一种野生干巴菌工厂化生产方法

摘要

本发明公开一种野生干巴菌工厂化生产方法，干巴菌菌种已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC）保藏，保藏号为：CGMCC NO. 9902。将野生干巴菌消毒后纵向撕成块状，接种于培养基中进行斜面培养即得到干巴菌菌种。将该干巴菌菌种接种到营养袋的培养基中，同时将消毒处理的松树根插入该营养袋中培养，再分成数份后分别接种于上述相同的培养基中以相同方法培养，然后整袋栽种在松树根部的土壤中，以一定条件培养直至子实体露出土壤后20～30天，即能采摘干巴菌；如此实现野生干巴菌的规模化、工业化生产。本发明所得干巴菌子实体保证了干巴菌的原有香味和营养。本发明生产干巴菌的成活率高，能达到99%。

权利要求

1.一种干巴菌菌种，其特征在于：该菌种已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC）保藏，保藏号为：CGMCC NO. 9902；

所述干巴菌菌种通过下列步骤制备：

A、采摘新鲜粗壮的野生干巴菌，清理杂草和泥土后，用体积浓度为75%酒精清洁干巴菌表面，之后在无菌条件下纵向撕成块状；

B、将步骤A所得块状的干巴菌接种于下列培养基中：玉米面800～1200份、黄豆粉800～

1200份、松油300～600份、维生素B1 0.2～0.8份、硫酸镁0.5～1.5份、质量浓度为50%的葡萄糖溶液450～650份、质量浓度为10%的葡萄酸钙溶液180～300份、磷酸二氢钾0.2～0.8份、酵母40～60份，于22～25℃下进行斜面培养20～25天，得到干巴菌菌种，其保藏号为：CGMCC NO. 9902。

2.根据权利要求1所述的干巴菌菌种，其特征在于：所述步骤A中块状的干巴菌长度为3～5cm、厚度1～2cm。

3.根据权利要求1所述的干巴菌菌种，其特征在于：所述步骤B的斜面培养是在试管中完成的。

说明书

一种野生干巴菌工厂化生产方法

技术领域

[0001] 本发明属于野生食用菌培植技术领域，涉及一种野生干巴菌工厂化生产方法。

背景技术

[0002] 干巴菌（Thelephora ganbajun）属于担子菌门（Basidiomyeo-ta）层菌钢（Hymenomyeetes）非褶菌目（Aphyhoporales）革菌科（TheLephoraceae）革菌属（Thelephora）中的种类，在市场上称为干巴菌的还包括橙黄革菌（T.aurantiotineta）连坐革菌（T.vialis）掌状革菌（T.palmata）等其子实体从生珊瑚状多次分枝，由基部较厚的菌肉纤维状革质幼时柔软老后干韧，气香味美深受广大消费者喜爱，在云南省分布广泛，昆明、楚雄、玉溪、丽江、保山、曲靖、思茅等地区均有分布。

[0003] 干巴菌主要生长在海拔1000～2200m左右的松林地，主要是云南矮松地针叶林中，但也分布于松栎混交林或纯栎林中，它与松属植物（如云南松和思茅松等）有外生菌根关系，它独特的香味必须要在云南松林中的红土土壤这一生长环境才能得到保证，其它松林或者其它土壤则无法保证它独特的香味。研究发现干巴菌生长期较长，从菇蕾长到适合采摘的子实体需要20天左右，长到子实体老熟则需要30～40天左右，在地面生长期，天气的变化对干巴菌的生长发育和病虫害的发生有着重要影响，若长时间不下雨空气湿度低于70%，子实体生长不良，容易发生萎缩病，一天一场小雨，阴晴交替，保持空气湿度80%左右，最有利于干巴菌的生长、发育，但若长时间阴雨连绵，空气湿度在95%左右，干巴菌容易发生粉红单端孢端病，因此干巴菌是一种非常娇气的野生菌种，采收的最佳时期是子实体出土后的20～30天，干巴菌主要采收时间为6月～9月，10月以后的干巴菌已很稀少。

[0004] 干巴菌含有大量的营养物质，其中蛋白质的含量为24.15%、粗纤维为8.45%、总糖量为3.1%，并且每100g干巴菌中的维生素A为16.0mg、B族维生素为1.2mg，干巴菌还含有人体必需的18种氨基酸，其中的亚油酸含量最高，还含有新的对联三苯类色素，具有抗氧化活性，干巴菌含有丰富的矿物质微量元素，如铁、钾、钠、磷、钙硒等。总之干巴菌营养丰富，口感好，一直以来都处于供不应求的状况，近几年野生干巴菌销售量逐年减少，价格攀升严重，每1000g售价最高达到1500元左右，已成为高价商品。现今还没有实现工厂化生产，因此开发一种能实现规模化、产业化生产野生干巴菌的方法，是满足人们及市场所需的重要途径。

发明内容

[0005] 为实现干巴菌的规模化、产业化生产，本发明提供一种野生干巴菌工厂化生产方法。

[0006] 本发明通过下列技术方案实现：一种干巴菌菌种，该菌种已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC）保藏，保藏号为：CGMCC NO. 9902，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

[0007] 本发明的另一目的在于提供一种干巴菌菌种的制备方法，经过下列各步骤：

[0008] A、采摘新鲜粗壮的野生干巴菌，清理杂草和泥土后，用体积浓度为75%酒精清洁干巴菌表面，之后在无菌条件下纵向撕成块状；

[0009] B、将步骤A所得块状的干巴菌接种于下列培养基中：玉米面800～1200份、黄豆粉800～1200份、松油300～600份、维生素B1 0.2～0.8份、硫酸镁0.5～1.5份、质量浓度为50%的葡萄糖溶液450～650份、质量浓度为10%的葡萄酸钙溶液180～300份、磷酸二氢钾0.2～
0.8份、酵母40～60份，于22～25℃下进行斜面培养20～25天，得到干巴菌菌种，其保藏号为：CGMCC NO. 9902。

[0010] 所述步骤A中块状的干巴菌长度为3～5cm、厚度1～2cm。

[0011] 所述步骤B的斜面培养是在试管中完成的。

[0012] 本发明的又一个目的在于提供一种用所述干巴菌菌种工业化生产野生干巴菌的方法，包括下列步骤：

[0013] （1）将保藏号为：CGMCC NO. 9902的干巴菌菌种，接种到营养袋的培养基中，同时将消毒处理的松树根插入该营养袋的培养基中，于22～25℃下培养25～30天，培育得到第二代干巴菌菌种；所述营养袋的培养基由下列质量份的组分组成：松木80～120份、松针20～40份、玉米20～40份、黄豆粉20～40份、麦麸5～15份、石膏0.01～0.05份、白糖5～15份、松油5～15份、酵母0.05～0.15份；

[0014] （2）取出步骤（1）所得第二代干巴菌菌种分成数份后，分别接种于营养袋的培养基中，并在每袋营养袋中插入消毒处理的松树根，于22～25℃下培养25～30天，得到扩繁后的第三代干巴菌菌种；所述营养袋的培养基同步骤（1）；

[0015] （3）将步骤（2）扩繁所得第三代干巴菌菌种，整袋栽种在松树根部的土壤中，栽种深度为10cm以下，栽种后用消毒后的腐植土覆盖，并控制温度为17～18℃、湿度70～80%、风力1～2级、光照强度为400～600lux，直至子实体露出土壤后20～30天，即能采摘干巴菌；

[0016] （4）采摘时用刀平齐地面水平切下地上的干巴菌，地下干巴菌继续留下，并控制温度为17～18℃、湿度70～80%、风力1～2级、光照强度为400～600lux，直至子实体露出土壤后20～30天，又能采摘干巴菌；如此实现野生干巴菌的规模化、工业化生产。

[0017] 所述步骤（1）、（2）中消毒处理的松树根是指将成活的、长25～35cm、直径0.5～1cm的松树树根剪成斜面，去除分叉，再用体积浓度为75%的酒精进行清理和消毒，直至无泥土附着，然后将树根插入营养袋中10cm，并封口，保持干操通风。

[0018] 所述步骤（2）的第二代干巴菌菌种分成数份是指：将每一袋营养袋中长满的第二代干巴菌菌种分成15～25袋。

[0019] 所述步骤（3）中消毒后的腐植土是用质量浓度为3～5‰的乙酸溶液喷洒后的腐植土。

[0020] 所述步骤（3）的松树是指移栽在大棚中的松树，且土壤来自松树林土壤，具体操作是：将来自松树林的土壤移运至大棚中进行翻土和平铺形成大棚土壤，将控根器按常规间隔竖直放置于大棚土壤上，再将松树置于控根器中，将来自松树林的土壤填入控根器中覆盖和固定松树根部，并按常规管护使松树生长一年以上。

[0021] 所述松树为云南松，树龄为5～25年。

[0022] 所述土壤为海拔在1500～2200m、pH值为4.5以上、有机质为1.5以上的松树林中的土壤。

[0023] 所述控根器的高度为0.8～1m、直径为0.8～1.2m。第三代干巴菌菌种整袋栽种时的袋数视松树的根部大小来确定。

[0024] 本发明具备的优点及效果：本发明可通过菌种深埋在松树根部底下，长期保存老菌种产生孢子，利用人工营造出大自然的自然生长规律；或者通过移栽培育营造成干巴菌能自然生长的环境，利用温室大棚调整温度、湿度、光度、风度都由自动化控制，以5～25年云南松及云南红土土壤为条件，营造出山林一样的砂石土壤，再以菌种培育孢子或斜面培育的方式大量获得干巴菌。使用本发明的方法所得干巴菌子实体不会变异，口感香味与野生干巴菌是完全相同的，保证了干巴菌的原有香味和营养。本发明生产干巴菌的成活率高，能达到99%，且无需使用农药化肥，采收期短，每20～30天即可采摘一次，通过人工控制环境条件，可实现规模化、产业化生产干巴菌，且一年四季均可采收。

具体实施方式

[0025] 下面通过实施例对本发明做进一步说明。

[0026] 实施例1

[0027] A、采摘新鲜粗壮的野生干巴菌，清理杂草和泥土后，用体积浓度为75%酒精清洁干巴菌表面，之后在无菌条件下纵向撕成长度为3～5cm、厚度1～2cm的块状；

[0028] B、将步骤A所得块状的干巴菌接种于下列培养基中：玉米面1000份、黄豆粉1000份、松油500份、维生素B1 0.5份、硫酸镁1份、质量浓度为50%的葡萄糖溶液550份、质量浓度为10%的葡萄酸钙溶液200份、磷酸二氢钾0.5份、酵母50份，于23℃下在试管中进行斜面培养22天，得到干巴菌菌种，其保藏号为：CGMCC NO. 9902；

[0029] C、将保藏号为：CGMCC NO. 9902的干巴菌菌种，接种到营养袋的培养基中，将成活的、长30cm、直径1cm的松树树根剪成斜面，去除分叉，再用体积浓度为75%的酒精进行清理和消毒，直至无泥土附着，然后将树根插入营养袋中10cm，并封口，保持干操通风，于25℃下培养28天，培育得到第二代干巴菌菌种；所述营养袋的培养基由下列质量份的组分组成：松木100份、松针30份、玉米30份、黄豆粉30份、麦麸10份、石膏0.03份、白糖10份、松油10份、酵母0.1份；

[0030] D、取出步骤C所得第二代干巴菌菌种，将每一袋营养袋中长满的第二代干巴菌菌种分成20袋后，分别接种于营养袋的培养基中，将成活的、长30cm、直径1cm的松树树根剪成斜面，去除分叉，再用体积浓度为75%的酒精进行清理和消毒，直至无泥土附着，然后将树根插入营养袋中10cm，并封口，保持干操通风，于25℃下培养28天，得到扩繁后的第三代干巴菌菌种；所述营养袋的培养基同步骤C；

[0031] E、将来自松树林的土壤移运至大棚中进行翻土和平铺形成大棚土壤，将高度为1m、直径为1m的控根器按常规间隔竖直放置于大棚土壤上，再将树龄为8年的松树置于控根器中，将来自松树林的土壤填入控根器中覆盖和固定松树根部，并按常规管护使松树生长一年以上；将步骤D扩繁所得第三代干巴菌菌种，整袋栽种在控根器中松树根部的土壤内，栽种深度为15cm，栽种2袋，栽种后用消毒后的腐植土覆盖，并控制温度为18℃、湿度80%、风力1～2级、光照强度为500lux，直至子实体露出土壤后20～30天，即能采摘干巴菌；所述消毒后的腐植土是用质量浓度为4‰的乙酸溶液喷洒后的腐植土；

[0032] F、采摘时用刀平齐地面水平切下地上的干巴菌，地下干巴菌继续留下，并控制温度为18℃、湿度80%、风力1～2级、光照强度为500lux，直至子实体露出土壤后20～30天，又能采摘干巴菌；如此实现野生干巴菌的规模化、工业化生产。成活率达99%。

[0033] 实施例2

[0034] A、采摘新鲜粗壮的野生干巴菌，清理杂草和泥土后，用体积浓度为75%酒精清洁干巴菌表面，之后在无菌条件下纵向撕成长度为3cm、厚度1cm的块状；

[0035] B、将步骤A所得块状的干巴菌接种于下列培养基中：玉米面800份、黄豆粉800份、松油600份、维生素B1 0.2份、硫酸镁1.5份、质量浓度为50%的葡萄糖溶液450份、质量浓度为10%的葡萄酸钙溶液300份、磷酸二氢钾0.2份、酵母40份，于22℃下在试管中进行斜面培养25天，得到干巴菌菌种，其保藏号为：CGMCC NO. 9902；

[0036] C、将保藏号为：CGMCC NO. 9902的干巴菌菌种，接种到营养袋的培养基中，将成活的、长25cm、直径0.8cm的松树树根剪成斜面，去除分叉，再用体积浓度为75%的酒精进行清理和消毒，直至无泥土附着，然后将树根插入营养袋中10cm，并封口，保持干操通风，于23℃下培养30天，培育得到第二代干巴菌菌种；所述营养袋的培养基由下列质量份的组分组成：松木80份、松针20份、玉米40份、黄豆粉20份、麦麸5份、石膏0.05份、白糖5份、松油15份、酵母0.05份；

[0037] D、取出步骤C所得第二代干巴菌菌种，将每一袋营养袋中长满的第二代干巴菌菌种分成15袋后，分别接种于营养袋的培养基中，将成活的、长25cm、直径0.8cm的松树树根剪成斜面，去除分叉，再用体积浓度为75%的酒精进行清理和消毒，直至无泥土附着，然后将树根插入营养袋中10cm，并封口，保持干操通风，于22℃下培养30天，得到扩繁后的第三代干巴菌菌种；所述营养袋的培养基同步骤C；

[0038] E、将海拔在1500～2200m、pH值为4.5以上、有机质为1.5以上的来自松树林的土壤移运至大棚中进行翻土和平铺形成大棚土壤，将高度为0.8m、直径为1.2m的控根器按常规间隔竖直放置于大棚土壤上，再将树龄为5年的云南松置于控根器中，将来自松树林的土壤填入控根器中覆盖和固定松树根部，并按常规管护使松树生长一年以上；将步骤D扩繁所得第三代干巴菌菌种，整袋栽种在控根器中松树根部的土壤内，栽种深度为12cm，栽种1袋，栽种后用消毒后的腐植土覆盖，并控制温度为17℃、湿度70%、风力1级、光照强度为400lux，直至子实体露出土壤后20天，即能采摘干巴菌；所述消毒后的腐植土是用质量浓度为3‰的乙酸溶液喷洒后的腐植土；

[0039] F、采摘时用刀平齐地面水平切下地上的干巴菌，地下干巴菌继续留下，并控制温度为17℃、湿度70%、风力1级、光照强度为400lux，直至子实体露出土壤后20天，又能采摘干巴菌；如此实现野生干巴菌的规模化、工业化生产。成活率达98.9%。

[0040] 实施例3

[0041] A、采摘新鲜粗壮的野生干巴菌，清理杂草和泥土后，用体积浓度为75%酒精清洁干巴菌表面，之后在无菌条件下纵向撕成长度为5cm、厚度2cm的块状；

[0042] B、将步骤A所得块状的干巴菌接种于下列培养基中：玉米面1200份、黄豆粉1200份、松油300份、维生素B1 0.8份、硫酸镁0.5份、质量浓度为50%的葡萄糖溶液650份、质量浓度为10%的葡萄酸钙溶液180份、磷酸二氢钾0.8份、酵母60份，于25℃下在试管中进行斜面培养20天，得到干巴菌菌种，其保藏号为：CGMCC NO. 9902；

[0043] C、将保藏号为：CGMCC NO. 9902的干巴菌菌种，接种到营养袋的培养基中，将成活的、长35cm、直径0.5cm的松树树根剪成斜面，去除分叉，再用体积浓度为75%的酒精进行清理和消毒，直至无泥土附着，然后将树根插入营养袋中10cm，并封口，保持干操通风，于22℃下培养25天，培育得到第二代干巴菌菌种；所述营养袋的培养基由下列质量份的组分组成：松木120份、松针40份、玉米20份、黄豆粉40份、麦麸15份、石膏0.01份、白糖15份、松油5份、酵母0.15份；

[0044] D、取出步骤C所得第二代干巴菌菌种，将每一袋营养袋中长满的第二代干巴菌菌种分成25袋后，分别接种于营养袋的培养基中，将成活的、长35cm、直径0.5cm的松树树根剪成斜面，去除分叉，再用体积浓度为75%的酒精进行清理和消毒，直至无泥土附着，然后将树根插入营养袋中10cm，并封口，保持干操通风，于23℃下培养25天，得到扩繁后的第三代干巴菌菌种；所述营养袋的培养基同步骤C；

[0045] E、将海拔在1500～2200m、pH值为6、有机质为2的来自松树林的土壤移运至大棚中进行翻土和平铺形成大棚土壤，将高度为1m、直径为0.8m的控根器按常规间隔竖直放置于大棚土壤上，再将树龄为15～25年的云南松置于控根器中，将来自松树林的土壤填入控根器中覆盖和固定松树根部，并按常规管护使松树生长一年以上；将步骤D扩繁所得第三代干巴菌菌种，整袋栽种在控根器中松树根部的土壤内，栽种深度为10cm以下，栽种3袋，栽种后用消毒后的腐植土覆盖，并控制温度为17～18℃、湿度75%、风力2级、光照强度为600lux，直至子实体露出土壤后30天，即能采摘干巴菌；所述消毒后的腐植土是用质量浓度为5‰的乙酸溶液喷洒后的腐植土；

[0046] F、采摘时用刀平齐地面水平切下地上的干巴菌，地下干巴菌继续留下，并控制温度为17～18℃、湿度75%、风力2级、光照强度为600lux，直至子实体露出土壤后30天，又能采摘干巴菌；如此实现野生干巴菌的规模化、工业化生产。成活率达99.2%。