液相色谱法测定塑料制品中9种抗氧剂特定迁移量的方法

摘要

本发明提供一种同时测定五种食品模拟物中9种抗氧剂的特定迁移量的高效液相色谱紫外法。食品模拟物浸泡待测样品，冷却至室温并混匀，水基食品模拟物用含三(2-羧乙基)膦盐酸盐的四氢呋喃混合液定容，经亲水性聚四氟乙烯针头过滤器过滤后进样；异辛烷食品模拟物旋蒸氮吹浓缩至近干，用含三(2-羧乙基)膦盐酸盐的甲醇定容，再经亲水性聚四氟乙烯针头过滤器过滤后进样。用C8柱梯度洗脱分离；检测波长为285 nm；进样量为20μL。该方法色谱分离和线性关系较好，回收率和准确度较高，定量限满足欧盟(EU）NO 10/2011法规中9种抗氧剂特定总迁移量的限量要求，并已应用于实际样品的检测。

权利要求

1.液相色谱法测定塑料制品中9种抗氧剂特定迁移量方法，9种抗氧剂分别为：没食子酸丙酯、没食子酸正辛酯、没食子酸月桂酯、抗氧剂RC1726、抗氧剂1520、抗氧剂Ionoxwsp、抗氧剂ZKF、抗氧剂425、抗氧剂2246，所述9种紫外吸收剂来自于塑料类食品包装材料及容器中，其特征在于该方法包括以下的步骤：一、迁移试验

根据食品接触塑料制品的实际用途，按照表面积体积比将食品模拟物注入到塑料制品或玻璃器皿中，在器皿口或容器口以表面皿或铝箔纸进行密封后，在烘箱或培养箱中按欧盟NO10/2011法规规定确定迁移温度和迁移时间进行迁移试验，完毕后冷却至室温，将其中的食品模拟物转移到干净玻璃器皿中待后续处理；其中食品模拟物分为食品模拟物A、B、C、D1、D2；

二、食品模拟物的处理

（1）、食品模拟物A、B、C、D1的处理：准确移取迁移试验后的各食品模拟物5mL至10mL容量瓶中，将三(2-羧乙基)膦盐酸盐与四氢呋喃进行混合，形成混合物A，混合物A中三(2-羧乙基)膦盐酸盐的质量分数为0.05%；用混合物A定容食品模拟物后，混匀，用注射器吸取上述稀释后的各食品模拟物1~2mL，经亲水性聚四氟乙烯针头过滤器过滤至进样瓶中，待测；

（2）、食品模拟物D2的处理：准确移取10mL异辛烷浸泡液至鸡心瓶中，添加1mL所述的混合物A，在45℃，130mba条件下旋蒸浓缩至约1mL，再用氮吹浓缩至近干，将三(2-羧乙基)膦盐酸盐与甲醇混合，形成混合物B，混合物B中三(2-羧乙基)膦盐酸盐的质量分数为0.05%；

准确添加1mL混合物B，混匀后，用亲水性聚四氟乙烯针头过滤器过滤至进样瓶中，待测；

三、空白试验

按照步骤二中（1）、（2）方法处理未与待测样品接触的食品模拟物；

四、液相色谱紫外法测定

仪器条件：

1）色谱柱：C8柱，高×内径×膜厚=250mm×4.6mm×5μm；

2）流动相A为0.1%的甲酸水溶液，流动相B为甲醇溶液，梯度洗脱条件：0~1.0min，50%B；

1.0~10.0min，50%~95%B；10.0~15.0min，95%B;15.0~17.0min，95%~100%B；17.0~25.0min，

100%B；25.0~25.1min，100%~50%B；25.1~30min，50%B；

3）进样量：20μL；

4）流速：1mL/min；

5）检测波长：285nm；

6）柱温：40℃；

7）定量方式：校准曲线外标法，获得9种抗氧剂迁移量。

2.根据权利要求1所述的液相色谱法测定塑料制品中9种抗氧剂特定迁移量方法，其特征在于迁移实验中所述的食品模拟物和表面积体积比根据欧盟NO10/2011法规规定，食品模拟物A、B、C、D1、D2分别为：10%乙醇、3%乙酸、20%乙醇、50%乙醇、异辛烷。

说明书

液相色谱法测定塑料制品中9种抗氧剂特定迁移量的方法

技术领域

[0001] 本发明属于化学物检测领域，涉及塑料类食品包装接触材料中有害9种抗氧剂特定总迁移量的检测方法，尤其涉及一种使用高效液相色谱紫外(HPLC-UV)法测定塑料类食品包装材料及容器中9种抗氧剂特定迁移量的检测方法。

背景技术

[0002] 塑料类食品接触材料常需加入了抗氧剂、紫外吸收剂等功能助剂来延长相关制品的使用寿命。但在制品使用的过程中，这些被添加的抗氧剂也会迁移到食品中，直接危害人体的健康。欧盟在2011年发布的(EU)NO 10/2011法规将多种抗氧剂的特定迁移量(SML)或特定总迁移量[SML(T)]加以了限定。

[0003] 目前，国内外有关抗氧剂的检测主要集中在食品、塑料、饲料以及食品模拟物类样品中，使用的检测方法有HPLC法和HPLC-MS/MS法。已有的有关食品模拟物中抗氧剂的检测文献仅能检测食品模拟物中几种抗氧剂的特定迁移量，由于同时检测的抗氧剂种类与欧盟(EU)NO 10/2011法规附表2中9种抗氧剂的种类不完全一致，无法对欧盟(EU)NO 10/2011法规中9种抗氧剂的特定总迁移量进行检测。

发明内容

[0004] 为了解决塑料类食品包装材料及容器中有害抗氧剂特定总迁移量检测的难题，本发明的提供一种高效液相色谱紫外(HPLC-UV)法检测塑料类食品接触材料中9种抗氧剂的特定总迁移量的检测方法，该方法具有灵敏、准确、快速、简便的特点。

[0005] 为了实现上述目的，本发明的高效液相色谱紫外(HPLC-UV)法检测塑料类食品接触材料中9种抗氧剂的特定总迁移量的检测方法，包括以下步骤：

[0006] 一、迁移试验

[0007] 根据食品接触塑料制品的实际用途，按照一定的表面积体积比将食品模拟物注入到待测样品塑料制品或玻璃器皿中，在器皿口或容器口以表面皿或铝箔纸进行密封后，在烘箱或培养箱中按欧盟(EU)NO 10/2011法规规定确定迁移温度和迁移时间进行迁移试验，完毕后冷却至室温，将其中的食品模拟物转移到干净玻璃器皿中待后续处理；其中食品模拟物分为食品模拟物A、B、C、D1、D2；

[0008] 其中食品模拟物根据欧盟(EU)NO 10/2011法规规定，食品模拟物A：10％乙醇水溶液(v/v)，用于模拟pH＞4.5的水性食品；食品模拟物B：3％乙酸水溶液(w/v)，用于模拟pH＜4.5的酸性食品；食品模拟物C：20％乙醇水溶液(v/v)，用于模拟含酒精且酒精含量不超过
20％的食品；食品模拟物D1:50％乙醇水溶液(v/v)，用于模拟含酒精且酒精含量大于20％的食品以及油水乳化液；食品模拟物D2：异辛烷，用于模拟表面含有游离脂肪的食品。

[0009] 按欧盟(EU)NO 10/2011法规规定，按表1所示根据产品实际用途选择合适的迁移试验条件：

[0010] 表1

[0011]

[0012]

[0013] 按欧盟(EU)NO 10/2011法规规定，表面积体积比：对于＜500mL，＞10L容器类塑料制品或不可盛装的扁平制品，将塑料制品剪切好放入干净的玻璃器皿中，以6dm2食品接触面的表面积对应1L食品模拟物的比例；对于＞500mL，＜10L的容器类塑料制品，则将食品模拟物注入至距容器边缘4/5处。

[0014] 二、食品模拟物的处理

[0015] 1)、食品模拟物A、B、C、D1的处理：准确移取迁移试验后的各食品模拟物5mL至10mL容量瓶中，将将三(2-羧乙基)膦盐酸盐与四氢呋喃进行混合，形成混合物A，混合物A中三(2-羧乙基)膦盐酸盐的质量分数为0.05％；用混合物A定容食品模拟物后，混匀，用注射器吸取上述稀释后的各食品模拟物1～2mL，经亲水性聚四氟乙烯针头过滤器过滤至进样瓶中，待测；

[0016] (2)、食品模拟物D2的处理：准确移取10mL异辛烷浸泡液至鸡心瓶中，添加1mL所述的混合物A，在45℃，130mba条件下旋蒸浓缩至约1mL，再用氮吹浓缩至近干，将三(2-羧乙基)膦盐酸盐与甲醇混合，形成混合物B，将三(2-羧乙基)膦盐酸盐与甲醇溶液混合，形成混合物B，混合物B中三(2-羧乙基)膦盐酸盐的质量分数为0.05％；准确添加1mL混合物B，混匀后，用亲水性聚四氟乙烯针头过滤器过滤至进样瓶中，待测。

[0017] 三、空白试验

[0018] 按照步骤二中(1)、(2)方法处理没有与待测样品接触的食品模拟物A、B、C、D1、D2。

[0019] 四、液相色谱紫外(HPLC-UV)法测定

[0020] 仪器条件：

[0021] 1)色谱柱：C8柱，高×内径×膜厚＝250mm×4.6mm×5μm，或相当者；

[0022] 2)流动相A为0.1％的甲酸水溶液，流动相B为甲醇溶液，梯度洗脱条件：0～1.0min，50％B；1.0～10.0min，50％～95％B；10.0～15.0min，95％B；15.0～17.0min，95％～100％B；17.0～25.0min，100％B；25.0～25.1min，100％～50％B；25.1～30min，50％B；

[0023] 3)进样量：20μL；

[0024] 4)流速：1mL/min；

[0025] 5)检测波长：285nm；

[0026] 6)柱温：40℃；

[0027] 7)定量方式：校准曲线外标法，获得9种抗氧剂的迁移量。

[0028] 检测结果根据欧盟NO 10/2011法规规定判断特定迁移量是否符合规定。

[0029] 本发明由于采用了上述的技术方案，食品模拟物A、B、C、D1采用含0.05％TCEP四氢呋喃稀释后，用亲水性聚四氟乙酸针头过滤器过滤，食品模拟物D2采用0.05％TCEP四氢呋喃溶液来保持抗氧剂的稳定性，该方法在五种食品模拟物中的定量限为0.005～1.0mg/L；水基食品模拟物在3～72、0.5～12、0.3～7.2或0.15～3.6mg/L，异辛烷食品模拟物在30～
720、5～120、3～72或1.5～36mg/L范围内线性关系良好(r2>0.9982)；0.3～84mg/L三水平的加标回收率为83.7％～113％，相对标准偏差为0.8％～11.2％。结果表明，该方法色谱分离和线性关系较好，回收率和准确度较高，定量限完全满足欧盟(EU)NO 10/2011法规附表2中9种抗氧剂特定总迁移量的限量要求，可以高效、简便、快速的测定塑料类食品包装材料及容器中9种抗氧剂特定总迁移量。

[0030] 本发明建立了高效液相色谱-紫外检测法测定食品接触材料中9种抗氧剂的特定迁移量[SML(T)]。该方法具有样品处理简单快速、色谱分离效果和线性相关性好、回收率和准确度较高等优点，方法的定量限低，能完全满足欧盟(EU)NO 10/2011法规的限量要求。该方法已应用于食品接触材料相关制品中九种抗氧剂的特定总迁移量检测，并可广泛应用于食品接触材料相关制品中九种抗氧剂特定总迁移量的监管及产品质量控制。

具体实施方式

[0031] 下面结合实施例对本发明做进一步详细说明。

[0032] 实施例1

[0033] 本发明的高效液相色谱紫外(HPLC-UV)法测定塑料类食品包装材料及容器中9种抗氧剂特定总迁移量的方法，通过以下步骤实现：

[0034] 一、样品前处理方法

[0035] 1、迁移试验

[0036] 1.1食品模拟物：根据(EU)NO 10/2011法规规定，食品模拟物A：10％乙醇水溶液(v/v)，用于模拟pH＞4.5的水性食品；食品模拟物B：3％乙酸水溶液(w/v)，用于模拟pH＜4.5的酸性食品；食品模拟物C：20％乙醇水溶液(v/v)，用于模拟含酒精且酒精含量不超过
20％的食品；食品模拟物D1:50％乙醇水溶液(v/v)，用于模拟含酒精且酒精含量大于20％的食品以及油水乳化液；食品模拟物D2：异辛烷，用于模拟表面含有游离脂肪的食品。

[0037] 1.2迁移条件：按欧盟(EU)NO 10/2011法规规定，根据表3所示根据产品实际用途选择合适的迁移试验条件：

[0038] 表3

[0039]

[0040] 1.3表面积体积比：对于＜500mL，＞10L容器类塑料制品或不可盛装的扁平制品，将塑料制品剪切好放入干净的玻璃器皿中，以6dm2食品接触面的表面积对应1L食品模拟物的比例；对于＞500mL，＜10L的容器类塑料制品，则将食品模拟物注入至距容器边缘4/5处。

[0041] 1.4迁移：根据食品接触塑料制品的实际用途，按照表面积体积比将选用的食品模拟物注入到塑料制品或玻璃器皿中，在器皿口或容器口以表面皿或铝箔纸进行密封后，在烘箱或培养箱中按“②迁移条件”设定迁移温度和时间进行迁移试验。完毕后冷却至室温，将其中的食品模拟物转移到干净玻璃器皿中待后续处理。

[0042] 2、食品模拟物的处理

[0043] 2.1、食品模拟物A、B、C、D1的处理：准确移取迁移试验后的各食品模拟物5mL至10mL容量瓶中，将三(2-羧乙基)膦盐酸盐与四氢呋喃进行混合，形成混合物A，混合物A中三(2-羧乙基)膦盐酸盐的质量分数为0.05％；用混合物A定容食品模拟物后，混匀，用注射器吸取上述稀释后的各食品模拟物1～2mL，经亲水性聚四氟乙烯针头过滤器过滤至进样瓶中，待测；

[0044] 2.2、食品模拟物D2的处理：准确移取10mL异辛烷浸泡液至鸡心瓶中，添加1mL所述的混合物A，在45℃，130mba条件下旋蒸浓缩至约1mL，再用氮吹浓缩至近干，将三(2-羧乙基)膦盐酸盐与甲醇溶液混合，形成混合物B，将三(2-羧乙基)膦盐酸盐与甲醇溶液混合，形成混合物B，混合物B中三(2-羧乙基)膦盐酸盐的质量分数为0.05％；准确添加1mL混合物B，混匀后，用亲水性聚四氟乙烯针头过滤器过滤至进样瓶中，待测。

[0045] 3、空白试验

[0046] 按照2.1、2.2方法处理未与待测样品接触的食品模拟试液。

[0047] 二、液相色谱紫外(HPLC-UV)法测定条件：

[0048] 仪器条件：

[0049] 1)色谱柱：C8柱，高×内径×膜厚＝250mm×4.6mm×5μm，或相当者；

[0050] 2)流动相A为0.1％的甲酸水溶液，流动相B为甲醇溶液，梯度洗脱条件：0～1.0min，50％B；1.0～10.0min，50％～95％B；10.0～15.0min，95％B；15.0～17.0min，95％～100％B；17.0～25.0min，100％B；25.0～25.1min，100％～50％B；25.1～30min，50％B；

[0051] 3)进样量：20μL；

[0052] 4)流速：1mL/min；

[0053] 5)检测波长：285nm；

[0054] 6)柱温：40℃；

[0055] 7)定量方式：校准曲线外标法校准曲线外标法，获得9种抗氧剂的迁移量。

[0056] 检测结果根据欧盟NO 10/2011法规规定判断特定迁移量是否符合规定。

[0057] 三、线性关系和测定低限

[0058] 本方法的测定低限见表4：

[0059] 表4方法的测定低限(单位mg/kg)

[0060]

[0061]

[0062] 取不同浓度的9种待测抗氧剂混合标准溶液(见表5)，按本方法所确定的仪器条件以及低浓度至高浓度的顺序分别依次进样，以各种抗氧剂色谱峰面积对浓度作线性回归，其浓度与色谱峰面积线性关系良好，相关系数大于0.9982，结果见表6。

[0063] 表5标准溶液系列浓度(单位：μg/mL)

[0064]

[0065] 表6各抗氧剂的线性范围、校准曲线、相关系数

[0066]

[0067]

[0068] 四、回收率和精密度试验

[0069] 阴性样品中分别添加三个不同浓度水平的9种抗氧剂混合标准溶液，六次重复试验的平均加标回收率和精密度数据见表7。

[0070] 表7 9种抗氧剂在五种食品模拟物中的平均加标回收率和精密度(n＝6)。

[0071]

[0072]

[0073] 本发明通过高效液相色谱紫外(HPLC-UV)法检测与塑料类食品包装材料相接触的五种食品模拟物10％乙醇、3％乙酸、20％乙醇、50％乙醇、异辛烷中9种抗氧剂特定总迁移量，该方法具有色谱分离和线性关系较好，回收率和准确度较高，定量限完全满足欧盟(EU)NO 10/2011法规附表2中9种抗氧剂特定迁移量的限量要求，具有较好的应用价值和前景。