一种虫草贝和贝虫草的培养方法

摘要

本发明公开了一种虫草贝和贝虫草的培养方法，其在适合蛹虫草生长的条件下，在液体种子培养基中培养液体蛹虫草种子；将双壳贝或者双壳贝肉放在培养瓶或蛹虫草专用培养盒中，加盖灭菌，无菌环境将液体蛹虫草种子接种到已灭菌的双壳贝肉上，置于20℃‑25℃培养室中，进行暗培养10‑15天后，菌丝体完全覆盖贝肉体表面，并深入生长到贝肉的内部，成为虫草贝；或进行暗培养20‑30天后，将培养物转移到15℃‑22℃、相对湿度75%‑95%、每天8‑10小时散射光条件下培养至少15天，使虫草子实体长到至少2cm长度，进行采收，即为贝虫草，本发明操作简单，原料易得，培养周期相对较短，大大提高附加值，使贝蛋白部分水解成肽类及氨基酸等易于消化吸收的成分，并含有虫草多糖、虫草酸、虫草素等有益成分，使虫草贝含有虫草特有的保健功能。

权利要求

1.一种虫草贝的培养方法，其特征在于其包括如下步骤：

（1）液体种子制备：培养基配方按重量百分比：2%葡萄糖，0.6%蛋白胨，1%酵母膏，余量水，pH自然；将配制好的培养基分装入500ml锥形瓶中，每瓶装150ml，食用菌专用封口膜封口，在121℃条件下灭菌30min，自然冷却至20 30℃；在无菌条件下每瓶接入2粒黄豆粒大小~的活化好的保存于PDA斜面培养基上的蛹虫草菌种，封口；置于旋转式摇床上转速150rpm、温度25℃条件下培养3-6天，成为蛹虫草液体种子；所述蛹虫草菌种来源于中国林业微生物菌种保藏管理中心，编号cfcc 5974；

（2）培养：选取海水或淡水双壳贝，将双壳贝或者去壳的双壳贝肉放在培养瓶或蛹虫草专用培养盒中，加盖，在灭菌锅中进行完全灭菌处理，灭菌温度121℃，灭菌时间至少30min；

灭菌后冷却至不超过35℃时，在超净工作台接种蛹虫草液体种子，接种量按每只贝肉接种

0.5mL计，接种后封盖、置20℃-28℃暗培养，10-15天后，菌丝体完全覆盖贝肉体表面，并深入生长到贝肉的内部，成为虫草贝。

2.一种贝虫草的培养方法，其特征在于其包括如下步骤：

（1）液体种子制备：培养基配方按重量百分比：2%葡萄糖，0.6%蛋白胨，1%酵母膏，余量水，pH自然；将配制好的培养基分装入500ml锥形瓶中，每瓶装150ml，食用菌专用封口膜封口，在121℃条件下灭菌30min，自然冷却至20 30℃；在无菌条件下每瓶接入2粒黄豆粒大小~的活化好的保存于PDA斜面培养基上的蛹虫草菌种，封口；置于旋转式摇床上转速150rpm、温度25℃条件下培养3-6天，成为蛹虫草液体种子；所述蛹虫草菌种来源于中国林业微生物菌种保藏管理中心，编号cfcc 5974；

（2）培养：选取海水或淡水双壳贝，将双壳贝或者去壳的双壳贝肉放在培养瓶或蛹虫草专用培养盒中，加盖，在灭菌锅中进行完全灭菌处理，灭菌温度121℃，灭菌时间至少30min；

灭菌后冷却至不超过35℃时，在超净工作台接种蛹虫草液体种子，接种量按每只贝肉接种

0.5mL计，接种后封盖、置20℃-28℃暗培养，20-30天后，将培养物转移到15℃-22℃、相对湿度75%-95%、每天8-10小时散射光条件下培养至少15天，使虫草子实体长到至少2cm长度，进行采收，带有贝体与虫草子实体的贝、草复合体，即为贝虫草。

说明书

一种虫草贝和贝虫草的培养方法

[0001] 技术领域：

[0002] 本发明涉及一种虫草贝和贝虫草的培养方法，尤其涉及一种在人工培养条件下，把低值贝类转化为虫草贝，以及以贝类为原料培养虫草形成子实体制备贝虫草的方法，属于食药用菌栽培技术领域。

[0003] 背景技术：

[0004] 蛹虫草，别称北虫草、北冬虫夏草，是虫草属的模式菌，分类学上属于子囊菌门，粪壳菌纲，肉座菌亚纲，肉座菌目，虫草菌科，虫草属。蛹虫草作为一种重要的食药用真菌，营养成分丰富，除含有蛋白质、氨基酸等营养成分外，还含有多种维生素、磷、锌、铜、铁等微量元素及多种药用有效成分，如虫草酸、虫草素、虫草多糖等，使其具有抗肿瘤，抗病原微生物，抗氧化，调节免疫系统，调节内分泌，抗疲劳及对肝、肾和呼吸系统具有保护作用等一系列药理作用。大量研究表明，蛹虫草有效成分、药理作用等与冬虫夏草类似，可作为冬虫夏草的替代品。

[0005] 由于蛹虫草对生长环境要求较低，目前已经形成了蛹虫草人工培养技术、人工固体培养技术、液体发酵培养等培养技术。

[0006] 现有的液体培养技术可以大规模培养蛹虫草菌丝体，缺点是其有效成分种类及含量与天然形成的蛹虫草有较大差异，且缺乏有虫有草的外形。

[0007] 现有的固体培养技术一方面可用粮食作为培养基大规模培养蛹虫草菌丝体、子实体，缺点是缺乏有虫有草的外形，其次生代谢产物也与和活体动物寄生后长出的子实体有差异。

[0008] 现有技术也可模拟自然环境，将蚕、蚕蛹 ( 一般都指活体蚕蛹) 作为蛹虫草的培养基，培养获得有虫有草的子实体，但其生产一方面受蚕、蚕蛹来源的季节性限制，另一方面蚕、蚕蛹价格较高，导致生产的子实体成本较高。因此，寻找来源广泛、价格低廉、不受季节限制的其它动物替代蚕、蚕蛹，更有利于蛹虫草的大规模种植。

[0009] 双壳贝的特点是在身体的左右两侧各有贝壳一枚，全部生活在水中，大部分海产，少数在淡水，极少数为寄生。双壳贝有2万多种，分布很广，多数可食用，如蚶、牡蛎、青蛤、河蚬、蛤仔等，但有的经济价值高，是美味食品，有的经济价值低，做饲料用。对于低值贝类进行加工，提高其附加值，有很好的推广应用前景。

[0010] 发明内容：

[0011] 本发明的目的在于克服上述已有技术的不足而提供一种操作简单，原料易得，培养周期相对较短，大大提高附加值的虫草贝和贝虫草的培养方法。

[0012] 本发明的目的可以通过如下措施来达到：

[0013] 一种虫草贝的培养方法，其特征在于其包括如下步骤：

[0014] （1）液体种子制备：培养基配方按重量百分比：2%葡萄糖，0.6%蛋白胨，1%酵母膏，余量水，pH自然；将配制好的培养基分装入500ml锥形瓶中，每瓶装150ml，食用菌专用封口膜封口，在121℃条件下灭菌30min，自然冷却至20 30℃；在无菌条件下每瓶接入2粒黄豆粒~大小的活化好的保存于PDA斜面培养基上的蛹虫草菌种，封口；置于旋转式摇床上转速
150rpm、温度25℃条件下培养3-6天，成为蛹虫草液体种子；

[0015] （2）培养：选取海水或淡水双壳贝，将双壳贝或者去壳的双壳贝肉放在培养瓶或蛹虫草专用培养盒中，加盖，在灭菌锅中进行完全灭菌处理，灭菌温度121℃，灭菌时间至少30min；灭菌后冷却至不超过35℃时，在超净工作台接种蛹虫草液体种子，接种量按每只贝肉接种0.5mL计，接种后封盖、置20℃-28℃暗培养，15天后，菌丝体完全覆盖贝肉体表面，并深入生长到贝肉的内部，成为虫草贝。

[0016] 一种贝虫草的培养方法，其特征在于其包括如下步骤：

[0017] （1）液体种子制备：培养基配方按重量百分比：2%葡萄糖，0.6%蛋白胨，1%酵母膏，余量水，pH自然；将配制好的培养基分装入500ml锥形瓶中，每瓶装150ml，食用菌专用封口膜封口，在121℃条件下灭菌30min，自然冷却至20 30℃；在无菌条件下每瓶接入2粒黄豆粒~大小的活化好的保存于PDA斜面培养基上的蛹虫草菌种，封口；置于旋转式摇床上转速
150rpm、温度25℃条件下培养3-6天，成为蛹虫草液体种子；

[0018] （2）培养：选取海水或淡水双壳贝，将双壳贝或者去壳的双壳贝肉放在培养瓶或蛹虫草专用培养盒中，加盖，在灭菌锅中进行完全灭菌处理，灭菌温度121℃，灭菌时间至少30min；灭菌后冷却至不超过35℃时，在超净工作台接种蛹虫草液体种子，接种量按每只贝肉接种0.5mL计，接种后封盖、置20℃-28℃暗培养，30天后，将培养物转移到15℃-22℃、相对湿度75%-95%、每天8小时散射光条件下培养至少15天，使虫草子实体长到至少2cm长度，进行采收。带有贝体与虫草子实体的贝、草复合体，即为贝虫草。

[0019] 本发明同已有技术相比可产生如下积极效果：

[0020]  1、本发明采用常见的低值双壳贝类作为蛹虫草生长的宿主。通常蛹虫草的培养都是以蛹作为宿主，但是以蛹作为宿主在接种时，操作繁琐，易染菌。本发明应用常见低值双壳贝类培养的贝虫草在外观形态和蛹虫草活性物质的含量上，都和蛹为宿主培养的虫草相近，且培养周期相对较短。

[0021] 2、低值双壳贝类一般的应用价值是作为动物饲料，附加值低，本发明将低值双壳贝类转化为营养成分更为丰富的虫草贝，以及以低值双壳贝类为原料培养虫草子实体生产贝虫草，经过转化成为虫草贝、贝虫草之后，可以大大提高其附加值。

[0022]  3、本发明适宜于海水双壳贝及淡水双壳贝类，原料易得，成本低，且来源不受季节限制，生产的贝虫草成本低于以蚕、蚕蛹培养的蛹虫草。

[0023] 具体实施方式：下面对本发明的具体实施方式做详细说明：

[0024] 实施例1：

[0025] 菌种：蛹虫草（Cordyceps militaris (L.) Link）菌种来源于中国林业微生物菌种保藏管理中心，编号cfcc 5974，保存于PDA斜面培养基上。

[0026] 液体种子制备：培养基配方按重量百分比：2%葡萄糖，0.6%蛋白胨，1%酵母膏，余量水，pH自然；将配制好的培养基分装入500ml锥形瓶中，每瓶装150ml，食用菌专用封口膜封口，在121℃条件下灭菌30min，自然冷却至20 30℃；在无菌条件下每瓶接入2粒（黄豆粒大~小）活化好的菌种，封口；置于旋转式摇床上转速150rpm、温度25℃条件下培养3-6天，成为蛹虫草液体种子；

[0027] 虫草贝培养：选取海水双壳贝，贝种不限，将海水双壳贝或去壳的海水双壳贝肉放在培养瓶或蛹虫草专用培养盒中，加盖，在灭菌锅中进行完全灭菌处理，灭菌温度121℃，灭菌时间至少30min；灭菌后冷却至不超过35℃时，在超净工作台接种蛹虫草液体种子，接种量按每只贝肉接种0.5mL计，接种后封盖、置20℃-28℃暗培养，10-15天后，菌丝体完全覆盖贝肉体表面，并深入生长到贝肉的内部，成为虫草贝，直接食用或干燥后保存、食用。低值双壳贝类肉体表面长满蛹虫草菌丝体，贝蛋白部分水解成肽类及氨基酸等易于消化吸收的成分，并含有虫草多糖、虫草酸、虫草素等有益成分，使虫草贝含有虫草特有的保健功能。

[0028] 贝虫草培养：选取海水双壳贝，贝种不限，将海水双壳贝或去壳的海水双壳贝肉放在培养瓶或蛹虫草专用培养盒中，加盖，在灭菌锅中进行完全灭菌处理，灭菌温度121℃，灭菌时间至少30min；灭菌后冷却至不超过35℃时，在超净工作台接种蛹虫草液体种子，接种量按每只贝肉接种0.5mL计，接种后封盖、置20℃-28℃暗培养，20-30天后，将培养物转移到15℃-20 ℃、相对湿度75%-95%、每天8小时散射光条件下培养至少15天，使虫草子实体长到至少2cm长度，进行采收。带有贝体与虫草子实体的贝、草复合体，即为贝虫草。

[0029] 实施例2：

[0030] 菌种：蛹虫草（Cordyceps militaris (L.) Link）菌种来源于中国林业微生物菌种保藏管理中心，编号cfcc 5974，保存于PDA斜面培养基上。

[0031] 液体种子制备：培养基配方按重量百分比：2%葡萄糖，0.6%蛋白胨，1%酵母膏，余量水，pH自然；将配制好的培养基分装入500ml锥形瓶中，每瓶装150ml，食用菌专用封口膜封口，在121℃条件下灭菌30min，自然冷却至20 30℃；在无菌条件下每瓶接入2粒（黄豆粒大~小）活化好的菌种，封口；置于旋转式摇床上转速150rpm、温度25℃条件下培养3-6天，成为蛹虫草液体种子；

[0032] 虫草贝培养：选取淡水双壳贝，贝种不限，将淡水双壳贝或去壳的海水双壳贝肉放在培养瓶或蛹虫草专用培养盒中，加盖，在灭菌锅中进行完全灭菌处理，灭菌温度121℃，灭菌时间至少30min；灭菌后冷却至不超过35℃时，在超净工作台接种蛹虫草液体种子，接种量按每只贝肉接种0.5mL计，接种后封盖、置23℃-28℃暗培养，15天后，菌丝体完全覆盖贝肉体表面，并深入生长到贝肉的内部，成为虫草贝。直接食用或干燥后保存、食用。低值双壳贝类肉体表面长满蛹虫草菌丝体，贝蛋白部分水解成肽类及氨基酸等易于消化吸收的成分，并含有虫草多糖、虫草酸、虫草素等有益成分，使虫草贝含有虫草特有的保健功能。

[0033] 贝虫草培养：选取淡水双壳贝，贝种不限，将淡水双壳贝或去壳的海水双壳贝肉放在培养瓶或蛹虫草专用培养盒中，加盖，在灭菌锅中进行完全灭菌处理，灭菌温度121℃，灭菌时间至少30min；灭菌后冷却至不超过35℃时，在超净工作台接种蛹虫草液体种子，接种量按每只贝肉接种0.5mL计，接种后封盖、置23℃-28℃暗培养，30天后，将培养物转移到18℃-22 ℃、相对湿度80%-90%、每天10小时散射光条件下培养至少15天，使虫草子实体长到至少2cm长度，进行采收。带有贝体与虫草子实体的贝、草复合体，即为贝虫草。

[0034] 以上的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通工程技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。