一种依折麦布中残留溶剂的检测方法

摘要

一种依折麦布中残留溶剂的检测方法，属于分析化学技术领域，采用气相色谱法，检测过程如下：（1）对照品溶液的准备：取异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸各适量，精密称定，加二甲基亚砜溶解并稀释制成每1mL中分别含异丙醇0.5mg，二氯甲烷0.06mg，正己烷0.029mg，乙酸乙酯0.5mg，醋酸0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液；（2）供试品溶液的准备：取依折麦布样品1.0g，精密称定，置10mL量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；（3）测定：精密量取供试品溶液与对照品溶液各1μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算含量，各峰间的分离度均应符合要求。

权利要求

1.一种依折麦布中残留溶剂的检测方法，其特征在于，采用气相色谱法，检测过程如下：（1）对照品溶液的准备：取异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸各适量，精密称定，加二甲基亚砜溶解并稀释制成每1mL中分别含异丙醇0.50mg，二氯甲烷0.06mg，正己烷

0.029mg，乙酸乙酯0.50mg，醋酸0.50mg的混合溶液，作为对照品溶液；

（2）供试品溶液的准备：取依折麦布样品1.0g，精密称定，置10mL容量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

（3）测定：精密量取供试品溶液与对照品溶液各1μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算含量，色谱条件为：色谱柱：5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷为固定相、30m×

0.53mm×2.65μm HP-5毛细管柱；柱温为程序升温：起始温度45℃，维持5分钟，然后以每分钟10℃的速率升温至100℃，再以每分钟50℃的速率升温至230℃，维持5分钟；进样口温度

230℃；氢火焰离子化检测器，检测器温度250℃，进样方式为直接进样，载气为N2，载气流速为4.0mL/min。

说明书

一种依折麦布中残留溶剂的检测方法

技术领域

[0001] 本发明属于分析化学领域，特别是涉及一种依折麦布中残留溶剂的检测方法。

背景技术

[0002] 药品中的残留溶剂是指在原料药、制剂生产中所使用却没有完全除去的有机溶剂。有机溶剂的残留量如果超过安全值，则会对患者人体造成一定的影响，因此药品残留溶剂都有严格的限制。人用药物注册技术要求国际协调会的指导原则中，将药品生产中常用的溶剂按照危害程度分为4类，并且规定了每种溶剂的限值。根据中国药典2010年版二部附录Ⅷ P残留溶剂测定法中规定的残留溶剂含量要求及依折麦布的合成工艺，必须控制依折麦布在合成工艺中用到的有机溶剂异丙醇（第三类溶剂），二氯甲烷（第二类溶剂），正己烷（第二类溶剂），乙酸乙酯（第三类溶剂），醋酸（第三类溶剂）的残留量，限度分别为：异丙醇、乙酸乙酯、醋酸的限度均为0.5%，二氯甲烷的限度为0.06%，正己烷的限度为0.029%。

发明内容

[0003] 本发明所要解决的技术问题是，提供一种依折麦布中残留溶剂的检测方法，利用气相色谱法同时检测出依折麦布原料药中的异丙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯和醋酸5中有机溶剂残留量。

[0004] 所述气相色谱法测定过程如下：

[0005] 1）对照品溶液的准备：取异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸各适量，精密称定，加二甲基亚砜溶解并稀释制成每1mL中分别含异丙醇0.5mg，二氯甲烷0.06mg，正己烷0.029mg，乙酸乙酯0.5mg，醋酸0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液；

[0006] 2）供试品溶液的准备：取依折麦布样品1.0g，精密称定，置10mL量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

[0007] 3）测定：精密量取对照品溶液1μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，各峰间的分离度均应符合要求。精密量取供试品溶液与对照品溶液各1μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算；

[0008] 计算公式：含量（%）=  ×100%

[0009] 其中：C对：异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸对照品溶液浓度，mg/mL ；

[0010] C样：供试品溶液浓度，mg/mL；

[0011] A对：异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸对照品溶液主峰面积；

[0012] A样：供试品溶液中异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸的峰面积；

[0013] 其中，色谱条件为： 色谱柱：5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷为固定相、30m×0.53mm×2.65μm HP-5毛细管柱；柱温为程序升温：起始温度45℃，维持5分钟，然后以每分钟10℃的速率升温至100℃，再以每分钟50℃的速率升温至230℃，维持5分钟；进样口温度
230℃；氢火焰离子化检测器，检测器温度250℃，进样方式为直接进样，载气为N2，载气流速为4.0mL/min。

[0014] 本发明的主要特点是：通过色谱条件的优选，建立了依折麦布中残留物异丙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯和醋酸的检测方法，试验证明所建立的方法专属性好、检测限低，线性关系、重现性和准确度好。

附图说明

[0015] 图1：异丙醇峰定位试验气相色谱图（1.异丙醇；2.二甲基亚砜）；

[0016] 图2：二氯甲烷峰定位试验气相色谱图（1.二氯甲烷；2.二甲基亚砜）；

[0017] 图3：正己烷峰定位试验气相色谱图（1.正己烷；2.二甲基亚砜）；

[0018] 图4：乙酸乙酯峰定位试验气相色谱图（1.乙酸乙酯；2.二甲基亚砜）；

[0019] 图5：醋酸峰定位试验气相色谱图（1.醋酸；2.二甲基亚砜）；

[0020] 图6：混合对照品溶液的峰定位试验气相色谱图（1.异丙醇；2.二氯甲烷；3.正己烷；4.乙酸乙酯；5.醋酸；6.二甲基亚砜）。

具体实施方式

[0021] 仪器：日本岛津气相色谱仪（型号：GC-2014C、工作站：Shimadzu）、Agilent HP-5(30m×0.530mm，膜厚2.65μm)毛细管色谱柱（或极性相近的色谱柱），试剂均为色谱纯。

[0022] 实施例1

[0023] 一种依折麦布中残留溶剂的检测方法，利用气相色谱法同时检测出依折麦布原料药中的异丙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯和醋酸5中有机溶剂残留量，

[0024] 所述气相色谱法测定过程如下：

[0025] 4）对照品溶液的准备：取异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸各适量，精密称定，加二甲基亚砜溶解并稀释制成每1mL中分别含异丙醇0.5mg，二氯甲烷0.06mg，正己烷0.029mg，乙酸乙酯0.5mg，醋酸0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液；

[0026] 5）供试品溶液的准备：取依折麦布样品1.0g，精密称定，置10mL量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

[0027] 6）测定：精密量取对照品溶液1μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，各峰间的分离度均应符合要求。精密量取供试品溶液与对照品溶液各1μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算；

[0028] 其中，色谱条件为：5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱为色谱柱；起始温度45℃，维持5分钟；然后以每分钟10℃的速率升温至100℃；再以每分钟50℃的速率升温至230℃，维持5分钟；进样口温度230℃；检测器温度250℃，精密量取对照品溶液1μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，各峰间的分离度均应符合要求。精密量取供试品溶液与对照品溶液各1μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。进样方式为直接进样，载气为N2，载气流速为4.0mL/min。

[0029] 方法验证：

[0030] 1. 峰定位及系统适用性试验

[0031] 1.1峰定位试验

[0032] 空白溶液：二甲基亚砜

[0033] 精密称取异丙醇约125mg，置10mL量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释制成每1mL中约含12.5mg的溶液，作为异丙醇储备液，精密量取异丙醇储备液1mL，置25mL量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为异丙醇定位溶液；

[0034] 精密称取二氯甲烷约15mg，置10mL量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释制成每1mL中约含1.5mg的溶液，作为二氯甲烷储备液，精密量取二氯甲烷储备液1mL，置25mL量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为二氯甲烷定位溶液；

[0035] 精密称取正己烷约7.25mg，置10mL量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释制成每1mL中约含0.725mg的溶液，作为正己烷储备液，精密量取正己烷储备液1mL，置25mL量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为正己烷定位溶液；

[0036] 精密称取乙酸乙酯约125mg，置10mL量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释制成每1mL中约含12.5mg的溶液，作为乙酸乙酯储备液，精密量取甲苯储备液1mL，置25mL量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为乙酸乙酯定位溶液；

[0037] 精密称取醋酸约125mg，置10mL量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释制成每1mL中约含12.5mg的溶液，作为醋酸储备液，精密量取醋酸储备液1mL，置25mL量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为醋酸定位溶液；

[0038] 分别精密量取异丙醇储备液，二氯甲烷储备液，正己烷储备液，乙酸乙酯储备液，醋酸储备液各1mL，置同一25mL量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为混合对照品溶液；

[0039] 取本品约1.0g，精密称定，置10mL量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

[0040] 测定：精密量取空白溶液、异丙醇定位溶液，二氯甲烷定位溶液，正己烷定位溶液，乙酸乙酯定位溶液，醋酸定位溶液定位溶液、混合对照品溶液、供试品溶液各1μL直接进样进行测试（气相色谱图如1 6所示），由图可知：空白溶剂对异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸~乙酯，醋酸的检测均无干扰，各残留溶剂色谱峰与相邻色谱峰的分离度均符合要求，异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸峰面积的理论板数均大于5000，说明该方法系统适用性良好。

[0041] 1.2系统适用性试验

[0042] 取上述混合对照品溶液连续进样6针，各峰的理论塔板数均应大于5000，各峰间的分离度应大于1.5，峰面积的相对标准偏差均不得过10.0%，各峰保留时间的RSD均不得大于2.0%。

[0043] 2. 定量限

[0044] 分别取专属性项下各定位溶液适量，置于同一量瓶中，用二甲基亚砜逐步稀释，进样测试，记录色谱图，至异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸各峰的信噪比均为10:1。连续进样6针，峰面积的相对标准偏差不得过10.0%，保留时间的RSD均不得大于2.0%，测试结果如表1所示。

[0045] 表1

[0046]

[0047] 3.检测限

[0048] 取定量限溶液3mL，置10mL量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，进样测试，测试结果如表2所示。

[0049] 表2

[0050]

[0051] 4. 线性关系

[0052] 精密量取异丙醇储备液，二氯甲烷储备液，正己烷储备液，乙酸乙酯储备液，醋酸储备液各1.5mL，1.0mL，0.8mL，0.6mL，0.2mL，各置同一25mL量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，以峰面积与浓度进行线性回归分析，测试结果如表3所示。

[0053] 表3

[0054]

[0055] 5.精密度

[0056] 5.1重复性

[0057] 取异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸各适量，精密称定，加二甲基亚砜溶解并稀释制成每1mL中分别含异丙醇0.5mg，二氯甲烷0.06mg，正己烷0.029mg，乙酸乙酯0.5mg，醋酸0.5mg的混合对照品溶液，作为对照品溶液。

[0058] 取本品约1.0g，精密称定，置10ml量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；同法配制6份供试品溶液（浓度均相同）。

[0059] 测定：精密量取各溶液1μL，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，6份供试品溶液均未检出异丙醇、二氯甲烷、醋酸；正己烷含量为0.001%，RSD为0%；乙酸乙酯含量为0.005%，RSD为0%，说明重复性试验良好。

[0060] 计算公式：C%=   ×100%

[0061] 其中：C对：异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸对照品溶液浓度，mg/ml[0062] C样：供试品溶液浓度, mg/ml

[0063] A对：异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸对照品溶液主峰面积[0064] A样：供试品溶液中异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸的峰面积[0065] 5.2中间精密度

[0066] 由不同的分析员在不同的时间操作。

[0067] 取异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸各适量，精密称定，加二甲基亚砜溶解并稀释制成每1mL中分别含异丙醇0.5mg，二氯甲烷0.06mg，正己烷0.029mg，乙酸乙酯0.5mg，醋酸0.5mg的混合对照品溶液，作为对照品溶液。

[0068] 取本品约1.0g，精密称定，置10mL量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；同法配制6份供试品溶液（浓度均相同）。

[0069] 测定：精密量取各溶液1μL，分别注入气相色谱仪，记录色谱图。并将计算结果与重复性试验结果汇总对比，结论：不同分析人员用同一台仪器对本品进行测定，6份供试品溶液均未检出异丙醇、二氯甲烷、醋酸；正己烷含量为0.001%，RSD为0%；乙酸乙酯含量为0.005%，RSD为0%，说明该方法的中间精密度良好。

[0070] 计算公式：C%=   ×100%

[0071] 其中：C对：异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸对照品溶液浓度，mg/ml[0072] C样：供试品溶液浓度, mg/ml

[0073] A对：异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸对照品溶液主峰面积[0074] A样：供试品溶液中异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸的峰面积[0075] 在该试验中，12份供试品溶液均未检出异丙醇、二氯甲烷、醋酸；正己烷含量为0.001%，RSD为0%；乙酸乙酯含量为0.005%，RSD为0%，说明该方法精密度良好。

[0076] 6.准确度

[0077] 取异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸各适量，精密称定，加二甲基亚砜溶解并稀释制成每1mL中分别含异丙醇0.5mg，二氯甲烷0.06mg，正己烷0.029mg，乙酸乙酯0.5mg，醋酸0.5mg的混合对照品溶液，作为对照品溶液。

[0078] 取本品约1.0g，精密称定，置10mL量瓶中，分别加入定量限、限度（限度是和本部分对照品溶液浓度相同）和1.25倍限度浓度的溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为低、中、高三个浓度范围的供试品溶液，每个浓度分别配制3份。

[0079] 测定：精密量取各溶液1μL，分别注入气相色谱仪，记录色谱图。分别测定其实测量，与理论加入量比较，计算回收率，结果如表4所示。

[0080] 计算公式：回收率%=（测得量-原有量）/加入量×100%

[0081] 表4 准确度测试结果

[0082]

[0083] 7.耐用性

[0084] 取异丙醇，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，醋酸各适量，精密称定，加二甲基亚砜溶解并稀释制成每1mL中分别含异丙醇0.5mg，二氯甲烷0.06mg，正己烷0.029mg，乙酸乙酯0.5mg，醋酸0.5mg的混合对照品溶液，作为对照品溶液。

[0085] 取本品约1.0g，精密称定，置10mL量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

[0086] 在其它条件不变的情况下，改变进样口温度（分别为225℃和235℃）、检测器温度（分别为245℃和255℃）、不同流速（分别为3.6mL/min和4.4mL/min）、不同分流比（分别为18:1和22:1）。

[0087] 测定：精密量取供试品溶液和对照品溶液各1μL，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，结果：当色谱条件有较小的变动时，系统使用性均符合要求；异丙醇、二氯甲烷、醋酸均未检出，正己烷含量为0.001%，RSD为0%；乙酸乙酯含量为0.005%，RSD为0%，证实该检测方法耐用性良好。