一种米铂的制备方法

摘要

本发明提供了一种抗肿瘤药物米铂(Miriplatin)的制备方法：配制二甲基甲酰胺和正丁醇的混合溶液，升温，加入米铂粗品，保温搅拌至完全溶解，得米铂粗品溶液；溶液澄清后，加入活性炭继续保温搅拌，过滤，收集滤液；滤液降温，加入甲苯，保温搅拌；反应结束后，再次降温，析出晶体，养晶；养晶结束继续缓慢降温，养晶，抽滤，洗涤，干燥，得到米铂精品。本发明提供的制备方法操作简单，收率较高，米铂纯度达到99.9％以上，最大单杂控制在0.1％以下，总杂控制在0.2％以内。

权利要求

1.一种米铂的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

1)配制二甲基甲酰胺和正丁醇的混合溶液，升温，加入米铂粗品，保温搅拌至完全溶解，得米铂粗品溶液；

2)溶液澄清后，加入活性炭继续保温搅拌，过滤，收集滤液；

3)滤液降温，加入甲苯，保温搅拌；

4)反应结束后，再次降温，析出晶体，养晶；

5)养晶结束继续缓慢降温，养晶，抽滤，洗涤，干燥，得到米铂精品。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1)所述的二甲基甲酰胺和正丁醇的混合溶液中，二甲基甲酰胺与正丁醇的体积比为1～3﹕1。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1)所述的升温是指将混合溶液升温至

130～160℃。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1)所述的米铂粗品与混合溶液的固液比为1g:7～15ml。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中加入活性炭的质量为米铂粗品的1～3％；保温搅拌速度为20～30转/分钟；搅拌时间为20～40分钟。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3)所述的甲苯与步骤1)中正丁醇的体积比为0.5～1.5﹕1；所述的加入甲苯是指控制滴加速度，在20～40分钟内滴加完毕。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3)所述的降温是指控制时间在1～2小时内降温至70～90℃；保温搅拌速度为10～20转/分钟；搅拌时间为0.5～2小时。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤4)所述的再次降温所述的温度为20～30℃，养晶时间为1～4小时。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤5)所述的缓慢降温是指控制时间在1～2小时内降温至-5～5℃，养晶时间为1～4小时。

说明书

一种米铂的制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及铂类抗肿瘤药物，尤其涉及米铂的一种制备方法。

背景技术

[0002] 肝细胞癌是世界上最常见的、复发率很高的恶性肿瘤之一，位居全球恶性肿瘤发病率的第5位，死因第3位，且呈逐年增长趋势，已超过62.6万人/年，我国发病人数约占全球总发病人数的55％。肝细胞癌的发病特点多为丙型肝炎病毒或乙型肝炎病毒持续感染导致慢性肝炎、肝硬化而最终发展为肝细胞癌。临床上通常采用肝脏切除、移植等外科手术治疗；射频消融术、经皮微波凝固疗法、经皮无水乙醇注射疗法等内科局部治疗；经导管肝动脉化疗栓塞术(TACE)、经导管的动脉灌注治疗；全身化疗。其中，TACE尽管只在无法实施外科手术或内科局部治疗的时候才使用，但在首次治疗中的比例却为29.6％，在肝内复发治疗中占53.3％，其重要地位可见一斑。TACE是将抗癌药物与碘化罂粟子油的混合物从肝动脉内注入病灶，同时注入明胶海绵等栓塞物质堵塞动脉，切断动脉血流，达到致肿瘤坏死的目的。用于TACE的抗癌药物有盐酸阿霉素、盐酸表柔比星、丝裂霉素、顺铂、净司他丁斯酯等。其中，铂类抗癌药物顺铂因其高效抗癌活性与广谱抗癌效果而被广泛使用，对肝细胞癌也表现出良好的临床效果，但其水溶性的特点使得它利用碘化罂粟子油为载体的物理稳定性受到严重影响；净司他丁斯酯是唯一作为以碘化罂粟子油脂肪酸乙酯(ethyl ester of iodinated poppy-seed oil fatty acid)为载体、由肝动脉注射给药的抗癌药物获得批准的，自1994年上市后抗肿瘤效果获得首肯，但该药存在可能导致肝动脉血管损伤、对肝胆系统的影响不可逆转等问题，对以后治疗及预后有影响，用药安全存在隐患。因此，寻找与碘化罂粟子油脂肪酸乙基酯亲和性高、抗癌效果不逊于净司他丁斯酯、预后安全、隐患小的药物成为药物研发的新目标。

[0003] 米铂(英文名字Miriplatin，CAS 141977-79-9)，化学名称为：顺-[(1R，2R)-1，2-环己二胺-N，N’]双十四酰氧基合铂一水合物，是由日本住友制药株式会社开发的一种新型脂溶性铂(II)类抗肿瘤药物，代号为SM-11355。该品种于2009年在日本获批准上市，临床主要用于肝癌的治疗。米铂的特点是脂溶性好，毒副作用小。米铂-碘油乳浊液对晚期肝癌的有效率56％，毒性主要是嗜中性白血球减少症和总胆红素升高，病人能很好的耐受。

[0004] 研究表明，米铂可以与末梢栓塞剂Lipiodol混合后保持稳定，米铂/Lipiodol既栓塞肿瘤供血动脉又能缓慢释放抗癌药，能选择性地长期停留于肝癌组织内，保持长时间有效的药物浓度，栓塞与化疗相辅相成，互相促进，同时也有效的降低了其它铂类抗肿瘤药物毒副作用剧烈和产生耐药性的缺点。

[0005] 将米铂-Lipiodol经肝动脉进行栓塞化疗治疗不能手术治疗的肝细胞癌病人，与文献报道的顺铂-Lipiodol或苯乙烯马来酸新制菌素-Lipiodol加明胶海绵的疗效接近而毒副反应明显减小。投以疗效相当的一定药量，米铂-Lipiodol的Cmax是顺铂-Lipiodol的1/300；并且两者达到Cmax的时间为8-37天和10-60分钟。另外，药代动力学表明，米铂在肿瘤组织的药物浓度是非肿瘤组织的六倍。米铂-Lipiodol通过避免药物浓度的峰谷效应(突释效应)而发挥持续稳定的作用，并且由于构效的脂质靶向体系的协同作用，使患者得到较高的疗效和更低的毒副作用。

[0006] 目前现有技术报道的米铂的制备方法主要有如下几种：

[0007] 欧洲专利0193936A1(优先权日本专利JP43869/85)披露，以1，2-二胺基环己烷为起始原料，与氯亚铂酸钾反应制得二氯-1，2-二胺基环己烷合铂后与硝酸银反应得二硝基-1，2-二胺基环己烷合铂，滤去沉淀，然后将其加入到含有肉豆蔻酸钠的悬浮水溶液中，室温避光反应三星期，过滤出固体，水洗，减压干燥即得米铂粗品。

[0008] 该制备工艺是以混合的1，2-二胺基环己烷为起始原料，米铂粗品中含有大量的顺反异构体和对映异构体，且所得米铂会有少量的银离子残留。

[0009] 国际专利WO94/14470报道的方法，是将顺式-[二碘-(1R，2R)-1，2-环己二胺]合铂(II)和肉豆蔻酸银悬浮在氯仿中反应，除去形成的碘化银后，滤液经浓缩处理得到米铂。

[0010] 由于起始原料顺式-[二碘-(1R，2R)-1，2-环己二胺]合铂(II)和肉豆蔻酸银在氯仿中几乎不溶，导致该反应进行极慢，且产物纯度较低，不适合工业化生产。此外，通过该方法制备得到的米铂会有少量银离子残留，同时还会有对人体有害的氯仿残留。

[0011] 日本专利JP11315088和JP2004083508公开的方法，是在水中将顺式-[二氯代(1R，2R)-1，2-环己二胺]合铂与硝酸银反应得到顺式-[二硝酸(1R，2R)-1，2-环己二胺]合铂溶液，然后加到肉豆蔻酸、氯仿和强氧化钾反应，后处理得到米铂。

[0012] 由于肉豆蔻酸溶于氯仿难溶于水，所以反应基本上是在两相中进行，反应时间长，且收率低。反应过程中加入多种溶剂，且用到毒性较大的氯仿，后处理麻烦，不利于最终产品的精制。

[0013] 中国专利201010185779.0公开的制备方法，是以顺式-[二碘-((1R，2R)-1，2-环己二胺)]合铂(II)(环铂)为反应物，经硝酸银水解后通过离子交换生成二羟基化合物，再与正十四碳酸在50～60℃下反应约3～5个小时，将得到的白色固体过滤得到米铂固体。该方法涉及多次过滤、离子交换等步骤，操作麻烦且降低了产品收率。另外，硝酸银用量大，增加了经济成本，且制备得到的米铂会有少量的银离子残留。

[0014] 中国专利201010039194.8披露的制备工艺是以顺式-[二碘-((1R，2R)-1，2-环己二胺)]合铂(II)(环铂)为反应物，加入适量水搅拌均匀后，缓慢加入硝酸亚汞，在50～60℃下反应约3～5小时，过滤，加入正十四碳酸溶液，反应约6～7小时后处理得到米铂固体。该方法使用了对人体和环境均有害的硝酸亚汞，限制了大规模生产。

[0015] 中国专利201010249760.8公开的合成方法，是以顺式-[二硝酸(1R，2R)-1，2-环己二胺]合铂(II)溶液与肉豆蔻酸盐在溶剂中反应得到米铂粗品。该方法制备得到的米铂会有少量的银离子残留。

[0016] J.Coord.Chem.1993，29：1-6报道的制备方法，是将氯亚铂酸钾和碘化钾与(1R，2R)-1，2-二胺基环己烷反应，制得二碘-(1R，2R)-1，2-二胺基环己烷合铂，然后将十四酸钠与硝酸银反应，制得十四酸银。二碘-(1R，2R)-1，2-二胺基环己烷合铂和十四酸银在氯仿中反应，制得米铂。该制备工艺中，二碘-(1R，2R)-1，2-二胺基环己烷合铂和十四酸银见光易分解变色，不易保存。另外，该方法控制银离子的难度较大，制备得到的米铂会有少量的银离子残留且使用了对人体有害的溶剂氯仿。

[0017] 中国新药杂志，2011，20(17)：1715-1717报道的合成方法，是在水中将顺式-[(1R，2R)-1，2-环己二胺-二碘]合铂(环铂)与硝酸银于60℃反应后过滤得到顺式-[二硝酸-(1R，
2R)-1，2-环己二胺]合铂溶液，然后加入肉豆蔻酸钠溶液，60℃反应后处理得到米铂。该方法控制Ag+离子的难度大，制备得到的米铂会有少量的银离子残留。

[0018] 中国药物化学杂志，2011，20(17)：1715-1717报道的合成方法，是在水中将顺式-[(1R，2R)-1，2-环己二胺-二碘]合铂(环铂)与硫酸银反应后过滤得到硫酸顺式-[二水(1R，2R)-(-)1，2-环己二胺]合铂(II)溶液，然后加入Ba(OH)2·8H2O的悬浊液，过滤得到顺式-[二羟基-(1R，2R)-1，2-环己二胺]合铂(II)溶液，最后加入正十四碳酸溶液反应，后处理得到米铂。

[0019] 上述方法多使用银配合物，容易造成银离子过量，而银离子是影响铂类抗肿瘤药物产品质量的主要原因之一。而且有的制备方法中还使用了氯仿，对人体和环境的伤害较大。因此，对粗品进行有效的精制提纯，以满足药用原料的纯度要求，成为急需解决的问题。

[0020] 米铂在水中不溶，若用水做溶剂，无法实现对米铂的提纯，因此，需要选用其他溶剂或手段来提纯米铂。

[0021] 目前关于米铂提纯的文献鲜有报道，只有中国专利CN102225954有过报道。该专利将米铂溶于正丁醇和无水乙醇的混合溶液中，过滤不溶物后在溶液中加入适量去离子水，即得到米铂精品。但其溶解度较小，重结晶收率较低，所得产品收率均在70％以下。

发明内容

[0022] 本发明的目的在于提供一种操作简单，收率高，纯度好的米铂提纯方法。

[0023] 现报道的米铂的合成和提纯方法中，米铂收率不高，杂质未得到有效去除，无法满足药物制剂的要求。

[0024] 本发明通过以下技术方案来解决上述问题：

[0025] 一种米铂的制备方法，采取梯度降温的方式，具体来说，该方法包括如下步骤：

[0026] 1)配制二甲基甲酰胺和正丁醇的混合溶液，升温，加入米铂粗品，保温搅拌至完全溶解，得米铂粗品溶液；

[0027] 2)溶液澄清后，加入活性炭继续保温搅拌，过滤，收集滤液；

[0028] 3)滤液降温，加入甲苯，保温搅拌；

[0029] 4)反应结束后，再次降温，析出晶体，养晶；

[0030] 5)养晶结束继续缓慢降温，养晶，抽滤，洗涤，干燥，得到米铂精品。

[0031] 其中：步骤1)所述的二甲基甲酰胺和正丁醇的混合溶液中，二甲基甲酰胺与正丁醇的体积比为1～3﹕1。

[0032] 步骤1)所述的升温是指将混合溶液升温至130～160℃。

[0033] 步骤1)所述的米铂粗品与混合溶液的固液比为1g:7～15ml。

[0034] 步骤2)中加入活性炭的质量为米铂粗品的1～3％；保温搅拌速度为20～30转/分钟；搅拌时间为20～40分钟。

[0035] 步骤3)所述的甲苯与步骤1)中正丁醇的体积比为0.5～1.5﹕1；所述的加入甲苯是指控制滴加速度，在20～40分钟内滴加完毕。

[0036] 步骤3)所述的降温是指控制时间在1～2小时内降温至70～90℃；保温搅拌速度为10～20转/分钟；搅拌时间为0.5～2小时。

[0037] 步骤4)所述的再次降温所述的温度为20～30℃，养晶时间为1～4小时。

[0038] 步骤5)所述的缓慢降温是指控制时间在1～2小时内降温至-5～5℃，养晶时间为1～4小时。

[0039] 本发明可以有效的去除杂质，反应条件温和，操作简单，收率较高(80～90％)，HPLC纯度高(99.9％以上)，单个杂质可以控制在0.1％以下，总杂可以控制在0.2％以内。

[0040] 依照本发明精制提纯所得的米铂，制成的制剂质量高，生产成本低，可以很大程度上降低肿瘤患者的不良反应和治疗费用，具有一定的社会效益和经济效益。

具体实施方式

[0041] 以下通过实施例具体说明本发明及其有益效果，本领域普通技术人员对本发明所做的显而易见的改变和修饰也包含在本发明之内。

[0042] 实施例1：米铂的精制

[0043] 本实施例所用米铂粗品采用日本专利JP11-315088的制备方法制备，纯度97.18％(HPLC检测)，最大单杂1.86％，总杂3.71％。

[0044] 精制工艺：

[0045] 1)配制二甲基甲酰胺和正丁醇的混合溶液60ml(DMF﹕正丁醇＝2﹕1)，升温至145℃，加入米铂粗品5.00g，保温搅拌至完全溶解，得米铂粗品溶液；

[0046] 2)溶液澄清后，加入活性炭0.10g，以25转/分钟的速度继续保温搅拌30分钟，过滤，收集滤液；

[0047] 3)滤液在1.5小时内降温至80℃，在30分钟内滴加甲苯20ml，然后以15转/分钟速度保温搅拌1小时；

[0048] 4)反应结束后，再次降温至25℃，析出晶体，养晶3小时；

[0049] 5)养晶结束后，在1小时内降温至5℃，再次养晶3小时，抽滤，洗涤，干燥，得固体4.40g，收率88％，纯度99.97％(HPLC检测)，最大单杂0.05％，总杂小于0.05％。

[0050] 实施例2：米铂的精制

[0051] 本实施例所用米铂粗品国际专利WO 94/14470公开的制备方法制备，纯度95.89％(HPLC检测)，最大单杂1.71％，总杂3.35％。

[0052] 精制工艺：

[0053] 1)配制二甲基甲酰胺和正丁醇的混合溶液60ml(DMF﹕正丁醇＝3﹕1)，升温至140℃，加入米铂粗品5.00g，保温搅拌至完全溶解，得米铂粗品溶液；

[0054] 2)溶液澄清后，加入活性炭0.05g，以20转/分钟的速度继续保温搅拌40分钟，过滤，收集滤液；

[0055] 3)滤液在1小时内降温至90℃，在20分钟内滴加甲苯15ml，然后以10转/分钟速度保温搅拌2小时；

[0056] 4)反应结束后，再次降温至30℃，析出晶体，养晶2小时；

[0057] 5)养晶结束后，在2小时内降温至-5℃，再次养晶4小时，抽滤，洗涤，干燥，得固体4.30g，收率86％，纯度99.96％(HPLC检测)，最大单杂0.07％，总杂小于0.07％。

[0058] 实施例3：米铂的精制

[0059] 本实施例所用米铂粗品欧洲专利0193936A1公开的制备方法制备，纯度96.76％(HPLC检测)，最大单杂1.58％，总杂2.96％。

[0060] 精制工艺：

[0061] 1)配制二甲基甲酰胺和正丁醇的混合溶液50ml(DMF﹕正丁醇＝1﹕1)，升温至150℃，加入米铂粗品5.00g，保温搅拌至完全溶解，得米铂粗品溶液；

[0062] 2)溶液澄清后，加入活性炭0.15g，以30转/分钟的速度继续保温搅拌20分钟，过滤，收集滤液；

[0063] 3)滤液在2小时内降温至70℃，在40分钟内滴加甲苯25ml，然后以20转/分钟速度保温搅拌0.5小时；

[0064] 4)反应结束后，再次降温至20℃，析出晶体，养晶4小时；

[0065] 5)养晶结束后，在1.5小时内降温至0℃，再次养晶2小时，抽滤，洗涤，干燥，得固体4.50g，收率90％，纯度99.98％(HPLC检测)，最大单杂0.06％，总杂小于0.08％。

[0066] 实施例4：米铂的精制

[0067] 本实施例所用米铂粗品采用中国专利201010185779.0的制备方法制备，纯度93.61％(HPLC检测)，最大单杂1.23％，总杂2.41％。

[0068] 精制工艺：

[0069] 1)配制二甲基甲酰胺和正丁醇的混合溶液75ml(DMF﹕正丁醇＝1.5﹕1)，升温至135℃，加入米铂粗品5.00g，保温搅拌至完全溶解，得米铂粗品溶液；

[0070] 2)溶液澄清后，加入活性炭0.05g，以25转/分钟的速度继续保温搅拌25分钟，过滤，收集滤液；

[0071] 3)滤液在1.5小时内降温至85℃，在25分钟内滴加甲苯15ml，然后以18转/分钟速度保温搅拌1.5小时；

[0072] 4)反应结束后，再次降温至23℃，析出晶体，养晶1小时；

[0073] 5)养晶结束后，在2小时内降温至5℃，再次养晶1小时，抽滤，洗涤，干燥，得固体4.20g，收率84％，纯度99.97％(HPLC检测)，最大单杂0.07％，总杂小于0.09％。

[0074] 实施例5：米铂的精制

[0075] 本实施例所用米铂粗品购自山东铂源药业有限公司，纯度89.55％(HPLC检测)，最大单杂1.09％，总杂2.21％。

[0076] 精制工艺：

[0077] 1)配制二甲基甲酰胺和正丁醇的混合溶液35ml(DMF﹕正丁醇＝2.5﹕1)，升温至130℃，加入米铂粗品5.00g，保温搅拌至完全溶解，得米铂粗品溶液；

[0078] 2)溶液澄清后，加入活性炭0.10g，以28转/分钟的速度继续保温搅拌35分钟，过滤，收集滤液；

[0079] 3)滤液在2小时内降温至75℃，在35分钟内滴加甲苯15ml，然后以13转/分钟速度保温搅拌2小时；

[0080] 4)反应结束后，再次降温至28℃，析出晶体，养晶4小时；

[0081] 5)养晶结束后，在1小时内降温至0℃，再次养晶1小时，抽滤，洗涤，干燥，得固体4.15g，收率83％，纯度99.96％(HPLC检测)，最大单杂0.06％，总杂小于0.09％。

[0082] 实施例6：米铂的精制

[0083] 本实施例所用米铂粗品购自芜湖诺威化学技术有限公司，纯度95.12％(HPLC检测)，最大单杂0.97％，总杂1.89％。

[0084] 精制工艺：

[0085] 1)配制二甲基甲酰胺和正丁醇的混合溶液45ml(DMF﹕正丁醇＝2﹕1)，升温至155℃，加入米铂粗品5.00g，保温搅拌至完全溶解，得米铂粗品溶液；

[0086] 2)溶液澄清后，加入活性炭0.15g，以22转/分钟的速度继续保温搅拌30分钟，过滤，收集滤液；

[0087] 3)滤液在1.5小时内降温至70℃，在30分钟内滴加甲苯15ml，然后以10转/分钟速度保温搅拌2小时；

[0088] 4)反应结束后，再次降温至25℃，析出晶体，养晶4小时；

[0089] 5)养晶结束后，在1小时内降温至5℃，再次养晶4小时，抽滤，洗涤，干燥，得固体4.35g，收率87％，纯度99.98％(HPLC检测)，最大单杂0.05％，总杂小于0.08％。

[0090] 实施例7：米铂的精制

[0091] 本实施例所用米铂粗品购自南京卡文迪许生物工程技术有限公司，纯度96.23％(HPLC检测)，最大单杂1.31％，总杂2.35％。

[0092] 精制工艺：

[0093] 1)配制二甲基甲酰胺和正丁醇的混合溶液70ml(DMF﹕正丁醇＝2.5﹕1)，升温至160℃，加入米铂粗品5.00g，保温搅拌至完全溶解，得米铂粗品溶液；

[0094] 2)溶液澄清后，加入活性炭0.15g，以25转/分钟的速度继续保温搅拌30分钟，过滤，收集滤液；

[0095] 3)滤液在2小时内降温至90℃，在35分钟内滴加甲苯30ml，然后以20转/分钟速度保温搅拌1.5小时；

[0096] 4)反应结束后，再次降温至30℃，析出晶体，养晶1小时；

[0097] 5)养晶结束后，在1.5小时内降温至-5℃，再次养晶4小时，抽滤，洗涤，干燥，得固体4.25g，收率85％，纯度99.99％(HPLC检测)，最大单杂0.07％，总杂小于0.08％。

[0098] 实施例8-14所采用的米铂粗品与实施例1相同，米铂粗品与混合溶液的比例如实施例所述，区别在于采用的溶剂配比不同，得到的产品有关物质结果和收率，如表1所示。

[0099] 表1：不同溶剂配比精制米铂

[0100]

[0101] 试验例：稳定性试验

[0102] 取本发明实施例1-3所得产品，于6±2℃条件下放置，考察稳定性，至长期12个月，三批产品中杂质A、C、D、E、F、S,S-异构体及cis-异构体均未检出，有关物质其他杂质中最大单杂与总杂未发生明显变化。具体结果见表2：

[0103]

[0104] 表2中所列杂质名称及结构式如下：

[0105]