香豆雌酚开环类似物及其医药用途

摘要

本发明涉及药物化学领域，具体涉及具有通式I和通式II结构的香豆雌酚开环类似物及其医药用途，特别是用于制备作为血管生成抑制和血管阻断剂的药物的用途。

权利要求

1.一种化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物的结构如通式I或通式II所示：其中R代表二甲氨基、二乙氨基、吡咯烷基、吗啉基、哌啶基。

2.权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述化合物为通式I化合物，其中R代表哌啶基。

3.权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述化合物为通式II化合物，其中R代表哌啶基、吡咯烷基。

4.权利要求3所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R代表吡咯烷基。

5.一种药物组合物，其中含有权利要求1至4中任一项的化合物及药学上可接受的载体。

6.权利要求1至4中任一项的化合物用于制备作为血管生成抑制剂或血管阻断剂的药物的用途。

说明书

香豆雌酚开环类似物及其医药用途

技术领域

[0001] 本发明涉及药物化学领域，具体涉及香豆雌酚的开环类似物及其医药用途，特别是用于制备作为血管生成抑制和血管阻断剂的药物的用途。

背景技术

[0002] 肿瘤是以异常细胞失控增生和扩散为特征的疾病。美国癌症学会2014年的《全球癌症事实和数据》报告显示：2012年全世界共新增1400万癌症病例并有820万人死亡，其中，中国新增307万癌症患者并造成约220万人死亡，分别占全球总量的21.9％和26.8％。报告预测全球癌症病例将呈现迅猛增长态势，由2012年的1400万人，逐年递增至2025年的1900万人，到2035年将达到2400万人。癌症已经成为严重危害人类健康和生命的重大疾病，迄今仍没有非常满意的治疗方法，因此开发低毒高效的抗肿瘤药物迫在眉睫。恶性肿瘤的生长、发展、转移有赖于肿瘤血管网络，因为肿瘤区域的新生毛细血管是肿瘤赖以生长和生存的物质基础，肿瘤血管网不仅为肿瘤的继续生长提供营养和氧气，还能为肿瘤的侵袭和转移提供路径。所以阻断肿瘤组织的血管系统就能达到抑制肿瘤的生长和转移的目的，这为肿瘤的治疗提供了一种新的思路。肿瘤血管抑制剂以肿瘤血管为靶点，通过抑制肿瘤的血管生成或者通过快速选择性地破坏肿瘤已存血管，从而切断肿瘤的营养来源和阻断肿瘤血供，使得肿瘤“饿死”和“坏死”。

[0003] 靶向肿瘤血管药物治疗目前主要有两种策略，一是干扰新血管发生及形成过程的血管生成抑制剂(Angiogenesis inhibitors，Antiangiogenic agents，AIs)；二是选择性直接破坏肿瘤血管系统的血管阻断剂(又称血管破坏剂，血管分裂剂等，Vascular disruptingAgents，VDAs)。前一种策略是基于对新血管生成机制的了解，通过抑制肿瘤血管生成过程的关键因子、酶和受体，影响血管生成信号传导通路，实现抑制血管生成，达到治疗肿瘤的目的。后一种策略则是利用肿瘤血管和正常组织血管内皮的差异性实现快速和选择性地损害或者堵塞已形成的肿瘤血管，引起肿瘤血管损伤，破坏实体瘤血管内皮，阻塞毛血管萌芽，导致肿瘤坏死。

[0004] 自上世纪90年代以来，多种天然产物被发现在低剂量或者无毒性浓度下，具有较好的抑制肿瘤血管生成和引起现存肿瘤血管坏死的作用，如：紫杉醇(taxane)、长春新碱(vinca)、秋水仙碱(colchicine)和考布他丁类(combretastatins)等。

[0005] 本课题组在前期研究中将活性的天然产物香豆雌酚的内酯环和呋喃环分别开环，并在此基础上对其进行结构改造，获得了全新的具有良好抗血管生成活性的类似物，为开发新型抗肿瘤血管药物提供了基础。

[0006]

发明内容

[0007] 本发明公开了结构为通式I和通式II的香豆雌酚开环类似物或其药学上可接受的盐。经药理实验证明该类化合物具有良好的抗人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖活性，可用于制备作为血管生成抑制或血管阻断剂的药物的用途。

[0008]

[0009] 其中R代表二甲氨基、二乙氨基、四氢吡咯基、吗啉基、哌啶基；

[0010] 其中R更优选哌啶基。

[0011]

[0012] 其中R’代表二甲氨基、二乙氨基、四氢吡咯基、吗啉基、哌啶基；

[0013] 其中R’更优选哌啶基、吡咯烷基。

[0014] 本发明化合物的结构及编号如下：

[0015]

[0016]

[0017]

[0018]

[0019]

[0020] 药理实验及实施例中化合物的代号等同于以上代号所对应的化合物结构。

[0021] 下面是本发明化合物的部分药理学试验及结果：

[0022] MTT法测试HUVEC细胞增殖试验

[0023] 测试方法：HUVEC以含10％胎牛血清的1640培养液培养，取对数生长期细胞用于实验。调整细胞密度为2×104个/mL，接种于96孔板，培养24小时后，加入100μl/孔的含药培养基，各个浓度4个复孔，以相同体积的培养基代替测试药物作为对照组，空白组为200μl培养基，混匀后继续培养48小时后，加入20μl/孔MTT(浓度为5mg/ml)。继续培养4h后，弃上清液，每孔加入DMSO 150μl/孔，酶标检测仪于570nm波长处测定每孔吸光度(A)值，按公式计算细胞增殖抑制率：抑制率＝(对照组A值-实验组A值)/(对照组A值-空白组A值)×100％。

[0024]

[0025] 实验结果说明本发明的化合物均具有一定的抗HUVEC增殖活性，特别是化合物4，化合物6和化合物9具有作为制备血管生成抑制和血管阻断剂的药物用途的潜力。

[0026] 具体实施方式(所述实施例只是用来说明本发明，而不是用来限定本发明)[0027] 实施例1

[0028] 1-(2，4-二羟基苯基)-2-(4-甲氧基苯基)乙酮(11)的合成

[0029] 用新蒸的三氟化硼乙醚溶液50ml溶解间苯二酚3.60g(32.5mmol)，再加入对甲氧基苯乙酸5.00g(30.0mmol)。混合物在100℃反应，以TLC决定终点，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤萃取三次，有机相加入无水硫酸钠干燥过夜。减压浓缩除去溶剂，粗品用无水乙醇重结晶，得到类白色粉末5.95g，产率77％，mp150-152℃，EI-MS m/z：259[M+H]+。

[0030] 实施例2

[0031] 4，7-二羟基-3-(4-甲氧基苯基)-香豆素(12)的合成

[0032] 将4.4g化合物11(17.05mmol)与8.2gNaH(341mmol)加入120ml碳酸二乙酯中，氮气保护下80℃反应，以TLC决定终点。将100ml水加入反应液中，分液，有机相弃去，水相用乙酸乙酯萃取三次，用1mol/L的盐酸将水相pH调至3-4，大量白色固体析出，抽滤得粗品，经柱层析纯化后得3.8g白色粉末，产率80％，ESI-MS m/z：283[M-H]-。

[0033] 实施例3

[0034] N-氯乙基吡咯烷盐酸盐的合成

[0035] 将4.6ml吡咯烷(57.5mmol)与4.6ml 2-氯乙醇(69.0mmol)加入到40ml甲苯中，加热回流2小时，反应液冷却至室温，冰浴下滴加氯化亚砜8.4ml(114mmol)，20min滴完，撤去冰浴，室温搅拌6小时，减压蒸去甲苯和氯化亚砜，残余固体用乙醇重结晶，得氯乙基吡咯烷盐酸盐8.3g。

[0036] 实施例4

[0037] N-氯乙基二甲胺盐酸盐的合成

[0038] 将2.0ml二甲氨基乙醇(19.9mmol)加入到20ml甲苯中，冰浴下滴加氯化亚砜4.3ml(59.7mmol)，10min滴完，撤去冰浴，室温搅拌4小时，减压蒸去甲苯和氯化亚砜，得氯乙基二甲胺盐酸盐2.8g。

[0039] 实施例5

[0040] N-氯乙基吗啉盐酸盐的合成

[0041] 将5.0ml吗啉(57.5mmol)与4.6ml 2-氯乙醇(69.0mmol)加入到40ml甲苯中，加热回流2小时，反应液冷却至室温，冰浴下滴加氯化亚砜8.4ml(114mmol)，20min滴完，撤去冰浴，室温搅拌6小时，减压蒸去甲苯和氯化亚砜，残余固体用乙醇重结晶，得氯乙基吗啉盐酸盐7.9g。

[0042] 实施例6

[0043] N-氯乙基哌啶盐酸盐的合成

[0044] 将7.3ml吡咯烷(0.1mol)与8.1ml 2-氯乙醇(1.2mol)加入到30ml甲苯中，加热回流2小时，反应液冷却至室温，冰浴下滴加氯化亚砜20.0ml(0.27mol)，30min滴完，撤去冰浴，室温搅拌8小时，减压蒸去甲苯和氯化亚砜，残余固体用乙醇重结晶，得氯乙基哌啶盐酸盐15.5g。

[0045] 实施例7

[0046] N-氯乙基二乙胺盐酸盐的合成

[0047] 将2.0ml二乙胺(28.8mmol)与2.3ml 2-氯乙醇(34.5mmol)加入到30ml甲苯中，加热回流2小时，反应液冷却至室温，冰浴下滴加氯化亚砜6.0ml(81.4mmol)，10min滴完，撤去冰浴，室温搅拌4小时，减压蒸去甲苯和氯化亚砜，残余固体用乙醇重结晶，得氯乙基二乙胺盐酸盐3.3g。

[0048] 实施例8

[0049] 4-羟基-3-(4-甲氧基苯基)-7-[2-(四氢吡咯-1-基)乙氧基]-香豆素(1)的合成[0050] 将0.2g化合物12(0.70mmol)、0.36g N-氯乙基吡咯烷盐酸盐(2.1mmol)和1.34g十二水合磷酸三钠(7.04mmol)悬浮于4ml四氢呋喃中，60℃反应，以TLC决定终点，减压蒸去四氢呋喃，残留固体溶于10ml水中，用1mol/L的盐酸调pH至6-7，乙酸乙酯萃取三次，合并有机相，加入无水硫酸钠静置干燥2小时，减压蒸干得粗品，经柱层析后得淡黄色固体77mg，1HNMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：1.58(4H，m，3，4-pyrrolidyl-H)，2.31(4H，m，2，5-pyrrolidyl-H)，2.58(2H，t，-OCH2CH2N-)，3.66(2H，t，-OCH2CH2N-)，3.78(3H，s，-OCH3)，
6.73-7.76(7H，m，Ar-H)；ESI-MS m/z：382[M+H]+。

[0051] 实施例9

[0052] 4-羟基-3-(4-甲氧基苯基)-7-(2-二甲氨基乙氧基)-香豆素(2)的合成

[0053] 具体操作同实施例8，投入0.2g化合物12和0.31gN-氯乙基二甲胺盐酸盐，得淡黄色固体56mg，1HNMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：2.50(6H，s，N-CH3×2)，2.81(2H，t，-OCH2CH2N-)，3.86(3H，s，-OCH3)，4.16(2H，t，-OCH2CH2N-)，7.06-7.92(7H，m，Ar-H)；ESI-MS m/z：356[M+H]+。

[0054] 实施例10

[0055] 4-羟基-3-(4-甲氧基苯基)-7-[2-(吗啉-4-基)乙氧基]-香豆素(3)的合成

[0056] 具体操作同实施例8，投入0.2g化合物12和0.4g N-氯乙基吗啉盐酸盐，得深红色固体50mg，1HNMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：2.20(2H，t，NCH2CH2O×2)，2.44(2H，t，-OCH2CH2N-)，3.38(4H，m，NCH2CH2O×2)，3.67(2H，t，-OCH2CH2N-)，3.79(3H，s，-OCH3)，6.74-7.80(7H，m，Ar-H)；ESI-MS m/z：398[M+H]+。

[0057] 实施例11

[0058] 4-羟基-3-(4-甲氧基苯基)-7-[2-(哌啶-1-基)乙氧基]-香豆素(4)的合成

[0059] 具体操作同实施例8，投入0.2g化合物12和0.4g N-氯乙基哌啶盐酸盐，得红色固体92mg，1HNMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：1.45(2H，m，4-piperidyl-H)，2.13(4H，m，3，5-piperidyl-H)，2.40(4H，m，2，6-piperidyl-H)，2.67(2H，t，-OCH2CH2N-)，3.68(2H，t，-OCH2CH2N-)，3.80(3H，s，-OCH3)，6.96-7.87(7H，m，Ar-H)；ESI-MS m/z：396[M+H]+。

[0060] 实施例12

[0061] 4-羟基-3-(4-甲氧基苯基)-7-(2-二乙氨基乙氧基)-香豆素(5)的合成

[0062] 具体操作同实施例8，投入0.2g化合物12和0.4g N-氯乙基二乙胺盐酸盐，得淡黄色固体90mg，1HNMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：0.88(6H，t，N-CH2CH3×2)，1.65(4H，q，N-CH2CH3×2)，1.90(2H，t，-OCH2CH2N-)，3.71(3H，s，-OCH3)，3.79(2H，t，-OCH2CH2N-)，6.42-7.77(7H，m，Ar-H)；ESI-MS m/z：384[M+H]+。

[0063] 实施例13

[0064] 9-甲氧基香豆雌酚(13)的合成

[0065] 将1.5g化合物12(5.32mmol)溶于24ml 1，2-二氯乙烷中，加入2.6g三氯化铁(15.96mmol)，氮气保护下70℃反应6小时，TLC检测反应，反应结束后加入1mol/L的HCl10ml，过滤，滤饼用水洗，然后用少量乙酸乙酯洗，干燥后得1.3g 9-甲氧基香豆雌酚。

[0066] 实施例14

[0067] 2-[2-羟基-4-(四氢吡咯-1-基)乙氧基苯基]-6-甲氧基苯并呋喃-3-甲酸(6)的合成

[0068] 将0.2g化合物13(0.71mmol)、0.36g N-氯乙基吡咯烷盐酸盐(2.1mmol)悬浮于6ml四氢呋喃中，加入5mol/L的NaOH溶液1.36ml，60℃反应，以TLC决定终点，减压蒸去四氢呋喃，残留固体溶于2ml水中，用1mol/L的盐酸调pH至无固体析出，过滤收集滤饼，干燥后得淡黄色固体43mg，1HNMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：1.68(4H，m，3，4-pyrrolidyl-H)，2.51(4H，m，2，5-pyrrolidyl-H)，2.78(2H，t，-OCH2CH2N-)，3.78(3H，s，-OCH3)，4.05(2H，t，-OCH2CH2N-)，
6.35-7.42(6H，m，Ar-H)，8.48(1H，s，-OH)，15.73(1H，s，-COOH)；ESI-MS m/z：396[M-H]-。

[0069] 实施例15

[0070] 2-(2-羟基-4-二甲氨基乙氧基苯基)-6-甲氧基苯并呋喃-3-甲酸(7)的合成[0071] 具体操作同实施例14，投入0.2g化合物13和0.31g N-氯乙基二甲胺盐酸盐，得淡黄色固体76mg，1HNMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：2.47(6H，s，N-CH3×2)，2.94(2H，t，-OCH2CH2N-)，3.38(3H，s，-OCH3)，3.69(2H，t，-OCH2CH2N-)，6.54-7.88(6H，m，Ar-H)；ESI-MS -m/z：370[M-H]。

[0072] 实施例16

[0073] 2-[2-羟基-4-(吗啉-4-基)乙氧基苯基]-6-甲氧基苯并呋喃-3-甲酸(8)的合成[0074] 具体操作同实施例14，投入0.2g化合物13和0.4g N-氯乙基吗啉盐酸盐，得淡红色1
固体35mg，HNMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：2.49(2H，t，NCH2CH2O×2)，2.81(2H，t，-OCH2CH2N-)，3.47(4H，m，NCH2CH2O×2)，3.63(3H，s，-OCH3)，4.07(2H，t，-OCH2CH2N-)，6.35-
7.79(6H，m，Ar-H)，9.96(1H，s，-OH；ESI-MS m/z：412[M-H]-。

[0075] 实施例17

[0076] 2-[2-羟基-4-(哌啶-1-基)乙氧基苯基]-6-甲氧基苯并呋喃-3-甲酸(9)的合成[0077] 具体操作同实施例14，投入0.2g化合物13和0.4g N-氯乙基哌啶盐酸盐，得深红色固体83mg，1HNMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：1.61(2H，m，4-piperidyl-H)，2.03(4H，m，3，5-piperidyl-H)，2.50(4H，m，2，6-piperidyl-H)，2.83(2H，t，-OCH2CH2N-)，3.72(2H，t，-OCH2CH2N-)，3.80(3H，s，-OCH3)，6.33-7.88(6H，m，Ar-H)，9.70(1H，s，-OH)；ESI-MS m/z：410[M-H]-。

[0078] 实施例18

[0079] 2-(2-羟基-4-二乙氨基乙氧基苯基)-6-甲氧基苯并呋喃-3-甲酸(10)的合成[0080] 具体操作同实施例14，投入0.2g化合物13和0.4g N-氯乙基二乙胺盐酸盐，得红色固体83mg，1HNMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：0.98(6H，t，N-CH2CH3×2)，1.65(4H，q，N-CH2CH3×2)，1.98(2H，t，-OCH2CH2N-)，3.69(3H，s，-OCH3)，3.97(2H，t，-OCH2CH2N-)，6.42-7.77(6H，m，Ar-H)；ESI-MS m/z：398[M-H]-。