一种芽孢杆菌增效剂及增效生防菌剂

摘要

本发明公开了一种芽孢杆菌增效剂及增效生防菌剂，该芽孢杆菌增效剂由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕10％～80％、甲基纤维素10％～80％、蔗糖10％～80％。本发明的芽孢杆菌增效剂，采用黄豆豆粕、甲基纤维素与蔗糖复配，用于芽孢杆菌类生防菌剂，能够促进芽孢杆菌的芽孢萌发，提高生防菌的成活率；提高生防菌对病害菌的防效，削弱土著微生物对芽孢杆菌类生防菌的拮抗作用及负面影响，促进生防菌快速萌发生长，从而提高生防菌防效；经过大田试验，该芽孢杆菌增效剂对芽孢杆菌类生防菌剂的增效效果显著。

权利要求

1.一种芽孢杆菌增效剂，其特征在于：由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕10％～

80％、甲基纤维素10％～80％、蔗糖10％～80％。

2.根据权利要求1所述的芽孢杆菌增效剂，其特征在于：由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕40％～50％、甲基纤维素15％～20％、蔗糖35％～40％。

3.一种增效生防菌剂，其特征在于：包括以下重量份数的组分：芽孢杆菌生防菌剂4～6份、芽孢杆菌增效剂0.8～1.2份；所述芽孢杆菌增效剂由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕10％～80％、甲基纤维素10％～80％、蔗糖10％～80％。

4.根据权利要求3所述的增效生防菌剂，其特征在于：包括以下重量份数的组分：芽孢杆菌生防菌剂5份、芽孢杆菌增效剂1份；所述芽孢杆菌增效剂由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕40％～50％、甲基纤维素15％～20％、蔗糖35％～40％。

5.根据权利要求3或4所述的增效生防菌剂，其特征在于：所述芽孢杆菌生防菌剂包含以下质量百分比的组分：生防菌菌剂原粉8％～12％、木钠4％～7％、十二烷基硫酸钠0.3％～0.6％、海藻酸钠0.7％～1.4％、蔗糖0.8％～1.2％、硅藻土80％～84％。

6.根据权利要求5所述的增效生防菌剂，其特征在于：所述生防菌菌剂原粉中的芽孢杆菌生防菌为解淀粉芽孢杆菌或烟草赖氨酸芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌。

7.根据权利要求6所述的增效生防菌剂，其特征在于：所述芽孢杆菌生防菌剂中芽孢杆菌生防菌的活芽孢数不低于1×109个/g。

说明书

一种芽孢杆菌增效剂及增效生防菌剂

技术领域

[0001] 本发明属于微生物增效剂技术领域，具体涉及一种芽孢杆菌增效剂，同时还涉及一种使用上述芽孢杆菌增效剂的增效生防菌剂。

背景技术

[0002] 生防菌是指用于防治植物病害的有益微生物。自然界中，植物寄主不但与病原物存在密切的相互作用，同时与周围的非病原微生物也存在着广泛的相互作用。植物病害的微生物防治是指通过一种或多种微生物来降低病原物的数量或减弱病原物的致病活力，从而减少病原物所致病害的发生。利用自然界中的一些拮抗微生物对病原物的抗生作用、营养和空间的竞争作用、重寄生作用以及微生物诱导植物产生系统抗性等机理，来防治植物病害是植物病害生物防治的一个重要组成部分；其中所述的拮抗微生物即为生防菌。

[0003] 芽孢杆菌是土壤和植物微生态优势微生物种群之一，能够形成耐热抗逆、耐旱、抗紫外线的芽孢，有利于生防菌剂的生产、剂型加工及在环境中存活、定殖与繁殖，批量生产工艺简单，成本较低，施用方便，储存期长，且控制根茎部病害持久有效，是一种较理想的生防菌，是研制生防菌剂极好的材料，目前已成为人们研究和开发的热点。芽孢杆菌生防菌通过营养竞争、促进植物生长、诱导植物抗性、分泌抗菌物质等方式发挥生防功能和控制植物病害。然而，发挥这些生防功能的先决条件是生防菌必须在土壤中萌发、生长并达到相当的种群密度。通过在芽孢杆菌类生防菌剂中添加增效剂，促进芽孢在土壤中萌发并削减土壤原著微生物对生防菌剂的影响，对发挥芽孢杆菌类生防菌对病害的防治效果具有重要实践意义。

[0004] 增效剂是指对药剂有明显增效作用的添加剂。增效剂按其作用机理的不同大致可以分为内增效剂和外增效剂两大类。内增效剂主要是通过抑制或弱化防治对象对农药的解毒作用，降低药剂在防治对象体内的代谢速度，从而提高防效，其多为害虫体内乙酰胆碱酯酶(AchE)、羧酸酯酶(CarE)、GsH.S.转移酶(GST)等酶系的抑制剂。外增效剂通过改善药剂的润湿、分布、分散、滞留和渗透等性能，增强药剂在农作物或防治对象表面的铺展、黏附渗透等能力，减少药液的漂移，降低紫外线对制剂中有效成分的分解，达到提高药效、延长药效持效期、减少用量、保护生态环境的目的。就目前来说，由于外增效剂作用机理简单、增效明显、稳定性好、作用速度快，其使用量远高于内增效剂，而内增效剂由于受到防治对象体内多种生理生化因素的影响，增效幅度相对较小，且不稳定，在使用中受到一定限制(对苏云金芽孢杆菌HBF-1菌株增效剂的初步筛选，宋健、冯书亮等，2008)。

[0005] 现有技术中，CN1293198C公开了一种用于芽孢杆菌发酵的增效剂，其为由FeSO4、CaCl2、MgSO4、CuSO4、Co(NO3)2、MnSO4、ZnSO4按照一定比例配成的水溶液；该增效剂用于芽孢杆菌发酵，可补充微生物维持和生长所需的多种营养物质，明显提高发酵液中的活菌含量，缩短发酵周期，降低发酵成分。CN101897337B公开了一种微生物农药增效剂，以喜树碱或其衍生物为主要有效成分，所述的喜树碱或其衍生物在增效剂中的质量分数为0.5-8.5％；该增效剂可有效地促进苏云金芽孢杆菌或杆状病毒杀虫剂的杀虫效果，提高药效，在同等防效下可减少微生物杀虫剂的用量。但是，对于如何促进生防菌萌发生长并如何削减土壤微生物对生防菌的影响方面的增效剂未见报道。

发明内容

[0006] 本发明的目的是提供一种芽孢杆菌增效剂，与芽孢杆菌生防菌剂混合施用，能够削弱土著微生物对生防菌的负面影响，促进生防菌快速萌发生长，从而提高生防菌防效。

[0007] 本发明的第二个目的是提供一种使用上述芽孢杆菌增效剂的增效生防菌剂。

[0008] 为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：

[0009] 一种芽孢杆菌增效剂，由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕10％～80％、甲基纤维素10％～80％、蔗糖10％～80％。

[0010] 优选的，所述的芽孢杆菌增效剂，由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕40％～50％、甲基纤维素15％～20％、蔗糖35％～40％。

[0011] 所述芽孢杆菌增效剂的制备方法是取配方量的黄豆豆粕、甲基纤维素和蔗糖，混合即得。所述芽孢杆菌增效剂为固体粉末。

[0012] 本发明的芽孢杆菌增效剂，采用黄豆豆粕、甲基纤维素与蔗糖复配，用于芽孢杆菌类生防菌剂，能够促进芽孢杆菌的芽孢萌发，提高生防菌的成活率；提高生防菌对病害菌的防效，削弱土著微生物对芽孢杆菌类生防菌的拮抗作用及负面影响，促进生防菌快速萌发生长，从而提高生防菌防效；经过大田试验，该芽孢杆菌增效剂对芽孢杆菌类生防菌剂的增效效果显著。

[0013] 一种增效生防菌剂，包括以下重量份数的组分：芽孢杆菌生防菌剂4～6份、芽孢杆菌增效剂0.8～1.2份；所述芽孢杆菌增效剂由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕10％～80％、甲基纤维素10％～80％、蔗糖10％～80％。

[0014] 优选的，所述的增效生防菌剂，包括以下重量份数的组分：芽孢杆菌生防菌剂5份、芽孢杆菌增效剂1份；所述芽孢杆菌增效剂由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕40％～50％、甲基纤维素15％～20％、蔗糖35％～40％。

[0015] 所述芽孢杆菌生防菌剂包含以下质量百分比的组分：生防菌菌剂原粉8％～12％、木钠4％～7％、十二烷基硫酸钠0.3％～0.6％、海藻酸钠0.7％～1.4％、蔗糖0.8％～1.2％、硅藻土80％～84％。

[0016] 所述生防菌菌剂原粉中的芽孢杆菌生防菌为解淀粉芽孢杆菌或烟草赖氨酸芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌。所述芽孢杆菌生防菌剂及其制备方法具体可参见专利文件CN102925393B、CN102851245B的记载。所述的解淀粉芽孢杆菌优选为专利文件CN102925393B记载的兼抗根结线虫和烟草疫霉的烟草内生菌-解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciensZY-9-13菌株；所述的烟草赖氨酸芽孢杆菌优选为专利文件CN102851245B记载的抗烟草青枯病的烟草内生菌菌株-烟草赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus tobaccocum)Kpa菌株。所述芽孢杆菌生防菌剂中芽孢杆菌生防菌的活芽孢数不低于1×109个/g。

[0017] 本发明的芽孢杆菌增效剂，通过芽孢的萌发来提高芽孢杆菌的成活率；同时通过削弱土著微生物对芽孢杆菌类生防菌的拮抗作用及负面影响来促进生防菌快速生长，提高防效；因此，上述的增效生防菌剂中，可用的芽孢杆菌生防菌剂并不局限于上述所列，现有的芽孢杆菌类生防菌剂(主要生防菌为芽孢杆菌类生防菌)都是可用的；所述芽孢杆菌生防菌剂中的芽孢杆菌生防菌优选的烟草内生芽孢杆菌。

[0018] 本发明的增效生防菌剂，主要由芽孢杆菌生防菌剂和上述的芽孢杆菌增效剂复配而成，能够削弱土著微生物对生防菌株的负面影响，促进芽孢类杆菌生防菌剂中芽孢的快速萌发，提高生防菌对病害菌的防效；对人畜无毒，安全有效；成本低廉，使用方便，适合推广使用。

[0019] 本发明的增效生防菌剂的制备方法，是将芽孢杆菌生防菌剂与芽孢杆菌增效剂按重量份数混合后，即得；或者将芽孢杆菌生防菌剂与芽孢杆菌增效剂按重量份数混合后，加水稀释100～500倍，即得。该制备方法工艺简单，成本较为低廉。将芽孢杆菌生防菌剂与芽孢杆菌增效剂分开包装，方便储存与运输；使用时随用随配，使用方便。所得增效生防菌剂的施用方法同常规生防菌剂的施用方法，如直接喷施或灌根。

具体实施方式

[0020] 下面结合具体实施方式对本发明作进一步的说明。

[0021] 实施例1

[0022] 本实施例的芽孢杆菌增效剂，由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕50％、甲基纤维素15％、蔗糖35％。

[0023] 本实施例的增效生防菌剂，包括以下重量份数的组分：芽孢杆菌生防菌剂5份、芽孢杆菌增效剂1份；所述芽孢杆菌增效剂由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕50％、甲基纤维素15％、蔗糖35％。

[0024] 所述芽孢杆菌生防菌剂为解淀粉芽孢杆菌菌剂，该菌剂为中国烟草总公司郑州烟草研究院研制的ZY-9-13可湿性粉剂，是将ZY-9-13菌剂原粉与木钠、十二烷基硫酸钠、海藻酸钠、蔗糖和硅藻土按照20:11:1:2:2:164的质量比混匀制成的；具体参见专利文件CN102925393B的记载。ZY-9-13菌剂原粉中的菌株为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciensZY-9-13菌株，即兼抗根结线虫和烟草疫霉的烟草内生菌。所述ZY-9-13可湿性粉剂中，活芽孢数为1×109个/g。

[0025] 本实施例的增效生防菌剂的制备方法，是将所述的芽孢杆菌增效剂与所述的芽孢杆菌生防菌剂按照质量比为1:5的比例混合均匀后，加水稀释500倍，即得高活性的增效生防菌剂。

[0026] 实验例1

[0027] 本实验例对实施例1所得增效生防菌剂的效果进行检测试验。试验地点为河南泌阳烟草试验田，以解淀粉芽孢杆菌菌剂和清水为对照，烟草移栽时期和发病初期灌根；发病盛期统计烟草黑胫病发病率及病情指数，计算防治效果。另外，生防菌分子标记后，生防菌剂施入3天后，取根际土测生防菌数量(显微镜荧光检测)，计算生防菌成活率。结果如表1所示。

[0028] 表1实施例1所得增效生防菌剂对烟草黑胫病的防效及增效剂对生防菌成活影响[0029]

[0030] 从表1可知，与解淀粉芽孢杆菌菌剂(对照1)和清水(对照2)相比，实施例1所得增效生防菌剂对烟草黑胫病的防效从64％提高到76％，生防菌的成活率提高36％以上。试验结果表明，生防菌剂添加增效剂后，大大提高了生防菌剂的防效及生防菌的成活率。

[0031] 实施例2

[0032] 本实施例的芽孢杆菌增效剂，由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕40％、甲基纤维素20％、蔗糖40％。

[0033] 本实施例的增效生防菌剂，包括以下重量份数的组分：芽孢杆菌生防菌剂5份、芽孢杆菌增效剂1份；所述芽孢杆菌增效剂由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕40％、甲基纤维素20％、蔗糖40％。

[0034] 所述芽孢杆菌生防菌剂为烟草赖氨酸芽孢杆菌菌剂，该菌剂为中国烟草总公司郑州烟草研究院与江西省烟草公司抚州市公司联合研制Kpa菌株可湿性粉剂，是将Kpa菌剂原粉与木钠、十二烷基硫酸钠、海藻酸钠、蔗糖和硅藻土按照20:11:1:2:2:164的质量比混匀制成的；具体参见专利文件CN102851245B的记载。Kpa菌剂原粉中的菌株为烟草赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus tobaccocum)Kpa菌株，即抗烟草青枯病的烟草内生菌菌株。所述Kpa9
菌株可湿性粉剂中，活芽孢数为1×10个/g。

[0035] 本实施例的增效生防菌剂的制备方法，是将所述的芽孢杆菌增效剂与所述的芽孢杆菌生防菌剂按照质量比为1:5的比例混合均匀后，加水稀释100倍，即得高活性的增效生防菌剂。

[0036] 实验例2

[0037] 本实验例对实施例2所得增效生防菌剂的效果进行检测试验。试验地点为江西黎川烟草试验田，以赖氨酸芽孢杆菌菌剂和清水为对照，烟草移栽时期和发病初期灌根；发病盛期统计烟草青枯病发病率及病情指数，计算防治效果。另外，生防菌分子标记后，生防菌剂施入3天后，取根际土测生防菌数量(显微镜荧光检测)，计算生防菌成活率。结果如表2所示。

[0038] 表2实施例2所得增效生防菌剂对烟草青枯病的防效及增效剂对生防菌成活影响[0039]

[0040] 从表2可知，与赖氨酸芽孢杆菌菌剂(对照1)和清水(对照2)相比，实施例2所得增效生防菌剂对烟草青枯病的防效从70％提高到74％，生防菌的成活率提高4％以上。试验结果表明，生防菌剂添加增效剂后，大大提高了生防菌剂的防效及生防菌的成活率。

[0041] 实施例3

[0042] 本实施例的芽孢杆菌增效剂，由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕80％、甲基纤维素10％、蔗糖10％。

[0043] 本实施例的增效生防菌剂，包括以下重量份数的组分：芽孢杆菌生防菌剂4份、芽孢杆菌增效剂1.2份；所述芽孢杆菌增效剂由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕80％、甲基纤维素10％、蔗糖10％。

[0044] 所述芽孢杆菌生防菌剂同实施例1。

[0045] 本实施例的增效生防菌剂的制备方法，是将所述的芽孢杆菌增效剂与所述的芽孢杆菌生防菌剂按照质量比为1.2:4的比例混合均匀后，加水稀释200倍，即得高活性的增效生防菌剂。

[0046] 实施例4

[0047] 本实施例的芽孢杆菌增效剂，由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕10％、甲基纤维素80％、蔗糖10％。

[0048] 本实施例的增效生防菌剂，包括以下重量份数的组分：芽孢杆菌生防菌剂6份、芽孢杆菌增效剂0.8份；所述芽孢杆菌增效剂由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕10％、甲基纤维素80％、蔗糖10％。

[0049] 所述芽孢杆菌生防菌剂同实施例2。

[0050] 本实施例的增效生防菌剂的制备方法，是将所述的芽孢杆菌增效剂与所述的芽孢杆菌生防菌剂按照质量比为0.8:6的比例混合均匀后，加水稀释300倍，即得高活性的增效生防菌剂。

[0051] 实施例5

[0052] 本实施例的芽孢杆菌增效剂，由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕10％、甲基纤维素10％、蔗糖80％。

[0053] 本实施例的增效生防菌剂，包括以下重量份数的组分：芽孢杆菌生防菌剂5份、芽孢杆菌增效剂1份；所述芽孢杆菌增效剂由以下质量百分比的组分组成：黄豆豆粕10％、甲基纤维素10％、蔗糖80％。

[0054] 所述芽孢杆菌生防菌剂同实施例1。

[0055] 本实施例的增效生防菌剂的制备方法，是将所述的芽孢杆菌增效剂与所述的芽孢杆菌生防菌剂按照质量比为1:5的比例混合均匀后，加水稀释400倍，即得高活性的增效生防菌剂。