一种雪上一支蒿微乳及其制作方法

摘要

本发明公开了一种雪上一支蒿微乳及其制作方法。所述微乳主要由雪上一支蒿制作而成。制成的微乳具有良好的透皮吸收特性，可提高水难溶性药物的溶解度，促进大分子药物在体内的吸收，增加其透过率；还可在角质层和真皮形成药物储库，明显缓释药物，且外观澄清透明，粒径在1～100nm，稳定性好。

权利要求

1.一种雪上一支蒿微乳，其特征在于：按重量份计算，由雪上一支蒿总碱0.5-5份、肉豆蔻酸异丙酯1-15份、聚氧乙烯35蓖麻油10-30份、无水乙醇1-20份及水40-75份制成。

2.如权利要求1所述的雪上一支蒿微乳，其特征在于：按重量份计算，由雪上一支蒿总碱1-3份、肉豆蔻酸异丙酯2-4份、聚氧乙烯35蓖麻油15-25份、无水乙醇5-15份及水60-70份制成。

3.如权利要求2所述的雪上一支蒿微乳，其特征在于：按重量份计算，由雪上一支蒿总碱2份、肉豆蔻酸异丙酯3.3份、聚氧乙烯35蓖麻油19.8份、无水乙醇9.9份及水65份制成。

4.一种如权利要求1-3任一项所述的雪上一支蒿微乳的制作方法，其特征在于：将雪上一枝蒿总碱与肉豆蔻酸异丙酯混合后，超声处理10-20min，待药物分散均匀后，再加入聚氧乙烯35蓖麻油和无水乙醇，超声处理10-20min后，搅拌，边搅拌边加水，加完水之后继续搅拌，直至溶液呈透明澄清的微乳液，即得。

5.如权利要求4所述的雪上一支蒿微乳的制作方法，其特征在于：将雪上一枝蒿总碱与肉豆蔻酸异丙酯混合后，超声处理15min，待药物分散均匀后，再加入聚氧乙烯35蓖麻油和无水乙醇，超声处理15min后，搅拌，边搅拌边加水，水加完之后继续搅拌，直至溶液呈透明澄清的微乳液，即得。

说明书

一种雪上一支蒿微乳及其制作方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种雪上一支蒿微乳及其制作方法，特别是一种载药量高、质量好的雪上一支蒿微乳及其制作方法。技术背景

[0002] 雪上一枝蒿系毛茛科植物乌头属雪上一枝蒿(Aconitum brachypodum Diels.)的干燥块根，性温，味苦、辛，有大毒，具祛风除湿、通利关节、消肿止痛之功。其生物碱类成分具有活血、镇痛、抗炎等作用。但其治疗量与中毒量十分接近，使用不当可能导致中毒、心律失常乃至休克等。毒性中药采用经皮给药是中医外治法的一大特色，较其他给药途径，在治疗痛风、类风湿关节炎和风湿关节炎等疾病方面更具有显著的疗效优势。雪上一枝蒿主要有效成分为生物碱类，经皮给药时，其透皮性能较差，处方中常加入大量促渗剂以增加其透过量，但可能导致剂量控制不准确，以及中毒等，故雪上一枝蒿总碱虽有明确的祛风除湿、通利关节、消肿止痛等作用，但经透皮给药的毒性和疗效个体差异大。将雪上一支蒿制成微乳作为载体透皮给药，与其他剂型相比具有独特优势，能提高药物的透皮能力，可在角质层和真皮形成药物储库，明显缓释药物，达到长时间高剂量的释放，从而提高药物的生物利用度，达到增效减毒的目的。但由于雪上一支蒿总碱的水溶性和脂溶性较差，发明人在研究过程中发现，将其制成微乳时，辅料的选择比较困难，大多数辅料制成的雪上一支蒿微乳中，雪上一支蒿总碱的载药量都较低，约为3mg/g左右，且性能不够稳定，外观不够澄清透明，微乳的粒径较大，一般超过100nm，质量较差。
发明内容：

[0003] 本发明的目的在于，提供一种雪上一支蒿微乳及其制作方法。所选辅料可提高水难溶性药物雪上一支蒿总碱的溶解度，促进其中的大分子药物在体内的吸收，增加其透过率；还可在角质层和真皮形成药物储库，明显缓释药物；制成的微乳中雪上一支蒿总碱载药量高，最高可达20mg/g，且外观澄清透明，粒径在1～100nm内，性能稳定、微乳质量好。

[0004] 为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案实现：一种雪上一支蒿微乳，主要由雪上一支蒿总碱制成。

[0005] 前雪上一支蒿微乳中，按重量份计算，由雪上一支蒿总碱0.5-5份、肉豆蔻酸异丙酯1-15份、聚氧乙烯35蓖麻油10-30份、无水乙醇1-20份及水40-75份制成。

[0006] 前雪上一支蒿微乳中，按重量份计算，由雪上一支蒿总碱1-3份、肉豆蔻酸异丙酯2-4份、聚氧乙烯35蓖麻油15-25份、无水乙醇5-15份及水60-70份制成。

[0007] 前雪上一支蒿微乳中，按重量份计算，由雪上一支蒿总碱2份、肉豆蔻酸异丙酯3.3份、聚氧乙烯35蓖麻油19.8份、无水乙醇9.9份及水65份制成。

[0008] 一种前述的雪上一支蒿微乳的制作方法，将雪上一枝蒿总碱与肉豆蔻酸异丙酯混合后，超声处理10-20min，待药物分散均匀后，再加入聚氧乙烯35蓖麻油和无水乙醇，超声处理10-20min后，搅拌，边搅拌边加水，加完水之后继续搅拌，直至溶液呈透明澄清的微乳液，即得。

[0009] 前述的雪上一支蒿微乳的制作方法，将雪上一枝蒿总碱与肉豆蔻酸异丙酯混合后，超声处理15min，待药物分散均匀后，再加入聚氧乙烯35蓖麻油和无水乙醇，超声处理
15min后，搅拌，边搅拌边加水，水加完之后继续搅拌，直至溶液呈透明澄清的微乳液，即得。

[0010] 本发明所述药物主要由雪上一支蒿制作而成。雪上一枝蒿源于云南，是四川民间广为流传和使用的跌打、疗伤的止痛药。对于跌扑肿痛、风湿红肿，特别是各种内外伤疼痛，内服外搽具有立竿见影的奇特疗效，现代医药学临床研究认为：雪上一枝蒿性温，味苦、辛。用于风湿骨痛，跌扑肿痛及牙痛等症，疗效显著。雪上一枝蒿甲、乙、丙、丁素均有镇痛作用，伏毛铁棒锤总生物碱的镇痛作用较强；3-乙酰乌头碱是一种不成瘾镇痛剂，对炎性肿胀、渗出及棉球肉芽增生等均有明显的抑制作用；伏毛铁棒锤总碱具有较强的局部麻醉作用；雪上一枝蒿对蛙心有近似洋地黄样作用，其所致心功能障碍，可被阿托品拮抗；一枝蒿甲、乙对心呈乌头碱样作用；宣威乌头有抗肿瘤作用；准葛尔乌头碱和欧乌头碱具有抗生育活性；
铁棒锤可引起心律失常和血压下降。肉豆蔻酸异丙酯，Isopropyl myristate，广泛应用于化妆品中，可以起到保湿和滋润皮肤的作用，皮肤对本品的吸收性较好，能在皮层内与毛囊有效接触，渗入皮层深处，并将化妆品中的活性组分带入，充分发挥有效成分的作用。作为化妆品溶剂及皮肤保湿剂，渗透剂。肉豆蔻酸异丙酯是非脂性润肤剂，极易被皮肤吸收。是半固体基质的组分之一，也可作为局部给药制剂中许多物质的溶剂。它应用于各种局部制剂和化妆品，包括浴油、化妆品、护发护甲产品、面霜、洗剂、护唇膏、剃须膏、润肤剂、除臭剂、耳部用混悬剂、阴道霜剂。例如，肉豆蔻酸异丙酯在某一冷霜处方中是一种自乳化成份，而这种冷霜处方可作为许多药物和皮肤用药物的基质；在化妆品中，其在水和甘油的稳定混合液中也有应用。肉豆蔻酸异丙酯可作为透皮吸收制剂中的穿透促进剂，可与治疗用超声波和离子导入结合一起使用。肉豆蔻酸异丙酯在水-油凝胶缓释乳(water-oil gel 
prolonged-release emulsion)中可作为油相的主要成分。聚氧乙烯35蓖麻油是聚氧乙烯蓖麻油(polyoxyethylenated castor oil；emulsifier EL)的一种，是非离子型表面活性剂。主要用作水相乳化剂。主要用作农药乳化剂和印花涂料扩散剂。无水乙醇，ethyl 
alcohol absolute，无色澄清液体，能与水和氯仿、乙醚等多种有机溶剂以任意比例互溶。
能与水形成共沸混合物(含水4.43％)，共沸点78.15℃。相对密度(d204)0.789。熔点-114.1℃。沸点78.5℃。

[0011] 本发明中，由于雪上一支蒿总碱的水溶性和脂溶性较差，制成微乳时，辅料及辅料用量的选择成了难点。发明人在研究中发现，实验中选用的大多数辅料制成的雪上一支蒿微乳，雪上一支蒿总碱的载药量都较低，约为3mg/g左右。发明人经多次试验后发现，以雪上一支蒿总碱为主要原料，选用无水乙醇为助乳化剂，聚氧乙烯35蓖麻油为乳化剂，肉豆蔻酸异丙酯为油相，且控制各辅料的配比为：肉豆蔻酸异丙酯：聚氧乙烯35蓖麻油：无水乙醇：水＝1-15：10-30：1-20：40-75，这样制制成的微乳中雪上一支蒿总碱的载药量提高了，最高可达20mg/g。最佳辅料配比为：肉豆蔻酸异丙酯：聚氧乙烯35蓖麻油：无水乙醇：水＝3.3：19.8：9.9：65。制成的微乳外观澄清透明，粒径在1～100nm内，性能稳定、微乳质量好。

[0012] 发明人进行了大量的实验，本发明中仅提供了其中的关键实验数据；

[0013] 实验例

[0014] 1材料

[0015] 1.1仪器

[0016] LC-20AT高效液相色谱仪(日本岛津公司)，JEM-2100透射电子显微镜(日本电子株式会社)；AE/240型分析天平(上海梅特勒仪器有限公司)；HJ-6A数显恒温磁力搅拌器(常州国华电器有限公司)；超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司，SK8210HP)。

[0017] 1.2试药

[0018] 雪上一枝蒿甲素对照品(纯度≥98％，中国食品药品检定研究院，批号110895-200404)；雪上一枝蒿总碱(自制，纯度为11％)；肉豆蔻酸异丙酯(IPM，Alfa aesar公司)；辛酸癸酸三甘油酯(GTCC，英国禾大公司)；聚氧乙烯(35)蓖麻油(Cremophor EL35)、聚氧乙烯氢化蓖麻油(Cremophor RH40)、泊洛沙姆188(P188)，均购于德国BASF公司；聚山梨酯80(吐温80，成都市科龙化工试剂厂)；甲醇、乙腈为色谱纯；水为娃哈哈纯净水；其他试剂均为分析纯。

[0019] 2方法与结果

[0020] 2.1处方的研究

[0021] 2.1.1油相的选择

[0022] 2.1.1.1油相乳化能力考察

[0023] 乳剂的制备：精密称取玉米油、IPM、GTCC各0.6g，置于5mL EP管中，以吐温-80为乳化剂，固定油相与乳化剂比例为6:4，采用高速分散器W＝8000r·min-1搅拌，使其充分混匀，然后加入2mL纯净水，高速搅拌乳化2min，得到乳白均一乳剂。

[0024] 油相乳化能力测定：取制备好的乳剂，3000r·min-1离心20min，观察是否分层。采用紫外分光光度法考察乳剂的稳定性，测定乳剂的物理稳定性参数KE。

[0025]

[0026] 式中，A0为原乳剂的稀释液在某一波长的吸光度；A：原乳剂经离心后离心管下层液经同倍稀释后在同一波长的吸光度。在相同条件下，KE值越小，乳剂越稳定，λ＝550nm。

[0027] 结果天然油相玉米油、GTCC制备的乳剂经离心后均发生明显分层，以合成油相IPM制备的乳剂较稳定，玉米油、GTCC及IPM所制备的乳剂稳定性参数KE分别为17.9、10.1、8.9。表明由GTCC、IPM制备的乳液稳定性更好。

[0028] 2.1.1.2不同油相对雪上一枝蒿总碱溶解度的测定

[0029] 分别称取过量雪上一枝蒿总碱于西林瓶中，分别加入IPM、辛酸癸酸三甘油酯(GTCC)各1mL，于磁力搅拌器上室温搅拌12h，使溶解达平衡后，10000r·min-1离心10min，取上清液，适当稀释后经0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液按2.2.6.3项下色谱条件测定其质量浓度。结果，总碱在IPM中的平衡溶解度为2.40mg·mL-1，在GTCC中的平衡溶解度为2.45mg·mL-1，两者平衡溶解度相当。

[0030] 结合2.1.1.1项下乳化能力考察结果，故选择IPM作为微乳的油相。

[0031] 2.1.2乳化剂的选择

[0032] 2.1.2.1乳化剂稳定性考察

[0033] 以IPM为油相，以EL35、RH40、P188为乳化剂，固定油相与乳化剂质量比为6﹕4，乳化剂与油相进行混合后，恒温37℃，350r·min-1搅拌，加水100倍量，从加水即刻计时，分别于30、60、90、120、180、240s取样2mL，以紫外分光光度法在550nm处测定其吸光度，考察乳化剂的乳化性能，结果见表1。

[0034] 表1不同乳化剂在不同时间的吸光值

[0035]

[0036] 由实验过程中发现，P188形成油水混合物，几乎不能乳化，不能测定吸光值；EL35、RH40能形成乳白均一乳剂，以EL35的吸光值最小，推测其形成的乳剂粒径最小，因此选择这两种乳化剂进行微乳的相图研究，进一步筛选最佳乳化剂。

[0037] 2.1.2.2伪三元相图筛选乳化剂

[0038] 精密称取RH40、EL35作为乳化剂(SF)和乙醇作为助乳化剂(CoSF)按质量比2∶1制备混合乳化剂，以两种混合乳化剂分别与IPM按质量比9∶1，8∶2，7∶3，6∶4，5∶5，4∶6，3∶7，2∶8和1∶9的比例精确称量，置于西林瓶中，25℃恒温水浴，300r·min-1磁力搅拌混合均匀，以纯净水滴定，观察液体的形态变化，同时以600nm入射光照射，观察是否有丁达尔现象，记录体系的临界变化点。计算临界点时每个组分在微乳体系中的质量百分含量，用等边三角形的一个边表示乳化剂和助乳化剂的混合物(S)，其余两个边分别表示油相(O)和水相(W)，借助Origin 7.5软件绘制微乳的伪三元相图，确定O/W型微乳区，结果见图1-图2。

[0039] 其中ME区为O/W型微乳区，G区为凝胶区，E区为普通乳剂区，由图形看出RH40所形成的微乳区最大，但RH40在温度较低时不易流动，且结合其稳定性考察项目的结果，故选用Cremophor EL-35作为乳化剂。

[0040] 2.1.3助乳化剂的选择

[0041] 精密称取Cremophor EL-35作为乳化剂，考察不同助表面活性剂：无水乙醇、1，2-丙二醇、异丙醇、丙三醇、乙醇﹕1-2丙二醇＝1﹕1对微乳体系的影响，固定乳化剂与助乳化剂质量比2:1，按照2.1.2.2项下乳化剂对伪三元相图的影响中水滴定法操作，滴定过程中不断观察体系变化和是否出现丁达尔现象，记录临界点并绘制伪三元相图，结果见图3-图7。

[0042] 由伪三元相图看出，丙三醇所形成的微乳区域面积最大，但所形成的微乳放置后有絮状物产生且凝胶区也较大。无水乙醇所形成的微乳区域面积较小，但其微乳稳定且凝胶区也小，因此，选用无水乙醇作为助乳化剂。

[0043] 2.1.4Km值对微乳形成的影响

[0044] 精密称取Cremophor EL-35作为乳化剂，无水乙醇作为助乳化剂，按照质量比Km＝1∶1，Km＝2∶1，Km＝3∶1混合均匀，然后分别与IPM按质量比9∶1，8∶2，7∶3，6∶4，5∶5，4∶6，3∶7，2∶8和1∶9一系列比例精确称量，混合均匀，按照2.1.2.2项下乳化剂对伪三元相图的影响中水滴定法操作，滴定过程中不断观察体系变化和是否出现丁达尔现象，记录临界点并绘制伪三元相图，结果见图8-图10。

[0045] 由实验结果可知，当Km＝2﹕1与3﹕1时所形成空白微乳区域面积较大，但Km＝3﹕1时，所形成的微乳放置后会变混浊，不稳定，故选用乳化剂与助乳化剂的质量比为2﹕1进行实验研究。混合乳化剂与IPM质量比为9﹕1，8﹕2时能形成微乳，但质量比为8﹕2所制微乳不稳定，故确定混合乳化剂与IPM质量比为9﹕1。

[0046] 2.1.5空白微乳处方的确定

[0047] 由以上筛选结果确定IPM作为油相，Cremophor EL-35作为乳化剂，无水乙醇作为助乳化剂，乳化剂与助乳化剂的质量比为2﹕1，混合乳化剂与IPM质量比为9﹕1。微乳处方为：IPM-Cremophor EL35-无水乙醇-水(3.3％:19.8％:9.9％:67.0％)。

[0048] 2.1.6雪上一枝蒿微乳处方的确定

[0049] 称取适量雪上一枝蒿总碱，加入到IPM中，按比例加入混合乳化剂，超声使分散溶解。最后将水相逐滴滴加到混合物中，搅拌直至形成透明的微乳系统。制备含雪上一枝蒿总碱0.5％、1％、2％的微乳，12000r·min-1离心10min后，测定其离心前后微乳中的雪甲素含量变化。结果表明，雪上一枝蒿微乳中雪甲素的含量在离心前后无明显变化。表明所制备的雪上一枝蒿微乳稳定性良好。因此，确定雪上一枝蒿微乳处方为：雪上一枝蒿总碱-IPM-Cremophor EL35-无水乙醇-水(2％:3.3％:19.8％:9.9％:65.0％)。

[0050] 2.2质量评价

[0051] 2.2.1微乳性状

[0052] 空白微乳为无色透明、低黏度液体；雪上一枝蒿微乳为棕黄色透明、低黏度液体。空白微乳和雪上一枝蒿微乳用λ＝650nm激光入射，两者都具有明显丁达尔现象。

[0053] 2.2.2形态与粒径观察

[0054] 取三批(20150323、20150325和20150327)雪上一枝蒿微乳适量，用水稀释20倍后，滴在覆有支持膜的铜网上，静置10min后用滤纸片吸干，再滴加2％磷钨酸(pH为7.4)溶液于铜网上负染3min，自然挥干，采用透射电子显微镜在120000倍下观察并摄制照片，结果见图11-图13，微乳呈圆整的球体，粒径均在1～100nm之间。

[0055] 2.2.3微乳的鉴别

[0056] 离心法：取同一处方的三批(20150323、20150325和20150327)雪上一枝蒿微乳，4000r/min离心15min，结果三批微乳都呈均一澄明状态，没有分层，可判断为已形成微乳。

[0057] 稀释法：能被水稀释的微乳为O/W型微乳，能被大量油稀释的为W/O型微乳。取同一处方的三批(20150323、20150325和20150327)雪上一枝蒿微乳适量，分别加水和油稀释，结果表明，所制备的雪上一枝蒿微乳可被水稀释，而不能被油稀释，加入大量油后分层，因此，可判断雪上一枝蒿微乳为O/W型微乳。

[0058] 2.2.4pH值测定

[0059] 分别取三批微乳0.5g，用纯净水稀释100倍后，用酸度计测定其pH值。其结果为三批样品的平均pH值为5.92。

[0060] 2.2.5微乳的稳定性

[0061] 参考《中国药典》2010年版二部附录，将自制雪上一枝蒿微乳以10000r·min-1离心15min，微乳澄清透明，无分层现象，符合微乳稳定性要求。采用留样观察法考察，取适量雪上一枝蒿微乳，密封于试管内，分别放置于4、25℃条件下贮藏1个月，定期进行观察，结果表明，微乳透明度及雪上一枝蒿甲素含量均无明显变化。

[0062] 2.2.6含量测定

[0063] 2.2.6.1对照品溶液的制备

[0064] 精密称取雪上一枝蒿甲素对照品适量，加甲醇溶液溶解并制成每1mL含1.004mg的溶液，即得，备用。

[0065] 2.2.6.2供试液的制备

[0066] 分别精密称取空白微乳与雪上一枝蒿微乳0.5g于10mL量瓶中，加入甲醇超声10min，取出，放至室温后，定容至刻度。精密移取2mL于25mL量瓶中，加入甲醇超声5min，取出，放至室温后，定容至刻度，摇匀。0.45μm微孔滤膜滤过，收集续滤液，备用。

[0067] 2.2.6.3色谱条件

[0068] 色谱柱为Kromasil C18柱(150mm×4.6mm，5μm)；流动相为乙腈-磷酸盐缓冲溶液-1(pH7.3)(20﹕80)；流速为1.0mL·min ；检测波长为199nm；柱温为30℃；进样量为20μL。

[0069] 2.2.6.4专属性试验

[0070] 分别取甲醇、雪甲素对照品溶液、样品溶液注入液相色谱仪中，色谱条件同前，进样20μL，测定，结果表明雪上一枝蒿甲素分离良好，且在出峰处无干扰，见图14。

[0071] 2.2.6.5标准曲线的制备

[0072] 精密吸取适量对照品贮备液于量瓶中，加甲醇分别制成浓度为2.008，4.016，8.032，12.048，16.064，20.08μg·mL-1的一系列对照品溶液。精密吸取20μL，按2.2.6.3项下色谱条件进行测定。以雪上一枝蒿甲素的浓度(μg·mL-1)(X)和相应峰面积积分值(Y)进行线性回归，得到雪上一枝蒿甲素的标准曲线方程为Y＝21.32X+1.075，r＝0.9999，表明雪上一枝蒿甲素在2.008～20.08μg·mL-1呈良好线性关系。

[0073] 2.2.6.6精密度考察

[0074] 分别取同浓度(8.032μg·mL-1)的对照品溶液，按2.2.6.3项下色谱条件连续进样6次，每次进样量20μL，记录色谱峰峰面积，计算其RSD(％)值为1.73％，表明仪器精密度良好。

[0075] 2.2.6.7稳定性考察

[0076] 取同一样品溶液按2.2.6.3项下色谱条件分别于0，2，4，6，8，10，12，18，24h进样分析，记录色谱峰峰面积，计算峰面积在24h内的RSD(％)为1.94％，表明供试品溶液在24h内稳定性良好。

[0077] 2.2.6.8重复性试验

[0078] 精密称取微乳6份，按供试品项下方法制备，进样分析。结果微乳中雪上一枝蒿甲素的含量为2.19mg·g-1，重复性的RSD(％)为1.50％，表明重复性良好。

[0079] 2.2.6.9回收率考察

[0080] 精密称取已知含量的雪上一枝蒿微乳6份，各0.25g。每份分别加入0.502mg雪甲素对照品，照供试品溶液的制备项下制备样品溶液，在上述色谱条件下进样分析，结果见表2。

[0081] 表2加样回收率试验

[0082]

[0083] 2.2.6.10样品含量测定

[0084] 取3批雪上一枝蒿微乳，每批3份，每份约0.5g，精密称定，按供试品溶液制备方法制备，得供试品溶液。并按上述含量测定方法分别测定其雪上一枝蒿甲素的含量，见表3。

[0085] 表3雪上一枝蒿微乳中雪上一枝蒿甲素的质量分数测定mg·g-1

[0086]

[0087] 雪上一枝蒿总碱有明确的祛风除湿、通利关节、消肿止痛等作用，但经透皮给药的毒性和疗效个体差异大。而微乳具有良好的透皮吸收特性，可提高水难溶性药物的溶解度，促进大分子药物在体内的吸收，增加其透过率；且可在角质层和真皮形成药物储库，明显缓释药物。上述实验通过平衡溶解度选择了适宜的油相，并采用伪三元相图法优化了表面活性剂、助表面活性剂的种类及其各自在处中的比例。采用优选的处方所制备的雪上一枝蒿总碱微乳外观澄清透明，粒径在1～100nm，稳定性好。用甲醇提取后测定其雪甲素的含量，所建立的含量测定方法精密度高、线性关系良好、回收率符合要求。

[0088] 实验例2载药量考察

[0089] 1、药物辅料：

[0090] 本发明微乳辅料：肉豆蔻酸异丙酯3.3g、聚氧乙烯35蓖麻油19.8g、无水乙醇9.9g、水65g；

[0091] 对比微乳1辅料：花生油19.8g、聚山梨酯-20(Tween-20)3.3g、甘油9.9g及水65g；

[0092] 对比微乳2辅料：双油酸酯19.8g、聚乙二醇甘油单酯3.3g、甘油9.9g及水65g；

[0093] 对比微乳3辅料：氢化玉米油19.8g、液体大豆卵磷脂3.3g、乙醇9.9g及水65g；

[0094] 对比微乳4辅料：油酸乙酯19.8g、吐温803.3g、丙二醇9.9g及水65g；

[0095] 工艺：按比例分别称取上述辅料及雪上一枝蒿总碱，置于50mL烧杯中，37℃下恒温搅拌10min，加同温水浴纯化水50mL，磁力搅拌15min，制成微乳。

[0096] 2、载药量检测结果：

[0097] 按上述不同配方称取各辅料，分别于不同量的雪上一枝蒿总碱制成微乳，检测雪上一枝蒿总碱与不同辅料混合后的最高载药量，结果见表4：

[0098] 表4载药量检测结果

[0099]

[0100] 结论：由上表可知，本发明微乳中载药量远高于其他各组。附图说明：

[0101] 图1是EL-35所形成的微乳的伪三元相图；

[0102] 图2RH-40所形成的微乳的伪三元相图；

[0103] 图3以无水乙醇为助乳化剂形成的微乳的伪三元相图；

[0104] 图4以1，2-丙二醇为助乳化剂形成的微乳的伪三元相图；

[0105] 图5以异丙醇为助乳化剂形成的微乳的伪三元相图；

[0106] 图6以丙三醇为助乳化剂形成的微乳的伪三元相图；

[0107] 图7以乙醇：1，2-丙二醇＝1：1为助乳化剂形成的伪三元相图；

[0108] 图8Km＝1:1时所形成的微乳相图；

[0109] 图9Km＝2:1时所形成的微乳相图；

[0110] 图10Km＝3:1时所形成的微乳相图；

[0111] 图11取3g微乳稀释20倍后透射电镜图；

[0112] 图12取4g微乳稀释20倍后透射电镜图；

[0113] 图13取5g微乳稀释20倍后透射电镜图；

[0114] 图14甲醇(A)、空白微乳(B)、雪上一枝蒿甲素对照品(C)和本发明微乳(D)的HPLC图。

[0115] 下面结合实施例对发明作进一步的说明，但并不作为对本发明限制的依据。

[0116] 与现有技术相比，本发明将雪上一支蒿总碱制成微乳，所述微乳具有良好的透皮吸收特性，所选辅料可提高水难溶性药物雪上一支蒿总碱的溶解度，提高其载药率，并促进其中的大分子药物在体内的吸收，增加其透过率；还可在角质层和真皮形成药物储库，明显缓释药物；制成的微乳外观澄清透明，粒径在1～100nm内，性能稳定、微乳质量好。达到了发明目的。具体实施方式：

[0117] 实施例1.

[0118] 配方：雪上一支蒿总碱2g、肉豆蔻酸异丙酯3.3g、聚氧乙烯35蓖麻油19.8g、无水乙醇9.9gg及水65g。

[0119] 工艺：取雪上一枝蒿总碱与肉豆蔻酸异丙酯混合后，超声处理15min，待药物分散均匀后，再加入聚氧乙烯35蓖麻油和无水乙醇，超声处理15min后，搅拌，边搅拌边加水，加完水之后继续搅拌，直至溶液呈透明澄清的微乳液，即得雪上一支蒿微乳。

[0120] 实施例2.

[0121] 配方：雪上一支蒿总碱2g、肉豆蔻酸异丙酯2g、聚氧乙烯35蓖麻油15g、无水乙醇5g及水60g。

[0122] 工艺：取雪上一枝蒿总碱与肉豆蔻酸异丙酯混合后，超声处理15min，待药物分散均匀后，再加入聚氧乙烯35蓖麻油和无水乙醇，超声处理15min后，搅拌，边搅拌边加水，加完水之后继续搅拌，直至溶液呈透明澄清的微乳液，即得雪上一支蒿微乳。

[0123] 实施例3.

[0124] 配方：雪上一支蒿总碱3g、肉豆蔻酸异丙酯4g、聚氧乙烯35蓖麻油25g、无水乙醇5g及水60g制成。

[0125] 工艺：取雪上一枝蒿总碱与肉豆蔻酸异丙酯混合后，超声处理15min，待药物分散均匀后，再加入聚氧乙烯35蓖麻油和无水乙醇，超声处理15min后，搅拌，边搅拌边加水，加完水之后继续搅拌，直至溶液呈透明澄清的微乳液，即得雪上一支蒿微乳。