N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺及其制备与应用转让专利
申请号 : CN201410439877.0
文献号 : CN105367564B
文献日 : 2018-03-23
发明人 : 胡艾希 , 张明明 , 丁娜 , 叶姣 , 颜晓维 , 向建南
申请人 : 湖南大学
摘要 :
本发明涉及化学结构式I所示的N‑[4‑苯基‑5‑(1，2，4‑三唑‑1‑基)噻唑‑2‑基]酰胺：其中，X1、X3选自：氯、溴、氟、碘；X4选自：氢、氘、甲基、乙基、氯、溴、氟、碘；X2、X5选自：氢、氘、甲基、乙基；R选自：氢、甲基；n选自：0、1、2、3；Y选自：氢、C1～C2烷基、C3～C11直链烷基或支链烷基、C1～C2卤代烷基或二卤代烷基、C3～C5卤代直链烷基或卤代支链烷基、苯基。N‑[4‑苯基‑5‑(1，2，4‑三唑‑1‑基)噻唑‑2‑基]酰胺在制备Hela细胞的抗癌药物或神经氨酸酶抑制剂中应用。
权利要求 :
1.化学结构式I所示的N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺：其中，X1、X3选自：氯、溴、氟或碘；X4选自：氢、氘、甲基、乙基、氯、溴、氟或碘；X2、X5选自：氢、氘、甲基或乙基；R选自：氢或甲基；n选自：0或1；Y选自：氢、C1～C2烷基、C1～C2氯代烷基、C3～C5氯代直链烷基或氯代支链烷基、C1～C2溴代烷基、C1～C2氟代烷基或C1～C2碘代烷基。
2.一类N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺，选自N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]乙酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-
2-基]氯乙酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-氯丙酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙烯酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]异丁酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-甲基丙烯酰胺、N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，
4-三唑-1-基)噻唑-2-基]氯乙酰胺、N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-氯丙酰胺、N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙烯酰胺、N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]异丁酰胺或N-[4-(2，4-二氯苯基)-
5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-甲基丙烯酰胺。
3.权利要求1所述的N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺的制备方法：其特征在于它制备反应如下：其中，X1～X5、R、n、Y的定义如权利要求1所述；MBr选自：溴化钠或溴化钾。
4.权利要求3所述的制备方法，其中化学结构式Ⅱ所示的2-溴-1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮的制备方法；其特征在于采用双氧水-MBr体系溴化1-苯基-2-(1，2，4-三唑-
1-基)乙酮制备2-溴-1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮；MBr选自：溴化钠或溴化钾；1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮、MBr和双氧水的投料摩尔比为1.0∶1.0∶1.0～1.0∶1.5∶3.5。
5.权利要求1或2所述的N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺在制备抗Hela细胞的抗癌药物中应用。
6.化学结构式I所述的N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺在制备神经氨酸酶抑制剂中的应用：
1 3 4 2 5
其中，X 、X选自：氯、溴、氟或碘；X 选自：氢、氘、甲基、乙基、氯、溴、氟或碘；X 、X选自：氢、氘、甲基或乙基；n选自：0；Y选自：C1～C2烷基、C1～C2氯代烷基、C1～C2溴代烷基、C1～C2氟代烷基或C1～C2碘代烷基。
说明书 :
N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺及其制备
与应用
技术领域
[0001] 本发明涉及新化合物的制备与应用，具体是N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺的制备与应用。
背景技术
[0002] 2-溴-1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮是制备4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-1，3-噻唑-2-胺及其衍生物的关键中间体。2-溴-1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮的制备及其在噻唑衍生物的合成上的应用已有描述[J.Organomet.Chem.2006，691：2686；
Synth.Commun.2007，37：199；Heteroat Chem 2007，18：55；高等学校化学学报，2007，28：
270-273；有机化学，2012，32：1715-1718]。方建新等描述了在乙酸中用分子溴溴化1-苯基-
2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮得到2-溴-1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮；制备反应如下：
Synth.Commun.2007，37：199；Heteroat Chem 2007，18：55；高等学校化学学报，2007，28：
270-273；有机化学，2012，32：1715-1718]。方建新等描述了在乙酸中用分子溴溴化1-苯基-
2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮得到2-溴-1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮；制备反应如下：
[0003]
[0004] 在上述典型的分子溴溴化反应中，溴元素的利用率小于50％。生成的副产物溴化氢没有回收，易造成环境污染。
[0005] 张沐等[有机化学，2013，33(09)：1955-1959]描述了N-芳基-4-(吡啶-2-基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺衍生物的合成与生物活性；其中关键中间体2溴-1-(吡啶-2-基)-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮的制备反应如下：
[0006]
[0007] 在该溴化反应中，三溴化吡啶具有一定的选择性且反应条件温和副反应少，但是，它在潮湿空气中很容易分解释放出溴素，有一定的腐蚀性，不方便保存运输。其溴代反应中的原子利用率较溴素更低。
[0008] 代黎等[药物实践杂志，2013，31(03)：195-197]描述了N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)溴化了1-环丙基-2-(2-氟苯基)乙酮，制备反应如下：
[0009]
[0010] 在本溴化反应中，NBS具有较高的选择性，但它有强刺激性，价格也相对较贵。
[0011] 5-(1,2,4-三唑)噻唑衍生物具有较好的生物活性，其中部分4-芳基-5-(1,2,4-三唑)噻唑衍生物及其生物活性如表1所示：
[0012] 表14-芳基-5-(1,2,4-三唑)噻唑衍生物的生物活性
[0013]
[0014] 刘建兵等[Syn.Commun,2011，41：3197-3206]描述了4-(2，4-二氟苯基-5-(1，2，4-三唑基)苯氨基噻唑衍生物的合成及其杀菌活性。为了增加活性三唑基的柔性，在三唑基和噻唑基之间增加了1碳原子合成了5-(1，2，4-三唑基-甲基)苯氨基噻唑衍生物。其化学结构分别为：
[0015]
发明内容
[0016] 本发明的目的在于提供化学结构式Ⅰ所示N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺：
[0017]
[0018] 其中，X1、X3选自：氯、溴、氟、碘；X4选自：氢、氘、甲基、乙基、氯、溴、氟、碘；X2、X5选自：氢、氘、甲基、乙基；R选自：氢、甲基；n选自：0、1、2、3；Y选自：氢、C1～C2烷基、C3～C11直链烷基或支链烷基、C1～C2氯代烷基或二氯代烷基、C3～C5氯代直链烷基或氯代支链烷基、C1～C2溴代烷基、C3～C5溴代直链烷基或溴代支链烷基、C1～C2氟代烷基、C3～C5氟代直链烷基或氟代支链烷基、C1～C2碘代烷基、C3～C5碘代直链烷基或碘代支链烷基、苯基。
[0019] 本发明的目的在于提供的N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺选自N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]乙酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，
2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]氯乙酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-氯丙酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙烯酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]异丁酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-甲基丙烯酰胺、N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]氯乙酰胺、N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-氯丙酰胺、N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙烯酰胺、N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]异丁酰胺、N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-甲基丙烯酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]肉桂酰胺或N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]肉桂酰胺。
2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]氯乙酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-氯丙酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙烯酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]异丁酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-甲基丙烯酰胺、N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]氯乙酰胺、N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-氯丙酰胺、N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙烯酰胺、N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]异丁酰胺、N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-甲基丙烯酰胺、N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]肉桂酰胺或N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]肉桂酰胺。
[0020] 本发明的目的在于提供的N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺的制备方法：其特征在于制备反应如下：
[0021]
[0022]
[0023] 其中，X1、X3选自：氯、溴、氟、碘；X4选自：氢、氘、甲基、乙基、氯、溴、氟、碘；X2、X5选自：氢、氘、甲基、乙基；R选自：氢、甲基；n选自：0、1、2、3；Y选自：氢、C1～C2烷基、C3～C11直链烷基或支链烷基、C1～C2氯代烷基或二氯代烷基、C3～C5氯代直链烷基或氯代支链烷基、C1～C2溴代烷基、C3～C5溴代直链烷基或溴代支链烷基、C1～C2氟代烷基、C3～C5氟代直链烷基或氟代支链烷基、C1～C2碘代烷基、C3～C5碘代直链烷基或碘代支链烷基、苯基；MBr选自：溴化钠或溴化钾。
[0024] 本发明的目的在于提供的N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺具有良好的抗癌活性，可在制备抗癌药物中应用。
[0025] 本发明的目的在于提供了N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺在制备神经氨酸酶抑制剂中的应用。
[0026] 本发明的目的在于提供化学结构式Ⅱ所示2-溴-1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮的制备方法；其特征在于采用双氧水-MBr体系溴化1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮生成2-溴-1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮；MBr选自：溴化钠或溴化钾。
[0027] 本发明的目的在于提供2-溴-1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮的制备方法，其特征在于1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮、MBr和双氧水的投料比(摩尔比)为1.0∶1.0∶1.0～1.0∶1.5∶3.5；MBr选自：溴化钠或溴化钾。
[0028] 本发明的目的在于提供2-溴-1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮的制备方法，其特征在于采用双氧水-MBr体系溴化1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮的工艺，溴的利用率高；合成工艺中溴充分利用；节约了或充分利用资源，从源头上和本质上防治环境污染。
[0029] 本发明与现有技术相比具有如下优点：
[0030] 1.设计制备了N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺，其具有良好的抗癌活性，可在制备抗癌药物中应用。
[0031] 2.本发明首次采用双氧水氧化MBr溴化1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮生成2-溴-1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮；其反应机理如下：
[0032]
[0033] 从反应机理可知：采用双氧水-MBr体系溴化1-苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮的工艺，溴的利用率高；合成工艺中溴充分利用；节约了或充分利用资源，从源头上和本质上防治环境污染。
[0034] 本发明首次发现N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺具有抗流感药物神经氨酸酶活性。
具体实施方式
[0035] 以下实施例旨在说明本发明而不是对本发明的进一步限定。
[0036] 实施例1
[0037] 2-溴-1-(2，4-二氯苯基)-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮的制备
[0038] 0.1mol1-(2，4-二氯苯基)-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮、3mL乙酸、0.14mol溴化钠加入反应瓶中，70℃下搅拌，滴加0.3mol30％双氧水，反应3.0h；得2-溴-1-(2，4-二氯苯基)-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮，收率85.0％。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:8.80(s，1H，三唑5-H)，8.03(s，1H，三唑3-H)，7.71(s，1H，CH)，7.66(d，J＝8.0Hz，1H，C6H36-H)，7.52(d，J＝8.0Hz，1H，C6H33-H)，7.44～7.42(m，1H，C6H35-H)。
[0039] 实施例2
[0040] 2-溴-1-(2，4-二氯-5-氟苯基-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮的制备
[0041] 0.1mol1-(2，4-二氯-5氟苯基)-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮、3mL乙酸、0.14mol溴化钠加入反应瓶中，70℃下搅拌，滴加0.3mol30％双氧水，反应3.0h；得2-溴-1-(2，4-二氯-5-氟苯基)-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮，收率88.0％。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:8.76(s，1H，三唑5-H)，8.03(s，1H，三唑3-H)，7.73(s，1H，CH)，7.59～7.54(m，2H，C6H23，6-H)。
[0042] 实施例3
[0043] 4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺的制备
[0044] 1mmol2-溴-1-(2，4-二氯-5-氟苯基)-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮、20mL乙醇，回流，加入1mmol硫脲，TLC监测，反应10min，冷却至40℃，滴加稀氨水至pH＝7-8，抽滤得浅黄色固体4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺，收率80.3％，m.p.251～253℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：8.02(s，1H，三唑5-H)，7.94(s，1H，三唑3-H)，7.49～7.47(m，1H，苯基3-H)，7.26～7.25(m，1H，苯基6-H)，5.78(s，2H，NH2)。
[0045] 实施例4
[0046] 4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺的制备
[0047] 1mmol2-溴-1-(2，4-二氯苯基)-2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酮、20mL乙醇，回流，加入1mmol硫脲，TLC监测，反应10min，冷却至40℃，滴加稀氨水至pH＝7-8，抽滤得浅黄色固体4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺，收率75.2％，m.p.237～239℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：8.01(s，1H，三唑5-H)，7.89(s，1H，三唑3-H)，7.45(d，J＝2.4Hz，1H，苯基
6-H)，7.34(d，J＝8.0Hz，1H，苯基3-H)，7.29(dd，J＝1.8Hz，J＝8.4Hz，1H，苯基5-H)，5.77(s，2H，NH2)。
6-H)，7.34(d，J＝8.0Hz，1H，苯基3-H)，7.29(dd，J＝1.8Hz，J＝8.4Hz，1H，苯基5-H)，5.77(s，2H，NH2)。
[0048] 实施例5
[0049] N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]乙酰胺的制备[0050] 1mmol4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺、20mL二氯甲烷和2mL三乙胺，常温下滴加乙酰氯，TLC监测，反应2.5h，用NaHCO3溶液、水洗涤，无水硫酸钠干燥后抽滤，旋蒸回收溶剂，柱层析得到浅黄色固体N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]乙酰胺，收率86.0％，m.p.216～219℃。1H NMR(DMSO，400MHz)δ：
12.65(s，1H，NH)，8.65(s，1H，三唑5-H)，8.20(s，1H，三唑3-H)，7.90～7.89(m，1H，苯基3-H)，7.64～7.62(m，1H，苯基6-H)，2.22(s，3H，CH3)。
12.65(s，1H，NH)，8.65(s，1H，三唑5-H)，8.20(s，1H，三唑3-H)，7.90～7.89(m，1H，苯基3-H)，7.64～7.62(m，1H，苯基6-H)，2.22(s，3H，CH3)。
[0051] 实施例6
[0052] N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]氯乙酰胺的制备[0053] 1mmol4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺、20mL二氯甲烷和2mL三乙胺，常温下滴加氯乙酰氯，TLC监测，反应2h，用NaHCO3溶液、水洗涤，用无水硫酸钠干燥，抽滤后旋蒸回收溶剂，柱层析得到浅黄色液体N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]氯乙酰胺，收率52.0％，m.p.146～149℃。1H NMR(DMSO，
400MHz)δ：9.92(s，1H，NH)，8.07(s，1H，三唑5-H)，8.01(s，1H，三唑3-H)，7.53～7.51(m，1H，苯基3-H)，7.27～7.25(m，1H，苯基6-H)，2.22(s，2H，CH2)。
400MHz)δ：9.92(s，1H，NH)，8.07(s，1H，三唑5-H)，8.01(s，1H，三唑3-H)，7.53～7.51(m，1H，苯基3-H)，7.27～7.25(m，1H，苯基6-H)，2.22(s，2H，CH2)。
[0054] 实施例7
[0055] N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙酰胺的制备[0056] 1mmol4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺、5mL丙酸酐，室温搅拌10min，升温至55℃继续反应，TLC监测反应，反应5h，逐滴将反应液加入500mL冰水中，搅拌析出淡黄色固体，收集析出的固体，二氯甲烷萃取，干燥，旋蒸，固体合并得N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙酰胺，收率93.2％，m.p.169～171℃。1H NMR(DMSO，400MHz)δ：12.60(s，1H，NH)，8.64(s，1H，三唑5-H)，8.20(s，1H，三唑3-H)，7.90～7.88(m，1H，苯基3-H)，7.64～7.61(m，1H，苯基6-H)，2.51(q，J＝7.6Hz，2H，COCH2)，1.12(t，J＝7.6，3H，CH3)。
[0057] 实施例8
[0058] N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-氯丙酰胺的制备
[0059] 1mmol4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺、20mL二氯甲烷和2mL三乙胺，常温下滴加2-氯丙酰氯，TLC监测，反应0.5h，用NaHCO3溶液、水洗涤，用无水硫酸钠干燥，抽滤后旋蒸回收溶剂，柱层析得到浅黄色固体N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-氯丙酰胺，收率61.9％，m.p.173～176℃。1H NMR(DMSO，400MHz)δ：13.10(s，1H，NH)，8.62(s，1H，三唑5-H)，8.17(s，1H，三唑3-H)，7.88～7.86(m，
1H，苯基3-H)，7.62～7.60(m，1H，苯基6-H)，4.78(q，J＝8.0Hz，1H，CHCl)，1.63(d，J＝
8.0Hz，3H，CH3)。
1H，苯基3-H)，7.62～7.60(m，1H，苯基6-H)，4.78(q，J＝8.0Hz，1H，CHCl)，1.63(d，J＝
8.0Hz，3H，CH3)。
[0060] 实施例9
[0061] N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙烯酰胺的制备[0062] 1mmol4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺、20mL二氯甲烷和2mL三乙胺，常温下滴加丙烯酰氯，TLC监测，反应1.5h，用NaHCO3溶液、水洗涤，用无水硫酸钠干燥，抽滤后旋蒸回收溶剂，柱层析得到浅黄色液体N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙烯酰胺，收率32.1％，m.p.175～177℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：9.62(s，1H，NH)，8.07(s，1H，三唑5-H)，8.01(s，1H，三唑3-H)，7.51～7.50(m，1H，苯基3-H)，7.26～7.24(m，1H，苯基6-H)，6.61，5.98(2×d，J＝12.0Hz，2H，＝CH2)，6.28(m，
1H，CH＝)。
1H，CH＝)。
[0063] 实施例10
[0064] N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]异丁酰胺的制备[0065] 1mmol4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺、20mL二氯甲烷和2mL三乙胺，常温下滴加异丁酰氯，TLC监测，反应2h，用NaHCO3溶液、水洗涤，用无水硫酸钠干燥，抽滤后旋蒸回收溶剂，柱层析得到浅黄色液体N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]异丁酰胺，收率60.0％，m.p.167～169℃。1H NMR(CDCl3，
400MHz)δ：9.29(s，1H，NH)，8.06(s，1H，三唑5-H)，8.00(s，1H，三唑3-H)，7.51～7.49(m，1H，苯基3-H)，7.25～7.23(m，1H，苯基6-H)，2.71(m，1H，CH)，1.33，1.26(2×d，J＝6.8Hz，6H，2×CH3)。
400MHz)δ：9.29(s，1H，NH)，8.06(s，1H，三唑5-H)，8.00(s，1H，三唑3-H)，7.51～7.49(m，1H，苯基3-H)，7.25～7.23(m，1H，苯基6-H)，2.71(m，1H，CH)，1.33，1.26(2×d，J＝6.8Hz，6H，2×CH3)。
[0066] 实施例11
[0067] N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-甲基丙烯酰胺的制备
[0068] 1mmol4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺、20mL二氯甲烷和2mL三乙胺，常温下滴加异丁酰氯，TLC监测，反应4h，用NaHCO3溶液、水洗涤，用无水硫酸钠干燥，抽滤后旋蒸回收溶剂，柱层析得到浅黄色液体N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-甲基丙烯酰胺，收率60.3％，m.p.105～107℃。1H NMR(DMSO，400MHz)δ：12.73(s，1H，NH)，8.65(s，1H，三唑5-H)，8.21(s，1H，三唑3-H)，7.91～
7.89(m，1H，苯基3-H)，7.69～7.66(m，1H，苯基6-H)，6.16，5.77(2×s，2H，C＝CH2)，2.00(s，
3H，CH3)。
7.89(m，1H，苯基3-H)，7.69～7.66(m，1H，苯基6-H)，6.16，5.77(2×s，2H，C＝CH2)，2.00(s，
3H，CH3)。
[0069] 实施例12
[0070] N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]乙酰胺的制备
[0071] 1mmol4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺、20mL二氯甲烷和2mL三乙胺，常温下滴加乙酰氯，TLC监测，反应1.5h，用NaHCO3溶液、水洗涤，无水硫酸钠干燥后抽滤，旋蒸回收溶剂，柱层析得到浅黄色液体N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]乙酰胺，收率53.7％，m.p.266～268℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：10.14(s，1H，NH)，8.06～8.03(d，J＝12.0Hz，1H，三唑5-H)，7.94～7.92(d，J＝8.0Hz，1H，三唑3-H)，7.50～7.47(d，J＝12.0Hz，1H，苯基6-H)，7.35(m，2H，苯基3，5-H)，2.50(s，3H，CH3)。
[0072] 实施例13
[0073] 2-氯-N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]氯乙酰胺的制备[0074] 1mmol4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺、20mL二氯甲烷和2mL三乙胺，冰浴下滴加氯乙酰氯，TLC监测，反应1.5h，用NaHCO3溶液、水洗涤，用无水硫酸钠干燥，抽滤后旋蒸回收溶剂，柱层析得到浅黄色固体2-氯-N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]氯乙酰胺，收率38.5％，m.p.115～118℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：9.78(s，1H，NH)，8.05(s，1H，三唑5-H)，7.95(s，1H，三唑3-H)，7.49(s，1H，苯基6-H)，7.34(s，2H，苯基3，5-H)，4.35(s，2H，CH2)。
[0075] 实施例14
[0076] N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙酰胺的制备
[0077] 1mmol4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺、5mL丙酸酐，室温搅拌10min，升温至55℃继续反应，反应3h，逐滴将反应液加入500mL冰水中，搅拌析出淡黄色固体，收集析出的固体，二氯甲烷萃取，干燥，旋蒸，固体合并得N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，
2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙酰胺，收率97.8％，m.p.208～210℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：9.51(s，1H，NH)，8.05(s，1H，三唑5-H)，7.94(s，1H，三唑3-H)，7.48(s，1H，苯基6-H)，7.32(s，2H，苯基3，5-H)，2.48(q，J＝7.4Hz，2H，COCH2)，1.27(t，J＝8.0Hz，3H，CH3)。
2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙酰胺，收率97.8％，m.p.208～210℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：9.51(s，1H，NH)，8.05(s，1H，三唑5-H)，7.94(s，1H，三唑3-H)，7.48(s，1H，苯基6-H)，7.32(s，2H，苯基3，5-H)，2.48(q，J＝7.4Hz，2H，COCH2)，1.27(t，J＝8.0Hz，3H，CH3)。
[0078] 实施例15
[0079] N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-氯丙酰胺的制备[0080] 1mmol4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺、20mL二氯甲烷和2mL三乙胺，常温下滴加2-氯丙酰氯，TLC监测，反应1h，用NaHCO3溶液、水洗涤，用无水硫酸钠干燥，抽滤后旋蒸回收溶剂，柱层析得到浅黄色固体N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-氯丙酰胺，收率80.0％，m.p.179～182℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：
9.84(s，1H，NH)，8.05(s，1H，三唑5-H)，7.95(s，1H，三唑3-H)，7.48(s，1H，苯基6-H)，7.33(s，2H，苯基3，5-H)，4.68(q，J＝7.2Hz，1H，CHCl)，1.88(d，J＝7.2Hz，3H，CH3)。
9.84(s，1H，NH)，8.05(s，1H，三唑5-H)，7.95(s，1H，三唑3-H)，7.48(s，1H，苯基6-H)，7.33(s，2H，苯基3，5-H)，4.68(q，J＝7.2Hz，1H，CHCl)，1.88(d，J＝7.2Hz，3H，CH3)。
[0081] 实施例16
[0082] N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙烯酰胺的制备[0083] 1mmol4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺、20mL二氯甲烷和2mL三乙胺，常温下滴加丙烯酰氯，TLC监测，反应1.5h，用NaHCO3溶液、水洗涤，用无水硫酸钠干燥，抽滤后旋蒸回收溶剂，柱层析得到浅黄色固体N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙烯酰胺，收率31.3％，m.p.225～227℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：9.54(s，1H，NH)，8.06(s，1H，三唑5-H)，7.95(s，1H，三唑3-H)，7.48(s，1H，苯基6-H)，7.33(s，2H，苯基3，5-H)，6.60，5.98(2×d，J＝16.8Hz，J＝10.8Hz，2H，＝CH2)，6.27(m，1H，CH＝)。
[0084] 实施例17
[0085] N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]异丁酰胺的制备[0086] 1mmol4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺、20mL二氯甲烷和2mL三乙胺，常温下滴加异丁酰氯，TLC监测，反应0.5h，用NaHCO3溶液、水洗涤，用无水硫酸钠干燥，抽滤后旋蒸回收溶剂，柱层析得到浅黄色固体N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]异丁酰胺，收率51.8％，m.p.81～83℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：9.63(s，
1H，NH)，8.05(s，1H，三唑5-H)，7.94(s，1H，三唑3-H)，7.48(s，1H，苯基6-H)，7.33(s，2H，苯基3，5-H)，2.71(m，1H，CH)，1.33，1.29(2×d，J＝6.8Hz，6H，2×CH3)。
1H，NH)，8.05(s，1H，三唑5-H)，7.94(s，1H，三唑3-H)，7.48(s，1H，苯基6-H)，7.33(s，2H，苯基3，5-H)，2.71(m，1H，CH)，1.33，1.29(2×d，J＝6.8Hz，6H，2×CH3)。
[0087] 实施例18
[0088] N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-甲基丙烯酰胺的制备
[0089] 1mmol4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺、20mL二氯甲烷和2mL三乙胺，常温下滴加异丁酰氯，TLC监测，反应1.5h，用NaHCO3溶液、水洗涤，用无水硫酸钠干燥，抽滤后旋蒸回收溶剂，柱层析得到浅黄色液体N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]-2-甲基丙烯酰胺，收率71.8％，m.p.91～94℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：
9.74(s，1H，NH)，8.04(s，1H，三唑5-H)，7.92(s，1H，三唑3-H)，7.64～7.60(m，1H，苯基6-H)，
7.47～7.42(m，2H，苯基3，5-H)，5.68(d，J＝12.0Hz，2H，C＝CH2)，2.02(s，3H，CH3)。
9.74(s，1H，NH)，8.04(s，1H，三唑5-H)，7.92(s，1H，三唑3-H)，7.64～7.60(m，1H，苯基6-H)，
7.47～7.42(m，2H，苯基3，5-H)，5.68(d，J＝12.0Hz，2H，C＝CH2)，2.02(s，3H，CH3)。
[0090] 实施例19
[0091] N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]肉桂酰胺的制备[0092] 0.50g4-(2,4-二氯-5-氟苯基)-5-(1H-1,2,4-三唑-1-基)噻唑-2-胺、20mL无水二氯甲烷和2mL三乙胺中，常温滴加肉桂酰氯，TLC监测反应2.0h，柱层析分离得灰色固体N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]肉桂酰胺0.45g，收率64.3％，m.p.136～138℃。1H NMR(CDCl3，500MHz)δ：6.52(s，1H，＝CH)，6.55(s，1H，＝CH)，7.41～7.59(m,7H,C6H5,C6H2)，7.85(s，1H，噻唑环3-H)，7.88(s，1H，噻唑环5-H)。
[0093] 实施例20
[0094] N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]肉桂酰胺的制备[0095] 4-(2,4-二氯苯基)-5-(1H-1,2,4-三唑-1-基)噻唑-2-胺(0.47g，1.5mmol)、20mL无水二氯甲烷和2mL三乙胺中。常温滴加肉桂酰氯，TLC监测反应2.5h，柱层析分离得黄色固体N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]肉桂酰胺0.28g，收率42.4％，m.p.125～128℃。1H NMR(CDCl3，500MHz)δ：6.52(s，1H，＝CH)，6.55(s，1H，＝CH)，7.43～7.59(m,8H,C6H5,C6H3)，7.85(s，1H，噻唑环3-H)，7.88(s，1H，噻唑环5-H)。
[0096] 实施例21
[0097] N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺的抗肿瘤活性
[0098] 1.抗肿瘤活性原理
[0099] MTT法生物活性测试又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT分析法以活细胞代谢物还原剂噻唑蓝[3-(4，5-二甲基-2-噻唑)-2，5-二苯基溴化四氮唑；3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl)-2，5-diphenyltetrazolium bromide，MTT]为基础。MTT是一种能接受氢原子的染料。活细胞线粒体中与NADP相关的脱氢酶在细胞内可将黄色的MTT转化成不溶性的蓝紫色的甲瓒(formazon)，而死细胞则无此功能。用DMSO溶解formazon后，在一定波长下用酶标仪测定光密度值，既可定量测出细胞的存活率。根据光密度值的变化观察样品对肿瘤细胞的抑制作用。
[0100] 2.抗肿瘤活性实验
[0101] 试样：N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺(Ⅰ)。
[0102]
[0103] 其中，X1、X3选自：氯、溴、氟、碘；X4选自：氢、氘、甲基、乙基、氯、溴、氟、碘；X2、X5选自：氢、氘、甲基、乙基；R选自：氢、甲基；n选自：0、1、2、3；Y选自：氢、C1～C2烷基、C3～C11直链烷基或支链烷基、C1～C2氯代烷基或二氯代烷基、C3～C5氯代直链烷基或氯代支链烷基、C1～C2溴代烷基、C3～C5溴代直链烷基或溴代支链烷基、C1～C2氟代烷基、C3～C5氟代直链烷基或氟代支链烷基、C1～C2碘代烷基、C3～C5碘代直链烷基或碘代支链烷基、苯基。
[0104] 细胞系：宫颈癌细胞系Hela(中南大学湘雅医学院细胞库提供)。
[0105] 试剂：噻唑蓝(MTT)、RPMI1640培养液、新生牛血清、抗生素(美国英杰生命技术公司)；胰酶(美国AMRESCO公司)；96孔培养板(美国英杰生命技术公司)；二甲基亚砜(美国Sigma公司)。
[0106] 仪器：HFsafe-1500型超净工作台、HF151UV型CO2培养箱(上海力申科学仪器有限公司)；XSP-15C型倒置显微镜(上海长方光学仪器有限公司)；Multiskan MK3型酶标仪(美国Thermo公司)；超纯水制备仪(美国Milli-Q公司)。
[0107] 实验操作：试样对于Hela细胞的测试。每种细胞的实验操作过程相同，一次实验过程中，每种试样设置5个浓度梯度(0.010μmol/mL、0.030μmol/mL、0.100μmol/mL、0.300μmol/mL和1.000μmol/mL)，每个浓度四个平行试样，每组实验平行3次，并通过空白组对照得出结论。酶标仪检测各孔OD值，检测波长570nm。
[0108] 3.抗肿瘤活性评价
[0109] 1)细胞抑制率计算：
[0110]
[0111] 2)IC50值计算
[0112] 试样浓度对数值与细胞抑制率线性回归，利用软件计算试样对细胞的半数抑制浓度IC50值。优选化合物对于Hela细胞的IC50见表2。
[0113] 表2N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺对于Hela细胞的抑制活性(μmol/mL)
[0114]
[0115] 抗肿瘤活性结果表明：N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺对于Hela细胞具有抑制活性，可以用于制备抗Hela细胞的抗癌药物。
[0116] 实施例22
[0117] N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺的抗流感病毒神经氨酸酶活性[0118] 1.实验原理
[0119] 化合物MUNANA是神经氨酸酶的特异性底物，在神经氨酸酶作用下产生的代谢产物在360nm照射激发下，可以产生450nm荧光，荧光强度的变化可以灵敏地反应神经氨酸酶活性。酶都来自A/PR/8/34(H1N1)病毒毒株。
[0120] 2.实验方法
[0121] 在酶反应体系中，一定浓度样品与流感病毒神NA悬浮于反应缓冲液中(pH6.5)，加入荧光底物MUNANA启动反应体系，37℃孵育40分钟后，加反应终止液终止反应。在激发波长360nm和发射波长为450nm的参数条件下，测定荧光强度值。反应体系的荧光强度可以反映酶的活性。根据荧光强度的减少量可以计算化合物对NA活性的抑制率。
[0122] 3.检测样品：N-[4-苯基-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]酰胺(Ⅰ)。
[0123]
[0124] 其中，X1、X3选自：氯、溴、氟、碘；X4选自：氢、氘、甲基、乙基、氯、溴、氟、碘；X2、X5选自：氢、氘、甲基、乙基；R选自：氢、甲基；n选自：0、1、2、3；Y选自：氢、C1～C2烷基、C3～C11直链烷基或支链烷基、C1～C2氯代烷基或二氯代烷基、C3～C5氯代直链烷基或氯代支链烷基、C1～C2溴代烷基、C3～C5溴代直链烷基或溴代支链烷基、C1～C2氟代烷基、C3～C5氟代直链烷基或氟代支链烷基、C1～C2碘代烷基、C3～C5碘代直链烷基或碘代支链烷基、苯基。
[0125] 4.活性结果
[0126] 优选化合物N-[4-(2，4-二氯-5-氟苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]氯乙酰胺和N-[4-(2，4-二氯苯基)-5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]丙烯酰胺在反应系统中检测浓度40.0μg/mL时对神经氨酸酶的抑制率分别为22.4％和29.9％。