一种锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散的应用

摘要

本发明涉及一种锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用。其中，所述锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散，由以下原料按质量份制成：锌基蒙脱石5～10份、钙基蒙脱石8～12份。制剂采用锌基蒙脱石、钙基蒙脱石为本发明药物的有效成分,与药用辅料，通过高温干热灭菌、混合、无菌分装等工艺制成药剂。经过皮肤外用途径给药，可快速凝血并止血，并可防止伤口感染，具有抗菌、消炎作用，并对受损的皮肤有收敛、愈合作用。

权利要求

1.一种锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用，所述锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散，由以下原料按质量份制成：锌基蒙脱石    5～10份

钙基蒙脱石    8～12份；

其中所述的锌基蒙脱石、钙基蒙脱石，均粉碎过500目筛；

所述的锌基蒙脱石是将蒙脱石用酸化后，用水溶性锌盐溶液浸泡或洗脱烘干，并粉碎过500目筛得到，其中的锌离子为锌基蒙脱石标示量5.0～9.5％；

所述的钙基蒙脱石是将蒙脱石用酸化后，用水溶性钙盐溶液浸泡或洗脱烘干，并粉碎过500目筛得到，其中的钙离子为钙基蒙脱石标示量5.0～9.5％。

2.如权利要求1所述的锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用，其特征在于，所述应用是锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散单独应用或者和其它药物配合使用作为药剂的联合应用。

3.如权利要求1所述的锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用，其特征在于，所述皮肤创伤包括皮肤划伤出血、烫伤、跌扑损伤。

4.如权利要求1所述的锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用，其特征在于，所述锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散，由以下原料按质量份制成：锌基蒙脱石    5～8份

钙基蒙脱石    8～10份。

5.如权利要求4所述的锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用，其特征在于，所述锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散，由以下原料按质量份制成：锌基蒙脱石    8份

钙基蒙脱石    10份。

6.如权利要求4所述的锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用，其特征在于，所述锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散，由以下原料按质量份制成：锌基蒙脱石    7份

钙基蒙脱石    9份。

7.如权利要求4所述的锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用，其特征在于，所述锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散，由以下原料按质量份制成：锌基蒙脱石    5份

钙基蒙脱石    8份。

8.如权利要求4～7任一所述的锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用，其特征在于，其中所述的锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散按以下方法制成：(1)将配方量的锌基蒙脱石粉碎，过500目筛，放入干热灭菌柜内，温度为170～180℃灭菌，灭菌时间为180～240min，降至室温备用；

(2)将配方量的钙基蒙脱石粉碎，过500目筛，放入干热灭菌柜内，温度为250～300℃灭菌，灭菌时间为120min，降至室温备用；

(3)将步骤(1)、步骤(2)得到的物料投入已灭菌的混料罐中；进行搅拌并混合均匀后；

无菌分装即得锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散。

说明书

一种锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散的应用

技术领域

[0001] 本发明涉及一种止血散的应用，特别涉及一种锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散的应用，属于医药技术领域。

背景技术

[0002] 血液是一种包含血浆以及分散在血浆中的红细胞、白细胞、微粒和血小板的液体组织，血浆中还包含水分、酸、类脂、可溶性电解质以及蛋白质。悬浮在血浆中的一种特殊的蛋白质为纤维蛋白原，在出血的情况下，血纤维蛋白原可与水和凝血酶作用形成不溶于血纤维蛋白并进一步聚合形成凝块，阻止出血。在正常情况下，动物体(包括人体)受伤出血时，血液中的纤维蛋白原可发挥上述功能，起到止血的作用。

[0003] 在多种情况下，较小的伤口所造成的出血可由血液自身的凝血功能以及外加的一些护理措施而得以抑制。在其他情况时如果在大量出血的情况下，则必需特定的设备和材料以及专业医务人员进行抢救。出血致残一直是战伤阵亡和平时意外伤死亡的主要原因，虽然近代战争中军械装备不断升级，但止血技术仍较传统，多为止血带包扎加压止血。虽止血有效，但副作用明显，如时间过长会引起神经麻痹，严重时还会引起肢体损伤，甚至导致局部组织坏死。快速止血急救装备是目前国际上正在加速研究的项目，它能帮助战伤或严重意外伤病人立即止血，为送医院抢救赢得宝贵时间。

[0004] 随着各国医学界对止血材料止血性能要求的提高，开发出止血效果更佳的材料势在必行。首先，作为止血敷料或止血剂的材料要具备良好的止血性能，优良的生物相容性，无毒、无副作用、无刺激性易于加工成型等。因此，从现有的条件出发，寻找自然界中优良的生物材料并加以加工、改进就成为一种理想的选择。其次，可根据各种止血材料不同的性能，采用多种止血材料联用的方法，使材料发挥更好的止血性能。此外，止血材料止血方法和止血途径的研究有待进一步加强，以便开发出与现有止血途径不同的止血材料。为人类健康作出新的贡献。

[0005] 中国专利文献CN101677848A公开了一种具有加入的钙盐非钙沸石在止血装置和产品中的用途，该专利所述药剂由沸石与水溶性的钙盐进行离子交换所得。众所周知，沸石是一类天然硅铝酸盐矿石，现在已发现的有40种，然而经结构测定的还不到30种，主要有方沸石、浊沸石、钙十字沸石、钠沸石、丝光沸石、片沸石、斜发沸石、菱沸石、八面沸石等，该专利存在以下缺陷；1、该专利未表述使用的何种沸石，每种沸石所具备的活性点是不一样的，所使用的应用方向大有不同；2、沸石具有较强的吸水性，该矿物质在吸水过程中，产生较高的温度，可造成一定程度的热损伤；3、天然沸石含有较多的致病菌的存在，该专利整个制备过程并未描述无菌制备过程；4、由于沸石矿物颗粒较粗，在该专利中未表述选择沸石的粒径，在制备止血剂中如含有较大的颗粒，容易造成皮肤二次损伤，并对伤口愈合产生不利因素。中国专利文献CN101104080公开了沸石止血敷料及其制备方法和用途，该专利所述药剂是4A沸石、粘结剂、木质素以及任选的分子筛活化粉制备的沸石止血敷料为原料，其中的所述沸石止血敷料的主要成分及含量为：Al2O3在25～35％之间，SiO2在30～40％之间，以及CaO在10～18％之间，Na2O含量在1％以下，粒径在大于0.2至小于1mm的范围内。该发明的含沸石止血敷料止血速度快、无菌、无热原、无细胞毒性、无致敏反应、无皮肤刺激性、使用方便且成本低。该专利存在以下缺陷：但该专利只具有止血功能，而无对创伤面的收敛和愈合功能。

[0006] 目前，现有的止血材料中，存在着仅对创伤口的止血作用，而无对创伤口的收敛和愈合功能，并且存在止血材料不具备抑菌性等，容易引起伤口感染，还有可能形成有利于细菌生长的环境，造成伤口反复感染，不易愈合。总之，以上现有技术的治疗方法都存在不同程度的缺陷，使临床应用受到很大限制。为满足广大患者的临床需求，本领域技术人员多年来一直在寻求研制开发安全、高效，质量可控、使用方便的止血散剂。

[0007] 蒙脱石是一种矿物药，是一种含水的层状硅酸盐矿物，其单位晶胞由两层硅氧四面体片和一层铝氧八面体片组成，属于典型的其四面体中的Si4+可以被AL3+置换，八面体中4+ 3+ 2+ 2+ 3+ 2+ 2+
的Si 、AL 易被Mg 、Fe 、Fe 、Zn 、Mn 等置换，使蒙脱石晶体产生层间负电荷。蒙脱石的这些特征赋予它遇水特有的膨胀、吸附、带电和离子交换特性，使之用于药学上具有独特的优势。该药物是治疗腹泻和消化道溃疡以及胃肠道保护常用药物并在临床上已取得较好的疗效。目前，蒙脱石制剂主要为口服制剂，临床用于成人及儿童急、慢性腹泻等。迄今为止，蒙脱石改性成锌基蒙脱石、钙基蒙脱石用于制备锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散尚未见报道。

发明内容

[0008] 为了解决现有技术中的上述缺陷，本发明提供了一种锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用。

[0009] 发明概述

[0010] 本发明采用以锌基蒙脱石与钙基蒙脱石为药物的有效成份，制备皮肤创伤愈合的药物，实现止血、抗菌、促愈和止痛效果以及良好的透气、吸液性能。

[0011] 本发明使用的锌基蒙脱石、钙基蒙脱石能够解离出游离的锌离子、钙离子和蒙脱石；将无菌止血散的药剂撒敷于皮肤创伤处，可发挥以下作用：(1)无菌止血散中解离出的蒙脱石遇到血液后，会形成凝胶，能够压迫性地阻止血的进一步外流，从而快速止血；(2)解离出的蒙脱石还可以吸附伤口中的细菌，阻止细菌的繁殖，防止伤口感染，所形成的凝胶在伤口表面和四周可以作为保护层，阻止外界的细菌入侵；(3)锌基蒙脱石解离出的锌离子具有抗菌、消炎作用，并对受损的皮肤有收敛、愈合作用；(4)钙基蒙脱石解离出的钙离子可缩短出血时间及血浆复钙时间。

[0012] 发明详述

[0013] 术语说明：

[0014] 锌基蒙脱石(Zn-蒙脱石)：是将蒙脱石用酸化后，用水溶性锌盐溶液浸泡或洗脱烘干，并粉碎过500目筛得到，其中的锌离子为锌基蒙脱石标示量5.0～9.5％；可市购或按现有方法制备。

[0015] 钙基蒙脱石(Ca-蒙脱石)：是将蒙脱石用酸化后，用水溶性钙盐溶液浸泡或洗脱烘干，并粉碎过500目筛得到，其中的钙离子为钙基蒙脱石标示量5.0～9.5％；可市购或按现有方法制备。

[0016] 皮肤创伤：是指由于外伤或其他伤病造成皮肤等组织出现离断或缺损，包括皮肤划伤出血、烫伤、跌扑损伤。

[0017] 室温：是指实验操作所处的环境温度，控制在15～30℃范围内。

[0018] 本发明的技术方案如下：

[0019] 一种锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用。

[0020] 根据本发明，锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用，所述应用是锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散单独应用或者和其它药物配合使用作为药剂的联合应用。

[0021] 根据本发明，锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用，其中，所述皮肤创伤包括皮肤划伤出血、烫伤、跌扑损伤。

[0022] 根据本发明，锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用，其中，所述锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散，由以下原料按质量份制成：

[0023] 锌基蒙脱石  5～10份

[0024] 钙基蒙脱石  8～12份；

[0025] 根据本发明，优选的；

[0026] 锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用，其中，所述锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散，由以下原料按质量份制成：

[0027] 锌基蒙脱石  5～8份

[0028] 钙基蒙脱石  8～10份；

[0029] 根据本发明，进一步优选的；

[0030] 锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用，其中，所述锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散，由以下原料按质量份制成：

[0031] 锌基蒙脱石  8份

[0032] 钙基蒙脱石  10份；

[0033] 或者,

[0034] 锌基蒙脱石  7份

[0035] 钙基蒙脱石  9份；

[0036] 或者,

[0037] 锌基蒙脱石  5份

[0038] 钙基蒙脱石  8份。

[0039] 其中所述的锌基蒙脱石、钙基蒙脱石，粉碎过500目筛。

[0040] 根据本发明，所述的锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在制备皮肤创伤愈合的药物中的应用，其中所述的锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散按以下方法制成：

[0041] (1)将配方量的锌基蒙脱石粉碎，过500目筛，放入干热灭菌柜内，温度为170～180℃灭菌，灭菌时间为180～240min，降至室温备用；

[0042] (2)将配方量的钙基蒙脱石粉碎，过500目筛，放入干热灭菌柜内，温度为250～300℃灭菌，灭菌时间为120min，降至室温备用；

[0043] (3)将步骤(1)、步骤(2)得到的物料投入已灭菌的混料罐中；进行搅拌并混合均匀后；无菌分装即得锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散。

[0044] 就制备方法而言，以上是本发明的优选方法，但不限于此。

[0045] 以上所述锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散制备方法中未特别限定的，可参照现有技术。本领域的技术人员根据其熟知的知识，可以适当加以调整。

[0046] 本发明所述的制备方法中锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散质量标准如下、但不限以下所述锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散标准。

[0047] 锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散

[0048] 本品含锌基蒙脱石与钙基蒙脱石应为标示量的97.0％～105.0％；其中锌离子为锌基蒙脱石与钙基蒙脱石标示量3.5～5.5％，钙离子为锌基蒙脱石与钙基蒙脱石标示量3.5～5.5％。

[0049] 【性状】本品为类白色粉。

[0050] 【鉴别】取本品0.5g，置具塞瓶中，加入纯化水50ml，加入盐酸调pH值为3.5～4.5；超声波处理20分钟，离心、过滤，取滤饼置烘箱105℃干燥2小时后，放入干燥器内约12小时(干燥器内盛有氯化钠饱和溶液，20℃时相对湿度约78％)，然后将上述供试品照X射线粉末衍射法(中国药典2010年版二部附录ⅨF)测定，记录图谱，供试品的X-射线衍射图谱应与蒙脱石对照品图谱一致。

[0051] 【检查】无菌：照无菌检查法中国药典2010年版(附录ⅪH)检查，应符合规定。

[0052] 粒度 取供试品10g，精密称定，置七号筛。照粒度和粒度分布测定法(中国药典2010版附录Ⅸ E第二法单筛分法)检查，精密称定通过筛网的粉末重量，应不低于95％。

[0053] 其他 应符合散剂项下的各项规定。

[0054] 【含量】

[0055] 锌含量 取锌标准溶液，加水稀释制成每1ml中约含锌分别为0.05μg、0.1μg、0.2μg、0.3μg、0.4μg溶液，为对照品溶液。

[0056] 含锌量 精密称定本品1.0g，精密称定，置瓷皿中，分别加硫酸6ml与硝酸10ml，待反应完全后，置电炉上蒸干，放冷至室温，加入20％浓度盐酸40ml，用玻璃棒搅匀，经滤纸过滤，残渣用热的蒸馏水洗涤3次，滤液合并，置100ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。精密量取10ml溶液置100ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，然后再精密量取10ml溶液置100ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀作为供试品溶液。取对照品溶液与供试品溶液分别测定吸光度，计算样品中的锌含量。

[0057] 含钙量 精密称定本品0.5g；置瓷皿中，分别加浓硫酸98％(w/w)6ml与浓硝酸65％(w/w)10ml，待反应完全后，置电炉上蒸干，放冷至室温，加入水40ml，用玻璃棒搅匀，经滤纸过滤，残渣用热的蒸馏水洗涤3次，滤液合并，置100ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。加氢氧化钠试液15ml与钙紫红素指示剂0.1g，用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液自紫红色转变为纯蓝色。每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于25mg的钙离子。

[0058] 下面结合实验例对本发明做进一步的说明，但不限于此。

[0059] 实验例1：锌基蒙脱石与钙基蒙脱石灭菌实验

[0060] 在本发明所述的应用中，制剂的活性成分锌基蒙脱石、钙基蒙脱石是由蒙脱石改性，颗粒极细的含水铝硅酸盐构成的层状矿物，研究锌基蒙脱石、钙基蒙脱石灭菌方法是确保锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散药物符合质量标准的前提下，保证锌基蒙脱石与钙基蒙脱石止血散药物能够安全使用，具有重大的创新突破。

[0061] 1、锌基蒙脱石灭菌实验

[0062] 不同的干热温度和干热时间对锌基蒙脱石干热灭菌效果的比较，见表1：

[0063] 表1 锌基蒙脱石干热灭菌效果比较

[0064]

[0065] 由表1中可分析得出：

[0066] (1)干热温度在160～170℃、干燥时间在120～240min条件下，锌基蒙脱石X-射线衍射图谱与对照品图谱一致，表明在此条件下干热未对锌基蒙脱石化学结构发生破坏，但无菌检查，不符合规定；

[0067] (2)干热温度在170～180℃，干热时间在120min，锌基蒙脱石X-射线衍射图谱与对照品图谱一致，表明在此条件下干热未对锌基蒙脱石化学结构发生破坏，但无菌检查，不符合规定；

[0068] (3)干热温度在170～180℃，干热时间在180～240min，锌基蒙脱石X-射线衍射图谱与对照品图谱一致，表明在此条件下干热未对锌基蒙脱石化学结构发生破坏，无菌检查，符合规定；详见图1锌基蒙脱石X-射线衍射图谱。

[0069] 结果分析:锌基蒙脱石的灭菌温度选定为170～180℃,时间为180～240min。

[0070] 2、钙基蒙脱石灭菌实验

[0071] 不同的干热温度和干热时间对钙基蒙脱石干热灭菌效果的比较，见表2：

[0072] 表2 钙基蒙脱石干热灭菌效果比较

[0073]

[0074] 由表1中可分析得出：

[0075] (1)干热温度在170～180℃，干燥时间在120～240min条件下，钙基蒙脱石X-射线衍射图谱与标准品图谱一致，表明在此条件下干热未对钙基蒙脱石化学结构发生破坏，但无菌检查，不符合规定；

[0076] (2)干热温度在250～300℃，干热时间在120min，钙基蒙脱石X-射线衍射图谱与标准品图谱一致，表明在此条件下干热未对钙基蒙脱石化学结构发生破坏，详见图2钙基蒙脱石X-射线衍射图谱，无菌检查，符合规定；

[0077] (3)干热温度在250～300℃，干热时间在180～240min，钙基蒙脱石X-射线衍射图谱与标准品图谱对照，表明在此条件下干热对钙基蒙脱石化学结构发生破坏，无菌检查，符合规定。

[0078] 结果分析:钙基蒙脱石的灭菌温度选定为250～300℃,时间为120min。

[0079] 实验例2：锌基蒙脱石与钙基蒙脱石家兔皮肤刺激试验

[0080] 1、试验材料

[0081] (1)药物：取实施例1的锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散作为供试品做此实验，待用。

[0082] (2)动物：健康日本大耳白家兔，体质量2.0～2.4kg，雌雄各半，由山东大学实验动物中心提供。

[0083] (3)方法

[0084] 家兔6只按性别体重随机分为完整皮肤组和破损皮肤组，每组3只。给药前24h将家兔背脊两侧对称脱毛，脱毛面积为家兔体表面积的10％(每侧范围约50cm)。左侧为A区(空白对照区)，B区(70％乙醇对照区)，右侧为C区(锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散给药实验区)。脱毛后24h完整皮肤组左侧A区涂以蒸馏水0.5mL，B区涂以70％乙醇0.5mL，右侧C区用锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散、1日3次。然后用一层塑料纸和两层纱布覆盖后用自制兔套固定。破损皮肤组在给药前用针头在脱毛区皮肤上磨损，以擦伤表皮、不伤真皮、轻度渗血为度，给药方法同完整皮肤组。给药固定6h后取去覆盖物，观察给药部位出现红斑和水肿情况。每日涂抹1次，连续7天。

[0085] 评价方法：按表3、表4分别进行刺激反应及刺激强度评分，评价多次给药对完整与破损皮肤的刺激强度、刺激反应的恢复情况和时间，并与对照组比较见表5。反应平均值的计算方法为红斑形成总分与水肿形成总分的和除以同组实验动物总数。

[0086] 表3 皮肤刺激反应评分标准

[0087]

[0088]

[0089] 表4 皮肤刺激强度评分标准

[0090]

[0091] 表5 对家兔完整皮肤和破损皮肤刺激性评分

[0092]

[0093] 2、结果

[0094] 连续7天皮肤分别给予锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散及赋形剂后，完整皮肤及破损皮肤均无红斑及水肿出现，皮肤刺激反应强度均小于0.5分。停药后1周涂擦药物及其赋形剂部位均无色素沉着、皮肤菲薄及粗糙等现象。表明锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散多次连续给药对家兔完整皮肤和破损皮肤无刺激性，属无刺激性药物，临床应用安全。

[0095] 实验例3：锌基蒙脱石与钙基蒙脱石家兔皮肤过敏实验

[0096] 1、实验材料

[0097] (1)药物：取实施例1的锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散作为供试品做此实验，待用。

[0098] (2)动物:健康雄性Wistar大鼠，体重250～300g，由山东大学实验动物中心提供。

[0099] 2、实验方法

[0100] Wistar鼠12只，分为完整皮肤和破损皮肤过敏实验组，每组6只。每只大鼠按30mg/kg剂量于腹腔注射给予戊巴比妥钠麻醉后进行手术。每只大鼠背部两侧先剪后化学法脱毛，去毛范围每侧约4cm×6cm。破损皮肤组每只动物以灭菌手术刀片，在去毛区划“井”字，以划破表皮渗血为度。

[0101] ①致敏接触：右侧去毛区涂受试药0.2g，左侧涂生理盐水0.2mL作对照，用消毒无刺激性医用纱布覆盖，胶布固定，每只动物分笼饲养，在实验涂以药物持续作用6h，第7天和第14天各重复1次，这一阶段为致敏接触。

[0102] ②激发接触：于末次涂药致敏后第14天，再涂以受试药0.2g 1次，持续6h后去掉实验药物即刻观察，然后24h、48h、72h再次观察皮肤过敏反应情况。这一阶段为激发接触。于末次涂药第14天后，有无充血、水肿、硬结、坏死等反应。整个实验期间观察局部皮肤反应情况(有无发红、红斑及水肿)，以及有无特殊情况出现和变态反应出现。观察动物的食欲、行为活动、对外界反应有无异常。根据反应情况做出过敏反应评分，求出各组动物的平均分，数据用t检验评价组间差异。

[0103] 3、实验结果

[0104] 两组大鼠的饮食、行为活动均正常，无特殊情况和变态反应出现，对外界反应均正常。受试组及对照组大鼠皮肤无红斑和水肿形成，受试组及对照组大鼠皮肤反应值皆为0、致敏率为0，无过敏反应，锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散对大鼠皮肤无致敏性。

[0105] 4、实验结论

[0106] 锌基蒙脱石与钙基蒙脱石止血散对大鼠完整皮肤及破损皮肤均无过敏性反应，表明其毒性低，副作用小，用药安全可靠。

[0107] 实验例4：锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散抑菌活性研究实验

[0108] 1、抑菌浓度

[0109] 锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散中含有锌基蒙脱石，锌基蒙脱石能与细菌细胞膜的膜蛋白结合，当其与细菌接触时，锌离子可缓慢释放出来，破坏了细菌的结构，并进入其细胞中破坏电子传递系统的酶，同时与DNA反应，起到杀菌作用。在杀灭细菌后，锌离子从细胞内游离出来，重复上述杀菌过程发现，锌基蒙脱石具有持久的抑菌活性。

[0110] 表6列出了以四环素(s)为对照品，不同浓度锌基蒙脱石与钙基蒙脱石止血散(实施例1制备)对(A)金黄色葡萄球菌；(B)大肠埃希菌；(C)铜绿假单胞菌；(D)沙门氏菌的抑菌情况，M为锌基蒙脱石与钙基蒙脱石止血散的质量浓度，其中M1＝0.002g/mL、M2＝0.006g/mL、M3＝0.02g/mL、M4＝0.2g/mL，抑菌圈直径(mm)大小表示抑菌活性的强弱，见表6。

[0111] 表6 为不同浓度锌基蒙脱石抑菌圈直径(mm)

[0112]

[0113] 由表6可知，质量浓度为0.001和0.005g/mL的锌基蒙脱石有一定抑菌活性，当锌基蒙脱石的质量浓度为0.02和0.2g/mL时，抑菌活性基本相同，无显著差异，表明随着锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散止血散质量浓度的增加，其抑菌活性达到一个稳定值，锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散抑菌有效浓度为0.02g/mL。

[0114] 2、抑菌活性

[0115] 质量浓度为0.02g/ml的(1)钙基蒙脱石、(2)钠基蒙脱石、(3)锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散对4种细菌的抑菌活性列于表7。

[0116] 表7 为各种蒙脱石抑菌圈直径(mm)

[0117]

[0118] 由表7可知，锌基蒙脱石的抑菌活性明显较高，与钙基蒙脱石和钠基蒙脱石相比有显著差异，并抑菌范围针对这四种菌比四环素广。

[0119] 实验例5：锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散对伤口收敛、愈合影响的组织学研究实验

[0120] 创伤愈合是指机体由于外伤或其他伤病造成皮肤等组织出现离断或缺损后，局部组织通过再生、重建进行修补恢复的一系列病理生理过程，它是医学中最基本的问题之一，同时也是外科领域长期致力于探索的重要临床研究课题。本发明选择兼具有止血、抗菌、促进伤口愈合作用的锌基蒙脱石与钙基蒙脱石散剂，并应用病理实验技术观察在伤口愈合过程中对创面组织影响的组织学变化且探讨其机制，为临床上探索一条促进伤口愈合的有效途径，并为皮肤创伤愈合临床研究提供可靠的实验依据。

[0121] 1、材料和方法

[0122] 1.1材料

[0123] 实验动物：健康家兔24只，雌雄各半，体重2.5～3.0kg(购于山东大学非临床研究中心)；

[0124] 药品：锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散实施例1方法制备；

[0125] 1.2实验方法

[0126] 动物模型建立方法：以手术切割方法造模，造模前一天家兔背部以8％硫化钠脱毛备皮。术前腹腔注射2％戊巴比妥钠(30mg/kg)，家兔俯卧位，常规碘伏消毒后，距脊柱正中旁开2cm处做皮肤全层切口，面积约2cm×2cm，共6个，左右各3个，创面间隔约2cm。用生理盐水冲洗伤口，消毒后备用。

[0127] 实验动物分组：将家兔随机分为三组：空白组(即盐水处理组)、实验组l(即蒙脱石组)、和实验组3(锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散组)，每组均为8只，分别给予生理盐水、蒙脱石、锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散治疗。即术后第3、5、7和10天组和伤口自然愈合组。

[0128] 取材：四组家兔在术后第3、5、7、10天分别于伤口处距边缘约0.2cm取全厚皮肤组织。所取组织中部分用4％多聚甲醛及时固定，4℃保存待做石蜡切片及HE、Masson染色。

[0129] 伤口愈合时间的观察：伤口愈合标准以创面面积小于总面积的5％或愈合面积大于95％为完全愈合。

[0130] 伤口愈合速率的观察：各组动物分别在伤后第3、5、7、10天，用0.25cm×O.25cm的透明方格纸测定伤口面积，用德国产ASM.68K半自动图像分析仪计算伤口面积，伤口愈合速率＝愈合面积/原伤口面积。

[0131] 统计学处理：用SAS6.12统计学处理软件，对各种数据进行统计学处理。

[0132] 2、实验结果

[0133] 2.1一般情况：所有动物于麻醉后约2～4h苏醒，开始活动，自由进食、进水。喂养期间动物活动好，食欲可，体重较稳定。

[0134] 2.2伤口愈合率：从表1和表2可见，术后第3天，盐水处理组、蒙脱石、锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散组比较。术后第10天，空白组(盐水处理组)、蒙脱石组、锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散组比较，见表8、表9；

[0135] 表8 术后第三天伤口愈合率的比较 (％)

[0136]

[0137] 注：蒙脱石与空白组(盐水处理组)比较，﹡p＜0.05；锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散与蒙脱石比较p＜0.05；锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散与空白组(盐水处理组)比较，﹡﹡p＜0.01；

[0138] 表9 术后第十天伤口愈合率的比较 (％)

[0139]

[0140] 注：蒙脱石与空白组(盐水处理组)比较，﹡p＜0.05；锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散与蒙脱石比较p＜0.05；锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散与空白组(盐水处理组)比较，﹡﹡p＜0.01；

[0141] 本实验通过观察锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散对伤口愈合的促进作用得出以下几点结论：

[0142] ①蒙脱石能够促进伤口愈合，减少组织液渗出，创面干燥，能减轻局部创口水肿程度，加速肉芽组织生成，加速愈合，能达到收敛生肌的目的，在创面形成保护膜，预防感染。

[0143] ②锌基蒙脱石解离出的锌离子能增强吞噬细胞吞噬功能、趋化活力及杀菌功能，并通过超氧化物歧化酶来保持吞噬细胞内的自由基水平，发挥杀菌作用，加速伤口的愈合；另外锌离子能沉淀蛋白质，外用有收敛防腐作用，帮助肉芽组织形成；提高伤口愈合质量；
其中钙基蒙脱石解离出的钙离子可缩短出血时间及血浆复钙时间。

[0144] ③锌基蒙脱石与钙基蒙脱石通过促进表皮细胞、血管内皮细胞和成纤维细胞增殖分化来加速伤口愈合作用优于单用蒙脱石，其锌基蒙脱石在表皮缓慢释放锌离子，从而有利于蒙脱石最大限度的发挥功效；二者结合有望作为一种新的促进伤口愈合的药物应用于临床，具有良好的临床推广应用前景。

[0145] 实验例6：锌基蒙脱石与钙基蒙脱石散剂中锌离子释放度、钙离子释放度实验[0146] 1、试药和仪器

[0147] 1.1药品：锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散，实施例1、2、3制备；

[0148] 1.2仪器：紫外分光光度计、智能溶出试验仪；

[0149] 2、释放度的测定

[0150] 锌离子释放度取本品1g，按中国药典2010版二部附录XC中的第一法，转速为100rpm，释放介质为以磷酸盐缓冲液(pH6.8)1000ml，温度为(37±0.5)℃，分别于1、1.5、2、
2.5、3h时间点处取样5ml，同时补充同温的释放介质5ml；取出的样品微孔滤膜过滤后，置
100ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。然后再精密量取10ml溶液置100ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀作为供试品溶液。取对照品溶液与供试品溶液分别测定吸光度，计算样品中的锌含量。结果见表10。

[0151] 表10 实施例样品不同时间点锌离子累计释放率(％)

[0152]

[0153] 以时间(小时h)对三批的锌离子累计释放量(％)作曲线，即得各样品的累计释放曲线，结果见附图3。

[0154] 钙离子释放度 取本品1g，按中国药典2010版二部附录XC中的第一法，转速为100rpm，释放介质为以磷酸盐缓冲液(pH6.8)1000ml，温度为(37±0.5)℃，分别于1、2、3、4h时间点处取样5ml，同时补充同温的释放介质5ml；取出的样品微孔滤膜过滤后，置100ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。然后再精密量取10ml溶液置100ml容量瓶中，加氢氧化钠试液15ml与钙紫红素指示剂0.1g，用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液自紫红色转变为纯蓝色。每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于25mg的钙离子，结果见表11。

[0155] 表11 实施例样品不同时间点钙离子累计释放率(％)

[0156]

[0157]

[0158] 以时间(小时h)对三批的钙离子累计释放量(％)作曲线，即得各样品的累计释放曲线，结果见附图4。

[0159] 结果分析：在本发明中锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散中解离出的的蒙脱石即作为缓释材料又作为破损皮肤保护剂，一方面使锌、钙离子缓慢释放，降低了锌、钙离子对皮肤的刺激作用；另一方面对破损皮肤有很强的覆盖保护能力，提高皮肤屏障对攻击因子的防御能力和局部皮肤保护作用。

[0160] 实验例7：锌基蒙脱石与钙基蒙脱石对动物皮肤急性毒性实验

[0161] 1、药物：锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散由实施例2制备，置于研钵中研成细粉，待用。

[0162] 2、动物：健康日本大耳白家兔，体质量2.0～2.4kg，雌雄各半，由山东大学实验动物中心提供。

[0163] (1)方法

[0164] 家兔16只随机分为锌基蒙脱石与钙基蒙脱石完整皮肤组、锌基蒙脱石与钙基蒙脱石破损皮肤组、溶媒完整皮肤组、溶媒破损皮肤组，每组4只。动物受试前24h背部用6％的Na2S去毛，去毛面积80cm2。给药前检查去毛部位皮肤是否因去毛而受损，受伤皮肤不宜做完整皮肤的毒性实验。破损皮肤组造模是在实验前进行。将家兔皮肤消毒后用消毒手术刀作“井”字形划破表皮，以皮肤出现轻微渗血为度。锌基蒙脱石与钙基蒙脱石为直接外用，溶媒均匀涂抹于家兔去毛皮肤，面积约为70cm2，稍干后再均匀涂抹1次(两次共约8mL)。乘湿以无刺激性纱布固定，在其上覆以聚乙烯薄膜，然后再包扎固定，以防止液体挥发。给受试物后24h无家兔中毒死亡，用温水、棉签洗去残留于皮肤的受试物，继续观察，连续7d。观察家兔死亡情况和全身中毒表现，即严密观察家兔的饮食、活动、皮毛、粪便及口、眼、鼻分泌物等反应。7天后空气栓塞处死家兔，肉眼观察其肝、肺、肾、胃、肠等内脏器官。

[0165] (2)结果

[0166] 在皮肤急性毒性实验过程中，家兔无死亡，饮食、活动、皮毛、粪便及口、眼、鼻分泌物等均无异常。完整皮肤反应：对剪除背部毛发面积为6cm×6cm的家兔，在24h内外用锌基蒙脱石与钙基蒙脱石给药，家兔食欲、精神及粪便未见异常，也未见死亡。停药后7天内也未见动物死亡和其他异常表现。

[0167] 破损皮肤反应：对家兔已剪除背部毛发的皮肤用砂纸擦伤至渗血，24h内外用锌基蒙脱石与钙基蒙脱石，给药时间内家兔食欲、精神及粪便未见异常，未见病变器官，也未见死亡。即锌基蒙脱石与钙基蒙脱石外用给药后7天内饮食、排便、毛色、呼吸、运动、皮肤及试验局部均未见异常反应。

[0168] (3)结论

[0169] 皮肤急性毒性实验表明锌基蒙脱石与钙基蒙脱石均未引起家兔皮肤局部毒性和全身急性毒性反应，提示锌基蒙脱石与钙基蒙脱石对家兔破损皮肤未见明显毒性反应。

[0170] 实验例8：锌基蒙脱石与钙基蒙脱石处方配比研究实验

[0171] 本发明通过凝血时间实验，比较了锌基蒙脱石与钙基蒙脱石不同的配比的凝血时间和出血时间，从而考察锌基蒙脱石与钙基蒙脱石配比处方。

[0172] 锌基蒙脱石与钙基蒙脱石混悬液的制备：将不同比例的锌基蒙脱石与钙基蒙脱石混合物，分别加入烧杯中，按照锌基蒙脱石与钙基蒙脱石混合物:纯化水＝1:10(质量比)，室温下进行超声波处理，制成不同比例的锌基蒙脱石与钙基蒙脱石混悬液，备用。

[0173] 取18～22g小鼠48只，雌雄不分，禁食禁水24h。摘眼球取血1mL，放入加有0.1mL柠檬酸钠溶液(38mg/mL)的离心管内，混匀后以1000r/min离心10min，取内径8mm试管1支，加入混合血浆和生理盐水各80mL，随即放入37℃水浴中温浴2min，然后加入80mL不同比例锌基蒙脱石与钙基蒙脱石混悬液(2.8mg/mL)，混匀后再放入37℃水浴中，立即计时，记录自加药后至纤维蛋白形成、液面不动所需时间，即为锌基蒙脱石与钙基蒙脱石混悬液血浆复钙时间。结果见表12。

[0174] 表12 锌基蒙脱石与钙基蒙脱石不同配比对血浆复钙时间的影响

[0175]

[0176] 注：从表中分析，但实验1血浆复钙时间为422s，与实验例2、3、4、5、6、7相比p＜0.05。实验7血浆复钙时间为312s；与实验例2、3、4、5、6相比p＞0.05。从经济利益和临床效果考虑，根据以上实验结果，本发明处方选择；锌基蒙脱石:钙基蒙脱石＝5:8、7:9、8:10、9:
11、10:12(质量百分比)；优选处方：锌基蒙脱石:钙基蒙脱石为5:8、7:9、8:10(质量百分比)。

[0177] 实验例9：锌基蒙脱石与钙基蒙脱石体外凝血研究实验

[0178] 1材料与方法

[0179] 1.1药物及试剂：锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散(实施例1制备)；云南白药(云南白药集团股份有限公司)；淀粉(湖南尔康制药有限公司)；

[0180] 1.2实验动物：健康成年新西兰大白兔，体重2.0～2.5kg，雌雄兼用(普通级，山东大学实验动物中心提供)；

[0181] 2方法

[0182] 体外凝血时间的测定：取试管32支，按实验药物分为4组：空白组、淀粉组、阳性对照云南白药组和锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散组，每组8支试管，空白组不加任何药物，其他组分别加入不同药物各100mg。选取健康新西兰大白兔8只，雌雄各半。动物适应性饲养1周后进行试验，将兔子固定后心脏取血，每只8m1。取血后迅速注入试管，每支2ml，立即摇匀，同时计时开始，每隔15S轻轻倾斜试管1次，观察有无凝血出现，直至试管内血液不再流动为止，即血液完全凝固时间(S)。结果见表13；

[0183] 表13 对新西兰大白兔体外凝血时间的影响( n＝8)

[0184]

[0185] 实验结果评价：锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散组与空白组比较P＜0.01；与淀粉组比较P＜0.01；与云南白药组比较P＜0.05。

[0186] 3结果：淀粉组与空白组比较凝血时间虽然有缩短，但无显著性差异(P＞0.05)。云南白药组与空白组比较；有明显缩短凝血时间(P＜0.O1)。锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散组与淀粉组比；体外凝血时间有非常明显缩短(P＜0.O1)。与阳性药云南白药比较，止血材料锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散组体外凝血效果较好，有统计学意义(P＜0.O5)。试验结果说明锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散有较好的体外凝血效果。

[0187] 实验例10：锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散止血作用的研究实验[0188] 1、实验材料

[0189] 1.1巴马小型猪，体重22～30kg，雌雄兼用，普通级，由山东乳山市华乳养猪厂提供；

[0190] 1.2锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散由实施例1制备；

[0191] 2、方法与结果

[0192] 2.1对巴马小型猪股静脉、动脉创伤止血效果的研究，选用健康巴马小型猪18只，雌雄各半，随机分3组，每组6只，即阴性对照淀粉组、阳性对照云南白药组、锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散组。

[0193] ①实验动物 巴马小型猪建立血管创伤模型，苯巴比妥钠耳缘静脉麻醉(30mg/kg)；仰位固定在手术台上，消毒、充分暴露并游离股静脉约6cm，用动脉夹夹住近心端股静脉，另一端用绳提拉住，在股静脉中间部位采用医用动脉导管穿刺鞘(直径0.3cm)穿刺暴露好的股静脉，模型建立后，放开动脉夹后血液从穿刺孔喷出，立即对出血创面按压止血包(每个出血创面均使用30g受试材料：阴性对照淀粉、阳性对照云南白药、试验药物锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散，制做成的(止血包)进行止血，按压2min后，观察记录各组动物创面的止血效果。

[0194] ②以同样的方法在后肢另一侧建立股动脉出血模型，按压同时开始计时，按压2min后每隔30s观察一次出血部位，至5s不见渗血时停止计时，即出血时间。观察记录各组动物创面的止血效果。按压出血部位过程中，动脉创面出血被吸附在止血包里，止血包按压前先用电子天平称重，记录重量，止血后再称止血包的湿重，用止血后的重量减去止血前的重量，即可代表出血的量。

[0195] ③观察结束后逐层缝合腹膜、肌肉、皮肤，并在缝合表面洒上聚维酮碘以防止感染，实验过程注意无菌操作。若未能控制股动脉出血不再应用其他干预措施，记录24h内动物死亡数，并及时取下股动脉创面组织；存活实验动物，术后自由饮水、饮食，于手术后24h麻醉观察股动脉创面，取下股动脉创面组织，用10％中性甲醛固定，石蜡包埋，做组织切片，HE染色观察创面组织病理变化情况。

[0196] 2.2统计学处理实验数据以 表示，用SPSS13.0软件，采用单因素方差分析进行统计学处理，对非正态分布的计数资料采用检验。显著性水平P＜0.O5。

[0197] 2.3对巴马小型猪股静脉创伤止血效果的影响

[0198] 在巴马小型猪股静脉创伤止血试验中，阴性对照淀粉按压2min后均不能有效止血，有明显的渗血；阳性对照云南白药按压2min后其中有一只动物伤口处有渗血，止血有效率85.6％；锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散止血包按压2min后均可以有效止血。与淀粉对照组比较，阳性对照云南白药和锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散止血包对巴马小型猪股静脉创伤出血的止血作用有显著性差异(P＜0.O5，P＜0.O1)。见表14。

[0199] 表14 对巴马小型猪股静脉创伤止血效果的影响(n＝6)

[0200]

[0201]

[0202] 1P＜0.05，2P＜0.01，与淀粉组比较。

[0203] 2.4对巴马小型猪股动脉创伤止血效果的影响

[0204] 巴马小型猪股动脉创伤止血试验结果显示，与淀粉对照组比较，云南白药组和锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散组均能显著缩短巴马小型猪股动脉出血时间(P＜0.O1)，并减少出血量(P＜0.O5，P＜0.O1)。锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散组对巴马小型猪股动脉创伤止血效果要明显好于云南白药组，出血时间有显著缩短(P＜0.O5)，出血量也明显减少(P＜0.O5)。受试止血材料锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散止血包按压大约5min后可均可有效止血；阴性对照淀粉组不采取其他措施，24h内其中有2只巴马小型猪因失血过多造成休克性死亡。结果见表15。

[0205] 表15 对巴马小型猪股动脉创伤止血效果的影响( n＝6)

[0206]

[0207] 1P＜0.05，2P＜0.01，与淀粉组比较；3P＜0.05，与云南白药组比较。

[0208] 试验表明，锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散止血包对巴马小型猪股动、静脉致命性出血模型均有显著的止血效果，降低死亡率。

[0209] 2.5股动脉止血部位的病理观察组织切片HE染色后，于显微镜下观察可见，受试止血材料淀粉组、云南白药组和锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散组，各组血管创面及附近均未发现有血管壁的不规则增厚、溃疡、坏死或动脉瘤形成等改变，各组病理检验无明显异常改变，但各组均有血管腔面的血栓附着，其相应的显微镜下主要表现为新鲜血栓形成。病理观察结果如下；

[0210] A、淀粉组股动脉血管创面，未发现有血管壁的不规则增厚、溃疡、坏死或动脉瘤形成等改变；

[0211] B、淀粉组股动脉血管腔面有血栓附着；

[0212] C、云南白药组股动脉血管创面，未发现有血管壁的不规则增厚、溃疡、坏死或动脉瘤形成等改变；

[0213] D、云南白药组股动脉血管腔面有新鲜的血栓形成；

[0214] E、锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散组股动脉血管创面，未发现有血管壁的不规则增厚、溃疡、坏死或动脉瘤形成等改变；

[0215] F、锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散组股动脉血管腔面有血栓附着。

[0216] 本实验通过对新西兰大白兔体外凝血，巴马小型猪致命性股动、静脉创伤止血实验的观察，证明了本发明锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散具有较好的止血效果，能够快速、有效的止血；通过动物实验模型来模拟创伤出血，结果发现使用锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散进行急救止血效果十分显著，为锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散在急救方面的应用提供了可靠的实验依据。传统的止血方法如加压、敷料填塞和止血带等，都是通过压力止血，止血带止血还会造成远端组织缺血和代谢异常导致严重的并发症等。锌基蒙脱石与钙基蒙脱石止血散止血包作为一种外用急救止血材料，具有止血效果确切，价格低廉、携带轻便、使用简便、安全耐用等许多优点，对大血管创伤出血可以有效止血，符合重伤急救“保命、延时”需要，并且兼有轻便、不发热，便于清创的特点。

[0217] 本发明的特点及有益效果如下：

[0218] 1、本发明应用中所述的锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散有效成分锌基蒙脱石、钙基蒙脱石是一种安全无毒药物，用药后，不被皮肤所吸收，不进入血液循环，并且蒙脱石局部形成负电性，而层与层之间则带正电，电荷分布呈多态微相分离结构。这样，借助静电作用，蒙脱石可与带电性生物分子及细菌、病毒、毒素产生相互作用，将其固定、清除；达到祛腐、生肌、促进溃疡愈合。

[0219] 2、本发明应用中所述的制剂经过皮肤外用途径给药，具有抑菌、干燥脱水，抑血作用。锌基蒙脱石与钙基蒙脱石解离出的蒙脱石具有较强吸水性作用，减少组织液渗出，创面干燥,能减轻局部创口水肿程度，加速肉芽组织生成，加速愈合，能达到收敛生肌的目的。蒙脱石直接引到细菌表面从而起到较长时间的抑菌作用，其特点是抑菌力强、无味、性能稳定、无刺激性、无毒性、能抑制细菌、病毒、真菌、芽孢及原虫等，对创面愈合无干扰作用，应用胜过其他任何一种伤口护理产品。

[0220] 3、本发明应用中所述的制剂，其中锌基蒙脱石解离出的锌离子能增强吞噬细胞吞噬功能、趋化活力及杀菌功能，并通过超氧化物歧化酶来保持吞噬细胞内的自由基水平，发挥杀菌作用，加速创伤、烧伤的愈合；另外锌离子能沉淀蛋白质，外用有收敛防腐作用，帮助肉芽组织形成；锌还具有消除氧自由基的作用，是调节炎性细胞活动的因子。它也抑制超生理浓度体外细菌增长；而蒙脱石同时具有止血消肿、消炎解毒、收敛生肌等功能。

[0221] 4、本发明应用中所述的制剂，其中钙基蒙脱石解离出的钙离子可缩短出血时间及血浆复钙时间。

[0222] 综上所述，本发明所述的应用，制剂采用锌基蒙脱石、钙基蒙脱石为本发明药物的有效成分,与药用辅料，通过高温干热灭菌、混合、无菌分装等工艺制成药剂。经过皮肤外用途径给药，可快速凝血并止血，并可防止伤口感染。

附图说明

[0223] 图1是锌基蒙脱石干热温度在170～180℃，干热时间在180～240min，X-射线衍射图谱，横坐标为2θ(°)，纵坐标为强度(任意单位)；

[0224] 图2是钙基蒙脱石干热温度在250～300℃，干热时间在120min，X-射线衍射图谱，横坐标为2θ(°)，纵坐标为强度(任意单位)；

[0225] 图3是实施例1、2、3样品锌离子累计释放量(％)作曲线图，横坐标为时间，纵坐标为释放度；

[0226] 图4是实施例1、2、3样品钙离子累计释放量(％)作曲线图，横坐标为时间，纵坐标为释放度。

具体实施方式

[0227] 下面结合实施例对本发明做进一步的说明，但不限于此。

[0228] 实施例1～3原辅料说明：

[0229]原辅料名称 生产企业 执行标准
锌基蒙脱石 山东司邦得制药有限公司 企业标准
钙基蒙脱石 山东司邦得制药有限公司 中国药典2010版二部增补版

[0230] 实施例中所涉及的装置和设备均为散剂生产通用设备，市场可购。说明如下：

[0231] 干热灭菌柜(型号HDA500)南京长江药机制造有限公司有售；混料机(100L)南京长江药机制造有限公司有售。

[0232] 实施例1、锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散及制备方法

[0233] 1、原辅材料投料量配比(w/w):

[0234] 锌基蒙脱石  8份

[0235] 钙基蒙脱石  10份；

[0236] 2、制备

[0237] (1)将配方量的锌基蒙脱石放入干热灭菌柜内，温度为170～180℃灭菌，灭菌时间为180min，降至室温备用；

[0238] (2)将配方量的钙基蒙脱石放入干热灭菌柜内，温度为250～300℃灭菌，灭菌时间为120min，降至室温备用；

[0239] (3)将步骤(1)、步骤(2)得到的物料投入已灭菌的混料罐中；进行搅拌并混合均匀后；无菌分装即得锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散。

[0240] 实施例2、锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散及制备方法

[0241] 1、原辅材料投料量配比(w/w):

[0242] 锌基蒙脱石  7份

[0243] 钙基蒙脱石  9份；

[0244] 2、制备

[0245] (1)将配方量的锌基蒙脱石放入干热灭菌柜内，温度为170～180℃灭菌，灭菌时间为240min，降至室温备用；

[0246] (2)将配方量的钙基蒙脱石放入干热灭菌柜内，温度为250～300℃灭菌，灭菌时间为120min，降至室温备用；

[0247] (3)将步骤(1)、步骤(2)得到的物料投入已灭菌的混料罐中；进行搅拌并混合均匀后；无菌分装即得锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散。

[0248] 实施例3、锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散及制备方法

[0249] 1、原辅材料投料量配比(w/w):

[0250] 锌基蒙脱石  5份

[0251] 钙基蒙脱石  8份；

[0252] 2、制备

[0253] (1)将配方量的锌基蒙脱石放入干热灭菌柜内，温度为170～180℃灭菌，灭菌时间为210min，降至室温备用；

[0254] (2)将配方量的钙基蒙脱石放入干热灭菌柜内，温度为250～300℃灭菌，灭菌时间为120min，降至室温备用；

[0255] (3)将步骤(1)、步骤(2)得到的物料投入已灭菌的混料罐中；进行搅拌并混合均匀后；无菌分装即得锌基蒙脱石与钙基蒙脱石无菌止血散。