一种茶叶鲜样生化成分的快速检测方法

摘要

一种茶叶鲜样生化成分的快速检测方法，属于茶叶检测方法技术领域。包括以下步骤：1）茶样制备；2）磨样；3）样品提取：研磨完成后加入1.2‑1.7ml提取液，按照国标法进行相应的茶多酚、儿茶素或氨基酸提取，提取完成后离心分离，离心时间8‑12min，离心力3000g，温度3‑5℃，用2ml注射器吸取上清液，过直径13mm、孔径0.45μm的针头过滤器；4）样品测定：根据国标法测定样品相关生化成分含量，并进行相关组织含量的换算。上述一种茶叶鲜样生化成分的快速检测方法，具有方便、快捷、可靠性高等特点，大大提高了育种效率，同时也是研究茶叶品质成分的理想方法。

权利要求

1.一种茶叶鲜样生化成分的快速检测方法，其特征在于包括以下步骤：

1）茶样制备：在春茶季节采摘待测茶树样品的鲜样单芽、一芽一叶或一芽二叶，称重后放入2ml离心管中，迅速用液氮冷冻，放入-80℃冰箱中冷冻储存；

2）磨样：在每个样品中加入两颗研磨珠，利用高通量组织研磨仪，研磨时间为85-95s、研磨频率为18-22次/s；

3）样品提取：研磨完成后加入1.2-1.7ml提取液，按照国标法进行相应的茶多酚、儿茶素或氨基酸提取，提取完成后离心分离，离心时间9-11min，离心力3000g，温度4℃，用2ml注射器吸取上清液，过直径13mm、孔径0.45μm的针头过滤器；

4）样品测定：根据国标法测定样品相关生化成分含量，并进行相关组织含量的换算。

说明书

一种茶叶鲜样生化成分的快速检测方法

技术领域

[0001] 本发明属于茶叶检测方法技术领域，具体为一种茶叶鲜样生化成分的快速检测方法。

背景技术

[0002] 茶树是一种重要的多年生经济作物。目前茶叶样品制备通常采样国标GB/T 8303-2013，即茶样磨碎后在电热恒温干燥箱中加热、除去水分至恒重后用于茶多酚、儿茶素或氨基酸含量的测定。而在茶树育种中经常碰到的问题是茶叶样品太少，不够用于按照国标法测定茶多酚、儿茶素或氨基酸含量，因此导致茶树早期鉴定延后，育种周期延长。另一方面，由于烘干等步骤可能会引起茶叶各种生化成分的转化，导致测定的数据并不能真实的反应茶叶中各种物质的含量，因此也存在误差。

发明内容

[0003] 针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于设计提供一种茶叶鲜样生化成分的快速检测方法的技术方案，具有方便、快捷、可靠性高等特点，大大提高了育种效率，同时也是研究茶叶品质成分的理想方法。

[0004] 所述的一种茶叶鲜样生化成分的快速检测方法，其特征在于包括以下步骤：

[0005] 1）茶样制备：在春茶季节采摘待测茶树样品的鲜样单芽、一芽一叶或一芽二叶，称重后放入2ml离心管中，迅速用液氮冷冻，放入-80℃冰箱中冷冻储存；

[0006] 2）磨样：在每个样品中加入两颗研磨珠，利用高通量组织研磨仪，研磨时间为80-100s、研磨频率为15-25次/s；

[0007] 3）样品提取：研磨完成后加入1.2-1.7ml提取液，按照国标法进行相应的茶多酚、儿茶素或氨基酸提取，提取完成后离心分离，离心时间8-12min，离心力3000g，温度3-5℃，用2ml注射器吸取上清液，过直径13mm、孔径0.45μm的针头过滤器；

[0008] 4）样品测定：根据国标法测定样品相关生化成分含量，并进行相关组织含量的换算。

[0009] 所述的一种茶叶鲜样生化成分的快速检测方法，其特征在于步骤2）中：研磨时间为85-95s、研磨频率为18-22次/s。

[0010] 所述的一种茶叶鲜样生化成分的快速检测方法，其特征在于步骤3）中：离心时间9-11min，温度4℃。

[0011] 上述一种茶叶鲜样生化成分的快速检测方法，具有方便、快捷、可靠性高等特点，大大提高了育种效率，同时也是研究茶叶品质成分的理想方法。

具体实施方式

[0012] 以下结合具体实施例对本发明作进一步说明。

[0013] 实施例1

[0014] 1）茶样制备：在春茶季节采摘待测茶树样品的鲜样单芽、一芽一叶或一芽二叶，称重后放入2ml离心管中，迅速用液氮冷冻，放入-80℃冰箱中冷冻储存；

[0015] 2）磨样：在每个样品中加入两颗研磨珠，利用高通量组织研磨仪，研磨时间为80s、研磨频率为15次/s；

[0016] 3）样品提取：研磨完成后加入1.2ml提取液，按照国标法进行相应的茶多酚、儿茶素或氨基酸提取，提取完成后离心分离，离心时间8min，离心力3000g，温度3℃，用2ml注射器吸取上清液，过直径13mm、孔径0.45μm的针头过滤器；

[0017] 4）样品测定：根据国标法测定样品相关生化成分含量，并进行相关组织含量的换算。

[0018] 实施例2

[0019] 1）茶样制备：在春茶季节采摘待测茶树样品的鲜样单芽、一芽一叶或一芽二叶，称重后放入2ml离心管中，迅速用液氮冷冻，放入-80℃冰箱中冷冻储存；

[0020] 2）磨样：在每个样品中加入两颗研磨珠，利用高通量组织研磨仪，研磨时间为90s、研磨频率为20次/s；

[0021] 3）样品提取：研磨完成后加入1.5ml提取液，按照国标法进行相应的茶多酚、儿茶素或氨基酸提取，提取完成后离心分离，离心时间10min，离心力3000g，温度4℃，用2ml注射器吸取上清液，过直径13mm、孔径0.45μm的针头过滤器；

[0022] 4）样品测定：根据国标法测定样品相关生化成分含量，并进行相关组织含量的换算。

[0023] 实施例3

[0024] 1）茶样制备：在春茶季节采摘待测茶树样品的鲜样单芽、一芽一叶或一芽二叶，称重后放入2ml离心管中，迅速用液氮冷冻，放入-80℃冰箱中冷冻储存；

[0025] 2）磨样：在每个样品中加入两颗研磨珠，利用高通量组织研磨仪，研磨时间为100s、研磨频率为25次/s；

[0026] 3）样品提取：研磨完成后加入1.7ml提取液，按照国标法进行相应的茶多酚、儿茶素或氨基酸提取，提取完成后离心分离，离心时间12min，离心力3000g，温度5℃，用2ml注射器吸取上清液，过直径13mm、孔径0.45μm的针头过滤器；

[0027] 4）样品测定：根据国标法测定样品相关生化成分含量，并进行相关组织含量的换算。

[0028] 本发明还通过相应的试验数据进一步说明本发明的有益效果。

[0029] 试验一：

[0030] 试验比较了3个茶树品种一芽一叶样品采用鲜样生化成分快速检测法及传统方法（即样品经过冷冻干燥，磨样后按照国标法测定）测定的儿茶素组分含量及咖啡碱（Caffeine）含量。结果发现，干样测定的数据平均比鲜样高4.9倍，该数据的差异与茶叶鲜样的含水量一致。不同茶树品种儿茶素组成成分特征用两种方法测定的结果是一致的。例如品种Y5儿茶素成分C和GCG含量特别高，而EGC和EC含量较低，两种测定方法测定结果一致。而品种I3 EGCG含量特别高，两种测定方法测定结果也是一致的。综述所述，茶叶鲜样生化成分快速检测法具有较好的重复性和可靠性。相关研究的结论正确，结果直接、可靠。因此，该方法十分适合于茶树育种中对少量茶样的快速精准测定。见表1。

[0031]

[0032] 采用本发明实施例1和实施例3所述的检测方法进行同样的试验，也能达到本发明所述的有益效果。