本发明公开了一种治疗转移性肿瘤的化合物及其用途，如式I所示的化合物，其中，R1‑R8分别独立选自H、D、C1‑C3的烷基或部分氘代烷基。该化合物是在veliparib结构的基础上研发出的一种治疗转移性肿瘤的新药，可有效抑制PARP的活性。该化合物可作为治疗子宫癌、肺癌、胃癌、黑色素瘤、乳腺癌、前列腺癌、结肠癌或颅内肿瘤的药物。式I。
1.一种治疗转移性肿瘤的化合物的合成方法,该化合物选自C2、C3、C4化合物中的一种，其特征在于：所述的C2、C3、C4化合物的合成方法步骤为：1) 2,3-二氨基-5,6-二氘代苯甲酰胺的合成向50ml Schlenk管中加入重水20mL，2,3-二氨基苯甲酰胺2g，碳酸氢钾3g，再加入钯碳
50mg，氢气置换气体三次，100℃水浴加热72h，碱性反向柱柱层析纯化得目标产物1.3g，收率65%，质谱：154.2（M+H+）；2) 化合物C2的合成向100ml的三口瓶中加入2,3-二氨基-5,6-二氘代苯甲酰胺1.6g,10mmol，加2-甲基-4,
4-二氘代咪唑 0.95g,11mmol，硫粉 3.2g,100mmol，170℃下搅拌6h,冷却后加入二氯甲烷
60ml溶解,硅胶拌样浓缩,硅胶色谱柱,柱层析分离得到目标产物0.18g，收率7.6%，质谱：
236.2（M+H+），1H NMR (CD3OD, 400 MHz, TMS): 7.82 (s,1H, Ph-H) , 5.52 (s, 1H, Ph-H), 2.58 (m, 2H,-CH2-)； 上接第1）步，化合物C3的合成方法为， 向100ml的三口瓶中加入2,3-二氨基-5,6-二氘代苯甲酰胺 1.6g,10mmol，加入2-甲基-4,4,5,5-四氘代咪唑 0.95g,11mmol，硫粉3.2g,100mmol，170℃下搅拌6h,冷却后加入二氯甲烷60ml溶解,硅胶拌样浓缩,硅胶色谱柱,柱层析分离得到目标产物0.12g，收率5%，+ 1质谱：238.2（M+H），H NMR (CD3OD, 400 MHz, TMS): 7.82 (s,1H, Ph-H), 5.45 (s, 1H, Ph-H)；化合物C4的合成方法为，向100ml的三口瓶中加入2,3-二氨基苯甲酰胺3.2g,20mmol，加入2-甲基-4,4,5,5-四氘代咪唑 0.95g,11mmol，硫粉3.2g,100mmol，170℃下搅拌6h，冷却后加入二氯甲烷60ml溶解，硅胶拌样浓缩,硅胶色谱柱,柱层析分离得到目标产物0.12g，收率5%，质谱：236.2（M+H+），1H NMR (CD3OD, 400 MHz, TMS): 7.95 (d, J = 8.8 Hz, 1H, Ph-H), 7.82 (t, J =
8.4 Hz , 1H, Ph-H), 7.63 (d, J = 8.8 Hz, 1H, =CH-), 5.72 (s, 1H, Ph-H)。
一种治疗转移性肿瘤的化合物及其用途
技术领域
[0001] 本发明涉及一种治疗转移性肿瘤的化合物及其用途。
背景技术
[0002] 聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶（PARP）是近几年治疗癌症的新型靶点。PARP抑制剂通过抑制肿瘤细胞DNA损伤修复、促进肿瘤细胞发生凋亡，从而可增强放疗以及烷化剂和铂类药物化疗的疗效。这种药物利用遗传性乳腺癌的“致命弱点”展开攻击。这一弱点由被称之为“BRCA1”的基因缺陷所致，限制了癌细胞修复受损DNA的能力。除了可提高化疗药的疗效外，PARP抑制剂作为单药对BRCA突变的患者也有效。BRCA突变的患者基因重组功能已经缺失，再通过PARP抑制剂抑制DNA的修复，则可以通过双重作用杀死肿瘤细胞，初步临床研究中已证实这一理论假设。PARP抑制剂不仅与BRCA1或BRCA2突变可产生协同作用，也可能与许多还未发现的基因突变也存在协同杀伤作用。
[0003] veliparib是一种新型高选择抑制PARP的苯并咪唑类化合 物,体内外实验表明本品具有显著的抑制PARP活性的作用。在治疗转移性乳腺癌、结肠癌、转移性黑色素瘤和脑肿瘤方面已取得显著的效果,其与替莫唑胺联用 治疗乳腺癌的研究即将进入III期临床。许多新型的veliparib被研究与应用（例如，徐秀春，石玉等，新型PARP抑制剂veliparib，现代药物与临床，2013, 28(1):69-73。
[0004] 但是，对于veliparib类药物的研究还处于探索阶段，因此在veliparib的结构基础上研发一种能有效治疗肿瘤的新药，尤为重要。
发明内容
[0005] 本发明的目的是提供一种治疗转移性肿瘤的化合物及其用途。
[0006] 本发明提供式I所示的化合物：
[0007]
[0008] 式I
[0009] 其中，R1-R8分别独立选自H、D、C1-C3的烷基或部分氘代烷基。
[0010] 进一步地，所述R1-R8分别独立选自H、D、C1-C3的烷基或部分氘代烷基。
[0011] 进一步地，所述R1-R8中至少一个是氘。
[0012] 本发明还提供了式I所示化合物在制备治疗转移性肿瘤药物中的用途。
[0013] 进一步地，所述药物是PARP抑制剂类药物。
[0014] 进一步地，所述药物是治疗子宫癌、肺癌、胃癌、黑色素瘤或乳腺癌的药物。
[0015] 进一步地，所述药物是治疗前列腺癌、结肠癌或颅内肿瘤的药物。
具体实施方式
[0016] 下面通过具体实施例对本发明作进一步阐述，但本发明并不局限于此。
[0017] 下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
[0018] 本发明治疗转移性肿瘤的化合物选自以下任一化合物：
[0019] C1：
[0020]
[0021] C2：
[0022]
[0023] C3：
[0024]
[0025] C4：
[0026]
[0027] 实施例1：2,3-二氨基苯甲酰胺的合成
[0028]
[0029] 向500mL三口瓶中加入N,N-二甲基甲酰胺（DMF）80ml, 2,3-二氨基苯甲酸 (9.1g,60mmol),搅拌,恒压滴液漏斗滴加二氯亚砜 10g,滴加完毕后加热到30℃过夜,然后升温至
50℃,滴加氨水水溶液75g,反应3h,加入水100ml,搅拌2h,冷却至室温过夜,过滤产品并用
500ml水洗涤5次,50ml异丙醇洗涤1次,室温真空干燥得粗品5.6g。质谱：152.2（M+H+）。
[0030] 实施例2：2,3-二氨基-5,6-二氘代苯甲酰胺的合成
[0031]
[0032] 向50ml Schlenk管中加入重水20mL，2,3-二氨基苯甲酰胺2g，碳酸氢钾3g，再加入钯碳50mg，氢气置换气体三次。100℃水浴加热72h，碱性反向柱柱层析纯化得目标产物1.3g，收率65%。质谱：154.2（M+H+）。
[0033] 实施例3：化合物C1的合成
[0034]
[0035] 向100ml的三口瓶中加入2,3-二氨基-5,6-二氘代苯甲酰胺(1.6g,10mmol),加2-甲基咪唑(0.95g,11mmol), 硫粉(3.2g,100mmol)，170℃下搅拌6h,冷却后加入二氯甲烷60ml溶解,硅胶拌样浓缩,硅胶色谱柱,柱层析分离得到目标产物0.21g，收率9%。质谱：
234.1（M+H+）。1H NMR (CD3OD, 400 MHz, TMS): 7.82 (s,1H, Ph-H), 5.43 (s, 1H, Ph-H), 2.60 (m, 2H,-CH2-), 2.52 (m, 2H,-CH2-)。:
[0036] 实施例4：化合物C2的合成
[0037]
[0038] 向100ml的三口瓶中加入2,3-二氨基-5,6-二氘代苯甲酰胺(1.6g,10mmol),加2-甲基-4,4-二氘代咪唑(0.95g,11mmol),硫粉(3.2g,100mmol),170℃下搅拌6h,冷却后加入二氯甲烷60ml溶解,硅胶拌样浓缩,硅胶色谱柱,柱层析分离得到目标产物0.18g，收率7.6%。质谱：236.2（M+H+）。1H NMR (CD3OD, 400 MHz, TMS): 7.82 (s,1H, Ph-H) , 5.52 (s, 1H, Ph-H), 2.58 (m, 2H,-CH2-)。
[0039] 实施例5：化合物C3的合成
[0040]
[0041] 向100ml的三口瓶中加入2,3-二氨基-5,6-二氘代苯甲酰胺(1.6g,10mmol),加入2-甲基-4,4,5,5-四氘代咪唑(0.95g,11mmol),硫粉(3.2g,100mmol),170℃下搅拌6h,冷却后加入二氯甲烷60ml溶解,硅胶拌样浓缩,硅胶色谱柱,柱层析分离得到目标产物0.12g，收率5%。质谱：238.2（M+H+）。1H NMR (CD3OD, 400 MHz, TMS): 7.82 (s,1H, Ph-H), 5.45 (s, 1H, Ph-H)。
[0042] 实施例6：化合物C4的合成
[0043]
[0044] 向100ml的三口瓶中加入2,3-二氨基苯甲酰(3.2g,20mmol),加入2-甲基-4,4,5,5-四氘代咪唑(0.95g,11mmol),硫粉(3.2g,100mmol),170℃下搅拌6h,冷却后加入二氯甲烷60ml溶解,硅胶拌样浓缩,硅胶色谱柱,柱层析分离得到目标产物0.12g，收率5%。质谱：
236.2（M+H+）。1H NMR (CD3OD, 400 MHz, TMS): 7.95 (d, J = 8.8 Hz, 1H, Ph-H), 7.82 (t, J = 8.4 Hz , 1H, Ph-H), 7.63 (d, J = 8.8 Hz, 1H, =CH-), 5.72 (s, 1H, Ph-H)。
[0045] 以下通过实验例具体说明本发明的化合物在治疗转移性肿瘤中的用途及其有益效果。
[0046] 实验例a：本发明化合物的药代动力学
[0047] 兔子10只,体重1kg-1.5kg。实验前禁食24h，自由饮水。分别灌胃5mg/mg各受试化合物，化合物均以5%DMSO、5%吐温-80、90%的0.5%CMC-Na配制，给药体积为10mL/kg。给药后3h统一进食。于给药后0.25,0.5,1.0,2.0,4.0,6.0,12，和24h，每个时间点随机选取3只兔子，在以上设定的时间点于耳缘静脉取静脉血0.5mL，置于EDTA试管中，12000rpm离心
10min，分离血浆，密封保存于-20℃冰柜中。用移液枪去100μL血清到干净的离心管中，加入乙腈（CH3CN）稀释，并离心。取离心液用LC-MS检测药物浓度,结果见表1。
[0048]
[0049] 表1结果表明，本发明化合物的药峰浓度高、药物吸收度较好，消除半衰期优于veliparib，可以提高临床使用的药效，降低给药频次。
[0050] 实验例b：体外活性实验
[0051] 在含有50mM Tris（pH为8.0），1mM DTT和4 mM MgCl2缓冲溶液中进行酶活性测定。PARP反应包含1.5 μm[3M]-NAD+(1.6μCi/mmol),200nM生物素组蛋白H1，200nM slDNA，及
1nM PARP或4nM PARP-2酶。在加有100μL反应液的96孔板上进行SPA检测。在50uL含有PARP和DNA的2×酶液混合物中加入50μL 2×NAD+基底混合物，反应开始。加入150μL 1.5mM本甲酰胺反应停止。170μL反应终止液转移到链霉亲和素包被的闪熔镀层上，温育1小时，用微型板块闪烁计数器计数。Ki数据由在不同浓度下受试化合物抑制率曲线确定。
[0052] 本发明化合物的体外活性
[0053]
[0054] 从表中可以得出结论本发明的化合物对PARP酶具有良好的抑制能力，其中化合物C2优于对照药品Veliparib。
[0055] 综合实验数据表明，本发明制备的化合物药峰浓度高、药物吸收度较好，可以作为PARP抑制剂，具抗肿瘤活性，尤其对转移性胃癌、肺癌、列腺癌、结肠癌或颅内肿瘤等具有良好的治疗活性，为临床用药提供了新选择。
