无钠离子软骨素酶解液制备方法

摘要

本发明公开一种无钠离子软骨素酶解液制备方法，酶解过程采用氨水做为PH值碱性调节剂。通过使用氨水作为生产过程中的调碱剂，可以避免加入烧碱带来钠离子，生产所得酶解液为低钠溶液，从而从源头保证了钙盐质量。同时减少生产中氯化钠的生成，降低废水废渣中无机盐含量，减轻污水处理难度。具有成本低，环保等优点，无钠离子酶解液可直接进行软骨素钙盐等生产，减少了软骨素钙盐等生产中的除钠过程，同时生产废水中无钠盐产生，且含有大量有机氮和无机氮，增加了氮含量，可作为液态肥料，直接稀释后用于浇灌农田，经济生态效益明显。

权利要求

1.一种无钠离子软骨素酶解液制备方法，其特征在于：酶解过程采用氨水做为pH值碱性调节剂，包括以下步骤：

1) 将动物鲜软骨加水至漫过软骨，加热至沸腾后，100℃蒸煮熟化8～24h，分层除上层油脂，得蒸煮液；

2)将步骤1)所得蒸煮液降温至45～50℃，加氨水调节pH为8.5～9.0，加入2709碱性蛋白酶，酶解1～4h，再次加氨水调节pH至8.0～8.5并控制温度为40～45℃，加入粉碎的猪胰脏，保持pH8.0～8.5酶解4h，得粗酶解液；

3) 用盐酸调节步骤2)所得粗酶解液pH为5.5，然后升温至80～90℃，静置30min，分层取上清液，得无钠离子软骨素酶解液。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤1）中动物鲜软骨为牛、羊、鸡、鸭或猪的鲜软骨。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤2）中2709碱性蛋白酶的加入量为步骤1）动物鲜软骨重的0.1～1.5‰；猪胰脏的加入量为动物鲜软骨重的1.5～2.5%；所述的氨水质量浓度为10～28%。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：2709碱性蛋白酶的加入量为动物鲜软骨重的0.8‰。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤3）中用盐酸调节步骤2)所得粗酶解液pH为5.5后，先加入动物鲜软骨重0.01%～1.5%的二水氯化钙，再升温。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：二水氯化钙加入量为步骤1）动物鲜软骨重的0.2%。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤3）中所述的盐酸质量浓度为35%。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤2）和3）的操作均在搅拌条件下进行，所述的搅拌转速为30～65r/min。

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤3）中，分层取上清液后的废水中，钠离子含量<0.01wt%；废水中氮含量为游离氮0.5 wt %，氨基氮1.5 wt %，可作为液态肥料，稀释后用于浇灌农田。

说明书

无钠离子软骨素酶解液制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种软骨素生产方法，特别涉及一种无钠离子软骨素酶解液制备方法。

背景技术

[0002] 硫酸软骨素是一种提取于动物软骨的酸性粘多糖，在心血管疾病、关节病的防治等方面具有重要的作用，是目前市场上较重要的生化产品。硫酸软骨素除了作为药品外，大量的是作为改善关节病的补充品，作为健康食品和化妆品应用，市场呈快速上升的势头。硫酸软骨素是我国生化药物的第三大出口产品，仅次于氨基酸和肝素钠。

[0003] 传统方法提取的硫酸软骨素主要以钠盐形式存在，由于软骨素对钙的吸附能力比钠的强，使用后，常引起血管及毛细血管部位的钙沉积而导致瘀点和血肿。硫酸软骨素钙就能克服上述缺点，替代钠盐，从而使钙盐具有广泛的应用前景。硫酸软骨素钙作为传统软骨素钠盐的替代产品，可以清除体内血液中的脂质和脂蛋白，有效地防治冠心病，增加细胞的信使核糖核酸和脱氧核糖核酸的生物合成，促进细胞的新陈代谢，另外还具有缓和抗凝血作用及消炎镇痛功效 。

[0004] 目前硫酸软骨素钙的生产方法多为以钠盐作为原料：硫酸软骨素钠经水溶解，阳离子交换树脂处理，用氢氧化钙和氯化钙离子转型，然后加酒精沉淀，制得硫酸软骨素钙，干燥粉碎制得白色粉末状产品，即为成品。该方法需经钠盐提取过程，硫酸软骨素损失大，收率减少。直接进行钙盐的生产将会大大降低钙盐成本，但传统软骨素酶解提取过程中，需要使用大量的钠盐，酶解液钠离子含量高，需要进行钙离子转型，使得钙盐的生产难度大。减少生产过程中钠离子的使用，可以减少去除钠离子的难度。

[0005] 同时生产中大量使用烧碱作为调碱剂，盐酸作为调酸剂，使得废水废渣中增加大量的氯化钠，加大了污水处理成本。

发明内容

[0006] 本发明针对现有技术存在的上述缺点，提出一种无钠离子软骨素酶解液制备方法，本发明方法减少了软骨素酶解提取过程中钠盐的产生，并可直接生产软骨素钙盐、软骨素钠盐或其他盐。

[0007] 本发明技术方案如下：

[0008] 一种无钠离子软骨素酶解液制备方法，其特征在于：酶解过程采用氨水做为PH值碱性调节剂。

[0009] 上述无钠离子软骨素酶解液制备方法，包括以下步骤：

[0010] 1) 将动物鲜软骨加水至漫过软骨，加热至沸腾后，100℃蒸煮熟化8～24h，分层除上层油脂，得蒸煮液；

[0011] 2)将步骤1)所得蒸煮液降温至45～50℃，加氨水调节pH为8.5～9.0，加入2709碱性蛋白酶，酶解1～4h，再次加氨水调节pH至8.0～8.5并控制温度为40～45℃，加入粉碎的猪胰脏，保持pH8.0～8.5酶解4h，得粗酶解液；

[0012] 3) 用盐酸调节步骤2)所得粗酶解液pH为5.5，然后升温至80～90℃，静置30min，分层取上清液，得无钠离子软骨素酶解液。

[0013] 优选地， 步骤1）中动物鲜软骨为牛、羊、鸡、鸭或猪等的鲜软骨，或者上述动物干软骨，采用干软骨时，每重量份干软骨可替换1.5～2份鲜软骨。

[0014] 优选地， 步骤2）中2709碱性蛋白酶的加入量为步骤1）动物鲜软骨重的0.1～1.5‰，最优选0.8‰。

[0015] 优选地， 步骤2）中猪胰脏的加入量为动物鲜软骨重的1.5～2.5%。

[0016] 优选地， 步骤2）中所述的氨水质量浓度为10～28%。

[0017] 进一步地，步骤3）中用盐酸调节步骤2)所得粗酶解液pH为5.5后，先加入动物鲜软骨重0.01%～1.5%的二水氯化钙，再升温；最优选二水氯化钙加入量为步骤1）动物鲜软骨重的0.2%。

[0018] 优选地， 步骤3）中所述的盐酸质量浓度为35%。

[0019] 优选地，步骤2）和3）的操作均在搅拌条件下进行，所述的搅拌转速为30～65r/min。

[0020] 本发明无钠离子软骨素酶解液制备方法，废水中钠离子含量<0.01wt%；废水中氮含量为游离氮0.5 wt %，氨基氮1.5 wt %，可作为液态肥料，稀释后用于浇灌农田。

[0021] 本发明目的是通过采用氨水代替烧碱作为调碱剂实现的。酶解生产过程由氨水做为调碱剂，可以避免加入烧碱带来钠离子，生产所得酶解液为低钠溶液，从而从源头保证了钙盐质量。同时减少生产中氯化钠的生成，降低废水废渣中无机盐含量，减轻污水处理难度。

[0022] 本发明制备方法具有成本低，环保等优点，无钠离子酶解液可直接进行软骨素钙盐等生产，减少了软骨素钙盐等生产中的除钠过程，同时生产废水中无钠盐产生，且含有大量有机氮和无机氮，增加了氮含量，可作为液态肥料，直接稀释后用于浇灌农田，经济生态效益明显。

具体实施方式

[0023] 为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面通过具体实施例对本发明进一步详细说明，但实施例不限制本发明。

[0024] 实施例1

[0025] 1）10000Kg鲜牛软骨从罐下部开蒸汽加热下沉，后加少量水漫过软骨，沸腾后，100℃保温24h，关好蒸汽，除去上层油脂，得蒸煮液；

[0026] 2）开启搅拌，搅拌转速为45r/min，将步骤1)所得蒸煮液开冷却水降温到50℃；加质量浓度为20%的氨水调节蒸煮液pH为8.5，加入2709碱性蛋白酶10Kg，控制温度在45～50℃，酶解2h；再次加质量浓度为20%的氨水调节pH至8.5并控制温度40～45℃，加入粉碎为肉泥的猪胰脏200Kg，保持pH8.0～8.5酶解4h，得粗酶解液；

[0027] 3）45r/min搅拌下，用质量浓度为35%的盐酸调至酶解液pH为5.5，然后升温至90℃，搅拌0.5h，静置30min，分层取上清液，即为本实施例无钠离子软骨素酶解液。

[0028] 将实施例1无钠离子软骨素酶解液打入树脂罐，下部骨渣加热水洗两次，也打入树脂罐吸附1h，放掉母液，树脂洗涤洗脱，洗脱液调pH11，双氧水氧化24h后，过滤，滤液调pH6.5酒精沉淀，脱水，烘干，粉碎，即得200Kg软骨素成品，收率1.94%、纯度97%。

[0029] 本实施例制备无钠离子软骨素酶解液的废水中钠离子含量0.005wt%；废水中氮含量为游离氮0.5 wt %，氨基氮1.5 wt %，可作为液态肥料，稀释后用于浇灌农田。

[0030] 实施例2

[0031] 1）10000Kg鲜羊软骨从罐下部开蒸汽加热下沉，后加少量水漫过软骨，沸腾后，100℃保温8h，关好蒸汽，除去上层油脂，得蒸煮液；

[0032] 2）开启搅拌，搅拌转速为30r/min，将步骤1)所得蒸煮液开冷却水降温到45℃；加质量浓度为10%的氨水调节蒸煮液pH为8.5，加入2709碱性蛋白酶10Kg，酶解1h；再次加质量浓度为10%的氨水调节pH至8.0并控制温度40～45℃，加入粉碎为肉泥的猪胰脏100Kg，保持pH8.0酶解4h，得粗酶解液；

[0033] 3）30r/min搅拌下，用质量浓度为35%的盐酸调至酶解液pH为5.5，然后加入50Kg二水氯化钙，再升温至80℃，搅拌0.5h，静置30min，分层取上清液，即为本实施例无钠离子软骨素酶解液。

[0034] 将实施例2无钠离子软骨素酶解液采用与实施例1相同的后续操作，即得215Kg软骨素成品，收率2.13%%、纯度99.1%。

[0035] 本实施例制备无钠离子软骨素酶解液的废水中钠离子含量0.006wt%；废水中氮含量为游离氮0.5 wt %，氨基氮1.5 wt %，可作为液态肥料，稀释后用于浇灌农田。

[0036] 实施例3

[0037] 1）10000Kg鲜牛软骨从罐下部开蒸汽加热下沉，后加少量水漫过软骨，沸腾后，100℃保温12h，关好蒸汽，除去上层油脂，得蒸煮液；

[0038] 2）开启搅拌，搅拌转速为65r/min，将步骤1)所得蒸煮液开冷却水降温到50℃；加质量浓度为28%的氨水调节蒸煮液pH为9.0，加入2709碱性蛋白酶15Kg，酶解4h；再次加质量浓度为28%的氨水调节pH至8.5并控制温度40～45℃，加入粉碎为肉泥的猪胰脏500Kg，保持pH8.0酶解4h，得粗酶解液；

[0039] 3）65r/min搅拌下，用质量浓度为35%的盐酸调至酶解液pH为5.5，然后加入150Kg二水氯化钙，再升温至90℃，搅拌0.5h，静置30min，分层取上清液，即为本实施例无钠离子软骨素酶解液。

[0040] 将实施例3无钠离子软骨素酶解液采用与实施例1相同的后续操作，即得 214Kg软骨素成品，收率 2.11%、纯度98.7%。

[0041] 本实施例制备无钠离子软骨素酶解液的废水中钠离子含量0.007wt%；废水中氮含量为游离氮0.5 wt %，氨基氮1.5 wt %，可作为液态肥料，稀释后用于浇灌农田。

[0042] 上述实施例制备过程中均无钠离子引入，所得酶解液具体成分见表1。

[0043] 对比例1

[0044] 对比例1的软骨素酶解液制备方法与实施例1不同之处在于NaOH代替氨水作为碱性PH调节剂，其他操作均相同。

[0045] 将对比例1的软骨素酶解液采用与实施例1相同的后续操作，得201Kg软骨素成品，收率1.95%、纯度97.1%。

[0046] 表1实施例和对比例检测结果

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