6’-O-反式桂皮酰梓醇的正相加压柱层析制备方法

摘要

说明书摘要：本发明涉及中药新药研究领域，具体而言涉及一种6’‑O‑反式桂皮酰梓醇的正相加压柱层析制备方法。所用原料为6’‑O‑反式桂皮酰梓醇含量大于35%的中药提取物（可以是专利：201110400683.6所介绍的“10‑香荚酰梓醇制备的方法”制备10‑香荚酰梓醇后所剩的提取物，也可以是乙醇、甲醇回流提取，经石油醚或乙酸乙酯萃取等方式获得的含有6’‑O‑反式桂皮酰梓醇的植物提取物），通过正相加压柱层析的方法使其纯度>95%。本发明废物利用，节能环保，填料便宜，成本低，一次处理样品量大，效率高，生产周期短，溶剂回收快等特点，适合工业化规模生产。

权利要求

1.一种6’-O-反式桂皮酰梓醇的正相加压柱层析制备方法，其特征在于，以制备10-香荚酰梓醇后所剩的提取物为原料，其中6’-O-反式桂皮酰梓醇的含量在40%-50%之间，乙醇溶解后，用100-200目硅胶均匀拌样，烘干粉碎过60目筛，干法装入样品柱，将样品柱与层析柱串联，用流动相冲洗，收取相应洗脱液，干燥即得。

2.如权利要求1所述一种6’-O-反式桂皮酰梓醇的正相加压柱层析制备方法，其特征在于，拌样时原料与硅胶重量比为1：5-2：1。

3.如权利要求1所述一种6’-O-反式桂皮酰梓醇的正相加压柱层析制备方法，其特征在于，收取洗脱液时以双波长紫外检测器设置波长为235nm、265nm、282nm中的任意两个波长。

4.如权利要求1所述一种6’-O-反式桂皮酰梓醇的正相加压柱层析制备方法，其特征在于，层析柱所用层析硅胶为200-400目，流动相为：环己烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醇、甲醇一种或两种溶剂以一定比例混合使用，加压泵系统压力为80-200 Psi，流速为50-130ml/min。

说明书

6’-O-反式桂皮酰梓醇的正相加压柱层析制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及中药新药研究领域，具体而言涉及一种6’-O-反式桂皮酰梓醇的正相加压柱层析制备方法。

背景技术

[0002] 6’-O-反式桂皮酰梓醇是传统中药胡黄连中的主要成分。6’-O-反式桂皮酰梓醇具有抗菌、保肝、利胆、降血糖等多种功效。国外将6’-O-反式桂皮酰梓醇与其他物质的混合物应用于临床，国内近年来开发了胡黄连环烯醚萜总苷（以6’-O-反式桂皮酰梓醇和10-香甲酰梓醇为主要药效成分），相比较而言，单纯的6’-O-反式桂皮酰梓醇应用于临床药效将更加明确，副作用更小，用药安全性与有效性将更加有保障。经检索，国内专利涉及6’-O-反式桂皮酰梓醇制备的有：2007101643215：使用常压柱层析，工艺简单，但影响效率；2013106189968：使用反相填料层析技术，效率高但成本昂贵，本发明所公开工艺采用加压正相色谱分离方法，相较于上述两专利，具有一次处理样品量大，填料便宜，效率高，使用工艺设备先进等优点。

[0003]

发明内容

[0004] 本发明所用原料为6’-O-反式桂皮酰梓醇含量大于35%的中药提取物（可以是专利（专利号：201110400683.6）所介绍的“10- 香荚酰梓醇制备的方法”制备10-香荚酰梓醇后所剩的提取物，也可以是其他含有6’-O-反式桂皮酰梓醇的植物提取物），通过正相加压柱层析的方法使其纯度>95%。

[0005] 取专利（专利号：201110400683.6）所介绍的“10- 香荚酰梓醇制备的方法”制备10-香荚酰梓醇后所剩的提取物，经检测6’-O-反式桂皮酰梓醇的含量在40% 50%之间（或其~
他含有6’-O-反式桂皮酰梓醇量大于35%的植物提取物），乙醇溶解加拌样硅胶拌样，装入样品柱。

[0006] 取层析硅胶装入层析柱，用流动相冲洗层析柱3-5个柱床体积，将样品柱与层析柱串联起来，用流动相冲洗，流动相为环己烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醇、甲醇一种或两种溶剂以一定比例混合使用。流速50 150ml/min 。~

[0007] 以双波长紫外检测器设置波长为265nm或235nm或282nm，进行检测，以检测峰响应值为依据收集洗脱液，洗脱液干燥即得。具体实施例

[0008] 以下具体实施例明显可以得到纯度>95%的6’-O-反式桂皮酰梓醇，但根据专业技术知识可以对本发明所公开流动相进行微调以得到相同效果，凡不违背本发明精神的改动皆视为本发明内容。

[0009] 实施例 1

[0010] 取专利（专利号：201110400683.6）所介绍的“10- 香荚酰梓醇制备的方法”制备10-香荚酰梓醇后所剩的提取物25g，经检测6’-O-反式桂皮酰梓醇的含量为47%，用乙醇溶解后加37.5g拌样硅胶拌样，装入样品柱。

[0011] 取120g层析硅胶装入层析柱，用流动相（氯仿：甲醇=20:1）冲洗层析柱3-5个柱床体积，将样品柱与层析柱串联起来，用流动相冲洗，流速50ml/min，压力为78psi。

[0012] 以双波长紫外检测器（设置其波长1为265nm，波长2为235nm）进行检测，以检测峰响应值为依据收集洗脱液，回收溶剂，得6’-O-反式桂皮酰梓醇10.3 g，高效液相色谱法检测其纯度为94.6%。

[0013] 实施例2

[0014] 取专利（专利号：201110400683.6）所介绍的“10-香荚酰梓醇制备的方法”制备10-香荚酰梓醇后所剩的提取物40g，经检测6’-O-反式桂皮酰梓醇的含量为36%，乙醇溶解加60g拌样硅胶拌样，装入样品柱。

[0015] 取180g层析硅胶装入层析柱，用流动相（氯仿：乙醇=18:1）冲洗层析柱3-5个柱床体积，将样品柱与层析柱串联起来，用流动相冲洗，流速80ml/min，压力为85psi。

[0016] 以双波长紫外检测器设置波长1为265nm，波长2为282nm，进行检测，以检测峰响应值为依据收集洗脱液，回收溶剂，得6’-O-反式桂皮酰梓醇11.0g，高效液相色谱法检测其纯度为96.0%。

[0017] 实施例 3

[0018] 取专利（专利号：201110400683.6）所介绍的“10- 香荚酰梓醇制备的方法”制备10-香荚酰梓醇后所剩的提取物22g，经检测6’-O-反式桂皮酰梓醇的含量为42%，用乙醇溶解后加34g拌样硅胶拌样，装入样品柱。

[0019] 取120g层析硅胶装入层析柱，用流动相乙酸乙酯冲洗层析柱3-5个柱床体积，将样品柱与层析柱串联起来，用流动相冲洗，流速120ml/min，压力为90psi。

[0020] 以双波长紫外检测器（设置其波长1为235nm，波长2为282nm）进行检测，以检测峰响应值为依据收集洗脱液，回收溶剂，得6’-O-反式桂皮酰梓醇8.3g，高效液相色谱法检测其纯度为95.2%。