具有抗癌活性的7‑α‑[9‑(4，4，5，5，5‑五氟戊基亚硫酰基)壬基]‑雌甾‑1，3，5(10)‑三烯‑3，17β‑二醇的酯类衍生物及其制备方法

摘要

本发明提供了一类氟维司群的酯类衍生物及其制备方法。这类化合物是将氟维司群中C‑3、C‑17位上的‑OH酯化后形成的脂肪酸酯类化合物，结构如下式。其中，取代基R为H、碳原子个数为2～22的烷酰基、烯酰基或其立体异构体；取代基R′可以为H、碳原子数目为2～4的烷酰基、烯酰基或其立体异构体；这类脂肪酸酯类化合物作为前体药物，可提高化合物的稳定性，同时极性的降低可使其容易制备成脂肪乳剂、微球等制剂，避免制剂过程中高温等因素引起的化合物的降解和有机溶剂的使用。

权利要求

1.一种如下式A所示的化合物，

其中:

取代基R'选自H、碳原子个数为2至4的烷酰基和烯酰基，取代基R选自碳原子个数为11至22的烷酰基和烯酰基。

2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，

所述取代基R选自碳原子个数为11至22的烷酰基。

3.根据权利要求2所述的化合物，其特征在于，

所述取代基R选自十一烷酰基、十六烷酰基、二十二烷酰基或2-[(3',3')-二甲基-1'-甲基]丁基-5-甲基-(7,7)-二甲基-辛烷酰基。

4.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，

所述取代基R选自含有1至6个碳碳双键、碳原子个数为11至22的烯酰基，其中所述碳碳双键既可以分布在主链上，也可以分布在支链上。

5.根据权利要求4所述的化合物，其特征在于，

所述取代基R选自十一碳-2-烯酰基、二十碳-(5,8,11,14,17)-五烯酰基和二十二碳-(4,7,10,13,16,19)-六烯酰基。

6.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，

取代基R'选自碳原子个数为2至4的烷酰基时，为乙酰基或丁酰基。

7.根据权利要求1或6所述的化合物，其特征在于，

所述取代基R为2-[(3',3')-二甲基-1'-甲基]丁基-5-甲基-(7,7)-二甲基-辛烷酰基或十一碳-2-烯酰基。

8.制备根据权利要求1-7中任一项所述的化合物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：a)对式B的化合物进行C-17位上-OH的酰基化：将式B的化合物与碱性试剂、有机酸、催化剂在溶剂中在室温下搅拌，形成反应混合物，反应制得式A的化合物C-17位上的酰基化粗产品；其中所述溶剂选自一氯甲烷、二氯甲烷、三氯甲烷；

b)将步骤a)所得粗产物进行纯化，除去副产物Ν,Ν-二环基脲，制得式Α的化合物C-

17位上的酰基化纯化产品；

当根据化合物中的所述取代基R'不为H时，所述方法还包括步骤c)将步骤b)所制得的C-17位上的酰基化纯化产品进行C-3位上的酰基化：将步骤b)所制得的C-17位上的酰基化纯化产品与碱性试剂、有机酸、催化剂在溶剂中在室温下搅拌，反应制得式A的化合物C-17和C-3位上的酰基化粗产物；其中所述溶剂选自四氢呋喃、乙酸乙酯；

d)将步骤c)所得粗产物进行纯化，制得式A的化合物的纯化产品；其中，在步骤a)和c)中：所述碱性试剂选自吡啶、2-甲基吡啶、3-甲基吡啶、4-甲基吡啶、2-乙基吡啶、3-乙基吡啶、4-乙基吡啶、5-乙基吡啶、2-甲基-5-乙基吡啶、2-二甲氨基吡啶、4-二甲氨基吡啶；所述催化剂为N,N-二环己基碳二亚胺。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，在步骤a)中，所述有机酸为碳原子个数为2至22的烷基酸或烯酸；在步骤b)中，所述纯化包括将步骤a)所制得的粗产物溶解在四氢呋喃或乙酸乙酯中，然后利用正己烷或正己烷-乙酸乙酯的混合溶剂对其进行沉降、利用硅胶层析柱和/或中性氧化铝吸附法进行分离纯化；在步骤c)中所述有机酸为碳原子个数为2至

4的烷基酸或烯酸；在步骤d)中，所述纯化是利用硅胶柱层析法和乙醇淋洗法进行的，其中，在所述硅胶柱层析法中利用正己烷-乙酸乙酯混合溶剂进行梯度洗脱，正己烷与乙酸乙酯的体积比为50:1-1:1。

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，在步骤a)中，所述碱性试剂选自4-二甲氨基吡啶。

11.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，在步骤c)中，所述碱性试剂选自4-二甲氨基吡啶。

12.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，在步骤c)中，所述溶剂为四氢呋喃。

13.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，在步骤d)中，采用正己烷与乙酸乙酯的体积比为40:1/10:1/5:1进行梯度洗脱。

14.一种包括根据权利要求1-7中任一项所述的式A化合物的组合物，其特征在于，所述组合物为油剂或微球剂。

15.一种包括根据权利要求1-7中任一项所述的式A化合物或根据权利要求14所述组合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途

16.根据权利要求15所述的用途，其特征在于，所述药物用于抑制带有雌激素受体的癌细胞。

17.根据权利要求15所述的用途，其特征在于，所述药物用于抑制乳腺癌细胞。

说明书

具有抗癌活性的7-α-[9-(4，4，5，5，5-五氟戊基亚硫酰基)壬

基]-雌甾-1， 3，5(10)-三烯-3，17β-二醇的酯类衍生物及其

制备方法

技术领域

[0001] 本发明属医药领域，具体涉及到通式A化合物的制备方法，具体来说，涉及到7-α-[9-(4，4，5，5，5-五氟戊基亚硫酰基)壬基]-雌甾-1，3，5(10) -三烯-3，17β-二醇的酯类衍生物及其制备方法。

背景技术

[0002] 7-α-[9-(4，4，5，5，5-五氟戊基亚硫酰基)壬基]-雌甾-1，3，5(10)- 三烯-3，17β-二醇，别名氟维司群(Fulvestrant)，通式如下式B所示，是一类新型的雌激素受体阻断剂，用于抗雌激素疗法治疗无效、雌激素受体呈阳性的绝经后晚期乳腺癌的治疗。

[0003]

[0004] 乳腺癌的最大特点在于它的发生与发展，与体内雌激素水平及其代谢有关。研究表明，在许多乳腺癌患者的肿瘤细胞上均发现有雌激素受体(ER)，且肿瘤生长受到雌激素的刺激，因此降低雌激素的浓度，或阻断雌激素与其受体的结合，可抑制肿瘤细胞的生长和繁殖，是目前治疗乳腺癌的主要方法之一。氟维司群可与雌激素受体竞争性结合，亲和力与雌二醇相似；其还可阻滞受体，抑制雌激素的结合，并激发受体发生形态改变，降低ER浓度而损害肿瘤细胞。氟维司群可下调人体乳腺癌细胞中的ER 蛋白，将ER下调在肿瘤细胞内，使肿瘤的生长最小化。由于本品不改变已存在的肿瘤ER状态，不影响新的ER产生，因此肿瘤继续被“程序化”为ER阳性，这样本品持续发生治疗作用。其最大的优点在于没有一般抗雌激素类药物的部分激动作用和雌激素样活性。

[0005] 现今许多商品化的氟维司群制剂，是采用油为赋形剂的，这主要是考虑一下两方面原因。一方面，氟维司群的稳定性较差，是一个容易降解的药物，其一般在-20℃下保存，常温下不宜太久，否则会影响其纯度。其降解机理暂不清楚，一般认为影响其稳定性的主要原因在于其C-3位、C-17 位的-OH的存在。同时3-、17-位的-OH的存在，增加了药物的极性，增加了药物对胃肠道的刺激，只能做成注射剂。

[0006] 另一方面，与其他甾族化合物一样，氟维司群具有难以配制的某些物理性质，是一个特别亲脂的分子，水溶性极小，大约10ng/mL。US5183514、 CN1394141A中给出了其溶解度(mg/mL，25℃)(水0.001、花生油0.45、芝麻油0.58、蓖麻油20、Migloyl 810 3.06、Migloyl 812 2.72、油酸乙酯1.25、苯甲酸苄酯6.15、肉豆蔻酸异丙酯0.80、Span 85 3.79、乙醇>
200、苯甲醇 >200)。可见，即使在溶解度最大的蓖麻油中，也不可能使氟维司群的浓度达到临床给药要求。因此许多上市的氟维司群制剂不但使用油作为溶剂，并且在其中添加了其他的赋形剂增溶，如乙醇、苯甲酸卞酯、苯甲醇等。这样可以制备成可肌肉注射的、含量不低于45mg/mL的注射剂，且有效血浆浓度(2.5ng/mL)可维持2周。但这些溶剂的加入，增加了制剂中药物沉淀析出的风险，同时会引起注射部位的刺激作用。

[0007] 可见，如何在保证抑制癌细胞效果的同时，对氟维司群进行结构上的改进，尤其是C-3位和C-17位上-OH的改造，使其降低对人体的刺激性，并且提高亲脂性，从而更易于制成可用于人体的制剂，是现有技术中亟待解决的问题。

发明内容

[0008] 因此，本发明的目的在于，对氟维司群结构中C-3位和C-17位上的-OH 进行改进，使其酯化成C-17位含碳原子个数为2至22的酯类(含羧基上C) 化合物，C-3位含碳原子个数为2至4的酯类(含羧基上C)化合物，以增加药物的稳定性和在亲脂性溶剂中的溶解度。

[0009] 本发明的目的是通过以下方式实现的：

[0010] 本发明提供了一种如下式A所示的化合物，

[0011]

[0012] 其中：

[0013] 取代基R′选自H、碳原子个数为2至4的烷酰基和烯酰基，

[0014] 取代基R选自H、碳原子个数为2至22的烷酰基和烯酰基。

[0015] 优选地，

[0016] 取代基R′为H，且取代基R选自碳原子个数为11至22的烷酰基和烯酰基；

[0017] 优选地，

[0018] 所述取代基R选自碳原子个数为11至22的烷酰基，优选为十一烷酰基、十六烷酰基、二十二烷酰基或2-[(3′，3′)-二甲基-1′-甲基]丁基-5- 甲基-(7，7)-二甲基-辛烷酰基。

[0019] 优选地，

[0020] 所述取代基R选自含有1至6个碳碳双键、碳原子个数为11至22的烯酰基，其中，所述碳碳双键既可以分布在主链上，也可以分布在支链上；

[0021] 优选地，

[0022] 所述取代基R选自十一碳-2-烯酰基、二十碳-(5，8，11，14，17)- 五烯酰基和二十二碳-(4，7，10，13，16，19)-六烯酰基。

[0023] 优选地，

[0024] 取代基R′选自碳原子个数为2至4的烷酰基时，为乙酰基或丁酰基。

[0025] 优选地，

[0026] 所述取代基R选自碳原子个数为11至22的烷酰基和烯酰基，优选为 2-[(3′，3′)-二甲基-1′-甲基]丁基-5-甲基-(7，7)-二甲基-辛烷酰基或十一碳-2-烯酰基。

[0027] 示例性地，所述化合物可以具有如下式所示的结构，以下示出了氟维司群酯Ⅰ～Ⅺ的结构式：

[0028]

[0029]

[0030] 此外，本发明还提供了一种制备上述化合物的方法，所述方法包括以下步骤：

[0031] a)对式B的化合物进行C-17位上-OH的酰基化：将式B的化合物与碱性试剂、有机酸、催化剂在溶剂中在室温下搅拌，形成反应混合物，反应制得式A的化合物C-17位上的酰基化粗产物；

[0032]

[0033]

[0034] b)将步骤a)所得粗产物进行纯化，除去副产物N,N-二环基脲，制得式A的化合物C-17位上的酰基化纯化产品；

[0035] 当根据化合物中的所述取代基R′不为H时，所述方法还包括

[0036] 步骤c)将步骤b)所制得的C-17位上的酰基化纯化产品进行C-3位上的酰基化：将步骤b)所制得的C-17位上的酰基化纯化产品与碱性试剂、有机酸、催化剂在溶剂中在室温下搅拌，反应制得式A的化合物C-17和 C-3位上的酰基化粗产物；

[0037] d)将步骤c)所得粗产物进行纯化，制得式A的化合物的纯化产品。

[0038] 其中，在步骤a)中，所述碱性试剂选自吡啶、2-甲基吡啶、3-甲基吡啶、4-甲基吡啶、2-乙基吡啶、3-乙基吡啶、4-乙基吡啶、5-乙基吡啶、2- 甲基-5-乙基吡啶、2-二甲氨基吡啶、4-二甲氨基吡啶，优选选自4-二甲氨基吡啶；所述溶剂选自一氯甲烷、二氯甲烷、三氯甲烷；所述催化剂为脱水剂，优选为N，N-二环己基碳二亚胺；所述有机酸为碳原子个数为2至 22的烷基酸或烯酸；在步骤b)中，所述纯化包括将步骤a)所制得的粗产物溶解在四氢呋喃或乙酸乙酯中，然后利用正己烷或正己烷-乙酸乙酯的混和溶剂对其进行沉降、利用硅胶层析柱和/或中性氧化铝吸附法进行分离纯化；在步骤c)中，所述碱性试剂选自吡啶、2-甲基吡啶、3-甲基吡啶、 4-甲基吡啶、2-乙基吡啶、3-乙基吡啶、4-乙基吡啶、5-乙基吡啶、2-甲基 -5-乙基吡啶、2-二甲氨基吡啶、4-二甲氨基吡啶，优选选自4-二甲氨基吡啶；所述溶剂选自四氢呋喃、乙酸乙酯，优选为四氢呋喃；所述催化剂为脱水剂，优选为N，N-二环己基碳二亚胺；所述有机酸为碳原子个数为2 至4的烷基酸或烯酸；在步骤d)中，所述纯化是利用硅胶柱层析法和乙醇淋洗法进行的，其中，在所述硅胶柱层析法中利用正己烷-乙酸乙酯混合溶剂进行梯度洗脱，正己烷与乙酸乙酯的体积比为50:1～1:1，优选采用 40:1/10:1/5:1梯度洗脱。

[0039] 此外，本发明还提供了一种包括上述式A化合物的组合物，其中，所述组合物的为油剂、脂肪剂或微球剂。

[0040] 此外，本发明还提供了一种包括上述的式A化合物或包括式A化合物的组合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途；所述药物优选用于抑制带有雌激素受体的癌细胞，特别优选用于抑制乳腺癌细胞。

[0041] 本发明还提供了一种用于治疗癌症的方法，其中，所述方法包括向有需要的受试者给予治疗有效量的如上所述的式A化合物；所述方法优选用于抑制带有雌激素受体的癌细胞，特别优选抑制乳腺癌细胞的方法；

[0042] 优选地，所述式A化合物通过注射给药。

[0043] 示例性地，本发明的化合物制备成油剂后，经皮下注射于荷人乳腺癌 MCF-7瘤的裸鼠，考察其抑瘤率，结果表明，此类衍生物具有抗癌活性，用于乳腺癌的治疗。

具体实施方式

[0044] 下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。

[0045] 合成实施例

[0046] 虽然下述实施例中选用的碱性试剂为4-二甲氨基吡啶，但应当理解，也可将吡啶、2-甲基吡啶、3-甲基吡啶、4-甲基吡啶、2-乙基吡啶、3-乙基吡啶、4-乙基吡啶、5-乙基吡啶、
2-甲基-5-乙基吡啶、2-二甲氨基吡啶等试剂作为碱性试剂用于下述实施例中。

[0047] 实施例1 化合物Ⅱ的合成及结构确认

[0048] 在500mL三口圆底烧瓶中加入5g(8.25mmol)氟维司群，用300mL二氯甲烷搅拌溶解，然后顺次加入0.137g(1.1mmol)的4-二甲氨基吡啶 (DMAP)、2.155g(8.41mmol)的棕榈酸、1.672g(8.23mmol)的N，N-二环己基碳二亚胺(DCC)，室温(例如，20±5℃)反应48h，终止反应。

[0049] 反应液过滤除去析出的副产物N，N’-二环己基脲(DCU)，滤液用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，再用水洗涤至中性，旋蒸除去溶剂二氯甲烷，得无色透明胶状液体8.8g，将其用适量乙酸乙酯溶解，冰箱中冷冻(例如，冷冻温度可为-15±3℃)，洗出少量白色固体，过滤除去，如此反复3次。后将滤液旋蒸除去乙酸乙酯，得无色透明胶状液体。将此无色透明液体用少量四氢呋喃溶解，加入到正己烷中，形成大量白色固体，静置，过滤；滤饼再采用上述四氢呋喃溶解、正己烷沉降方法反复3次，得白色粉末状产品，即纯的化合物Ⅱ，60℃真空烘干，得1.5gⅡ(HPLC测定纯度为 99.88％，C18柱，流动相67％THF水溶液，流速1.0mL/min，检测波长 220nm)，摩尔收率22％。

[0050] IR(cm-1)：3209，2922，2852，1607，1503，1446，1385，1106，1055，1014，982。

[0051] 1HNMR(500MHz，CDCl3，ppm)：0.78(s,3H)，0.88(t,3H)，1.01-1.52(t, 32H)，1.59-1.63(t,6H)，1.70～1.76(t,6H)，1.89～1.94(t,2H)，2.10～2.32(t,10H)， 2.61～2.85(t,
8H)，3.74(t,2H)，6.20(d,j＝10Hz,1H)，6.56～7.14(t,3H)。

[0052] 13CNMR(125MHz，CDCl3，ppm)：172.67，154.23，136.88，131.04， 126.93，117.67，113.01，82.02，52.41，50.83，46.49，43.40，42.05，38.23， 36.92，34.74，34.65，33.35，
33.24，31.93，30.51，29.92～28.22，27.24， 25.62，25.00，22.63，14.65，14.09，11.12。

[0053] 实施例2 化合物Ⅰ的合成及结构确认

[0054] 1)反应处理

[0055] 将3g(4.95mmol)氟维司群加入250mL圆底烧瓶中，加入160mL二氯甲烷搅拌溶解，然后顺次加入0.0822g(0.66mmol)DMAP、0.96g十一烷酸 (5.05mmol)、1.02g(4.98mmol)DCC，保持室温(例如，20±5℃)搅拌反应48 小时后，中止反应。

[0056] 2)后处理

[0057] 将反应体系先冷冻，尽可能析出反应的副产物DCU，滤除DCU固体，滤液再以饱和碳酸氢钠溶液洗涤，并水洗至中性，旋蒸除去二氯甲烷，得到无色透明的胶状液体。再以少量乙酸乙酯溶解胶状液体，在冰箱中冷冻 (例如，冷冻温度可为-15±3℃)，直至再无白色固体DCU析出。滤液浓缩除去乙酸乙酯，再以正己烷-乙酸乙酯混合溶剂重结晶，滤除析出白色固体(未反应的原料氟维司群)。母液旋干溶剂后，为无色油状物。采用硅胶柱层析法进一步纯化(洗脱剂为正己烷-乙酸乙酯(1:1，体积比))。旋蒸得无色油状物1.0611g，即化合物Ⅰ(HPLC测定纯度为99.104％，方法同实施例1)，摩尔收率27.7％。

[0058] IR(cm-1)：3385，2926，2855，1756，1494，1463，1199，1152，1059， 1017，985，721。

[0059] 1HNMR(500MHz，CDCl3，ppm)：δ7.28(s,1H)，6.83(d,1H)，6.77 (d,1H)，3.73(t,1H,J＝8Hz)，2.88～1.17(t,57H)，0.89(s,3H)，0.77(s,3 H)。

[0060] 13CNMR(125MHz，CDCl3，ppm)：δ172.64，148.52，137.13，126.91， 122.37，120.10，118.64，81.93，52.75，51.03，46.47，43.33，41.67，38.23， 36.89，34.50，34.45，33.85，
31.89，29.67，29.50，29.63，29.55，29.49，29.46，29.34，29.30，29.26，29.16，29.12，
28.80，28.23，27.11，25.70， 25.01，24.88，22.66，14.62，14.50，11.50。

[0061] 实施例3 化合物Ⅲ的合成及结构确认

[0062] 将3g(4.95mmol)氟维司群加入250mL圆底烧瓶中，加入160mL二氯甲烷搅拌溶解，然后顺次加入0.0822g(0.66mmol)DMAP、1.87g(5.05mmol) 二十二碳烷酸、1.02g(4.98mmol)DCC，保持室温(例如，20±5℃)搅拌反应48小时后，中止反应。

[0063] 将反应液参照实施例2中后处理方法处理，得白色固体粉末 1.016g(HPLC纯度92.634％)(C18柱，流动相75％THF水溶液，流速1.0 mL/min，检测波长220nm)，即化合物Ⅲ，摩尔收率22.1％。

[0064] IR(cm-1)：3607，3424，2919，2851，1754，1495，1471，1199，1153， 1141，1112，1081，985，719。

[0065] 1HNMR(500MHz，CDCl3，ppm)：δ7.28(d,1H)，6.83(d,1H)，6.77 (d,1H)，3.74(t,1H,J＝8Hz)，2.91～1.05(t,79H)，0.89(t,3H)，0.77(s,3 H)。

[0066] 13CNMR(125MHz，CDCl3，ppm)：δ172.64，148.53，137.13，126.91， 122.37，118.64，81.93，52.83，51.11，46.48，43.34，41.68，38.24，36.89， 34.50，33.15，31.94，30.56，
29.94，29.86，29.71，29.67，29.63，29.62， 29.51，29.48，29.37，29.35，29.27，29.17，
29.13，28.81，28.23，27.12， 25.70，25.01，24.88，23.16，22.66，14.50，14.01，11.50。

[0067] 实施例4 化合物Ⅳ的合成及结构确认

[0068] 将3g(4.95mmol)氟维司群加入250mL圆底烧瓶中，加入160mL二氯甲烷搅拌溶解，然后顺次加入0.0822g(0.66mmol)DMAP、1.44g(5.05mmol) 异硬脂酸、1.02g(4.98mmol)DCC，保持室温(例如，20±5℃)搅拌反应48 小时后，中止反应。

[0069] 将反应液参照实施例2中后处理方法处理，得为无色胶状物 1.0028g(HPLC测定纯度为99.312％)(方法参照实施例3)，即化合物Ⅳ，摩尔收率23.2％。

[0070] IR(cm-1)：3396，2928，2866,1748，1494，1466，1364，1198，1149， 1121，1058，1017，984,720。

[0071] 1HNMR(500MHz，CDCl3，ppm)：δ7.28(s,1H)，6.83(d,1H)，6.76 (s,1H)，3.74(t,1H,J＝8Hz)，2.35-1.03(t,71H)，1.09-0.94(t,3H)，0.89(s, 3H)，0.77(s,3H)。

[0072] 13CNMR(125MHz,CDCl3，ppm)：δ171.15，148.60，137.03，126.88， 122.45，118.72，81.94，53.34，53.04，52.82，51.39，50.96，48.46，48.39， 48.32，46.48，43.33，41.68，
38.21，37.92，37.86，37.79，36.89，34.50， 33.16，32.37，32.05，31.11，30.56，30.06，
29.96，29.87，29.69，29.55， 29.50，29.37，29.32，29.18，28.81，28.26，27.11，26.09，
25.65，24.81， 22.66，21.21，19.40，14.61，14.50，11.51。

[0073] 实施例5 化合物Ⅴ的合成及结构确认

[0074] 将0.36g(0.6mmol)氟维司群加入50mL圆底烧瓶中，加入25mL二氯甲烷搅拌溶解，然后顺次加入9.93mg(0.08mmol)DMAP、 0.113g(0.61mmol)十一碳烯酸、0.13g(0.64mmol)DCC，保持室温(例如，20 ±5℃)搅拌反应48小时，终止反应。

[0075] 将反应液参照实施例2中后处理方法处理，得为淡黄色油状物，采用 3次硅胶柱层析法和1次中性氧化铝进一步纯化，蒸干后得淡黄色油状物0.1g(HPLC纯度为96.010％)(方法参照实施例3)，即化合物Ⅴ，收率21.5％。

[0076] IR(KBr，cm-1)：3387，2927，2855，1736，1652，1494，1461，1356， 1312，1198，1154，1121，1059，1016，983，721。

[0077] 1HNMR(500MHz，CDCl3，ppm)：δ7.27(t,1H)，7.15(t,1H)，6.87 (s,1H)，6.82(s,1H)，6.43(t,2H)，5.99(t,1H)，3.74(t,1H,J＝8Hz)，3.2-1.1 (t,51H)，0.89(t,3H,J＝
7Hz)，0.77(s,3H)。

[0078] 13CNMR(125MHz，CDCl3，ppm)：δ170.90，165.38，151.71，148.55， 137.10，135.55，126.91，122.44，120.94，120.12，118.79，81.93，52.77， 51.04，46.50，43.35，41.71，
38.27，36.91，34.51，33.18，31.85，30.56， 29.94，29.87，29.70，29.62，29.51，29.36，
29.34，29.19，29.16，29.09， 28.96，28.81，28.23，27.13，25.70，24.88，22.66，14.50，
13.50，11.10。

[0079] 实施例6 化合物Ⅵ的合成及结构确认

[0080] 将0.36g(0.6mmol)氟维司群加入50mL圆底烧瓶中，加入25mL二氯甲烷搅拌溶解，然后顺次加入9.93mg(0.08mmol)DMAP、 0.185g(0.61mmol)二十碳五稀酸、0.13g(0.64mmol)DCC，保持室温(例如， 20±5℃)搅拌反应48小时后，中止反应。

[0081] 将反应液按照实施例2中后处理方法处理，得淡黄色油状物 0.31mg(HPLC纯度99.195％，方法参照实施例3)，即化合物Ⅵ，收率58％。

[0082] IR(cm-1)：3396，3012，2927，2855，1756，1609，1494，1456，1312， 1198，1137，1058，1018，985，719。

[0083] 1HNMR(500MHz，CDCl3，ppm)：δ7.28(t,1H)，6.84(t,1H,J＝7.5 Hz)，6.77(d,1H)，5.43～5.32(t,10H)，3.74(t,1H,J＝8Hz)，2.87～1.18(t, 55H)，0.97(t,3H,J＝7.5Hz)，
0.77(s,3H)。

[0084] 13CNMR(125MHz，CDCl3，ppm)：δ172.38，137.19，132.05，129.07， 128.84，128.59，128.29，128.22，128.10，127.89，127.03，126.94，122.34， 118.62，81.94，52.76，51.05，
46.48，43.34，41.67，38.23，36.89，34.50， 33.78，33.15，30.56，29.95，29.86，29.68，
29.65，29.50，29.36，29.18， 28.82，28.24，27.12，26.56，25.70，25.66，25.65，25.56，
24.82，22.66， 20.85，14.50，13.50，11.50。

[0085] 实施例7 化合物Ⅶ的合成及结构确认

[0086] 将0.36g(0.6mmol)氟维司群加入50mL圆底烧瓶中，加入25mL二氯甲烷搅拌溶解，然后顺次加入9.93mg(0.08mmol)DMAP、0.2g(0.61mmol) 二十二碳六烯酸、0.13g(0.64mmol)DCC，保持室温(例如，20±5℃)搅拌反应48小时，中止反应。

[0087] 将反应液按照实施例2中后处理方法处理，得淡黄色油状物 0.1165g(HPLC纯度99.051％，方法参照实施例3)，即化合物Ⅶ，收率21.1％。

[0088] IR(cm-1)：3396，3013，2927，2855，1756，1609，1494，1456，1358， 1198，1138，1059，1018，984，719。

[0089] 1HNMR(500MHz，CDCl3，ppm)：δ7.27(t,1H)，6.83(d,1H)，6.77 (t,1H)，5.4～5.3(t,12H)，3.74(t,J＝8Hz,1H)，2.8～1.1(t,55H)，0.97(t,3 H)，0.77(s,3H)。

[0090] 13CNMR(125MHz，CDCl3，ppm)：δ171.88，148.47，137.22，132.05， 129.62，128.58，128.33，128.29，128.26，128.11，128.09，128.04，127.89， 127.64，127.03，126.93，
122.35，118.62，81.94，52.76，51.05，46.48， 43.34，41.67，38.23，36.89，34.50，34.34，
33.14，30.56，29.94，29.85， 29.68，29.65，29.50，29.36，29.18，28.82，28.24，27.12，
25.70，25.66， 25.64，25.55，22.85，22.66，22.58，20.57，14.30，14.10，11.50。

[0091] 实施例8 化合物Ⅷ的合成和结构确认

[0092] 1)反应处理

[0093] 将0.31g(0.4mmol)化合物Ⅴ(实施例5中合成的)、4mL(40mmol) 乙酸酐、0.2g(1.6mmol)、4-二甲氨基吡啶(DMAP)依次加入50mL圆底烧瓶中，加入30mL四氢呋喃溶液，回流反应48小时，终止反应。

[0094] 2)后处理

[0095] 将反应体系冷却后，先水洗至中性，分液，有机层旋干，硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷-乙酸乙酯(40:1/10:1/5:1，体积比))进行梯度洗脱，洗脱液蒸干后得乳白色胶状液体，即化合物Ⅷ。

[0096] IR(cm-1)：3449，2927，2855，1736，1651，1494，1461，1373，1360， 1311，1245，1198，1154，1121，1045，1027，983，896，822，720。

[0097] 1HNMR(500MHz，CDCl3，ppm)：δ7.27(t，1H)，7.15(t，1H)，6.87(t，1H)，6.81(d，1H)，6.40(t，1H)，6.00(d，1H)，5.63(t，1H)， 4.70(t，1H)，2.7～1.1(t，52H)，2.05(t，3H)，0.89(t，3H)，0.82(s，3H)。

[0098] 13CNMR(125MHz，CDCl3，ppm)：δ170.90，165.36，151.72，148.56， 137.07，136.97，126.92，122.43，122.32，120.92，118.73，82.76，52.71， 50.98，46.26，42.94，41.40，
38.20，38.12，37.06，34.50，33.17，32.50， 32.41，31.84，29.85，29.67，29.55，29.49，
29.35，29.32，29.18，29.15， 28.79，28.16，26.96，25.64，22.78，22.65，21.17，14.63，
12.02。

[0099] 实施例9 化合物Ⅸ的合成和结构确认

[0100] 将0.3g(0.35mmol)化合物Ⅳ(实施例4中合成的)、3.5mL(35mmol) 乙酸酐、0.18g(1.44mmol)4-二甲氨基吡啶(DMAP)依次加入50mL圆底烧瓶中，加入30mL四氢呋喃。回流反应48小时，终止反应。

[0101] 将反应液按照实施例8中后处理方法处理，得乳白色胶状液体，即化合物Ⅸ。

[0102] IR(cm-1)：3311，2927，2854，1736，1665，1494，1460，1365，1245， 1200，1045，1027，984，803，720。

[0103] 1HNMR(500MHz，CDCl3，ppm)：δ7.27(t，1H)，6.82(t，1H)，6.76(t，1H)，4.70(t，1H)，2.77～1.08(t，49H)，2.05(t，3H)，0.81～0.95 (t，27H)。

[0104] 13CNMR(125MHz，CDCl3，ppm)：δ174.36,171.23,148.55,136.95, 126.90,122.45,122.39,118.74,118.71,82.76,53.11,53.03,52.81,51.39, 48.45,48.31,46.25,42.94,
41.40,38.07,37.78,37.05,34.50,33.16,32.36, 32.05,31.93,31.44,30.19,30.05,
30.03,29.88,29.67,29.55,29.49,29.35, 29.30,29.17,28.80,28.19,27.52,26.99,
25.66,22.69,21.17,20.35,19.93, 14.63,12.02。

[0105] 实施例10 化合物Ⅹ的合成和结构确认

[0106] 将0.3g(0.35mmol)化合物Ⅴ(实施例5中合成的)、3.5mL(35mmol) 丁酸酐、0.18g(1.44mmol)4-二甲氨基吡啶(DMAP)依次加入50mL圆底烧瓶中，加入30mL四氢呋喃。回流反应48小时，终止反应。

[0107] 将反应液按照实施例8中后处理方法处理，得乳白色胶状液体，即化合物Ⅹ。

[0108] IR(cm-1)：3441,2927,2855,1734,1651,1494,1460,1197,1154,1120, 1092,1019,983,803,720。

[0109] 1HNMR(500MHz，CDCl3，ppm)：δ7.27(t，1H)，7.15(t，1H)， 6.88(t，1H)，6.81(d，1H)，6.40(t，1H)，6.00(d，1H)，5.63(t，1H)， 4.70(t，1H)，2.7～1.0(t，56H)，0.96(t，3H)，
0.88(t，3H)，0.82(t，3H)。

[0110] 13CNMR(125MHz，CDCl3，ppm)：δ173.79，165.38，151.73，148.57， 137.02，136.99，126.93，122.45，122.39，120.60，118.67，82.45，52.73， 50.99，46.28，43.02，41.42，
38.21，38.14，37.10，36.52，36.28，34.51， 33.19，32.51，32.43，31.85，29.86，29.68，
29.56，29.50，29.36，29.33， 29.19，29.17，28.81，28.18，27.58，26.99，25.65，22.82，
22.66，18.69， 14.50，12.02，12.00。

[0111] 实施例11 化合物Ⅺ的合成和结构确认

[0112] 将0.69g(0.89mmol)化合物Ⅳ(实施例4中合成的)、14.5mL(89mmol) 丁酸酐、0.44g(3.52mmol)4-二甲氨基吡啶(DMAP)依次加入50mL圆底烧瓶中，加入69mL四氢呋喃溶液，回流反应48小时，终止反应。

[0113] 将反应体系冷却后，先水洗至中性，分液，有机层旋干，硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷-乙酸乙酯(40:1/10:1/5:1，体积比))进行梯度洗脱，洗脱液蒸干后得粗品，粗品采用多次超声水洗产品的方法，水洗时产品以胶状物的形式附着于瓶壁，洗完水相直接倒出，反复洗至产品再无丁酸臭味为止，最后以乙醇快速淋洗，在减压烘箱中去除溶剂，得乳白色胶状液体，即化合物Ⅺ。

[0114] IR(cm-1)：3448，2390，2857，1750，1734，1609，1494，1465，1364， 1198，1150，1121，1094，1048，1019，984，905，803，732。

[0115] 1HNMR(500MHz，CDCl3，ppm)：δ7.27(t，1H)，6.82(t，1H)， 6.76(s，1H)，4.71(t，1H)，1.09～2.77(t，53H)，0.81～1.08(t，30H)。

[0116] 13CNMR(125MHz，CDCl3，ppm)：δ174.36，173.78，148.54，136.95， 126.90，122.45，122.39，118.73，118.71，82.45，53.33，53.03，52.82， 51.39，48.45，48.31，46.27，43.00，
41.41，38.08，37.76，37.09，36.52， 34.50，33.17，32.36，32.05，31.10，31.07，30.05，
30.03，30.01，29.88， 29.68，29.59，29.55，29.50，29.35，29.31，29.21，29.17，28.81，
28.20， 27.57，27.01，25.67，22.58，22.40，19.93，18.59，14.64，13.69，12.06。

[0117] 理化性质实施例

[0118] 实施例12 氟维司群及其酯衍生物在不同溶剂中的溶解度实验

[0119] 分别精密称取氟维司群和氟维司群的酯类衍生物适量，按照中国药典 2010年版二部凡例中规定，考察比较两者在不同油和溶剂中的溶解度 (mg/mL)，结果如表1所示：

[0120] 表1.氟维司群及其酯类化合物在不同油和溶剂中的溶解度

[0121]溶剂 蓖麻油 大豆油 中链油 PEG400 丙二醇
化合物Ⅱ >100.2 >100 >10 2.9 10.2
化合物Ⅴ ND 122 ND ND 12.2
化合物Ⅰ ND 255 ND ND 2.9
化合物Ⅲ ND 11 ND ND 0.4
化合物Ⅳ ND 28 ND ND 7.1
氟维司群 20* 5 ND 6.9 10.2

[0122] 其中，*指文献值。

[0123] 可见化合物Ⅱ在亲脂性溶剂蓖麻油、大豆油、中链油等中溶解度较氟维司群有明显的增加，而丙二醇中几乎没变化，在亲水性溶剂PEG400中明显变小；同时化合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ等衍生物在亲脂性的大豆油中溶解度明显大于氟维司群。

[0124] 药效实施例

[0125] 实施例13 氟维司群及化合物Ⅱ、Ⅹ对人乳腺癌MCF-7裸鼠异种移植瘤的生长抑制作用

[0126] 试验药物：氟维司群及化合物Ⅱ、Ⅹ均为分散于油中灭菌后制备成油剂形式。

[0127] 实验动物及分组、来源、种系、品系：BALB/c雌性裸小鼠，由中国军事医学科学院实验动物研究中心提供(实验动物生产许可证：SCXK(军) 2007-004)，日龄：35～40天；体重：18～24g。分为阴性对照组、阳性对照组(氟维司群油剂)、药物治疗组(化合物Ⅱ、Ⅹ油剂)，每组5只。

[0128] 给药方法、剂量及时间：阴性对照组为空白溶剂(油)，单次皮下注射 0.2mL/20g；阳性对照组(氟维司群油剂)，单次皮下注射，剂量100mg/kg；药物治疗组(化合物Ⅱ、Ⅹ)，单次皮下注射，剂量均100mg/kg。

[0129] 模型的建立及肿瘤测量方法：取对数生长期的人乳腺癌MCF-7细胞株，在无菌条件下后制备成5×108/mL细胞悬液，以0.1mL接种于裸小鼠右侧腋窝皮下。裸小鼠移植瘤用游标卡尺测量移植瘤直径，待肿瘤生长至 100～300mm3后将动物随机分组。头颈部皮下注射给药体积为0.2mL/20g。给药28天后，小鼠处死，手术剥取瘤块称重。计算抑瘤率(抑瘤率＝(1-实验组瘤重/对照组瘤重)×100％)。结果如表2所示：

[0130] 表2氟维斯群及酯类衍生物对人乳腺癌MCF-7裸鼠异种移植肿瘤生长的抑制作用(X±SD)

[0131]

[0132] 与空白对照组比较，*p<0.05,**p<0.01。

[0133] 结果表明氟维司群及其酯类衍生物Ⅱ、Ⅹ均有抗乳腺癌作用。