一种ASE提取人参叶中人参皂苷Rg1和Re的方法

摘要

本发明公开了一种ASE提取人参叶中人参皂苷Rg1和Re的方法，包括以下步骤：步骤1：将人参叶粉碎后，过筛；步骤2：称取0.2重量份罗汉果粉，与1重量份硅藻土混合均匀待用；步骤3：在预先放好过滤膜的萃取池中加入步骤2所得到的混合物，加入适量的硅藻土至达到萃取池的池口；盖上萃取池的盖子进行静态萃取；萃取结束后得到萃取液；萃取条件为：萃取溶剂为甲醇；萃取温度110℃；静态萃取时间7min；冲洗体积80％；静态循环次数3次。本发明提供了一种ASE提取人参叶中人参皂苷Rg1和Re的方法，该方法操作简单，提取精度高。

权利要求

1.一种ASE提取人参叶中人参皂苷Rg1和Re的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：将人参叶粉碎后，过筛；

步骤2：称取0.2重量份罗汉果粉，与1重量份硅藻土混合均匀待用；

步骤3：在预先放好过滤膜的萃取池中加入步骤2所得到的混合物，加入适量的硅藻土至达到萃取池的池口；盖上萃取池的盖子进行静态萃取；萃取结束后得到萃取液；

萃取条件为：萃取溶剂为甲醇；萃取温度110℃；静态萃取时间7min；冲洗体积80％；静态循环次数3次。

2.根据权利要求1所述的ASE提取人参叶中人参皂苷Rg1和Re的方法，其特征在于，所述的萃取池的体积为10ml。

3.根据权利要求2所述的ASE提取人参叶中人参皂苷Rg1和Re的方法，其特征在于，所述的静态萃取的压力为1500psi。

4.根据权利要求3所述的ASE提取人参叶中人参皂苷Rg1和Re的方法，其特征在于，所述的静态萃取的吹扫时间为60s。

5.根据权利要求1所述的ASE提取人参叶中人参皂苷Rg1和Re的方法，其特征在于，步骤

3之后还包括：将萃取液稀释后加入到离心管中净化，然后过滤后得到滤液，所述的离心管中加有石墨碳SPE柱。

说明书

一种ASE提取人参叶中人参皂苷Rg1和Re的方法

技术领域

[0001] 本发明涉及实验室检测领域，特别是一种ASE提取人参叶中人参皂苷Rg1和Re的方法。

背景技术

[0002] 2015年药典记载：取本品粉末约0.2g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷30ml，加热回流1小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥去三氯甲烷，加甲醇30ml，加热回流3小时，提取液低温蒸干，加水10ml使溶解，加石油醚(30～60℃)提取2次，每次10ml，弃去醚液，水液通过D101型大孔吸附树脂柱(内径为1.5cm，柱长为15cm)，以水50ml洗脱，弃去水液。再用
20％乙醇50ml洗脱，弃去20％乙醇洗脱液，继用80％乙醇80ml洗脱，收集洗脱液70ml，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

[0003] 药典的方法操作过程复杂，洗脱次数多，对操作人员的操作技能要求高。

发明内容

[0004] 本发明的目的是提供一种ASE提取人参叶中人参皂苷Rg1和Re的方法，该方法操作简单，提取精度高。

[0005] 本发明提供的技术方案为：一种ASE提取人参叶中人参皂苷Rg1和Re的方法，包括以下步骤：

[0006] 步骤1：将人参叶粉碎后，过筛；

[0007] 步骤2：称取0.2重量份罗汉果粉，与1重量份硅藻土混合均匀待用；

[0008] 步骤3：在预先放好过滤膜的萃取池中加入步骤2所得到的混合物，加入适量的硅藻土至达到萃取池的池口；盖上萃取池的盖子进行静态萃取；萃取结束后得到萃取液；

[0009] 萃取条件为：萃取溶剂为甲醇；萃取温度110℃；静态萃取时间7min；冲洗体积80％；静态循环次数3次。

[0010] 在上述的ASE提取人参叶中人参皂苷Rg1和Re的方法中，所述的萃取池的体积为10ml。

[0011] 在上述的ASE提取人参叶中人参皂苷Rg1和Re的方法中，所述的静态萃取的压力为1500psi。

[0012] 在上述的ASE提取人参叶中人参皂苷Rg1和Re的方法中，所述的静态萃取的吹扫时间为60s。

[0013] 在上述的ASE提取人参叶中人参皂苷Rg1和Re的方法中，步骤3之后还包括：将萃取液稀释后加入到离心管中净化，然后过滤后得到滤液，所述的离心管中加有石墨碳SPE柱。

[0014] 本发明在采用上述技术方案后，其具有的有益效果为：

[0015] 本发明的萃取方法操作简单，精度与药典方法的精度一致，重复性好。

附图说明

[0016] 图1为本发明的色谱分析人参皂苷Rg1有效性验证的直角坐标图；

[0017] 图2为本发明的色谱分析人参皂苷Re有效性验证的直角坐标图。

具体实施方式

[0018] 下面结合具体实施方式，对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制。

[0019] 实施例1：

[0020] 将人参叶样品经粉碎机粉碎，过三号筛，约0.2g，精密称定，与1g硅藻土混合均匀，待用，移入到预先放好过滤膜的ASE 10ml萃取池中再加入适量硅藻土，轻轻振摇使之与池口在同一水平线上，拧紧萃取池上盖。萃取结束后，把萃取液转移至蒸发皿中蒸干后用甲醇溶解并定容至10mL容量瓶，吸取1ml样品液加入装有100mgGCB的2ml离心管进行净化，溶液过0.22微米滤膜后进入HPLC测定。

[0021] 萃取条件(见表1)为：

[0022] 表1

[0023]  与药典接近
萃取池体积(ml) 10
萃取溶剂 甲醇
压力(psi) 1500
温度(℃) 110
静态萃取时间(min) 7
静态循环次数 3
冲洗体积(％) 80
吹扫时间(s) 60

[0024] 分析方法为LC液相色谱法，液相色谱分析条件：

[0025] a)仪器：Thermo双三元液相(U-3000)

[0026] b)色谱柱：Thermo Syncronis Dim.(mm)AQ 1.7μm 50×2.1mm

[0027] c)柱温：40℃

[0028] d)流速：0.3mL/min

[0029] e)流动相：乙腈-水梯度洗脱(1min乙腈：水的体积比为60:40；1-3min乙腈：水的体积比为70:30；3-8min乙腈：水的体积比为80:20)

[0030] f)检测波长：203nm

[0031] 色谱分析有效性验证：

[0032] 取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1ml含人参皂苷Rg1 0.2mg、人参皂苷Re 0.2mg的溶液。

[0033] 取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品，精密称定，加甲醇制成每1ml约含0.2mg的混合溶液，即得，然后分别精密吸取该溶液0.5μl、1μl、1.5μl、2μl、3μl进入LC测定，并依照上述方法测定。以浓度(mg/ml)-峰面积进行线性回归，求得回归方程：人参皂苷Rg1y
2 2
＝1264.2x+7.6763，R ＝0.99979,人参皂苷Rg1y＝1148.8x-0.96132，R＝0.99998,人参皂苷Rg1在0.0911～0.5466mg/ml,人参皂苷Rg1在0.1013～0.6078mg/ml范围内呈良好的线性关系。表2和图1为人参皂苷Rg1线性试验结果；表3和图2为人参皂苷Re线性试验结果；其中，图1和2的横坐标表示浓度，纵坐标表示峰面积。

[0034] 表2人参皂苷Rg1线性试验结果

[0035]

[0036] 表3人参皂苷Re线性试验结果

[0037]

[0038] 1.1实施例1的萃取方法的重现性验证：

[0039] 取相同批号的样品(批号：15071601)0.2g，共3份，精密称定，按ASE提取方法提取供试品溶液，进样量为1μL，以上述的色谱条件平行试验，测得样品人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总量见表1，RSD为0.5％，试验表明ASE提取方法重复性良好，结果详见表4。

[0040] 表4

[0041]

[0042] 1.2实施例1的萃取方法的精确度测试

[0043] 采用实施例1的ASE萃取方法和药典的萃取方法对人参叶进行萃取，人参叶为3批，批号分别为15071601，120303，1407221；

[0044] 实施例1的ASE萃取方法对同一批次的人参叶采用相同规格的设备平行测试两次，分别为ASE1和ASE2表示。

[0045] 具体测试结果见下表5；

[0046] 表5

[0047]

[0048] 以上所述的仅为本发明的较佳实施例，凡在本发明的精神和原则范围内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。