抗氧化组合物及其应用

摘要

本发明公开了一种抗氧化组合物及其应用，该抗氧化组合物的活性成分由如下重量份的原料组成：蜂胶8.4‑25.2份、番茄红素0.2‑0.8份、叶黄素0.2‑0.5份和维生素E0.1‑6.5份。本发明中蜂胶、番茄红素、叶黄素及维生素E，四种物质抗氧化的原理不尽相同，能全方面共同作用，协同作用更强，诸药合用，共同达到抗氧化的效果。

权利要求

1.一种抗氧化组合物，其特征在于，其活性成分由如下重量份的原料组成：

2.权利要求1所述的抗氧化组合物在制备具有抗氧化功效的保健品中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述保健品的剂型为软胶囊。

4.一种抗氧化软胶囊，其特征在于，该抗氧化软胶囊的内容物的活性成分为权利要求1所述抗氧化组合物。

5.根据权利要求4所述的抗氧化软胶囊，其特征在于，该抗氧化软胶囊的内容物还包括食用油和蜂蜡。

6.根据权利要求5所述的抗氧化软胶囊，其特征在于，所述食用油选自橄榄油或玉米胚芽油。

说明书

抗氧化组合物及其应用

技术领域

[0001] 本发明涉及保健品技术领域，特别是涉及一种抗氧化组合物及其应用。

背景技术

[0002] 人体内不断进行物质和能量代谢的生命活动过程中，会因各种内因和外因而产生各种活性氧和自由基，有一定数量的自由基对人体是有益的，例如人体被病毒侵入后，自由基可以作为一种强氧化剂来杀死病毒。不过，当自由基超过一定数量，或日常接触到一些物质(如腐败、霉变的食物、抗菌素、农药)、污染的空气、香烟的烟雾和焦油、阳光和电磁辐射，甚至过量运动、心理压力时，都会激发更多活性氧和自由基的产生。而过多的自由基会损伤人的机体，不断攻击细胞膜等细胞组织，造成脂质过氧化反应，脂质过氧化产物又可分解为更多的自由基，引起自由基的连锁反应。这样，细胞膜结构的完整性受到破坏，引起细胞结构、遗传物质DNA等广泛损伤，让细胞失去正常的生理功能，从而导致疾病的产生。越来越多的研究显示，许多慢性病的发生和发展与机体自由基的氧化损伤相关。如血管内低密度脂蛋白(LDL)氧化引起动脉粥样硬化、心脑血管疾病，细胞遗传物质DNA氧化损伤、基因突变引起恶性肿瘤以及某些自身免疫性疾病、白内障、衰老等等，均为氧化损伤引起的后果。现代科学认为氧化与人体健康、衰老及一些慢性病息息相关，所以无论从健康层面还是护肤层面，我们都需要在日常生活中注意抗氧化。

[0003] 当今社会正步入老年化阶段，据估计，到2025年世界人口中超过60岁的人将从4亿上升到11亿，在我国情况更为严重，到2040年60岁以上的老年人将占我国总人口数的25％。氧化是伴随着生命活动的自然现象，日晒、压力、环境污染等都能让肌肤自由基泛滥，从而产生面色黯淡、缺水等氧化现象，其已成为肌肤衰老的最大威胁，是不可避免的。但是抗氧化以延缓衰老却是可能的，因此，保持自由基的产生与消除的平衡，强化防护系统的功能，防止自由基对细胞和组织的损伤，是预防细胞活力下降、机体衰老、血管硬化、血栓形成、组织癌变等疾病的关键措施。

[0004] 随着社会的进步，科学技术的发展，人们在长期实践和大量的试验研究中，得出这样的结论：只有用抗氧化剂，才能有效地清除自由基。当然，人体内也有各种消除活性氧和自由基的抗氧化防御体系，维持体内“氧化与抗氧化”的平衡。人体内防御氧化应激的重要体系主要是抗氧化酶类和非酶抗氧化剂。抗氧化酶类包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)等，这些酶的抗氧化活性依赖其辅基锌、锰、铜、铁和硒等微量元素。非酶抗氧化剂指具有抗氧化作用的小分子化合物，包括谷胱甘肽、维生素E、维生素C和类胡萝卜素等营养素。

[0005] 但是，随着环境污染，生活压力及不良的生活习惯增多。仅仅靠身体内部的调节来清除自由基已经不够。以上提到的维生素C、E，铁、锌等抗氧化营养素就可以通过日常饮食和营养保健食品获取。同时在迈入21世纪，我国人民收入和生活水平不断提高，城乡居民开始步入小康，健康问题备受人们关注，人们对“食”观念上已有很大改变，吃不仅为了活命，也为了健康，人们对食品提出了“营养、保健、卫生、安全”的要求。预计我国人口老龄化的高峰将诞生在21世纪中期，所以中老年人对保健品、食品的消费有一定增长，特别是抗氧化能使人美容养颜、延年益寿的保健食品需求尤为突出。因此，研发抗氧化的保健品是符合消费者的健康需求的。

[0006] 通过调研发现，在国家已批准的12000多种保健食品中，已有120多个产品具有抗氧化功能。目前国内抗氧化的保健产品主要有包括：各种维生素类保健品、大豆异黄酮类保健品、矿物质类保健品、中药类保健品等，这些产品都从不同角度来抗氧化，延缓衰老，为人们带来福音。但是这些产品的组成成分单一，抗氧化效果不甚明显。

发明内容

[0007] 基于此，本发明的目的是提供一种抗氧化效果好的抗氧化组合物及其应用。具体的技术方案如下：

[0008] 一种抗氧化组合物，其活性成分由如下重量份的原料组成：

[0009]

[0010] 在其中一个实施例中，抗氧化组合物的活性成分由如下重量份的原料组成：

[0011]

[0012] 在其中一个实施例中，抗氧化组合物的活性成分由如下重量份的原料组成：

[0013]

[0014] 在其中一个实施例中，抗氧化组合物的活性成分由如下重量份的原料组成：

[0015]

[0016] 本发明的另一目的是提供上述抗氧化组合物的应用。

[0017] 具体的技术方案如下：

[0018] 上述的抗氧化组合物在制备具有抗氧化功效的保健品中的应用。

[0019] 在其中一个实施例中，所述保健品的剂型为软胶囊。

[0020] 本发明的另一目的是提供一种抗氧化软胶囊。

[0021] 具体的技术方案如下：

[0022] 一种抗氧化软胶囊，其内容物的活性成分为上述抗氧化组合物。

[0023] 在其中一个实施例中，该抗氧化软胶囊的内容物还包括食用油和蜂蜡。

[0024] 在其中一个实施例中，所述食用油选自橄榄油或玉米胚芽油。

[0025] 本发明的原理和优点如下：

[0026] 蜂胶是天然抗氧化剂。其中，蜂胶总黄酮，分子量小，容易吸收，能顺利通过血脑屏障，参与体内组织细胞的氧化磷酸化代谢反应过程，在过剩自由基产生的位置(细胞线粒体)，发挥抗氧化作用，积极捕获自由基，中和自由基传递的连锁反应，降低自由基反应中间体浓度，稳定和清除过剩自由基。蜂胶可明显提高抗氧化剂(SOD)的活性，可减少自由基对细胞的伤害以及预防和治疗多种糖尿病并发症。蜂胶醇提取物能保护细胞膜免受自由基的+ +损伤，避免有膜结构损伤可能导致的Na-KATPase活性的下降。蜂胶黄酮既能明显提高脑组织抗氧化酶的活性，又能显著降低脑组织NO含量，蜂胶黄酮可以抑制NO的细胞毒作用。蜂胶中起抗氧化作用的主要成分之一是黄酮类化合物，也有资料显示蜂胶中众多的其它类化合物亦有抗氧化作用，如阿魏酸、咖啡酸等。另外糖类中的果糖也有明显的抗氧化作用。对蜂胶各种溶剂提取物的抗氧化性能的研究结果表明，各种溶剂提取物均对DPPH自由基具有清除作用，且随浓度增加清除能力增强，当浓度达到一定值时，清除率不再随浓度的增加而增大。95％乙醇提取物均比同浓度的其它提取物抗氧化效果好。蜂胶中还含有的大量有效成分，可以抑制过氧化脂质的生成和抑制酪氨酸酶活性。给面部有黄褐斑的中、老年人使用蜂胶药膏，结果大多数人2个月后黄褐斑明显减退，3个月后变得很浅。目前对消除老年斑的药物研究大多是围绕着自由基氧化和提高SOD的活性，并设法抑制酪氨酸酶的活性，减少黑色素的生成。

[0027] 番茄红素是类胡萝卜素的一种，它能使成熟的番茄呈现深红色，故得名“番茄红素”。它存在于红色蔬菜与水果中，如番茄、胡萝卜、西瓜、红色葡萄柚、草莓等，以番茄中的含量最高，是自然界中最强的抗氧化剂。番茄红素是类胡萝卜素中最有效的单线态氧灭活剂，可以通过物理或化学方式来淬灭单线态氧，其灭活能力是β-胡萝卜素的2倍、维生素E的100倍。动物实验表明，番茄红素对高脂饲料饲喂的大鼠血脂水平有明显的调节作用，提高抗氧化能力，抑制脂质过氧化。一项随机、交叉试验结果表明，12名健康成年人服用番茄酱或油树脂胶囊，每人每天分别摄取5、10、20mg番茄红素，连续服用2周后，可显著降低体内脂类、脂蛋白和蛋白质氧化损伤。与对照组相比，经常食用番茄的人血清脂质的过氧化水平和LDL-C的氧化水平明显降低。

[0028] 叶黄素也是一种性能优异的类胡萝卜素抗氧化剂，其抗氧化活性与番茄红素相似，通过物理或化学方式来淬灭单线态氧，能有效清除体内的自由基等特殊功能，从而改善人们的健康状况。因此，将一定量的叶黄素添加入到食品中有助于预防人体器官衰老引起的一系列疾病，使人保持旺盛的精力。叶黄素作为抗氧化剂可抑制活性氧自由基的活性，阻止它对正常的细胞的破坏，从而保护机体免受伤害，增强机体的免疫能力。

[0029] 类胡萝卜素可抑制AMVN[2，2′2-Azo-bis(2，4-dimethylvaleronitrile)]引起的多室脂质体内硫代巴比妥反应产物的生成，抗氧化能力较强，类胡萝卜素复合物的作用比单一成分更有效，所以当番茄红素和叶黄素同时存在时，协同作用更强。

[0030] 维生素E(VE)由于其脂溶性及在细胞膜和线粒体膜内的存在，成为机体内最重要的脂溶性抗氧化剂。VE属于抗氧化机制中的非酶防御系统，是最主要的生物自由基清除剂，它有疏水结构，能插入到不饱和脂肪酸存在的生物膜中，对稳定生物膜起着至关重要的作用。VE可将脂质过氧自由基还原成脂质过氧化物，形成一种相对稳定的产物，从而阻止不饱和脂肪酸过氧化在膜脂双层内传播，防止分子氧和自由基通过非酶反应对不饱和脂肪酸氧化。

[0031] 本申请发明人经过大量的研究发现：蜂胶，容易吸收，能稳定和清除过剩自由基，且具有一定的防腐作用；同时增加强氧化剂番茄红素、叶黄素及维生素E，番茄红素、叶黄素均为类胡萝卜素类抗氧化剂，番茄红素是类胡萝卜素中最有效的单线态氧灭活剂，类胡萝卜素复合物的作用比单一成分更有效，当番茄红素和叶黄素同时存在时，协同作用更强；维生素E在体内可保护易被氧化的物质，是一种良好的天然脂溶性维生素。本发明中蜂胶、番茄红素、叶黄素及维生素E，四种物质抗氧化的原理不尽相同，能全方面共同作用，协同作用更强，诸药合用，共同达到抗氧化的效果。

[0032] 本发明的抗氧化组合物(软胶囊剂型)经湖南省疾病预防控制中心做毒理检验、卫生学检验及稳定性检验，检查结果表明，本品安全、稳定、无毒副作用，适宜人体长期服用；经功能学验证，结果表明本发明抗氧化组合物能显著降低血中脂质过氧化物(MDA)含量，能提高血清超氧化物歧化酶(SOD)活力，根据有关评价标准判定，该软胶囊具有抗氧化功能；
经人体试食试验，试食后试食组血清MDA有所降低，血清SOD、血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)均有提高，试食前后体重、血压、心率、血常规、尿常规、心电图等安全性指标均未见明显异常改变，且试食期间未见与样品有关的不良反应。

具体实施方式

[0033] 本发明实施例所使用的原料如下：

[0034] 蜂胶购自河南长生园蜂业有限公司；

[0035] 番茄红素和叶黄素均购自西安小草植物科技有限公司；

[0036] 维生素E购自浙江医药股份有限公司新昌制药厂。

[0037] 以下通过实施例对本申请做进一步的阐述。

[0038] 实施例1

[0039] 本实施例一种抗氧化组合物，其活性成分由如下重量份的原料组成：

[0040]

[0041] 将上述抗氧化组合物制成抗氧化软胶囊，其内容物组成如下：

[0042]

[0043]

[0044] 制备方法如下：将蜂蜡加热至熔化，与维生素E、橄榄油充分混匀后，加入蜂胶粉、番茄红素、叶黄素和辅料(常规辅料)，搅拌使混合均匀，置胶体磨中研磨至料液混合均匀，静置达到脱气效果，作为软胶囊内容物，按传统的制备方法制成软胶囊。

[0045] 实施例2

[0046] 本实施例一种抗氧化组合物，其活性成分由如下重量份的原料组成：

[0047]

[0048] 将上述抗氧化组合物制成抗氧化软胶囊，其内容物组成如下：

[0049]

[0050] 制备方法如下：将蜂蜡加热至熔化，与维生素E、玉米胚芽油充分混匀后，加入蜂胶粉、番茄红素、叶黄素和辅料，搅拌使混合均匀，置胶体磨中研磨至料液混合均匀，静置达到脱气效果，作为软胶囊内容物，按传统的制备方法制成软胶囊。

[0051] 实施例3

[0052] 本实施例一种抗氧化组合物，其活性成分由如下重量份的原料组成：

[0053]

[0054]

[0055] 将上述抗氧化组合物制成抗氧化软胶囊，其内容物组成如下：

[0056]

[0057] 制备方法如下：将蜂蜡加热至熔化，与维生素E、玉米胚芽油充分混匀后，加入蜂胶粉、番茄红素、叶黄素和辅料，搅拌使混合均匀，置胶体磨中研磨至料液混合均匀，静置达到脱气效果，作为软胶囊内容物，按传统的制备方法制成软胶囊。

[0058] 实施例4

[0059] 本实施例一种抗氧化组合物，其活性成分由如下重量份的原料组成：

[0060]

[0061] 将上述抗氧化组合物制成抗氧化软胶囊，其内容物组成如下：

[0062]

[0063] 制备方法如下：将蜂蜡加热至熔化，与维生素E、玉米胚芽油充分混匀后，加入蜂胶粉、番茄红素、叶黄素和辅料，搅拌使混合均匀，置胶体磨中研磨至料液混合均匀，静置达到脱气效果，作为软胶囊内容物，按传统的制备方法制成软胶囊。

[0064] 实施例5

[0065] 本实施例一种抗氧化组合物，其活性成分由如下重量份的原料组成：

[0066]

[0067] 将上述抗氧化组合物制成抗氧化软胶囊，其内容物组成如下：

[0068]

[0069] 制备方法如下：将蜂蜡加热至熔化，与维生素E、玉米胚芽油充分混匀后，加入蜂胶粉、番茄红素、叶黄素和辅料，搅拌使混合均匀，置胶体磨中研磨至料液混合均匀，静置达到脱气效果，作为软胶囊内容物，按传统的制备方法制成软胶囊。

[0070] 实施例6

[0071] 为了探讨本发明抗氧化组合物与其他复合型抗氧化产品在抗氧化方面的优势，我们参照卫生部保健食品功能评价方法，内容包括对老龄小鼠体重、对老龄小鼠过氧化脂质及对老龄小鼠SOD活力的实验。

[0072] 1.材料

[0073] 1.1药物

[0074] 本发明抗氧化组合物(实施例2制备得到的抗氧化软胶囊)；

[0075] 对比组A是软胶囊，内容物配料为蜂胶：14重量份、玉米胚芽油：86重量份，软胶囊外壳材料为明胶、甘油，按传统的制备方法制成软胶囊；

[0076] 对比组B是一组公开的阿胶蜂胶软胶囊(cn201310367342.2)，软胶囊内容物配料有阿胶：35重量份、蜂胶：10重量份、番茄红素：5重量份、葡萄籽提取物原花青素：5重量份、色拉油：44重量份、维生素E：1重量份，软胶囊外壳材料为明胶、甘油，按传统的制备方法制成软胶囊。

[0077] 对比组C是软胶囊，内容物配料为蜂胶：14重量份、番茄红素：0.5重量份、虾青素：0.5重量份、维生素E：2重量份、玉米胚芽油：82重量份，软胶囊外壳材料为明胶、甘油，按传统的制备方法制成软胶囊。根据蜂胶的剂量换算出与抗氧化软胶囊中剂量组剂量相等的剂量。

[0078] 1.2动物

[0079] SPF级昆明种雄性12月龄小鼠70只，由长沙市开福区东创实验动物科技服务部提供，实验动物生产许可证号SCXK(湘)2009-0012。

[0080] 1.3剂量的选择及样品处理

[0081] 据人体口服推荐量，本发明抗氧化组合物设样品低、中、高剂量分别为0.2g/kg·bw、0.4g/kg·bw、1.2g/kg·bw，分别相当于人体推荐量的5、10、30倍。对比组A给予剂量为0.38g/kg·bw，对比组B给予剂量为0.47g/kg·bw，对比组C给予剂量为0.41g/kg·bw。

[0082] 2.实验方法

[0083] 试验前，小鼠称重后，尾尖采血后测定血液中的丙二醛(MDA)水平，按照MDA水平将老龄小鼠分为老龄对照组、对比组A、对比组B、对比组C和本发明抗氧化组合物的三个剂量组。各剂量组按照1.3中的剂量设计灌胃给予不同浓度的受试液(老龄对照组给予水)，每天灌胃一次，灌胃体积为0.1ml/10g·bw，连续30天。第31天，小鼠尾尖上采血测定MDA的含量，并摘眼球采血，离心，取血清，测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活力和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力，结果检验方法采用组间t检验。

[0084] 3.结果

[0085] 3.1抗氧化组合物(软胶囊剂型)对老龄小鼠体重的影响

[0086] 见表1可见，各剂量组实验初始、实验中期、实验结束对小鼠体重与对照组相比，无显著性差异(P>0.05)

[0087] 表1 抗氧化组合物对老龄小鼠体重的影响

[0088]组别 n 初始体重(g) 中期体重(g) 末期体重(g) 增重(g)
老龄对照组 10 49.01±4.31 50.07±3.88 51.18±4.05 2.17±1.67
对比组A 10 49.23±2.58 50.01±1.59 51.21±3.56 1.86±3.65
对比组B 10 49.49±3.74 50.35±2.16 50.08±4.08 1.12±2.42
对比组C 10 49.15±3.32 49.87±3.17 51.06±3.24 1.19±3.68
低剂量 10 49.09±3.11 49.69±2.83 50.07±2.80 1.08±2.93
中剂量 10 49.44±4.16 50.89±4.50 51.13±4.22 1.69±3.16
高剂量 10 49.62±3.02 50.30±2.78 51.01±3.66 1.39±3.53

[0089] 3.2抗氧化组合物对老龄小鼠过氧化脂质的影响

[0090] 见表2可见，经口给予不同剂量的样品30天后，本发明抗氧化组合物各剂量组试验末血液MDA水平与对照组比较都有显著性差异(P<0.05)，其中中、高剂量组与老龄对照组比较差异明显(P<0.01)。对比组A、B、C与中剂量组之间有显著性差异(P<0.05)，提示抗氧化软胶囊中剂量组治疗效果明显优于对比组A、B和C。

[0091] 表2 抗氧化组合物对老龄小鼠过氧化脂质的影响

[0092]

[0093]

[0094] 注：与中剂量抗氧化软胶囊比较△p<0.05，与对照组比较，*p<0.05，**p<0.01。3.3抗氧化组合物对老龄小鼠SOD活力的影响

[0095] 见表3可见，经口给予不同剂量的样品30天后，抗氧化组合物各剂量组血清SOD活力与老龄对照组比较都有升高的趋势(P<0.05)，中、高剂量组与老龄对照组比较有显著性差异(P<0.01)。对比组A、B、C与中剂量组之间有显著性差异(P<0.05)，表明抗氧化组合物中剂量组治疗效果明显优于对比组A、B和C。

[0096] 表3 抗氧化组合物对老龄小鼠SOD活力的影响

[0097]组别 n SOD活力(U/ml)
老龄对照组 10 164.66±37.55
对比组A 10 186.46±40.82*△
△
对比组B 10 190.31±39.17*
对比组C 10 189.83±40.52*△
低剂量 10 183.71±34.08*
中剂量 10 201.41±46.69**
高剂量 10 205.91±44.58**

[0098] 注：与中剂量抗氧化组合物比较△p<0.05，与对照组比较，*p<0.05，**p<0.01。3.4抗氧化组合物对老龄小鼠GSH-PX活力的影响

[0099] 见表4可见，经口给予不同剂量的样品30天后，抗氧化组合物各剂量组血清GSH-PX活力与老龄对照组比较都有升高的趋势(P<0.05)，低、中、高剂量组与老龄对照组均有显著性差异(P<0.01)。对比组A、B、C与中剂量组之间有显著性差异(P<0.05)，表明抗氧化组合物中剂量组治疗效果明显优于对比组A、B和C。

[0100] 表4 抗氧化组合物对老龄小鼠GSH-PX活力的影响

[0101]组别 n GSH-PX(U/L)
老龄对照组 10 575.62±63.21
对比组A 10 602.92±48.49*△
对比组B 10 599.38±53.67*△
对比组C 10 603.21±68.35*△
低剂量 10 638.71±64.52**
中剂量 10 677.60±44.97**
高剂量 10 681.80±54.53**

[0102] 注：与中剂量抗氧化组合物比较△p<0.05，与对照组比较，*p<0.05，**p<0.01。

[0103] 结果表明，本发明抗氧化组合物各剂量组与老龄对照组比较均有显著性差异，说明本发明抗氧化组合物具有抗氧化能力。本发明抗氧化组合物中剂量组与含等量蜂胶的阿胶蜂胶软胶囊等产品相比都有统计学意义，说明本发明抗氧化组合物在抗氧化能力方面比其他配方疗效更好。

[0104] 此外，本发明的抗氧化组合物还进行了毒理检验、卫生学检验、稳定性检验以及人体试食实验：

[0105] 本发明的抗氧化组合物(软胶囊剂型)经湖南省疾病预防控制中心做毒理检验、卫生学检验及稳定性检验。其毒理学检验中急性经口毒性试验结果表明对昆明种雌、雄小鼠的急性经口LD50均大于20.0g/kg·bw，属于无毒级；三项遗传毒性试验结果中Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验结果均为阴性；30天喂养试验期间，动物生长发育良好，各剂量组体重、增重、食物利用率、血常规指标、血生化指标。脏器重量等与对照组比较，无显著性差异(P>0.05)。卫生学检验表明该抗氧化组合物的感官指标、理化指标和微生物指标等均符合规定。稳定性检验表明在温度38±1℃，相对湿度75％条件下，放置3个月，各项指标均无明显变化。综合以上检查结果表明，本品安全、稳定、无毒副作用，适宜人体长期服用。

[0106] 经人体试食试验，受试者服用受试物180天，结果表明：试食后试食组血清MDA较试验前降低3.53％，血清SOD、血清GSH-Px均有提高，分别较试验前提高18.33％和6.57％，其中SOD活力与对照组(对照组服用水)试食后及自身试验前比较，差异均有显著性(P<0.05)。试食前后体重、血压、心率、血常规、尿常规、心电图等安全性指标均未见明显异常改变，且试食期间未见与样品有关的不良反应。

[0107] 以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。