本发明公开了一种中药组合物的薄层色谱检测方法，包括以下步骤：a、制备供试品溶液；b、制备对照品溶液；c、将供试品溶液、黄芪甲苷的对照品溶液、齐墩果酸的对照品溶液、松脂醇二葡萄糖苷的对照品溶液，分别点样于同一硅胶板，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，以2％香草醛硫酸溶液为显色剂，105℃加热至斑点显色清晰；d、检视显色后的硅胶板，即可。本发明中药组合物的薄层色谱检测方法，可以对中药组合物中的黄芪、女贞子、杜仲同时进行检测，检测结果准确、可靠，同时，本发明方法具有工序少、操作简便、检测时间短、成本低等优点，非常适合产业上的应用。
1.一种中药组合物的薄层色谱检测方法，其特征在于：所述鉴别方法包括以下步骤：a、制备供试品溶液：取中药组合物，加入甲醇A，超声处理，过滤，取上清液；上清液用微孔滤膜滤过，蒸干，残渣用10％v/v氨水溶解后，用水饱和正丁醇萃取，得到萃取液；将萃取液蒸干，残渣用甲醇B溶解，即得供试品溶液；
b、制备对照品溶液：取黄芪甲苷、齐墩果酸、松脂醇二葡萄糖苷分别用甲醇溶解，得到黄芪甲苷的对照品溶液、齐墩果酸的对照品溶液、松脂醇二葡萄糖苷的对照品溶液；
c、将供试品溶液、黄芪甲苷的对照品溶液、齐墩果酸的对照品溶液、松脂醇二葡萄糖苷的对照品溶液，分别点样于同一硅胶板，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，以2％香草醛硫酸溶液为显色剂，105℃加热至斑点显色清晰，得到显色后的硅胶板；其中，氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水中，氯仿、乙酸乙酯、甲醇、水的体积比为20：40：
所述中药组合物是由以下原料组成：黄芪、女贞子、杜仲。
2.根据权利要求1所述的薄层色谱检测方法，其特征在于：步骤a中，所述中药组合物是由以下重量份数的原料组成：黄芪18份、女贞子9份、杜仲9份。
3.根据权利要求1或2所述的薄层色谱检测方法，其特征在于：步骤a中，所述中药组合物按照以下步骤制备而成：①、取黄芪、女贞子、杜仲，粉碎至80目，烘干，分别得到黄芪粗粉、女贞子粗粉、杜仲粗粉；
②、在-10℃～-20℃条件下，将步骤①得到的黄芪粗粉进一步粉碎至100目～800目的粒度，得到黄芪超微粉；
③、将女贞子粗粉与杜仲粗粉混合，用水煎煮两次，过滤，浓缩，得到浓缩液；
④、将步骤③得到的浓缩液与步骤②得到的黄芪超微粉混匀，制粒，烘干，过80目筛，即得。
4.根据权利要求1所述的薄层色谱检测方法，其特征在于：步骤a中，中药组合物与甲醇A的重量体积比为1：15g/ml；甲醇A、10％v/v氨水、水饱和正丁醇、甲醇B的体积比为6：2：3：
5.根据权利要求1所述的薄层色谱检测方法，其特征在于：步骤a中，超声处理的时间为
6.根据权利要求1所述的薄层色谱检测方法，其特征在于：步骤b中，黄芪甲苷的对照品溶液、齐墩果酸的对照品溶液、松脂醇二葡萄糖苷的对照品溶液的浓度分别为1mg/ml。
7.根据权利要求1所述的薄层色谱检测方法，其特征在于：步骤c中，所述硅胶板为硅胶G薄层板。
8.根据权利要求1所述的薄层色谱检测方法，其特征在于：步骤d中，显色后的硅胶板，在与对照品色谱相应的位置上，供试品色谱显示相同颜色的斑点。
一种提高动物抵抗力的中药组合物的薄层色谱检测方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种提高动物抵抗力的中药组合物的薄层色谱检测方法。
背景技术
[0002] 薄层色谱(法)是一种常用的中药材鉴别方法，具有设备简单、操作简便、分离速度快、灵敏度和分辨率较高等优点。
[0003] 黄芪，又名黄耆，为豆科植物蒙古黄芪的干燥根，具有补气固表、利水退肿、托毒排脓、生肌等功效，是一种中药材。黄芪的化学成分复杂，主要有皂苷类、黄酮类及其苷类、多糖类、氨基酸类等。女贞子是木犀科女贞属植物女贞的干燥成熟果实，味甘、微苦涩，具有滋补肝肾、明目乌发之功，可用于肝肾阴虚、眩晕耳鸣、须发早白、目暗不明、内热消渴、骨蒸潮热等症状，是一种中药材。女贞子的化学成分复杂，主要有三菇类、黄酮类、苯乙醇类等。杜仲是被子植物门杜仲科杜仲属植物的树皮，是一种中药材。
[0004] 现有技术中，黄芪、女贞子、杜仲及其组合物等药材通常采用薄层色谱进行鉴别，然而，现有的鉴别方法只能对黄芪、女贞子、杜仲中的一种药材进行定性鉴别，如：刘晓庆等(刘晓庆李军胡景莲李晓艳门启鸣康廷国.黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷薄层色谱快速鉴别.辽宁中医药大学学报，2013年7月，第15卷，第7期.)通过特定的前处理制备得到供试品溶液，并选用特定的三氯甲烷-甲醇-水(7.5：2.5：0.2)为展开剂，才能获得薄层斑点清晰、分离度较好的检测结果；周扬等(周扬刘力徐德生.女贞子饮片中特女贞苦的薄层色谱鉴别.中国药业，2013年10月5日，第22卷，第19期.)通过特定的前处理制备得到供试品溶液，并选用特定的乙酸乙醋-丙酮-甲酸-水(6：3：1：1)为展开剂，才能获得薄层斑点清晰、分离度较好的检测结果；刘玲等(刘玲鲍家科.杜仲药材薄层色谱鉴别研究.中国民族民间医药，2013年.)通过特定的前处理制备得到供试品溶液，并选用特定的三氯甲烷-正丁醇-水-乙酸溶液(1：7：1：1)为展开剂，才能获得薄层斑点清晰、分离度较好的检测结果，其展开剂的筛选试验证明了即使是展开剂中各组分量的微小调整也会对检测结果带来非常大的影响。
[0005] 中国文献(翟少钦曹国文李成君.复方黄金颗粒的薄层鉴别.中兽医医药杂志，2010年，第6期.)公开了复方黄金颗粒的薄层鉴别方法，该方法需要对黄芪、女贞子等分别采用不同的前处理制备得到供试品溶液，分别选用不同的展开剂，分别进行薄层色谱检测，该方法不能对复方颗粒中黄芪、女贞子等组分同时进行前处理和薄层色谱检测，存在工序多、操作复杂、检测时间长、成本高等诸多缺陷。
[0006] 因此，需要发明一种工序少、操作简便且可以对黄芪、女贞子、杜仲同时进行检测的新方法。
发明内容
[0007] 本发明的目的在于提供一种中药组合物的薄层色谱检测方法。
[0008] 本发明提供的一种中药组合物的薄层色谱检测方法，包括以下步骤：
[0009] a、制备供试品溶液：取中药组合物，加入甲醇A，超声处理，过滤，取上清液；上清液用微孔滤膜滤过，蒸干，残渣用10％v/v氨水溶解后，用水饱和正丁醇萃取，得到萃取液；将萃取液蒸干，残渣用甲醇B溶解，即得供试品溶液；
[0010] b、制备对照品溶液：取黄芪甲苷、齐墩果酸、松脂醇二葡萄糖苷分别用甲醇溶解，得到黄芪甲苷的对照品溶液、齐墩果酸的对照品溶液、松脂醇二葡萄糖苷的对照品溶液；
[0011] c、将供试品溶液、黄芪甲苷的对照品溶液、齐墩果酸的对照品溶液、松脂醇二葡萄糖苷的对照品溶液，分别点样于同一硅胶板，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，以2％香草醛硫酸溶液为显色剂，105℃加热至斑点显色清晰；
[0012] d、检视显色后的硅胶板，即可。
[0013] 进一步的，步骤a中，所述中药组合物是由以下原料组成：黄芪、女贞子、杜仲。
[0014] 进一步的，步骤a中，所述中药组合物是由以下重量份数的原料组成：黄芪18份、女贞子9份、杜仲9份。
[0015] 进一步的，步骤a中，所述中药组合物按照以下步骤制备而成：
[0016] ①、取黄芪、女贞子、杜仲，粉碎至80目，烘干，分别得到黄芪粗粉、女贞子粗粉、杜仲粗粉；
[0017] ②、在-10℃～-20℃条件下，将步骤①得到的黄芪粗粉进一步粉碎至100目～800目的粒度，得到黄芪超微粉；
[0018] ③、将女贞子粗粉与杜仲粗粉混合，用水煎煮两次，过滤，浓缩，得到浓缩液；
[0019] ④、将步骤③得到的浓缩液与步骤②得到的黄芪超微粉混匀，制粒，烘干，过80目筛，即得。
[0020] 进一步的，步骤a中，中药组合物与甲醇A的重量体积比为1：15g/ml；甲醇A、10％v/v氨水、水饱和正丁醇、甲醇B的体积比为6：2：3：1。
[0021] 进一步的，步骤a中，超声处理的时间为60min；微孔滤膜的孔径为0.45μm。
[0022] 进一步的，步骤b中，黄芪甲苷的对照品溶液、齐墩果酸的对照品溶液、松脂醇二葡萄糖苷的对照品溶液的浓度分别为1mg/ml。
[0023] 进一步的，步骤c中，所述硅胶板为硅胶G薄层板。
[0024] 进一步的，步骤c中，氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水中，氯仿、乙酸乙酯、甲醇、水的体积比为20：40：22：1。
[0025] 进一步的，步骤d中，显色后的硅胶板，在与对照品色谱相应的位置上，供试品色谱显示相同颜色的斑点。
[0026] 本发明中药组合物的薄层色谱检测方法，可以对中药组合物中的黄芪、女贞子、杜仲同时进行检测，检测结果准确、可靠，同时，本发明方法具有工序少、操作简便、检测时间短、成本低等优点，非常适合产业上的应用。
[0027] 显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0028] 以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
[0029] 图1为本发明中药组合物的薄层色谱检测结果，其中，“松”代表“松脂醇二葡萄糖苷”，“甲”代表“黄芪甲苷”，“齐”代表“齐墩果酸”，“样”代表“供试品”。
具体实施方式
[0030] 本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。
[0031] 实施例1、本发明中药组合物的薄层色谱检测方法
[0032] 1、制备中药组合物
[0033] 按重量份数计：黄芪18份，女贞子9份，杜仲9份；将三种药材分别使用万能粉碎机粉碎至80目，烘干，使各粗粉药材的水分控制在6％～8％；在温度为-10℃～-20℃条件下，将黄芪粗粉粉碎至粒度为100～800目粒度的超微粉；将女贞子和杜仲粗粉混合，用水煎煮两次，过滤，混合滤液浓缩，最后将浓缩液和黄芪超微粉混合，制粒后烘干，过80目筛，得到中药组合物。
[0034] 2、检测方法
[0035] 将上述中药组合物颗粒研磨，精密称取粉末2.0g，置于三角瓶中，加甲醇30ml，超声处理60min，过滤，取上清液；上清液用0.45μm微孔滤膜(PTFE)滤过，置于蒸发皿中蒸干；残渣用10ml 10％(V/V)氨水溶解，放置10min，不时振摇；将溶液移至分液漏斗中，用15ml水饱和正丁醇萃取3次；合并萃取液，用蒸发皿蒸干，残渣加5ml甲醇溶解，即得供试品溶液；
[0036] 取黄芪甲苷、齐墩果酸、松脂醇二葡萄糖苷，加入甲醇，分别制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
[0037] 按照薄层色谱法(中华人民共和国药典2010版附录ⅥB)试验，吸取上述供试品溶液、对照品溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水(20:40:22:1)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；其检测结果见图1，在与对照品色谱相应的位置上，供试品色谱显示相同颜色的斑点。
[0038] 本发明中药组合物的薄层色谱检测方法，可以对中药组合物中的黄芪、女贞子、杜仲同时进行检测，检测结果准确、可靠，同时，本发明方法具有工序少、操作简便、检测时间短、成本低等优点，非常适合产业上的应用。
