淫羊藿苷元在制备预防或治疗肺纤维化药物中的应用

摘要

本发明请求保护淫羊藿苷元用于制备预防或治疗肺纤维化药物的用途，属于医药领域。本发明所述淫羊藿苷元为从传统中药淫羊藿中提取得到的中药单体，动物试验显示,其对于肺纤维化具有显著的防治作用。淫羊藿苷元抗肺纤维化作用疗效确切、副作用低，有广阔的医疗应用前景。

权利要求

1.淫羊藿苷元在制备预防或治疗肺纤维化药物中的用途。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于所述淫羊藿苷元的人用给药量为0.001mg/kg·d～50mg/kg·d。

3.如权利要求2所述的用途，其特征在于所述淫羊藿苷元的人用给药量为0.01mg/kg·d～10mg/kg·d。

4.如权利要求1所述的用途，其特征在于所述淫羊藿苷元为口服制剂、舌下含服制剂或注射制剂。

5.如权利要求4所述的用途，其特征在于所述口服制剂为其片剂、胶囊剂或微乳制剂。

6.如权利要求4所述的用途，其特征在于所述注射制剂为其注射液或注射微乳。

7.如权利要求4所述的用途，其特征在于每一制剂单位中含有淫羊藿苷元的含量为

0.001mg～50mg。

说明书

淫羊藿苷元在制备预防或治疗肺纤维化药物中的应用

技术领域

[0001] 本发明属于医药领域，涉及一种淫羊藿苷元的医药用途，具体涉及淫羊藿苷元在制备预防或治疗肺纤维化药物中的医药用途。

背景技术

[0002] 肺纤维化是多种间质性肺疾病的最终病理改变，其特征是长期弥漫性肺泡炎，成纤维细胞过度增殖，继而出现细胞外基质沉积过多，并逐渐取代正常肺组织，最终造成肺功能障碍，病人可能因呼吸衰竭而死亡。肺纤维化大体可分为原因已明(如放射线、药物、矽肺等)和原因未明(如特发性肺纤维化)两大类。研究认为病原微生物、粉尘、药物、化学制剂等多种因素均可诱导肺纤维化的发生，但其详细机制尚不清楚。肺纤维化可发生于任何年龄，全球发病率为7-10/10万，患者平均生存时间为3-4年，且随着年龄的增长，发病率逐渐增高而平均生存时间逐渐缩短。由此可见，肺纤维化严重危害人类的健康和生存，抗肺纤维化药物的研究与开发显得十分重要。

[0003] 目前抗肺纤维化的药物主要有：1)糖皮质激素，是目前临床治疗的主要选择，但这类药物副反应大，严重影响机体免疫功能，增加继发感染的可能性；2)干扰素γ(IFN-γ)，不良反应较多、易诱发耐受；3)细胞毒性药物(硫唑嘌呤、环磷酰胺等)，治疗药物选择性差、不良反应多；4)抗氧化剂(N-乙酰半胱氨酸等)，疗效不够理想；5)其他药物，秋水仙碱、吡啡呢酮等。鉴于此，有必要研制新型的高效、安全的治疗肺纤维化的药物。

[0004] 淫羊藿为小檗科植物淫羊藿、箭叶淫羊藿、粗毛淫羊藿、巫山淫羊藿或朝鲜淫羊藿的干燥地上部分。淫羊藿含多种黄酮类成分，如淫羊藿苷、淫羊藿次苷、淫羊藿苷元(Icaritin，ICT)等。中医认为其味辛、甘，性温，归肝、肾经，主治功能：补肾阳，强筋骨，祛风湿。淫羊藿苷元属黄酮醇类化合物，少量存在于淫羊藿药材中，其化学结构式如下：

[0005]

[0006] 淫羊藿苷元可以从淫羊藿药材或淫羊藿苷的体内代谢物中分离得到(孙朋悦，徐颖，文晔等，朝鲜淫羊藿的化学成分，中国植物化学杂志，1998，8(2)：122-125；刘铁汉，王毅，吴立军等，淫羊藿苷的肠菌代谢研究I.肠内细菌对淫羊藿苷的代谢转化，2000，31(11)：834-837)，或将淫羊藿苷经酶解分离得到(叶海涌，刘健，楼宜嘉，淫羊藿苷衍生物的制备及其雌激素样作用研究，浙江大学学报，2005，34(2)：131-136)。

[0007] 有文献报道淫羊藿苷元具有抗Aβ肽致大鼠原代培养神经细胞凋亡的作用(张翔南，王欢欢，王志强等，淫羊藿苷元抗Aβ肽致大鼠原代培养神经细胞凋亡的作用，浙江大学学报，2007，36(3)：224-226)。中国专利CN101836976A公开了淫羊藿苷元具有抗肿瘤血管生成的作用。中国专利CN101428015A公开了淫羊藿苷元具有抗内毒素血症的作用。中国专利CN101284000A公开了淫羊藿苷元具有防治肥胖症或脂肪肝的作用。中国专利CN1869204A公开了淫羊藿苷元在诱导干细胞体外定向分化方面的用途。中国专利CN1194701C公开了淫羊藿苷元或去甲基淫羊藿苷元具有在制备雌激素受体调节剂中的应用。

[0008] 但迄今为止，未见有关淫羊藿苷元抗肺纤维化生物活性或临床应用方面的研究。

发明内容

[0009] 本发明提供了一种新的预防或治疗肺纤维化的药物，该药物以淫羊藿苷元为药物活性成分。淫羊藿苷元为从中药淫羊藿中提取的一种中药单体，现有技术表明其具有多种治疗活性，因此本发明涉及淫羊藿苷元的一种新的医药用途，即淫羊藿苷元在制备预防或治疗肺纤维化药物中的用途。

[0010] 上述所述的医药用途中，淫羊藿苷元可以制备成合适的药物剂型口服给药或注射给药，其适用对象可以为人或其他恒温动物。当适用对象为人时，淫羊藿苷元的用量优选为0.001mg/kg·d～50mg/kg·d，进一步优选为0.01mg/kg·d～10mg/kg·d。对于本发明预防或治疗肺纤维化的药物的给药时间和给药次数需要根据病情的具体诊断结果而定，这在本领域技术人员掌握的技术范围之内。例如，将对小鼠预防或治疗肺纤维化的治疗方案应用于人身上，所用药物对人的有效剂量可以通过该药物对小鼠的有效剂量进行换算，这对于本领域的普通技术人员来说是显而易见的。

[0011] 上述所述的医药用途中，根据动物病情以及用药部位可以将淫羊藿苷元制备成合适的药物制剂以方便用药，如淫羊藿苷元可以开发成口服制剂、舌下含服制剂或注射制剂方便患者的使用，其中所述口服制剂可以为片剂、胶囊剂或微乳制剂，优选为片剂；所述舌下含服制剂为含有淫羊藿苷元并适用舌下给药的药物制剂，优选为其舌下片；所述注射制剂 可以为其注射液、注射微乳等，优选为注射液。当淫羊藿苷元制备成注射液时，药物可接受的载体可以为注射用水、氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸、甘油、乙醇、丙二醇等。上述所述淫羊藿苷元注射液还可以根据药物的性质加入适宜的附加剂，如渗透压调节剂、pH值调节剂、增溶剂、治疗氧剂、抑菌剂、乳化剂、助悬剂等，其中所述增溶剂为聚乙二醇400、吐温-80中的任意一种或两种。

[0012] 上述药物制剂的制备方法均可采用本领域技术人员制备该种剂型常规使用制备方法制得。上述药物制剂中，每一制剂单位中含有淫羊藿苷元的含量为0.001mg～50mg。

[0013] 与现有技术相比，本发明的优势在于：

[0014] 1、本发明所述的淫羊藿苷元具有显著的预防或治疗肺纤维化的作用。本发明实施例10显示本发明的淫羊藿苷元能够显著提高肺纤维化小鼠的存活率，提高肺纤维化小鼠的脾脏指数和胸腺指数、降低肺纤维化小鼠的肺指数，减轻肺纤维化小鼠的肺纤维化程度，对于肺纤维化具有显著的治疗作用。

[0015] 2、本发明所述淫羊藿苷元是从传统中药淫羊藿中提取得到的天然中药单体，其对人体毒副作用低，可以显著提高患者的用药安全性和用药依从性，进而大幅度改善了肺纤维化患者的治疗效果和生活质量。

具体实施方式

[0016] 为了使本领域技术人员充分了解本发明，以下通过具体的实施例进一步说明本发明，但本领域技术人员应该知晓，本发明实施例并不以任何方式限制本发明。

[0017] 实施例1淫羊藿苷元注射液

[0018]

[0019] 制备工艺：将处方量的丙二醇和乙醇混合均匀，加入淫羊藿苷元，搅拌溶解，加入处方量的0.9％氯化钠溶液，搅拌均匀，加入0.5％针用活性炭，搅拌，脱炭，即得。

[0020] 实施例2淫羊藿苷元注射液

[0021]

[0022]

[0023] 制备工艺：向处方量的PEG-400加入淫羊藿苷元，搅拌溶解，加入0.9％氯化钠溶液至10L，搅拌均匀，加入0.5％针用活性炭，搅拌，脱炭，即得。

[0024] 实施例3淫羊藿苷元注射液

[0025]

[0026] 制备工艺：将处方量的乙醇和吐温-80混合均匀，加入淫羊藿苷元，搅拌溶解，加入注射用水至10L，搅拌均匀，加入0.5％针用活性炭，搅拌，脱炭，即得。

[0027] 实施例4淫羊藿苷元注射液

[0028] 淫羊藿苷元   0.01g

[0029] 乙醇         3.3L

[0030] 注射用水     加至10L

[0031] 制备工艺：将处方量的乙醇加入淫羊藿苷元，搅拌溶解，加入注射用水至10L，搅拌均匀，加入0.5％针用活性炭，搅拌，脱炭，即得。

[0032] 实施例5片剂的制备

[0033]

[0034] 制备工艺:将淫羊藿苷元和辅料微晶纤维素、羧甲基淀粉钠混合均匀，加入适量的淀粉浆制软材，然后过16目筛制粒。湿颗粒在60℃干燥，干颗粒过20目筛整粒，筛出干粒中的细粉，与硬脂酸镁混匀，然后再与干颗粒混匀，压片，每片约200mg，即得。

[0035] 实施例6淫羊藿苷元舌下片

[0036]

[0037] 制备工艺：上述组分烘干、粉碎过筛预处理后混匀直接压片制得。

[0038] 实施例7淫羊藿苷元舌下片

[0039]

[0040] 制备工艺：将主药及各辅料成分烘干、粉碎过筛预处理，将主药与糖分、乳糖、羧甲基纤维素钠混匀，以纯水作为粘合剂将混匀的物料制备软材，过20目筛制粒并于60℃下干燥制备干颗粒，将硬脂酸镁加入到上述干颗粒总混，压片即得。

[0041] 实施例8微乳浓缩物

[0042]

[0043] 制备工艺：称取处方量中链脂肪酸甘油酯、聚氧乙烯蓖麻油EL-40、1，2-丙二醇、无水乙醇，混合后搅拌均匀，然后加入淫羊藿苷元溶解，也可以超声波处理以加速溶解，得澄清浓缩液，即为淫羊藿苷元微乳浓缩物。上述微乳浓缩物可进一步稀释用于注射或口服。

[0044] 实施例9微乳浓缩物

[0045]

[0046] 制备工艺：称取处方量PEG-2-硬脂酸酯、吐温-20、1-己醇、PEG3350混合后搅拌均匀，然后加入淫羊藿苷元溶解，也可以超声波处理以加速溶解，得澄清浓缩液，即为淫羊藿苷元微乳浓缩物。上述微乳浓缩物可以根据用药需要进行进一步稀释用于患者注射给药或口服给药。

[0047] 实施例10淫羊藿苷元对小鼠肺纤维化的作用研究

[0048] 1.动物分组及给药

[0049] 健康ICR小鼠，SPF级，雄性，105只，体重(20±2)g，将小鼠按体重随机分为7组，每组15只，分别为正常对照组、模型对照组、淫羊藿苷元低剂量注射组、淫羊藿苷元中剂量注射组、淫羊藿苷元高剂量注射组、淫羊藿苷元灌胃组、地塞米松组。腹腔注射水合氯醛350mg/kg麻醉小鼠，正常对照组气管滴注生理盐水，其余6组气管滴注博莱霉素(5mg/kg)，滴注后立即将小鼠直立旋转2min使药液在肺内均匀分布，放回笼中正常饲养。

[0050] 淫羊藿苷元和地塞米松用0.5％羧甲基纤维素钠混悬，自造模后第2天起，连续给药，每日一次，正常组及模型组给予等容量的0.5％羧甲基纤维素钠。

[0051] 各组分别给予下述药物：

[0052] 正常对照组：等体积的羧甲基纤维素钠，腹腔注射

[0053] 模型对照组：等体积的羧甲基纤维素钠，腹腔注射

[0054] 淫羊藿苷元低剂量注射组：1mg/kg淫羊藿苷元，腹腔注射

[0055] 淫羊藿苷元中剂量注射组：3mg/kg淫羊藿苷元，腹腔注射

[0056] 淫羊藿苷元高剂量注射组：9mg/kg淫羊藿苷元，腹腔注射

[0057] 淫羊藿苷元灌胃组：15mg/kg淫羊藿苷元，灌胃给药

[0058] 地塞米松组：5mg/kg地塞米松磷酸钠注射液，腹腔注射

[0059] 2.实验方法及数据处理

[0060] 每日测量小鼠体重，记录小鼠死亡时间。在造模后第30天，腹腔注射水合氯醛350mg/kg麻醉小鼠，腹主动脉放血处死，取小鼠脾脏、胸腺和肺，进行称重。取各组小鼠左肺下叶，置于4％甲醛固定，其余肺组织置于-70℃冷冻保存。

[0061] 2.1小鼠存活率的统计

[0062] 统计小鼠造模后第30天的存活率。

[0063] 2.2小鼠脾脏、胸腺、肺指数的计算

[0064] 按以下公式计算各组别小鼠的脾脏、胸腺、肺指数。

[0065]

[0066]

[0067]

[0068] 2.3小鼠肺纤维化程度的计算

[0069] 肺组织固定1周后，常规脱水、包埋、切片，参照Szapiel等(Szapiel S V,Elson N A,Fulmer J D.Bleomycin-induced interstitial pulmonary disease in the nude,athymic mouse[J].Am Rev Respir Dis,1979,120:893.)的方法评价肺纤维化的程度，并将等级资料转化为计量资料。无肺泡炎或肺纤维化(-，1分)；轻度肺泡炎或肺纤维化(+，2分)；中度肺泡炎或肺纤维化(++，3分)；重度肺泡炎或肺纤维化(+++，4分)。

[0070] 2.4数据统计与分析

[0071] 数据以 表示，采用SPSS15.0软件进行方差分析。

[0072] 3.结果与讨论

[0073] 3.1淫羊藿苷元对肺纤维化小鼠存活率的影响

[0074] 表1淫羊藿苷元对博来霉素致肺纤维化小鼠存活率的影响

[0075]

[0076]

[0077] 表1结果表明：造模后第30天，模型组小鼠存活率为53.3％；地塞米松组存活率与模型组相近；淫羊藿苷元低、中、高剂量注射组小鼠存活率为60.0％、93.3％、73.3％；淫羊藿苷元灌胃组小鼠存活率为66.7％。表明淫羊藿苷元可明显提高肺纤维化小鼠的存活率。

[0078] 3.2淫藿苷元对肺纤维化小鼠脾脏、胸腺、肺指数的影响

[0079] 表2淫羊藿苷元对博来霉素致肺纤维化小鼠脾脏、胸腺、肺指数的影响

[0080]

[0081] 与正常对照组相比，￥P<0.05，￥￥P<0.01；

[0082] 与模型对照组相比，#P<0.05，##P<0.01；

[0083] 表2结果表明，淫羊藿苷元能够提高肺纤维化小鼠的脾脏指数和胸腺指数，降低肺纤维化小鼠的肺指数。

[0084] 3.3淫羊藿苷元对肺纤维化小鼠肺组织病变的影响

[0085] 表3淫羊藿苷元对博来霉素致肺纤维化小鼠肺纤维化程度的影响

[0086]

[0087]

[0088] 与正常对照组相比，￥P<0.05，￥￥P<0.01；

[0089] 与模型对照组相比，#P<0.05，##P<0.01；

[0090] 如表3所示，造模后第30天，模型组肺组织纤维化程度非常严重，淫羊藿苷元各组和地塞米松组能够显著减低肺纤维化程度，其中淫羊藿苷元中剂量注射组降低肺纤维化程度的效果最好。

[0091] 综上所述，淫羊藿苷元具有预防和/或治疗肺纤维化疾病的功效。