人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置转让专利

申请号 : CN201510175741.8

文献号 : CN104726333B

文献日 :

基本信息:

PDF:

法律信息:

相似专利:

发明人 : 郝利国刘丽杰郭宏崔红升孟鑫

申请人 : 齐齐哈尔医学院

摘要 :

人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置,属于医学影像学技术领域,由口(1)、斜嘴(2)、口颈(3)、体(4)、搅拌吸取器(5)、控液流阀(6)、体腔(7)、培养板(8)、蒸汽发生器(21)构成,其特征在于:所述的培养板(8)长度为6‑18厘米,宽度为6‑18厘米,高度为0.5‑2厘米;凹面培养皿(10)玻璃质,上半部分圆筒形,下半部分为表面皿形的培养皿凹底(33),底部中央有皿底孔(15)。培养板(8)上部为培养板槽壁(32)围成的培养板槽腔(31),内盛有水;培养板(8)下部为皿底蒸汽加热层(12)。该方法所用装置制作简单,可操作性强,成本低廉,效果明显。

权利要求 :

1.人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置,由口(1)、斜嘴(2)、口颈(3)、体(4)、搅拌吸取器(5)、控液流阀(6)、体腔(7)、培养板(8)、侧液管(9)、凹面培养皿(10)、终液管(11)、皿底蒸汽加热层(12)、皿底蒸汽散热孔(13)、辐液管(14)、皿底孔(15)、液流阀(16)、主液管(17)、进皿底蒸汽管(18)、下板导汽管(19)、上板导汽管(20)、蒸汽发生器(21)、加热产汽舱(22)、控制板(23)、电源线(24)、电源线插头(25)、水箱(26)、水管(27)、间隔板(28)、水箱注水口(29)、培养皿腔(30)、培养板槽腔(31)、培养板槽壁(32)、培养皿凹底(33)、培养皿壁(34)、体顶壁(35)、控液流阀头旋槽(36)、槽顶隔离膜(37)、控液流阀头(38)、控液流阀杆(39)、控液流阀固爪(40)、吸取管顶封(41)、可动旋管(42)、转板把手(43)、圆形转板(44)、管板固定凸(45)、旋管轴承(46)、吸取管腔(47)、吸取管壁(48)、传力齿轮(49)、搅动片支架(50)、搅动片(51)、吸取管口(52)、针头(53)、针管腔(54)、针管壁(55)、针管壁刻度(56)、针管壁挡(57)、推液管(58)、推液管头(59)、针管凸(60)、细胞入管(61)、细胞吸取管(62)、注射器(63)构成,其特征在于:所述的培养板(8)长度为6-18厘米,宽度为6-18厘米,高度为0.5-2厘米,包括凹面培养皿(10)、培养板槽腔(31)、培养板槽壁(32)、皿底蒸汽加热层(12)、主液管(17)、液流阀(16)、辐液管(14)、侧液管(9)、终液管(11);凹面培养皿(10)玻璃质,上半部分圆筒形,由厚度为1-3毫米的培养皿壁(34)围成,直径为1-4厘米,高度为1-3厘米,所围成的空间为培养皿腔(30);下半部分为表面皿形的培养皿凹底(33),培养皿凹底(33)底部中央到底面的最大高度为0.5-0.75厘米,底部中央的孔为皿底孔(15),孔的直径为3-10毫米,位于间隔板(28)上的皿底孔(15)与主液管(17)相通;

位于体(4)底壁上的皿底孔(15)则被封住;培养板(8)上部为培养板槽壁(32)围成的培养板槽腔(31),槽壁玻璃质,厚度为1-3毫米,高度为0.3-1.5厘米;培养板槽腔(31),内盛有水;

培养板(8)下部为皿底蒸汽加热层(12),两部分之间被设有皿底蒸汽散热孔(13)的培养板槽腔(31)底隔开;皿底蒸汽散热孔(13)多个,分布于凹面培养皿(10)之间;主液管(17)、液流阀(16)、辐液管(14)、侧液管(9)和终液管(11)均是玻璃质管道结构,管径均为2-3毫米;

所述的口(1)在人胰腺癌组织块放入后,用市售的无菌滤膜封住,圆形,直径为2-5厘米;所述的斜嘴(2)两端开口大小形状相同,外端的开口为口(1),内端的开口也是口颈(3)的外口,内外口底缘中央的连线与水平面呈10-30°的夹角,壁厚1-3毫米;所述的口颈(3)后端从体(4)前端发出,上缘与体(4)上表面平齐,中央到斜嘴(2)的长度为1.5-3厘米;下缘与间隔板(28)平齐,中央到斜嘴(2)的长度为2-4厘米;玻璃质,壁厚1-3毫米;所述的体(4)长方体形,长度为15-50厘米,宽度为8-24厘米,高度为6-18厘米,玻璃质,壁厚1-3毫米;所述的体顶壁(35)是体(4)的顶面,上面分布着2个搅拌吸取器 (5)和1个控液流阀(6);体(4)内的空间为体腔(7),所述的体腔(7)前半部分被间隔板(28)分成上下两部分,间隔板(28)玻璃质,厚度为1-3毫米,其上对应每个皿底孔(15)处各有1个孔,孔的直径为3-10毫米;所述的间隔板(28)前缘和1侧缘均连接在体(4)侧壁上,上面设置有1个培养板(8),下方设置有1个水箱(26)和1个蒸汽发生器(21);所述的水箱(26)的长度为4-12厘米,宽度为3-9厘米,高度为2-

7厘米,与间隔板(28)之间的空间供主液管(17)穿行;水箱(26)一侧有一个直径为2-5毫米的圆形的水箱注水口(29);水箱(26)另一侧有1个直径为2-5毫米的水管(27),水管(27)在水箱(26)内的开口位于水箱(26)底部;所述的蒸汽发生器(21)圆筒状,直径为2-3厘米,高度为2-6厘米,包括进皿底蒸汽管(18)、下板导汽管(19)、上板导汽管(20)、蒸汽发生器(21)、加热产汽舱(22)、控制板(23)、电源线(24)、电源线插头(25)和水管(27);电源线(24)和电源线插头(25)是公知的可以将外界电源引入蒸汽发生器(21)的部件,电源线(24)为双股包皮铜丝线,电源线插头(25)为两相或三相插头;电源线(24)连接着控制板(23);加热产汽舱(22)是圆筒状的结构,直径为0.5-1厘米,高度为1-2厘米,上端与下板导汽管(19)和上板导汽管(20)相通,下部侧壁有1个直径为2-5毫米的孔;加热产汽舱(22)加热用的电阻丝位于其上部;上板导汽管(20)和下板导汽管(19)玻璃质或铜质,直径为1-3毫米,壁厚0.3-

0.5毫米;进皿底蒸汽管(18)是上板导汽管(20)和下板导汽管(19)在皿底蒸汽加热层(12)中的延续,长度为0.5-2厘米;所述的搅拌吸取器(5)包括吸取管顶封(41)、可动旋管(42)、转板把手(43)、圆形转板(44)、管板固定凸(45)、旋管轴承(46)、吸取管腔(47)、吸取管壁(48)、传力齿轮(49)、搅动片支架(50)、搅动片(51)、吸取管口(52);吸取管顶封(41)硅胶质,具弹性;可动旋管(42)不锈钢质,长度为4-12厘米,直径为5-10毫米,壁厚1-3毫米;转板把手(43)是圆形转板(44)边缘向外伸出的圆杆,直径为0.5-1.5厘米,长度为3-5厘米,不锈钢质,与圆形转板(44)通过公知的旋丝连接或直接焊接在一起;圆形转板(44)是直径为2-5厘米、厚度为1-5毫米的圆形不锈钢板,中央有一个内表面具有管板固定凸(45)的孔,通过该孔内凹凸啮合的管板固定凸(45),能够将圆形转板(44)与可动旋管(42)紧密连接在一起;吸取管的内腔是吸取管腔(47),由不锈钢质的吸取管壁(48)围成,下端开口为吸取管口(52);传力齿轮(49)是斜面为45°的齿轮;搅动片支架(50)是可动旋管(42)最末端垂直方向上长方体形的横杆,嵌入扇形橡胶质搅动片(51)基部;搅动片(51)橡胶质,扇形,最宽0.5-1厘米,基部最后为0.5-0.75厘米,长度为0.5-2厘米;所述的控液流阀(6)包括控液流阀头旋槽(36)、槽顶隔离膜(37)、控液流阀头(38)、控液流阀杆(39)、控液流阀固爪(40);控液流阀头旋槽(36)是圆柱形凹槽,圆柱形,直径为1-3厘米,深度为3-5毫米;槽顶隔离膜(37)是控液流阀头旋槽(36) 封口的弹性硅胶质薄膜,厚度为0.1-1毫米;控液流阀头(38)是不锈钢质的长方体形长杆,长度为0.8-2.8厘米,高度和宽度均为2-5毫米,中央焊接有圆杆状的控液流阀杆(39);控液流阀杆(39)圆杆形,长度为4-8厘米,直径为2-5毫米;控液流阀杆(39)下端焊接在控液流阀固爪(40);控液流阀固爪(40)长方体形,下表面向内具有长方体形缺刻。

2.根据权利要求1所述的人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置,其特征在于:所述的注射器(63)由针头(53)、针管腔(54)、针管壁(55)、针管壁刻度(56)、针管壁挡(57)、推液管(58)、推液管头(59)、针管凸(60)、细胞入管(61)、细胞吸取管(62)组成;

针头(53)、针管腔(54)、针管壁(55)、针管壁刻度(56)、针管壁挡(57)、推液管(58)、推液管头(59)和针管凸(60)的结构同公知市售的注射器,细胞入管(61)圆筒状,壁厚1-2毫米,管内腔直径1-3毫米,长度5-8毫米,玻璃质,末端稍膨大,壁厚增加0.1-0.5毫米。

说明书 :

人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置

技术领域

[0001] 本发明涉及人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置,属于医学影像学技术领域。

背景技术

[0002] 胰腺癌是一种极为凶险、高度恶性的消化道肿瘤,近年来其发病年龄呈现明显年轻化趋势。据美国国立卫生研究院报道其发病率与死亡率接近1∶1。受胰腺解剖学及生物学特征等因素的影响,确诊时多数已是晚期,手术切除的机会只有15%~20%甚至更低,而且术后易复发转移。早期诊断是改善胰腺癌预后的关键因素,目前尚缺少一种无创性早期诊断和监测疗效的有效方法。目前临床上常用化疗药物联合中药进行治疗,治疗药物、治疗方案很多,但是尚不能够在分子影像水平上有效评价药物疗效。近年来,分子影像学已经成为胰腺癌诊治的新方向,其应用日趋广泛,其中以超微超顺磁性纳米氧化铁颗粒(USPIO)为基础的磁共振分子影像是一个极具潜力的研究方向,USPIO是一种高效的实体瘤磁共振成像对比剂,它有区分肿瘤组织和正常组织的能力,这使得他们在某一种组织(肿瘤或者正常组织)中聚集更多,从而导致该处T2磁共振信号强度减低,产生强化对比的效果。以超微超顺磁性纳米氧化铁颗粒(USPIO)为基础的磁共振分子影像最重要的一个步骤就是构建人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型。具体为:1.人胰腺癌细胞株PANC-1、BxPC-3的培养:PANC-1细胞采用含10%进口胎牛血清的DMEM高糖培养基;BxPC-3细胞采用含10%进口胎牛血清的RPMI-1640培养基。培养条件均为37℃、饱和湿度、5%二氧化碳。细胞呈贴壁生长。两种细胞每3-4天按1∶2传代1次。2.收集细胞悬液:对数生长期的上述细胞,在超净工作台内倒去培养基,用无菌PBS清洗2次,每个培养瓶加入3ml 0.25%胰酶消化液,待细胞变圆后倒去消化液,加入3ml培养基终止消化,用滴管伸入培养瓶反复吹打瓶壁后,将细胞悬液移入50ml离心管内。以1000rpm的转速离心5分钟,弃去上清培养基。用无血清培养基将细胞悬起,调整活细胞浓度至108/ml。3.大白兔皮下接种瘤细胞:用1ml注射器吸取细胞悬液,于大白兔右下腹部皮下注射细胞悬液100uL(即1×107个细胞/只)。使用PANC-1细胞悬液接种大白兔5只,使用BxPC细胞悬液接种大白兔5只。3-4周后肿瘤体表直径长至约1cm时用于下一步实验。4.利用磁共振T2map和T2*map技术测定肿瘤组织的横向弛豫时间(T2和T2*),通过弥散加权成像(DWI)测定其表观弥散系数(ADC),以及氢磁共振波谱分析(1HMRS)测定肿瘤组织内主要代谢物波谱。将肿瘤组织的横向弛豫时间、表观弥散系数、代谢物峰值比和峰下面积比与其病理HE染色和免疫组化指标(Cyclin D1增殖染色、以及Hoechst和Tunel凋亡染色)进行对照分析,研究胰腺癌的微观病理改变,包括细胞外间隙,凋亡和增殖等与MRI之间的关系。以上步骤中,人胰腺癌细胞株PANC-1、BxPC-3的培养最为关键和基础,目前所有人胰腺癌细胞株的培养均需要在超净工作台上进行,需要的药品多,花费大,操作繁琐,而且经常造成较大的浪费,用不完的细胞就会被丢弃掉。因此如何研究出一种可以在外界进行操作、费用低廉的瘤细胞培养制备装置成为急需解决的一大难题,所以在培养瘤细胞时,将培养的细胞置于适宜的生长条件中,在装置外操作内部的部件,发明一种人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置是必要的。

发明内容

[0003] 为了克服现实细胞培养过程中所有人胰腺癌细胞株的培养均需要在超净工作台上进行,需要的药品多,花费大,操作繁琐,而且经常造成较大的浪费的难题,本发明提供了人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置,该种人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置,首先能够将细胞制备器具置于内部,避免了与外界接触的可能。其次,蒸汽发生器产生的蒸汽温度较高,能够在使用前对装置内部进行消毒,而且可以通入皿底蒸汽加热层,加热培养板内的水,为培养的细胞提供适宜的生长温度。再次,凹面培养皿可以借助重力,将搅拌吸取器刮取下来的瘤细胞自动聚集在凹面培养皿底壁中央,能够自动进行传代,省却了用离心机聚集细胞的操作,让制备的细胞不受水解酶和高速离心带来的伤害。搅拌吸取器在搅拌的同时,与注射器结合,能够快速高效地将制备好的瘤细胞用于人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型的构建,从而达到减少药品使用量、降低花费,简化操作的目的。
[0004] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:
[0005] 本发明人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置由口1、斜嘴2、口颈3、体4、搅拌吸取器5、控液流阀6、体腔7、培养板8、侧液管9、凹面培养皿10、终液管11、皿底蒸汽加热层12、皿底蒸汽散热孔13、辐液管14、皿底孔15、液流阀16、主液管17、进皿底蒸汽管18、下板导汽管19、上板导汽管20、蒸汽发生器21、加热产汽舱22、控制板23、电源线24、电源线插头25、水箱26、水管27、间隔板28、水箱注水口29、培养皿腔30、培养板槽腔31、培养板槽壁32、培养皿凹底33、培养皿壁34、体顶壁35、控液流阀头旋槽36、槽顶隔离膜37、控液流阀头38、控液流阀杆39、控液流阀固爪40、吸取管顶封41、可动旋管42、转板把手43、圆形转板44、管板固定凸45、旋管轴承46、吸取管腔47、吸取管壁48、传力齿轮49、搅动片支架50、搅动片51、吸取管口52、针头53、针管腔54、针管壁55、针管壁刻度56、针管壁挡57、推液管58、推液管头59、针管凸60、细胞入管61、细胞吸取管62、注射器63构成,其特征在于:所述的培养板8长度为6-18厘米,宽度为6-18厘米,高度为0.5-2厘米,包括凹面培养皿10、培养板槽腔31、培养板槽壁32、皿底蒸汽加热层12、主液管17、液流阀16、辐液管14、侧液管9、终液管11。凹面培养皿10玻璃质,上半部分圆筒形,由厚度为1-3毫米的培养皿壁34围成,直径为
1-4厘米,高度为1-3厘米,所围成的空间为培养皿腔30;下半部分为表面皿形的培养皿凹底
33,培养皿凹底33底部中央到底面的最大高度为0.5-0.75厘米,底部中央的孔为皿底孔15,孔的直径为3-10毫米,位于间隔板28上的皿底孔15与主液管17相通;位于体4底壁上的皿底孔15则被封住。培养板8上部为培养板槽壁32围成的培养板槽腔31,槽壁玻璃质,厚度为1-3毫米,高度为0.3-1.5厘米;培养板槽腔31,内盛有水。培养板8下部为皿底蒸汽加热层12,两部分之间被设有皿底蒸汽散热孔13的培养板槽腔31底隔开。皿底蒸汽散热孔13多个,分布于凹面培养皿10之间。主液管17、液流阀16、辐液管14、侧液管9和终液管11均是玻璃质管道结构,管径均为2-3毫米。
[0006] 所述的口1在人胰腺癌组织块放入后,用市售的无菌滤膜封住,圆形,直径为2-5厘米。所述的斜嘴2两端开口大小形状相同,外端的开口为口1,内端的开口也是口颈3的外口,内外口底缘中央的连线与水平面呈10-30°的夹角,壁厚1-3毫米。所述的口颈3后端从体4前端发出,上缘与体4上表面平齐,中央到斜嘴2的长度为1.5-3厘米;下缘与间隔板28平齐,中央到斜嘴2的长度为2-4厘米;玻璃质,壁厚1-3毫米。所述的体4长方体形,长度为15-50厘米,宽度为8-24厘米,高度为6-18厘米,玻璃质,壁厚1-3毫米。所述的体顶壁35是体4的顶面,上面分布着2个搅拌吸取器5和1个控液流阀6。体4内的空间为体腔7,所述的体腔7前半部分被间隔板28分成上下两部分,间隔板28玻璃质,厚度为1-3毫米,其上对应每个皿底孔15处各有1个孔,孔的直径为3-10毫米;所述的间隔板28前缘和1侧缘均连接在体4侧壁上,上面设置有1个培养板8,下方设置有1个水箱26和1个蒸汽发生器21。所述的水箱26的长度为4-12厘米,宽度为3-9厘米,高度为2-7厘米,与间隔板28之间的空间供主液管17穿行;水箱26一侧有一个直径为2-5毫米的圆形的水箱注水口29;水箱26另一侧有1个直径为2-5毫米的水管27,水管27在水箱26内的开口位于水箱26底部。
[0007] 所述的蒸汽发生器21圆筒状,直径为2-3厘米,高度为2-6厘米,包括进皿底蒸汽管18、下板导汽管19、上板导汽管20、蒸汽发生器21、加热产汽舱22、控制板23、电源线24、电源线插头25和水管27。电源线24和电源线插头25是公知的可以将外界电源引入蒸汽发生器21的部件,电源线24为双股包皮铜丝线,电源线插头25为两相或三相插头。电源线24连接着控制板23。加热产汽舱22是圆筒状的结构,直径为0.5-1厘米,高度为1-2厘米,上端与下板导汽管19和上板导汽管20相通,下部侧壁有1个直径为2-5毫米的孔;加热产汽舱22加热用的电阻丝位于其上部。上板导汽管20和下板导汽管19玻璃质或铜质,直径为1-3毫米,壁厚
0.3-0.5毫米。进皿底蒸汽管18是上板导汽管20和下板导汽管19在皿底蒸汽加热层12中的延续,长度为0.5-2厘米。
[0008] 所述的搅拌吸取器5包括吸取管顶封41、可动旋管42、转板把手43、圆形转板44、管板固定凸45、旋管轴承46、吸取管腔47、吸取管壁48、传力齿轮49、搅动片支架50、搅动片51、吸取管口52。吸取管顶封41硅胶质,具弹性。可动旋管42不锈钢质,长度为4-12厘米,直径为5-10毫米,壁厚1-3毫米。转板把手43是圆形转板44边缘向外伸出的圆杆,直径为0.5-1.5厘米,长度为3-5厘米,不锈钢质,与圆形转板44通过公知的旋丝连接或直接焊接在一起。圆形转板44是直径为2-5厘米、厚度为1-5毫米的圆形不锈钢板,中央有一个内表面具有管板固定凸45的孔,通过该孔内凹凸啮合的管板固定凸45,能够将圆形转板44与可动旋管42紧密连接在一起。吸取管的内腔是吸取管腔47,由不锈钢质的吸取管壁48围成,下端开口为吸取管口52。传力齿轮49是斜面为45°的齿轮。搅动片支架50是可动旋管42最末端垂直方向上长方体形的横杆,嵌入扇形橡胶质搅动片51基部。搅动片51橡胶质,扇形,最宽0.5-1厘米,基部最后为0.5-0.75厘米,长度为0.5-2厘米。
[0009] 所述的控液流阀6包括控液流阀头旋槽36、槽顶隔离膜37、控液流阀头38、控液流阀杆39、控液流阀固爪40。控液流阀头旋槽36是圆柱形凹槽,圆柱形,直径为1-3厘米,深度为3-5毫米。槽顶隔离膜37是控液流阀头旋槽36封口的弹性硅胶质薄膜,厚度为0.1-1毫米。控液流阀头38是不锈钢质的长方体形长杆,长度为0.8-2.8厘米,高度和宽度均为2-5毫米,中央焊接有圆杆状的控液流阀杆39。控液流阀杆39圆杆形,长度为4-8厘米,直径为2-5毫米。控液流阀杆39下端焊接在控液流阀固爪40。控液流阀固爪40长方体形,下表面向内具有长方体形缺刻。
[0010] 所述的注射器63由针头53、针管腔54、针管壁55、针管壁刻度56、针管壁挡57、推液管58、推液管头59、针管凸60、细胞入管61、细胞吸取管62组成。针头53、针管腔54、针管壁55、针管壁刻度56、针管壁挡57、推液管58、推液管头59和针管凸60的结构同公知市售的注射器,细胞入管61圆筒状,壁厚1-2毫米,管内腔直径1-3毫米,长度5-8毫米,玻璃质,末端稍膨大,壁厚增加0.1-0.5毫米。
[0011] 本发明的有益效果为,人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置,首先能够将细胞制备器具置于内部,避免了与外界接触的可能。其次,蒸汽发生器产生的蒸汽温度较高,能够在使用前对装置内部进行消毒,而且可以通入皿底蒸汽加热层,加热培养板内的水,为培养的细胞提供适宜的生长温度。再次,凹面培养皿可以借助重力,将搅拌吸取器刮取下来的瘤细胞自动聚集在凹面培养皿底壁中央,能够自动进行传代,省却了用离心机聚集细胞的操作,让制备的细胞不受水解酶和高速离心带来的伤害。搅拌吸取器在搅拌的同时,与注射器结合,能够快速高效地将制备好的瘤细胞用于人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型的构建,从而达到减少药品使用量、降低花费,简化操作的目的。人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置所用装置制作简单,可操作性强,成本低廉,效果明显。

附图说明

[0012] 下面结合附图对本发明进一步说明。
[0013] 图1为本发明人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置的整体结构示意图。
[0014] 图2为本发明人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置的培养板结构示意图。
[0015] 图3为本发明人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置的控液流阀纵剖面结构示意图。
[0016] 图4为本发明人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置的搅拌吸取器纵剖面结构示意图。
[0017] 图5为本发明人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置的注射器整体结构示意图。
[0018] 图中1.口,2.斜嘴,3.口颈,4.体,5.搅拌吸取器,6.控液流阀,7.体腔,8.培养板,9.侧液管,10.凹面培养皿,11.终液管,12.皿底蒸汽加热层,13.皿底蒸汽散热孔,14.辐液管,15.皿底孔,16.液流阀,17.主液管,18.进皿底蒸汽管,19.下板导汽管,20.上板导汽管,
21.蒸汽发生器,22.加热产汽舱,23.控制板,24.电源线,25.电源线插头,26.水箱,27.水管,28.间隔板,29.水箱注水口,30.培养皿腔,31.培养板槽腔,32.培养板槽壁,33.培养皿凹底,34.培养皿壁,35.体顶壁,36.控液流阀头旋槽,37.槽顶隔离膜,38.控液流阀头,39.控液流阀杆,40.控液流阀固爪,41.吸取管顶封,42.可动旋管,43.转板把手,44.圆形转板,
45.管板固定凸,46.旋管轴承,47.吸取管腔,48.吸取管壁,49.传力齿轮,50.搅动片支架,
51.搅动片,52.吸取管口,53.针头,54.针管腔,55.针管壁,56.针管壁刻度,57.针管壁挡,
58.推液管,59.推液管头,60.针管凸,61.细胞入管,62.细胞吸取管,63.注射器。

具体实施方式

[0019] 实施例一:
[0020] 如图所示,本发明的人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置具体为:人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置是将细胞培养板与外界隔离,能够通过水浴维持培养板上培养皿处的温度恒定,在外界自然环境中放取培养组织和细胞自如的装置,主体为透明玻璃质,由口1、斜嘴2、口颈3、体4、搅拌吸取器5、控液流阀6、体腔7、培养板8、侧液管9、凹面培养皿10、终液管11、皿底蒸汽加热层12、皿底蒸汽散热孔13、辐液管14、皿底孔15、液流阀16、主液管17、进皿底蒸汽管18、下板导汽管19、上板导汽管20、蒸汽发生器21、加热产汽舱22、控制板23、电源线24、电源线插头25、水箱26、水管27、间隔板
28、水箱注水口29、培养皿腔30、培养板槽腔31、培养板槽壁32、培养皿凹底33、培养皿壁34、体顶壁35、控液流阀头旋槽36、槽顶隔离膜37、控液流阀头38、控液流阀杆39、控液流阀固爪
40、吸取管顶封41、可动旋管42、转板把手43、圆形转板44、管板固定凸45、旋管轴承46、吸取管腔47、吸取管壁48、传力齿轮49、搅动片支架50、搅动片51、吸取管口52、针头53、针管腔
54、针管壁55、针管壁刻度56、针管壁挡57、推液管58、推液管头59、针管凸60、细胞入管61、细胞吸取管62、注射器63组成。口1是人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞制备装置与外界相通的开口,在人胰腺癌组织块放入后,用市售的无菌滤膜封住,从而保证外界细菌被屏蔽在外,圆形,直径为2-5厘米。斜嘴2是人胰腺癌组织块和无菌空气进出的通道,两端开口大小形状相同,外端的开口为口1,内端的开口也是口颈3的外口,内外口底缘中央的连线与水平面呈10-30°的夹角,壁厚1-3毫米。口颈3是斜嘴2和体4之间相连的部分,后端从体4前端发出,上缘与体4上表面平齐,中央到斜嘴2的长度为1.5-3厘米;下缘与间隔板28平齐,中央到斜嘴2的长度为2-4厘米;玻璃质,壁厚1-3毫米。体4长方体形,长度为15-50厘米,宽度为8-24厘米,高度为6-18厘米,玻璃质,壁厚1-3毫米。体顶壁35是体4的顶面,上面分布着2个搅拌吸取器5和1个控液流阀6。体4内的空间为体腔7,体腔7前半部分被间隔板28分成上下两部分,间隔板28玻璃质,厚度为1-3毫米,其上对应每个皿底孔15处各有1个孔,孔的直径为3-10毫米,是主液管17穿过间隔板28与皿底孔15连通的通道;间隔板28前缘和1侧缘均连接在体4侧壁上,上面设置有1个培养板8,下方设置有1个水箱26和1个蒸汽发生器21。
水箱26的长度为4-12厘米,宽度为3-9厘米,高度为2-7厘米,与间隔板28之间的空间供主液管17穿行;水箱26一侧有一个直径为2-5毫米的圆形的水箱注水口29,当水注入水箱26后,该口被盖封闭;水箱26另一侧有1个直径为2-5毫米的水管27,水管27在水箱26内的开口位于水箱26底部,能够将水箱26的水输送到蒸汽发生器21中,在加热产汽舱22中由于上部的水因被该处的电阻丝加热而变成可被释放的水蒸气不断减少时,能够借助蒸汽发生器21盛水空间产生的负压,将水箱26内的水吸到蒸汽发生器21中,所以只要保证水箱内有水,就可以源源不断产生水蒸气。蒸汽发生器21是产生热的水蒸气,通入皿底蒸汽加热层12以维持培养板8水浴恒温的装置,圆筒状,直径为2-3厘米,高度为2-6厘米,包括进皿底蒸汽管18、下板导汽管19、上板导汽管20、蒸汽发生器21、加热产汽舱22、控制板23、电源线24、电源线插头25和水管27。电源线24和电源线插头25是公知的可以将外界电源引入蒸汽发生器21的部件,电源线24为双股包皮铜丝线,电源线插头25为两相或三相插头。电源线24连接着控制板23,控制板23同公知热水器上的控制板,能够显示通电状况和培养板8内水浴水的温度。
加热产汽舱22是圆筒状的结构,直径为0.5-1厘米,高度为1-2厘米,上端与下板导汽管19和上板导汽管20相通,下部侧壁有1个直径为2-5毫米的孔,供蒸汽发生器21盛水空间中的水进入加热产汽舱22;加热产汽舱22加热用的电阻丝位于其上部,由于水的比热较大,上部的水被变成水蒸气释放出去以后,仍可由蒸汽发生器21盛水空间内的水补充进来。上板导汽管20和下板导汽管19均是将加热产汽舱22产生的热的水蒸汽输送到进皿底蒸汽管18,进而进入皿底蒸汽加热层12的管道,玻璃质或铜质,直径为1-3毫米,壁厚0.3-0.5毫米。进皿底蒸汽管18是上板导汽管20和下板导汽管19在皿底蒸汽加热层12中的延续,长度为0.5-2厘米。培养板8是培养、传代和集聚人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞的部件,长度为6-18厘米,宽度为6-18厘米,高度为0.5-2厘米,包括凹面培养皿10、培养板槽腔31、培养板槽壁32、皿底蒸汽加热层12、主液管17、液流阀16、辐液管14、侧液管9、终液管11。凹面培养皿10玻璃质,上半部分圆筒形,由厚度为1-3毫米的培养皿壁34围成,直径为1-4厘米,高度为1-3厘米,所围成的空间为培养皿腔30;下半部分为表面皿形的培养皿凹底33,培养皿凹底33底部中央到底面的最大高度为0.5-0.75厘米,底部中央的孔为皿底孔15,孔的直径为3-10毫米,位于间隔板28上的皿底孔15与主液管17相通;位于体4底壁上的皿底孔15则被封住。培养板8上部为培养板槽壁32围成的培养板槽腔31,槽壁玻璃质,厚度为1-3毫米,高度为0.3-1.5厘米;培养板槽腔31,内盛有水,能够对凹面培养皿10进行恒温水浴。培养板
8下部为皿底蒸汽加热层12,两部分之间被设有皿底蒸汽散热孔13的培养板槽腔31底隔开。
皿底蒸汽散热孔13多个,分布于凹面培养皿10之间,是将皿底蒸汽加热层12内被加热的水输送到培养板槽腔31的通道。培养人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞时,先在位于间隔板28上的培养板8培养人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型构建用瘤细胞:人胰腺癌细胞株PANC-1和BxPC-3,PANC-1细胞采用含10%进口胎牛血清的DMEM高糖培养基;BxPC-3细胞采用含10%进口胎牛血清的RPMI-1640培养基;培养条件均为37℃、饱和湿度、5%二氧化碳;细胞呈贴壁生长;两种细胞培养3-4天后进行传代。传代时,先用搅拌吸取器5搅动凹面培养皿10内贴壁生长的瘤细胞,等瘤细胞借助重力沉积到皿底孔15处后,用控液流阀6打开液流阀16,在不用离心的情况下,即可通过主液管17、液流阀16、辐液管14、侧液管9和终液管11将细胞转移到下一个培养板8。主液管17、液流阀16、辐液管14、侧液管9和终液管11均是玻璃质管道结构,管径均为2-3毫米。搅拌吸取器5包括吸取管顶封41、可动旋管42、转板把手43、圆形转板44、管板固定凸45、旋管轴承46、吸取管腔47、吸取管壁48、传力齿轮49、搅动片支架50、搅动片51、吸取管口52。吸取管顶封41硅胶质,具弹性,是可动旋管42顶端的帽子,能够将可动旋管42与外界隔开,在吸取细胞时,细胞吸取管62的游离端套在此处,即可将注射器63的针管腔54与吸取管腔47连通。可动旋管42不锈钢质,长度为4-12厘米,直径为5-10毫米,壁厚1-3毫米,能够在吸取管壁48外转动,带动传力齿轮49和搅动片支架50,将操作转板把手43的力量传送给搅动片51,发挥搅拌的功能。转板把手43是圆形转板44边缘向外伸出的圆杆,直径为0.5-1.5厘米,长度为3-5厘米,不锈钢质,与圆形转板44通过公知的旋丝连接或直接焊接在一起,以便操作人员操纵搅拌吸取器5,将贴壁生长的瘤细胞从所贴壁上刮下来,省却了水解酶的使用。圆形转板44是直径为2-5厘米、厚度为1-5毫米的圆形不锈钢板,中央有一个内表面具有管板固定凸45的孔,通过该孔内凹凸啮合的管板固定凸
45,能够将圆形转板44与可动旋管42紧密连接在一起。旋管轴承46是位于圆形转板44下方减小摩擦阻力的部件,结构同市售的轴承。吸取管的内腔是吸取管腔47,由不锈钢质的吸取管壁48围成,不论怎么转折都是一个整体,其下端开口为吸取管口52,在外力作用下,瘤细胞可以从吸取管口52被吸入吸取管腔47而离开体腔7。传力齿轮49是斜面为45°的齿轮,其结构同公知的齿轮,两个齿轮啮合后,能够将转动的力量向其垂直的方向传输。搅动片支架
50是可动旋管42最末端垂直方向上长方体形的横杆,嵌入扇形橡胶质搅动片51基部,能够支撑具弹性的搅动片51。搅动片51橡胶质,扇形,最宽0.5-1厘米,基部最后为0.5-0.75厘米,长度为0.5-2厘米,扇形的下缘正好与培养皿凹底33相吻合,以便达到最好的刮取效果。
控液流阀6是在体顶壁35外面控制内部液流阀16的部件,包括控液流阀头旋槽36、槽顶隔离膜37、控液流阀头38、控液流阀杆39、控液流阀固爪40。控液流阀头旋槽36是圆柱形凹槽,圆柱形,直径为1-3厘米,深度为3-5毫米,控液流阀头38能够在其中绕控液流阀杆39转动。槽顶隔离膜37是控液流阀头旋槽36封口的弹性硅胶质薄膜,厚度为0.1-1毫米,作用是将该开口封住,保证不被外界细菌污染体腔7内培养的瘤细胞。控液流阀头38是不锈钢质的长方体形长杆,长度为0.8-2.8厘米,高度和宽度均为2-5毫米,中央焊接有圆杆状的控液流阀杆
39。控液流阀杆39圆杆形,长度为4-8厘米,直径为2-5毫米。控液流阀杆39下端焊接在控液流阀固爪40。控液流阀固爪40长方体形,下表面向内具有长方体形缺刻,该缺刻能够与液流阀16的旋杆啮合,当旋动控液流阀头38时,即可通过控液流阀杆39和控液流阀固爪40作用于液流阀16,打开或关闭结构同公知水龙头的液流阀16。注射器63是将瘤细胞连续接种到大白兔体内构建人胰腺癌大白兔胰头移植瘤模型时使用的器具,由针头53、针管腔54、针管壁55、针管壁刻度56、针管壁挡57、推液管58、推液管头59、针管凸60、细胞入管61、细胞吸取管62组成。针头53、针管腔54、针管壁55、针管壁刻度56、针管壁挡57、推液管58、推液管头59和针管凸60的结构同公知市售的注射器,只是当针头53刺入大白兔体内后,如果所吸取细胞的量不足时,再吸取又需要重新拔出,但是这样一来就增加了感染细菌的危险。所以本发明在公知注射器上增设细胞入管61和细胞吸取管62,细胞入管61圆筒状,壁厚1-2毫米,管内腔直径1-3毫米,长度5-8毫米,玻璃质,末端稍膨大,壁厚增加0.1-0.5毫米,以便硅胶质的细胞吸取管62更加牢固地套在细胞入管61上。
[0021] 以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应了解,本发明不受上述实施例的限制,上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理,在不脱离本发明精神和范围的前提下,本发明还会有各种变化和改进,这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内,本发明要求保护范围由所附的权利要求书其等效物界定。