板栗果肉提取物及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种板栗果肉提取物及其制备方法和应用，属于天然产物提取应用技术领域。该制备方法包括以下步骤：提取：以板栗果肉为原料，以体积百分浓度为40％‑80％的乙醇水溶液为溶剂，进行溶剂提取，回收溶剂，即得板栗果肉提取物。上述板栗果肉提取物具有抑制二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)的作用，能够将该提取物作为DGAT抑制剂使用，用于治疗糖尿病、肥胖症及其它由此引发的并发症。

权利要求

1.一种用于抑制二酰基甘油酰基转移酶的板栗果肉提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：提取：以板栗果肉为原料，以体积百分浓度为45％-55％的乙醇水溶液为溶剂，进行溶剂提取，所述原料质量与溶剂体积的比值为1g:10-20ml，分2-4次进行超声波提取，每次

90min-120min；减压浓缩回收乙醇，浓缩至75-80℃时相对密度为1.08-1.10，加入2-3倍质量的水并搅拌，常温静置12-36小时，析出沉淀，取沉淀，即得板栗果肉提取物；

纯化：将所述提取步骤得到的板栗果肉提取物上样至粒径为100-200μm的碳十八烷基硅烷基键合硅胶色谱柱进行纯化，依次以体积比为0:10的甲醇-水溶液洗脱1-3个柱体积；

以体积比为4:6的甲醇-水溶液洗脱1-3个柱体积；收集体积比为4:6部分的乙醇-水溶液的洗脱液，回收溶剂，即得。

2.权利要求1所述的板栗果肉提取物的制备方法制备得到的板栗果肉提取物。

3.权利要求2所述的板栗果肉提取物在制备抑制二酰基甘油酰基转移酶的抑制剂和/或在制备胰岛素增敏剂中的应用。

4.权利要求2所述的板栗果肉提取物在制备用于预防和治疗糖尿病、肥胖症及其并发症的药物中应用。

说明书

板栗果肉提取物及其制备方法和应用

技术领域

[0001] 本发明涉及天然产物提取应用技术领域，特别是涉及一种板栗果肉提取物及其制备方法和应用。

背景技术

[0002] 随着全球经济的快速发展，肥胖症的发病率与日俱增。据估测，至2050年，全球成年男性肥胖患病率将增加至60％，成年女性将达到50％，而16的岁以下的儿童将上升至25％。肥胖流行将导致一系列并发症的发生，如糖尿病；心血管疾病：心肌梗塞，高血压，高血脂等。其中，肥胖是引起糖尿病发病的众多因素中最危险的因素。

[0003] 肥胖的治疗主要是通过三个方面：改善生活方式，药物治疗和手术治疗。生活方式的改变往往需要患者自身的意志及监护人监督来保证实施，同时要注意身体的变化、维护营养的平衡，但往往复发率高。手术方法多用于严重肥胖患者的并发症的治疗，但是鉴于手术费用的昂贵和医疗监护的终身性，使用药物预防治疗肥胖症成为了至关重要的手段。

[0004] 甘油三酯(Triacylgycerol,TG)是真核生物能量储存的主要形式，当人体摄入的能量超过其消耗的能量时，过剩的能量便以TG的形式储存在脂肪组织，同时过多的TG也会在胰岛β细胞、肝脏等组织沉积，最终导致肥胖和糖尿病等疾病。因此，抑制这些组织内TG的合成可作为治疗肥胖的新策略。

[0005] TG主要在肝脏、脂肪组织及小肠中合成。TG合成有两条途径：甘油三磷酸途径(主要途径)和单酰甘油途径(次要途径)。首先3-磷酸甘油与2分子脂酰CoA生成磷脂酸，后者在磷酸酶作用下脱磷酸形成二酰甘油(DAG)。DAG也可经次要途径单酰甘油和1分子脂酰CoA生成。而二酰基甘油酰基转移酶(Acly CoA:diacylglycerol acyltransferase,DGAT)作为催化TG合成的关键最后一步：脂酰辅酶A酰基转移到DAG形成TG，是TG合成的限速酶。

[0006] DGAT是一种内质网膜整合蛋白，有两种亚型：DGAT1和DGAT2。DGAT1和DGAT2在哺乳动物所有组织中广泛表达，在功能上发生了趋同进化，都能催化sn-1,2-二酰甘油和脂酰CoA合成TG，且对底物脂酰CoA没有特异性。DGATl属于胆固醇酰基转移酶基因家族，DGAT2属于Mramanniana基因家族。研究发现，无论是给予一般饮食还是高脂饮食，DGAT-/-小鼠脂肪细胞体积都较DGAT+/+小鼠小。值得注意的是，在给予以高脂饮食后，DGAT1+/+小鼠的脂肪细胞体积增大了两倍，而DGATl-/-小鼠的脂防细胞大小没有明显变化。同时，DGAT1-/-小鼠的瘦素活性也有所提高。DGAT2功能下调可明显降低肥胖小鼠肝脏TG含量，改善脂肪肝的形成。这些研究表明，DGAT活抑制剂在预防肥胖、调节脂代谢紊乱、预防肝脂肪变性等方面有重要的药物研究价值。

[0007] 2006年，辉瑞公司的DGAT1抑制剂BAY74-4113已处于I期临床试验；2009年，诺华的DGAT1抑制剂已进入II临床试验。DGAT1已逐渐成为肥胖、糖尿病等疾病药物的研究热点。目前还没有以DGAT1为靶点的天然降血脂药物上市，这为我们从天然资源里寻找高效、高选择性地小分子DGAT1抑制剂提供了机遇。

发明内容

[0008] 基于此，本发明从天然资源里寻找，提供一种具有DGAT1抑制活性的天然成分。

[0009] 一种板栗果肉提取物的制备方法，包括以下步骤：

[0010] 提取：以板栗果肉为原料，以体积百分浓度为40％-80％的乙醇水溶液为溶剂，进行溶剂提取，回收溶剂，即得板栗果肉提取物。

[0011] 本发明涉及的板栗(Castanea mollissima Blume)，属壳斗科Fagaceae栗属坚果类植物，又名栗、栗子、大栗等，是我国的特产植物，主产于广东、广西、云南、江西等地。主要作用于防治高血压病、冠心病、动脉硬化、骨质疏等疾病，是抗衰老、延年益寿的滋补佳品；栗子味甘，性温，入脾、胃、肾经；具有养胃健脾，补肾强筋，活血止血之功效。

[0012] 本发明人以现代医学理论和技术经过长期的实验研究后发现，板栗果肉的乙醇提取物具有抑制二酰基甘油酰基转移酶(Acly CoA:diacylglycerol acyltransferase,DGAT)的作用，能够将该提取物作为DGAT抑制剂使用，用于治疗肥胖症及其它由此引发的并发症。

[0013] 在其中一个实施例中，所述提取步骤中，所述溶剂为体积百分浓度为45％-55％的乙醇水溶液。，优选50％的乙醇水溶液。本发明人通过实验发现，以45％-55％的乙醇水溶液提取得到的板栗果肉提取物具有更佳的DGAT抑制活性。

[0014] 在其中一个实施例中，所述提取步骤中，所述提取步骤中，所述原料质量与溶剂体积的比值为1g:10-20ml，分2-4次进行超声波提取，每次90min-120min；

[0015] 所述回收溶剂的具体方法为：减压浓缩回收乙醇，浓缩至75-80℃时相对密度为1.08-1.10，加入2-3倍质量的水并搅拌，常温静置12-36小时，析出沉淀，取沉淀，即得板栗果肉提取物。以上述方法提取，具有提取效率高，操作性强，得到产物活性好的优点。

[0016] 在其中一个实施例中，还包括纯化步骤，所述纯化步骤为：

[0017] 将所述提取步骤得到的板栗果肉提取物上样至反向硅胶色谱柱进行纯化，用乙醇-水溶液体系梯度洗脱，收集乙醇-水体积比为3.5-4.5:5.5-6.5部分洗脱液，回收溶剂，即得。

[0018] 通过进一步的纯化，能够富集该提取物的组合物中真正对DGAT有抑制活性的成分。并且，本发明人经过大量的实验后发现，对DGAT有抑制活性的成分主要存在于3.5-4.5:5.5-6.5的乙醇-水洗脱液中，其它组份的洗脱液中成分的活性均不如该组份。

[0019] 在其中一个实施例中，所述纯化步骤中，所述反向硅胶为粒径为100-200μm的碳十八烷基硅烷基键合硅胶。以该型号的反向硅胶纯化上述板栗果肉提取物，能够较好的富集该提取物的组合物中真正对DGAT有抑制活性的部分。

[0020] 在其中一个实施例中，所述纯化步骤中，将所述提取步骤得到的板栗果肉提取物上样至反向硅胶色谱柱后，依次用体积比为0:10、3.5-4.5:5.5-6.5的乙醇-水溶液梯度洗脱，收集体积比为3.5-4.5:5.5-6.5部分的乙醇-水溶液的洗脱液，回收溶剂，即得。先用水洗脱，去除其中部分杂质成分，具有较好的纯化效果。

[0021] 在其中一个实施例中，所述纯化步骤中，以体积比为0:10的甲醇-水溶液洗脱1-3个柱体积；以体积比为4:6的甲醇-水溶液洗脱1-3个柱体积；收集体积比为4:6部分的乙醇-水溶液的洗脱液。以上述柱体积的洗脱液洗脱，能够最大限度的去除杂质成分并保留对DGAT有抑制活性的成分。

[0022] 本法明还公开了上述的板栗果肉提取物的制备方法制备得到的板栗果肉提取物。该板栗果肉提取物具有DGAT抑制活性的作用，为一种天然DGAT抑制剂，可作为抑制二酰基甘油酰基转移酶的抑制剂使用，用于预防和治疗肥胖症及其并发症。

[0023] 本法明还公开了上述的板栗果肉提取物作为抑制二酰基甘油酰基转移酶的抑制剂和/或作为胰岛素增敏剂中的应用。

[0024] 在其中一个实施例中，所述抑制二酰基甘油酰基转移酶的抑制剂和/或作为胰岛素增敏剂在制备用于预防和治疗糖尿病、肥胖症及其并发症的药物中应用。

[0025] 与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

[0026] 本发明的一种板栗果肉提取物的制备方法，采用该方法制备得到的板栗果肉提取物，具有抑制二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)的作用，能够将该提取物作为DGAT抑制剂或作为胰岛素增敏剂使用，用于治疗糖尿病、肥胖症及其它由此引发的并发症。对开发利用中国的药用植物资源具有重要意义。

[0027] 并且，该板栗果肉提取物的制备方法具有操作性强，适用于工业化生产的优点。

具体实施方式

[0028] 为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。

[0029] 除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

[0030] 以下实施例中，所使用的C18反相硅胶，由Merck公司生产，货号M2014441；STZ(链脲佐菌素)，为sanland产品，分析纯，临用前在4℃冰浴中用0.05mol/ml柠檬酸pH 4.5溶液配制，立即使用；血脂康，由北京北大维信生物科技有限公司生产,批号2015055，人胰岛素，由诺和诺德(中国)制药有限公司生产,批号2014223。消渴丸，由广州中一药业有限公司生产，批号：GF0085。

[0031] 实施例1

[0032] 一种板栗果肉提取物，通过以下方法制备得到：

[0033] 1、提取。

[0034] 将干燥切碎的板栗果肉，用体积百分浓度为40％浓度的乙醇，按照板栗果肉与乙醇料液比(g/ml)为10-20倍量，进行超声波提取2-4次，每次90min-120min，合并提取液。在本实施例中，板栗果肉为500g，乙醇为5L-10L，超声波提取3次，每次120min。

[0035] 随后，提取液减压浓缩回收乙醇，浓缩至相对密度1.08-1.10(75-80℃时)，放凉，加入2-3倍量水并搅拌，常温静置24小时，析出沉淀，过滤或离心取沉淀，沉淀物置于敞口容器中加热，尽可能挥尽乙醇，放凉，得到40％乙醇提物28.1g，干燥后得到板栗果肉提取物，即为组分A1。

[0036] 2、纯化。

[0037] 将所述提取步骤得到的板栗果肉提取物上样至反相硅胶色谱(C-18；粒径150μm)，进行纯化，分别用乙醇/水(v/v，0:10，4:6，5:5，10:0)为洗脱液，每种洗脱液1L(相当于2个柱体积)，进行梯度洗脱，收集乙醇/水(v/v，4:6)的分离组份，收集洗脱液(乙醇/水＝4:6)，将洗脱液常温减压浓缩，干燥，得板栗果肉提取物精制组份4.0g，即为组分A2。

[0038] 实施例2

[0039] 一种板栗果肉提取物，通过以下方法制备得到：

[0040] 1、提取。

[0041] 将干燥切碎的板栗果肉，用体积百分浓度为50％浓度的乙醇，按照板栗果肉与乙醇料液比(g/ml)为10-20倍量，进行超声波提取2-4次，每次90min-120min，合并提取液。在本实施例中，板栗果肉为500g，乙醇为5L-10L，超声波提取3次，每次120min。

[0042] 随后，提取液减压浓缩回收乙醇，浓缩至相对密度1.08-1.10(75-80℃时)，放凉，加入2-3倍量水并搅拌，常温静置24小时，析出沉淀，过滤或离心取沉淀，沉淀物置于敞口容器中加热尽可能挥尽乙醇，放凉，得到50％乙醇提物37.5g，干燥后得到板栗果肉提取物，即为组分B1。

[0043] 2、纯化。

[0044] 将所述提取步骤得到的板栗果肉提取物上样至反相硅胶色谱(C-18；粒径150μm)，进行纯化，分别用乙醇/水(v/v，0:10，4:6，5:5，10:0)为洗脱液，每种洗脱液1L(相当于2个柱体积)，进行梯度洗脱，收集乙醇/水(v/v，4:6)的分离组份，收集洗脱液(乙醇/水＝4:6)，将洗脱液常温减压浓缩，干燥，得板栗果肉提取物精制组份5.3g，即为组分B2。

[0045] 并且，在该实施例中，还将醇/水(v/v，0:10，5:5，10:0)组份的洗脱液常温减压浓缩，干燥，分别得到组份BI，组份BII和组份BIII。

[0046] 实施例3

[0047] 一种板栗果肉提取物，通过以下方法制备得到：

[0048] 1、提取。

[0049] 将干燥切碎的板栗果肉，用体积百分浓度为80％浓度的乙醇，按照板栗果肉与乙醇料液比(g/ml)为10-20倍量，进行超声波提取2-4次，每次90min-120min，合并提取液。在本实施例中，板栗果肉为500g，乙醇为5L-10L，超声波提取3次，每次120min。

[0050] 随后，提取液减压浓缩回收乙醇，浓缩至相对密度1.08-1.10(75-80℃时)，放凉，加入2-3倍量水并搅拌，常温静置24小时，析出沉淀，过滤或离心取沉淀，沉淀物置于敞口容器中加热尽可能挥尽乙醇，放凉，得到80％乙醇提物33.1g，干燥后得到板栗果肉提取物，即为组分C1。

[0051] 2、纯化。

[0052] 将所述提取步骤得到的板栗果肉提取物上样至反相硅胶色谱(C-18；粒径150μm)，进行纯化，分别用乙醇/水(v/v，0:10，4:6，5:5，10:0)为洗脱液，每种洗脱液1L(相当于2个柱体积)，进行梯度洗脱，收集乙醇/水(v/v，4:6)的分离组份，收集洗脱液(乙醇/水＝4:6)，将洗脱液常温减压浓缩，干燥，得板栗果肉提取物精制组份4.1g，即为组分C2。

[0053] 试验例1

[0054] 上述实施例得到的提取物的抑制DGAT1的活性试验。

[0055] 1、实验方法。

[0056] DGATl抑制剂的体外检测使用表达在昆虫细胞膜的人类DGATl作为酶源(Proc.Natl.Acad.sci.1998,95,13018-13023)。将sf9细胞(来源：ProSpec，货号：CYT-421)用包含人类DGATl编码序列的重组杆状病毒(来源：吉奉生物科技有限公司，货号：BL10097)进行感染，48小时后采集。

[0057] 细胞通过超声溶解法溶解，并在4℃条件下，在40％蔗糖溶液中以28000rpm转速离心分离1小时，得到所述DGAT1酶。收集，清洗细胞间的隔膜碎片并在液氮中储存。

[0058] DGAT1活性检测：通过修正的科尔曼(Coleman)所描述的方法进行(methods inEnzymology1992,209,98-102)。

[0059] 反应体系中包含：100μg/ml样品，上述方法得到的0.4μg DGAT1酶，5mM MgCl2和1.2mM sn-1,2-二酰基甘油-丙三醇，用蒸馏水调整总检测体积至200μL，在试管中培养。

[0060] 通过在上述体系中加入100μmol/L 14C甘油酰基-辅酶A(0.05μCi)进行反应，并于25℃条件下进行温和短暂的震荡。30min后通过加入1.5mL 2-丙醇:庚烷:水(80:20:2)终止反应。反应停止后加入l.0mL庚烷和0.5mL 0.1M碳酸盐缓冲液(pH9.5)，将放射性三酰甘油产物分离到有机相中，并用2.0ml的碱性乙醇溶液(乙醇:0.5N NaOH:H2O＝50:10:40)洗涤一次。用液体闪烁照相法检测上层庚烷层的放射性来量化DGAT1活性。实验结果如下：

[0061] 表1.不同提取物对DGAT1抑制活性的IC50(n＝10)

[0062]

[0063] 实验结果显示：不同浓度乙醇提取物及精制组份对抑制DGAT1活性效果都不相同，其中组份B1和组份B2(50％乙醇提取物及50％乙醇提取物精制组份)对DGAT1抑制活性最佳。

[0064] 而组份BI、BII、BIII与组份B2相比，活性较差，说明在50％乙醇提取物中，具有抑制DGAT1效果的活性成分主要存在于乙醇/水(v/v，4:6)的洗脱液中。

[0065] 试验例2

[0066] 上述实施例得到的提取物分别对高血脂大鼠降体重实验。

[0067] 1、实验方法。

[0068] 取健康清洁级的昆明种雄性大鼠50只，基础饲料平衡喂养7天后，筛选出体重为160～220g的大鼠40只，随机分组成空白组、模型组、实验组(组分A1和组分A2)、血脂康对照组(XZK)。

[0069] 大鼠通过喂食高脂饲料形成高血脂症动物模型。从实验开始到结束，正常组(即空白组)和高脂模型组(即模型组)给予等体积生理盐水，给药组(即实验组)和对照组(血脂康对照组)分别灌胃给药A1组分和A2组分(200mg/kg)和血脂康(200mg/kg)，1次/d，连续灌胃30d，每天测量体重。实验结果如下：

[0070] 表2.不同提取物对高血脂大鼠降体重情况

[0071]

[0072] 实验结果显示，实验组与模型组比较，活性组份A1和A2对高脂饮食所致高血脂大鼠均有显著的降体重效果，其中A2组分降体重效果与血脂康对照组相当。

[0073] 试验例3

[0074] 上述实施例得到的提取物分别对STZ致高血糖大鼠降血糖实验。

[0075] 1、实验方法。

[0076] 以昆明大鼠100只(雄性)，随机分组成空白组、模型组(Diabetic control)、实验组(A1组份，A2组份)、消渴丸对照组(XKW)。

[0077] 除空白组外，各组禁食不禁水1d，以STZ(在4℃冰浴中用0.05mol/ml柠檬酸pH4.5溶液配制，立即使用)腹腔注射60mg/kg，造糖尿病模型。注射后72h断尾取血测定血糖(测前禁食6h)，血糖值高于11.1mmol/L用于实验(10只/组)。

[0078] 实验组分别以A1组份、A2组份灌胃(200mg/kg)；XKW组以消渴丸灌胃(250mg/kg)；空白组、模型组灌胃等体积生理盐水。给药30d，每天称重、给药一次。末次给药后，断尾取血测定血糖(测前禁食6h)。实验结果如下：

[0079] 表3.不同提取物对STZ致高血糖大鼠降血糖情况

[0080]

[0081]

[0082] 实验结果显示：实验组大鼠血糖均有不同程度的下降，其中以组分A2降低血糖作用最显著。实验数据表明，组分A2的降糖效果优于消渴丸。

[0083] 试验例4

[0084] 上述实施例得到的提取物对STZ致高血糖大鼠胰岛素敏感性的影响实验。

[0085] 1、实验方法。

[0086] 以昆明大鼠100只(雄性)，随机分组成空白组、模型组(Diabetic control)、实验组(A1组份，A2组份)、消渴丸对照组(XKW)。

[0087] 除空白组外，各组禁食不禁水1d，以STZ(在4℃冰浴中用0.05mol/ml柠檬酸pH4.5溶液配制，立即使用)腹腔注射60mg/kg，造糖尿病模型。注射后72h断尾取血测定血糖(测前禁食6h)，血糖值高于11.1mmol/L用于实验(10只/组)。

[0088] 实验组分别以组分A1，组分A2灌胃(300mg/kg)；空白组、模型组灌胃等体积生理盐水。给药30d，每天称重、给药一次。以上各组在给药30d内，每天腹腔注射长效人胰岛素1IU/kg。30d后，各组大鼠四天内每天分别腹腔注射速效人胰岛素0.05、0.5、1.0、2.5IU/kg，测定给速效人胰岛素前后的血糖，计算比值。实验结果如下：

[0089] 表4.不同提取物对STZ致高血糖大鼠胰岛素敏感性情况

[0090]

[0091]

[0092] 实验结果中显示，不同组分对STZ致高血糖大鼠胰岛素敏感性均有改善，但各组分效果不同,组分A2与模型组比较，胰岛素敏感性增强效果最显著。

[0093] 试验例5

[0094] 上述实施例得到的提取物分别对STZ致高血糖大鼠糖耐量的影响实验。

[0095] 1、实验方法

[0096] 以昆明大鼠100只(雄性)，随机分组成空白组、模型组(Diabetic control)、实验组(A1组份，A2组份)、消渴丸对照组(XKW)。

[0097] 除空白组外，各组禁食不禁水1d，以STZ(在4℃冰浴中用0.05mol/ml柠檬酸pH4.5溶液配制，立即使用)腹腔注射60mg/kg，造糖尿病模型。注射后72h断尾取血测定血糖(测前禁食6h)，血糖值高于11.1mmol/L用于实验(10只/组)。

[0098] 实验组分别以组分A1，组分A2灌胃(300mg/kg)；XKW组以消渴丸灌胃(250mg/kg)；空白组、模型组灌胃等体积生理盐水(每组10只)。给药30d，每天称重、给药一次。以上各组给药30d后禁食4h(9:00～13:00)，灌胃葡萄糖(300mg/kg)，测定灌胃前(0min)及灌胃后
30min，60min，120min血糖。实验结果如下:

[0099] 表5.不同提取物对STZ致高血糖大鼠糖耐量情况

[0100]

[0101] 从实验结果中显示，各组分均有提高STZ致高血糖大鼠的糖耐量的趋势，但各组份效果不同。实验数据表明，组分A2的降糖效果与XZK组相当。

[0102] 试验例6

[0103] 上述实施例得到的提取物分别对STZ致高血糖大鼠体重变化实验。

[0104] 以昆明大鼠100只(雄性)，随机分组成空白组、模型组(Diabetic control)、实验组(A1组份，A2组份)、消渴丸对照组(XKW)。

[0105] 除空白组外，各组禁食不禁水1d，以STZ(在4℃冰浴中用0.05mol/ml柠檬酸pH4.5溶液配制，立即使用)腹腔注射60mg/kg，造糖尿病模型。注射后72h断尾取血测定血糖(测前禁食6h)，血糖值高于11.1mmol/L用于实验(10只/组)。

[0106] 实验组分别以组分A1，组分A2灌胃(300mg/kg)；XKW组以消渴丸灌胃(250mg/kg)；空白组、模型组灌胃等体积生理盐水。给药30d，每天称重、给药一次。实验结果如下：

[0107] 表6.不同提取物对STZ致高血糖大鼠体重变化情况(n＝10)

[0108]

[0109] 实验结果显示：不同组份对STZ致高血糖大鼠体重的增加作用均不相同。其中组份A2增加体重效果最佳。

[0110] 通过上述试验数据显示，本发明的板栗提取物组分均能能够抑制DGAT活性(试验例1)。并通过高血脂大鼠降体重实验(试验例2)，充分肯定了本发明板栗果肉提取物对高血脂模型动物有降体重作用，且进一步通过STZ致高血糖大鼠降糖实验表明(试验例3)，本发明板栗果肉提取物能够明显降低模型动物血糖,并改善机体对胰岛素的敏感性，提高胰岛素的生物利用度(试验例4)。通过对STZ致高血糖大鼠糖耐量检测显示(试验例5)，本发明板栗果肉提取物可以显著提高机体糖耐量。通过大鼠体重变化试验数据得知(试验例6)，本发明板栗果肉提取物对糖尿病模型动物降低体重均有显著改善效果。

[0111] 综合上述相关试验数据，表明板栗提取物对治疗2型糖尿病、肥胖症及并发症有潜在的实际意义。

[0112] 以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

[0113] 以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。