一种盐酸特拉唑嗪片的有关物质分析方法

摘要

本发明公开了一种盐酸特拉唑嗪片的有关物质分析方法，该有关物质为首次报道，制备方法包括：将盐酸特拉唑嗪原料药置于80～90℃条件下破坏36～48小时；将上述高温破坏样品溶于甲醇体积百分浓度为70％～90％的甲醇‑水溶液中，搅拌，抽滤，收集滤液，减压浓缩得浓缩物；将上述浓缩物用正相硅胶柱色谱分离，用体积比为5:1～2:1的氯仿‑甲醇混合溶剂等度洗脱，收集第8～14个柱体积洗脱液，浓缩得粗品；将上述粗品用反相硅胶柱纯化，固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为乙腈体积百分浓度为80％～90％的乙腈‑水，等度洗脱，收集第7～11个柱体积洗脱液，浓缩，冷冻干燥。制备方法简易可行。本发明提供的液相分析方法能有效分离有关物质的色谱峰与特拉唑嗪色谱峰。

权利要求

1.一种盐酸特拉唑嗪片中的有关物质，其特征在于，化学结构式如下：

2.一种权利要求1所述有关物质的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)高温破坏：将盐酸特拉唑嗪原料药置于80～90℃条件下破坏36～48小时；

(2)富集：将上述高温破坏样品溶于甲醇体积百分浓度为70％～90％的甲醇-水溶液中，搅拌，抽滤，收集滤液，减压浓缩得浓缩物；

(3)粗品制备：将上述浓缩物用正相硅胶柱色谱分离，用体积比为5:1～2:1的氯仿-甲醇混合溶剂等度洗脱，收集第8～14个柱体积洗脱液，浓缩得粗品；

(4)精制：将上述粗品用反相硅胶柱纯化，固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为乙腈体积百分浓度为80％～90％的乙腈-水，等度洗脱，收集第7～11个柱体积洗脱液，浓缩，冷冻干燥即得所述有关物质。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)高温破坏：将盐酸特拉唑嗪原料药置于85℃条件下破坏42小时；

(2)富集：将上述高温破坏样品溶于甲醇体积百分浓度为80％的甲醇-水溶液中，搅拌，抽滤，收集滤液，减压浓缩得浓缩物；

(3)粗品制备：将上述浓缩物用正相硅胶柱色谱分离，用体积比为7:2的氯仿-甲醇混合溶剂等度洗脱，收集第11个柱体积洗脱液，浓缩得粗品；

(4)精制：将上述粗品用反相硅胶柱纯化，固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为乙腈体积百分浓度为85％的乙腈-水，等度洗脱，收集第9个柱体积洗脱液，浓缩，冷冻干燥即得所述有关物质。

4.一种权利要求1所述有关物质的分析方法，其特征在于，包括如下参数：色谱柱：Agilent Extend-C18，4.6mm×250mm，5μm；

流动相：A为乙腈，B为0.06mol/L正辛胺溶液，磷酸调节pH值至6.8；

梯度洗脱程序：0～8min，A 25％；8～20min，A 25％→70％；20～40min，A 70％；40～

45min，A 70％→25％；45～50min，A 25％；

流动相流速：1.2mL·min-1；

检测波长：246nm；

柱温：40℃；

进样量：10μL。

5.权利要求1所述的有关物质在盐酸特拉唑嗪片有关物质检查中作为对照品的用途。

说明书

一种盐酸特拉唑嗪片的有关物质分析方法

技术领域

[0001] 本发明属于药物制剂领域，涉及制剂稳定性研究，具体涉及一种盐酸特拉唑嗪片的有关物质分析检测方法。

背景技术

[0002] 盐酸特拉唑嗪(terazosin hydrochloride,TZ)是美国Abbott公司20世纪80年代开发的一种长效抗高血压药，具有阻滞外周突触后α1-肾上腺素受体的作用，从而引起血管扩张，外周血管阻力减小而降低血压。本品具有对心输出量影响极小、不引起反射性心跳加快、不减少肾血流量或肾小球过滤等优点。由于α1-肾上腺素受体阻滞而使膀胱颈、前列腺、前列腺包膜平滑肌松驰，尿道阻力和压力、膀胱阻力减小，从而减轻尿道症状，因此盐酸特拉唑嗪也是目前治疗男性良性前列腺增生下尿路症状的一线药物。盐酸特拉唑嗪化学结构式如下：

[0003]

[0004] 2015版药典中，盐酸特拉唑嗪(第二部1064页)有关物质部分对杂质Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ进行了控制，各杂质结构式如下：

[0005]

[0006] 因为杂质Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ在原料部分已经得到控制，所以，2015版药典中盐酸特拉唑嗪片(第二部1065页)有关物质部分仅使用自身对照法控制了最大单杂和总杂。

[0007] 目前，尚未见盐酸特拉唑嗪片中其他杂质(有关物质)的报道。

发明内容

[0008] 本发明的目的在于提供一种盐酸特拉唑嗪片中的有关物质，并提供了该有关物质的制备方法和分析检测方法，可以用于盐酸特拉唑嗪片的有关物质检查，有利于提高盐酸特拉唑嗪片的质量标准。

[0009] 上述目的是通过如下技术方案得以实现的：

[0010] 一种盐酸特拉唑嗪片中的有关物质，化学结构式如下：

[0011]

[0012] 一种上述有关物质的制备方法，包括如下步骤：

[0013] (1)高温破坏：将盐酸特拉唑嗪原料药置于80～90℃条件下破坏36～48小时；

[0014] (2)富集：将上述高温破坏样品溶于甲醇体积百分浓度为70％～90％的甲醇-水溶液中，搅拌，抽滤，收集滤液，减压浓缩得浓缩物；

[0015] (3)粗品制备：将上述浓缩物用正相硅胶柱色谱分离，用体积比为5:1～2:1的氯仿-甲醇混合溶剂等度洗脱，收集第8～14个柱体积洗脱液，浓缩得粗品；

[0016] (4)精制：将上述粗品用反相硅胶柱纯化，固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为乙腈体积百分浓度为80％～90％的乙腈-水，等度洗脱，收集第7～11个柱体积洗脱液，浓缩，冷冻干燥即得所述有关物质。

[0017] 优选地，所述的制备方法包括如下步骤：

[0018] (1)高温破坏：将盐酸特拉唑嗪原料药置于85℃条件下破坏42小时；

[0019] (2)富集：将上述高温破坏样品溶于甲醇体积百分浓度为80％的甲醇-水溶液中，搅拌，抽滤，收集滤液，减压浓缩得浓缩物；

[0020] (3)粗品制备：将上述浓缩物用正相硅胶柱色谱分离，用体积比为7:2的氯仿-甲醇混合溶剂等度洗脱，收集第11个柱体积洗脱液，浓缩得粗品；

[0021] (4)精制：将上述粗品用反相硅胶柱纯化，固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为乙腈体积百分浓度为85％的乙腈-水，等度洗脱，收集第9个柱体积洗脱液，浓缩，冷冻干燥即得所述有关物质。

[0022] 一种上述有关物质的分析方法，包括如下参数：

[0023] 色谱柱：Agilent Extend-C18(4.6mm×250mm，5μm)；

[0024] 流动相：A为乙腈，B为0.06mol/L正辛胺溶液(磷酸调节pH值至6.8)；

[0025] 梯度洗脱程序：0～8min，A25％；8～20min，A25％→70％；20～40min，A70％；40～45min，A70％→25％；45～50min，A25％；

[0026] 流动相流速：1.2mL·min-1；

[0027] 检测波长：246nm；

[0028] 柱温：40℃；

[0029] 进样量：10μL。

[0030] 上述的有关物质在盐酸特拉唑嗪片有关物质检查中作为对照品的用途。

[0031] 本发明的优点：

[0032] (1)本发明提供了一种盐酸特拉唑嗪片中产生的有关物质，该有关物质为首次报道；

[0033] (2)本发明提供了一种所述有关物质的制备方法，得率高，简易可行；

[0034] 本发明提供的液相分析方法能快速检测出所述有关物质，该有关物质的色谱峰与特拉唑嗪色谱峰分离度大于2.0，且峰纯度检查合格。

附图说明

[0035] 图1为本发明有关物质氢谱数据归属图；

[0036] 图2为本发明有关物质碳谱数据归属图。

具体实施方式

[0037] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

[0038] 实施例1：有关物质的制备和结构确证

[0039] 取10g盐酸特拉唑嗪原料均匀摊在培养皿中，置于烘箱中，85℃破坏42小时。然后，将高温破坏样品溶于甲醇体积百分浓度为80％的甲醇-水溶液中，搅拌20分钟，用抽滤漏斗抽滤，收集滤液，减压浓缩得浓缩物6.2g；然后将浓缩物用8ml甲醇溶解，用8g粒度为100～200目的正相硅胶拌样，挥干溶剂，用120g粒度为200～300目的正相硅胶作为分离硅胶进行柱色谱分离，用体积比为7:2的氯仿-甲醇混合溶剂等度洗脱，收集第11个柱体积洗脱液，减压浓缩得粗品4.8g；然后将粗品用乙腈体积百分浓度为85％的乙腈水溶液溶解，用反相硅胶柱纯化，固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为乙腈体积百分浓度为85％的乙腈-水，等度洗脱，收集第9个柱体积的洗脱液，减压浓缩，冷冻干燥得淡黄色粉末3.5g。HPLC归一化纯度大于98％。

[0040] 结构确证：

[0041] 淡黄色粉末，易溶于丙酮和甲醇；HR-ESIMS显示[M+H]+为m/z 418.1714，结合核磁特征可得分子式为C19H23N5O6。氢谱数据及归属见图1(ppm,methanol-d4,500MHz)；碳谱数据及归属见图2(ppm,methanol-d4,150MHz)。综合质谱和核磁数据，结合特拉唑嗪的结构确证数据可确证该物质的化学结构式如下所示：

[0042]

[0043] 实施例2：有关物质的制备

[0044] 取10g盐酸特拉唑嗪原料均匀摊在培养皿中，置于烘箱中，80℃破坏48小时。然后，将高温破坏样品溶于甲醇体积百分浓度为70％的甲醇-水溶液中，搅拌20分钟，用抽滤漏斗抽滤，收集滤液，减压浓缩得浓缩物6.1g；然后将浓缩物用8ml甲醇溶解，用8g粒度为100～200目的正相硅胶拌样，挥干溶剂，用120g粒度为200～300目的正相硅胶作为分离硅胶进行柱色谱分离，用体积比为5:1的氯仿-甲醇混合溶剂等度洗脱，收集第14个柱体积洗脱液，减压浓缩得粗品4.5g；然后将粗品用乙腈体积百分浓度为80％的乙腈水溶液溶解，用反相硅胶柱纯化，固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为乙腈体积百分浓度为80％的乙腈-水，等度洗脱，收集第11个柱体积的洗脱液，减压浓缩，冷冻干燥得淡黄色粉末3.2g。HPLC归一化纯度大于98％。

[0045] 实施例3：有关物质的制备

[0046] 取10g盐酸特拉唑嗪原料均匀摊在培养皿中，置于烘箱中，90℃破坏36小时。然后，将高温破坏样品溶于甲醇体积百分浓度为90％的甲醇-水溶液中，搅拌20分钟，用抽滤漏斗抽滤，收集滤液，减压浓缩得浓缩物6.4g；然后将浓缩物用8ml甲醇溶解，用8g粒度为100～200目的正相硅胶拌样，挥干溶剂，用120g粒度为200～300目的正相硅胶作为分离硅胶进行柱色谱分离，用体积比为2:1的氯仿-甲醇混合溶剂等度洗脱，收集第8个柱体积洗脱液，减压浓缩得粗品4.9g；然后将粗品用乙腈体积百分浓度为90％的乙腈水溶液溶解，用反相硅胶柱纯化，固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为乙腈体积百分浓度为90％的乙腈-水，等度洗脱，收集第7个柱体积的洗脱液，减压浓缩，冷冻干燥得淡黄色粉末3.7g。HPLC归一化纯度大于98％。

[0047] 实施例4：盐酸特拉唑嗪片加速试验(40℃条件下30天)样品检测分析[0048] 盐酸特拉唑嗪片：收集市售不同品牌的盐酸特拉唑嗪片(距生产日期3个月内)[0049] 对照品溶液制备：精密称取2mg本发明有关物质于200ml容量瓶中，用70％乙腈溶解定容，作为有关物质储备液；精密量取有关物质储备液1ml于20ml容量瓶中，用液相分析方法中初始比例的流动相稀释定容(约0.5μg/mL)。

[0050] 供试品溶液制备：取40℃条件下放置30天的盐酸特拉唑嗪片研磨成细粉，精密称取细粉适量(约含特拉唑嗪12.5mg)置于25ml容量瓶中，添加液相分析方法中初始比例的流动相，超声使特拉唑嗪溶解，放冷，稀释至刻度。

[0051] 对照溶液：精密量取供试品溶液0.5ml于200ml容量瓶中，用液相分析方法中初始比例的流动相稀释至刻度。

[0052] 液相色谱条件：

[0053] 高效液相色谱仪：Agilent 1260，二元泵，VWD；

[0054] 色谱柱：Agilent Extend-C18(4.6mm×250mm，5μm)；

[0055] 流动相：A为乙腈，B为0.06mol/L正辛胺溶液(磷酸调节pH值至6.8)；

[0056] 梯度洗脱程序：0～8min，A25％；8～20min，A25％→70％；20～40min，A70％；40～45min，A70％→25％；45～50min，A25％；

[0057] 流动相流速：1.2mL·min-1；

[0058] 检测波长：246nm；

[0059] 柱温：40℃；

[0060] 进样量：10μL。

[0061] 分别精密量取有关物质对照品溶液、供试品溶液和对照溶液10μL注入液相色谱仪分析。结果在不同品牌盐酸特拉唑嗪片中均检测到本发明提供的有关物质，该有关物质的色谱峰与特拉唑嗪色谱峰分离度均大于2.0，且峰纯度检查合格。不同品牌盐酸特拉唑嗪片中该有关物质的含量为0.05～0.12％，有必要列入盐酸特拉唑嗪片的质量研究控制中。

[0062] 上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。