一种含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种含有3,5‑二氯水杨醛缩4‑氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物，为如下结构式(I)的配合物。本发明还公开了该含有3,5‑二氯水杨醛缩4‑氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的制备方法以及在制备抗癌药物中的应用。

权利要求

1.一种含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物，为如下结构式(I)的配合物：

(I)；所述的配合物(I)为晶体结构，其晶体学数据如下：三斜晶系，空间群P-1，a = 

0.8972(4) nm，b = 0.9010(4) nm，c = 1.7574(8) nm，α= 104.410(5)°，β= 92.753(5)°，γ= 100.603(6)°，Z= 2，V= 1.3459(10) nm3；分子中镍原子为六配位的畸变八面体构型；

所述的配合物(I)的红外数据：FT-IR (KBr, cm-1): 3066, 3053, 1597, 1571, 1481, 

1469, 1319, 1209, 1037；所述的配合物(I)的制备方法，其特征是在反应容器中加入3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱及溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入50 mmol/L的乙酸镍的乙醇溶液，在搅拌回流下反应5～11 h，然后滴加吡啶，继续回流5～15 h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶，得棕色透明晶体，即为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物；其中，3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与乙酸镍的物质的量比为1:1～1:1.2；溶剂无水乙醇的用量为每毫摩尔3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱加12～24毫升；吡啶的用量为每毫摩尔3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱14～28毫升；所述的配合物(I)具有一定的热稳定范围，在93℃以下能稳定存在。

2.权利要求1所述含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物在制备抗癌药物中的应用。

3.权利要求2所述的应用，其中所述癌细胞为人结肠癌细胞、人肝癌细胞、人乳腺癌细胞、人子宫颈癌细胞。

说明书

一种含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的

镍配合物及其制备方法和应用

技术领域

[0001] 本发明涉及一种含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物及其制备方法，以及该含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物在制备抗癌药物中的应用。

背景技术

[0002] Schiff碱主要是指含有亚胺或甲亚胺特性基团（-RC=N-）的一类有机化合物，在合成上具有合成周期短，操作方法简便等特点、并且与金属离子具有很好的配位作用。Schiff碱金属配合物的研究始于20世纪五十年代，因其独特的结构而广泛应用于抑菌及抗肿瘤活性研究、抑制超氧自由基活性、化学分析以及与DNA的相互作用等多方面，尤其是其具有的较强的抑菌、抗癌生物活性，这使得人们越来越关注这类配合物的生物药用价值。例如，Hodnett课题组在1970年发现了含有Schiff碱的有机配合物具有一定的抗肿瘤活性，并且，当它与部分金属离子形成配合物后抗癌活性增强。

[0003] 文献(化学试剂, 2013, 35(11): 1023-1027)报道，一种氨基酸Schiff碱及其铜、镍配合物的合成及抑菌活性。

[0004] 文献(化学试剂, 2003, 25(5): 274-276)报道，Schiff碱金属配合物的抗癌活性研究进展。

[0005] 文献(Inorganic Chemistry Communications, 2015, 57: 8-10)报道，过渡金属Cu（II）、Cd（II）、Zn（II）Shciff碱配合物对人肺腺癌细胞（A549）、人胃癌细胞（BGC-823和SGC-7901）都具有较好的抑制作用。

[0006] 文献(Journal of Molecular Strcture, 2013, 1049: 326-335)报道，Cu（II）Shciff碱配合物对人体乳腺癌细胞（MCF7）、人肝癌细胞（HepG2）、人结肠癌细胞（HCT-116）的抑制活性顺序是：MCF7＞HCT-116＞HepG2。

[0007] 基于Schiff碱金属配合物是经实验证明具有抗癌活性的物质，本发明选择3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱和吡啶为配体，与乙酸镍在一定条件下反应，合成得到了对人结肠癌细胞（Colo205）、人肝癌细胞（HepG2）、人乳腺癌细胞（MCF7）和人子宫颈癌细胞（Hela）具有一定抑制活性的配合物，为开发抗癌药物提供了新的途径。

发明内容

[0008] 本发明的第一目的是提供了一种含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物。

[0009] 本发明的第二目的是提供上述含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物制备方法。

[0010] 本发明的第三目的是提供上述含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物在制备抗癌药物中的应用。

[0011] 作为本发明的第一方面的一种含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物，为结构式(I)的配合物

[0012]

[0013] (I)。

[0014] 本发明的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物经元素分析、红外光谱及X-射线单晶衍射结构分析，结果如下：

[0015] 元素分析(C28H21Cl3N4O2Ni)：计算值：C 55.08，H 3.47，N 9.18；实测值：C 55.04，H 3.52，N 9.23。

[0016] FT-IR (KBr, cm-1): 3066, 3053, 1597, 1571, 1481, 1469, 1319, 1209, 1037。

[0017] 本发明的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物为晶体结构，其晶体为三斜晶系，空间群P-1，a = 0.8972(4) nm，b = 0.9010(4) nm，c = 1.7574(8) nm，α= 104.410(5)°，β= 92.753(5)°，γ= 100.603(6)°，Z= 2，V= 1.3459(10) nm3。

[0018] 本发明的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的结构特点是：分子中镍原子为六配位的畸变八面体构型。

[0019] 作为本发明的第二方面的一种含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的制备方法，是在反应容器中加入3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱及溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入50 mmol/L的乙酸镍的乙醇溶液，在搅拌回流下反应5～11 h，然后滴加吡啶，继续回流5～15 h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶，得棕色透明晶体，即为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物。

[0020] 在本发明的一个优选实施例中，所述3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与乙酸镍的物质的量比为1:1～1:1.2。

[0021] 在本发明的一个优选实施例中，所述溶剂无水乙醇的用量为每毫摩尔3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱加12～24毫升。

[0022] 在本发明的一个优选实施例中，所述吡啶的用量为每毫摩尔3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱14～28毫升。

[0023] 作为本发明的第三方面的一种含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物在制备抗癌药物中的应用。

[0024] 申请人对上述含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物进行了体外抗肿瘤活性确定研究，确认了含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物具有一定的抗癌生物活性，也就是说上述配合物的用途是在制备抗癌药物中的应用，具体的说就是在制备抗人结肠癌、人肝癌、人乳腺癌、人子宫颈癌药物中的应用。

[0025] 本发明的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物对人结肠癌细胞、人肝癌细胞、人乳腺癌细胞和人子宫颈癌细胞显示出良好的抗癌活性，本发明的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物抗癌活性高、成本低、制备方法简单等特点，为开发新的抗癌药物提供了新途径。

附图说明

[0026] 图1为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的IR谱图。

[0027] 图2为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的晶体结构图。

[0028] 图3为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的TG-DTG曲线。

具体实施方式

[0029] 通过以下实施例进一步详细说明本发明，但应注意本发明的范围并不受这些实施例的任何限制。

[0030] 实施例1：

[0031] 含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的制备：

[0032] 在100mL三口烧瓶中加入0.314 g (1.0 mmol)3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱及15mL溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入20mL 50 mmol/L的乙酸镍的乙醇溶液，在搅拌回流下反应5 h，然后滴加14mL吡啶，继续回流8 h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶，得棕色透明晶体，即为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物。产率：83.7%。熔点：93～94℃(dec)。

[0033] 元素分析(C28H21Cl3N4O2Ni)：计算值：C 55.08，H 3.47，N 9.18；实测值：C 55.04，H 3.52，N 9.23。

[0034] FT-IR (KBr, cm-1): 3066, 3053, 1597, 1571, 1481, 1469, 1319, 1209, 1037。

[0035] 晶体学数据：三斜晶系，空间群P-1，a = 0.8972(4) nm，b = 0.9010(4) nm，c = 1.7574(8) nm，α= 104.410(5)°，β= 92.753(5)°，γ= 100.603(6)°，Z= 2，V= 1.3459(10) nm3。

[0036] 实施例2：

[0037] 含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的制备：

[0038] 在100mL三口烧瓶中加入0.314 g (1.0 mmol)3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱及12mL溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入22mL 50 mmol/L的乙酸镍的乙醇溶液，在搅拌回流下反应8 h，然后滴加18mL吡啶，继续回流5 h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶，得棕色透明晶体，即为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物。产率：85.1%。熔点：93～94℃(dec)。

[0039] 元素分析(C28H21Cl3N4O2Ni)：计算值：C 55.08，H 3.47，N 9.18；实测值：C 55.04，H 3.52，N 9.23。

[0040] FT-IR (KBr, cm-1): 3066, 3053, 1597, 1571, 1481, 1469, 1319, 1209, 1037。

[0041] 晶体学数据：三斜晶系，空间群P-1，a = 0.8972(4) nm，b = 0.9010(4) nm，c = 1.7574(8) nm，α= 104.410(5)°，β= 92.753(5)°，γ= 100.603(6)°，Z= 2，V= 1.3459(10) nm3。

[0042] 实施例3：

[0043] 含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的制备：

[0044] 在100mL三口烧瓶中加入0.314 g (1.0 mmol)3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱及20mL溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入24mL 50 mmol/L的乙酸镍的乙醇溶液，在搅拌回流下反应9 h，然后滴加28mL吡啶，继续回流13 h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶，得棕色透明晶体，即为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物。产率：85.0%。熔点：93～94℃(dec)。

[0045] 元素分析(C28H21Cl3N4O2Ni)：计算值：C 55.08，H 3.47，N 9.18；实测值：C 55.04，H 3.52，N 9.23。

[0046] FT-IR (KBr, cm-1): 3066, 3053, 1597, 1571, 1481, 1469, 1319, 1209, 1037。

[0047] 晶体学数据：三斜晶系，空间群P-1，a = 0.8972(4) nm，b = 0.9010(4) nm，c = 1.7574(8) nm，α= 104.410(5)°，β= 92.753(5)°，γ= 100.603(6)°，Z= 2，V= 1.3459(10) nm3。

[0048] 实施例4：

[0049] 含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的制备：

[0050] 在500mL三口烧瓶中加入1.570 g (5.0 mmol)3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱及90 mL溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入110mL 50 mmol/L的乙酸镍的乙醇溶液，在搅拌回流下反应7 h，然后滴加90mL吡啶，继续回流9 h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶，得棕色透明晶体，即为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物。产率：80.6%。熔点：93～94℃(dec)。

[0051] 元素分析(C28H21Cl3N4O2Ni)：计算值：C 55.08，H 3.47，N 9.18；实测值：C 55.04，H 3.52，N 9.23。

[0052] FT-IR (KBr, cm-1): 3066, 3053, 1597, 1571, 1481, 1469, 1319, 1209, 1037。

[0053] 晶体学数据：三斜晶系，空间群P-1，a = 0.8972(4) nm，b = 0.9010(4) nm，c = 1.7574(8) nm，α= 104.410(5)°，β= 92.753(5)°，γ= 100.603(6)°，Z= 2，V= 1.3459(10) 
3
nm。

[0054] 实施例5：

[0055] 含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的制备：

[0056] 在1000mL三口烧瓶中中加入3.140 g (10.0 mmol)3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱及240mL溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入210mL 50 mmol/L的乙酸镍的乙醇溶液，在搅拌回流下反应10 h，然后滴加220mL吡啶，继续回流15 h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶，得棕色透明晶体，即为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物。产率：81.2%。熔点：93～94℃(dec)。

[0057] 元素分析(C28H21Cl3N4O2Ni)：计算值：C 55.08，H 3.47，N 9.18；实测值：C 55.04，H 3.52，N 9.23。

[0058] FT-IR (KBr, cm-1): 3066, 3053, 1597, 1571, 1481, 1469, 1319, 1209, 1037。

[0059] 晶体学数据：三斜晶系，空间群P-1，a = 0.8972(4) nm，b = 0.9010(4) nm，c = 1.7574(8) nm，α= 104.410(5)°，β= 92.753(5)°，γ= 100.603(6)°，Z= 2，V= 1.3459(10) 
3
nm。

[0060] 实施例6：

[0061] 含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的制备：

[0062] 在1000mL三口烧瓶中中加入3.140 g (10.0 mmol)3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱及160mL溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入225mL 50 mmol/L的乙酸镍的乙醇溶液，在搅拌回流下反应11 h，然后滴加240mL吡啶，继续回流11 h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶，得棕色透明晶体，即为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物。产率：79.5%。熔点：93～94℃(dec)。

[0063] 元素分析(C28H21Cl3N4O2Ni)：计算值：C 55.08，H 3.47，N 9.18；实测值：C 55.04，H 3.52，N 9.23。

[0064] FT-IR (KBr, cm-1): 3066, 3053, 1597, 1571, 1481, 1469, 1319, 1209, 1037。

[0065] 晶体学数据：三斜晶系，空间群P-1，a = 0.8972(4) nm，b = 0.9010(4) nm，c = 1.7574(8) nm，α= 104.410(5)°，β= 92.753(5)°，γ= 100.603(6)°，Z= 2，V= 1.3459(10) nm3。

[0066] 试验例：

[0067] 本发明的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物，其体外抗癌活性测定是通过MTT实验方法实现的。

[0068] MTT分析法：

[0069] 以代谢还原3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide为基础。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶标仪测定特征波长的光密度，可间接反映活细胞数量。

[0070] 采用MTT法来测定实施例1制备的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物对人结肠癌细胞（Colo205）、人肝癌细胞（HepG2）、人乳腺癌细胞（MCF7）、人子宫颈癌细胞（Hela）和人肺癌细胞（NCI-H460）的抑制活性。

[0071] 细胞株及培养体系：Colo205、HepG2、MCF7、HEK93和NCI-H460细胞株取自美国组织培养库（ATCC）。用含10%胎牛血清的RPMI 1640（GIBICO公司）培养基，在5%（体积分数）CO2、37℃饱和湿度培养箱内进行体外培养。

[0072] 测试过程：将测试药液（1ng/mL～100ug/mL）按照浓度的浓度梯度分别加入到各个孔中，每个浓度设6个平行孔。实验分为药物实验组（分别加入不同浓度的测试药）、对照组（只加培养液和细胞，不加测试药）和空白组（只加培养药，不加细胞和测试药）。将加药后的孔板置于37℃，5%CO2培养箱中培养72h。对照药物的活性按照测试样品的方法测定。在培养了72h后的孔板中，每孔加MTT 40uL（用D-Hanks缓冲液配成4mg/mL）。在37℃放置4h后，移去上层清液。每孔加150uL DMSO，振荡5min，使Formazan结晶溶解。最后，利用自动酶标仪在570nm波长处检测各孔的光密度。

[0073] 数据处理：数据处理使用Graph Pad Prism version 5.0程序，配合物IC50通过程序中具有S形剂量响应的非线性回归模型进行拟合得到。

[0074] 以MTT分析法对人结肠癌细胞（Colo205）、人肝癌细胞（HepG2）、乳腺癌细胞（MCF7）、子宫颈癌细胞（Hela）和人肺癌细胞（NCI-H460）细胞株进行分析，测定其IC50值，结果如表1所示，结论为：由表中数据可知，以本发明的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物用作抗癌药物，对人结肠癌细胞（Colo205）、人肝癌细胞（HepG2）、人乳腺癌细胞（MCF7）和人子宫颈癌细胞（Hela）具有一定的药效，可作为抗癌药物的候选化合物。

[0075] 表1 含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物抗癌药物体外活性测试数据

[0076]

[0077] 其余实施例制备的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物以MTT法对人结肠癌细胞（Colo205）、人肝癌细胞（HepG2）、人乳腺癌细胞（MCF7）、人子宫颈癌细胞（Hela）和人肺癌细胞（NCI-H460）的抗癌活性测试方法同试验例，测试结果与表1基本相同。