多种微生物发酵的木薯酒精渣饲料及其制备方法与应用

摘要

本发明公开了一种用于发酵木薯酒精渣饲料的液体菌液，它是由芽孢菌和乳酸菌中的一种或两种的组合而成；其中芽孢菌与乳酸菌接种比例为3:2（v/v），芽孢菌B1与芽孢菌B2接种比例为1:2（v/v），乳酸菌R1和芽孢菌R2接种比例为1:2‑3（v/v）。本发明进一步公开了用于发酵木薯酒精渣饲料的液体菌液在制备改善饲料风味，提高适口性方面的应用。实验结果显示：采用本发明的液体菌液发酵的木薯酒精渣饲料益生菌数明显提高。木薯酒精渣饲料经过发酵，乳酸含量明显增加。经过发酵的木薯酒精渣饲料有明显的酸甜气味。

权利要求

1.一种用于发酵木薯酒精渣饲料的液体菌液，其特征在于它是由芽孢菌和乳酸菌组合而成；其中芽孢菌与乳酸菌混合比例为3:2（v/v），芽孢菌B1与芽孢菌B2混合比例为1:2（v/v），乳酸菌R1和乳酸菌R2混合比例为1: 3（v/v）；

所述的芽孢菌B1指的是枯草芽孢杆菌CGMCC 1.1413，芽孢菌B2指的是地衣芽孢杆菌CGMCC 1.265，乳酸菌R1指的是植物乳杆菌CGMCC 1.557，乳酸菌R2指的是凝结芽孢杆菌CGMCC 1.3220。

2.一种采用权利要求1所述用于发酵木薯酒精渣饲料的液体菌液发酵木薯酒精渣饲料的制备方法，其特征在于按如下的步骤进行：（1）发酵饲料的原料配比为：木薯酒精渣40% 80%（w/w）、湿法糖渣10% 30%（w/w）、玉米~ ~皮8% 18%（w/w）；

~

（2）在步骤（1）中加入液体菌液3% 8%（w/w），然后加入碳酸钙，添加量为1% 3%（w/w），调~ ~节pH到5.0 6.0，发酵温度28℃ 32℃，发酵时间为4天 10天，得到木薯酒精渣发酵饲料；

~ ~ ~

所述的液体菌液指的是：其中芽孢菌与乳酸菌混合比例为3:2（v/v），芽孢菌B1与芽孢菌B2混合比例为1:2（v/v），乳酸菌R1和乳酸菌R2混合比例为1: 3（v/v）。

3.权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述木薯酒精渣指的是利用木薯加工生产酒精所剩下的残渣，主要由木薯外部褐色的皮，内部的薄壁组织和氰苷类物质组成；所述湿法糖渣是玉米提取葡萄糖和淀粉后的副产品；所述玉米皮是将玉米颗粒浸泡、破碎后，分离出来的玉米表皮经过洗涤、挤水、烘干工序加工而成。

4.权利要求1所述的用于发酵木薯酒精渣饲料的液体菌液在制备改善饲料风味，提高适口性方面的应用。

说明书

多种微生物发酵的木薯酒精渣饲料及其制备方法与应用

技术领域

[0001] 本发明属于微生物发酵技术领域，涉及多种微生物发酵的木薯酒精渣饲料及其制备方法与应用。

背景技术

[0002] 木薯酒精渣是利用木薯生产酒精所产生的大宗农副产品，主要由木薯外部的皮，内部的薄壁组织和氰苷类物质组成，含有大量的粗纤维，但粗蛋白含量较低，木质化程度高，适口性很差。粗纤维具有较强的稳定性，动物消化利用率低，直接作为饲料效果较差。木薯应用性强，随着市场需求的增加，木薯酒精渣也在不断增加，储存时间越久越会对环境造成污染，暴露在自然中会发生霉变，产生的废水和有毒物质不仅会对土壤造成较大破坏，造成经济损失的同时还会进一步威胁人和动物的健康。如何处理这些木薯酒精渣便成为制约木薯加工企业发展的瓶颈。

[0003] 木薯酒精渣粗纤维含量高，碳水化合物含量高，但是蛋白质含量低，一般认为是一种来源广泛、价格低廉、质量低劣的能量饲料。采用生物处理技术，在芽孢杆菌，乳酸菌等相关微生物的综合作用下，进行一系列的复杂的生物化学作用，改变木薯渣的物理化学性质使木薯酒精渣成为一种有潜力资源，将会有广阔的发展前景。近年来，很多学者研究表明：通过微生物本身的特性或产生的酶来利用木薯酒精渣中的营养成分可以提高这类饲料的营养价值、消化率和适口性。利用微生物发酵木薯酒精渣，不但可以做到大量消耗木薯酒精渣，另外也是解决目前国内市场反刍动物饲料缺乏的一种廉价方法，具有极大的发展潜力。
但是目前发酵木薯渣饲料大多采用单一菌种的微生物处理，比如青贮，其营养价值提高不多，实际应用也并不理想。而采取两种以上的混合菌种处理木薯渣的研究为数不多并且由于菌种组合不佳，菌种存活率不高，在实际生产条件下生产工艺复杂、成本高也会限制木薯渣发酵饲料的大规模生产。因此，继续探讨开发高效、低成本、可实现工厂化生产木薯渣生物饲料的最佳混合菌种及其最佳发酵工艺条件具有重要意义。

发明内容

[0004] 本发明公开了一种用于发酵降解木薯酒精渣饲料的液体菌液，其特征在于它是由芽孢菌和乳酸菌中的一种或两种的组合而成；其中芽孢菌与乳酸菌接种比例为3:2（v/v），芽孢菌B1与芽孢菌B2接种比例为1:2（v/v），乳酸菌R1和芽孢菌R2接种比例为1:2-3（v/v）；

[0005] 所述的芽孢菌B1指的是枯草芽孢杆菌1.1413（CGMCC），B2指的是地衣芽孢杆菌1.265（CGMCC）。乳酸菌R1指的是植物乳杆菌1.557（CGMCC），B2指的是凝结芽孢杆菌1.3220（CGMCC）。

[0006] 本发明进一步公开了采用液体菌液发酵木薯酒精渣饲料的制备方法，其特征在于按如下的步骤进行：

[0007] （1）发酵饲料的原料配比为：木薯酒精渣40% 80%（w/w）、湿法糖渣10% 30%（w/w）、~ ~玉米皮8% 18%（w/w）；
~

[0008] （2）在步骤（1）中加入液体菌液3% 8%（w/w），然后加入碳酸钙添加量为1% 3%（w/~ ~w），调节pH到5.0 6.0，发酵温度28℃ 32℃，发酵时间为4天 10天，得到木薯酒精渣发酵饲~ ~ ~
料；制备得到的发酵饲料直接作为饲料，或直接作为饲料原料配制成为饲料。

[0009] 所述的液体菌液指的是：芽孢菌和乳酸菌混合比例为3:2（v/v），芽孢菌B1和B2的比例为1:2（v/v），乳酸菌R1和R2的比例为1:2-3（v/v）。

[0010] 本发明所述的木薯酒精渣是利用木薯加工生产酒精所剩下的残渣，主要由木薯外部褐色的皮，内部的薄壁组织和氰苷类物质组成；所述湿法糖渣是玉米提取葡萄糖和淀粉后的副产品；所述玉米皮是将玉米颗粒浸泡、破碎后，分离出来的玉米表皮经过洗涤、挤水、烘干工序加工而成。

[0011] 本发明更进一步公开了用于发酵降解木薯酒精渣饲料的液体菌液在制备改善饲料风味，提高适口性方面的应用。实验结果表明：

[0012] （1）采用本发明所述的液体菌液发酵的木薯酒精渣饲料益生菌数明显提高。

[0013] （2）木薯酒精渣饲料经过发酵，乳酸含量明显增加。

[0014] （3）经过发酵的木薯酒精渣饲料有明显的酸甜气味。

[0015] 为实现上述目的，本发明主要做了如下的工作：

[0016] （1）确定发酵原料配比

[0017] 为最大程度消耗利用木薯酒精渣，木薯酒精渣添加比例在40% 80%（w/w）。由于水~分过高，原料成分不稳定且含杂菌过多，需要添加一些成分相对稳定并利于微生物附着的基质，另外由于木薯酒精渣pH很低，并不利于菌体生长，需要添加缓冲剂碳酸钙来调节pH，添加量为1% 3%（w/w）。改良后发酵饲料的原料配比为木薯酒精渣40% 80%（w/w）、湿法糖渣~ ~
10% 30%（w/w）、玉米皮8% 18%（w/w）。
~ ~

[0018] （2）发酵菌种的筛选

[0019] 本研究用到的菌株共15株，菌种按类别可分为芽胞菌9株，分别是地衣芽孢杆菌1.265（CGMCC）、地衣芽孢杆菌1.813（CGMCC）、解淀粉芽孢杆菌1.769（CGMCC）、解淀粉芽孢杆菌1.398（CGMCC）、枯草芽孢杆菌1.1413（CGMCC）、枯草芽孢杆菌1.173（CGMCC）、枯草芽孢杆菌1.836（CGMCC）、枯草芽孢杆菌1.215（CGMCC）、饲料类芽孢杆菌1.3772（CGMCC）。乳酸菌6株，分别是植物乳杆菌1.557（CGMCC）、植物乳杆菌1.2158（CGMCC）、植物乳杆菌1.555（CGMCC）、嗜酸乳杆菌1.1854（CGMCC）、短乳杆菌1.214（CGMCC）、凝结芽孢杆菌1.3220（CGMCC）。

[0020] 2.1芽孢菌菌株的筛选

[0021] 通过产淀粉酶实验和抑菌性实验从9株芽胞菌中筛选出高产淀粉酶和抑菌性强的菌株。

[0022] 各取9株芽孢菌菌种一环接到装液量50ml的250ml的三角烧瓶中，37℃培养12h，液体培养基为：牛肉膏0.5%，蛋白胨1%，NaCl 0.5%，pH7.2 7.4。~

[0023] 将活化好的芽胞菌分别点接到淀粉培养基平板上，然后放入37 ℃恒温生化培养箱中培养，观察菌株周围是否有透明圈产生，挑取产生透明圈的菌株再次活化，稀释涂布到平板上，使之产生单菌落，观察产生透明圈的大小，挑取透明圈大的菌株活化保藏[0024] 将活化好的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌稀释一定浓度后混入已经冷却到50℃左右的固体培养基中，混合均匀后倒平板。然后将活化好的在淀粉培养基上产生较大透明圈的菌株点接到平板上，放在37℃恒温培养，观察是否产生抑菌圈，挑取产生抑菌圈的菌株再次活化，稀释涂布到平板上，使之产生单菌落，观察所产生抑菌圈的大小，挑取抑菌圈大的5株菌株纯化保存，分别是地衣芽孢杆菌1.265（CGMCC）、解淀粉芽孢杆菌1.769（CGMCC）、枯草芽孢杆菌1.1413（CGMCC）、枯草芽孢杆菌1.836（CGMCC）、饲料类芽孢杆菌1.3772（CGMCC）。

[0025] 2.2乳酸菌菌株的筛选

[0026] 通过乳酸菌产乳酸性能实验从6株乳酸菌中筛选出产酸高的乳酸菌。

[0027] 将活化好的乳酸菌菌液分别按照5%的比例接种于饲料中，然后搅拌饲料使之充分混匀，装入发酵袋置于37℃环境中发酵3d后进行检测。检测时称取5g发酵饲料放入三角瓶中，加入45ml蒸馏水振荡20min，然后离心取10ml上清液，稀释10倍后用生物传感分析仪测定其乳酸含量，选取乳酸含量高的4株菌株纯化保存，分别是植物乳杆菌1.557（CGMCC）、植物乳杆菌1.2158（CGMCC）、短乳杆菌1.214（CGMCC）、凝结芽孢杆菌1.3220（CGMCC）。

[0028] 2.3适合固态发酵菌株的筛选

[0029] 通过单菌发酵试验首先确定饲料发酵乳酸菌，将活化后乳酸菌按照2%的接种量分别接入发酵料中，3天后检测乳酸菌数和乳酸含量，最终选出菌数多，乳酸含量高的乳酸菌R1（植物乳杆菌1.557，CGMCC）和乳酸菌R2（凝结芽孢杆菌1.3220，CGMCC）；随后将两株乳酸菌分别和其中一株芽孢菌接入发酵料中，发酵结束后检测芽孢菌数，乳酸含量，最终确定芽孢菌为芽孢菌B1（地衣芽孢杆菌1.265，CGMCC）、芽孢菌B2（枯草芽孢杆菌1.1413，CGMCC）。

[0030] （3）发酵条件的优化

[0031] 3.1发酵饲料芽孢菌与乳酸菌混合比例的优化

[0032] 将筛选出的2株芽孢菌和2株乳酸菌活化2代，接入预先混合好的发酵料中，接种量为5%，芽孢菌与乳酸菌接种比例分别为1:2，2:1，1:1，3:1，3:2，2株芽孢菌接种比例为1:1，2株乳酸菌接种比例为1:1，32℃恒温生化培养箱中发酵4d后，检测其中的乳酸含量和益生菌数等指标

[0033] 表1 不同菌种混合比例发酵后乳酸含量与益生菌数

[0034]

[0035] 由表1可以看出，当芽孢菌和乳酸菌的混合比例为3:2时，乳酸含量和益生菌数达到最高，分别为1.70%和1.52×109cfu/g。因此，芽孢菌与乳酸菌的混合比例选择是3:2。

[0036] 3.2发酵饲料2株芽孢菌比例的优化

[0037] 将2株芽孢菌和2株乳酸菌活化2代，接入预先混合好的发酵料中，接种量为5%，芽孢菌与乳酸菌接种比例为3:2，2株芽孢菌B1和B2接种比例分别为3:1，2:1，1:1，1:2，1:3，2株乳酸菌接种比例为1:1，32℃恒温生化培养箱中发酵4d后，检测其中的乳酸含量和益生菌数等指标。

[0038] 表2 两种芽孢菌不同混合比例发酵后乳酸含量与益生菌数

[0039]

[0040] 由表2可以看出，芽孢菌B1和B2的混合比例为1:2与1:1和1:3实验组相比，益生菌数差别并不大，但乳酸含量明显要高。因此，最终确定2株芽孢菌B1和B2的混合比例为1:2。

[0041] 3.3发酵饲料2株乳酸菌比例的优化

[0042] 将2株芽孢菌和2株乳酸菌活化2代，接入预先混合好的发酵料中，接种量为5%，芽孢菌与乳酸菌接种比例为3:2，2株芽孢菌B1和B2接种比例为1:2，2株乳酸菌R1和R2比例分别为3:1，2:1，1:1，1:2，1:3，32 ℃恒温生化培养箱中发酵4d后，检测其中的乳酸含量和益生菌数等指标。

[0043] 表3 两种乳酸菌不同混合比例发酵后乳酸含量与益生菌数

[0044]

[0045] 由表3可以看出，两种乳酸菌R1和R2的混合比例为1:3的实验组与1:2的相比，益生菌数并没有太大差别，但是乳酸含量较后者要高。因此，2株乳酸菌R1和R2的混合比例确定为1:3。

[0046] 3.4发酵饲料接种量的优化

[0047] 将2株芽孢菌和2株乳酸菌活化2代，接入预先混合好的发酵料中，芽孢菌与乳酸菌接种比例为3:2，2株芽孢菌B1和B2比例为1:2，2株乳酸菌R1和R2比例为1:3，接种量分别为1%，3%，5%，7%，9%，32℃恒温生化培养箱中发酵4d后，检测其中的乳酸含量和益生菌数等指标。

[0048] 表4 不同接种量发酵后乳酸含量与益生菌数

[0049]

[0050] 由表4可以看出，随着接种量的增加，乳酸含量也在增加，在到达2%时维持稳定，益生菌数在接种量为5%时最高，为1.29×109cfu/g，随后逐渐降低，说明乳酸含量过高会抑制菌体的生长。因此，接种量为5%时发酵效果最好。

[0051] 3.5发酵饲料温度的优化

[0052] 将2株芽孢菌和2株乳酸菌活化2代，接入预先混合好的发酵料中，接种量为5%，芽孢菌与乳酸菌接种比例为3:2，2株芽孢菌B1和B2比例为1:2，2株乳酸菌R1和R2比例为1:3，分别置于24℃，28 ℃，32 ℃，36 ℃，40 ℃恒温生化培养箱中发酵4d，检测其中的乳酸含量和益生菌数等指标。

[0053] 表5 不同发酵温度发酵后乳酸含量与益生菌数

[0054]

[0055] 由表5可以看出，发酵温度为32℃和36℃时，乳酸含量和益生菌数都相对较高，且差别并不大，但是考虑到能耗问题，因此，选择发酵温度为32℃。

[0056] （4）正交试验优化发酵条件

[0057] 将筛选出的菌株，2株芽孢菌和2株乳酸菌活化2代，以单因素优化的条件进行正交实验，采用L9(33)型三水平三因素正交实验对芽孢菌与乳酸菌的接种比例，接种量，发酵温度进行分析。发酵4d后，测定其乳酸含量，水分，还原糖，大肠菌数，芽孢菌数和乳酸菌数，以乳酸含量作为指标，选取乳酸含量最高的作为最终饲料发酵条件。

[0058] 表6 正交实验影响因素与水平列表

[0059]

[0060] 表7 正交实验极差分析表

[0061]

[0062] 表8 正交实验方差分析表

[0063]

[0064] 从正交实验结果直观分析R值可知，影响试验结果的因素依次为C>A>B，即对产乳酸影响因素依次为发酵温度、接种比例、接种量。

[0065] 从K值可以看出，A2B2C3发酵产生的乳酸最多，即接种比例为3:2，接种量为5%，发酵温度36℃。但在实际生产过程中，考虑到能耗成本的问题，发酵温度确定为32℃，是最优选项。

[0066] 通过正交实验的方差分析，可以看出：因素C（发酵温度）和因素A（接种比例）对实验结果的影响差异显著，而因素B（接种量）对实验结果的影响差异不显著。

[0067] 将采用芽孢菌和乳酸菌混合比例为3:2，芽孢菌B1和B2的比例为1:2，乳酸菌R1和R2的比例为1:3的菌种配方菌液，液体菌种添加量为5%，发酵温度32℃，发酵时间为4天得到的木薯酒精渣发酵饲料，采用SBA-40C型生物传感分析仪，高效液相色谱（安捷伦1200）等仪器分析检测发酵后产品中各项成分的含量变化，结果如表9所示：

[0068]

[0069] 由表9可以看出，经过发酵后，乳酸含量和益生菌数均有很大的提高，PH值也有明显的下降，不但能够维持发酵饲料成分的稳定，而且能有效抑制有害杂菌的生长。

具体实施方式

[0070] 下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。

[0071] 其中所述木薯酒精渣、湿法糖渣、玉米皮均为工业生产的大宗副产物，木薯酒精渣是利用木薯加工生产酒精所剩下的残渣，湿法糖渣是玉米提取葡萄糖和淀粉后的副产品；玉米皮是将玉米颗粒浸泡、破碎后，分离出来的玉米表皮经过洗涤、挤水、烘干工序加工而成。

[0072] 实施例1

[0073] 确定发酵原料配比

[0074] 木薯酒精渣添加量分别为50%、60%、70%，湿法糖渣的添加量分别为10%、20%、30%，玉米皮的添加量分别为8%、18%、28%，碳酸钙添加量为2%，进行组合试验，最终确定发酵饲料的原料配比为木薯酒精渣60%（w/w）、湿法糖渣20%（w/w）、玉米皮18%（w/w），添加缓冲剂碳酸钙来调节pH，添加量为2%（w/w）。

[0075] 实施例2

[0076] 发酵菌种的筛选

[0077] 2.1芽孢菌菌株的筛选

[0078] 通过产淀粉酶实验和抑菌性实验从9株芽胞菌中筛选出高产淀粉酶和抑菌性强的菌株5株，分别是地衣芽孢杆菌1.265（CGMCC）、解淀粉芽孢杆菌1.769（CGMCC）、枯草芽孢杆菌1.1413（CGMCC）、枯草芽孢杆菌1.836（CGMCC）、饲料类芽孢杆菌1.3772（CGMCC）。

[0079] 2.2乳酸菌菌株的筛选

[0080] 通过乳酸菌产乳酸性能实验从6株乳酸菌中筛选出产酸高的乳酸菌4株，分别是植物乳杆菌1.557（CGMCC）、植物乳杆菌1.2158（CGMCC）、短乳杆菌1.214（CGMCC）、凝结芽孢杆菌1.3220（CGMCC）。

[0081] 2.3适合固态发酵菌株筛选

[0082] 首先通过单菌发酵试验对筛选出的4株产酸高的乳酸菌再次筛选，确定饲料发酵乳酸菌为乳酸菌R1（植物乳杆菌1.557，CGMCC）和乳酸菌R2（凝结芽孢杆菌1.3220，CGMCC）。随后将两株乳酸菌分别和筛选出的高产淀粉酶和抑菌性强的5株芽孢菌的其中一株接入发酵料中，发酵结束后检测芽孢菌数，乳酸含量，最终确定芽孢菌为芽孢菌B1（地衣芽孢杆菌
1.265，CGMCC）、芽孢菌B2（枯草芽孢杆菌1.1413，CGMCC）。

[0083] 实施例3

[0084] 发酵条件的优化

[0085] 3.1发酵饲料芽孢菌与乳酸菌混合比例的优化

[0086] 将筛选出的2株芽孢菌和2株乳酸菌活化2代，接入预先混合好的发酵料中，接种量为5%，芽孢菌与乳酸菌接种比例分别为3:1，3:2，1:1，2株芽孢菌接种比例为1:1，2株乳酸菌接种比例为1:1，32℃恒温生化培养箱中发酵4d后，检测其中的乳酸含量和益生菌数等指标。根据结果最终确定芽孢菌与乳酸菌的混合比例选择是3:2。

[0087] 3.2发酵饲料2株芽孢菌比例的优化

[0088] 将2株芽孢菌和2株乳酸菌活化2代，接入预先混合好的发酵料中，接种量为5%，芽孢菌与乳酸菌接种比例为3:2，2株芽孢菌B1和B2接种比例分别为1:1，1:2，1:3，2株乳酸菌接种比例为1:1，32℃恒温生化培养箱中发酵4d后，检测其中的乳酸含量和益生菌数等指标。根据结果最终确定2株芽孢菌B1和B2的混合比例为1:2。

[0089] 3.3发酵饲料2株乳酸菌比例的优化

[0090] 将2株芽孢菌和2株乳酸菌活化2代，接入预先混合好的发酵料中，接种量为5%，芽孢菌与乳酸菌接种比例为3:2，2株芽孢菌B1和B2接种比例为1:2，2株乳酸菌R1和R2比例分别为1:2，1:3，1:4，32 ℃恒温生化培养箱中发酵4d后，检测其中的乳酸含量和益生菌数等指标。根据结果最终确定2株乳酸菌R1和R2的混合比例为1:3。

[0091] 3.4发酵饲料接种量的优化

[0092] 将2株芽孢菌和2株乳酸菌活化2代，接入预先混合好的发酵料中，芽孢菌与乳酸菌接种比例为3:2，2株芽孢菌B1和B2比例为1:2，2株乳酸菌R1和R2比例为1:3，接种量分别为3%，5%，7%，32℃恒温生化培养箱中发酵4d后，检测其中的乳酸含量和益生菌数等指标。根据结果最终确定接种量为5%时发酵效果最好。

[0093] 3.5发酵饲料温度的优化

[0094] 将2株芽孢菌和2株乳酸菌活化2代，接入预先混合好的发酵料中，接种量为5%，芽孢菌与乳酸菌接种比例为3:2，2株芽孢菌B1和B2比例为1:2，2株乳酸菌R1和R2比例为1:3，分别置于28 ℃，32 ℃，36 ℃恒温生化培养箱中发酵4d，检测其中的乳酸含量和益生菌数等指标。根据结果最终确定发酵温度为32℃

[0095] 实施例4

[0096] 正交试验优化发酵条件

[0097] 将筛选出的菌株，2株芽孢菌和2株乳酸菌活化2代，以单因素优化的条件进行正交实验，采用L9(33)型三水平三因素正交实验对芽孢菌与乳酸菌的接种比例，接种量，发酵温度进行分析。发酵4d后，测定其乳酸含量，水分，还原糖，大肠菌数，芽孢菌数和乳酸菌数，以乳酸含量作为指标，选取乳酸含量最高的作为最终饲料发酵条件。最终结果显示采用芽孢菌和乳酸菌混合比例为3:2，芽孢菌B1和B2的比例为1:2，乳酸菌R1和R2的比例为1:3的菌种配方菌液，液体菌种添加量为5%，发酵温度32℃得到的木薯酒精渣发酵饲料终乳酸含量最高，品质最好。

[0098] 对比试验

[0099]