一种治疗多发性骨髓瘤的口服中药组合物及其制备方法

摘要

本发明属于医药领域，特别涉及一种治疗多发性骨髓瘤的口服中药组合物及其制备方法。该药物组合物由黄芪7～10重量份、黄芩7～10重量份、淫羊藿7～10重量份、天竺黄3～6重量份、水葱1～4重量份、茴心草1～4重量份制成，采用乙酸乙酯提取制备，加入医药学上可接受的药用辅料制备成口服药物制剂。该中药组合物能够显著多发性骨髓瘤小鼠的生存时间，对肿瘤生长具有显著抑制作用，且安全性良好。

权利要求

1.一种治疗多发性骨髓瘤的口服中药组合物，其特征在于，由以下重量份比的原料制成：黄芪7～10重量份、黄芩7～10重量份、淫羊藿7～10重量份、天竺黄3～6重量份、水葱1～

4重量份、茴心草1～4重量份。

2.根据权利要求1所述的治疗多发性骨髓瘤的口服中药组合物，其特征在于，所述原料的重量份比为：黄芪8重量份、黄芩8重量份、淫羊藿8重量份、天竺黄4重量份、水葱2重量份、茴心草2重量份。

3.根据权利要求1所述的治疗多发性骨髓瘤的口服中药组合物，其特征在于，所述原料的重量份比为：黄芪9重量份、黄芩9重量份、淫羊藿9重量份、天竺黄4重量份、水葱2重量份、茴心草3重量份。

4.根据权利要求1所述的治疗多发性骨髓瘤的口服中药组合物，其特征在于，所述原料的重量份比为：黄芪9重量份、黄芩9重量份、淫羊藿9重量份、天竺黄5重量份、水葱3重量份、茴心草2重量份。

5.根据权利要求1所述的治疗多发性骨髓瘤的口服中药组合物，其特征在于，所述原料的重量份比为：黄芪8重量份、黄芩8重量份、淫羊藿8重量份、天竺黄5重量份、水葱2重量份、茴心草3重量份。

6.根据权利要求1至5任一项所述的治疗多发性骨髓瘤的口服中药组合物，其特征在于，所述口服中药组合物的剂型为胶囊剂。

7. 权利要求1至5任一项所述的治疗多发性骨髓瘤的口服中药组合物的制备方法，其特征在于，所述口服中药组合物的制备方法包括以下步骤：

1）取处方量黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄、水葱、茴心草，粉碎过 120 目筛得药材粉末；

2）取药材粉末加入19～22倍重量的乙酸乙酯萃取，65℃～72℃下恒温水浴提取2次，每次2～5 小时，合并滤液，得药材提取液；

3）将药材提取液浓缩成药材干膏；

4）将药材干膏粉碎，与医药学上可接受的药用辅料混合，制备成口服药物制剂。

8.权利要求7所述的治疗多发性骨髓瘤的口服中药组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤2）中乙酸乙酯的用量为药材粉末的20倍重量，恒温水浴提取温度为70℃，每次提取3 小时。

说明书

一种治疗多发性骨髓瘤的口服中药组合物及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明属于医药领域，具体涉及一种治疗多发性骨髓瘤的口服中药组合物及其制备方法。

背景技术

[0002] 在多发性骨髓瘤（Multiple myeloma）是一种起源于浆细胞的恶性克隆性疾病主要表现为浆细胞过度增殖，分泌单克隆免疫球蛋白；同时正常免疫球蛋白减少，引起骨痛及病理性骨折、贫血和出血倾向、感染、肾功能损害、高钙血症等一系列临床表现。目前欧美国家多发性骨髓瘤发病率较高，达3.5～4.5/10万，中国发病率约为1/10万，以中老年人为高发人群，男性发病率高于女性，是血液系统的常见肿瘤之一。其发病率占全部血液系统肿瘤的10％左右，呈逐年上升趋势，已成为肿瘤领域研究的热点之一（Meng Zhang,Li-Ping Liu,Yuling Chen,et al.Wogonin induces apoptosis in RPMI 8226,a human myeloma cell line,by downregulating phospho-Akt and overexpressing Bax.Life Science,2013,92(1):55-62.）。

[0003] 该病目前被认为是一种不可治愈的血液恶性肿瘤，西医通常以化疗为主要治疗手段。一般情况下，化疗持续一年，患者进入平台期，疾病停止进展，但继续化疗可继发骨髓增生异常综合征或急性白血病，如不继续化疗则会复发，使治疗难以进行。部分患者服用化疗药物后出现周围神经病变，血压降低甚至发生急性心衰或病情恶化，生存期缩短。几乎所有患者治疗后均复发，至今难以治愈。

[0004] 中医学根据其临床表现，将其归属于“骨痹”、“虚劳”、“血证”等范畴，其病因与肾精亏虚，邪毒内蕴，瘀血阻络，痰湿内停有关。中医治疗以补肾填精、凉血解毒、活血通络、化痰祛湿为基础辨证施治。经过长期研究和筛选，目前已发现部分中药对多发性骨髓瘤具有良好的抑制作用，且对其作用机制有了更深入的研究，如藤黄酸是中药藤黄的主要活性成分，因其具有明显的肿瘤细胞杀伤性而被广泛研究； 黄芩素是黄芩中提取的有效活性成分，有研究表明黄芩素可能通过下调磷酸-Akt和促凋亡基因Bax的过度表达诱导RPMI-8226细胞株的凋亡；刘琳等研究证实黄芪多糖可促进间充质干细胞（MM-BMSC）增殖，并证实了促进其增殖的最佳浓度，主要机制为促进静止期的MM-BMSC细胞由G0/G1期进入S期及G2/M期（郭沱,侯健.MM的治疗现状与进展.中国实用内科学杂志,2006,26(6):892-894.）。

[0005] 中药复方制剂就有多靶点协同作用的特点，且具有安全性高、能够延长患者生存期的优点。然而，目前大部分中药抗多发性骨髓瘤研究尚处于初步药效学考察阶段，尚未见针对多发性骨髓瘤的中药复方制剂上市。

发明内容

[0006] 针对上述现有技术，本发明的目的之一是提供一种治疗多发性骨髓瘤的口服中药组合物，为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

[0007] 一种治疗多发性骨髓瘤的口服中药组合物，由以下重量份比的原料制成：黄芪7～10重量份、黄芩7～10重量份、淫羊藿7～10重量份、天竺黄3～6重量份、水葱1～4重量份、茴心草1～4重量份。

[0008] 优选的，所述原料的重量份比为：黄芪8重量份、黄芩8重量份、淫羊藿8重量份、天竺黄4重量份、水葱2重量份、茴心草2重量份。

[0009] 优选的，所述原料的重量份比为：黄芪9重量份、黄芩9重量份、淫羊藿9重量份、天竺黄4重量份、水葱2重量份、茴心草3重量份。

[0010] 优选的，所述原料的重量份比为：黄芪9重量份、黄芩9重量份、淫羊藿9重量份、天竺黄5重量份、水葱3重量份、茴心草2重量份。

[0011] 优选的，所述原料的重量份比为：黄芪8重量份、黄芩8重量份、淫羊藿8重量份、天竺黄5重量份、水葱2重量份、茴心草3重量份。

[0012] 优选的，上述口服中药组合物的剂型为胶囊剂。

[0013] 本发明的另一方面提供了上述治疗多发性骨髓瘤的口服中药组合物的制备方法，包括以下步骤：

[0014] 1）取处方量黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄、水葱、茴心草，粉碎过 120 目筛得药材粉末；

[0015] 2）取药材粉末加入19～22倍重量的乙酸乙酯萃取，65℃～72℃下恒温水浴提取2次，每次2～5 小时，合并滤液，得药材提取液；

[0016] 3）将药材提取液浓缩成药材干膏；

[0017] 4）将药材干膏粉碎，与医药学上可接受的药用辅料混合，制备成口服药物制剂。

[0018] 优选的,上述制备方法中，步骤2）中乙酸乙酯的用量为药材粉末的20倍重量，恒温水浴提取温度为70℃，每次提取3 小时。

[0019] 本发明技术方案所述的黄芪已被中国药典2010版本收录，为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。甘，微温。归肺、脾经。具有补气升阳，固表止汗，利水消肿，生津养血，行滞通痹，托毒排脓，敛疮生肌等功效，主要用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，内热消渴，血虚萎黄，半身不遂，痹痛麻木，痈疽难溃，久溃不敛的治疗。

[0020] 本发明技术方案所述的黄芩已被中国药典2010版本收录，为唇形科植物黄芩ScutellariabaicalensisGeorgi的干燥根。苦，寒。归肺、胆、脾、大肠、小肠经。具有清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎功效。主要用于湿温、暑湿，胸闷呕恶，湿热痞满，泻痢，黄疸，肺热咳嗽，高热烦渴，血热吐衄，痈肿疮毒，胎动不安。

[0021] 本发明技术方案所述的淫羊藿，也称为仙灵脾，已被中国药典2010版本收录，为小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicornum Maxim.、箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum (Sieb.et Zucc.) Maxim. 、柔毛淫羊藿Epimedium pubescens Maxim.、巫 山淫羊藿Epimedium wushanense T.S.Ying、或朝鲜淫羊藿Epimedium koreanum Nakai 的干燥地上部分。辛、甘，温。归肝、肾经。 具有补肾阳，强筋骨，祛风湿的功效。主要用于阳痿遗精，筋骨痿软，风湿痹痛， 麻木拘挛；更年期高血压。

[0022] 本发明技术方案所述的天竺黄已被中国药典2010版本收录， 为禾本科植物青皮竹Bambusa textilisMcClure或华思劳竹Schizostachyum chinensesRendle等茎杆内的伤流液自然干燥凝结而成的块状物。甘，寒。入心、肝、胆经。具有清化热痰，凉心定惊作用。主治热痰壅盛，咳嗽气喘，热病神昏谵妄，中风痰壅，癫痫，小儿惊风抽搐。

[0023] 本发明技术方案所述的水葱为莎草科藨草属植物水葱Scirpus tabernaemontani Gmel.[S. validus Vahl]的地上全草，记载于《南京民间药草》（周太炎,丁志遵著. 科学技术出版社1956年出版），具有除湿利尿功效。主要用于水肿胀满，小便不利。

[0024] 本发明技术方案所述的为茴心草为苔藓类真藓科大叶藓属植物暖地大叶藓Rhodobryum giganteum （Schwaegr.） Par.，的全草。辛、苦，平。具有养心安神，清肝明目的功效。主要用于心悸怔忡，神经衰弱；外用治目赤肿痛。记载于《全国中草药汇编》（谢宗万主编. 人民卫生出版社1975年出版）

[0025] 本发明的中药组合物以补气补血的黄芪、清热燥湿的黄芩、补肾阳的淫羊藿为君药，以清热的天竺黄、茴心草和利湿的水葱为臣药，发挥对多发性骨髓瘤的治疗作用。在组方研究中发明人经过大量筛选研究表明，茴心草、水葱两味中药对上述君药和臣药组成的复方具有显著的增效作用，组方中加入茴心草、水葱两味中药后，能够多发性骨髓瘤动物模型的生存期，发挥了预料不到的效果。

[0026] 临床应用时，本发明的中药组合物人体口服给药剂量为0.2～0.4g生药材/kg体重。

具体实施方式

[0027] 下面结合实施例对本发明作进一步的解释。应当理解的是，以下实施例仅用于解释本发明，而不是限制本发明的保护范围。

[0028] 实施例1 治疗多发性骨髓瘤的中药胶囊及其制备

[0029] 治疗多发性骨髓瘤的中药胶囊的组方见下表：

[0030]

[0031] 中药胶囊的制备方法：

[0032] 1）取处方量黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄、水葱、茴心草，粉碎过 120 目筛得药材粉末；

[0033] 2）取药材粉末加入20倍重量的乙酸乙酯萃取，70℃下恒温水浴提取2次，每次3 小时，合并滤液，得药材提取液；

[0034] 3）将药材提取液浓缩成药材干膏；

[0035] 4）将药材干膏粉碎成粉末，装入胶囊壳即得，胶囊装量为40～50mg/胶囊。

[0036] 实施例2 治疗多发性骨髓瘤的中药片剂及其制备

[0037] 治疗多发性骨髓瘤的中药片剂的组方见下表：

[0038]

[0039] 口服片剂的制备方法：

[0040] 1）取处方量黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄、水葱、茴心草，粉碎过 120 目筛得药材粉末；

[0041] 2）取药材粉末加入21倍重量的乙酸乙酯萃取，71℃下恒温水浴提取2次，每次4 小时，合并滤液，得药材提取液；

[0042] 3）将药材提取液浓缩成药材干膏；

[0043] 4）将药材干膏粉碎成粉末，加入干膏2倍重量的淀粉，干膏0.6倍重量的微粉硅胶，1.2倍重量水湿法制粒，干燥压片，片剂规格为40～50mg/片。

[0044] 实施例3 治疗多发性骨髓瘤的中药组合物的药效学研究

[0045] 一、药物制备

[0046] 为验证本发明的治疗多发性骨髓瘤的中药组合物的药效，特制备如下对比例：

[0047] 对比例1：黄芪8 kg、黄芩8 kg、淫羊藿8 kg、天竺黄 4 kg，取处方量黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄，粉碎过 120 目筛得药材粉末；取药材粉末加入20倍重量的乙酸乙酯萃取，70℃下恒温水浴提取2次，每次3 小时，合并滤液，得药材提取液；将药材提取液浓缩成药材干膏备用。

[0048] 对比例2：水葱2kg、茴心草2kg，处方量水葱、茴心草粉碎过 120 目筛得药材粉末；取药材粉末加入20倍重量的乙酸乙酯萃取，70℃下恒温水浴提取2次，每次3 小时，合并滤液，得药材提取液；将药材提取液浓缩成药材干膏备用。

[0049] 对比例3：黄芪11kg、黄芩11kg、淫羊藿9 kg、天竺黄5kg、水葱2kg、茴心草2 kg；取处方量黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄、水葱、茴心草粉碎过 120 目筛得药材粉末；取药材粉末加入20倍重量的乙酸乙酯萃取，70℃下恒温水浴提取2次，每次3 小时，合并滤液，得药材提取液；将药材提取液浓缩成药材干膏备用。

[0050] 对比例4：生理盐水

[0051] 为验证本发明的治疗多发性骨髓瘤的中药组合物的药效，特制备如下实验例：

[0052] 实验例1： 黄芪8 kg、黄芩8 kg、淫羊藿8 kg、天竺黄4kg、水葱2kg、茴心草2 kg；

[0053] 实验例2：黄芪9 kg、黄芩9 kg、淫羊藿9 kg、天竺黄4kg、水葱2kg、茴心草3 kg；

[0054] 实验例3：黄芪9 kg、黄芩9kg、淫羊藿9 kg、天竺黄5kg、水葱3kg、茴心草2 kg；

[0055] 实验例4：黄芪8 kg、黄芩8 kg、淫羊藿8 kg、天竺黄5kg、水葱2kg、茴心草3 kg；

[0056] 实验例5：黄芪10kg、黄芩10kg、淫羊藿10kg、天竺黄6kg、水葱4kg、茴心草4 kg；

[0057] 上述实验例1-5的复方药物制备方法如下：

[0058] 1）取处方量黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄、水葱、茴心草，粉碎过 120 目筛得药材粉末；

[0059] 2）取药材粉末加入20倍重量的乙酸乙酯萃取，70℃下恒温水浴提取2次，每次3 小时，合并滤液，得药材提取液；

[0060] 3）将药材提取液浓缩成药材干膏备用。

[0061] 二、模型及给药

[0062] SPF级BALB/c雌性小鼠，6～8周龄，体重18～22 g，由北京北京维通利华实验动物技术有限公司。实验动物适检疫1周，饲养于SPF级实验室，室内相对湿度45%～60%，室内温度18～20℃，12h/12h明暗循环。饲喂标准灭菌小鼠饲料（小鼠NIH-41标准饲料）和灭菌纯净水。

[0063] 多发性骨髓瘤PRMI8226细胞株购自北京天恩泽生物技术有限公司。将PRMI8226细胞株加入含10%胎牛血清加双抗(青霉素100U/ml, 链霉素100 mg/L)的RPMI1640培养液内（上海元龙生物技术有限公司），37℃、50% CO2 、饱和湿度培养箱中培养。传代3、4代后, 取对数生长期细胞, 用RPMI1640培养液调整细胞密度备用。用台盼蓝染细胞确定活细胞数在95%以上。

[0064] 健康BALB/c小鼠皮下注射PRMI8226细胞建立多发性骨髓瘤小鼠模型，接种密度为5
6×10 个细胞/只。接种后每天观察各组小鼠的精神、食欲、活动等情况, 每周记录小鼠的体重、肿瘤体积大小。使用游标卡尺测量肿瘤表面的直径并按下列公式计算肿瘤相对体积:

[0065] 肿瘤体积=a×b2/2(mm3),a为最长径，b为与a垂直方向最短径。

[0066] 待肿瘤体积生长至100～120 mm3，将小鼠随机分为8组，每组6只。分别灌胃给予对比例1-3和实验例1-5制备的干膏，给药前将干膏粉碎，混悬于生理盐水，以便灌胃给药。为确保剂量的标准化和药效的可比性，各组小鼠给药剂量以如下：对比例1、3及实验例1-5给药剂量以黄芪生药材计算为6.75g/kg（相当于黄芪：黄芩：淫羊藿：天竺黄：水葱：茴心草组方重量比为8:8:8:4:2:2时，人体给药剂量为0.3g生药材/kg）；对比例2剂量以水葱生药材计算为1.69 g/kg（相当于黄芪：黄芩：淫羊藿：天竺黄：水葱：茴心草组方重量比为8:8:8:4:2:2时，人体给药剂量为0.3g生药材/kg）。各组小鼠隔日给药1次，共给药15次。

[0067] 三、观察指标

[0068] 1.小鼠生存时间：小鼠从肿瘤细胞接种到死亡的时间为其生存时间。以天为单位，统计各组小鼠生存时间以平均值±标准差表示。

[0069] 2.抑瘤率：给药后24h测定各组小鼠肿瘤体积。计算各组小鼠抑瘤率，抑瘤率计算公式如下：1-[（给药后肿瘤体积-给药前肿瘤体积）/给药前肿瘤体积]×100%。抑瘤率以平均值±标准差表示

[0070] 四、统计分析

[0071] 数据以平均值±标准差表示，采用SPSS12.0软件进行统计分析，组间比较用t检验。P＜0.05视为有显著差异。

[0072] 五、结果和结论

[0073] 1.各组小鼠生存时间比较

[0074] 各组小鼠生存时间观察结果见下表：

[0075]

[0076] 与对比例4（生理盐水组相比）相比aP＜0.05, bP＜0.01；与对比例1相比cP＜0.05，dP＜0.01；与实验例1相比eP＜0.05，f P＜0.01；

[0077] 由上表可见，对比例1组方（黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄）本身能够显著延长模型小鼠的生存时间，对比例2组方（水葱、茴心草）对模型小鼠生存时间无显著延长作用。实验例1-5（黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄、水葱、茴心草）能够显著延长模型小鼠的生存时间，且延长效果显著高于对比例1（黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄）。对比例3组方（黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄、水葱、茴心草）中虽然黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄用量加大，但小鼠的生存时间仍与实验例1无显著差异。说明实验例1-5的组方既能够显著延长模型小鼠生存期，也能够减少药材用量。

[0078] 换言之，在组方中黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄发挥抗多发性骨髓瘤作用，水葱、茴心草具有增效作用，但黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄的用量并非越高越好。

[0079] 2.实验组药效实验结果

[0080] 各组小鼠肿瘤的抑瘤率见下表：

[0081]

[0082] 与对比例4（生理盐水组相比）相比aP＜0.05, bP＜0.01；与对比例1相比cP＜0.05，dP＜0.01；与实验例1相比eP＜0.05，f P＜0.01；

[0083] 由上表可见，对比例1组方（黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄）本身具有显著的抑瘤作用，对比例2组方（水葱、茴心草）无显著抑瘤作用。实验例1-5（黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄、水葱、茴心草）的抑瘤效果显著高于对比例1（黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄）。对比例3组方（黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄、水葱、茴心草）中虽然黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄用量加大，但抑瘤效果与实验例1无显著差异。说明实验例1-5的组方既具有显著抑瘤作用，也能够减少药材用量。

[0084] 换言之，在组方中黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄发挥抗多发性骨髓瘤作用，水葱、茴心草具有增效作用，但黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄的用量并非越高越好。

[0085] 另外，各组小鼠生存时间数据表明，黄芪、黄芩、淫羊藿、天竺黄、水葱、茴心草组成复方制剂安全性良好，未缩短模型小鼠生存时间。