一种多功能的含丝裂霉素的止血防粘连棉片

摘要

本发明公开了针对粘连发生机制（即局部血肿形成和成纤维细胞增生）而设计的一种多功能的含丝裂霉素的止血防粘连棉片，具有局部精确止血、预防血肿形成、抑制周围纤维细胞增生及局部精准预防瘢痕组织粘连的作用，是目前防粘连产品中唯一一种不置入体内的防粘连产品。棉片是手术中最常用最有效的止血工具，具有一次性即取即用，方便快捷，止血效果显著等优点，本发明产品根据不同手术对棉片大小规格不同的要求，设计针对不同手术需求大小规格的棉片，可以达到精确止血、避免浪费与避免血肿形成的目的；本发明的棉片中均匀分布有一定浓度的丝裂霉素C和积雪苷，在止血的同时兼顾具有抑制纤维细胞增生及预防周围瘢痕组织增生的作用，使手术疗效更加显著，同时节约手术操作时间，使手术简捷迅速，减少手术和环境污染的风险。

权利要求

1.一种多功能的含丝裂霉素的止血防粘连棉片的制作方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）配制丝裂霉素C溶液：将丝裂霉素C溶解到培养液中，配制成0.8-2mg/ml储存浓度的溶液，冻存于-20度；使用时按需配制成合适的质量浓度；使用溶液的质量浓度为0.3mg/ml、

0.4mg/ml或0.5mg/ml；培养液使用PBS或RPMI-1640培养液；

（2）配制积雪苷溶液：积雪草总苷2.5～10g、加入适量的溶剂中，搅拌10-100分钟，待溶解后、加溶剂至100～300ml，搅拌30分钟备用；积雪苷溶液的浓度为0.02g/ml、0.03g/ml或

0.05g/ml；

（3）将医用棉片完全浸入上述丝裂霉素C溶液中5-10分钟，去除气泡；

（4）将棉片再放入积雪苷溶液5-15分钟，放入平整漏网中，静置3～8分钟，待无液滴滴下；

（5）将棉片在通风处干燥；

（6）将干燥后的含有丝裂霉素C和积雪苷的棉片切割成相应规格，灭菌，包装；

所述棉片根据手术止血区域的大小，应用不同规格的棉片，其不仅可以贴敷于出血区域具有精确压迫止血的作用，同时可以起到避免血肿形成及抑制周围纤维细胞增生达到预防周围组织瘢痕增生的作用，其中均匀附有丝裂霉素C和积雪苷。

2.根据权利要求1所述的多功能的含丝裂霉素的止血防粘连棉片的制作方法，其特征在于，所述的棉片具有根据不同的手术需求，具有四种不同的大小规格：规格1：宽0.5cm×长1.0cm；规格2：宽1.0cm×长2.0cm；规格3：宽2.0cm×长6.0cm；规格

4：宽4.0cm×长10.0cm；达到局部精确有效止血的作用。

3.根据权利要求2所述的多功能的含丝裂霉素的止血防粘连棉片的制作方法，其特征在于，所述的不同的大小规格的棉片应用于止血区域具有预防血肿形成的作用。

4.根据权利要求1所述的多功能的含丝裂霉素的止血防粘连棉片的制作方法，其特征在于，所述的棉片具有预防周围纤维细胞增生的作用。

5.根据权利要求1所述的多功能的含丝裂霉素的止血防粘连棉片的制作方法，其特征在于，所述的棉片具有预防局部瘢痕组织粘连的作用。

说明书

一种多功能的含丝裂霉素的止血防粘连棉片

技术领域

[0001] 本发明涉及一种多功能止血棉片，本发明尤其涉及一种具有抗瘢痕、粘连、术后感染等多功能的含丝裂霉素的止血防粘连棉片。

背景技术

[0002] 术后瘢痕粘连是外科最常见的并发症，严重影响患者的功能及外观，其发生机制为手术局部血肿形成和成纤维细胞增生，其中局部血肿形成是瘢痕粘连形成最主要的原因。目前棉片是公认的术中最好的压迫止血材料。手术创伤及血肿所造成瘢痕增生粘连往往是许多外科手术疗效不佳甚至失败的原因，一种既能良好精确止血又能精确预防瘢痕粘连的棉片将给外科手术带来新的希望。组织瘢痕形成主要是血肿机化和成纤维细胞增殖和胶原等细胞外基质生物合成所致，而目前没有一种兼有压迫止血和防成纤维细胞增殖药物于一体的防粘连产品。丝裂霉素C（Miltomycin C，MMC）具有抗成纤维细胞增殖、抗瘢痕形成等抗纤维增殖的作用，是公认的防粘连最好的抗代谢药物，MMC越来越多的应用于眼科、耳鼻喉头颈外科、整形外科、妇产科、骨科、口腔科和泌尿外科等的各种手术治疗中。手术中一次性给与丝裂霉素C，明显的降低了手术后瘢痕所致的手术失败率。眼科、耳鼻喉头颈外科、整形外科、妇产科、骨科、口腔科和泌尿外科等的相关研究也证实了MMC在0.3-0.5mg/ml浓度下，作用5min能够有效地抑制成纤维细胞增殖，防止瘢痕粘连形成，为粘膜上皮盖创面提供了有利条件，修复后的组织结构正常、功能良好，同时对机体不产生任何毒副作用。 MMC越来越多的应用于手术防瘢痕粘连的治疗，但在具体手术中的应用，多为手术过程中现配现用的方式：术前备好注射用的10mg丝裂霉素C粉剂，配制成浓度为0.3-0.5mg/ml的丝裂霉素C溶液，手术中用注射器吸取适量溶液在弯盘中浸湿棉片，过程注意严格遵守无菌原则，应用于局部手术区域；手术中往往仅应用1-5ml的丝裂霉素C溶液即可，余下的废弃掉，这种方式造成了丝裂霉素C的极大浪费，同时也增加了手术污染的风险，增加了手术的时间。积雪草(Centella asiatica)在我国作为药用植物使用已有两千多年历史，国内资源丰富，遍布长江流域以南地区。国外在20世纪70年代就将积雪草提取物用作促进创伤愈合的药物，经国内外长期使用证实，积雪草总苷及其制剂，外用或内服，对外伤、手术创伤、烧伤、疤痕疙瘩及硬皮病具有疗效确切、安全可靠等特点。

[0003] 现有技术CN200510057223（文献1）中公开了一种包括药物膜层的抗瘢痕药膜，所述药物膜层为含有药物醋酸曲安奈德和硅油的硅凝胶膜层。但该抗瘢痕药膜制作工艺复杂，成本昂贵，临床应用价值有限。且曲安奈德的药物副作用较大，使用后会引起皮肤瘙痒、针刺感等过敏反应，并容易引起患者激素水平改变，皮肤萎缩以及继发感染等病症。因此迫切需要一种成本低廉、使用方便、制作工艺简单且疗效确切的预防瘢痕粘连的棉片。

发明内容

[0004] 本发明的目的在于针对当前眼科、耳鼻喉头颈外科、整形外科、妇产科、骨科、口腔科和泌尿外科等的各种手术应用棉片止血达不到精确止血，多以大面积覆盖压迫，容易留下空隙引起血肿形成，或者止血区域小需要对棉片进行剪裁造成物品浪费；同时棉片仅有止血效果，没有抑制周围纤维细胞增生、预防瘢痕粘连的疗效；同时原有利用丝裂霉素C方法具有现用现配、步骤繁琐、浪费时间、容易污染等不足，提供一种使用方便同时具有抗瘢痕、粘连、术后感染的多功能的含丝裂霉素的止血防粘连棉片。

[0005] 本发明的另一目的在于提供这种棉片的制备方法和使用方法。

[0006] 本发明的止血棉片中优选含有丝裂霉素C和积雪苷。

[0007] 本发明所述的含有丝裂霉素C和积雪苷的棉片，以医用棉片为载体，将医用棉片分别经过丝裂霉素C溶液和积雪苷溶液浸泡后真空干燥，得到均匀附着有丝裂霉素C和积雪苷的棉片。棉片的制作原料与医用的脑棉相同，对周围血管、神经等刺激反应小，不仅可以用于手术中压迫止血，更重要的是可以防止术后组织瘢痕粘连。丝裂霉素C溶液的质量浓度优选0.3mg/ml -0.5mg/ml；积雪苷溶液的浓度为0.008g/ml-0.1g/ml。

[0008] 本发明所述的多功能的含丝裂霉素的止血防粘连棉片，根据眼科、耳鼻喉头颈外科、整形外科、妇产科、骨科、口腔科和泌尿外科等不同部位手术设计四种不同规格的含有丝裂霉素C的棉片：规格1：宽0.5cm×长1.0cm；规格2：宽1.0cm×长2.0cm；规格3：宽2.0cm×长6.0cm；规格4：宽4.0cm×长10.0cm。小规格棉片对于狭小腔道及精细手术止血具有明显的优势，大规格棉片的应用可以使较大创面得到清晰有效的止血；合适大小规格的棉片应用于止血区域具有预防血肿形成的作用；棉片具有预防周围纤维细胞增生的作用。

[0009] 根据不同手术的需求，有相应的规格和相应活性药物（即MMC和积雪苷）质量浓度的棉片与之适应。本发明产品减少了棉片叠加所致物品浪费的同时也避免了叠加空隙血肿的形成；另外本发明产品也避免了手术中配制溶液与剪切棉片至合适大小的过程，节约手术操作时间，使手术简捷迅速，减少手术污染的风险。

[0010] 本发明所述的棉片的具体制备方法，包括如下步骤：

[0011] （1）配制丝裂霉素C溶液：将丝裂霉素C溶解到培养液中，配制成0.8-2mg/ml储存浓度的溶液，冻存于-20度。使用时按需配制成合适的质量浓度。使用溶液的质量浓度优选0.3mg/ml、0.4mg/ml或0.5mg/ml。培养液可使用任意常用的培养液，例如无血清培养液，含
10%血清培养液，优选使用PBS或RPMI-1640培养液；

[0012] （2）配制积雪苷溶液：积雪草总苷2.5～10g、加入适量的溶剂中，搅拌10-100分钟，待溶解后、加溶剂至100～300ml，搅拌30分钟备用。溶剂可使用任意可溶解积雪草总苷的溶剂，例如水，优选纯化水；无水乙醇，以及水与乙醇任意比例的混合溶剂，积雪苷溶液的浓度为0.008g/ml至0.1g/ml，优选0.02、0.03、0.05g/ml；

[0013] （3）将医用棉片完全浸入上述丝裂霉素C溶液中5-10分钟，去除气泡；

[0014] （4）浸泡3～8分钟，将棉片再放入积雪苷溶液5-15分钟，放入平整漏网中，静置3～8分钟，待无液滴滴下；

[0015] （5）将棉片在通风处干燥；

[0016] （6）将干燥后的含有丝裂霉素C和积雪苷的棉片切割成相应规格，灭菌，包装。

[0017] 本发明所述的多功能的含丝裂霉素的止血防粘连棉片的使用方法，包括如下步骤：取适当规格的棉片覆盖于渗血区域，棉片吸收周围的液体成分膨胀而压迫止血，待明确止血效果后去除，再用适量生理盐水冲洗即可。

[0018] 本发明棉片用于外科手术，一次性使用，用后清除，并不植入体内。

[0019] 本发明与现有技术相比，其有益效果为：

[0020] （1）本发明根据手术止血范围大小设计相应规格的止血棉片，达到精确压迫、精确止血的目的，止血清晰有效；而传统大面积压迫的方法难于观察止血效果而且容易造成血肿在叠加棉片周边缝隙形成，止血模糊、效果不佳。

[0021] （2）本发明在精确止血的同时，可以达到精确预防出血区纤维细胞增生及瘢痕粘连的作用，使治疗更加精确化，手术疗效更佳化；棉片精确压迫止血的同时，棉片中含有丝裂霉素C和积雪苷，精确覆盖于棉片覆盖区，达到精确抑制瘢痕成纤维细胞的过度增生，降低纤维变性，避免了无序的瘢痕增生的作用效果。达到精确预防瘢痕粘连的手术疗效；而传统使用方法，容易造成丝裂霉素C溶液播散至正常组织而影响愈合。

[0022] （3）本发明设计合理，结构简单，利用眼科、耳鼻喉头颈外科、整形外科、妇产科、骨科等不同手术对棉片的大小需求不同，设计四种不同规格、含有一定浓度范围的丝裂霉素C的棉片，使无论是相对狭小的手术区域还是相对开阔的手术区域均有与之相应的棉片应用，提高手术的治疗效果，使手术过程操作简捷，节约手术时间，降低手术风险。

[0023] （4）本发明多功能的含丝裂霉素的止血防粘连棉片中含有一定浓度的丝裂霉素C，手术中不需当场配制，只需选择合适的棉片应用于相应的治疗区域，使应用与消耗等同，避免了传统使用方法对丝裂霉素C的浪费，降低医疗消耗，减少患者的医疗费用；与当今的当场配制、裁剪应用方式相比具有明显的优点。

附图说明

[0024] 图1：使用本发明的止血棉片与使用对比例1的棉片临床对比图片。

具体实施方式

[0025] 下面对本发明技术方案进行详细说明，但是本发明的保护范围不局限于所述实施例。

[0026] 实施例1：预防瘢痕粘连的丝裂霉素C和积雪苷棉片，以医用棉片为载体，将医用棉片经过一定浓度的丝裂霉素C溶液和积雪苷溶液浸泡后干燥，得到均匀附着有丝裂霉素C和积雪苷的棉片。具体制作方法为：

[0027] 以100cm×100cm的未切割棉片为例：

[0028] 称取100g丝裂霉素C，溶于含有100L的100cm×100cm×20cm容器中，混合均匀，配制成1mg/ml的溶液，冻存于-20度。配制0.4mg/ml丝裂霉素C溶液，倒入100L的100cm×100cm×20cm容器中，将10张100cm×100cm的棉片完全浸入其中，浸泡5min，混匀，脱气，称取3.0g积雪草总苷加入适量的水中，搅拌10分钟，待溶解后加水至100ml，搅拌30分钟，将棉片再放入积雪苷溶液5-15分钟，将其分别放置于大小为105cm×105cm的漏网中，静置5min，真空干燥，切片，灭菌，包装。

[0029] 实施例2：按照实施例1相同的方法制作棉片，区别仅有使用0.3mg/ml丝裂霉素C溶液。

[0030] 实施例3：按照实施例1相同的方法制作棉片，区别仅有使用0.5mg/ml丝裂霉素C溶液。

[0031] 实施例4：按照实施例1相同的方法制作棉片，区别仅有称取2.0g积雪草总苷加入适量的30%乙醇水溶液中。

[0032] 实施例5：按照实施例1相同的方法制作棉片，区别仅有称取5.0g积雪草总苷加入适量的水中。

[0033] 实施例6：按照实施例1相同的方法制作棉片，区别仅有称取8.0g积雪草总苷加入适量的水中，搅拌10分钟，待溶解后加水至300ml。

[0034] 对比例1：将医用棉片经过生理盐水浸泡后干燥得到对比棉片。

[0035] 使用按照本发明实施例1-6和对比例1制作的棉片分别应用于100例外科临床手术中，覆盖于渗血区域，棉片吸收周围的液体成分膨胀而压迫止血，待明确止血效果后去除，再用适量生理盐水冲洗即可。使用本发明的棉片后出现瘢痕增生等术后并发症的比例为3%，使用对比例1的棉片出现瘢痕增生等术后并发症的比例为18%。图1显示了使用本发明的止血棉片与使用对比例1的棉片临床对比图片。A：使用按照实施例制作的棉片后硬脊膜外瘢痕较少，周围组织疏松；B：使用按照对比例1制作的棉片后硬脊膜外瘢痕较多，硬膜囊受压明显。

[0036] 从上述对比效果以及图1可以看出，本发明的棉片具有优异的预防瘢痕粘连的手术疗效。