生物有机肥发酵液体微生物菌剂及其制备方法

摘要

本发明提供了一种生物有机肥发酵液体微生物菌剂，它包括以下组分：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酿酒酵母、乳酸杆菌和黑曲霉。上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂具有配方科学，发酵初期升温迅速，高温持续时间长，蛋白酶和纤维素酶活性高且稳定，发酵时间短，酶活强、活菌数高，除臭效果好等特点。本发明还提供一种上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂的制备方法。

权利要求

1.一种生物有机肥发酵液体微生物菌剂，其特征在于，它由以下体积百分数的组分组成：枯草芽孢杆菌菌液40%-50%、地衣芽孢杆菌菌液12%-18%、酿酒酵母菌液16%-24%、乳酸杆菌菌液7%-9%和黑曲霉菌液10%-14%，其中，所述枯草芽孢杆菌菌液、所述地衣芽孢杆菌菌液、所述酿酒酵母菌液、所述乳酸杆菌菌液和所述黑曲霉菌液的浓度为9-11亿cfu/ml。

2.一种权利要求1所述的生物有机肥发酵液体微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：

活化培养：将枯草芽孢杆菌菌种、地衣芽孢杆菌菌种、酿酒酵母菌种、乳酸杆菌菌种、黑曲霉菌种分别接种到相应的培养基中进行活化培养，分别得到一代菌株；

扩大培养：将所述枯草芽孢杆菌的一代菌株和所述地衣芽孢杆菌的一代菌株分别接种到肉汤琼脂培养基中进行培养，分别得到权利要求1中所述的枯草芽孢杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液；将所述酿酒酵母的一代菌株、所述黑曲霉的一代菌株分别接种到PDA培养基中进行培养，分别得到权利要求1中所述的酿酒酵母菌液和黑曲霉菌液；将所述乳酸杆菌的一代菌株接种到MRS培养基中进行培养，得到权利要求1中所述的乳酸杆菌菌液；

制备菌剂：按照权利要求1所述的组分，对所述枯草芽孢杆菌菌液、所述地衣芽孢杆菌菌液、所述酿酒酵母菌液、所述乳酸杆菌菌液和所述黑曲霉菌液进行混合，得到所述生物有机肥发酵液体微生物菌剂。

3.根据权利要求2所述的生物有机肥发酵液体微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述活化培养的步骤包括：采用肉汤琼脂培养基分别对所述枯草芽孢杆菌菌种和所述地衣芽孢杆菌菌种进行活化培养，分别得到所述枯草芽孢杆菌的一代菌株和所述地衣芽孢杆菌的一代菌株；采用PDA培养基分别对所述酿酒酵母菌种和所述黑曲霉菌种进行活化培养，分别得到所述酿酒酵母的一代菌株和所述黑曲霉的一代菌株；采用MRS培养基对所述乳酸杆菌菌种进行活化培养，得到所述乳酸杆菌一代菌株。

4.根据权利要求3所述的生物有机肥发酵液体微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述活化培养步骤中的培养温度为29-31℃，活化培养时间为20-28小时。

5.根据权利要求2-4任一项所述的生物有机肥发酵液体微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述扩培培养步骤中的培养温度为27-29℃，扩大 培养时间为40-56小时。

说明书

生物有机肥发酵液体微生物菌剂及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及微生物发酵领域，尤其是涉及一种生物有机肥发酵液体微生物菌剂及其制备方法。

背景技术

[0002] 随着中国畜禽养殖的迅猛发展，畜禽粪便的产量也在迅速增长，据统计2011年中国畜禽粪便产量达21.21亿吨，随着畜禽养殖量的增加而迅速增加，预计到2020年将达到28.75亿吨，畜禽粪便处理已经严重影响畜禽产业的可持续发展，且造成环境污染；农作物秸秆在国内的利用率也较低，大部分被焚烧或废弃，大量温室气体对环境同样造成污染；食用菌下脚料作为废料大部分是直接废弃，占用场地，也污染环境。上述的这些有机固体废弃物资源化利用率非常低。

[0003] 现阶段国内外对于有机固体废弃物资源化处理方面都在积极探索，同时也出现了一系列的相关微生物菌剂用于有机固体废弃物发酵。但在发酵资源化处理过程中普遍存在微生物菌剂种类单一、分解大分子蛋白和粗纤维能力弱且氮素易损耗，产生刺鼻异味等问题。

发明内容

[0004] 因此，本发明的目的是解决现有产品的不足，提供一种生物有机肥发酵液体微生物菌剂及其制备方法，解决原有有机固体废弃物资源化处理过程中普遍存在微生物菌剂种类单一、分解大分子蛋白和粗纤维能力弱且氮素易损耗，产生刺鼻异味等问题。

[0005] 本发明采取的技术方案如下：

[0006] 一种生物有机肥发酵液体微生物菌剂，其包括枯草芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、酿酒酵母菌液、乳酸杆菌菌液和黑曲霉菌液。

[0007] 基于上述，它包括以下体积百分数的组分：枯草芽孢杆菌菌液40%-50%、地衣芽孢杆菌菌液12%-18%、酿酒酵母菌液16%-24%、乳酸杆菌菌液7%-9%和黑曲霉菌液10%-14%，其中，所述枯草芽孢杆菌菌液、所述地衣芽孢杆菌菌液、所述酿酒酵母菌液、所述乳酸杆菌菌液和所述黑曲霉菌液的浓度为9-11亿cfu/ml。

[0008] 一种上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂的制备方法包括以下步骤：

[0009] 活化培养：将枯草芽孢杆菌菌种、地衣芽孢杆菌菌种、酿酒酵母菌种、乳酸杆菌菌种、黑曲霉菌种分别接种到相应的培养基中进行活化培养，分别得到一代菌株；

[0010] 扩大培养：将所述枯草芽孢杆菌的一代菌株和所述地衣芽孢杆菌的一代菌株分别接种到肉汤琼脂培养基中进行培养，分别得到枯草芽孢杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液；将所述酿酒酵母的一代菌株、所述黑曲霉的一代菌株分别接种到PDA培养基中进行培养，分别得到酿酒酵母菌液和黑曲霉菌液；将所述乳酸杆菌的一代菌株接种到MRS培养基中进行培养得到乳酸杆菌菌液；

[0011] 制备菌剂：对所述枯草芽孢杆菌菌液、所述地衣芽孢杆菌菌液、所述酿酒酵母菌液、所述乳酸杆菌菌液和所述黑曲霉菌液进行混合，得到所述生物有机肥发酵液体微生物菌剂。

[0012] 基于上述，所述活化培养的步骤包括：采用肉汤琼脂培养基分别对所述枯草芽孢杆菌菌种和所述地衣芽孢杆菌菌种进行活化培养，分别得到所述枯草芽孢杆菌的一代菌株和所述地衣芽孢杆菌的一代菌株；采用PDA培养基分别对所述酿酒酵母菌种和所述黑曲霉菌种进行活化培养，分别得到所述酿酒酵母的一代菌株和所述黑曲霉的一代菌株；采用MRS培养基对所述乳酸杆菌菌种进行活化培养，得到所述乳酸杆菌一代菌株。

[0013] 基于上述，所述活化培养步骤中的培养温度为29-31℃，活化培养时间为20-28小时。

[0014] 基于上述，所述扩培培养步骤中的培养温度为27-29℃，扩培培养时间为40-56小时。

[0015] 其中，所述活化培养步骤中培养得到的所述枯草芽孢杆菌菌液、所述地衣芽孢杆菌菌液、所述酿酒酵母菌液、所述乳酸杆菌菌液和所述黑曲霉菌液的浓度为9-11亿cfu/ml；在所述制备菌剂的步骤中，各菌液按照以下体积百分数混合：枯草芽孢杆菌菌液40%-50%、地衣芽孢杆菌菌液12%-18%、酿酒酵母菌液16%-24%、乳酸杆菌菌液7%-9%和黑曲霉菌液10%-
14%。

[0016] 与现有技术相比，本发明提供的所述生物有机肥发酵液体微生物菌剂主要包括枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酿酒酵母、乳酸杆菌和黑曲霉等五种微生物，通过该五种菌种复配而成的一种高效产纤维素酶、蛋白酶和除臭活性物质的功能复合菌剂；所述生物有机肥发酵液体微生物菌剂还可以对畜禽粪便、秸秆、食用菌下脚料等有机废弃物在48℃-68℃进行高效环保快速发酵处理，所述生物有机肥发酵液体微生物菌剂中的各微生物之间分工作用明确，对于难以降解的大分子蛋白和粗纤维具有高效降解性能、稳定强，从而使得有机肥、饲料中含有大量的有益活菌、分解酶类和生物活性因子，增加畜禽粪便、秸秆、食用菌下脚料等有机废弃物的资源化利用率。因此，本发明提供的生物有机肥发酵液体微生物菌剂具有配方科学、具有发酵初期升温迅速，高温持续时间长，蛋白酶和纤维素酶活性高且稳定，发酵时间短，酶活强、活菌数高，除臭效果好等特点，而且该生物有机肥发酵液体微生物菌剂不仅解决了环境污染问题，同时将畜禽粪便、秸秆、食用菌下脚料等有机废弃物中的蛋白质、纤维素等有益物质回收使用，同时还为畜禽粪便、秸秆、食用菌下脚料等有机废弃物资源化利用提供了保障。而且本发明提供的上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂是通过按照一定的体积分数将上述五种菌液进行混合而得到，因此，本发明提供的上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂的制备方法比较简单，易于操作生产。

[0017] 进一步，本发明提供的生物有机肥发酵液体微生物菌剂主要由45%枯草芽孢杆菌菌液、15%地衣芽孢杆菌菌液、20%酿酒酵母菌液、8%乳酸杆菌菌液、12%黑曲霉菌液组成的多功能复合菌剂，并具有结构优、效果稳、酶活强、活菌数高等特点。

具体实施方式

[0018] 下面通过具体实施方式，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。

[0019] 实施例1

[0020] 1.1 生物有机肥发酵液体微生物菌剂

[0021] 本发明实施例1提供一种生物有机肥发酵液体微生物菌剂，它包括以下体积百分数的组分：枯草芽孢杆菌菌液40%、地衣芽孢杆菌菌液18%、酿酒酵母菌液23%、乳酸杆菌菌液7%和黑曲霉菌液10%，其中，所述枯草芽孢杆菌菌液、所述地衣芽孢杆菌菌液、所述酿酒酵母菌液、所述乳酸杆菌菌液和所述黑曲霉菌液的浓度为9亿cfu/ml。

[0022] 1.2 制备方法

[0023] 本实施例提供的上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：

[0024] 活化培养：将枯草芽孢杆菌菌种、地衣芽孢杆菌菌种、酿酒酵母菌种、乳酸杆菌菌种、黑曲霉菌种分别接种到相应的培养基中在29℃活化培养28小时，分别得到一代菌株；

[0025] 扩大培养：将所述枯草芽孢杆菌的一代菌株和所述地衣芽孢杆菌的一代菌株分别接种到肉汤琼脂培养基中，在27℃扩培培养56小时，分别得到浓度为9亿cfu/ml的枯草芽孢杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液；将所述酿酒酵母的一代菌株、所述黑曲霉的一代菌株分别接种到PDA培养基中，在27℃扩培培养56小时，分别得到浓度为9亿cfu/ml的酿酒酵母菌液和黑曲霉菌液；将所述乳酸杆菌的一代菌株接种到MRS培养基中，在27℃扩培培养56小时，得到浓度为9亿cfu/ml的乳酸杆菌菌液；

[0026] 制备菌剂：按照实施例1.1提供的生物有机肥发酵液体微生物菌剂的配方进行混合，得到上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂。

[0027] 1.3 应用

[0028] 利用实施例1.1提供的上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂可以发酵有机废弃物，具体方法包括以下步骤：提供含水量为65%的有机废弃物，作为发酵底物，其中，所述发酵底物由以下质量百分数的有机废弃物组成：畜禽粪便40%，秸秆30%，食用菌下脚料30%，且所述秸秆和食用菌下脚料为3-5 mm的颗粒；按照每1000 kg发酵底物加入0.9 L的实施例3.1提供的上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂的比例，将所述发酵底物与所述生物有机肥发酵液体微生物菌剂进行混合后，再用有机肥翻抛机3次混匀，并堆放成高0.7-0.8 m的矩形发酵底物堆；所述矩形发酵底物堆在57-59℃进行发酵，发酵7天后发酵底物松散，无臭味时结束发酵，得到生物有机肥。

[0029] 采用有机肥料NY525-2012标准规定的方法对利用本实施例提供的生物有机肥发酵液体微生物菌剂对鸡粪进行发酵得到的所述生物有机肥进行测试，其中，所述生物有机肥中的主要组分的质量百分含量如下：有机质63%，纯氮1.82%，磷（P2O5）1.93%，钾（K2O）2.13%，pH值为5.5-6.5，符合有机肥料的标准，可以直接用来作为有机肥施用。

[0030] 实施例2

[0031] 2.1 生物有机肥发酵液体微生物菌剂

[0032] 本发明实施例2提供一种生物有机肥发酵液体微生物菌剂，它包括以下体积百分数的组分：枯草芽孢杆菌菌液42%、地衣芽孢杆菌菌液16%、酿酒酵母菌液22%、乳酸杆菌菌液7.5%和黑曲霉菌液12.5%，其中，所述枯草芽孢杆菌菌液的浓度为9.2亿cfu/ml、所述地衣芽孢杆菌菌液的浓度为9.5亿cfu/ml、所述酿酒酵母菌液的浓度为10亿cfu/ml、所述乳酸杆菌菌液的浓度为9.8亿cfu/ml和所述黑曲霉菌液的浓度为9.3亿cfu/ml。

[0033] 2.2 制备方法

[0034] 本实施例提供的上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂的制备方法，与实施例1.2提供的制备方法基本相同，不同之处在于：

[0035] 在所述活化培养的步骤中，所述枯草芽孢杆菌菌种和地衣芽孢杆菌菌种分别接种到肉汤琼脂培养基中，在30℃活化培养24小时，分别得到枯草芽孢杆菌的一代菌株和地衣芽孢杆菌的一代菌株；将酿酒酵母菌种和黑曲霉菌种分别接种到PDA培养基中，在29℃活化培养26小时，分别得到酿酒酵母的一代菌株和黑曲霉的一代菌株；将乳酸杆菌菌种接种到MRS培养基中，在29℃活化培养24小时，得到乳酸杆菌一代菌株；

[0036] 在所述扩大培养的步骤中，所述枯草芽孢杆菌、所述地衣芽孢杆菌、所述酿酒酵母、所述黑曲霉和所述乳酸杆菌各自的一代菌株的扩培培养温度为28℃，扩培培养时间为50小时，最终得到的所述枯草芽孢杆菌菌液的浓度为9.2亿cfu/ml、所述地衣芽孢杆菌菌液的浓度为9.5亿cfu/ml、所述酿酒酵母菌液的浓度为10亿cfu/ml、所述乳酸杆菌菌液的浓度为9.8亿cfu/ml和所述黑曲霉菌液的浓度为9.3亿cfu/ml；

[0037] 在所述制备菌剂的步骤中，按照实施例2.1提供的生物有机肥发酵液体微生物菌剂的配方进行混合。

[0038] 利用实施例2.1提供的上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂可以发酵有机废弃物，具体方法与实施例1.3的方法基本相同。

[0039] 实施例3

[0040] 3.1 生物有机肥发酵液体微生物菌剂

[0041] 本发明实施例3提供一种生物有机肥发酵液体微生物菌剂，它包括以下体积百分数的组分：枯草芽孢杆菌菌液45%、地衣芽孢杆菌菌液15%、酿酒酵母菌液20%、乳酸杆菌菌液8%和黑曲霉菌液12%，其中，所述枯草芽孢杆菌菌液、所述地衣芽孢杆菌菌液、所述酿酒酵母菌液、所述乳酸杆菌菌液和所述黑曲霉菌液的浓度为10亿cfu/ml。

[0042] 3.2 制备方法

[0043] 本实施例提供的上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂的制备方法，与实施例2.2提供的制备方法基本相同，不同之处在于：

[0044] 在所述活化培养的步骤中，所述的五种微生物菌种的活化培养温度均为30℃，活化培养时间均为24小时；

[0045] 在所述扩大培养的步骤中，所述五种微生菌的一代菌株分别扩培培养温度为28℃，扩培培养时间为48小时，且最终得到的上述五种微生菌的菌液的浓度均为10亿cfu/ml；

[0046] 在所述制备菌剂的步骤中，按照实施例3.1提供的生物有机肥发酵液体微生物菌剂的配方进行混合。

[0047] 利用实施例3.1提供的上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂可以发酵有机废弃物，具体方法与实施例1.3的方法基本相同。

[0048] 实施例4

[0049] 4.1 生物有机肥发酵液体微生物菌剂

[0050] 本发明实施例4提供一种生物有机肥发酵液体微生物菌剂，它包括以下体积百分数的组分：枯草芽孢杆菌菌液48%、地衣芽孢杆菌菌液14%、酿酒酵母菌液18%、乳酸杆菌菌液9%和黑曲霉菌液11%，其中，所述枯草芽孢杆菌菌液的浓度为10.2亿cfu/ml、所述地衣芽孢杆菌菌液的浓度为10亿cfu/ml、所述酿酒酵母菌液的浓度为10.5亿cfu/ml、所述乳酸杆菌菌液的浓度为9.9亿cfu/ml和所述黑曲霉菌液的浓度为10.1亿cfu/ml。

[0051] 4.2 制备方法

[0052] 本实施例提供的上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂的制备方法，与实施例2.2提供的制备方法基本相同，不同之处在于：

[0053] 在所述活化培养的步骤中，所述的五种微生物菌种的活化培养温度均为31℃，活化培养时间均为20小时；

[0054] 在所述扩大培养的步骤中，所述五种微生菌的一代菌株分别扩培培养温度为29℃，扩培培养时间为40小时，且最终得到的实施例4.1所述浓度的五种微生菌菌液；

[0055] 在所述制备菌剂的步骤中，按照实施例4.1提供的生物有机肥发酵液体微生物菌剂的配方进行混合。

[0056] 利用实施例4.1提供的上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂可以发酵有机废弃物，具体方法与实施例1.3的方法基本相同。

[0057] 实施例5

[0058] 5.1 生物有机肥发酵液体微生物菌剂

[0059] 本发明实施例1提供一种生物有机肥发酵液体微生物菌剂，它包括以下体积百分数的组分：枯草芽孢杆菌菌液50%、地衣芽孢杆菌菌液12%、酿酒酵母菌液16%、乳酸杆菌菌液8%和黑曲霉菌液14%，其中，所述枯草芽孢杆菌菌液、所述地衣芽孢杆菌菌液、所述酿酒酵母菌液、所述乳酸杆菌菌液和所述黑曲霉菌液的浓度为11亿cfu/ml。

[0060] 5.2 制备方法

[0061] 本实施例提供的上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂的制备方法，与实施例3.2提供的制备方法基本相同，不同之处在于：在所述扩大培养的步骤中，最终得到的实施例5.1所述浓度的五种微生菌菌液；在所述制备菌剂的步骤中，按照实施例5.1提供的生物有机肥发酵液体微生物菌剂的配方进行混合。

[0062] 利用实施例5.1提供的上述生物有机肥发酵液体微生物菌剂可以发酵有机废弃物，具体方法与实施例1.3的方法基本相同。

[0063] 最后应当说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对其限制；尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细的说明，所属领域的普通技术人员应当理解：依然可以对本发明的具体实施方式进行修改或者对部分技术特征进行等同替换；而不脱离本发明技术方案的精神，其均应涵盖在本发明请求保护的技术方案范围当中。