/L，肌醇 50mg/L，丙三醇 
3.0mg/L，Na3C6H5O7∙H2O 0.45mg/L，叶酸 0.45mg/L，甘氨酸 2.0mg/L，赖氨酸 1.4mg/L，维生素B1 2.0mg/L，维生素B6 2.0mg/L，3-吡啶甲酸 2.0mg/L，蔗糖 45g/L，植物凝胶 5.5g/L；

[0032] 2，4-D 1.6mg/L，NAA 2.6mg/L，KT 1.0mg/L，水解蛋白 0.4g/L，牛磺酸 0.08mg/L，生物素 0.08mg/L，甲基亚硝基脲 2.0g/L，胰岛素 8.0mg/L，PH 5.9。

[0033] 脯氨酸的添加浓度设置以下8种：0；0.1mg/L；0.2mg/L；0.3mg/L；0.4mg/L；0.6mg/L；0.7mg/L；0.8mg/L。

[0034] 同样选取该两个籼稻品种作为花药供体，操作方法、培养方法同实施例1，计算愈伤组织诱导率。

[0035] 实施例5

[0036] 配制如下配方的培养基（铁盐添加浓度的优选）：

[0037] KNO3 3300mg/L，(NH4)2SO4 370mg/L，KH2PO4 510mg/L，CaCl2∙2H2O 245mg/L，MgSO4∙7H2O 235mg/L，氯化2-羟乙基三甲铵 250mg/L，MnSO4∙4H2O 9.0mg/L，ZnSO4∙7H2O 2.0mg/L，H3BO3 5.5mg/L，KI 1.0mg/L，肌醇 50mg/L，丙三醇 3.0mg/L，Na3C6H5O7∙H2O 0.45mg/L，叶酸 
0.45mg/L，甘氨酸 2.0mg/L，赖氨酸 1.4mg/L，脯氨酸0.5g/L，维生素B1 2.0mg/L，维生素B6 
2.0mg/L，3-吡啶甲酸 2.0mg/L，蔗糖 45g/L，植物凝胶 5.5g/L；

[0038] 2，4-D 1.6mg/L，NAA 2.6mg/L，KT 1.0mg/L，水解蛋白 0.4g/L，牛磺酸 0.08mg/L，生物素 0.08mg/L，甲基亚硝基脲 2.0g/L，胰岛素 8.0mg/L，PH 5.9。

[0039] FeSO4∙7H2O的添加浓度设置为以下6种（Na2-EDTA的添加浓度同比增减）：15mg/L；25mg/L；35mg/L；45mg/L；65mg/L；75mg/L。

[0040] 同样选取该两个籼稻品种作为花药供体，操作方法、培养方法同实施例1，计算愈伤组织诱导率。

[0041] 实施例6

[0042] 配制如下配方的培养基（甲基亚硝基脲添加浓度的优选）：

[0043] KNO3 3300mg/L，(NH4)2SO4 370mg/L，KH2PO4 510mg/L，CaCl2∙2H2O 245mg/L，MgSO4∙7H2O 235mg/L，氯化2-羟乙基三甲铵 250mg/L，Na2-EDTA 75mg/L，FeSO4∙7H2O 55mg/L，MnSO4∙4H2O 9.0mg/L，ZnSO4∙7H2O 2.0mg/L，H3BO3 5.5mg/L，KI 1.0mg/L，肌醇 50mg/L，丙三醇 
3.0mg/L，Na3C6H5O7∙H2O 0.45mg/L，叶酸 0.45mg/L，甘氨酸 2.0mg/L，赖氨酸 1.4mg/L，脯氨酸0.5g/L，维生素B1 2.0mg/L，维生素B6 2.0mg/L，3-吡啶甲酸 2.0mg/L，蔗糖 45g/L，植物凝胶 5.5g/L；

[0044] 2，4-D 1.6mg/L，NAA 2.6mg/L，KT 1.0mg/L，水解蛋白 0.4g/L，牛磺酸 0.08mg/L，生物素 0.08mg/L，胰岛素 8.0mg/L，PH 5.9。

[0045] 甲基亚硝基脲的添加浓度设置为以下5种：0；1mg/L；3mg/L；4mg/L；5mg/L。

[0046] 同样选取该两个籼稻品种作为花药供体，操作方法、培养方法同实施例1，计算愈伤组织诱导率。

[0047] 实施例7

[0048] 配制如下配方的培养基（水解蛋白添加浓度的优选）：

[0049] KNO3 3300mg/L，(NH4)2SO4 370mg/L，KH2PO4 510mg/L，CaCl2∙2H2O 245mg/L，MgSO4∙7H2O 235mg/L，氯化2-羟乙基三甲铵 250mg/L，Na2-EDTA 75mg/L，FeSO4∙7H2O 55mg/L，MnSO4∙4H2O 9.0mg/L，ZnSO4∙7H2O 2.0mg/L，H3BO3 5.5mg/L，KI 1.0mg/L，肌醇 50mg/L，丙三醇 
3.0mg/L，Na3C6H5O7∙H2O 0.45mg/L，叶酸 0.45mg/L，甘氨酸 2.0mg/L，赖氨酸 1.4mg/L，脯氨酸0.5g/L，维生素B1 2.0mg/L，维生素B6 2.0mg/L，3-吡啶甲酸 2.0mg/L，蔗糖 45g/L，植物凝胶 5.5g/L；

[0050] 2，4-D 1.6mg/L，NAA 2.6mg/L，KT 1.0mg/L，牛磺酸 0.08mg/L，生物素 0.08mg/L，甲基亚硝基脲 2.0g/L，胰岛素 8.0mg/L，PH 5.9。

[0051] 水解蛋白添加浓度设置以下6种：0；0.1 g/L；0.2g/L；0.3g/L；0.5g/L；0.6g/L。

[0052] 同样选取该两个籼稻品种作为花药供体，操作方法、培养方法同实施例1，计算愈伤组织诱导率。

[0053] 实施例8

[0054] 配制如下配方的培养基（胰岛素添加浓度的优选）：

[0055] KNO3 3300mg/L，(NH4)2SO4 370mg/L，KH2PO4 510mg/L，CaCl2∙2H2O 245mg/L，MgSO4∙7H2O 235mg/L，氯化2-羟乙基三甲铵 250mg/L，Na2-EDTA 75mg/L，FeSO4∙7H2O 55mg/L，MnSO4∙4H2O 9.0mg/L，ZnSO4∙7H2O 2.0mg/L，H3BO3 5.5mg/L，KI 1.0mg/L，肌醇 50mg/L，丙三醇 
3.0mg/L，Na3C6H5O7∙H2O 0.45mg/L，叶酸 0.45mg/L，甘氨酸 2.0mg/L，赖氨酸 1.4mg/L，脯氨酸0.5g/L，维生素B1 2.0mg/L，维生素B6 2.0mg/L，3-吡啶甲酸 2.0mg/L，蔗糖 45g/L，植物凝胶 5.5g/L；

[0056] 2，4-D 1.6mg/L，NAA 2.6mg/L，KT 1.0mg/L，水解蛋白 0.4g/L，牛磺酸 0.08mg/L，生物素 0.08mg/L，甲基亚硝基脲 2.0g/L，PH 5.9。

[0057] 胰岛素添加浓度设置以下6种：0；2 g/L；4g/L；6g/L；10g/L；12g/L。

[0058] 同样选取该两个籼稻品种作为花药供体，操作方法、培养方法同实施例1，计算愈伤组织诱导率。

[0059] 培养基对比实验

[0060] 将实施例2-8分别与实施例1进行对比 ，对比的结果如下表所示：

[0061]

[0062]

[0063]

[0064]

[0065]

[0066]

[0067] 从表1-7可以看出，使用本发明所提供的培养基比使用其它任何对比培养基诱导籼稻花药愈伤组织的效率更高，表明本发明提供的培养基配方是经过大量单因子、多因子试验所筛选的最优组合，多年来我们亦围绕本发明的组合配比做了小范围单因子改变优化组合试验，大量的实验研究亦得出本发明的组分配比是最优的。使用本发明所提供的培养基对籼稻品种鸡嘴川、地谷的愈伤组织诱导率提高到了5.6%和4.3%，充分说明了本发明提供的培养基是一种显著改良的籼稻花药诱导培养基。

[0068] 实施例9

[0069] 为了比较本发明所提供的培养基与前人采用的培养基诱导籼稻花药愈伤效果的差异，我们从相关文献查找了6个籼稻花药愈伤诱导培养基配方，配制成花药愈伤诱导培养基，同样选取籼稻品种鸡嘴川和地谷作为花药供体诱导花药愈伤，操作方法、培养方法同实施例1，计算愈伤组织诱导率。

[0070] 其它6个诱导培养基为：

[0071] N6培养基：N6基本培养基+50g/L蔗糖+6.5g/L琼脂+1mg/L KT+2mg/L 2，4-D+3mg/L NAA+600g/L脯氨酸，pH为5.9（对比文件来自于向发云等《花药培养在籼稻恢复系提纯与改良中的应用》）；

[0072] 改良N6培养基：N6大量元素+M5微量元素+VB1 5mg/L+水解乳蛋白500mg/L+2，4-D 2mg/L+6-BA l mg/L+琼脂0.7%，pH为5.9（对比文件来自于赵成章等《化学杀雄对籼稻花药培养力的影响》）；

[0073] MSN培养基：KNO3 2830mg/L，(NH4)2SO4 463mg/L，KH2PO4 170mg/L，MgSO4∙7H2O 185mg/L，CaCl2∙2H2O 440mg/L，MnSO4∙4H2O 4.4mg/L，ZnSO4∙7H2O 1.5mg/L，H3BO3 6.2mg/L，KI 0.8mg/L，CuSO4∙H2O 0.025mg/L，Na2MoO4∙2H2O 0.25mg/L，Na2EDTA 37.25mg/L，FeSO4∙
7H2O 27.85 mg/L，甘氨酸 2.0mg/L，HCl合维B1 2.5mg/L，HCl合维B6 2.5mg/L，吡啶-3-甲酸 2.5mg/L，2，4-D 0.75mg/L，NAA 2.5mg/L，激动素0.75mg/L，酪脘水解物 500mg/L，蔗糖 
40g/L，琼脂8g/L，还己六醇 100mg/L，pH为5.9（对比文件来自于S∙K RINA等《通过培养基的改良提高籼稻的花药培养效率》）；

[0074] SK-1培养基：KNO3 3150mg/L，KH2PO4 540mg/L，MgSO4∙7H2O 185mg/L，CaCl2∙2H2O 150mg/L，MnSO4∙4H2O 22.3mg/L，ZnSO4∙7H2O 1.5mg/L，H3BO3 6.0mg/L，KI 1.0mg/L，CuSO4∙H2O 0.025mg/L，Na2MoO4∙2H2O 0.25mg/L，Na2EDTA 37.25mg/L，FeSO4∙7H2O 27.85 mg/L，甘氨酸 2.0mg/L，HCl合维B1 2.5mg/L，HCl合维B6 2.5mg/L，吡啶-3-甲酸 2.5mg/L，2，4-D 
0.75mg/L，NAA 2.5mg/L，激动素0.75mg/L，酪脘水解物 500mg/L，蔗糖 40g/L，琼脂8g/L，还己六醇 100mg/L，pH为5.9（对比文件来自于S∙K RINA等《通过培养基的改良提高籼稻的花药培养效率》）；

[0075] RZ培养基：KNO3 3270mg/L，(NH4)2SO4 290mg/L，KH2PO4 540mg/L，MgSO4∙7H2O 370mg/L，CaCl2∙2H2O 440mg/L，MnSO4∙4H2O 22.3mg/L，ZnSO4∙7H2O 866mg/L，H3BO3 6.2mg/L，KI 0.83mg/L，CuSO4∙H2O 0.025mg/L，Na2MoO4∙2H2O 0.25mg/L，Na2EDTA 37.25mg/L，FeSO4∙
7H2O 27.85 mg/L，甘氨酸 2.0mg/L，HCl合维B1 2.5mg/L，HCl合维B6 2.5mg/L，吡啶-3-甲酸 2.5mg/L，2，4-D 0.5mg/L，NAA 2.5mg/L，激动素0.75mg/L，蔗糖 40g/L，琼脂8g/L，还己六醇 100mg/L，pH为5.9（对比文件来自于S∙K RINA等《通过培养基的改良提高籼稻的花药培养效率》）；

[0076] SH培养基：SH基本培养基+50g/L蔗糖+6.5g/L琼脂+1mg/L KT+2mg/L 2，4-D+2mg/L NAA+0.5mg/L BA，pH为5.9（对比文件来自于黄慧君等《影响籼稻花药培养效果的综合因素研究》）。

[0077] 培养基对比实验