可用作αvβ6整联蛋白拮抗剂的萘啶衍生物

摘要

式(I)的化合物或其(I)的盐，其中R1代表氢原子、甲基或乙基，R2代表氢原子或氟原子，R3代表氢原子、甲基或乙基，。

权利要求

1. 式(I)的化合物

其中 Ri代表氨原子、甲基或乙基； 化代表氨原子或氣原子； R3代表氨原子、甲基或乙基； 或其药学上可接受的盐。

2. 根据权利要求1的式（I)化合物，其中Ri代表甲基，R2代表氨原子且R3代表甲基；或其 药学上可接受的盐。

3. 根据权利要求1的式（I)化合物，其中Ri代表甲基，R2代表氨原子且R3代表氨原子;或 其药学上可接受的盐。

4. 根据权利要求1的式（I)化合物，其中Ri代表甲基，R2代表氣基团且R3代表甲基；或其 药学上可接受的盐。

5. 根据权利要求1的式（I)化合物，其中Ri代表氨原子，R2代表氨原子且R3代表氨原子； 或其药学上可接受的盐。

6. 根据权利要求1的式（I)化合物，其中Ri代表乙基，R2代表氨原子且R3代表甲基；或其 药学上可接受的盐。

7. 根据权利要求1的式（I)化合物，其中Ri代表乙基，R2代表氨原子且R3代表乙基；或其 药学上可接受的盐。

8. 根据权利要求1的式（I)化合物，其中Ri代表氨原子，R2代表氨原子且R3代表甲基；或 其药学上可接受的盐。

9. 根据权利要求1的式(I)的化合物。

10. 根据权利要求9的化合物，其选自： 3-(3-(3,5-二甲基-1 护化挫-1-基)苯基)-4-((仍-3-(2-(5,6,7,8-四氨-1,8-糞晚-2- 基）乙基川比咯烧-1-基)下酸； 3-(3-(5-甲基-1 护化挫-1-基）苯基)-4-((仍-3-(2-(5,6,7,8-四氨-1,8-糞晚-2-基） 乙基川比咯烧-1-基)下酸； 3-(3-(5-乙基-3-甲基-1 护化挫-1-基）苯基）-4-((仍-3-(2-(5,6,7,8-四氨-1,8-糞 晚-2-基）乙基川比咯烧-1-基)下酸； 3-(3-(1护化挫-1-基）苯基)-4-((仍-3-(2-(5,6,7,8-四氨-1,8-糞晚-2-基）乙基）化 咯烧-1-基)下酸； 3-(3-(3,5-二乙基-1 护化挫-1-基）苯基)-4-((仍-3-(2-(5,6,7,8-四氨-1,8-糞晚-2- 基）乙基川比咯烧-1-基)下酸； 3-(3-(4-氣-3,5-二甲基-1 护化挫-1-基)苯基)-4-((仍-3-(2-(5,6,7,8-四氨-1,8-糞 晚-2-基）乙基川比咯烧-1-基)下酸； 3-(3-(3-甲基-1 护化挫-1-基）苯基)-4-((仍-3-(2-(5,6,7,8-四氨-1,8-糞晚-2-基） 乙基川比咯烧-1-基)下酸。

11. 根据权利要求1的化合物，其为： 3-(3-(3,5-二甲基-1 护化挫-1-基)苯基)-4-((仍-3-(2-(5,6,7,8-四氨-1,8-糞晚-2- 基）乙基川比咯烧-1-基)下酸：

12. 根据权利要求1的化合物，其为（幻-3-(3-(3,5-二甲基-1//-化挫-1-基）苯基）-4- ((仍-3-(2-(5,6,7,8-四氨-1,8-糞晚-2-基）乙基川比咯烧-1-基)下酸

13. 根据权利要求1的化合物，其为 3-(3-(3,5-二甲基-1 护化挫-1-基)苯基)-4-((仍-3-(2-(5,6,7,8-四氨-1,8-糞晚-2- 基）乙基川比咯烧-1-基)下酸盐酸盐。

14. 根据权利要求1的化合物，其为（幻-3-(3-(3,5-二甲基-1护化挫-1-基）苯基）-4- ((仍-3-( 2-( 5，6，7，8-四氨-1，8-糞晚-2-基）乙基)邮咯烧-1-基)下酸盐酸盐。

15. 药物组合物，其包含根据权利要求1至14中任一项的式（I)化合物或其药学上可接 受的盐和一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

16. 根据权利要求1至14中任一项的式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备药物中 的用途，所述药物用于治疗α店6受体括抗剂适应的疾病或状况。

17. 根据权利要求16的用途，用于治疗纤维化疾病。

18. 根据权利要求16的用途，用于治疗特发性肺纤维化。

19. 式(II)的化合物

其中Ri代表氨原子、甲基或乙基； 化代表氨原子或氣原子； R3代表氨原子、甲基或乙基;且 R4是Cl至Cs烷基;或其盐。

20. 如权利要求19中要求保护的式（II)化合物，其中R4代表叔下基、异丙基、乙基或甲 基;或其盐。

21. 如权利要求20中要求保护的化合物，其为3-(3-(3,5-二甲基-1//-化挫-1-基）苯 基)-4-((仍-3-(2-(5,6,7,8-四氨-1,8-糞晚-2-基）乙基)R比咯烧-1-基)下酸甲醋。

22. 如权利要求20中要求保护的化合物，其为3-(3-(3,5-二甲基-1护化挫-1-基）苯 基)-4-((仍-3-(2-(5,6,7,8-四氨-1,8-糞晚-2-基）乙基)R比咯烧-1-基)下酸叔下醋。

说明书

可用作整联蛋白拮抗剂的萘啶衍生物 发明领域

[0001] 本发明涉及作为av06整联蛋白拮抗剂的吡咯烷化合物，包含此类化合物的药物组 合物，和它们在治疗中、尤其在治疗c〇3 6整联蛋白拮抗剂适应的状况中的用途，化合物在制 备用于治疗av06整联蛋白的拮抗剂适应的状况的药物中的用途，和治疗和预防人中的a v06 整联蛋白的拮抗适应的病症的方法，和可用作制备此类化合物的中间体的化合物。

[0002] 发明背景

[0003] 整联蛋白超家族蛋白是由a和0亚基构成的异源二聚细胞表面受体。已经报道了 18 种a亚基和8种0亚基，其已经表明形成24种不同的a/0异源二聚体。每条链包含大细胞外结 构域(对于0亚基，>640个氨基酸，对于a亚基，>940个氨基酸），每条链具有约20个氨基酸的 跨膜跨越区域，并且通常每条链具有30-50个氨基酸的短胞质尾。不同的整联蛋白已经显示 参与过多的细胞生物学，包括细胞粘附至细胞外基质，细胞_细胞相互作用，和对细胞迀移、 增殖、分化和存活的影响（Barczyk等人，a/3c/ Tissue 7?esea_rcA, 2010，3划，269)〇

[0004] 整联蛋白受体经由与配体的短蛋白-蛋白结合界面与结合蛋白相互作用，且整联 蛋白家族可以分为在此类配体中共享相似的结合识别基序的亚家族。主要亚家族是RGD-整 联蛋白，其识别在其蛋白序列内含有RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸)基序的配体。在该亚家 族中存在8种整联蛋白，即a vfo、av03、av05、a v06、av08、aIIb0 3、〇5仇、，其中命名法表明civfo、 avf33、 avf35、avf36和avf3 8与发散亚基共享共同的V亚基，且ajuddPasfo与发散a亚基共享共 同的01亚基。&亚基已经显示与11种不同的a亚基配对，其中只有上述列出的3种通常识别 RGD肽基序。（Humphries等人，o/CeD 5fcie/3ce, 2006，HP, 3901)。

[0005] 在8种RGD结合整联蛋白内对不同的含有RGD的配体具有不同的结合亲和力和特异 性。配体包括蛋白诸如纤连蛋白、玻连蛋白、骨桥蛋白和转化生长因子仇和此（TGFPjPTGF 03)的潜在相关肽(LAPs) JGm和TGFfo与LAPs的结合已经在几个系统中显示能够活化TGF 01和TGF03生物活性，和随后的TGF0驱动的生物学（Worthington等人，freflc/s i/3 5fcie/3ces, 2011，光，47) aRGD整联蛋白与此类配体的特异性结合取决于许 多因素，这取决于细胞表型。此类配体的多样性，连同RGD结合整联蛋白的表达模式，产生了 多种疾病干预的机会。此类疾病包括纤维变性疾病（Margadant等人，及彷0 reports， 2010，97)、炎性病症、癌症（Desgrosellier等人，7Vatt/_re Ca/3ce_r, 2010， 川，9)、再狭窄和具有血管生成组分的其它疾病（Weis等人，CoW办"ad. Per sped. Med. 2011, 1, a006478)〇

[0006] 文献中已经公开了显著数目的av整联蛋白诘抗剂（Goodman等人，7>e/3t/s i/3 PAaiTsacoiogicaJ Sbieflces，2012,幻，405)，包括诘抗剂抗体、小肽和化合物。对于抗 体，这些包括泛-av诘抗剂Intetumumab，选择性av03诘抗剂Etaracizumab，和选择性a v06诘 抗剂31乂-100。西仑吉肽（(^161^^(16)是抑制€^3和€^ 5两者的环状肽拮抗剂，且38-267268是抑制<^03和(1¥0 5两者的化合物的实例（1;[11^;[118011-13611^等人，1/^6 5?. 丄Kis. &i.，2006，47，1600)。化合物充当av整联蛋白的不同组合的拮抗剂 的发明使得能够产生且适合于特定疾病适应症的新颖药剂。

[0007] 肺纤维化代表几种间质性肺病(包括特发性间质性肺炎)的末期，且特征在于肺间 质内的细胞外基质的过量沉积。在特发性间质性肺炎间，特发性肺纤维化(IPF)代表最常见 和最致命的状况，在诊断后具有3至5年的中值生存时间。IPF中的纤维化通常是渐进的，目 前药物干预难治的，且不可避免地由于功能肺泡单位的闭塞而导致呼吸衰竭。IPF在美国和 欧洲影响约500,000人。该状况因此代表迫切需要新颖治疗方法的重大未满足的医疗需要 (Datta A 等人，Novel therapeutic approaches for pulmonary fibrosis, British Journal of Pharmacology 2011 163:141-172)。

[0008] 存在强体外实验动物和IPF患者免疫组织化学数据以支持上皮限制的整联蛋白av 说在TGF-m的活化中的关键作用。该整联蛋白的表达在正常上皮组织中是低的，且在损伤 和发炎上皮(包括IPF中的活化上皮）中显著上调。靶向该整联蛋白因此降低干扰更广泛的 TGF-P稳态作用的理论可能性。抗体阻断对a v06整联蛋白的部分抑制已经显示防止肺纤维 化，而不加重炎症（Horan GS等人Partial inhibition of integrin av06 prevents pulmonary fibrosis without exacerbating inflammation. Am J Respir Crit Care 2008 177:56-65)。

[0009] av03整联蛋白在许多细胞类型(包括血管内皮)上表达，其中其已被表征为屏障抗 性的调节剂。急性肺损伤和败血症的动物模型中的数据已经表明该整联蛋白在血管渗漏中 的显著作用，因为敲除小鼠显示明显增强的血管渗漏，导致肺水肿或死亡。此外，能够抑制 功能的抗体引起人肺动脉和脐静脉内皮细胞响应于多种生长因子的单层渗透性的急剧 增加。这些数据表明c〇33在维持血管刺激之后血管内皮完整性中的保护作用，且该功能的抑 制可以驱动慢性疾病背景中的致病性反应(Su等人Absence of integrin av03 enhances vascular leak in mice by inhibiting endothelial cortical actin formation Am J Tfespir Crit Care 2012 185:58-66)。因此，av06相比于av&的选择性可以提供安全优 势。

[0010] 本发明的一个目的是提供av06诘抗剂。

[0011] 发明概述

[0012] 在本发明的第一个方面，提供了式（I)的化合物或其盐，更具体地式（I)的化合物 或其药学上可接受的盐

[0014] 其中

[0015] 代表氢原子、甲基或乙基

[0016] R2代表氢原子或氟原子

[0017] R3代表氢原子、甲基或乙基。

[0018]式（I)的化合物和它们的盐具有av06拮抗剂活性，且据信可能用于治疗或预防某些 病症。

[0019] 在本发明的第二个方面，提供了包含式（I)的化合物或其药学上可接受的盐和一 种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。

[0020] 在本发明的第三个方面，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治 疗中，尤其用于治疗整联蛋白受体拮抗剂适应的疾病或病症。

[0021] 在本发明的第四个方面，提供了在有需要的人中治疗或预防c〇36整联蛋白受体拮 抗剂适应的疾病或病症的方法，所述方法包括向有需要的人施用治疗有效量的式（I)的化 合物或其药学上可接受的盐。

[0022] 在本发明的第五个方面，提供了式（I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备药 物中的用途，所述药物用于治疗整联蛋白受体拮抗剂适应的疾病或病症。

[0023] 发明详述

[0024]在本发明的第一个方面，提供了式(I)的化合物或其盐

[0026] 其中

[0027] 代表氢原子、甲基或乙基

[0028] R2代表氢原子或氟原子 [0029] R3代表氢原子、甲基或乙基。

[0030]在一些实施方案中，式(I)的化合物具有以下构型：

[0032]应当理解的是，本发明涵盖上文所述的具体和优选基团的所有组合。

[0033] 在一些实施方案中，代表甲基，R2代表氢原子且R3代表甲基。

[0034] 在一些实施方案中，Ri代表甲基，R2代表氢原子且R3代表氢原子。

[0035] 在一些实施方案中，代表甲基，R2代表氟基团且R3代表甲基。

[0036] 在一些实施方案中，Ri代表氢原子，R2代表氢原子且R3代表氢原子。

[0037] 在一些实施方案中，Ri代表乙基，R2代表氢原子且R3代表甲基。

[0038] 在一些实施方案中，Ri代表乙基，R2代表氢原子且R3代表乙基。

[0039] 在一些实施方案中，Ri代表氢原子，R2代表氢原子且R3代表甲基。

[0040] 在一个实施方案中，所述化合物选自：

[0041] 3-(3-(3,5-二甲基-1"-吡唑-1-基）苯基)-4-(U)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘 啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸；

[0042] 3-(3-(5_ 甲基-1 炉吡唑-1-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸；

[0043] 3-(3-(5-乙基-3-甲基-丨炉吡唑―丨-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-l，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸；

[0044] 3-(3-(1炉吡唑-1-基）苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8_ 四氢-1,8-萘啶-2-基）乙 基)吡咯烷-1-基)丁酸；

[0045] 3-(3-(3,5_ 二乙基-1"-吡唑-1-基）苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8_ 四氢-1,8-萘 啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸；

[0046] 3-(3-(4_ 氟-3,5-二甲基-1炉吡唑-1-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-1， 8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸；

[0047] 3-(3-(3_ 甲基-1 炉吡唑-1-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8_ 四氢-1,8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸；

[0048]或其药学上可接受的盐。

[0049] 在一个实施方案中，所述化合物是：

[0050] 3-(3-(3,5_ 二甲基-1"-吡唑-1-基）苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8_ 四氢-1,8-萘 啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸；

[0051]或其药学上可接受的盐。

[0052]应当理解的是，本发明涵盖作为游离碱和作为其盐(例如作为药学上可接受的盐） 的式(I)的化合物。在一个实施方案中，本发明涉及式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。 [0053] 对于合适盐的综述，参见Berge等人，x PAai-ffl. 5fci.，66:1-19，（1977)。合适 的药学上可接受的盐列于P H Stahl and C G Wermuth, editors, //aflc/Aoo女 〇/ Pharmaceutical Salts; Properties, Selection and Use, ffeinheim/Surich：ffiley-VCH/VHCA，2002。合适的药学上可接受的盐可以包括与无机酸的酸加成盐，所述无机酸诸 如，例如，盐酸，氢溴酸，正磷酸，硝酸，磷酸，或硫酸，或与有机酸的酸加成盐，所述有机酸诸 如，例如，甲磺酸，乙磺酸，对甲苯磺酸，乙酸，丙酸，乳酸，柠檬酸，富马酸，苹果酸，琥珀酸， 水杨酸，马来酸，甘油磷酸，酒石酸，苯甲酸，谷氨酸，天冬氨酸，苯磺酸，萘磺酸，诸如2-萘磺 酸，己酸或乙酰水杨酸。通常，药学上可接受的盐适当时可以通过使用期望的酸或碱容易地 制备。所得盐可以从溶液沉淀出且通过过滤来收集或可以通过蒸发溶剂来回收。

[0054]其它非药学上可接受的盐，例如甲酸盐、草酸盐或三氟乙酸盐，可以用于，例如分 离式(I)的化合物，且包括在本发明的范围之内。

[0055]药学上可接受的碱加成盐可以通过式（I)的化合物与合适的无机或有机碱（例如 三乙胺、乙醇胺、三乙醇胺、胆碱、精氨酸、赖氨酸或组氨酸），任选在合适的溶剂中，反应来 形成，以得到碱加成盐，所述碱加成盐通常例如通过结晶和过滤来分离。药学上可接受的碱 盐包括铵盐，碱金属盐，诸如钠和钾的盐，碱土金属盐，诸如钙和镁的盐，和与有机碱的盐， 包括伯胺、仲胺和叔胺(诸如异丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二环己胺和N-甲基-D-葡萄糖 胺）的盐。

[0056] 在一个实施方案中，式（I)的化合物呈游离碱的形式，例如，3-(3-(3,5_二甲基-1"-吡唑-1-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8_四氢-1,8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基） 丁酸。

[0057] 在另一个实施方案中，式（I)的化合物为盐酸盐，例如，3_(3_(3，5-二甲基-1"-吡 唑-1-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8_四氢-1，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸盐 酸盐。

[0058] 本发明在其范围内包括式（I)的化合物的盐的所有可能的化学计量和非化学计量 形式。

[0059] 应当理解的是，许多有机化合物可以与它们在其中反应或者它们从其中沉淀或结 晶的溶剂形成复合物。这些复合物被称为"溶剂化物"。例如，与水的复合物被称为"水合 物"。具有高沸点和/或能够形成氢键的溶剂，诸如水、二甲苯、化甲基吡咯烷酮、甲醇和乙醇 可用于形成溶剂化物。用于鉴定溶剂化物的方法包括，但不限于，NMR和微量分析。式（I)的 化合物的溶剂化物在本发明的范围之内。

[0060] 式（I)的化合物可以呈晶体或无定形形式。此外，一些式（I)的化合物的晶体形式 可以作为多晶型体存在，其包括在本发明的范围之内。式（I)的化合物的多晶型形式可以使 用多种常规分析技术表征和区分，所述分析技术包括但不限于，X-射线粉末衍射(XRPD)图 谱、红外（IR)光谱、拉曼光谱、差示扫描量热（DSC)、热重分析（TGA)和固态核磁共振 (SSNMR)〇

[0061] 应当理解的是，晶体形式可以任选地水化或溶剂化。本发明在式（I)的化合物的范 围内包括化学计量水合物以及含有可变量的水的式（I)的化合物。合适的溶剂化物包括药 学上可接受的溶剂化物，诸如水合物。溶剂化物包括化学计量的溶剂化物和非化学计量的 溶剂化物。

[0062] 本文所述的化合物含有两个不对称中心，使得可以形成光学异构体，例如非对映 异构体。因此，本发明涵盖式（I)的化合物的异构体，无论作为经分离以便基本上不含其它 异构体（即纯的）的个别异构体还是作为混合物。可以分离经分离以便基本上不含其它异构 体(即纯的）的个别异构体，使得存在小于10%，特别是小于约1%，例如小于约0.1%的另一 种异构体。

[0063] 本领域技术人员应当理解，某些非对映异构体的活性可以小于其它非对映异构 体，且个别非对映异构体的活性可以低于选择的限值。

[0064] 在一个实施方案中，式（I)的化合物是（幻-3-(3-(3,5_二甲基-1"-吡唑-1-基）苯 基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8_四氢-1，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸

[0066] 在另一个实施方案中，式（I)的化合物是（幻-3-(3-(3,5_二甲基-1"-吡唑-1-基） 苯基)-4-(⑷-3-(2-(5,6,7,8-四氢-1，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-卜基)丁酸盐酸盐。

[0067] 异构体的分离可以通过本领域技术人员已知的常规技术(例如，通过分步结晶、层 析或HPLC)来实现。

[0068]式（I)的化合物可以几种互变异构形式之一存在。应当理解的是，本发明涵盖式 (I) 的化合物的所有互变异构体，无论作为个别互变异构体或其混合物。

[0069]从上述应当理解的是，式（I)的化合物的溶剂化物、异构体和多晶型形式及其盐包 括在本发明的范围内。

[0070] 化合物制备

[0071] 本发明的化合物可以通过各种方法(包括标准化学法)制备。任何先前定义的变量 将继续具有先前定义的含义，除非另有说明。下面描述说明性的一般合成方法，然后在工作 实施例中制备本发明的具体化合物。

[0072] 结构式（I)的化合物可以通过以下方法制备，所述方法涉及首先脱保护结构式 (II) 的化合物，即切割酯基，随后转化为盐：

[0074] 其中Ri、R2和R3如上所定义，

[0075] R4是&至〇5烷基，例如叔丁基、异丙基、乙基或甲基。

[0076] 本发明的第六个方面提供了式(II)的化合物。

[0077] 在一个实施方案中，式(II)的化合物具有以下构型：

[0079] 结构式（11)(其中R4为叔丁基）的化合物的脱保护可以通过在惰性溶剂(诸如DCM、 2-甲基-四氢呋喃、四氢呋喃、1，4_二氧杂环己烷或环戊基甲基醚）中使用例如盐酸、氢溴 酸、硫酸或三氟乙酸的酸水解来完成。

[0080] 或者，结构式（11)(其中R4为甲基）的化合物的脱保护可以通过在合适的溶剂(诸 如甲醇）中使用例如氢氧化钠或氢氧化钾水溶液的碱水解来完成。

[0081]切割酯基团之后，所得产物可以通过本领域技术人员众所周知的方法转化为所需 盐。

[0082]在一个实施方案中，游离碱至盐酸盐的转化通过用盐酸水溶液处理游离碱的乙腈 溶液、浓缩所得盐溶液和从乙腈结晶来实现。

[0083]结构式（II)的化合物可以通过经催化剂(诸如碳载钯或铑)催化氢化结构式（III) (其中和R4如上所定义）的化合物来获得。氢化可以在合适的溶剂(诸如Et0H、Me0H 或两者的混合物）中在大气压力或稍高压力的氢气(诸如2至10个大气压)下进行。

[0085]结构式（III)的化合物可以通过以下方法制备，所述方法涉及在合适的催化剂存 在的情况下（任选地手性配体存在的情况下）在升高温度且在碱存在的情况下使结构式 (IV)的化合物与结构式(V)的硼酸反应。

[0087] 其中和R4如上所定义，且双键的几何学可以是(幻异构体或(幻和(Z)异构 体的混合物，优选纯(幻异构体。

[0088]结构式(V)的化合物，其中如上所定义，且

[0089]抱代表氢或&至〇5烷基，诸如2, 3-二甲基丁烷-2, 3-二醇（频哪醇）。

[0090]结构式(V)的化合物可以用作纯硼酸(R5 = H)，或用作硼酸酯(R5 =烷基），其可以 在水和碱(诸如氢氧化钾)存在的情况下原位转化为硼酸。

[0092] 缩合结构式（IV)和（V)的化合物的方法在合适的催化剂（诸如铑催化剂，优选约 5%的氯（1，5_环辛二烯)铑(I)二聚体)存在的情况下，且在水混溶的惰性溶剂(诸如1，4_二 氧杂环己烷）中在碱(诸如氢氧化钾)存在的情况下在升高温度(诸如50至90°C)来进行。缩 合方法在严格厌氧条件下进行，其中反应混合物用惰性气体(诸如氮气）吹扫，且在减压下 排空，重复排空的过程，且用氮气吹扫几次，例如三次。

[0093]该缩合方法产生约1:1比率的两种非对映异构体，其可以通过结晶、层析或通过 HPLC进行分离。优选的分离方法是在手性支持物(诸如Chiralpak柱)上的手性HPLC。在10% 的添加剂(诸如手性配体)存在的情况下，形成的非对映异构体的比率可以基本上增加至例 如约80: 20。此类添加剂包括对映体纯的膦配体，例如(W-a)-〗，〗'-双(二苯基膦基)-1， 联二萘[(幻-BINAP]，其提供作为主要异构体的生物活性更高的非对映异构体。

[0094] 发现非对映异构比率取决于烷基R4的大小。因此，当R4为叔烷基时，获得更高比率 的期望的主要异构体。优选的烷基R4是叔丁基，其产生高达95:5的非对映异构比率。非对映 异构比率可以通过手性HPLC或通过结晶进一步增强至例如大于99:1。在更大规模，当烷基 R 4为甲基时，获得90:10的非对映异构比率。

[0095]结构式（IV)的化合物可以通过以下制备:在约10%的合适的钯催化剂在合适的惰 性溶剂(诸如DCM)存在的情况下，在叔胺碱(诸如三乙胺或二异丙胺)存在的情况下且在环 境温度下，使U)-2_(2-(吡咯烷-3-基）乙基)-1，8_萘啶[结构式(VI)的化合物]与结构式 (VII)的化合物反应。合适的钯催化剂优选具有双齿配体，诸如两个二苯基膦基团，例如，1， 双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II) [Pd(dppf)Cl2]。结构式(VI)的化合物可以用作游 离碱，或者在叔胺碱存在的情况下从盐(诸如二盐酸盐)原位产生。

[0097] 结构式(VI)的化合物[(7?)-2-(2_(吡咯烷-3-基）乙基)_1，8_萘啶]可以通过本文 所述的方法制备。借助说明，（友)_2_(2_(R比略烧_3_基）乙基)_1，8_萘啶可以通过方案1中所 述的方法制备。

[0098]方案 1

[0100] 试剂和条件：（a)碘，咪唑，三苯基膦，DCM，0°C;(b) 2-甲基-[1，8]_萘啶， LiN(TMS)2，THF, 0°C;(c) 4MHC1/二氧杂环己烷。[0101 ] (7?)-3_(羟基甲基）吡略烧-1-甲酸叔丁酯商购自Fluorochem或BePharm Ltd，且2- 甲基-[1，8]_萘啶商购自，例如，Manchester Organics LtcUAldrich或Alfa Aesar。

[0102]结构式(VII)的化合物可以通过本文所述的方法制备。借助说明，结构式(VI)(其 中R4是叔丁基，且双键具有(幻几何学）的化合物可以通过方案2中所述的方法制备。

[0103]方案 2

[0105] 试剂和条件：（a)异丁烯，浓H2S〇4,二乙醚，24 h;(b)乙酸钾，乙腈，60 °C， 4 h〇

[0106] (i?)-4-溴丁-2-稀酸根据文献程序制备[T. Den Hartog, D. J. Van Dijken, A. J. Minnaard, B. L. Feringa Tetrahedron Asymmetry 2010, 21, 1574-1584]。

[0107] 结构式(VII)(其中R4是甲基）的化合物可以通过本文所述的方法制备。例如，（五)_ 4-乙酰氧基丁-2-烯酸甲酯可以通过以下制备:在合适的溶剂(诸如乙腈)和在升高温度(诸 如45-55°C)下使商购的(幻4-溴丁-2-烯酸甲酯与乙酸盐诸如乙酸钾或乙酸钠反应。

[0108] 结构式(V)的化合物可以从结构式(VIII)的化合物制备，其中h、R#PR3如前面所 定义。

[0110] 结构式(V)的化合物(其中抱为扪可以通过三步骤方法制备，所述三步骤方法涉及 在惰性溶剂诸如THF或2-甲基-四氢呋喃在低温诸如-60至-78°C和在氮气或氩气的惰性气 氛中使结构式(VIII)的化合物与有机锂试剂诸如正丁基锂反应，随后与三烷基硼酸酯诸如 三(异丙基)硼酸酯反应，最后水解。

[0111] 或者，结构式(V)的化合物(其中抱是频哪醇)可以通过以下制备:在钯催化剂诸如 三(二亚苄基丙酮）二钯(得自Aldrich)存在的情况下，且在膦配体诸如2-二环己基膦基-2'，j'-三异丙基联苯基(X-PH0S)(得自Aldrich)存在的情况下，且在乙酸钾存在的情况 下，在惰性溶剂诸如1，4_二氧杂环己烷，在升高温度，例如110°C，且在惰性气氛诸如氮气 中，使结构式(VIII)的化合物与双(频哪醇)二硼(得自Aldrich)反应。在反应结束时将水添 加至反应混合物引起所得频哪醇酯的水解，以提供所需硼酸(V)。

[0112] (3-(1"_吡唑-1-基）苯基)硼酸，即化合物(V)，其中心士和办各自代表氢，是市售 的，例如得自ABCR GmbH。

[0113] 结构式(VIII)的化合物可以由（3-溴苯基)肼(得自Aldrich)或(3-溴苯基)肼盐酸 盐(得自Amatek或Reddy & Reddy)制备，并且通过本文实验部分所述的方法用适当的二羰 基化合物诸如戊烷-2，4-二酮、庚烷-3，5-二酮、3-氟-戊烷-2，4-二酮，或掩蔽二酮诸如(幻-4_(二甲基氨基)丁-3-烯-2-酮，或炔属酮诸如己-3-炔-2-酮加热。

[0114] 应当理解，在任何上述途径中，保护一个或多个官能团可能是有利的。保护基团和 除去它们的方式的实例可见T. W. Greene 'Protective Groups in Organic Synthesis' (3rd edition, J. Wiley and Sons, 1999)。合适的胺保护基团包括酰基（例如乙酰基）、 氨基甲酸酯（例如2'，2'，2'_三氯乙氧羰基、苄氧羰基或叔丁氧羰基）和芳基烷基（例如苄 基），它们可以适当时通过水解除去(例如使用酸诸如二氧杂环己烷中的盐酸或二氯甲烷中 的三氟乙酸)或还原除去(例如苄基或苄氧羰基的氢解，或使用乙酸中的锌还原去除2'，2'， 2'-三氯乙氧羰基）。其它合适的胺保护基包括三氟乙酰基(-C0CF 3)，它可以通过碱催化的 水解除去。

[0115] 应当理解，在上述的任一途径中，将各种基团和部分引入分子的合成步骤的准确 顺序可以变化。确保在该过程的一个阶段引入的基团或部分不受随后的转化和反应影响以 及相应地选择合成步骤的顺序在本领域技术人员的技能之内。

[0116] 某些式(V)至(VIII)化合物也被认为是新的，因此形成本发明的又进一步方面。

[0117] 遵循独立的对映选择性不对称合成获得化合物（I)的绝对构型(其中h代表甲基， R2代表氢原子，且R 3代表甲基）（实施例1)，其中提供已知绝对构型的共同中间体，和比较衍 生自两种合成途径的共同中间体的分光、旋光性和分析型手性HPLC。通过用氢化铝锂还原 实施例1的羧酸基团以得到醇中间体33异构体1(方案3)而获得共同中间体。通过氢化铝锂 还原和所得萘醇经碳上的5% Rh的催化氢化而从中间体13(异构体2)的次要产物获得中间 体33(异构体2)的其它非对映异构体。

[0118]

[0119]通过使用2-溴乙酸叔丁酯、二乙酸钯、三(〇-甲苯基)膦和三磷酸钾(方案4)将中间 体9转化为中间体35而开始独立合成。用TFA去除叔丁基酯，以得到中间体36，然后将其用甲 醇酯化，以得到中间体37。后者用2-溴乙酸叔丁酯烷基化，以得到外消旋中间体38。将外消 旋物38通过制备型手性HPLC解析为其两种对映异构体，异构体1和异构体2。中间体38的异 构体1在CHC13中具有+81的旋光度，而异构体2具有-82的旋光度。使用氢氧化锂和过氧化氢 选择性水解中间体38的每种对映异构体的甲基酯，以得到中间体39异构体1和异构体2。异 构体1具有+42的旋光度，而异构体2具有-41的旋光度。

[0120]

[0121]通过使用Evans方法的独立不对称合成获得中间体39的每种对映异构体的绝对构 型。因此，使用市售的⑶-4-苄基噁唑烷-2-酮将中间体36转化为中间体40(方案5)。中间体 40首先使用六甲基二硅氮烷锂在_78°C烯醇化，然后用2-溴乙酸叔丁酯烷基化，以得到作为 通过从较少受阻侧烷基化烯醇化物衍生的非对映异构体的中间体41(主要异构体）。次要组 分是从更受阻侧烷基化烯醇化物衍生的异构体(中间体42)。用氢氧化锂和过氧化氢水解主 要异构体（中间体41)得到期望的中间体39的（幻_对映异构体，其具有+65的旋光度。因此， 中间体39异构体1具有（幻-构型。

[0122]

[0123]中间体3然后在EDC、，羟基苯并三唑和，甲基吗啉存在的情况下用中间体39的 (幻_对映异构体(异构体1)酰化，以得到中间体43,通过经5% Rh/C的催化氢化将其转化为 中间体44(方案6)。用TFA切割44的叔丁酯，以得到中间体45，首先通过硼烷-THF络合物、然 后通过氢化锂铝将其还原，以得到中间体46。中间体46的主要组分的600 MHz咕NMR光谱、 旋光度和分析型手性HPLC与对于中间体33异构体1生成的数据相同。因此，中间体33异构体 1的苄基不对称中心的构型具有(幻_构型。

[0124]

[0125] 使用方法

[0126] 式(I)的化合物及其盐据信是整联蛋白受体活性、特别是整联蛋白c〇36受体活性的 抑制剂，且因此在a $6化合物适应的疾病或状况的治疗中具有潜在效用。

[0127] 本发明因此提供了式（I)的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗中。式（I) 的化合物或其药学上可接受的盐可用于治疗受体拮抗剂适应的疾病或状况。

[0128] 本发明因此提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗c〇36受体拮 抗剂适应的疾病或状况。

[0129] 还提供了式（I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备药物中的用途，所述药物 用于治疗avfo受体拮抗剂适应的疾病或状况。

[0130] 还提供了在有需要的受试者中治疗av06受体拮抗剂适应的疾病或状况的方法，其 包括施用治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。

[0131] 合适地，有需要的受试者是哺乳动物，特别是人。

[0132] 如本文所使用的术语"有效量"是指将引发例如研究人员或临床医师寻求的组织、 系统、动物或人的生物学或医学反应的药物或药剂的量。此外，术语"治疗有效量"是指与没 有接受此类量的相应受试者相比导致疾病、病症或副作用的改善的治疗、治愈、预防或减轻 或疾病或病症的进展速率降低的任何量。该术语在其范围内还包括有效增强正常生理功能 的量。

[0133] 纤维变性疾病涉及修复或反应过程中的器官或组织中过量纤维性结缔组织的形 成。cOM吉抗剂据信可用于治疗各种此类疾病或状况，包括依赖于整联蛋白功能和经由 av整联蛋白活化转化生长因子邮]那些。疾病可以包括但不限于肺纤维化，例如，特发性肺 纤维化，非特异性间质性肺炎(NSIP)，普通型间质性肺炎(UIP)，Hermansky-Pudlak综合征， 进行性大块纤维化(煤矿工人的尘肺病的并发症），结缔组织病相关的肺纤维化，哮喘和 coro中的气道纤维化，急性呼吸窘迫综合征(ARDS)相关的纤维化，急性肺损伤;辐射诱导的 纤维化;家族性肺纤维化;肺动脉高压）；肾纤维化(糖尿病肾病，IgA肾病，狼疮性肾炎;局灶 节段性肾小球硬化(FSGS)，移植肾病，自身免疫性肾病，药物诱导的肾病，高血压相关的肾 病，肾源性系统纤维化）；肝纤维化(病毒诱导的纤维化(例如，丙型肝炎或乙型肝炎），自身 免疫性肝炎，原发性胆汁性肝硬化，酒精性肝病，非酒精性脂肪肝疾病，包括非酒精性脂肪 性肝炎(NASH)，先天性肝纤维化，原发性硬化性胆管炎，药物诱导的肝炎，肝硬化）；皮肤纤 维化（增生性瘢痕，硬皮病，瘢痕疙瘩，皮肌炎，嗜酸性筋膜炎，Dupytrens挛缩，Ehlers-Danlos综合征，Peyronie氏病，营养不良性大疱性表皮松解（epidermolysis bullosa dystrophica)，口腔粘膜下纤维化）；眼部纤维化(AMD，糖尿病性黄斑水肿，干眼，青光眼）； 心脏纤维化（充血性心脏衰竭，心内膜心肌纤维化，肥厚性心肌病（HCM)，扩张型心肌病 (DCM)，致心律失常性右室心肌病(ARVC)，高血压性心脏病，心肌结节病和其它形式的心脏 衰竭)和其它混杂纤维化状况(纵隔纤维化，骨髓纤维化，腹膜后纤维化，克罗恩病，神经纤 维瘤病，子宫肌瘤(纤维瘤），慢性器官移植排斥）。~说或的额外拮抗作用可存在额外益 处。

[0134] 此外，还可以治疗与c〇36整联蛋白相关的癌前期病变或癌症(这些可以包括但不限 于:子宫内膜癌，基底细胞癌，肝癌，结肠癌，子宫颈癌，口腔癌，胰腺癌，乳腺和卵巢癌，卡波 氏肉瘤，巨细胞肿瘤和与基质相关的癌症）。可以得益于对血管生成的影响的状况也可受益 (例如实体瘤）。

[0135] 术语"av06抑制剂适应的疾病或状况"意欲包括任何或所有上述疾病状态。

[0136] 在一个实施方案中，所述av06抑制剂适应的疾病或状况选自特发性肺纤维化。

[0137] 组合物

[0138] 尽管可能对于治疗中使用，式（I)的化合物以及其药学上可接受的盐可以作为原 料化学品施用，但呈现活性成分作为药物组合物是常见的。

[0139] 本发明因此在进一步方面提供了包含式(I)的化合物或药学上可接受的盐和一种 或多种药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂的药物组合物。式（I)的化合物和药学上 可接受的盐如上所述。载体、稀释剂或赋形剂在与组合物的其它成分相容且对其受体无害 的意义上必须是可接受的。

[0140] 根据本发明的另一个方面，还提供了用于制备药物组合物的方法，其包括混合物 式（I)的化合物或其药学上可接受的盐与一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形 剂。所述药物组合物可以用于治疗本文所述的任何疾病。

[0141] 进一步提供了用于治疗av06受体抑制剂适应的疾病或状况的药物组合物，所述药 物组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。

[0142] 进一步提供了包含0.05至lOOOmg式（I)的化合物或其药用盐和0.1至2g-种或多 种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。

[0143] 由于式(I)的化合物意欲用于药物组合物中，容易理解的是，它们各自优选以基本 上纯的形式提供，例如，至少60 %纯，更合适地至少75%纯，优选至少85 %纯，尤其是至少 98 %纯(基于重量的重量％)。

[0144] 药物组合物可以每个单位剂量含有预定量的活性成分的单位剂量形式呈现。优选 的单位剂量组合物是含有每日剂量或亚剂量或其适当部分的活性成分的组合物。此类单位 剂量可以因此一天施用多于一次。优选的单位剂量组合物是含有如上文所述的每日剂量或 亚剂量(用于一天施用多于一次)或其适当部分的活性成分的组合物。

[0145] 药物组合物可以适于通过任何适当的途径，例如通过口服(包括口腔或舌下），直 肠，吸入，鼻内，局部(包括口腔、舌下或经皮），阴道或肠胃夕K包括皮下、肌内、静脉内或皮 内）途径来施用。此类组合物可以通过药学领域中已知的任何方法来制备，例如通过使活性 成分与载体或赋形剂结合在一起。

[0146] 在一个实施方案中，药物组合物适于经鼻或吸入施用。

[0147] 用于经鼻或吸入施用的剂型可以方便地配制为气溶胶、溶液剂、悬浮剂、凝胶剂或 干粉剂。

[0148] 对于合适和/或适于吸入施用的组合物，优选的是，本发明的化合物呈粒径减小的 形式，更优选地，大小减小的形式通过微粉化获得或可通过微粉化获得。大小减小(例如，微 粉化)的化合物或盐的优选粒径通过约0.5至约10微米的D50值(例如如使用激光衍射测量） 定义。

[0149] 气溶胶制剂(例如，用于吸入施用)可以包含活性物质于药学上可接受的水性或非 水性溶剂中的溶液或细悬浮液。气溶胶制剂可以无菌形式的单或多剂量呈现于密封容器 中，这可以采用药筒的形式或再填充用于用喷雾装置或吸入器使用。或者，所述密封容器可 以是单一分配装置，诸如装有计量阀的单剂量鼻吸入器或气溶胶分配器（计量剂量吸入 器），其意欲用于一旦容器的内容物已经耗尽则废弃。

[0150] 当剂型包含气溶胶分配器时，其优选含有合适的压力下的推进剂，诸如压缩空气， 二氧化碳或有机推进剂，诸如氢氟烃(HFC)。合适的HFC推进剂包括1，1，1，2，3，3，3-七氟丙 烷和1，1，1，2-四氟乙烷。气溶胶剂型也可以采取栗式雾化器的形式。加压气溶胶可以含有 活性化合物的溶液或悬浮液。这可需要引入额外赋形剂，例如共溶剂和/或表面活性剂，以 改善悬浮液制剂的分散特征和均匀性。溶液制剂也可需要添加共溶剂诸如乙醇。也可以引 入其它赋形剂改性剂以改善，例如，制剂的稳定性和/或味道和/或细粒质量特征(量和/或 概况）。

[0151] 对于合适和/或适于吸入施用的药物组合物，所述药物组合物可以是干粉可吸入 组合物。此类组合物可以包含粉末基质，诸如乳糖、葡萄糖、海藻糖、甘露醇或淀粉，式(I)的 化合物或其盐(优选呈粒径减小的形式，例如呈微粉化形式），和任选的性能改性剂诸如L-亮氨酸或另一种氨基酸和/或硬脂酸的金属盐诸如硬脂酸镁或硬脂酸钙。优选地，干粉可吸 入组合物包含乳糖的干粉掺合物和式（I)的化合物或其盐。乳糖优选为乳糖水合物，例如， 乳糖一水合物，和/或优选为吸入等级和/或精细等级乳糖。优选地，乳糖的粒径通过90 %或 更多（以重量计或以体积计）的乳糖颗粒直径小于1000微米(微米）（例如，10-1000微米，例 如30-1000微米）和/或50%或更多的乳糖颗粒直径小于500微米（例如，10-500微米)来定 义。更优选地，乳糖的粒径通过90%或更多的乳糖颗粒直径小于300微米（例如，10-300微 米，例如50-300微米)和/或50 %或更多的乳糖颗粒直径小于100微米来定义。任选地，乳糖 的粒径通过90%或更多的乳糖颗粒直径小于100-200微米和/或50%或更多的乳糖颗粒直 径小于40-70微米来定义。最重要地，优选的是，约3至约30% (例如，约10% )(以重量计或以 体积计）的颗粒直径小于50微米或小于20微米。例如，但非限制，合适的吸入等级乳糖是 E9334乳糖（10%精细）（Borculo Domo Ingredients, Hanzeplein 25，8017 JD Zwolle, Netherlands)〇

[0152] 任选地，尤其对于干粉可吸入组合物，用于吸入施用的药物组合物可以引入纵向 安装于合适的吸入装置内部的条或带中的多个密封剂量容器(例如，含有干粉组合物）。所 述容器根据需要是可破裂或剥离可打开的，且例如干粉组合物的剂量可以通过经由装置诸 如GlaxoSmithKline销售的DISKUS TM装置吸入而施用。DISKUS TM吸入装置例如描述于GB 2242134 A中，在该装置中，至少一个用于粉末形式的药物组合物的容器(一个或多个容器 优选为纵向固定于条或带上的多个密封剂量容器）置于两个彼此可剥开地固定的组件之 间；该装置包括:限定所述一个或多个容器的开启位置的装置;在开启位置分开的剥离组件 以打开容器的装置;连接开启容器的出口，使用者可以通过该出口从开启容器吸入粉末形 式的药物组合物。

[0153] 本发明化合物可以配制为用于从液体分配器递送的液体制剂，例如具有分配喷嘴 或分配喷孔的液体分配器，在将使用者施加力施加至液体分配器的栗机构之后通过该喷嘴 或喷孔分配计量剂量的液体制剂。

[0154] 此类液体分配器通常提供有多个计量剂量的液体制剂的存储器，所述剂量在相继 栗致动之后可以分配。分配喷嘴或分配喷孔可以构造为用于插入使用者的鼻孔中用于将液 体制剂喷雾分配于鼻腔中。上述类型的液体分配器在W0-A-2005/044354中描述和说明，其 全部内容通过引用并入本文。分配器具有容纳液体交换装置的外壳，所述液体交换装置具 有安装在用于含有液体制剂的容器上的压缩栗。该外壳具有至少一个手指可操作的侧杆， 所述侧杆可相对于外壳向内移动，以凸轮控制容器在外壳内向上移动以引起栗压缩，且通 过外壳的鼻喷嘴将计量剂量的制剂从栗杆中栗出。一种特别优选的液体分配器是在W0-A-2005/044354的图30-40中说明的通用类型。

[0155] 用于吸入或鼻内施用的组合物也可以通过雾化施用至肺和呼吸道的其它区域。此 类组合物可以是水性溶液或悬浮液。用于通过雾化吸入的溶液可以通过添加试剂诸如酸或 碱、缓冲盐、等渗调节剂、表面活性剂或抗微生物剂诸如苯扎氯铵(BAC)进行配制。所述组合 物可以是无菌的且无抗微生物防腐剂。它们可以灭菌，例如，通过过滤或在高压釜中加热。 它们可以呈现为非无菌溶液。治疗有效量的本发明的化合物的单一单位剂量可以被提供为 单一容器中的预混合、预测量的制剂。

[0156] 在另一个实施方案中，药物组合物适于口服施用。

[0157] 适于口服施用的药物组合物可以呈现为离散的单元，诸如胶囊或片剂;粉末或颗 粒剂;水性或非水性液体中的溶液或悬浮液;可食性泡沫或泡剂(whip);或者水包油液体乳 剂或油包水液体乳剂。

[0158] 例如，对于片剂或胶囊形式的口服施用，活性药物成分可以与口服的非毒性的药 学上可接受的惰性载体(诸如乙醇、甘油、水等)组合。适于引入片剂或胶囊的粉末可以通过 将化合物降低至适当的细度(例如通过微粉化)且与类似地制备的药物载体(诸如可口服的 碳水化合物，如例如，淀粉或甘露醇)混合而制备。调味剂、防腐剂、分散剂和着色剂也可以 存在。

[0159] 胶囊可以通过制备如上所述的粉末混合物且填充形成的胶囊壳而制备。助流剂和 润滑剂(诸如胶体二氧化硅、滑石粉、硬脂酸镁、硬脂酸钙或固体聚乙二醇)可以在填充操作 之前添加至粉末混合物。也可以添加崩解剂或增溶剂(诸如琼脂-琼脂、碳酸钙或碳酸钠）以 改善摄入胶囊时的药物的利用度。

[0160] 此外，当期望或必要时，合适的粘合剂、助流剂、润滑剂、甜味剂、调味剂、崩解剂和 着色剂也可以掺入混合物中。合适的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖（诸如葡萄糖或乳 糖）、玉米甜味剂、天然和合成的树胶(诸如阿拉伯树胶、黄芪胶或藻酸钠）、羧甲基纤维素、 聚乙二醇、蜡等。

[0161] 在这些剂型中使用的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、 氯化钠等。

[0162] 崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、皂土、黄原胶等。片剂通过，例如，制 备粉末混合物，制粒或压制，添加润滑剂和崩解剂且压制成片而配制。粉末混合物通过混合 适当地粉碎的化合物与如上所述的稀释剂或基质及任选的粘合剂(诸如羧甲基纤维素、藻 酸盐、明胶、或聚乙烯吡咯烷酮）、溶解延迟剂(诸如石蜡）、吸收加速剂(诸如季盐)和/或吸 收剂(诸如皂土、高岭土或磷酸二钙)而制备。粉末混合物可以通过用粘合剂诸如糖浆、淀粉 糊、阿拉伯胶浆(acadia mucilage)或者纤维素物质或聚合物的溶液润湿且强制通过筛网 而成粒。作为成粒的替代方式，粉末混合物可以通过压片机，结果未完全成形的小块破碎成 粒。颗粒可以通过添加硬脂酸、硬脂酸盐、滑石粉或矿物油的方式被润滑以防止粘结到成片 模上。润滑的混合物随后被压成片。本发明的化合物也可以与自由流动的惰性载体组合且 被直接压成片而不经过成粒或成块步骤。可以提供由虫胶的密封层、糖或聚合材料的包衣 和蜡的上光包衣组成的透明或不透明的保护性包衣。可以将染料添加至这些可以以区分不 同的单位剂型。

[0163] 口服液，诸如溶液、糖浆和酏剂，可以被制备成剂量单位形式，使得给定量含有预 定量的化合物。糖浆可以通过将化合物溶解在适当调味的水性溶液中制备，而酏剂通过利 用非毒性醇媒介物来制备。悬浮液可以通过将化合物分散于非毒性媒介物中来配制。也可 以添加增溶剂和乳化剂(诸如乙氧基化异硬脂醇和聚氧乙烯山梨醇醚）、防腐剂、调味添加 剂(诸如薄荷油)或者天然甜味剂或糖精或其它人造甜味剂等。

[0164] 适当时，用于口服施用的剂量单位组合物可以是微囊包封的。该制剂也可以通过 例如在聚合物、蜡等中包衣或包埋微粒材料而制备以延长或持续释放。

[0165] 本发明的化合物也可以脂质体递送系统的形式诸如小单层囊泡、大单层囊泡和多 层囊泡来施用。脂质体可由多种磷脂，诸如胆固醇、硬脂胺或磷脂酰胆碱形成。

[0166] 适合经皮施用的药物组合物可以呈现为离散的贴剂，其目的是保持与受体的表皮 紧密接触延长的一段时间。

[0167] 适合局部施用的药物组合物可以配制为软膏、霜剂、悬浮液、乳液、粉末、溶液、糊 剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂或油。

[0168] 为了治疗眼或其它外部组织，例如口和皮肤，该组合物优选地作为局部软膏或霜 剂应用。当配制在软膏中时，活性成分可以使用石蜡基质或与水混溶的软膏基质。或者，活 性成分可以使用水包油霜剂基质或油包水基质配制在霜剂中。

[0169] 适合向眼局部施用的药物组合物包括滴眼剂，其中活性成分溶解或悬浮在合适的 载体、特别是水性溶剂中。

[0170]适合在口中局部施用的药物组合物包括糖锭剂、软锭剂和漱口剂。

[0171] 适合直肠施用的药物组合物可以呈现为栓剂或灌肠剂。

[0172] 适合阴道施用的药物组合物可以呈现为阴道栓剂、卫生棉条、霜剂、凝胶剂、糊剂、 泡沫剂或喷雾制剂。

[0173] 适合肠胃外施用的药物组合物包括用于皮下、静脉内或肌内施用的水性和非水性 无菌注射溶液，其可以含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使组合物与预计受体的血液等渗的 溶质；和水性和非水性无菌悬浮液，其可以包括悬浮剂和增稠剂。组合物可以呈现于单位剂 量或多剂量容器中，例如密封的安瓿和小瓶，并且可以在冷冻干燥(冻干)条件下保存，其只 需要在临使用前添加无菌液体载体，例如注射用水。即配注射溶液和悬浮液可以由无菌粉 末、颗粒和片剂制备。

[0174] 本发明化合物的治疗有效量依赖于许多因素，包括例如受试者的年龄和体重、需 要治疗的确切的状况和其严重度、制剂的性质和施用途径，且最终决定于经治医师或兽医 的判断。在药物组合物中，用于口服或肠胃外施用的每个剂量单位优选地含有作为游离碱 计算的〇. 01-3000mg，更优选0.5-1000mg的本发明化合物。

[0175] 用于经鼻或吸入施用的每个剂量单位优选地含有作为游离碱计算的0.001_50mg， 更优选0.01 -50 mg，仍更优选l-50mg的式（I)化合物或其药学可接受的盐。

[0176] 对于雾化溶液或悬浮液的施用，剂量单位通常含有1至15 mg，例如，2 mg至10 mg， 或者4 mg至6 mg，其可以合适地每日一次、每日两次或每日多于两次递送。本发明的化合物 可以干燥或冻干的粉末提供，用于在药房中或由患者重构，或可以，例如，在水性盐水溶液 中提供。

[0177] 本发明的药学上可接受的化合物可以每日剂量(对于成人患者）的式（I)化合物或 其药学可接受的盐施用，例如每天0.0 lmg至3000mg或每天0.5mg至lOOOmg的口服或肠胃外 剂量，或每天〇 • OOlmg至50mg的经鼻或吸入剂量，或每天0 • Olmg至50mg或10mg至50mg的经鼻 或吸入剂量，其作为游离碱计算。该量可以每日单一剂量给予，或者更通常以采用每日许多 (诸如二、三、四、五或六次)亚剂量给予，使得每日总剂量是相同的。式（I)化合物的盐的有 效量可以作为化合物本身的有效量的比例而确定。

[0178] 本发明的化合物可以单独使用或与其它治疗剂组合使用。根据本发明的组合治疗 因此包括施用至少一种式（I)化合物或其药学上可接受的盐，以及使用至少一种其它药学 活性剂。优选地，本发明的组合治疗包括施用至少一种式（I)化合物或其药学上可接受的 盐，以及至少一种其它药学活性剂。本发明的化合物和其它药物活性剂可以在单一药物组 合物中一起施用或分开施用，当分开施用时，这可以同时或以任何顺序相继施用。选择本发 明的化合物和其它药学活性剂的量以及相对施用时机以获得预期的组合疗效。

[0179] 因此，在进一步方面，提供了包含本发明的化合物和至少一种其它药学活性剂的 组合。

[0180]因此，在一个方面，本发明的化合物和药物组合物可以与一种或多种其它治疗剂 组用或包含一种或多种其它治疗剂。应当理解，当本发明的化合物与通常通过吸入、静脉 内、口服、鼻内或其它途径施用的一种或多种其它治疗活性剂组合施用时，所得药物组合物 可以通过相同的途径施用。或者，组合物的各成分可以通过不同途径施用。

[0181]式（I)的化合物及其药学上可接受的盐可以与一种或多种其它药剂组合使用，所 述药剂可用于预防或治疗过敏性疾病，炎性疾病，自身免疫性疾病，例如;抗原免疫治疗，抗 组胺剂，皮质类固醇(例如，丙酸氟替卡松、氟替卡松糠酸酯、二丙酸倍氯米松、布地奈德、环 索奈德、莫米松糠酸酯、曲安西龙、氟尼缩松），NSAID，白三烯调节剂(例如，孟鲁司特、扎鲁 司特、普仑司特），iNOS抑制剂，胰蛋白酶抑制剂，IKK2抑制剂，p38抑制剂，Syk抑制剂，弹性 蛋白酶抑制剂，0-2整联蛋白拮抗剂，腺苷a2a激动剂，趋化因子拮抗剂，诸如CCR3拮抗剂或 CCR4拮抗剂，介质释放抑制剂，诸如色甘酸钠，5-脂氧合酶抑制剂(zyflo)，DP1拮抗剂，DP2 拮抗剂，PI3K S抑制剂，ITK抑制剂，LP(溶血磷脂)抑制剂或FLAP(5-脂氧合酶活化蛋白）抑 制剂（例如，3-(3-(叔丁基硫代)-1-(4-(6_乙氧基吡啶-3-基）苄基）-5-((5_甲基吡啶-2-基）甲氧基)_1H-吲哚-2-基)-2,2_二甲基丙酸钠），甲氨蝶呤，和类似药剂;单克隆抗体治 疗，诸如抗IgE，抗TNF，抗IL-5,抗IL-6,抗IL-12,抗IL-1和类似药剂;受体治疗，例如依那西 普和类似药剂;抗原非特异性免疫治疗（例如，干扰素或其它细胞因子/趋化因子，细胞因 子/趋化因子受体调节剂，细胞因子激动剂或拮抗剂，TLR激动剂和类似药剂）），TGFP合成的 抑制剂，例如吡非尼酮，祀向血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生的生长因子(PDGF)和成 纤维细胞生长因子(FGF)受体激酶的酪氨酸激酶抑制剂，例如Intedanib (BIBF-1120)和甲 磺酸伊马替尼(Gleevec)，内皮素受体拮抗剂，例如安贝生坦或马西替坦，抗氧化剂，诸如N-乙酰半胱氨酸(NAC或Fluimuci 1)，广谱抗生素，诸如四环素，例如米诺环素盐酸盐，磷酸二 酯酶5 (TOE5)抑制剂，例如西地那非。或者，可以组合使用抗c〇36抗体，例如单克隆抗体，诸如 W02003100033A2中描述的那些。

[0182] 本领域技术人员将会清楚，在合适时，其它治疗成分可以以盐的形式使用，例如作 为碱金属或胺盐或作为酸加成盐，或者前药，或者作为酯例如低级烷基酯，或者作为溶剂合 物，例如水合物，以优化治疗成分的活性和/或稳定性和/或物理特性，诸如溶解度。也将会 清楚，在合适时，治疗成分可以以光学纯的形式使用。

[0183] 上述联合药物可以方便地以药物组合物的形式呈现使用，因此包含上述定义的组 合连同药学上可接受的稀释剂或载体的药物组合物代表本发明的一个进一步方面。

[0184] 此类组合的各个化合物可以在独立的或组合的药物组合物中相继或同时施用。优 选地，各个化合物在组合的药物组合物中同时施用。本领域技术人员将容易理解已知治疗 剂的适当剂量。

[0185] 缩写

[0186] 以下列表提供了本文使用的某些缩写的定义。应当理解，该列表不是穷尽的，但是 本文以下没有定义的那些缩写的含义对于本领域技术人员将是显而易见的。

[0187] Ac (乙酰基）

[0188] BCECF-AM (2'，7'_双-(2-羧乙基)-5-(和-6)-羧基荧光素 AM酯）

[0189] Bu (丁基）

[0190] CHAPS (3-[(3_胆酰胺丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸盐）

[0191] CV (柱体积）

[0192] DCM (二氯甲烷）

[0193] DMF (#，妒二甲基甲酰胺）

[0194] DMS0 (二甲亚砜）

[0195] DSC (差示扫描比色法）

[0196] Et (乙基）

[0197] EtOH (乙醇）

[0198] EtOAc (乙酸乙酯）

[0199] h (小时）

[0200] HC1 (盐酸）

[0201] HEPES (4-(2_羟基乙基）-1_哌嗪乙磺酸）

[0202] L (升）

[0203] M (摩尔浓度）

[0204] MDAP (质量指导的自动制备型HPLC)

[0205] Me (甲基）

[0206] MeOH (甲醇）

[0207] min (分钟）

[0208] MTBE (甲基叔丁基醚）

[0209] Ph (苯基）

[0210] ipr (异丙基）

[0211] (R)-BINAP 双(二苯基膦基hl，"-联二萘

[0212] Si (二氧化硅）

[0213] SPE (固相萃取）

[0214] TEA (三乙胺）

[0215] TFA (三氟乙酸）

[0216] THF (四氢咲喃）

[0217] TLC (薄层层析）

[0218] XRPD (X射线粉末衍射）

[0219] 对盐水的所有提及是指氯化钠的饱和水溶液。

[0220] 实验细节

[0221] 分析 LCMS

[0222] 分析LCMS在下列系统A、B或C之一上进行。

[0223]对所有系统的紫外检测是从波长220nm到350nm的平均信号，使用交替扫描正和负 模式电喷射电离在质谱仪上记录质谱。

[0224] 本文提及的LCMS系统A-B的实验细节如下：

[0225] 系统A

[0226] 柱：50 mm X 2.1 mm ID, 1.7 Mi Acquity UPLC BEH Cis 柱

[0227] 流速：1 mL/min.

[0228] 温度：40°C

[0229] 溶剂:A:用氨溶液调节至pHIO的10mM碳酸氢铵/水

[0230] B:乙腈

[0232] 系统B

[0233] 柱：50 mm X 2.1 mm ID, 1.7 Mi Acquity UPLC BEH Cis

[0234] 流速：1 mL/min.

[0235] 温度:40°C

[0236] 溶剂:A:三氟乙酸于水中的0.1% v/v溶液

[0237] B:三氟乙酸于乙腈中的0.1% v/v溶液

[0239] 系统 C

[0240] 柱：50 mm X 2.1 mm ID, 1.7 Mi Acquity UPLC BEH C18 柱

[0241] 流速：1 mL/min

[0242] 温度：4(TC

[0243] 溶剂:A:甲酸于水中的0.1% v/v溶液

[0244] B:甲酸于乙腈中的0.1% v/v溶液

[0246] 质量指导的自动制备型HPLC

[0247] 粗产物通过下列方法A-C之一通过MDAP HPLC纯化。运行时间为15分钟，除非另外 说明。对所有方法的紫外检测是从波长210nm到350nm的平均信号，使用交替扫描正和负模 式电喷射电离在质谱仪上记录质谱。

[0248] 方法 A:

[0249] 方法A在XBridge Cis柱（通常100 mm X 30 mm i 5 ym填充直径）上在环境温 度下进行。使用的溶剂是：

[0250] A =用氨水溶液调节至pH 10的10 mM碳酸氢铵水溶液。

[0251] B =乙腈。

[0252]使用的梯度是：

[0254] 方法 B:

[0255] 方法A在X Bridge Ci8柱(通常100 mm X 30 mm i .d. 5 ym填充直径)上在环境温 度下进行。使用的溶剂是：

[0256] A =用氨水溶液调节至pH 10的10 mM碳酸氢铵水溶液。

[0257] B =乙腈。

[0258]使用的梯度是：

[0260]方法 C:[0261 ] 方法C在XBridge Cis柱(通常150 mm X 30 mm i .cl. 5 ym填充直径）上在环境温 度下进行。

[0262] 使用的溶剂是：

[0263] A =甲酸于水中的0.1% v/v溶液

[0264] B =甲酸于乙腈中的0• 1% v/v溶液。

[0265] 使用的梯度是：

[0267] UV检测是来自210nm至350nm的波长的平均信号。

[0268] 中间体的制备

[0269] 中间体1:(幻-3-(碘代甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

[0270] 5L真空夹套的玻璃反应容器(Radley's LARA)装入DCM(2L)，随后三苯基膦（339 g，1.29 mol)和咪唑（88 g，1.29 mol)，且将温度降低至0°C。然后经30分钟逐份添加碘 (328 g，1.29 mol)，同时将反应温度维持在0-5°C，以控制放热。在添加过程中，形成稠的 棕色沉淀。使沉淀经15分钟温热至室温，然后在室温再搅拌30分钟。经15分钟逐份添加(R)- 3-(羟基甲基吡略烧甲酸叔丁酯（200 g, 994 mmol)(得自Fluorochem或BePharm Ltd) 于DCM(200 mL)中的溶液，同时将反应温度维持在24 - 30°C。将反应混合物搅拌2小时，然 后用TBME (8 L)稀释且过滤。将滤液在减压下浓缩，且将残余物(700 g)在冰-水浴中的二 乙醚(2L)中研磨，以得到333 g的粗产物。粗产物的27g份通过硅胶筒（100 g)上的层析纯 化，经30分钟用0 - 50%乙酸乙酯-环己烷的梯度洗脱。合并适当的级分，且在真空中蒸 发以得到作为黄色油状物的标题化合物（16.33 g，5%)。剩余的粗物质(~306 g)通过硅胶 筒（1.5 kg)上的层析纯化，经9.5个柱体积用0 - 30%乙酸乙酯-环己烷的梯度洗脱。合并 适当的级分，且在真空中蒸发以得到作为淡黄色油状物的标题化合物（233.94 g，76%): LCMS (系统A) RT = 1.19 min, 100%，ES+ve ff/z 312 (M+H)+; [a]D2Q = + 23 (c 1.00， EtOH中）。

[0271] 中间体2:(7?)-3-(2-(l，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

[0272] 将2-甲基_1，8_萘啶（57 • 5 g，399 mmol)(得自Manchester Organics)和（7?)_3_ (碘代甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯（124.2 g，399 mmol)(中间体1)于THF(1 L)中的搅拌溶 液冷却至〇°C，且在氮气下经20分钟用双(三甲基甲硅烷基)氨基锂于THF(1M，399 mL，399 mmol)中的溶液处理，且将反应混合物在0°C搅拌3小时。将反应用饱和氯化铵溶液(500 mL) 和水（500 mL)淬灭，并且添加乙酸乙酯（1 L)。分离各层，并且将水相用进一步的乙酸乙 酯（1 L)萃取。将合并的有机层干燥(MgS04)、过滤并且在真空中蒸发。将残余棕色油状物 (162 g)通过硅胶筒（750 g)上的层析纯化，经8个柱体积用0 - 100 % [乙酸乙酯八5% MeOH - 95 %乙酸乙酯）]的梯度洗脱。合并适当的级分，且在真空中蒸发以得到作为橙色 固体的标题化合物（46.65 g, 36%):LCMS (系统A) RT = 0.99 min, 97%, ES+ve ff/z 328 (M+H).，[a]D2。= + 22 (c 1.00，Et0H中）。

[0273] 中间体3:U)-2-(2_(吡咯烷-3-基）乙基)-l，8-萘啶，二盐酸盐

[0274] 在室温用HC1 (4M/1，4-二氧杂环己烷（200 mL，800 mmol)缓慢处理(7?)-3-(2-(1，8_萘啶-2-基）乙基)吡咯烷酮-1-甲酸叔丁酯（104.71 g，320 mmol)于DCM (500 mL) 中的溶液。在室温将混合物搅拌过夜，到此时烧瓶中已经形成大固体团块。添加MeOH (~ 100 mL)以帮助溶解固体且继续搅拌。LCMS表明~72 %产物和~25 %起始材料。添加额外量 的4M HC1/1，4-二氧杂环己烷（100 mL)，且继续搅拌1小时。将溶剂在真空中蒸发以得到作 为紫色固体的标题化合物(89.66 g, 93%):LCMS (系统B) RT = 0.34 min, 100%, ES+ve m/z 228 (M+H)+〇

[0275] 中间体4 :(幻-4-溴丁-2-烯酸叔丁酯

[0276] 在-40°C在钢高压釜中经30分钟将异丁烯气体(363 mL, 3.82 mol)鼓泡通过(五)- 4-溴丁_2_稀酸（210 g, 1.27 mmol) [T. Den Hartog, D. J. Van Dijken, A. J. Minnaard, B. L. Feringa retraAec/ro/3 ds/Mset. 2010, 1574-1584]和浓H2SO4 (20.35 mL，382 mmol)于二乙醚（1 L)中的搅拌溶液。将混合物密封在高压锅中并且在室 温将混合物搅拌24小时。将反应冷却至0°C，然后用三乙胺（250 mL)碱化并且用DCM (3 X 200 mL)萃取。将有机层干燥并且在真空中浓缩。将残余物在正戊烷（200 mL)中研磨以得 到作为棕色糖浆的标题化合物（140 g，SO%):1!! NMR S (CDC13，400 MHz) 6.89 (dt，/= 15, 7.5 Hz, 1H), 5.95 (dt, /=15, 1 Hz, 1H), 3.99 (dd, /=7.5, 1 Hz, 2H), 1.48 (s, 9H)。将水层用2M HC1酸化至pH 2,且用EtOAc (2 X 250 mL)萃取，将合并的有机层用 水(2 X 500 mL)洗涤，经Na2S〇4干燥，在真空中蒸发，以得到作为灰白色固体的未反应的起 始材料(50 g)。

[0277] 中间体5 :(幻-4-乙酰氧基丁-2-烯酸叔丁酯

[0278] 在室温用乙酸钾（186 g，1.9 mol)处理(幻-4-溴丁-2-烯酸叔丁酯（280 g，1.27 mol)于乙腈（1.2 L)中的搅拌溶液。将混合物在60°C搅拌4小时，且将反应通过TLC(10%二 乙醚/石油醚，Rf = 0.4,通过UV检测）进行监测。将反应混合物冷却至室温，将固体通过 过滤去除并且用二乙醚（600 mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩，且将残余物通过硅胶上的柱 层析纯化，用10%二乙醚/石油醚洗脱。合并适当的级分，且蒸发以得到作为淡黄色液体的 标题化合物（148 g，58%产率）：

[0280] .3_: t:难:拿.。

[0281] 中间体6:1-(3_溴苯基)_5_甲基-If吡唑

[0282] 将(3-溴苯基)肼盐酸盐(得自Amatek)(300 g, 1.34 mol)于乙酸（2.2 L)中的溶 液用二异丙基乙基胺(234 mL, 1.34 mol)、随后用(i?)-4_(二甲基氨基）丁_3_稀_2_酮(得 自Acros)(152 g，1.34 mol)处理，且将反应混合物在90°C加热2小时。将反应混合物在减 压下浓缩，将残余物倾倒至饱和NaHC03溶液中并且用乙酸乙酯（2 XI L)萃取。将有机相 分离，并且经Na2S04干燥。将滤液在真空中蒸发，且残余物通过快速硅胶（100-200目）柱层析 使用0 - 4.5%乙酸乙酯/石油醚纯化。收集适当的级分且在减压下浓缩，以得到1-(3_溴苯 基）-3_甲基-1"-吡唑（中间体29)(40 g，13%)。用20 - 40%乙酸乙酯/石油醚进一步洗脱 柱得到作为黄色液体的标题化合物(205 g，64%):

[0283] SH MHR 5 (CDCb； 600 MHz) 7.6? (tf Hi, lH)f

[0284]

[0286] 中间体7:(3-(5_甲基-If吡唑-1-基)_苯基)硼酸

[0287] 用硼酸三异丙酯(得自Avra) (294 mL，1.265 mol)缓慢处理1-(3_溴苯基)-5_甲 基-1"-吡唑（中间体6) (200 g，844 mmol)于THF (2 L)中的溶液，然后冷却至-78°C并且 在-78°C经30 min添加n-BuLi (844 mL, 2109 mmol)。在-78°C将混合物搅拌2h。通过TLC (流动相:30% EtOAc/石油醚)监测反应。将反应混合物倾倒至2M HC1中并且将THF在减压下 去除。将残余物用2M NaOH碱化并且用乙酸乙酯（2 X 700mL)萃取。将水层用2M HC1中和 (pH~7)，且用乙酸乙酯（2 X 1 L)萃取。将有机层合并，经无水Na2S04干燥，且在真空中蒸 发，以得到作为白色固体的标题化合物（120 g，69%)。1^ ES+ve203 (M+H) +。

[0288] 中间体8:l-(3-溴苯基)-3,5_二甲基-If吡唑

[0289] 将(3-溴苯基)肼盐酸盐(得自Reddy & Reddy)(45 g，200 mmol)和戊烷-2,4-二 酮（Aldrich)(30.2 g, 302 mmol)于DCM(225 mL)中的溶液用浓H2SO4 (1.073 mL, 20.13 mmol)逐滴处理，且在氮气下在室温搅拌16小时。将反应混合物用DCM (500 mL)稀释并且用 水(2 X 250 mL)洗涤。将有机层经Na2S04干燥并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶上的 柱层析（100-200目）纯化，用5%乙酸乙酯/己烷洗脱，以得到作为浅棕色液体的标题化合物 (30 g, 59%)：

[0292] 中间体9: (3_(3,5-二甲基-If吡唑-1-基)苯基)硼酸

[0293] 将 1-(3_ 溴苯基）-3,5_ 二甲基-1"-吡唑（中间体 8)(30 g, 119 mmol)于 THF(500 mL)中的溶液用硼酸三异丙酯(得自Avra)(41.6 mL, 179 mmol)处理，冷却至-78°C，在氩气 下经1小时用2.5 M nBuLi (119 mL，299 mmol)逐滴处理，且在-78°C搅拌2小时。将反应混 合物用HC1水溶液（2M，150 mL)淬灭，用2M NaOH溶液中和并且用乙酸乙酯（2 X 300 mL)萃取。将合并的有机溶液经Na2S04干燥并且在减压下浓缩。将残余物用戊烷和二乙醚（1: 1)研磨，且通过过滤收集固体，以得到作为灰白色固体的标题化合物（15 g，57%):MS ES+ ve m/z 217 (M+H)+〇

[0294] 中间体10:l-(3_溴苯基)-5_乙基-3-甲基-If吡唑

[0295] 短暂搅拌(3-溴苯基)肼盐酸盐(得自Anichem)(2.0 g，8.9 mmol)和三乙胺（1.25 mL, 8.9 mmol)于Et0H(20 mL)中的悬浮液，直至均勾，然后添加己-3-炔-2-酮（得自MP Biomedicals或Alfa Aesar) (0.887 g, 8.9 mmol)，且将混合物加热至50°C持续 10分钟。 将混合物用浓HC1 (12M，2.5 mL)处理，加热至100°C持续20 min。将混合物在减压下浓缩， 并且将残余物在乙酸乙酯和碳酸氢钠水溶液之间分配。将有机溶液用NaHC03水溶液、盐水 洗涤，干燥(MgS0 4)并且在减压下蒸发。将残余物通过硅胶（330 g)筒上的层析纯化，经10 CV用0 - 100% DCM -环己烷的梯度洗脱。合并适当的级分，且在减压下蒸发以得到作为橙 色油状物的标题化合物（1.95 g，82%):

[0298] 中间体11:(3-(5_乙基-3-甲基-1H-吡唑-1-基)苯基)硼酸

[0299] 在-78°C用n-BuLi (1.6M, 13.2 mL)逐滴处理 1-(3_溴苯基)-5_乙基-3-甲基-1"-吡唑（中间体10) (2.795 g, 10.54 mmol)和硼酸三异丙酯(得自Aldrich) (2.4 g, 12.7 mmol)的混合物，并且保持温度低于-60°C。使该混合物升温至室温过夜。然后将混合物用2M HC1水溶液（11 mL，至pH 7)淬灭，并且用乙酸乙酯分配。将有机溶液用盐水洗涤并且干燥 (MgS04)。将滤液在减压下浓缩，且将残余油状物用环己烷-石油醚(40-60°)研磨，直至获得 固体。通过过滤收集固体，用石油醚洗涤，然后用少量水洗涤，空气干燥，然后在60 °C在真空 中干燥，以得到作为黄色固体的标题化合物(623 mg，26%):MS ES+ve齡今231 (M+H) +。

[0300] 中间体12:u,幻-4-(3-(2-(l，8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基)丁-2-烯酸叔丁 M

[0301] 将(幻-4-乙酰氧基丁-2-烯酸叔丁酯（中间体5)(14.20 g，70.9 mmol)和1Y-双 (二苯基膦基)二茂铁]二氯钯（II) [Pd(dppf)Cl2](4.72 g，6.45 mmol)于DCM(100 mL)中 的混合物在氮气下搅拌15分钟，然后添加(7?)-2-(2-(吡咯烷-3-基）乙基)-l，8-萘啶二盐酸 盐（中间体3)(17g, 57 mmol)于二异丙基乙基胺(56.3 mL, 322 mmol)和DCM(200 mL)中的 溶液。获得澄清的红色溶液，将其在氮气下搅拌24小时。将混合物在DCM和水（3 X 170 mL)之间分配。将有机相通过相分离筒，且将滤液在减压下浓缩。将残余油状物(27 g)在DCM 中上样至氨基丙基筒（900 g)，且通过使用经10个柱体积的0至100%乙酸乙酯的梯度的 CombiFlash Companion XL上的层析进行纯化。合并适当的级分，且在真空中蒸发以得到作 为棕色油状物的标题化合物（17.62 g，85%)，其在放置后固化:LCMS (系统A) RT = 1.05 min, 100% ; ES+ve m/z 368 (M+H)+〇

[0302]中间体 13 :4-((7?)-3-(2-(1，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)-3-(3-(3,5-二甲 基-if吡唑-i-基)苯基)丁酸叔丁酯

[0303] 将(3-(3,5_二甲基-1"-吡唑-1-基)苯基）硼酸（中间体9)(44.7 g，207 mmol)于 K0H(3.8 M，54.4 mL，207 mmol)中的溶液用(7?，五)-4-(3-(2-(1，8_萘啶-2-基）乙基)吡咯 烷-1-基)丁-2-烯酸叔丁酯（中间体12)(40 g，103 mmol)于1，4_二氧杂环己烷(300 mL)中 的溶液处理，且将该混合物使用真空和氮气脱气几次，持续5分钟。添加氯（1，5_环辛二烯） 铑（I)二聚体（2.55 g，5.17 mmol)，随后添加（7?)-BINAP (6.44 g，10.3 mmol)，且将混 合物再脱气5分钟。将溶液在90°C加热60分钟。冷却之后，将反应混合物在DCM(250mL)和水 (200mL)之间分配。将水相用DCM (200 mL)进一步萃取，且在真空中蒸发合并的有机溶液。 将残余油状物（95 g)溶解于DCM中，且通过氨基丙基筒KPNH (900 g)上的层析纯化，用经 10CV的0-50%乙酸乙酯-环己烷的梯度洗脱。合并适当的级分，且在真空中蒸发以得到棕色 油状物（39 g)99.5%;合并含有次要组分(RT=19-25 min)的级分，且在减压下浓缩，以得到作为棕色油状物的标 题化合物异构体2 (2.〇3g，4%):LCMS (系统A) RT= I.25 min, ES+ve ff/z 540 (M+H) + ; Chiralpak AD-H柱上的分析型手性HPLC RT=9.78 min, >99.5%。

[0306]中间体 14:3-(3-(3,5-二甲基-1"-吡唑-1-基)苯基)-4-(U)-3-(2-(5,6,7,8-四 氢-1,8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸叔丁酯

[0307]将 4-((7?)-3-(2-(1，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)-3-(3-(3,5-二甲基-1斤吡 P坐-1-基)苯基)丁酸叔丁酯(异构体1)(中间体13)(8.0 g, 14.8 mmol)于乙醇(200 mL)中 的溶液经10% Pd/C (1.58 g)在氢气气氛下在室温快速搅拌过夜。通过硅藻土过滤去除催 化剂且用乙醇洗涤。将合并的滤液和洗涤液在减压下蒸发，以得到作为棕色油状物的标题 化合物（7.19 g，89%)。!^!^ (系统A) RT = 1.44 min, ES+ve zs/z 544 (M+H) + 〇

[0308] 中间体 15:4-(U)-3-(2-(l，8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基）-3-(3-(5-甲基-lf吡唑- 1-基)苯基)丁酸叔丁酯

[0309] 将(3-(5-甲基-If吡唑-1-基)苯基)硼酸（中间体7)(12.53 g, 55.8 mmol)于KOH (3.8M，14.69 mL，55.8 mmol)中的水溶液用(7?，幻-4-(3-(2-(l，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯 烷-1-基）丁-2-烯酸叔丁酯（中间体12)(11.4 g，27.9 mmol)于1，4_二氧杂环己烷（196 mL)中的溶液处理，且将该溶液使用真空和氮气脱气几次，持续5分钟。将氯（1，5-环辛二烯） 铑（I)二聚体(0.688 g, 1.396 mmol)和(7?)-BINAP( 1.738 g, 2.79 mmol)添加至混合物， 且将溶液再脱气5分钟。将反应混合物在90 °C加热60分钟。冷却之后，将反应混合物在真空 中蒸发，且将残余物在DCM和水之间分配。将水相用DCM进一步萃取，且在真空中蒸发合并的 有机溶液。将残余油状物(21.53 g)溶解于DCM中，且通过CombiFlash Companion XL上的层 析氨基丙基筒(375 g)纯化，用经12个柱体积的0至100%乙酸乙酯-环己烷的梯度洗脱。 合并适当的级分，且在真空中蒸发以得到棕色油状物（13.56 ghChiralpak 0D-H柱（250 mm X4.6 mm)上的分析型手性HPLC(用20% EtOH -庚烷等度洗脱，流速=1.0 mL/min，在 215 nm检测)表明所述油状物是两种非对映异构体的混合物:峰1 RT = 15.1 min, 8.2 %; 峰2 RT = 22.6 min, 91.8 %。将混合物通过Chiralpak AD柱（50 mm X 200 mm)上的手性 制备性HPLC分离，用30%乙醇-庚烷洗脱，流速=50 mL/min，在215 nm检测，收集RT = 37 -50 min的主要组分的级分。将合并的级分在减压下蒸发，且将残余物用氨基丙基筒(375 g) 进一步纯化，用经12个柱体积的0 - 100%乙酸乙酯-环己烷的梯度洗脱。合并适当的级 分，且在真空中蒸发以得到作为棕色油状物的标题化合物的异构体1(9.06 g，62%) :LCMS (系统A) RT=1.20 min, 97%，ES+ve齡々526 (M+H) +。在减压下蒸发其它适当的级分，以 得到标题化合物的次要异构体(异构体2) (1.83 g，12%):LCMS (系统A) RT=1.21 min, ES+ve m/z 526 (M+H)+〇

[0310] 中间体 16:3-(3-(5-甲基-If 吡唑-1-基)苯基)-4-(U)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-1， 8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸叔丁酯

[0311] 将萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基)-3-(3-(5_甲基-1"-吡唑-卜基)苯基)丁酸叔丁酯（异构体1)(中间体15)(9.06 g, 17.2 mmol)于乙醇(250 mL)中的 溶液经10% Pd/C (1.834 g)在室温氢化48小时。通过硅藻土过滤去除催化剂且用乙醇洗 涤。将合并的滤液和洗涤液在真空中蒸发，以得到作为黄色油状物的标题化合物(7.68 g， 84%):LCMS (系统A) RT = 1.40 min, 95%，ES+ve zs/z 530 (M+H) +〇

[0312] 中间体 17:4-(U)-3-(2-(l，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)-3-(3-(5-乙基-3-甲基-lf吡唑-1-基)苯基)丁酸叔丁酯

[0313] 将(7?，幻-4-(3-(2-(1，8-萘啶-2-基）乙基)啦咯烷-卜基）丁-2-稀酸叔丁酯（中间 体12)(360 mg，0.980 mmol)、（3-(5-乙基-3-甲基-1"-吡唑-1-基）苯基）硼酸（中间体10) (676 mg, 2.94 mmol)、水性K0H(3.8M, 0.516 mL, 1.96 mmol)、氯（1,5-环辛二烯）铑（I) 二聚体（48.3 mg, 0.098 mmol)、（7?)_BINAP(122 mg, 0.196 mmol)于1,4-二氧杂环己烧 (15 mL)中的混合物在95 °C下加热3小时。将反应混合物在真空中浓缩，且在DCM(25mL)和水 (25mL)之间分配。将水层分离且用进一步DCM (25 mL)萃取，且在真空中浓缩合并的有机溶 液。将残余物溶解于DCM中，且通过硅胶筒(50 g)上的层析（用0 - 25% MeOH - DCM洗脱)进 行纯化。合并适当的级分，且在真空中蒸发以得到作为橙色油状物的标题化合物（158 mg， 29%):LCMS (系统A) RT = 1.31 min, 81%, ES+ve 554 (M+H)+ ;分析型手性HPLC Chiralpak AD (250 mm X 4.6 mm) 15% EtOH -庚烧，等度，流速 1 mL/min，在215 nm检 测。RT = 10.5 min, 92.6% (主要异构体)和14.8 min, 7.4% (次要异构体）；

[0316]中间体 18:3-(3-(5_ 乙基-3-甲基-1 炉吡唑-1-基)苯基)-4-(U)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-l，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸叔丁酯

[0317]将4-(U)-3-(2-(l，8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基）-3-(3-(5-乙基-3-甲基-l//-吡唑-1-基）苯基）丁酸叔丁酯（中间体17)(158mg，0•285mmol)经乙醇（10mL)中的 10% Pd/C (30 mg)氢化18小时。通过硅藻土（10 g)过滤去除催化剂且用乙醇洗涤。将合并 的滤液和洗涤液在真空中蒸发，以得到作为橙色油状物的标题化合物（130 mg，82%) :LCMS (系统A) RT = 1.49 min, ES+ve ff/z 558 (M+H) + 〇

[0318]中间体 19 :4-(U)-3-(2-(l，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)-3-(3-(lf吡唑- l-基)苯基)丁酸叔丁酯

[0319] 将(7?，幻-4-(3-(2-(1，8-萘啶-2-基）乙基)啦咯烷-卜基）丁-2-稀酸叔丁酯（中间 体 12)(333 mg, 0.906 mmol)、（3-(l"-吡唑-1-基）苯基）硼酸（得自ABCR GmbH)(511 mg, 2.72 mmol)、水性KOH(3.8M, 0.477 mL, 1.81 mmol)、氯（1,5-环辛二烯）铑（I)二聚体 (44.7 mg, 0.091 mmol)、（7?)_BINAP( 113 mg, 0• 196 mmol)于1,4-二氧杂环己烧（15 mL) 中的混合物在95 °C下加热3小时。将反应混合物在真空中浓缩，且在DCM( 25mL)和水(25mL) 之间分配。将水层分离且用进一步DCM (25 mL)萃取，且在真空中浓缩合并的有机溶液。将 残余物溶解于DCM中，且通过硅胶柱（50 g)上的层析（用0 - 25% MeOH - DCM洗脱)进行纯 化。合并适当的级分，且在真空中蒸发以得到作为橙色油状物的标题化合物（128 mg， 28%):LCMS (系统 A):7?r= 1.22 min, ES+ve 512 (M+H)+;分析型手性 HPLC Chiralpak AD (250 mm X 4.6 mm)，用含有0.1%异丙胺的30% EtOH -庚烷等度洗脱，流 速111117111111，在235 11111检测:1^ = 7.05 111111，95%(主要异构体)和12.2 111111，5%(次要异 构体)。

[0320] 中间体 20:3-(3-(lf 吡唑-1-基)苯基)-4-(U)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-l，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸叔丁酯

[0321] 将 4-((7?)-3-(2-(1，8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基)-3-(3-(1"-吡唑-1-基）苯 基)丁酸叔丁酯（中间体 19)(128 mg, 0.25 mmol)经乙醇（10 mL)中的 10% Pd/C (53 mg)氢 化18小时。通过硅藻土（10 g)过滤去除催化剂且用乙醇洗涤。将合并的滤液和洗涤液在真 空中蒸发，以得到作为橙色油状物的标题化合物（100 mg，78%):LCMS (系统A) RT = 1.45 min, ES+ve m/z 516 (M+H)+〇

[0322] 中间体21:l-(3-溴苯基)-3,5_二乙基-If吡唑

[0323] 将庚烷-3,5-二酮（得自Aldrich)(3.60 g，28.1 mmol)、（3-溴苯基）肼（得自 Anichem Inc)(3.50 g, 18.7 mmol)溶解于DCM(20 mL)中。添加浓H2SO4 (18M, 0.100 mL, 1.8 mmol)，且将反应在室温搅拌18小时。将反应混合物在真空中浓缩，且在DCM(25mL)和水 (25mL)之间分配，分离水相且用进一步DCM (25 mL)萃取。将合并的有机相在真空中浓缩， 以得到标题化合物（3.64 g, 70%) :LCMS (系统A):7«T= 1.31 min, ES+ve 279/281 (M+H) + 〇

[0324] 中间体22: (3_(3,5-二乙基-If吡唑-1-基)苯基)硼酸

[0325] 将 1-(3_溴苯基)-3,5_二乙基-1 炉吡唑（中间体21)(3.637 g, 13.03 mmol)、2-二 环己基膦基-2/,4/，6/-三异丙基联苯基〇-?1105)(得自41乜1(*)(298 11^，0.625 111111〇1)、 三(二亚节丙酬)二钮(得自Aldrich)(179 mg，0• 195 mmol)、乙酸钟（3• 20 g, 32• 6 mmol) 和双(频哪醇)二硼(得自Aldrich)(3.64 g, 14.3 mmol)于1,4-二氧杂环己烧(75 mL)中的 混合物加热至110°C，持续4小时。将水和乙酸乙酯添加至反应混合物中，且分离各层。水层 用EtOAc进一步萃取两次。将合并的有机萃取物通过疏水玻璃料，且在真空中蒸发滤液。将 残余物溶解于乙腈中，且通过反相层析（100 g)纯化，用经10 CV的含有0.1%甲酸的25 -85%乙腈-水的梯度洗脱。合并适当的级分，且在真空中蒸发以得到标题化合物（1.055 g，33%) :LCMS (系统A) 7?r= 0.86 min, ES+ve ff/z 245 (M+H) + 〇

[0326] 中间体 23:4-((7?)-3-(2-(1，8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基)-3-(3-(3,5-二乙 基-if吡唑-i-基)苯基)丁酸叔丁酯

[0327] 将(友，幻-4-(3-(2-(l，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基）丁-2-烯酸叔丁酯（中间 体 12)(210 mg，0.571 mmol)、（3-(3,5-二乙基-1 炉吡唑-1-基）苯基)硼酸（中间体22)(283 mg, 1.16 mmol)、水性KOH(3.8M, 0.3 mL, 1.14 mmol)、氯（1,5-环辛二烯）铑（I)二聚体 (14.1 mg, 0.03 mmol)、（7?)-BINAP(35.6 mg, 0.06 mmol)于1,4-二氧杂环己烧（5 mL)中 的混合物在95°C下加热4小时。将反应混合物在真空中浓缩，且在EtOAc (100 mL)和水 (100mL)之间分配。将水层分离且用进一步EtOAc (100 mL)萃取，且在真空中浓缩合并的有 机溶液。将残余物通过氨基丙基SPE筒（50 g)上的层析纯化，经1小时用0 - 100% EtOAc -环己烷洗脱。合并适当的级分，且在真空中蒸发以得到作为橙色油状物的标题化合物（130 mg, 40%):LCMS (系统 C):7?r= 0.97 min, ES+ve 568 (M+H)+;分析型手性 HPLC Chiralpak AD (250 mm X 4.6 mm)，用含有0.1%异丙胺的10% EtOH -庚烷等度洗脱，流 速 1 mL/min，在215 nm检测:RT = 10.5 min, 86% (主要异构体)和 13.7 min, 13% (次要 异构体）。通过Chiralpak AD (250 mm X 30 mm)上的制备型手性HPLC(用含有0.2%异丙胺 的10% EtOH -庚烷等度洗脱，流速30 mL/min，在215 nm检测）分离非对映异构体。合并适 当的级分，且在减压下蒸发以得到标题化合物的主要异构体(异构体1) (53 mg，41%):

[0329] a 也3H),Li.3化.>7吡3H)。其它适当的级分的蒸发得到标题化合物的 次要非对映异构体（异构体2) (5 mg, 4%):LCMS (系统C) RT = 0.96 min, ES+ve 568 (M+H)+〇

[0330] 中间体 24:3-(3-(3,5-二乙基-1"-吡唑-1-基)苯基)-4-(U)-3-(2-(5,6,7,8-四 氢-1,8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸叔丁酯

[0331] 将 4-((7?)-3-(2-(1，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)-3-(3-(3,5-二乙基-1斤吡 P坐-1-基)苯基)丁酸叔丁酯(异构体1)(中间体23)(144 mg, 0.25 mmol)经乙醇（10 mL)中 的10% Pd/C (27 mg)氢化18小时。通过硅藻土（10 g)过滤去除催化剂且用乙醇洗涤。将合 并的滤液和洗涤液在真空中蒸发，以得到作为橙色油状物的标题化合物（116 mg，80%): LCMS (系统A) RT = 1.61 min, ES+ve ff/z 572 (M+H) + 〇

[0332] 中间体25:l-(3-溴苯基)-4_氟-3,5-二甲基-1炉吡唑

[0333]将3-氟戊烧-2,4-二酮（得自Fluorochem)(2.84 g, 24.1 mmol)、（3_溴苯基）肼 (得自Anichem Inc)(3.0 g, 16 mmol)溶解于DCM(20 mL)。添加浓H2SO4 (0.171 mL, 3.21 mmol)，且将反应在室温搅拌18小时。将反应混合物在真空中浓缩，且在DCM(25mL)和水 (25mL)之间分配，分离水相且用进一步DCM (25 mL)萃取。然后将合并的有机相在真空中浓 缩，以得到标题化合物（2.61 g, 60%):LCMS (系统A) RT = 1.22 min, ES+ve 269/ 271 (M+H)+〇

[0334] 中间体26: (3-(4_氟-3,5-二甲基-If吡唑-1-基)苯基)硼酸

[0335] 将 1-(3_溴苯基)-4_氟-3,5-二甲基-1"-吡唑（中间体25)(2.61 g, 9.70 mmol)、 2-二环己基膦基-2/，4/，6/-三异丙基联苯基〇-?1103)(得自41(14(^)(222 11^，0.466 mmol)、三（二亚节丙酬）二钮（得自Aldrich)(133 mg, 0.146 mmol)、乙酸钟（2.38 g, 24.3 mmol)和双（频哪醇）二硼（得自Aldrich)(2.71 g, 10.67 mmol)于1,4-二氧杂环己烧（75 mL)中的混合物加热至110°C，持续4小时。将水和乙酸乙酯添加至反应混合物中，且分离各 层。水层用EtOAc进一步萃取。将合并的有机萃取物通过疏水玻璃料，且在真空中蒸发滤液。 将残余物溶解于乙腈中，且通过使用经10 CV的含有0.1%甲酸的25 - 85 %乙腈-水的 梯度的反相层析（100 g筒)纯化。合并适当的级分，且在真空中蒸发以得到标题化合物(400 mg, 18%):LCMS (系统A) RT = 0.77 min, ES+ve ff/z 235 (M+H) + 〇

[0336] 中间体 27:4-(U)-3-(2-(l，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)-3-(3-(4-氟-3,5-二甲基-lf吡唑-1-基)苯基)丁酸叔丁酯

[0337] 将（3-(4-氟-3,5-二甲基-1"-吡唑-1-基）苯基）硼酸（中间体26) (382 mg，1.63 mmol)、环辛二烯铑（I)氯化物二聚体（121 mg, 0.245 mmol)、水性K0H(3.8M, 0.430 mL, 1.63 mmol)于1，4_二氧杂环己烷(6 mL)中的溶液在环境温度在氮气下搅拌5分钟，然后添 加(7?，i?)-叔丁基4-(3_(2_( 1,8-萘啶-2-基）乙基）R比略烧-1-基)丁-2-稀酯环辛二稀（中间 体12)(300 mg，0.82 mmol)。将反应混合物在95°C加热1小时，然后在水（20 mL)和EtOAc (20 mL)之间分配。将有机层在减压下浓缩，溶解于Me0H(5mL)中，且上样于用MeOH (1 CV) 预调节的10 g氨基丙基SPE筒上。用MeOH (3 CV)洗涤柱，且在减压下浓缩级分。通过C18 (30 g)筒上的反相层析纯化残余物（385 mg)，用10 mM碳酸氢铵水溶液中的50 - 80%乙腈 (含有0.1%氨水)洗涤。在减压下浓缩适当的级分，以得到作为非对映异构体的混合物的标 题化合物（70 mg, 15%):LCMS (系统A) RT = 1.34 min, ES+ve zs/z 558 (M+H) +〇

[0338] 中间体 28:3-(3-(4-氟-3,5-二甲基-1"-吡唑-1-基）苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7, 8_四氢-1,8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸叔丁酯

[0339] 将4-((7?)-3-(2-(1，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)-3-(3-(4-氟-3,5-二甲基-1//-吡唑-1-基)苯基)丁酸叔丁酯（中间体27)(70 mg, 0.063 mmol)经乙醇(4 mL)中的10% Pd/C (13.4 mg)氢化4小时。通过硅藻土过滤去除催化剂且用乙酸乙酯洗涤。将合并的滤液 和洗涤液在减压下浓缩，以得到作为黄色油状物的标题化合物(70 mg，35%)。^!^ (系统 A) RT = 1.50 min, ES+ve m/z 562 (M+H)+〇

[0340] 中间体29:l-(3-溴苯基)-3_甲基-If吡唑

[0341] 将丁-3-炔-2-酮（1.75 mL，22.4 mmol)、（3-溴苯基）肼、盐酸盐（5.0 g，22.4 mmol)于Me0H(20 mL)中的溶液用浓HC1 (0.680 mL，22.4 mmol)处理，且将反应在密封微 波小瓶中在120°C加热2分钟。将反应混合物在真空中浓缩，且在DCM(25mL)和水(25mL)之间 分配，分离水层且用进一步DCM (25 mL)萃取。将合并的有机溶液浓缩，且通过二氧化硅SPE 筒（100 g)上的层析（用〇 - 100% DCM -环己烷的梯度洗脱)纯化。合并适当的级分，且在 真空中蒸发以得到标题化合物(2.39 g，45%):

[0343] _丨235美3_及其区域异构体卜（3-溴苯基）-5-甲基-1庆吡唑（中间体6) (1.7 g，32%) :LCMS (系统A) RT = 1.05 min, ES+ve ff/z 237/239 (M+H) + 〇

[0344] 中间体30:(3-(3_甲基-If吡唑-1-基)_苯基)硼酸

[0345] 通过与从中间体29 (2.39 g，10.1 mmol)开始制备中间体26所述的方法类似的 方法制备以提供标题化合物(2.23 g，100%) :LCMS (系统A) RT = 0.60 min, ES+ve ff/z 203 (M+H)+〇

[0346] 中间体 31:4-(U)-3-(2-(l，8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基）-3-(3-(3-甲基-lf吡唑- 1-基)苯基)丁酸叔丁酯

[0347] 通过与从中间体 12(336 mg, 0.914 mmol)和中间体30(554 mg, 2.74 mmol)制备 中间体27所述的方法类似的方法制备以提供标题化合物(212 mg，44%) :LCMS (系统A) RT =1.26 min, ES+ve zs/z 526 (M+H) + ;分析型手性 HPLC Chiralcel 0D (250 mm X 4.6 mm)，用40% EtOH -庚烧等度洗脱，流速 1 mL/min，在215 nm检测：RT = 10.1 min, 16.7% (次要异构体)和14.1 min, 83.3% (主要异构体）。

[0348] 中间体 32:3-(3-(3_ 甲基-If 吡唑-1-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-1， 8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸叔丁酯

[0349] 将萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基)-3-(3-(3_甲基-1"-吡唑-1-基)苯基)丁酸叔丁酯（中间体31)(212 mg, 0.403 mmol)于Et0H(10 mL)中的溶液经Pd/C (42.9 mg)氢化18小时。通过硅藻土过滤收集催化剂且用EtOH洗涤。将合并的滤液和洗涤液 在真空中浓缩，以得到作为橙色油状物的标题化合物（171 mg，80%):LCMS (系统A):RT= 1.46 min, ES+ve m/z 530 (M+H)+〇

[0350] 实施例的制备

[0351] 实施例 l:3-(3-(3,5-二甲基-If 吡唑-1-基）苯基)-4-(U)-3-(2-(5,6,7,8-四 氢-1,8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸

[0353]将 3-(3-(3,5_ 二甲基-1"-吡唑-1-基）苯基）-4-(U)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-l，8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基）丁酸叔丁酯（中间体14)(100mg，0.184mm Ol)于2-甲基 THF(0.5 mL)中的溶液用浓HC1(12M，0.077 mL，0.92 mmol)处理，且在40°C下搅拌2小时。 将溶剂在真空中蒸发，且将残余油状物溶解于乙醇（2mL)中，且应用至SCX-2离子交换筒 (5g)，用乙醇(2CV)和然后MeOH (2 CV)中的2M氨洗脱。合并含氨级分，且在真空中蒸发以得 到作为灰白色固体的标题化合物(79 mg，88%):

[0356] 通过下文描述的方法将实施例1鉴定为（幻-3-(3-(3,5-二甲基-1，吡唑-1_基)苯 基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8_ 四氢-1，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸。

[0358]实施例 2:3-(3-(5_ 甲基-1"-吡唑-1-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-1， 8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸

[0360]将 3-(3-(5_ 甲基-1 炉吡唑-1-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-l，8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基）丁酸叔丁酯（中间体16)(2•80g，5•29mm Ol)于2-甲基THF(15 mL)中的溶液用浓HC1(12M，3.96 mL，47.6 mmol)处理，且在40°C搅拌2小时。在真空中蒸 发溶剂，且将残余物(3.8 g)溶解于乙醇(2mL)中，且通过SCX-2筒(70 g)上的离子交换层析 纯化，用乙醇(2CV)和然后MeOH (1 CV)中的2M氨洗脱。将含氨级分在真空中蒸发，且将残余 物溶解于DCM中，且在氨基丙基筒（100 g)上进一步纯化，经30 min用0 - 25% MeOH - DCM 的梯度洗脱。合并适当的级分，且在真空中蒸发以得到作为白色泡沫的标题化合物（2.01 g, 80%)〇

[0361]

[0362] 实施例 3:3-(3-(5_ 乙基-3-甲基-If 吡唑-1-基)苯基)-4-(U)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-l，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸

[0364]将 3-(3-(5_ 乙基-3-甲基-1 炉吡唑-1-基）苯基）-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8_ 四氢-1， 8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸叔丁酯（中间体18)(130 mg，0.233 mmol)溶解于1， 4_二氧杂环己烷（5 mL)中，添加浓HC1(37%，0.038 mL，0.466 mmol)，且将反应混合物在 室温搅拌18小时。将混合物在真空中浓缩，且将样品溶解于DMSO(lmL)中，且通过Xbridge柱 上的Mass Directed AutoPrepHPLC (方法B)使用具有碳酸铵缓冲液的乙腈-水纯化。在 Radley氏放空装置中在氮气流下去除溶剂，以得到标题化合物(20 mg，17%):

[0367]实施例 4:3-(3-(1"_ 吡唑-1-基)苯基)-4-(U)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-l，8-萘啶- 2-基)乙基)P比略烧-1-基)丁酉爱

[0369]将 tU-df 吡唑-丨-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-1，8-萘啶-2_基）乙 基)吡略烧-1-基）丁酸叔丁酯（中间体20)(100 mg, 0.19 mmol)溶解于1,4-二氧杂环己烧 (5 mL)中，添加浓HC1 (37%，0.032 mL，0.39 mmol)，且将反应混合物在室温搅拌18小时。 将混合物在真空中浓缩，且将样品溶解于DMS0 - MeOH (1:1; 1 mL)中，且通过Xbridge柱 上的Mass Directed AutoPrepHPLC (方法A)使用具有碳酸铵缓冲液的乙腈-水纯化。在 Radley氏放空装置中在氮气流下去除溶剂，以得到标题化合物（10 mg，11%):

[0372]实施例 5:3-(3-(3,5-二乙基-1"-吡唑-1-基）苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8-四 氢-1,8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸

[0374]将 3-(3-(3,5_ 二乙基-1"-吡唑-1-基）苯基）-4-(U)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-l，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸叔丁酯（116mg，0.203mm Ol)溶解于l，4-二氧杂环己 烷(5 mL)中，然后用浓HC1 (0.033 mL，0.406 mmol)处理，且将反应在室温搅拌18小时。将 反应在真空中浓缩，且将残余物溶解于DMS0( lmL)中，且通过Xbridge柱上的Mass Directed AutoPrep HPLC(方法A)使用具有碳酸铵缓冲液的乙腈-水纯化。在Radleys放空装置中在氮 气流下干燥溶剂，以得到标题化合物(27 mg，26%):

[0377]实施例 6:3-(3-(4_ 氟-3,5-二甲基-1"-吡唑-1-基）苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7, 8_四氢-1,8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸

[0379]将 3-(3-(4_ 氟-3,5-二甲基-1 炉吡唑-1-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-l，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸叔丁酯（中间体28)(70mg，0.125mm Ol)溶解于 乙腈（1 mL)中，且添加4M HC1/二氧杂环己烷(0.093 mL，0.37 mmol)。将反应混合物在环 境温度下搅拌2小时。在该点的LCMS显示非常低转化成产物，添加更多4M HC1/二氧杂环己 烷(0.093 mL，0.37 mmol)，且将反应混合物再搅拌8小时。将反应混合物在减压下浓缩，溶 解于MeOH-DMSO (1:1; 2mL)中，且通过MDAP(方法A)纯化。合并适当的级分，且在放空单元 中在氮气流下浓缩，以得到作为橙色胶状物的标题化合物(30 mg，48%):

[0382]实施例 7:3-(3-(3_ 甲基-1"-吡唑-1-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-1， 8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸

[0384]将 3-(3-(3_ 甲基-1 炉吡唑-1-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-l，8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基)丁酸叔丁酯（中间体32)(92mg，0.17mm Ol)溶解于l，4-二氧杂 环己烷（5 mL)中，然后用浓HC1 (0.029 mL，0.35 mmol)处理，且将反应在室温搅拌18小 时。将反应在真空中浓缩，且将残余物溶解于DMSO(lmL)中，且通过Mass Directed AutoPreparative HPLC (方法A)纯化。合并适当的级分，且在Radleys放空装置中在氮气流 下蒸发，以得到标题化合物(18 mg，22%):

[0385]

[0387] 实施例8:(幻-3-(3-(3,5-二甲基-If 吡唑-1-基)苯基)-4-(U)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-l，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸，盐酸盐

[0388] 通过制备手性HPLC进一步纯化3_( 3_( 3，5-二甲基-If吡唑-1-基)苯基)_4_( (7?) - 3-(2-(5,6,7,8_四氢-1，8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基）丁酸（实施例1)(37.89 g，78 mmol)。将其溶解于乙醇(4mL)中，且将溶液用庚烷(6 mL)稀释。将溶液静置30分钟，然后过 滤。将滤液注射（1 g/注射）至Chiralpak AD柱（20 micron, 75 mm X 250 mm)，用30%乙 醇(含有0.1%异丙胺）-70%庚烷(含有0.1%异丙胺)等度洗脱。合并适当的级分，且在真 空中蒸发以得到作为灰白色泡沫的纯的实施例1(31.87 g)。以类似的方式纯化各种其它批 次，和

[0389] 实施例8:(tS)-3-(3-(3,5-二甲基-lf吡唑-1-基)苯基)-4-(U)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-l，8-萘啶-2-基)乙基)吡咯烷-1-基)丁酸，盐酸盐的大规模制备

[0390] 下面方案概述实施例8的大规模制备：

[0391]

[0392] 中间体1(幻-3_(碘代甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯步骤1&2.(替代方法)

[0393] 在氮气下向反应器装入2-甲基四氢呋喃（145 kg)、#，，二异丙基乙基胺（16.6 1^)和(7?)-3-(羟基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯（16.5 1^)。将批料冷却至0-10°(：，且添加甲 磺酰氯（11.6 kg)，随后添加2-甲基四氢呋喃(8 kg)，且将反应搅拌约5小时。进一步添加甲 磺酰氯(2.4 kg)，随后添加2-甲基四氢呋喃（5.2 kg)，且将反应搅拌约4.5小时。将反应混 合物相继用10%氢氧化钠水溶液(80 kg)、水(85 kg)、1N氯化铵水溶液（101 kg)、水（100 kg)和25 %NaCl水溶液（100 kg)洗涤。将有机相在减压下蒸馏至2-3个体积，且用乙醇（78 kg)稀释。将混合物在减压下蒸馏至2-3个体积，且用乙醇(72 kg)稀释。将混合物在减压下 蒸馏至2-3个体积，且用乙醇(77 kg)稀释。向混合物添加乙醇(72 kg)和碘化钾(70 kg)，且 将反应混合物加热至70-80 °C，持续16小时，然后冷却至40-50°C。将反应混合物加热至70-80°C，持续8小时，然后冷却至40-50°C。将反应混合物加热至70-80°C，持续4小时，然后冷却 至40-50°C。将混合物在减压下蒸馏至2-3个体积。将水（180 kg)和乙酸乙酯(80 kg)添加至 浓缩物，且将有机层相继用水(90 kg)和25%氯化钠水溶液(98 kg)洗涤。将剩余有机相在 减压下蒸馏至1-3个体积，且用THF (76 kg)稀释。将混合物在减压下蒸馏至1-3个体积，且 用THF (76 kg)稀释。将混合物在减压下蒸馏至1-3个体积，且用THF (33 kg)稀释。将混合 物在减压下蒸馏至1-3个体积，且用THF (34 kg)稀释。将混合物用THF (31 kg)稀释，以得 到产物的溶液，所述产物的溶液直接用于下一步骤(89.6 kg，22.4%w/w测定，80 %理论 值)。

[0394] HPLC RT = 15.15 min, 86.1%

[0395] 柱：150mm X 4.6mmID, 3.5um Agilent Zorbax SB-C8

[0396] 流速：1 •0 mL/min.

[0397] 温度：4(TC

[0398] 检测波长：210 nm

[0399] 溶剂:A:三氟乙酸于水中的0.05% v/v溶液 [0400] B:三氟乙酸于乙腈中的0.05% v/v溶液。

[0402] 中间体2. (7?)-3-(2-(l,8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

[0403] 阶段 3

[0404] 溶液1的制备:将(7?)-3-(碘代甲基）吡咯烷-1-甲酸叔丁酯（中间体1)(89.6 kg， 22.4%测定，20.1 kg活性剂）的溶液在减压下蒸馏至1-2个体积，且用THF(180 kg)稀释，添 加2-甲基萘啶(9.2 kg)，且在氮气下将溶液冷却至5-7°C。

[0405] 溶液2的制备:将双(三甲基甲硅烷基)氨基锂于THF (59.2 kg)中的溶液在氮气下 冷却至5-7 °C。

[0406] 根据以下条件通过经由静态混合物和流动反应器栗送上面制备的溶液1和2进行 反应，其中将输出反应混合物淬灭至水(80 kg)和乙酸(42 kg)的溶液中。

[0407] 工作：

[0408] 将混合物用2N NaOH溶液（347 kg)处理，且用MTBE (160 kg)萃取。将MTBE相在0-10°C用IN HC1溶液（196 kg)处理，且弃去有机层。将酸性水层用MTBE洗涤两次（142 kg和 146 kg)，然后通过添加2N NaOH水溶液(80 kg)调节至pH5-6。将水相用乙酸乙酯（162 kg) 萃取，且将水相通过添加NaOH(14 kg)调节至pH5-6。将水相用乙酸乙酯（166 kg)萃取，且将 水相通过添加Na0H(10 kg)调节至pH5-6。将水相用乙酸乙酯（176 kg)萃取，且将合并的 EtOAc相用水(210 kg)和25 %氯化钠水溶液(210 kg)洗涤。将有机溶液在减压下蒸馏至2-4 个体积，且用MTBE (80 kg)稀释。将混合物在减压下蒸馏至2-4个体积，且用正庚烷(80 kg) 稀释。将混合物在减压下蒸馏至2-4个体积，且用正庚烷(80 kg)稀释。将混合物在减压下蒸 馏至2-4个体积，且用MTBE (16 kg)稀释。将混合物冷却至5-10°C，且用正庚烷(40 kg)处 理。将固体产物通过过滤（离心机）收集，用正庚烷（10 kg)洗涤，且在50-60°C在真空下干 燥，以得到作为固体的标题产物(4.3 kg)。

[0409] 将滤液用EtOAc (203 kg)处理，且在减压下蒸馏至100-150L。将混合物用MTffi (80 kg)稀释，且在减压下蒸馏至80L。将混合物用正庚烷(60 kg)稀释，且在减压下蒸馏至 60L。将混合物用正庚烷(23 kg)稀释，且在减压下蒸馏至60L。将混合物用MTBE (16 kg)稀 释，且在减压下蒸馏至80L。将混合物用MTBE (8 kg)稀释，且在减压下蒸馏至60-80L。将混 合物用MTBE (8 kg)稀释，且在氮气下冷却至5-10°C。将混合物用正庚烷(21 kg)处理，且搅 拌约一小时。将固体产物通过过滤(离心机)收集，用正庚烷(5 kg)洗涤，且在50-60 °C在真 空下干燥，以得到作为固体的第二批标题产物(3.65 kg)。

[0410] 总共 7.95kg，36% 理论值

[0411] HPLC第1批RT = 9.33 min, 97.6%,

[0412] HPLC 第2批RT = 9.27 min, 99.1%,

[0413] 柱：150 mm X 4.6 mm ID, 3.5 ym Agilent Zorbax SB-C8

[0414] 流速：1 •0 mL/min.

[0415] 温度:40°C

[0416] 检测波长：210 nm

[0417] 溶剂:A:三氟乙酸于水中的0.05% v/v溶液

[0418] B:三氟乙酸于乙腈中的0.05% v/v溶液

[0420] 组合的手性HPLC RT = 28.95 min, 98.8%，

[0421] 柱：250 mm X 4.6 mm ID, Chiralpak IC

[0422] 流速：1 •0 mL/min。

[0423] 温度:30°C

[0424] 检测波长：218 nm

[0425] 溶剂:A:异丁胺于正庚烷中的0.1% v/v溶液

[0426] B:异丁胺于乙醇中的0• 1% v/v溶液。

[0428] 中间体51.(幻-4-乙酰氧基丁-2-烯酸甲酯阶段10

[0429]向反应器装入乙腈（140 kg)、乙酸钾（10 kg)、（五)_4_溴丁-2-烯酸甲酯（18 kg， 1 wt)和乙腈（3 kg)。将混合物在45-55 °C搅拌约12.5小时，且冷却至20-30 °C。将混合物过 滤，且将滤饼用乙酸乙酯（14 kg)洗涤。将滤液在减压下浓缩至2-3个体积，且用乙酸乙酯 (90 kg)稀释。将溶液用水洗涤4次(2x91 kg，2x92 kg)，且用11%氯化钠水溶液(99 kg)洗 涤。将有机相在减压下浓缩至1-2个体积，且添加DCM (80 kg)。将有机相在减压下浓缩至1-2个体积，且添加DCM (80 kg)。将有机相在减压下浓缩至1-2个体积，以得到标题化合物于 DCM中的溶液(14• 8 kg，53 • 4%测定，78%理论值）。

[0430] HPLC RT = 10.37 min, 83.9%,

[0431] 柱：150mm X 4.6mmID， 3.5um Agilent Zorbax SB-C8

[0432] 流速：1 •0 mL/min.

[0433] 温度：4(TC

[0434] 检测波长：210 nm

[0435] 溶剂:A:三氟乙酸于水中的0.05% v/v溶液

[0436] B:三氟乙酸于乙腈中的0.05% v/v溶液。

[0438] 中间体47. U，五)-4-(3-(2-(1，8_萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基）丁-2-烯酸甲 酯•步骤4&5

[0439] 通过在-10至0 °C将HC1气体鼓泡至甲醇（40 kg)中而制备HC1于MeOH中的溶液，直 到达到4.6mol/L的浓度。向该溶液中添加中间体2 (8 kg，lwt)于MeOH (24 kg)中的溶液， 且在氮气下加热至35-45°C，持续约4.5小时。将反应物在减压下蒸馏至2-3个体积。添加 MeOH (21 kg)，且将混合物在减压下浓缩至2-3个体积。添加MeOH (24 kg)，且将混合物在 减压下浓缩至2-3个体积。添加DCM (64 kg)，且将混合物在减压下浓缩至2-3个体积。添加 DCM (64 kg)，且将混合物在减压下浓缩至2-3个体积。添加DCM (64 kg)，且将混合物调节 至10-20°C，且在保持温度<30°C的情况下用#，，二异丙基乙胺（20 kg)逐滴处理，以得到 (7?)-2-(2-(吡咯烷-3-基）乙基)-1，8_萘啶，二盐酸盐（中间体3)的溶液。向另一个反应器 中装入DCM(61 kg)、(五)-4_乙酰氧基丁-2-烯酸甲酯（中间体51) (DCM中的53%w/w溶液，8.8 kg，4.7kg活性剂)和1，1'_[双(二苯基膦基)二茂铁]钯（II)氯化物（2.1 kg)，且反应器顶 部空间用氮气清洗，且在20_30°C搅拌30分钟。向该混合物添加上面制备的(7?)-2-(2-(吡咯 烷-3-基）乙基)-1，8-萘啶，二盐酸盐（中间体3)的溶液，且将混合物在20-30 °C搅拌约22小 时。将反应混合物用水(85 kg)处理，且过滤通过娃藻土(6 kg;用DCM (22 kg)预润湿），用 DCM(19 kg)洗涤。将有机相用水(80 kg)洗涤，冷却至5-10°C，且用0.5N HC1 (204 kg)酸 化。将水层用DCM (60 kg)洗涤，用DCM (123 kg)稀释，且用IN NaOH溶液(78 kg)中和。水层 用DCM (59 kg)萃取。将合并的DCM相用25%NaCl溶液(46 kg)洗涤，且在减压下浓缩至1-2 个体积。添加甲苯(34 kg)，且在减压下将混合物浓缩至35-45L，以得到标题化合物的溶液 (42.15 kg，13.4%测定，76%产率）。此处没有实施分析，因为物质是不稳定的，所以其直接 用于下一步骤。

[0440] 中间体9 (3_(3.5_二甲基-1H-吡唑-1-基)苯基)硼酸.阶段11&12

[0441] 向反应器中装入3-溴苯基肼盐酸盐(6 kg)、乙酰基丙酮(4031.7 g)和冰醋酸（18 L)，且将混合物加热至90-100 °C且搅拌3-4小时。将反应混合物浓缩成油状物，用水(20L)稀 释，用5.5M NaOH水溶液（10 L)调节至pH~7，且用MTBE (20 L)萃取。将MTBE层用水（15 L)和 盐水（10 L)洗涤，且浓缩以得到油状物。向油状物中添加硼酸异丙酯(B(0iPr)3 )(6058.6 g)和THF(40 L)，且将混合物冷却至-75至-60°C。在-70至-60°C逐滴添加n-BuLi (2.5M, 12.9 L)，且搅拌过夜。将反应物温热至-10至0°C，添加水(添加24L)，随后添加浓盐酸(4L)， 且将混合物搅拌10分钟，且分离。将水相用IN NaOH溶液调节至pH5-6,且用EtOAc (2x10 L) 萃取。将合并的有机物用NaHC03溶液和盐水洗涤，且浓缩，以得到油状物。将该油状物用庚 烷(20L)稀释，冷却至0-10°C，以得到白色固体，所述白色固体通过过滤分离，以得到标题化 合物(4530g，71%理论值）。

[0442] HPLC RT = 6.53 min, 98.7%,

[0443] 柱：150 mm X 4.6 mm ID, 3.5 ym Agilent Zorbax Bonus RP

[0444] 流速:1 •0 mL/min.

[0445] 温度:40°C

[0446] 检测波长：220 nm

[0447] 溶剂:A:三氟乙酸于水中的0.05% v/v溶液

[0448] B:三氟乙酸于乙腈中的0.05% v/v溶液。

[0450] 中间体 48.4-((7?)-3-(2-(1,8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基)-3-(3-(3,5-二甲 基-if吡唑-i-基)苯基)丁酸甲酯.阶段6.

[0451] 向反应器中装入甲苯(25 kg)、（7?，五)-4-(3-(2-(1，8_萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁-2-烯酸甲酯（中间体47/甲苯(42.15 1^，13.4%测定，5.6 1^(1的)活性剂）、17°/^/^ K0H水溶液（10 kg)、（ 3-(3，5-二甲基-1"-吡唑-1 -基）苯基）硼酸（中间体9) (8.4 kg)、氯-(1，5_环辛二烯）铑（I)二聚体(0.433 kg)和(7?)-( + )-2,2'_双（二苯基膦基联萘 (1.3 kg)。将反应器用氮气吹扫，加热至75-85°C，且在氮气下搅拌约5小时。将混合物在减 压下蒸馏至1_3个体积，且冷却至20_30°C。将混合物用DCM (166 kg)和水(57 kg)处理，搅 拌且弃去水相。将有机相用0.5N HC1水溶液（141 kg)酸化，分离，且用DCM (45和43 kg)洗 涤水相两次。将乙酸乙酯（57 kg)添加至水相中，且用IN NaOH水溶液(56 kg)中和至pH7-8。 收集有机层，且将水层用乙酸乙酯（2x28 kg)萃取两次。将合并的EtOAc萃取液用25% NaCl 水溶液(32 kg)洗涤，且在减压下蒸馏至1-2个体积。将混合物用MeOH (25 kg)稀释，且在减 压下蒸馏至1-2个体积。将残余物用MeOH (29 kg)稀释，以得到标题化合物于MeOH中的溶液 (~9: ldr, 49.4 kg, 9.0%测定，51%产率）。

[0452] HPLC RT = 11.68 min, 90.9%,

[0453] 柱：150 mm X 4.6 mm ID, 3.5 ym Agilent Zorbax SB-C8

[0454] 流速:1.0 mL/min.

[0455] 温度:4(TC

[0456] 检测波长:210 nm

[0457] 溶剂:A:三氟乙酸于水中的0.05% v/v溶液

[0458] B:三氟乙酸于乙腈中的0.05% v/v溶液

[0460] 手性HPLC RT = 10.27 min, 90.0%，

[0461] 柱：250 mm X 4.6 mm ID, 5 mi CHIRALPAK AD-H

[0462] 流速：1 •0 mL/min.

[0463] 温度:4(TC

[0464] 检测波长：248 nm

[0465] 溶剂:A:二乙胺于正己烷中的0.1% v/v溶液

[0466] B:二乙胺于乙醇中的0.1% v/v溶液。

[0468] 中间体49. 3-(3-(3,5_二甲基-If吡唑-1-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8-四 氢-1,8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸甲酯.阶段7

[0469] 向氢化容器中添加萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)-3-(3_(3， 5-二甲基-1//-P比唑-1-基）苯基）丁酸甲酯（中间体48)于MeOH(49.4 kg, 9.0%测定，4.4kg (lwt)活性剂）中的溶液和Rh/C( 1.1 kg)，且容器用氮气吹扫。将反应物置于氢气气氛 (0.3MPa)下，且在35-45°C搅拌约26小时。用氮气替换反应气氛，且冷却至20-30°C。将反应 混合物过滤，且将固体残余物用MeOH (3x13 kg)洗涤。将合并的滤液在减压下浓缩至100-200L，过滤，用MeOH (20 kg)洗涤，且进一步浓缩，以得到标题化合物于甲醇中的溶液(27.2 kg)〇

[0470] HPLC RT = 23.63 min, 85.4%,

[0471] 柱：150 mm X 4.6 mm ID, 2.5 mi Waters XSELECT HSS C18

[0472] 流速:0• 6 mL/min.

[0473] 温度：4(TC

[0474] 检测波长：245 nm

[0475] 溶剂:A:三氟乙酸于水中的0.2% v/v溶液

[0476] B:三氟乙酸于乙腈中的0.2% v/v溶液。

[0478] 中间体 50.3-(3-(3,5-二甲基-1"-吡唑-1-基）苯基）-4-(U)-3-(2-(5,6,7,8-四 氢-1,8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸.阶段8

[0479] 将阶段 7 中获得的 3-(3_(3,5_ 二甲基-1"-吡唑-1-基)苯基)-4-((7?)-3-(2_(5,6， 7，8-四氢-1，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸甲酯（中间体50)于甲醇(27 • 2 kg，4 • 4 kg (1 wt)活性剂）中的溶液在减压下蒸馏至1-2个体积，且用MeOH (26 kg)稀释。向该溶液中 添加二氧化硅硫醇(0.5 kg)，且将混合物的pH用HCl/MeOH (3.5M，8 kg)调节至~1。将混合 物在60-70°C搅拌10小时，冷却至20-30°C且过滤。将滤饼用甲醇(4 kg，然后2x5 kg)洗涤。 将滤液浓缩至6-8个体积，用MeOH (4 kg)稀释，且装入二氧化硅硫醇（0.5 kg)。用HC1/ MeOH (3.5M，2 kg)将pH调节至~1之后，将溶液在60-70°C搅拌10小时。将混合物冷却至20-30°C，过滤，且将滤饼用甲醇(5 kg，然后2X4 kg)洗涤，且将滤液在<45°C在减压下浓缩至 ~6-8个体积。将残余物用MeOH (13 kg)稀释，且在彡45°C在减压下进一步浓缩至1-2个体 积。将残余物用MeOH (13 kg)稀释，且添加2M NaOH水溶液(22 kg)，以得到pH>14的混合物， 将其在30-40°C搅拌11小时，然后用MeOH (4 kg)稀释，且在<45°C在减压下浓缩至4-5个体 积。将pH用HC1 (3M水溶液，6 kg)调节至8-9,且将混合物用DCM(20 kg)处理，且将水相的 pH通过添加NaOH (2M水溶液，5.7 kg)调节至pH 8-9。将水相用DCM (2x30 kg，31 kg，30 kg)萃取四次。将合并的有机相用水（10 kg)和HC1(3M水溶液，6 kg)的混合物洗涤，且将水 相用DCM (30 kg，31 kg)萃取两次。将合并的有机相在彡40°C在减压下浓缩至1-2个体积， 且用DCM (10 kg)稀释，以得到标题化合物于DCM中的溶液（16.8 kg，22.4%测定，87%理论 值，经两个步骤）。

[0480] HPLC RT = 20.69 min, 87.8%,

[0481] 柱：150 mm X 4.6 mm ID, 2.5 mi Waters XSELECT HSS C18

[0482] 流速：0.6 mL/min

[0483] 温度:4(TC

[0484] 检测波长：245 nm

[0485] 溶剂:A:三氟乙酸于水中的0.2% v/v溶液

[0486] B:三氟乙酸于乙腈中的0.2% v/v溶液。

[0488] 手性分离

[0489] 将从阶段8制备的DCM中的3-(3-(3,5_二甲基-1"-吡唑-卜基）苯基）-4-((7?)-3_ (2-( 5，6，7，8-四氢-1，8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基)丁酸（中间体50)溶液在减压下浓 缩，且添加MeOH以制备100 mg/mL溶液，将其过滤。将溶液应用于超临界流体层析(SFC)上用 于手性分离。SFC分离参数如下：

[0490]将含有期望异构体的级分在30°C在减压下浓缩，以得到作为MeOH/二乙胺中的溶 液的（幻-3_(3-(3,5-二甲基-1"-吡唑-1-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7,8_ 四氢-1,8-萘 啶-2-基）乙基)吡咯烷-1_基)丁酸(实施例1)(12.2 1^，22.9%测定，74%理论值）。[0491 ]实施例9.(幻-3-(3-(3,5_二甲基-If吡唑-1-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5,6,7, 8_四氢-1,8-萘啶-2-基)乙基)吡咯烷-1-基)丁酸，盐酸盐.阶段9.

[0492]将（幻-3-(3-(3,5_ 二甲基-1"-吡唑-1-基）苯基）-4-(U)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-l，8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基）丁酸（实施例l)于甲醇中的溶液（12.1kg，22.9%测 定，2.8 kg(lwt)活性剂）用DCM(3 kg)稀释，且在<35°C在减压下浓缩至1-3个体积。将所 得溶液用DCM (36 kg)稀释，且用33%氯化铵水溶液洗涤两次（14 kg x 2)，直至剩余二乙 胺为〈0.5%。将有机相用DCM (4 kg)稀释，经无水Na2S〇4 (2.8 kg)干燥，过滤，且用DCM (5 kg x 3)洗涤滤饼。将合并的滤液在<55°C在减压下浓缩至1-3个体积。装入乙腈(6 kg)，且 将混合物在<45°C在减压下蒸馏至1-3个体积，以去除残余甲醇。将残余物用乙腈(20 kg) 稀释，且然后装入HC1水溶液(3M，1.9 kg)。在35 °C搅拌40分钟之后，将混合物通过筒式过 滤器过滤至结晶容器中，用MeCN (3 kg)洗涤。将溶液在彡45°C在减压下蒸馏至~4个体积， 以得到标题化合物于乙腈中的溶液。添加四个部分的乙腈(8 kg x 2，14 kg, 19 kg)，且 在<45°C在减压下蒸馏至3-5个体积，以去除残余水。装入乙腈（17 kg)以稀释粗产物，将所 得溶液在50-55°C在氮气保护下搅拌16小时。将批料经5小时冷却至0-5°C，且在0-5°C在氮 气下搅拌~4小时。将批料加热至50-55°C，且在50-55°C在氮气下搅拌~4小时。将批料经6小 时冷却至-10- -8°C，且在-10- _8°C在氮气下搅拌~23小时。通过XRH)和DSC证实形式之后， 过滤悬浮液，且将滤饼在氮气下用乙腈(6 kg)洗涤。将湿固体在20-35 °C在减压下干燥20小 时，然后将温度增加至45-55°C，持续额外50小时。材料过筛之后，将其在45-55°C干燥额外 20小时，以得到标题化合物（1.966 kg，66%理论值）。

[0495] HPLC RT = 20.56 min, 99.4%,

[0496] 柱：150 mm X 4.6 mm ID, 2.5 mi Waters XSELECT HSS C18

[0497] 流速:0.6 mL/min.

[0498] 温度:40°C

[0499] 检测波长：245 nm

[0500] 溶剂:A:三氟乙酸于水中的0.2% v/v溶液[0501 ] B:三氟乙酸于乙腈中的0.2% v/v溶液

[0503] 手性HPLC RT = 34.8 min, 100% a/a,

[0504] 柱：250 mm X 4.6 mm ID, 5 mi CHIRALPAK AS-H

[0505] 流速：1 •0 mL/min.

[0506]温度：4(TC [0507] 检测波长：319 nm

[0508] 溶剂:A:三乙胺于正庚烷中的0.2% v/v溶液

[0509] B:三乙胺于乙醇中的0.2% v/v溶液。

[0511] 实施例1的绝对构型的测定

[0512] 实施例1及其非对映异构体的还原

[0513] 中间体 33:异构体 1.3-(3-(3,5_ 二甲基-If 吡唑-1-基)苯基)-4-((7?)-3-(2-(5, 6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁-1-醇

[0514] 将 3-(3-(3,5_二甲基-1"-吡唑-1-基)苯基)-4-(U)-3-(2-(5,6,7,8-四氢-l，8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基）丁酸盐酸盐（实施例8，其为实施例l的盐酸盐）（238mg， 0.454 mmol)于THF(5 mL)中的悬浮液在20°C用乙醚中的LiAlH4溶液（1M，1.5 mL)处理，且 将混合物在氮气下搅拌1.5小时。LCMS表明反应完成。通过添加2M NaOH溶液(0.8 mL)和乙 酸乙酯淬灭反应。分配混合物，且将有机溶液用NaHC03溶液、盐水洗涤，干燥(MgS0 4)且在减 压下蒸发。将残余物溶解于1:1 MeOH-DMSO (2 mL)中，且通过MDAP(方法A)纯化，收集RT= 6.6-9.4 min的级分。在减压下去除溶剂，以得到作为无色油状物的标题化合物（157 mg， 73%)。

[0516]中间体 34.4-((7?)-3-(2-(1，8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基)-3-(3-(3,5-二甲 基-i炉吡唑4-基)苯基)丁-i-醇

[0517]将 4-((7?)-3-(2-(1，8-萘啶-2-基）乙基）吡略烧-卜基）-3-(3-(3,5-二甲基-1"-吡 唑-1-基）苯基）丁酸叔丁酯（中间体13，异构体2)(155 mg, 0.287 mmol)于2-Me-THF(3 mL)中的溶液在冰中冷却至5°C，然后用THF中的氢化铝锂溶液（1M，1.5 mL)小心处理。将混 合物在氮气下搅拌2小时，LCMS表明完成。通过添加2M NaOH溶液(0.3 mL)淬灭反应，且将混 合物搅拌〇 . 5小时。添加乙酸乙酯和固体硫酸钠，且将混合物搅拌5分钟，过滤，用乙酸乙酯 洗涤固体，且在减压下蒸发。将残余物溶解于DMSO-MeOH (1:1，2 mL)中，且通过MDAP(方法 A)纯化，收集RT=5.09 min的级分。在减压下蒸发溶剂，将残余物溶解于MeOH中，且在减压下 再次蒸发，以得到两种不纯级分。合并两种级分(31 mg)，且通过MDAP 25 min rum (高pH) 再次纯化，收集RT=6.41 min，m/z 470的级分，在减压下蒸发以得到作为无色油状物的标 题化合物（16.4 11^，12%):1^^3(方法厶）1^=0.94 111111，91%，£5+¥6聲么 470 (]\«1)+; [a]D20 = - 14 (c=1.64，CHC13中）。

[0518] 中间体33异构体 2.3-(3-(3,5_二甲基-1"-吡唑-1-基)苯基)-4-(U)-3-(2-(5, 6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁-1-醇

[0519] 将4-((7?)-3-(2-(1，8-萘啶-2-基）乙基）吡略烧-卜基）-3-(3-(3,5-二甲基-1炉吡 P坐-1-基)苯基)丁-1-醇（中间体34)(8 mg, 0.02 mmol)于乙醇（5 mL)中的溶液经5% Rh/C 湿催化剂(5 mg)氢化2.5天。将反应混合物过滤通过硅藻土，且用乙醇洗涤催化剂。将滤液 和洗涤液在减压下蒸发，以得到作为无色油状物的标题化合物(7 mg，87%)。

[0521] 中间体39异构体1和异构体2的制备

[0522] 中间体35.2-(3-(3,5_二甲基-If吡唑-1-基)苯基）乙酸叔丁酯

[0524] 将(3-(3,5_ 二甲基-1"-吡唑-1-基)苯基)硼酸（中间体 9)(10.8 g，50 mmol)、2-溴乙酸叔丁酯（14.6 g, 75 mmol)、三-〇-甲苯基勝（1.5 g, 4.93 mmol)、Pd(0Ac)2(700 mg, 3.12 mmol)、粉末状三磷酸钾(42.5 g, 200 mmol)和四氢咲喃（100 mL)的混合物在氮 气/真空循环下脱气，且在回流下加热16小时。LCMS分析显示~70%转化率。进一步添加乙酸 钯(300 mg)和2-溴乙酸叔丁酯（3 g)，且将混合物回流6小时。LCMS显示没有起始原料和产 物的存在。将混合物在水(200 mL)和Et0Ac(2 X 200 mL)之间分配，且干燥(MgSCk)。蒸发 有机相，且通过在硅胶筒(330 g)上的层析纯化残余物，用0-40%乙酸乙酯-环己烷（15CV) 洗脱，以得到作为黄色油状物的标题化合物（10.4 g，72%):LCMS (方法C) RT=1.18 min, ES+ve m/z 287 (M+H)+〇

[0525] 中间体36.2-(3_(3,5-二甲基-If吡唑-1-基)苯基）乙酸酯

[0527] 将2-(3-(3,5_二甲基-1"-吡唑-1-基）苯基）乙酸叔丁酯（中间体35)(10 g，28 mmol)于二氯甲烷（10 mL)中的溶液用TFA (20 mL，260 mmol)缓慢处理，且在室温搅拌2小 时。LCMS分析显示反应完成。在减压下蒸发溶液，且将残余物溶解于2N NaOH (100 mL)中， 且用二乙醚(2 x 100 mL)洗涤。将水相用2N HC1酸化，且冷却的悬浮液用EtOAc (2 x 150 mL)萃取。将有机溶液干燥(MgS04)，并且蒸发。将残余物卜7 g)用二乙醚(40 mL)研磨，且通 过过滤收集，以得到作为米色固体的标题化合物(5.2 g，81%):

[0530] 中间体37.2-(3-(3,5_二甲基-If吡唑-1-基)苯基）乙酸甲酯

[0532]将2-(3-(3,5_二甲基-1"-吡唑-1-基）苯基）乙酸（中间体36)(460 mg, 2 mmol)的 溶液溶解于MeOH (70 mL)中，用环戊基甲基醚(3M，10 mL)中的盐酸溶液处理，且将混合物 加热至回流持续2小时。将混合物在减压下浓缩，并且将残余物在乙酸乙酯和碳酸氢钠之间 分配。将有机相用盐水洗涤，经MgS0 4干燥且在减压下蒸发。将残余物通过硅胶筒（20 g)上 的层析纯化，经20分钟用0-25 %乙酸乙酯-环己烷的梯度洗脱。合并含有主要组分的适当 的级分，且蒸发以得到作为无色油状物的标题化合物(251 mg，51%)。

[0534] 中间体38.4-叔丁基1-甲基2-(3_(3,5-二甲基-If吡唑-1-基)苯基)琥珀酸酯

[0536] 将六甲基二硅氮烷锂于THF(1M，1.85 mL)中的溶液冷却至-78°C，且用2-(3-(3， 5-二甲基-1炉吡唑-1-基)苯基）乙酸甲酯（中间体37)(453 mg, 1.85 mmol)于THF(2 mL)中 的溶液处理。5分钟之后，将反应混合物用2-溴乙酸叔丁酯（0.82 mL，5.6 mmol)/THF(2 mL)处理，且在-78°C30分钟之后，将混合物温热至室温。将混合物搅拌2.5小时，然后用此1 水溶液(0.2 M，10 mL)淬灭，且用乙酸乙酯萃取。将有机溶液用NaHC03水溶液、0.2M HC1、 盐水洗涤，干燥(MgS04)并且在减压下蒸发。将残余物通过50 g硅胶筒上的层析（用0-25% EtOAc-环己烷洗脱)进行纯化。合并含有主峰的级分，其在减压下蒸发，以得到无色油状物 (780 mg)，将其通过70 g硅胶筒上的层析(用0-50% TBME-环己烷洗脱)进一步纯化，以得到 作为无色油状物的标题化合物（479 mg，72%) :NMR S (CDC13) 7.43-7.33 (3H，m)， 7.29-7.25 (1H, m), 6.00 (1H, s), 4.09 (1H, dd, J 10.0, 5.5 Hz), 3.69 (3H, s), 3.13 (1H, dd, J 16.7, 10.0 Hz), 2.64 (1H, dd, J 16.7, 5.5 Hz), 2.30 (6H, s), 1.42 (9H, s)。通过Chiralcel OD-H柱（30 mm X 250 mm)上的制备手性HPLC(用5% IPA-己烷洗脱，流速=20 mL/min)解析该化合物的两种对映异构体，以得到作为无色油状物的 异构体 1 (267 mg):[a]D22 + 81 (c=1.028，CHC13 中）；Chiralcel 0J-H 柱上的分析型手性 HPLC(4.6 mm id X 250 mm) RT=7.75 min, 99.3% (含有其它对映异构体，RT=9.35 min, 0.7%)，和作为无色油状物的异构体2(23〇1^):[€^22 - 82 (0=1.016,003中）；分析型 手性HPLC RT=9.35 min, 98.6% (含有其它对映异构体，RT=7.75 min, 1.4%)。

[0537] 中间体39异构体1.4_(叔丁氧基)-2-(3-(3,5_二甲基-If吡唑-1-基)苯基)-4_ 氧代丁酸

[0539] 将4-叔丁基1-甲基2-(3_(3,5_二甲基-1"-吡唑-1-基）苯基）琥珀酸酯异构体1 (中间体38，异构体1)(257 mg，0.72 mmol)的溶液溶解于THF(2 mL)中，冷却至0°C(冰冷 却），然后添加30%过氧化氢(0.366 mL, 3.6 mmol)和水中的1M LiOH溶液（1M, 2.15 mL)。 在冰箱中静置过夜之后，将反应混合物用偏亚硫酸钠水溶液（1M, 3 mL)处理，然后用2M HC1溶液酸化至pH 1。将反应混合物用乙酸乙酯萃取三次，且将有机溶液经MgS04干燥。将溶 液在减压下蒸发，且将残余白色泡沫通过MDAP(方法C)纯化。将适当的级分在减压下蒸发， 以得到作为无色油状物的标题化合物(140 mg，57%)。[0541 ] 中间体39异构体2.4-(叔丁氧基)-2-(3-(3,5_二甲基-If吡唑-1-基)苯基)-4_ 氧代丁酸

[0543] 将4-叔丁基1-甲基2-(3-(3,5_二甲基-1"-吡唑-1-基）苯基）琥珀酸酯异构体2 (中间体38，异构体2)(220 mg, 0.61 mmol)的溶液溶解于2-Me-THF(5 mL)中，冷却至0°C (冰冷却），然后添加30%过氧化氢(0.313 mL, 3.1 mmol)和水中的0.2M LiOH溶液(0.2M, 9.21 mL，1.84 mmol) 1CMS表明反应在6天后完成。将反应混合物用硫代硫酸钠溶液（1M， 3 mL)和碳酸氢钠溶液(0.5M，8 mL)处理，且将混合物(pH 8)搅拌10分钟，然后用6M HC1溶 液酸化至pH 1。将反应混合物用乙酸乙酯萃取三次，且将有机溶液经MgS04干燥。在减压下 蒸发得到白色固体，将所述白色固体通过MDAP(方法C)纯化。在减压下蒸发适当的级分得到 作为无色油状物的标题化合物（105 mg，50%):

[0546] 作为(幻的中间体39异构体1的绝对构型的测定(埃文斯方法）

[0547] 中间体40.(幻-(+ )-4_苄基-3-(2-(3-(3,5-二甲基-1"-吡唑-1_基）苯基）乙酰 基)噁唑烷-2-酮

[0549] 将2-(3-(3,5_二甲基-1 炉吡唑-1-基)苯基）乙酸（中间体36)(2.3 g, 9.99 mmol) 溶解于THF(70 mL)中，且用DIPEA (2.268 mL，12.99 mmol)处理。经由注射器在氮气下向 搅拌的溶液添加新戊酰氯（1.229 mL，9.99 mmol)。将混合物在0°C搅拌45分钟，然后再冷 却至-78 °C，其得到白色浆料。

[0550] 同时，在独立烧瓶中，将（幻-4_苄基噁唑烷-2-酮（3.19 g，17.98 mmol)溶解于 THF(50 mL)中，且冷却至-78°C，同时搅拌。向该溶液添加n-BuLi 1.6M/己烷（11.24 mL， 17.98 mmol)，且将该混合物在-78°C搅拌0.5小时。使用套管将金属化的噁唑烷酮添加至混 合酸酐。将所得浆料在_78°C搅拌1小时，然后经周末使其温热至室温。将反应混合物用饱和 氯化铵水溶液(40mL)淬灭，用水（10mL)稀释，且用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，干 燥(MgS0 4)，过滤且在真空中浓缩。将残余油状物溶解于DCM中，且通过100g硅胶筒上的层析 纯化，经40分钟用0-50%乙酸乙酯/环己烷的梯度洗脱。合并含有主要组分的级分，且在真 空中浓缩，以得到作为无色油状物的标题化合物(2.1 g，54%):

[0553] 中间体41(幻-4-((幻-4_苄基-2-氧代噁唑烷-3-基）-3-(3-(3,5_二甲基-1"-吡 唑-1-基）苯基）-4_氧代丁酸叔丁酯和中间体42.(7?)-4-((幻-4-苄基-2-氧代噁唑烷-3-基)-3-(3-(3,5_二甲基-If吡唑-1-基)苯基)-4_氧代丁酸叔丁酯

[0555] 在-78°C将六甲基二硅氮烷锂于THF(1M，5.7 mL)中的溶液添加至（幻-4_苄基-3- (2-(3-(3，5-二甲基-1"-吡唑-1-基)苯基）乙酰基)噁唑烷-2-酮（中间体40) (2.0 g，5.14 mmo 1)于THF(10 mL)中的溶液，且将混合物在-78 °C搅拌60分钟，然后添加2-溴乙酸叔丁酯 (2.3 mL，15 mmol)。将混合物在-78°C搅拌3小时，然后温热至室温，且搅拌2天，然后将其 通过添加饱和氯化铵水溶液而淬灭。将混合物用乙酸乙酯分配，分离有机相，用盐水洗涤 (两次），经MgS0 4干燥，且在减压下蒸发。通过在硅胶（100 g)筒上的层析纯化残余物，经1小 时用0-50%乙酸乙酯-环己烷洗脱，以得到作为黄色油状物的标题化合物（1.2 g，46%)，这 是两种非对映异构体的混合物:LCMS (方法C) RT=1.32 min, 11%, ES+ve 504和RT= 1.36 min, 53%, ES+ve ffi/z 504 (M+H) +。通过MDAP(方法C)进一步纯化预期产物的非对映 异构混合物的部分(200mg)，收集RT=9.56 min的主要级分，以得到作为无色油状物的（幻_ 4-((幻-4-苄基-2-氧代噁唑烷-3-基)-3- (3- (3，5-二甲基-If吡唑-1-基)苯基)-4-氧代丁 酸叔丁酯（中间体41)(69 mg):单元中在氮气流下蒸发来自MDAP纯化的RT=9.2 min的次要级分，以得到(7?)-4-((幻-4-苄 基-2-氧代噁唑烷-3-基)-3-(3-(3,5_二甲基-If吡唑-1-基)苯基)-4_氧代丁酸叔丁酯（中 间体42)(7 mg):

[0558]

[0560] 中间体39异构体1 (幻-(+ )-4-(叔丁氧基)-2-(3-(3,5_二甲基-1"-吡唑-1-基) 苯基)-4-氧代丁酸

[0562] 在4°C将（幻-4-((幻-4_苄基-2-氧代噁唑烷-3-基)-3-(3-(3,5_二甲基-1炉吡唑- 卜基)苯基)-4_氧代丁酸叔丁酯（中间体41)(69 mg, 0.14 mmol)于THF(1 mL)中的溶液用 30%过氧化氢(8.8 M, 0.078 mL, 0.68 mmol)、随后用氢氧化锂水溶液（1M, 0.411 mL)处 理，且将混合物在冰浴中搅拌2小时。将反应混合物在冰箱中静置过夜，然后通过添加偏亚 硫酸钠水溶液、随后10分钟后添加2M HC1淬灭。2小时之后，将混合物用乙酸乙酯萃取，且水 层用更多EtOAc萃取。将合并的有机溶液用盐水洗涤，干燥(MgS0 4)，且在减压下蒸发。将残 余物溶解于DMS0 (1 mL)中，且通过MDAP(方法C)纯化，收集RT=8.3-9.9 min, ff/z 345的级 分。在放空单元中在氮气流下蒸发适当的级分，以得到作为无色油状物的标题化合物（22 mg, 47%)：

[0565]中间体46和中间体33异构体1的合成且显示它们是相同的异构体

[0566]中间体 43.(tS)-( + )-4-(U)-3-(2-(l，8-萘啶-2-基）乙基）P比咯烷-1-基）-3-(3- (3,5-二甲基-lf吡唑-1-基)苯基)-4-氧代丁酸叔丁酯

[0568] 将4-叔丁基1-甲基2-(3_(3,5_二甲基-If吡唑-1-基)苯基)琥珀酸酯（中间体39 异构体l)(l〇7 mg，0.31 mmol)于DCM(1 mL)中的溶液用，[3-(二甲基氨基)丙基]乙 基碳二亚胺盐酸盐(77 mg, 0.40 羟基苯并三挫水合物(62 mg, 0.40 mmol)处 理。将反应混合物搅拌10分钟，然后添加⑷-2-(2-(啦咯烷-3-基）乙基)-1，8_萘啶（中间体 3)(100 mg, 0.44 mmol)于DCM(3 mL)和A^-Me-吗啉(0.102 mL, 0.93 mmol)中的溶液。将混 合物在室温下搅拌2小时。将混合物用水稀释，且在相分离器玻璃料中分离各相，且在减压 下蒸发有机相。将残余物通过MDAP(方法C)纯化，收集脚么554的级分。在减压下去除溶剂， 以得到作为无色油状物的标题化合物（160 mg，93%):LCMS (方法C) RT= 0.99 min, 98.5%, ES+ve 554 (M+H)+; [a]D2Q= +41 (c = 1.720，CHC13中）；分析型手性 HPLC Chiralcel OD-H (4.6 mm X 250 mm)，用含有0.1%异丙胺的 10% EtOH-庚烷洗脱，在235 nm检测，流速=1 mL/min，RT=30.4 min, 77.3%和RT=37.6 min, 22.7%〇 [0569]中间体44.(幻-3-(3-(3,5-二甲基-If吡唑-1-基)苯基)-4_氧代-4-((7?)-3-(2_ (5,6,7,8_四氢-1,8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸叔丁酯

[0571] 将（幻-4-((7?)-3-(2-(1，8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基)-3-(3-(3,5-二甲基-1//吡唑-1-基)苯基)_4_氧代丁酸叔丁酯（中间体43)(107 mg, 0.19 mmol)于乙醇(20 mL) 中的溶液经5% Rh/C (28 mg)氢化4天。添加更多催化剂(5 mg)，且将混合物再氢化一天。通 过硅藻土过滤去除催化剂且用乙醇洗涤。将合并的滤液和洗涤液在减压下浓缩，以得到标 题化合物（101 mg, 94%):LCMS (方法C) RT=0.86 min, 98%, ES+ve ff/z 558 (M+H) +。

[0572] 中间体45.(幻-(+ )-3-(3-(3,5-二甲基-If吡唑-1-基)苯基)-4_氧代-4-((7?)_ 3-(2-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁酸

[0574] 将（幻-3-(3-(3,5_二甲基-1"-吡唑-1-基)苯基)_4_氧代 _4-((7?)-3-(2-(5,6,7， 8_四氢-1，8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-卜基)丁酸叔丁酯（中间体44)(101 mg，0.18 mmol) 于CHC13(5 mL)中的溶液在室温用TFA (3 mL)处理2小时。在减压下蒸发反应混合物，将残 余物溶解于DCM中，且在减压下再次蒸发三次。将残余物(200 mg)溶解于乙腈中，且向下通 过用MeCN预调节的SCX-2筒（10 g)。将化合物用MeCN洗涤，且用2M氨/MeOH洗脱。将含氮的级 分在减压下蒸发，以得到作为白色泡沫的标题化合物（80 mg，88%):LCMS (方法A) RT= 0.82 min, 90%，ES+ve ff/z 502 (M+H) + ; [a]D2。= + 34 (c=0.88，CHC13 中）〇

[0575] 中间体46.(幻-(+ )-3-(3-(3,5-二甲基-If吡唑-1-基)苯基)-4_(U)-3-(2-(5, 6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基）乙基)吡咯烷-1-基)丁-1-醇

[0577]将（幻-3-(3-(3,5_二甲基-1"-吡唑-1-基)苯基)_4_氧代 _4-((7?)-3-(2-(5,6,7， 8_四氢-1,8-萘啶-2-基）乙基）吡咯烷-1-基)丁酸（中间体45)(65 mg，0.13 mmol)于THF(1 mL)中的溶液在室温在氮气下用THF中的硼烷-THF溶液（1M，2 mL)处理。将混合物在环境温 度搅拌过夜。在早上，添加AcOH (0.5 mL)以淬灭过量的硼烷，随后添加2M NaOH溶液（lmL) 以破坏硼烷络合物。将混合物用乙醚稀释，且用2M NaOH洗涤两次，随后盐水洗涤，干燥 (MgSCk)且在减压下蒸发。将粗产物（100 mg)溶解于THF (1 mL)中，且在20°C在氮气下用乙 醚中的LiAlH4溶液（1M，1.5 mL)处理。将混合物在20°C保持30分钟，然后加热至50°C，持续 2小时。添加更多LiAlH4溶液（1M，0.7 mL)，且将混合物加热至60°C，持续45分钟。LCMS(方 法A)，对于产物，RT=1.12 min, 58%, 474 (M+H) +，且对于酰胺，RT=1.23 min, 27%, 聲么488 (M+H) +。将温度升高至80°C，持续额外1小时，然而，反应似乎已经停止。通过添加 2M NaOH溶液（1 mL)和乙醚猝灭反应混合物。通过过滤收集白色固体，用乙醚和乙酸乙酯洗 涤。将滤液和洗涤液在减压下蒸发。残余物(58 mg)通过MDAP(方法A)纯化，以得到作为黄色 胶状物的标题化合物(30 mg，49%):

[0579] ::轉。咕NMR光谱显示密切相关的信号的~3:1混合物，与标题化合物的非 对映异构体的混合物一致。主要组分匹配中间体33异构体1，次要组分匹配中间体33异构体 2。分析型手性HPLC (4.6 X 250 mm Chiralpakl AD)，用含有0.1%异丙胺的 10% EtOH-庚 烷洗脱，流速=1 mL/min，注射 15 此，在235 nm检测，RT=22.5 min，78.9%和RT=26.9 min， 21.1%〇

[0580] 溶解度[0581 ]根据N. Bhattachar等人上 /%a_ra. Aoa_/. 2006，152-157测量化 学发光氮检测(CLND)动力学溶解度，且发现为:对于实施例1，504 yM;对于实施例2,249 y M;对于实施例3,276 yM;对于实施例4,388處;对于实施例5,470 yM;对于实施例6,437 y M;对于实施例7,349 yM。

[0582] 生物学测定

[0583] 游游W定荆用的试剂和方法如所述[Ludbrook等人，5iocAe«. X 2003，3仰， 311)，澄清以下几点。使用以下细胞系，其中方括号中为配体:K562-a5fo (纤连蛋白），1(562-av03 (LAP-bi)，K562-av05 (玻连蛋白），K562-avfo (LAP-bi)，K562-avfe (LAP-bi)。用于促进 粘附的二价阳离子为2 mM MgCl2。粘附通过用荧光染料BCECF-AM (Life Technologies)标 记细胞进行定量，其中将6xl06个细胞/mL的细胞悬浮液与0.66mL/mL的30 mM BCECF-AM在 37°C孵育10分钟，然后分配至测定板中。在测定结束时，使用50 yL/孔的0.5% Triton X-100/H20裂解粘附的细胞以释放荧光。使用Envision ®板读数器(Perkin Elmer)检测荧光 强度。对于测定中的活性拮抗剂，将数据拟合至4参数逻辑方程，用于测定IC50。

[0584] 通过荧光偏振测定人可溶性整联蛋白蛋白与含RGD的肽的结合疲说奸'_莺 表达系统从pFastBac双重构建体共表达av和说的细胞外结构域。表达的蛋白含有av的氨基 酸31-987，随后为Tev切割位点，Fos表位标签和6His标签，说的氨基酸21-707，随后为断前 (Presci ss ion)蛋白酶位点，Jun表位标签和FLAG标签。该蛋白在表达后被分泌至培养基中； 其使用以下纯化:渗滤，随后使用His标签和随后的FLAG标签纯化，然后大小排阻层析。这得 到大于95%纯的物质。化学合成基于1^^0 3的荧光结合肽，其具有序列4〇-61?1^〇1^1^1( (Cy3B)-NH2。使用25 mM HEPES pH7.4、150 mM NaCl、l mM CHAPS和400 mM MgCh的测定缓 冲液。向黑色低体积384孔板添加0.1 mL/孔的测试化合物/100% DMS0,随后添加3 mL/孔的 10 nM c〇36蛋白。将板在室温孵育15分钟，然后添加3 mL/孔的4nM荧光含RGD的肽。将板在室 温孵育60分钟，且使用Envision®板读数器(Perkin Elmer)用531 nm的激发和590 nm测量 的发射检测荧光偏振。对于测定中的活性拮抗剂，将数据拟合至4参数逻辑方程，用于测定 1〇50〇

[0585] 实施例1在荧光偏振测定中对于人av06蛋白的亲和力(pIC5Q)为8.1，而其在细胞粘 附测定中的亲和力为： av06 pICso = 8.4;av03 pICso = 6;av05 pICso = 6.9;av08 pICso = 7.7。

[0586] 实施例2在荧光偏振测定中对于人av06蛋白的亲和力(pIC5Q)为7.8,而其在细胞粘 附测定中的亲和力为： av06 pICso = 8.4;av03 pICso = 6;av05 pICso = 6.8;av08 pICso = 7.7。

[0587] 实施例3在荧光偏振测定中对于人av06蛋白的亲和力(pIC5Q)为8.2,而其在细胞粘 附测定中的亲和力为： av06 pICso = 8.2;av03 pICso = 6;av05 pICso = 6.9;av08 pICso = 7.7。

[0588] 实施例4在荧光偏振测定中对于人av06蛋白的亲和力(pIC5Q)为8.2,而其在细胞粘 附测定中的亲和力为： av06 pICso = 8.6;avfe pICso = 6.9;av05 pICso = 7.5;av08 pICso = 7.8。

[0589] 实施例5在荧光偏振测定中对于人av06蛋白的亲和力(pIC5〇)为7.8,而其在细胞粘 附测定中的亲和力为： av06 pIC5〇 = 8.1;avfe pIC5〇 = 6.1;av05 pIC5〇 = 6.6;av08 pIC5〇 = 7.4。

[0590] 实施例6在荧光偏振测定中对于人av06蛋白的亲和力(pIC5Q)为7.7,而其在细胞粘 附测定中的亲和力为： av06 pIC5〇 = 8.1;avfe pIC5〇 = 5.8;av05 pIC5〇 = 6.6;av08 pIC5〇 = 7.3。

[0591]实施例7在荧光偏振测定中对于人av06蛋白的亲和力(pIC5Q)为7.8,而其在细胞粘 附测定中的亲和力为：av06 pICso = 8.4;avfe pICso = 6.7;av05 pICso = 7.4;av08 pICso = 7.3。