一种白芨裸种消毒方法

摘要

本发明公开了一种白芨裸种消毒方法，包括收集种子，将白芨蒴果晾干后去除果荚取出种子，滤除果荚碎渣，得到种子；种子消毒，洁净环境下在收集到的种子内加入75%的酒精和起泡剂轻微震荡混匀完成预处理，然后使用无菌水清洗种子；清洗完毕后加入0.1%的氯化汞和起泡剂轻微震荡混匀进行消毒处理；消毒处理完毕后使用无菌水清洗干净，得到消毒种子；种子保存。本发明适用于出现破损、虫蛀或者失水干裂的白芨裸种，白芨裸种进行处理后，可以避免组培过程中出现的大面积菌类污染，造成组培成活率严重降低的现象，进一步是的白芨组培育苗的蒴果选择范围更广泛，限制条件降低，使得适用于组培育苗的蒴果量大大增加。

权利要求

1.一种白芨裸种消毒方法，包括：

(1)收集种子：将白芨蒴果晾干后去除果荚取出种子，滤除果荚碎渣，得到种子；

(2)种子消毒：洁净环境下在收集到的种子内加入75％的酒精和起泡剂、硫酸钾和硝酸镧，其中硫酸钾和硝酸镧的终浓度分别为1％和0.05％；轻微震荡混匀完成预处理，然后使用无菌水清洗种子；清洗完毕后加入0.1％的氯化汞和起泡剂轻微震荡混匀进行消毒处理；

消毒处理完毕后使用无菌水清洗干净，得到消毒种子；

(3)种子保存：将消毒种子分摊在洁净环境内风干至种子成粉末状。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述收集种子过程中，使用10目不锈钢网筛除果荚碎渣。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述起泡剂为吐温-20。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述种子消毒过程中，加入酒精后的震荡时间为60秒。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述种子消毒过程中，加入氯化汞后的消毒处理时间为3min～10min。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述消毒处理后使用无菌水清洗5次～8次。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述预处理后使用无菌水清洗3次～5次。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述消毒种子在洁净环境内使用洁净风吹3h～5h至种子呈粉末状且无结块。

说明书

一种白芨裸种消毒方法

技术领域

[0001] 本发明涉及植物栽培技术领域，具体涉及到一种白芨裸种消毒方法。

背景技术

[0002] 珍稀名贵药材白芨 (Bletilla Striata (Thunb.) Reichb.f.) 为白芨属多年生草本植物，是国家重点保护野生植物，具有极高的经济价值。白芨以干燥块茎入药，具有收敛止血，消肿生肌的功效，广泛用于治疗肺结核及支气管扩张咯血、胃溃疡出血等症。白芨除了用于医药方面之外，白芨块茎富含白芨胶  , 白芨胶可代替西黄著胶粉、阿拉伯胶粉作为乳化剂、悬浮剂用于食品、美容及化工等领域，具有广泛的用途。

[0003] 白芨广泛分布于我国长江流域各省，主产于贵州、四川、湖南、湖北、安徽、河南、浙江、陕西等地。多为野生，也有少量栽培，3～4 年收获。

[0004] 白芨以地下根部的串根块茎入药。功能收敛止血、消肿生肌，治疗咯血、吐血、外伤出血、便血、鼻出血，特别对肺出血、上消化道出血和外伤出血有特效。它还可作药膳，具有美容消斑、减肥的功能。因白芨开花十分艳丽，又可盆栽观赏，具有较高的观赏价值。其原因是近年来受药用需求和园艺需求强劲增长的影响，我国白芨市场需求量也明显增多；过度采挖和生境破坏导致野生资源量急剧下降。与木本药用植物套种，可提高土地的单位利用效率。

[0005] 白芨喜阴凉、湿润而温暖的环境，既能无性繁殖，也可进行有性繁殖，因种子细小，自然条件下萌发比较困难，人工驯化苗一般采用组培快繁的方式大量扩繁。组培快繁白芨苗都采用新鲜未开裂的成熟蒴果，在进行表面消毒后切开蒴果将种子播撒于培养基上。该种方法要求蒴果完整无虫蛀无开裂，若挑选不合理可能造成组培过程大面积污染。因此挑选过程中会舍弃大量的不合格蒴果，造成种质资源的浪费。而每年白芨结出蒴果并不太多，其中还有相当部分开裂或者被虫蛀而无法用于组培育苗，常因合格蒴果数量不足而影响白芨组培育苗产业快速发展。

发明内容

[0006] 本发明的目的是提供一种白芨裸种消毒方法，使用本方法可以对出现破损、虫蛀或者失水干裂的裸种进行处理，使处理后的裸种可以保证消毒彻底，相对处理前可以提高保证萌发率。

[0007] 为达上述目的，本发明的一个实施例中提供了一种白芨裸种消毒方法，包括：

[0008] （1）收集种子：将白芨蒴果晾干后去除果荚取出种子，滤除果荚碎渣，得到种子；

[0009] （2）种子消毒：洁净环境下在收集到的种子内加入75%的酒精和起泡剂轻微震荡混匀完成预处理，然后使用无菌水清洗种子；清洗完毕后加入0.1%的氯化汞和起泡剂轻微震荡混匀进行消毒处理；消毒处理完毕后使用无菌水清洗干净，得到消毒种子；

[0010] （3）种子保存：将消毒种子分摊在洁净环境内风干至种子成粉末状。

[0011] 本发明的优化实施例，在收集种子过程中，使用10目不锈钢网筛除果荚碎渣。

[0012] 本发明的优化实施例，起泡剂为吐温-20。

[0013] 本发明的优化实施例，种子消毒过程中，加入酒精后的震荡时间为60秒；加入氯化汞后的消毒处理时间为3min 10min。~

[0014] 本发明的优化实施例，消毒处理后使用无菌水清洗5次 8次；预处理后使用无菌水~清洗3次 5次；消毒种子在洁净环境内使用洁净风吹3h 5h至种子呈粉末状且无结块。
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[0015] 综上所述，本发明具有以下优点：

[0016] 本发明适用于出现破损、虫蛀或者失水干裂的白芨裸种，白芨裸种进行处理后，可以避免组培过程中出现的大面积菌类污染，造成组培成活率严重降低的现象，进一步是的白芨组培育苗的蒴果选择范围更广泛，限制条件降低，使得适用于组培育苗的蒴果量大大增加。

[0017] 本发明通过预处理和消毒处理，可以保证即使出现破损、虫蛀或者失水干裂等白芨裸种的萌芽率，可以应用于工业化育苗。

[0018] 本发明可使用因长期保存而开裂的蒴果进行组培育苗，打破了白芨组培育苗只能在秋季播种的惯例；同时可以克服现阶段白芨育苗都采用新鲜蒴果消毒播种，长期保存后的蒴果会自然开裂，造成蒴果消毒时内部种子却不能彻底消毒，导致育苗时发生大面积污染的缺陷。

具体实施方式

[0019] 实施例1

[0020] 一种白芨裸种消毒方法，包括以下步骤：

[0021] （1）收集种子：选择出现破损及虫蛀，或因储藏不当导致失水干裂的蒴果；将白芨蒴果晾干后去除果荚取出种子，将种子混合物使用10目的不锈钢网筛过滤果荚碎渣，滤除果荚碎渣，得到种子；

[0022] （2）种子消毒：洁净环境下在收集到的种子内加入75%的酒精和起泡剂吐温-20轻微震荡混匀完成预处理，然后使用无菌水清洗种子；清洗完毕后加入0.1%的氯化汞和起泡剂轻微震荡混匀进行消毒处理；消毒处理完毕后使用无菌水清洗干净，得到消毒种子。

[0023] 具体的，可以将种子加入到100ml的注射器内，种子量不超过50ml。吸入75%酒精，滴入一滴吐温-20，并轻轻震荡60秒，拍打注射器使酒精和吐温-20混合，使得种子浸没在液体或者浸润。然后放掉酒精，吸入无菌水洗涤3次。清洗后加入一滴吐温-20起泡剂和40mL0.1%升汞溶液并轻轻震荡消毒5min，而后同上方法去除升汞溶液并用无菌水清洗6次。
以上过程均须在超净工作台中无菌操作

[0024] （3）种子保存：将消毒种子分摊在洁净环境内风干至种子成粉末状。

[0025] 具体的操作为：将已消毒完毕的种子用勺掏出放置于垫有多层无菌滤纸的接种碟中，分摊开并用超净工作台风力吹3h 5h直至种子成粉末状无伴结成块，即可将种子均匀播~撒于萌芽培养基中；以上过程均须在超净工作台中无菌操作。

[0026] 实施例2

[0027] 一种白芨裸种消毒方法，包括以下步骤：

[0028] （1）收集种子：选择出现破损及虫蛀，或因储藏不当导致失水干裂的蒴果；将白芨蒴果晾干后去除果荚取出种子，将种子混合物使用10目的不锈钢网筛过滤果荚碎渣，滤除果荚碎渣，得到种子；

[0029] （2）种子消毒：洁净环境下在收集到的种子内加入75%的酒精、起泡剂吐温-20、硫酸钾和硝酸镧，其中硫酸钾和硝酸镧的终浓度分别为1%和0.05%；轻微震荡混匀完成预处理，然后使用无菌水清洗种子；清洗完毕后加入0.1%的氯化汞和起泡剂轻微震荡混匀进行消毒处理；消毒处理完毕后使用无菌水清洗干净，得到消毒种子。本实施例在预处理过程中加入硫酸钾和硝酸镧后，可以对种子进行预处理，与实施例1相比，本实施例的裸种处理后相比实施例1的萌芽率提高了12%左右；可以降低种子受到消毒液的损害，提高萌发率，从而不会因裸果是损坏的而出现萌芽率降低的现象。

[0030] 具体的，可以将种子加入到100ml的注射器内，种子量不超过50ml。吸入75%酒精、硫酸钾和硝酸镧 ，滴入一滴吐温-20，并轻轻震荡60秒，拍打注射器使酒精、硫酸钾 、 硝酸镧 和吐温-20混合，使得种子浸没在液体或者浸润。然后放掉酒精溶液 ，吸入无菌水洗涤3次。清洗后加入一滴吐温-20起泡剂和40mL0.1%升汞溶液并轻轻震荡消毒5min，而后同上方法去除升汞溶液并用无菌水清洗6次。以上过程均须在超净工作台中无菌操作[0031] （3）种子保存：将消毒种子分摊在洁净环境内风干至种子成粉末状。

[0032] 具体的操作为：将已消毒完毕的种子用勺掏出放置于垫有多层无菌滤纸的接种碟中，分摊开并用超净工作台风力吹3h 5h直至种子成粉末状无伴结成块，即可将种子均匀播~撒于萌芽培养基中；以上过程均须在超净工作台中无菌操作。

[0033] 实施例3

[0034] 一种白芨裸种消毒方法，包括以下步骤：

[0035] （1）收集种子：选择出现破损及虫蛀，或因储藏不当导致失水干裂的蒴果；将白芨蒴果晾干后去除果荚取出种子，将种子混合物使用10目的不锈钢网筛过滤果荚碎渣，滤除果荚碎渣，得到种子；

[0036] （2）种子消毒：洁净环境下在收集到的种子内加入75%的酒精和起泡剂吐温-20轻微震荡混匀完成预处理，然后使用无菌水清洗种子；清洗完毕后加入0.1%的氯化汞和起泡剂轻微震荡混匀进行消毒处理；消毒处理完毕后使用无菌水清洗干净，得到消毒种子。

[0037] 具体的，可以将种子加入到100ml的注射器内，种子量不超过50ml。吸入75%酒精，滴入一滴吐温-20，并轻轻震荡80秒，拍打注射器使酒精和吐温-20混合，使得种子浸没在液体或者浸润。然后放掉酒精，吸入无菌水洗涤3次。清洗后加入一滴吐温-20起泡剂和60mL0.1%氯化汞溶液并轻轻震荡消毒8min，而后同上方法去除升汞溶液并用无菌水清洗7次。以上过程均须在超净工作台中无菌操作。

[0038] （3）种子保存：将消毒种子分摊在洁净环境内风干至种子成粉末状。

[0039] 具体的操作为：将已消毒完毕的种子用勺掏出放置于垫有多层无菌滤纸的接种碟中，分摊开并用超净工作台风力吹3h 5h直至种子成粉末状无伴结成块，即可将种子均匀播~撒于萌芽培养基中；以上过程均须在超净工作台中无菌操作。

[0040] 实施例4

[0041] 一种白芨裸种消毒方法，包括以下步骤：

[0042] （1）收集种子：选择出现破损及虫蛀，或因储藏不当导致失水干裂的蒴果；将白芨蒴果晾干后去除果荚取出种子，将种子混合物使用10目的不锈钢网筛过滤果荚碎渣，滤除果荚碎渣，得到种子；

[0043] （2）种子消毒：洁净环境下在收集到的种子内加入75%的酒精和起泡剂吐温-80轻微震荡混匀完成预处理，然后使用无菌水清洗种子；清洗完毕后加入0.2%的氯化汞和起泡剂轻微震荡混匀进行消毒处理；消毒处理完毕后使用无菌水清洗干净，得到消毒种子。

[0044] 具体的，可以将种子加入到100ml的注射器内，种子量不超过50ml。吸入75%酒精，滴入一滴吐温-20，并轻轻震荡90秒，拍打注射器使酒精和吐温-20混合，使得种子浸没在液体或者浸润。然后放掉酒精，吸入无菌水洗涤4次。清洗后加入一滴吐温-20起泡剂和60mL0.1%升汞溶液并轻轻震荡消毒7min，而后同上方法去除升汞溶液并用无菌水清洗7次。
以上过程均须在超净工作台中无菌操作

[0045] （3）种子保存：将消毒种子分摊在洁净环境内风干至种子成粉末状。

[0046] 具体的操作为：将已消毒完毕的种子用勺掏出放置于垫有多层无菌滤纸的接种碟中，分摊开并用超净工作台风力吹5h直至种子成粉末状无伴结成块，即可将种子均匀播撒于萌芽培养基中；以上过程均须在超净工作台中无菌操作。