一种油茶炭疽病无公害综合式防治方法

摘要

本发明公开了一种油茶炭疽病无公害综合式防治方法，包括步骤(1)中牛肉膏蛋白胨采用恒温震荡的方式进行溶解，水浴温度为80℃，由于这两种物质较难溶解，因此采取加热震荡的方式能够加快培养液的配置；步骤(1)中对培养液进行调pH处理，调节培养液的pH为5.6，该pH为炭疽菌种最适生长的pH环境，使得菌种顺利生长，步骤(2)中菌种的接种方式为平板划线法，接种方法分为平板划线法和倒平板法，由于倒平板法容易出现菌种堆叠，影响实验结果，因此在本发明中采用平板划线法作为菌种接种的首选方法，步骤(3)中菌种的培养温度为25℃，该温度适宜炭疽菌种的生长，步骤(4)中每次倒入的药剂量为5ml，为了防止过多一次致死菌种，过少效果不明显的问题，本发明采用该剂量对菌种入药。

权利要求

1.一种适用于大别山地区油茶炭疽病无公害综合式防治方法，其特征在于，其步骤包括：(1)称取20-30g牛肉膏和10-15g蛋白胨溶解于1L水中，在温度为300-500℃下高温灭菌，灭菌后取出培养液转移至培养皿中，培养液的体积应占培养皿体积的0.3-0.5；

(2)将上述培养液冷却至20-30℃，然后无菌条件下接种炭疽菌母种；

(3)将接种有炭疽菌母种的培养皿放入设定温度为20-28℃的恒温培养箱中培养；

(4)配置12种不同浓度的药剂每隔12h倒入3-7ml于培养基中，进行培养；(5)培养3-5天后观察菌丝生长状况，记录加入药剂菌丝的菌落直径和空白对照的菌丝直径；

(6)计算各种药剂在不同浓度下对炭疽病的抑制率，计算公式为：抑制率％＝(对照菌丝直径-加入药剂菌丝直径)/对照菌丝直径×100(7)比较12种药剂不同浓度下的抑制率，得出最为适合的药剂种类和该种药剂的最适喷洒浓度；

(8)选取有效成分含量100％波尔多液、500％硫磺.锰锌、700％炭疽病分和500％代森锰锌的四种药剂对实验果林进行喷洒，用药量为0.19Kg/m2，喷洒分两次，第一次在4月上旬，第二次在5月上旬，喷洒后8-15天观察油茶的发病率；

(9)通过上述的化学药剂防治实验结果，结合物理防治，对油茶进行综合防治，并且跟踪记录果实的发病率，计算油茶的产量。

2.一种权利要求1所述的油茶炭疽病无公害综合式防治方法，其特征在于，步骤(1)中牛肉膏蛋白胨采用恒温震荡的方式进行溶解，水浴温度为80℃。

3.一种权利要求1所述的油茶炭疽病无公害综合式防治方法，其特征在于，步骤(1)中对培养液进行调pH处理，调节培养液的pH为5.6。

4.一种权利要求1所述的油茶炭疽病无公害综合式防治方法，其特征在于，步骤(2)中菌种的接种方式为平板划线法。

5.一种权利要求1所述的油茶炭疽病无公害综合式防治方法，其特征在于，步骤(3)中菌种的培养温度为25℃。

6.一种权利要求1所述的油茶炭疽病无公害综合式防治方法，其特征在于，步骤(4)中每次倒入的药剂量为5ml。

说明书

一种油茶炭疽病无公害综合式防治方法

技术领域

[0001] 本发明涉及病菌防治技术领域，特别是涉及一种油茶炭疽病无公害综合式防治方法。

背景技术

[0002] 油茶是一种木本油料树种，而食用油安全是继全球石油安全、粮食安全之后，成为事关国家战略的又一个新课题。我国目前60％左右的植物食用油依赖进口或由外资企业控制，很不安全。近年来，国家开始对食用油安全十分关注，国务院于2008年在湖南专门召开油茶产业发展现场会；2009-2010年，中央1号文件2次提到要大力发展油茶等木本油料树种，可见发展植物食用油的重要性和迫切性。

[0003] 油茶炭疽病是油茶生产中最主要的病害，严重影响油茶的生长、油茶的产量和品质。油茶感染该病后，可引起落果、落蕾、落叶、枝梢枯死、甚至整株衰亡。各油茶产区常年因该病减产10％-30％，重病区减产可达50％以上甚至绝收，每年造成的直接经济损失不可估量，是当前油茶生产中亟待解决的问题之一。

发明内容

[0004] 一种油茶炭疽病无公害综合式防治方法，其特征在于，其步骤包括：

[0005] (1)称取20-30g牛肉膏和10-15g蛋白胨溶解于1L水中，在温度为300-500℃下高温灭菌，灭菌后取出培养液转移至培养皿中，培养液的体积应占培养皿体积的0.3-0.5；

[0006] (2)将上述培养液冷却至20-30℃，然后无菌条件下接种炭疽菌母种；

[0007] (3)将接种有炭疽菌母种的培养皿放入设定温度为20-28℃的恒温培养箱中培养；

[0008] (4)配置12种不同浓度的药剂每隔12h倒入3-7ml于培养基中，进行培养；

[0009] (5)培养3-5天后观察菌丝生长状况，记录加入药剂菌丝的菌落直径和空白对照的菌丝直径；

[0010] (6)计算各种药剂在不同浓度下对炭疽病的抑制率，计算公式为：

[0011] 抑制率(％)＝(对照菌丝直径-加入药剂菌丝直径)/对照菌丝直径×100[0012] (7)比较12种药剂不同浓度下的抑制率，得出最为适合的药剂种类和该种药剂的最适喷洒浓度；

[0013] (8)选取有效成分含量100％波尔多液、500％硫磺.锰锌、700％炭疽病分和500％代森锰锌的四种药剂对实验果林进行喷洒，喷洒份两次，第一次在4月上旬，第二次在5月上旬，喷洒后8-15天观察油茶的发病率；

[0014] (9)通过上述的化学药剂防治实验结果，结合物理防治，对油茶进行综合防治，并且跟踪记录果实的发病率，计算油茶的产量。

[0015] 优选的，步骤(1)中牛肉膏蛋白胨采用恒温震荡的方式进行溶解，水浴温度为80℃。

[0016] 优选的，步骤(1)中对培养液进行调pH处理，调节培养液的pH为5.6。

[0017] 优选的，步骤(2)中菌种的接种方式为平板划线法。

[0018] 优选的，步骤(3)中菌种的培养温度为25℃。

[0019] 优选的，步骤(4)中每次倒入的药剂量为5ml。

[0020] 有益效果：本发明提供了一种油茶炭疽病无公害综合式防治方法，步骤(1)中牛肉膏蛋白胨采用恒温震荡的方式进行溶解，水浴温度为80℃，由于这两种物质较难溶解，因此采取加热震荡的方式能够加快培养液的配置；步骤(1)中对培养液进行调pH处理，调节培养液的pH为5.6，该pH为炭疽菌种最适生长的pH环境，使得菌种顺利生长，步骤(2)中菌种的接种方式为平板划线法，接种方法分为平板划线法和倒平板法，由于倒平板法容易出现菌种堆叠，影响实验结果，因此在本发明中采用平板划线法作为菌种接种的首选方法，步骤(3)中菌种的培养温度为25℃，该温度适宜炭疽菌种的生长，步骤(4)中每次倒入的药剂量为5ml，为了防止过多一次致死菌种，过少效果不明显的问题，本发明采用该剂量对菌种入药。

具体实施方式

[0021] 为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。

[0022] 实施例1：

[0023] 一种油茶炭疽病无公害综合式防治方法，其特征在于，其步骤包括：

[0024] (1)称取20g牛肉膏和10g蛋白胨溶解于1L水中，采用恒温震荡的方式进行溶解，水浴温度为80℃，对培养液进行调pH处理，调节培养液的pH为5.6，在温度为300℃下高温灭菌，灭菌后取出培养液转移至培养皿中，培养液的体积应占培养皿体积的0.3；

[0025] (2)将上述培养液冷却至20℃，然后无菌条件下接种炭疽菌母种，接种方式为平板划线法；

[0026] (3)将接种有炭疽菌母种的培养皿放入设定温度为25℃的恒温培养箱中培养；

[0027] (4)配置12种不同浓度的药剂每隔12h倒入5ml于培养基中，进行培养，12种药剂不同浓度配置如下：

[0028]

[0029]

[0030] (5)培养3天后观察菌丝生长状况，记录加入药剂菌丝的菌落直径和空白对照的菌丝直径；

[0031] (6)计算各种药剂在不同浓度下对炭疽病的抑制率，计算公式为：

[0032] 抑制率(％)＝(对照菌丝直径-加入药剂菌丝直径)/对照菌丝直径×100[0033] (7)比较12种药剂不同浓度下的抑制率，得出最为适合的药剂种类和该种药剂的最适喷洒浓度；

[0034] (8)选取有效成分含量100％波尔多液、500％硫磺.锰锌、700％炭疽病分和500％代森锰锌的四种药剂对实验果林进行喷洒，喷洒份两次，第一次在4月8号，第二次在5月8号，喷洒后8天观察油茶的发病率；

[0035] (9)通过上述的化学药剂防治实验结果，结合物理防治，对油茶进行综合防治，并且跟踪记录果实的发病率，计算油茶的产量，防治处理如下：

[0036]

[0037]

[0038] 实施例2：

[0039] 一种油茶炭疽病无公害综合式防治方法，其特征在于，其步骤包括：

[0040] (1)称取25g牛肉膏和12g蛋白胨溶解于1L水中，采用恒温震荡的方式进行溶解，水浴温度为80℃，对培养液进行调pH处理，调节培养液的pH为5.6，在温度为450℃下高温灭菌，灭菌后取出培养液转移至培养皿中，培养液的体积应占培养皿体积的0.4；

[0041] (2)将上述培养液冷却至25℃，然后无菌条件下接种炭疽菌母种，接种方式为平板划线法；

[0042] (3)将接种有炭疽菌母种的培养皿放入设定温度为25℃的恒温培养箱中培养；

[0043] (4)配置12种不同浓度的药剂每隔12h倒入5ml于培养基中，进行培养，12种药剂不同浓度配置如下：

[0044]

[0045]

[0046] (5)培养4天后观察菌丝生长状况，记录加入药剂菌丝的菌落直径和空白对照的菌丝直径；

[0047] (6)计算各种药剂在不同浓度下对炭疽病的抑制率，计算公式为：

[0048] 抑制率(％)＝(对照菌丝直径-加入药剂菌丝直径)/对照菌丝直径×100[0049] (7)比较12种药剂不同浓度下的抑制率，得出最为适合的药剂种类和该种药剂的最适喷洒浓度；

[0050] (8)选取有效成分含量100％波尔多液、500％硫磺.锰锌、700％炭疽病分和500％代森锰锌的四种药剂对实验果林进行喷洒，喷洒份两次，第一次在4月6旬，第二次在5月10，喷洒后10天观察油茶的发病率；

[0051] (9)通过上述的化学药剂防治实验结果，结合物理防治，对油茶进行综合防治，并且跟踪记录果实的发病率，计算油茶的产量，防治处理如下：

[0052]

[0053]

[0054] 实施例3：

[0055] 一种研究炭疽病无公害防治技术的方法，其特征在于，其步骤包括：

[0056] (1)称取30g牛肉膏和15g蛋白胨溶解于1L水中，采用恒温震荡的方式进行溶解，水浴温度为80℃，对培养液进行调pH处理，调节培养液的pH为5.6，在温度为500℃下高温灭菌，灭菌后取出培养液转移至培养皿中，培养液的体积应占培养皿体积的0.5；

[0057] (2)将上述培养液冷却至30℃，然后无菌条件下接种炭疽菌母种，接种方式为平板划线法；

[0058] (3)将接种有炭疽菌母种的培养皿放入设定温度为25℃的恒温培养箱中培养；

[0059] (4)配置12种不同浓度的药剂每隔12h倒入5ml于培养基中，进行培养，12种药剂不同浓度配置如下：

[0060]药剂种类 浓度梯度(mg/L)
25％咪酰胺EC 167、250、500、1250
80％多菌灵WP 533、800、1600、4000
80％波尔多液WP 533、800、1600、4000
70％代森锰锌WP 467、700、1400、3500
70％硫磺锰锌WP 467、700、1400、3500
80％福美双WG 533、800、1600、4000
10％苯醚甲环唑WG 66.7、100、200、500
21％硅唑多菌灵SC 140、210、420、1050
75％百菌清WP 250、375、1000、1500
45％石硫合剂CR 300、450、900、2250
100％炭疽病分WP 667、1000、2000、5000
100％硫酸铜CR 667、1000、2000、5000

[0061] (5)培养5天后观察菌丝生长状况，记录加入药剂菌丝的菌落直径和空白对照的菌丝直径；

[0062] (6)计算各种药剂在不同浓度下对炭疽病的抑制率，计算公式为：

[0063] 抑制率(％)＝(对照菌丝直径-加入药剂菌丝直径)/对照菌丝直径×100[0064] (7)比较12种药剂不同浓度下的抑制率，得出最为适合的药剂种类和该种药剂的最适喷洒浓度；

[0065] (8)选取有效成分含量100％波尔多液、500％硫磺.锰锌、700％炭疽病分和500％代森锰锌的四种药剂对实验果林进行喷洒，喷洒份两次，第一次在4月12，第二次在5月15，喷洒后15天观察油茶的发病率；

[0066] (9)通过上述的化学药剂防治实验结果，结合物理防治，对油茶进行综合防治，并且跟踪记录果实的发病率，计算油茶的产量，防治处理如下：

[0067]

[0068] 通过实验得到的结果比较如下表：

[0069]

[0070]

[0071] 根据上述表格数据可以得出，当实施实施例2参数时，得到的该防治炭疽病技术，对炭疽病的抑制率为98.7％，用药量为0.12Kg/m2，果实发病率为8.2％，亩产量为1195kg，而现有技术标准对炭疽病的抑制率为90％，用药量为0.21Kg/m2，果实发病率为15.8％，亩产量为973kg，因此本发明具有显著的优越性。

[0072] 本发明提供了一种油茶炭疽病无公害综合式防治方法，步骤(1)中牛肉膏蛋白胨采用恒温震荡的方式进行溶解，水浴温度为80℃，由于这两种物质较难溶解，因此采取加热震荡的方式能够加快培养液的配置；步骤(1)中对培养液进行调pH处理，调节培养液的pH为5.6，该pH为炭疽菌种最适生长的pH环境，使得菌种顺利生长，步骤(2)中菌种的接种方式为平板划线法，接种方法分为平板划线法和倒平板法，由于倒平板法容易出现菌种堆叠，影响实验结果，因此在本发明中采用平板划线法作为菌种接种的首选方法，步骤(3)中菌种的培养温度为25℃，该温度适宜炭疽菌种的生长，步骤(4)中每次倒入的药剂量为5ml，为了防止过多一次致死菌种，过少效果不明显的问题，本发明采用该剂量对菌种入药。

[0073] 以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。