一种用于治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂

摘要

本发明涉及一种用于治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂及其应用，所述的复合制剂组成为：硝唑尼特10wt%~15 wt%、硫酸铜5 wt%~7 wt%、土霉素25 wt%~30 wt%、溶解剂48%~60%，上述原料的总和为100%。使用方法为：确诊为刺激隐核虫病后，按8~10 g/m3的量泼洒上述复合制剂，连续浸浴3天，能有效治愈大黄鱼刺激隐核虫病，并防止细菌继发感染。本发明具有制备方法简单、使用方便，可显著降低大黄鱼刺激隐核虫病的死亡率，提高养殖经济效益。

权利要求

1.一种用于治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂，其特征在于：按质量分数计，其原料组成为：硝唑尼特10% 15%、硫酸铜5% 7%、土霉素25% 30%、溶解剂48% 60%，以上原料的总和~ ~ ~ ~为100%。

2.根据权利要求1所述的用于治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂，其特征在于：按质量分数计，其组成为：硝唑尼特12%、硫酸铜5%、土霉素30%、溶解剂53%。

3.根据权利要求1或2所述的用于治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂，其特征在于：所述的溶解剂为二甲基亚砜。

4.一种制备如权利要求1所述的用于治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）称取硝唑尼特、硫酸铜、土霉素、溶解剂，备用；

（2）将硫酸铜加入溶解剂中，并搅拌至硫酸铜完全溶解；

（3）将硝唑尼特和土霉素依次加入步骤（2）所得的混合溶液中并搅拌至完全溶解，即得用于治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂。

说明书

一种用于治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂

技术领域

[0001] 本发明属于水产养殖技术领域，具体涉及一种用于治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂及其使用方法。

背景技术

[0002] 刺激隐核虫(Cryptocaryon  irritans  Brown)，又叫海水小瓜虫（Ichthyophthirius marinus），属原生动物门、纤毛亚门、寡膜纤毛纲、膜口亚纲、膜口目、凹口科、隐核虫属。除黄斑蓝子鱼(Siganus oramin)等少数几种鱼外，刺激隐核虫能感染大部分海水硬骨鱼类，并易导致大量死亡，对海水养殖危害严重。在我国大黄鱼(Pseudosciaena crocea)养殖生产中，刺激隐核虫病发病死亡率高达60％～100％，流行季节病死率可达80％以上，每年导致的经济损失达2亿元以上。强化营养提高鱼体免疫力、降低养殖密度、定期消毒等是养殖生产中预防刺激隐核虫的常见措施，但成效甚微；目前国内外对这种寄生虫病的防治主要采用硫酸铜、奎宁、亚甲蓝、苯扎氯铵、苯氧乙醇、福尔马林等浸浴治疗，但这些药物对刺激隐核虫病没有显著的疗效。因此，缺乏安全、高效的治疗药物是刺激隐核虫病不能有效控制并导致较大损失的根本原因，因而急需对这种寄生虫病有特效的药物制剂。

[0003] 硝唑尼特(nitazoxanide，NTZ)是一种新的广谱、高效抗寄生虫和微生物药物，对多种原虫、吸虫、线虫、蠕虫感染和敏感肠道菌感染有特效，其安全性高，抗菌杀虫谱宽，应用广泛。但尚未见硝唑尼特对鱼类寄生虫的驱杀效果研究报道。

发明内容

[0004] 本发明的目的在于，针对上述现有技术的不足，提供一种制作工艺简单、使用方便、杀虫效果好的用于治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂及其制备，为临床提供一种有效的治疗方法。

[0005] 为实现上述发明目的，本发明采取的技术方案是：

[0006] 一种用于治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂，按质量分数计，其组成为：硝唑尼特10% 16%、硫酸铜3% 6%、土霉素25% 30%、溶解剂48% 60%，以上原料的总和为100%。~ ~ ~ ~

[0007] 优选的，上述用于治疗刺激隐核虫病的复合制剂，按质量分数计，其组成为：硝唑尼特12%、硫酸铜5%、土霉素30%、溶解剂53%。

[0008] 作为优选，所述的溶解剂为二甲基亚砜。

[0009] 本发明用于治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂的配方依据及各原料特点在于：有效组分硝唑尼特、硫酸铜和土霉素，杀虫灭菌双效合一，且相对于单一组分作用时的杀灭效果更加快速高效，通过硝唑尼特与硫酸铜的药物配伍，充分发挥硝唑尼特对刺激隐核虫幼虫和滋养体的杀灭作用及对包囊的抑制作用，又兼顾硫酸铜对刺激隐核虫成体和幼虫的杀灭作用，在驱杀虫的药物中添加了土霉素浸浴病鱼，不但有效驱除了刺激隐核虫，在驱杀虫的同时防止细菌继发感染，也是病害控制的重要因素，取得了良好效果。

[0010] 一种治疗大黄鱼刺激隐核虫病复合制剂的制备方法，步骤如下：

[0011] （1）按配比称取各原料组分；

[0012] （2）将硫酸铜加入溶解剂二甲亚砜中，并搅拌至硫酸铜完全溶解；

[0013] （3）将硝唑尼特和土霉素依次加入步骤（2）所得的混合溶液中并搅拌至完全溶解，即得到用于治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合硝唑尼特制剂。

[0014] 本发明用于治疗大黄鱼刺激隐核虫病复合制剂使用时，根据网箱或池塘的施用面积及病虫害程度确定用量，剂量为8 10 g/m3，网箱经套袋和充气增氧，减少水体流动，维持~水体溶氧量4mg/L以上，复合制剂用水稀释500～1000倍均匀泼洒于网箱内，连续浸浴3天；
池塘可直接将复合硝唑尼特制剂用水稀释后均匀泼洒于池塘中，维持药物浓度连续药浴浸泡3天后换水。

[0015] 本发明的有益效果在于：

[0016] 1）本发明的复合制剂可有效杀灭鱼体上的刺激隐核虫，并防止细菌继发感染；具有驱杀大黄鱼体表、鳃上等部位寄生的刺激隐核虫滋养体、幼虫和防止细菌继发感染的作用；

[0017] 2）制备方法简单，使用方便，驱杀刺激隐核虫效果显著，同时防止了细菌继发感染；并且药效温和，水溶性好，药效稳定，对水产动物刺激性小；

[0018] 3）本发明主要成份毒性低，安全性高，硝唑尼特与硫酸铜混合使用具有协同增效作用，提高了药效，且不易产生耐药性，克服其他药物如福尔马林、高锰酸钾、亚甲基蓝、奎宁、苯扎氯铵、苯氧乙醇、以及一些中草药等作用时间久，疗效差等问题。

具体实施方式

[0019] 为了更清楚的理解本发明以及本发明制剂的药效，以下通过发明人给出的依本发明技术方案所完成的具体的实施例对本发明作进一步的详细描述，这些仅是本发明较好的实施例，但不限于这些实施例。

[0020] 本发明制备的用于治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂，主要原料来源及规格，见表1。

[0021] 表1 主要原料来源及规格

[0022]

[0023] 实施例1

[0024] 一种治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂，由下述质量百分比的原料组成：硝唑尼特10%、硫酸铜3%、土霉素30%、二甲基亚砜57%；

[0025] 制备：按配比称取各原料组分；依次将硫酸铜、硝唑尼特和土霉素溶于二甲基亚砜，搅拌均匀，得到一种墨绿色液体，即为本发明实施例1 用于治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂。

[0026] 实施例2

[0027] 一种治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂，由下述质量百分比的原料组成：硝唑尼特10%、硫酸铜6%、土霉素30%、二甲基亚砜54%；

[0028] 制备：同实施例1。

[0029] 实施例3

[0030] 一种治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂，由下述质量百分比的原料组成：硝唑尼特16%、硫酸铜6%、土霉素25%、二甲基亚砜53%；

[0031] 制备：同实施例1。

[0032] 实施例4

[0033] 一种治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂，由下述质量百分比的原料组成：硝唑尼特16%、硫酸铜3%、土霉素30%、二甲基亚砜51%；

[0034] 制备：同实施例1。

[0035] 实施例5

[0036] 一种治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂，由下述质量百分比的原料组成：硝唑尼特15%、硫酸铜5%、土霉素30%、二甲基亚砜50%；

[0037] 制备：同实施例1。

[0038] 上述实施例可以列举很多，再此不一一列举，从申请人所做的大量实验得到的数据证明，只要是按照本发明的技术方案的参数范围选择，即可制备出达到本发明目的的治疗大黄鱼刺激隐核虫病的复合制剂，效果良好。

[0039] 上述实施例中复合制剂的使用方法：对发病网箱进行套袋和充气增氧，减少水体流动，并维持水体溶氧量4mg/L以上，将上述复合硝唑尼特制剂用水稀释500～1000倍均匀泼洒网箱内；也可直接泼洒于发病池塘中，以池塘、网箱的水量为参考，使用剂量为8 10 g/~m3均可，维持药物浓度连续浸泡3天。

[0040] 以下是本发明复合硝唑尼特制剂用于杀灭大黄鱼刺激隐核虫效果试验。

[0041] 硝唑尼特对刺激隐核虫的杀灭试验：

[0042] 1 材料和方法

[0043] 1.1 试验鱼

[0044] 由福建福鼎海鸥水产食品有限公司网箱养殖基地提供，抽样检查鱼体表和鳃部寄生有大量刺激隐核虫，规格50～130 g/尾，各批次试验规格不同，同一试验规格一致；经活水船运回实验室后，暂养于直径 1.0 m 的玻璃钢桶中，连续充气，每天换水1次（经砂滤），每次换水30 %左右；暂养2～3 d后检查，虫体量数量不断增加，即可用于试验。

[0045] 1.2刺激隐核虫幼虫

[0046] 将从患刺激隐核虫病大黄鱼体表和鳃脱落于玻璃钢桶底的的刺激隐核虫包囊，收集到实验室后，在25℃控温条件下孵化约 40 h后收集获得幼虫，海水调整幼虫浓度至50个/50μL。

[0047] 1.3硝唑尼特对刺激隐核虫幼虫的体外杀灭试验

[0048] 将二甲亚砜溶解的硝唑尼特，用海水稀释至浓度2μg/L、4μg/L 10μg/L、20μg/L和40μg/L，分别取50μL药物加至96孔细胞板内，加入刺激隐核虫幼虫液 50μL，最终硝唑尼特浓度为1μg/L，2μg/L，5μg/L，10μg/L和20μg/L，每个浓度梯度设3个重复，培养板放入25 ℃温控培养箱内4 h后，倒置显微镜下观察刺激隐核虫幼虫的死亡情况，统计各孔的刺激隐核虫幼虫死亡率。

[0049] 1.4硝唑尼特对刺激隐核虫滋养体的杀灭试验

[0050] 试验设置为硝唑尼特0.5 g/m3、1.0 g/m3和硝唑尼特0.5 g/m3 + 硫酸铜0.5 g/m3和无药对照组，每组6尾病鱼，3个重复。不间断充气，试验水温26 ℃～27 ℃，浸浴72 h，每日记录鱼体死亡情况，分别于48 h和72 h取全鳃镜检滋养体数量，统计杀虫率。

[0051] 杀虫率(%)=(对照组的刺激隐核虫平均存活数量－试验组的刺激隐核平均存活数量)/对照组的刺激隐核平均存活数量×100%。

[0052] 1.5 硝唑尼特复配硫酸铜对刺激隐核虫滋养体的杀虫试验

[0053] 设置硝唑尼特浓度（0、1.0、1.6g/ m3）、复配硫酸铜（0.3、0.6 g/m3），设计9个试验组（见表2），每组20尾大黄鱼幼鱼，规格6～8 cm。试验于盛水50 L的150 L塑料桶内进行，浸浴72 h，试验过程不间断充气，试验水温26℃～27℃。分别于24 h、48 h和72 h取病鱼的鳃、鳍和刮取30%左右体表的粘液进行镜检，每组每次取鱼3尾，以3尾鱼的滋养体数量平均值为统计数据，统计杀虫率。

[0054] 表2硝唑尼特复配硫酸铜对刺激隐核虫滋养体的杀虫试验浓度组

[0055]

[0056] 1.6 硝唑尼特与硫酸铜复配制剂处理患病大黄鱼的治疗试验。

[0057] 根据前期试验结果，设置为硝唑尼特2.0 g/m3+硫酸铜0.5 g/m3、硝唑尼特1.5 g/m3+硫酸铜 0.5 g/m3、硝唑尼特1.2 g/m3+硫酸铜0.5 g/m3+土霉素3 g/m3和空白对照组。于1.5 m3玻璃纤维桶中放水1.0 m3， 每组放15尾病鱼进行试验，试验过程不间断充气，试验水温26 ℃～27 ℃，浸浴72 h，分别于浸浴48 h和72 h取全鳃和刮取30%左右体表的粘液检查体表滋养体寄生状况，并统计患病大黄鱼的成活率。

[0058] 鱼平均成活率(%)=镜检时的鱼存活数量/投放的鱼数量×100%

[0059] 2 结果

[0060] 2.1硝唑尼特对刺激隐核虫幼虫的体外杀灭效果

[0061] 硝唑尼特对刺激隐核虫幼虫的体外杀灭作用见表3。由表3可知：硝唑尼特对刺激隐核虫幼虫具有较强的杀灭作用，并且随着浓度的增加其杀灭作用逐渐增强，其浓度为20.0 μg/L时，对刺激隐核虫幼虫的杀灭率达到100%。

[0062] 表3 硝唑尼特对刺激隐核虫幼虫的杀灭作用

[0063]

[0064] 2.2硝唑尼特对刺激隐核虫滋养体的杀灭效果

[0065] 硝唑尼特对刺激隐核虫滋养体的杀灭作用见表4，由表4可知：浸浴48 h, 硝唑尼特0.5 g/m3+ 硫酸铜0.5 g/m3试验组抽样检查未发现滋养体寄生，硝唑尼特0.5 g/m3和硝唑尼特1.0 g/m3组试验鱼的鳃和体表少量滋养体，对照组鳃中等、体表较多滋养体；浸浴72h, 硝唑尼特0.5 g/m3+ 硫酸铜0.5 g/m3组及硝唑尼特1.0 g/m3组试验鱼的虫体完全脱落，硝唑尼特0.5 g/m3组鳃少量滋养体，体表滋养体脱落，而对照组鳃和体表均有中等数量的滋养体寄生。试验过程中试验组病鱼无死亡，而对照组的死亡率均为33.33%。

[0066] 表4 硝唑尼特对滋养体的驱除作用

[0067]

[0068] 2.3硝唑尼特复配硫酸铜对刺激隐核虫滋养体的杀虫效果

[0069] 硝唑尼特复配硫酸铜对刺激隐核虫滋养体的杀虫作用见表5，由表5可知：硝唑尼特驱除滋养体的效果与药物浓度呈现正相关，即试验浓度越高，驱除滋养体的效果越好；硝唑尼特与硫酸铜复配可明显提高其对滋养体的驱除作用，表现出药物叠加效应。

[0070] 表5 不同浓度硝唑尼特复配硫酸铜对刺激隐核虫滋养体的杀虫效果

[0071]

[0072] 2.4不同浓度硝唑尼特复配制剂处理患病大黄鱼的治疗效果。

[0073] 硝唑尼特1.2 g/m3+CuSO40.5 g/m3+土霉素3 g/m3组病鱼试验期间的治愈率达到100%（表6）。而硝唑尼特2 g/m3+ CuSO40.5 g/m3组、硝唑尼特1.5 g/m3+ CuSO40.5 g/m3组病鱼在浸泡72 h的治愈率分别为73.33%和73.67%，检查试验组鱼的体表和鳃，未发现刺激隐核虫滋养体寄生，鱼体表无炎症出现，鳃丝恢复正常，试验鱼恢复摄食，说明试验鱼已痊愈；
而对照组在72 h全部死亡，检查死亡病鱼体表和鳃，仍有大量刺激隐核虫滋养体寄生。结果表明硝唑尼特复配制剂对感染有刺激隐核虫的大黄鱼鱼具有较强的保护作用。

[0074] 表6 不同浓度硝唑尼特复配制剂处理患病大黄鱼的治疗效果

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