耐低钙大白菜品系的苗期筛选方法

摘要

本发明涉及蔬菜育苗技术，旨在提供一种耐低钙大白菜品系的苗期筛选方法。包括：取多品系大白菜种子，催芽后以改良Hoagland营养液水培，并根据幼苗生长情况调节电导率；挑选幼苗以无钙营养液定植，打氧通气、保温，定植中如新叶叶缘出现枯边即视为发病，以某品系的30％植株发病作为确定发病时间的指标；以到达发病时间早晚来判断各品系的耐低钙性强弱，到达发病时间最晚的即为耐低钙性最强的大白菜品系。本发明避免了长期无钙营养液培养导致的幼苗黄化不健壮，症状不典型的问题。不是以发病级数作为判断指标，而是以发病天数和发病株率作为判断指标，可以解决多品种同期鉴定的准确性问题。可以加快干烧心病症状表现，达到准确快速鉴定目的。

权利要求

1.一种耐低钙大白菜品系的苗期筛选方法，其特征在于，包括下述步骤：

(1)以多个品系的大白菜作为同期筛选的对象，每个品系取100粒籽粒饱满的种子；用蒸馏水洗净后放入带湿润滤纸的培养皿中，在25℃的培养箱中催芽48小时；

(2)各品系中分别挑选50粒发芽势一致的种子，用镊子放入圆筒水培海绵；将水培海绵放入50孔穴盘中，穴盘底部放置塑料托盘；托盘中加入电导率值为0.2mS/cm的改良Hoagland营养液，营养液的液面高度达到水培海绵高度一半，调节营养液PH值为6.0，进行育苗管理；

(3)幼苗真叶长出后，将托盘中改良Hoagland营养液调整为电导率值为0.5mS/cm，调节营养液PH值为6.0，继续培养；

(4)培养至幼苗呈4叶1心时，将托盘中改良Hoagland营养液调整到电导率值为1.0mS/cm，调节营养液PH值为6.0，继续培养5～7天；

(5)挑选各品系长势整齐一致的幼苗，定植到盛有无钙营养液的水培箱中，调节水培箱中无钙营养液EC值为2.0mS/cm，pH值为6.0；每个品系定植30株，定植株行距12×12厘米；水培箱置于控温温室中，采用打氧通气；保持温室内昼温25～30℃、夜温22～25℃；

(6)定植培养3天后开始观察新叶干烧心发病情况，如新叶的叶缘出现枯边即视为发病，以某品系的30％植株发病作为确定该品系发病时间的指标；以到达发病时间早晚来判断各品系的耐低钙性强弱，到达发病时间最晚的即为耐低钙性最强的大白菜品系。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述改良Hoagland营养液包括以下成分：大量元素：Ca(NO3)2·4H2O 945mg/L、KNO3 506mg/L、MgSO4·7H2O 493mg/L、KH2PO4 

136mg/L、NH4NO3 80mg/L；和

微量元素：KI 0.83mg/L、H3BO3 6.3mg/L、MnSO4·4H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO4·2H20 0.25mg/L、CuSO4·5H20 0.025mg/L、COCl2·6H2O 0.025mg/L；铁盐

12.5ml/L，由FeSO4·7H20 2.78g和Na2-EDTA 3.73g溶解混合定容到1L制得。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述无钙营养液包括以下成分：

大量元素：NH4H2PO4 230mg/L、KNO3 1010mg/L、MgSO4·7H2O 493mg/L、KH2PO4 136mg/L、NH4NO3 160mg/L；和微量元素：KI 0.83mg/L、H3BO3 6.3mg/L、MnSO4·4H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO4·2H20 0.25mg/L、CuSO4·5H20 0.025mg/L、COCl2·6H2O 0.025mg/L；铁盐

12.5ml/L，由FeSO4·7H20 2.78g和Na2-EDTA 3.73g溶解混合定容到1L制得；

使用时，调节营养液的pH值为6.0，EC值为2.0mS/cm。

说明书

耐低钙大白菜品系的苗期筛选方法

技术领域

[0001] 本发明涉及蔬菜育苗技术，特别涉及耐低钙大白菜品系的苗期筛选方法。

背景技术

[0002] 干烧心是大白菜的一种生理性病害，由缺钙引起，严重影响产量和质量。一般心叶和内叶叶缘先发褐变薄或腐烂，以后逐渐向中包叶和外包叶发展。结球初期开始发病，在结球初期临界点鉴定是最佳时期。

[0003] 大白菜在我国的栽培历史悠久、面积广、栽培地域跨度大，时常因各地的土壤肥力、灌溉等因素的影响受到干烧心病的危害，影响大白菜的品质和产量。近年来，在一些地区干烧心病已发展成为与大白菜的病毒病、霜霉病、软腐病、根肿病等同等重要的病害。大白菜干烧心病主要是由缺钙引起的生理性病害，结球初期开始发病，一般心叶和内叶叶缘先发褐变薄或腐烂，不同品种对大白菜干烧心病的抗性存在显著差异。因此，通过选育耐低钙大白菜品种成为解决栽培中大白菜干烧心病发生的重要途径，而准确、有效的耐低钙品种(自交系)的筛选鉴定方法是其前提技术条件。

[0004] 室内苗期鉴定法是目前干烧心病苗期主要鉴定方法，该方法是在玻璃温室内采用营养钵栽培，珍珠岩为栽培基质。采用不含钙的Hongland营养液配方把育好的2片叶大小的小苗移栽到直径8cm的营养钵中，营养钵放入盛有缺钙的改良Hongland营养液的育苗盘中；或是在一平台上，挖出15cm厚的土，用塑料布垫好以防漏水，营养钵置于铺好塑料布的槽中，槽中营养液深度保持在5cm左右。培养50天左右调查干烧心病发病症状。因幼苗长期生长在无钙条件下，易产生幼苗黄化、不健壮、使干烧心病症状不典型等缺点，影响鉴定准确度。

发明内容

[0005] 本发明要解决的技术问题是，克服现有技术中的不足，提供一种耐低钙大白菜品系的苗期筛选方法，从而解决苗期室内鉴定中幼苗易黄化、症状不典型的问题。

[0006] 为解决技术问题，本发明的解决方案是：

[0007] 提供一种耐低钙大白菜品系的苗期筛选方法，包括下述步骤：

[0008] (1)以多个品系的大白菜作为同期筛选的对象，每个品系取100粒籽粒饱满的种子；用蒸馏水洗净后放入带湿润滤纸的培养皿中，在25℃的培养箱中催芽48小时；

[0009] (2)各品系中分别挑选50粒发芽势一致的种子，用镊子放入圆筒水培海绵；将水培海绵放入50孔穴盘中，穴盘底部放置塑料托盘；托盘中加入电导率值为0.2mS/cm的改良Hoagland营养液，营养液的液面高度达到水培海绵高度一半，调节营养液PH值为6.0，进行育苗管理；

[0010] (3)幼苗真叶长出后，将托盘中改良Hoagland营养液调整为电导率值为0.5mS/cm，调节营养液PH值为6.0，继续培养；

[0011] (4)培养至幼苗呈4叶1心时，将托盘中改良Hoagland营养液调整到电导率值为1.0mS/cm，调节营养液PH值为6.0，继续培养5～7天；

[0012] (5)挑选各品系长势整齐一致的幼苗，定植到盛有无钙营养液的水培箱中，调节水培箱中无钙营养液EC值为2.0mS/cm，pH值为6.0；每个品系定植30株，定植株行距12×12厘米；水培箱置于控温温室中，采用打氧通气；保持温室内昼温25～30℃、夜温22～25℃；

[0013] (6)定植培养3天后观察新叶干烧心发病情况，如新叶的叶缘出现枯边即视为发病，以某品系的30％植株发病作为确定该品系发病时间的指标；以到达发病时间早晚来判断各品系的耐低钙性强弱，到达发病时间最晚的即为耐低钙性最强的大白菜品系。

[0014] 本发明中，所述改良Hoagland营养液包括以下成分：

[0015] 大量元素：Ca(NO3)2·4H2O 945mg/L、KNO3 506mg/L、MgSO4·7H2O 493mg/L、KH2PO4 136mg/L、NH4NO3 80mg/L；和

[0016] 微量元素：KI 0.83mg/L、H3BO3 6.3mg/L、MnSO4·4H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO4·2H20 0.25mg/L、CuSO4·5H20 0.025mg/L、COCl2·6H2O 0.025mg/L；铁盐
12.5ml/L，由FeSO4·7H20 2.78g和Na2-EDTA 3.73g溶解混合定容到1L制得。

[0017] 本发明中，所述无钙营养液包括以下成分：

[0018] 大量元素：NH4H2PO4 230mg/L、KNO3 1010mg/L、MgSO4·7H2O 493mg/L、KH2PO4 136mg/L、NH4NO3 160mg/L；和

[0019] 微量元素：KI 0.83mg/L、H3BO3 6.3mg/L、MnSO4·4H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO4·2H20 0.25mg/L、CuSO4·5H20 0.025mg/L、COCl2·6H2O 0.025mg/L；铁盐
12.5ml/L，由FeSO4·7H20 2.78g和Na2-EDTA 3.73g溶解混合定容到1L制得；

[0020] 使用时，调节营养液的pH值在5.5～6.5之间，EC值在1.8-2.0之间。

[0021] 本发明的有益效果在于：

[0022] (1)本发明根据大白菜苗期对养分的需求，以不同浓度改良Hoagland营养液分阶段培养，使植株正常生长；之后再进行无钙营养液培养鉴定，避免了长期无钙营养液培养导致的幼苗黄化不健壮，症状不典型的问题。

[0023] (2)大白菜从结球初期开始进入快速生长阶段，对养分需求增加，而在无钙营养液条件培养下，品种(自交系)在长期无钙营养液栽培下，都会由缺钙而引发干烧心病，只是发病时间上会有早晚。本发明不是以发病级数作为判断指标，而是以发病天数和发病株率作为判断指标，可以解决多品种同期鉴定的准确性问题。

[0024] (3)本发明根据大白菜结球初期植株生长特性，在控温温室内保持适宜大白菜快速生长的温度条件，可以加快干烧心病症状表现，达到准确快速鉴定目的。

具体实施方式

[0025] 下面结合具体实施方式，对本发明的实现方式进行详细阐述。

[0026] 试验品系选择：

[0027] 选择4个干烧心病田间症状表现有显著差异的大白菜纯合品系C8、651A、534、SD(纯合品系由浙江省农业科学院蔬菜研究所大白菜甘蓝育种组提供，其中651A、534表现高感干烧心病，C8、SD表现抗干烧心病)为研究对象。

[0028] 品系的催芽：

[0029] 每个品系取100粒籽粒饱满的种子，分别用蒸馏水冲洗净；准备4个9厘米直径的带盖玻璃培养皿，将9厘米定性滤纸铺入培养皿中，盖子铺一层滤纸，培养皿铺2层滤纸，将滤纸用蒸馏水湿润，并在培养皿盖子和底部进行品系编号；将洗净的4个品系种子对应编号用镊子放入培养皿中，盖好培养皿盖子，放入25℃的恒温培养箱中催芽48小时；

[0030] 改良Hoagland营养液的配制：

[0031] 改良Hoagland营养液具体包括以下成分：大量元素：Ca(NO3)2·4H2O 945mg/L、KNO3 506mg/L、MgSO4·7H2O 493mg/L、KH2PO4 136mg/L、NH4NO3 80mg/L；和微量元素：KI 0.83mg/L、H3BO3 6.3mg/L、MnSO4·4H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO4·2H20 
0.25mg/L、CuSO4·5H20 0.025mg/L、COCl2·6H2O 0.025mg/L；铁盐12.5ml/L，由FeSO4·7H20 
2.78g和Na2-EDTA 3.73g溶解混合定容到1L制得。

[0032] 先配制含钙大量元素(浓缩100倍)、无钙大量元素(浓缩100倍)、微量元素(浓缩100倍)、铁盐(浓缩200倍)贮备液，然后取10L刻度塑料量杯，取含钙大量元素、无钙钙大量元素、微量元素浓缩贮备液各100ml，铁盐浓缩贮备液125ml，,加蒸馏水至10升刻度，然后调整溶液pH值为6.0备用。

[0033] 品系的营养液育苗：

[0034] 1.准备4个50孔穴盘的塑料托盘并按品系名称编号，在塑料托盘内加入自来水至塑料托盘1/2高度，托盘中加入适量配好的营养液并混匀，用便携式电导率仪测定溶液EC值，直到溶液EC值达到0.20-0.21为止，调节营养液PH值为6.0，将50孔育苗穴盘放入塑料拖盘中。

[0035] 2.准备白色圆筒水培海绵200个，海绵直径3.0-3.2cm,高度3.5cm，海绵顶部中间有一字型切口，切口长度和深度约为1.0-1.2cm。

[0036] 3.挑选4个品系催芽完毕的种子，将发芽势一致且芽长达到0.5cm的种子挑出，芽向下放入水培海绵切口中，使种子顶端与海绵切口面平齐。将放有种子的水培海绵对应放入穴盘中，调节海绵高度，使营养液面达到水培海绵高度一半。进行常规育苗管理。

[0037] 不同浓度营养液阶段培养：

[0038] 1.幼苗真叶长出后，在托盘中加入适量配好的营养液并混匀，用便携式电导率仪测定溶液EC值，直到溶液EC值达到0.50-0.51为止，调节托盘中营养液pH值为6.0，进行常规育苗管理，每天观察一次营养液高度，保证海绵与营养液面接触，每两天检测一次营养液pH值和EC值，超出pH值变化阈值(5.8-6.2)和EC值变化阈值(0.35-0.60)进行调节。

[0039] 2.培养至幼苗呈4叶1心时，在托盘中加入适量配好的营养液并混匀，用便携式电导率仪测定溶液EC值，直到溶液EC值达到1.0-1.1为止，调节托盘中营养液pH值为6.0，进行常规育苗管理，每天观察一次营养液高度，保证海绵与营养液面接触，每两天检测一次营养液pH值和EC值，超出pH值变化阈值(5.8-6.2)和EC值变化阈值(0.8-1.2)进行调节。常规苗期管理，继续培养5～7天；

[0040] 无钙营养液的配制：

[0041] 无钙营养液具体包括以下成分：大量元素：NH4H2PO4 230mg/L、KNO3 1010mg/L、MgSO4·7H2O 493mg/L、KH2PO4 136mg/L、NH4NO3 160mg/L；和微量元素：KI 0.83mg/L、H3BO3 6.3mg/L、MnSO4·4H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO4·2H20 0.25mg/L、CuSO4·
5H20 0.025mg/L、COCl2·6H2O 0.025mg/L；铁盐12.5ml/L，由FeSO4·7H20 2.78g和Na2-EDTA 
3.73g溶解混合定容到1L制得；

[0042] 配制时，先配制大量元素(浓缩100倍)、微量元素(浓缩100倍)、铁盐(浓缩200倍)贮备液，备用。使用时，调节营养液的pH值在5.5～6.5之间，EC值在1.8-2.0之间。

[0043] 定植培养及发病观察

[0044] 1.在控温温室中放置内径长3.6m、宽1.2m，高15cm厘米的泡沫水培箱1个，内铺双色反光膜，白色面向上，加入自来水，水面高度达到12cm，体积约520L，加入大量元素贮备液5.2L，微量元素储备液5.2L，铁盐6.5L，用便携式电导率仪测定溶液EC值，调节溶液EC值达到2.0为止，pH值为6.0。

[0045] 2.将打孔泡沫板铺到营养液上漂浮，孔径与水培海绵直径相同，孔间距12cm，共6行20列，泡沫板下部每隔一列粘有厚度1cm的泡沫条，避免打孔泡沫板与营养页面贴合。

[0046] 3.挑选4个品系长势整齐一致的幼苗，定植到泡沫板上，每个品系定植30株，定植株行距12×12厘米，采用打氧通气；保持温室内昼温25～30℃、夜温22～25℃。每两天检测一次营养液pH值和EC值，超出pH值变化阈值(5.8-6.2)和EC值变化阈值(1.8-2.2)进行调节，常规苗期管理。

[0047] 4.定植培养3天后开始观察4个品系新叶干烧心发病情况，如新叶的叶缘出现枯边即视为发病，以品系的30％植株发病作为确定该品系发病时间的指标；以到达发病时间早晚来判断各品系的耐低钙性强弱，到达发病时间最晚的即为耐低钙性最强的大白菜品系。

[0048] 试验结果

[0049] 感干烧心品系651A培养3天开始有发病症状，5天有30％植株发病；感干烧心品系534培养4天有植株发病症状，5天有30％植株发病；抗干烧心病品系534培养12天有发病症状，15天有30％植株发病，抗干烧心病品系C8培养16天有发病症状，18天有30％植株发病，通过该方法可以明确区分抗、感干烧心病品系发病差异，达到准确鉴定的目的。