预测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者肝脏炎症程度的系统

摘要

本发明针对现有技术几乎没有无创诊断方法来确认ALT

权利要求

1.一种用于预测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者肝脏炎症程度的系统，其特征在于，所述系统包括：检测模块，用于检测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中乙肝核心抗体含量、谷草转氨酶含量和白蛋白含量；

Inf‐index1计算模块，用于根据所述乙肝核心抗体含量、谷草转氨酶含量和白蛋白含量，计算Inf‐index1；及，肝脏炎症程度预测模块，用于根据所述Inf‐index1预测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者的肝脏炎症程度；

其中，所述Inf‐index1为炎症指数；

其中，所述Inf‐index1经由以下公式计算得到：Inf‐index1＝A1×log10Anti‐HBc+A2×AST‐A3×Albumin‐A4；

其中，所述Anti‐HBc为谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中乙肝核心抗体含量，单位为log10IU/mL；

所述AST为谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中谷草转氨酶含量，单位为IU/L；

所述Albumin为谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中白蛋白含量，单位为g/L；

其中，所述A1、A2、A3、A4为系数；A1＝1.251±10％；A2＝0.03±10％；A3＝0.061±

10％；A4＝3.845±10％。

2.根据权利要求1所述的系统，其特征在于，根据所述Inf‐index1预测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者的肝脏炎症程度包括：根据谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型肝炎病毒感染人群的肝脏炎症程度统计学数据，确定需要进行乙肝治疗的临界值；

将所述Inf‐index1与所述临界值进行比较处理；

当比较结果为Inf‐index1大于所述临界值时，预测所述谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者的肝脏炎症程度达到了需要进行治疗的程度。

3.根据权利要求1所述的系统，其特征在于，所述计算模块的输入连接所述检测模块的输出，所述预测模块的输入连接所述计算模块的输出。

4.根据权利要求1所述的系统，其特征在于，所述检测模块包括检测所述乙肝核心抗体含量、谷草转氨酶含量和白蛋白含量所需的试剂和/或试剂盒和/或仪器。

说明书

预测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患

者肝脏炎症程度的系统

技术领域

[0001] 本发明涉及预测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者肝脏炎症程度的系统，属于生物医学领域。

背景技术

[0002] 在中国，乙型肝炎病毒慢性感染是严重威胁我国人民健康的公共卫生问题；根据2006年全国乙型肝炎血清流行病学调查结果表明，我国1～59岁一般人群HBsAg(乙肝表面抗原：已感染乙肝病毒的标志)携带率为7.18％。据此推算，我国现有慢性乙型肝炎病毒感染者约9300万人，其中慢性乙型肝炎患者约2000万例。慢性乙型肝炎患者若未经有效治疗多会进展为肝脏纤维化、肝硬化，发生多种危及生命的并发症。

[0003] 国际及国内指南将谷丙转氨酶(ALT)、乙肝病毒基因(HBVDNA)、乙肝抗原(HBe抗原)状态作为衡量乙肝是否抗病毒治疗的临床指标；其中ALT是目前临床中最为常用判断肝脏受损、肝脏炎症程度的血清学指标(金标准为肝脏穿刺)；当乙肝患者的谷丙转氨酶大于或等于二倍正常上限(ALT≥2倍)，是肝炎活动的标准，临床上必须进行抗病毒治疗；而对于谷丙转氨酶小于二倍正常上限(ALT<2倍)的乙肝患者，文献报道大约30％该类患者肝脏有明显的纤维化或者中重度炎症，若不及时治疗，可能导致病情的延误。

[0004] 对于ALT<2倍的乙肝患者，现行方法是通过肝脏穿刺来判断肝脏的病理状态来进行临床抗病毒治疗决策；然而肝脏穿刺活检是侵袭性检查，存在判读和取样误差，且有出血、胆漏等风险，且费用较为昂贵不适用于所有患者。但是目前除有创肝脏穿刺之外，尚无较好的判断肝脏病理状态的指标。尤其是对于ALT<2倍的人群，国际及国内对于此区病人群的研究并不多，对其肝脏病理炎症状态的无创诊断方法几乎没有。

[0005] 相关研究都表明，乙肝核心抗体(Anti-HBc)水平与慢乙肝患者的谷丙转氨酶水平(ALT)具有很好的相关性；本发明针对此问题，入组590例慢性乙肝患者分别做了肝脏穿刺病理分析及血清Anti-HBc检测，得到Anti-HBc水平与慢乙肝患者实际肝脏中炎症程度的相关性关系。

发明内容

[0006] 本发明的目的是针对上述现有技术问题，提供一种预测谷丙转氨酶小于二倍正常上限(ALT<2倍)的慢性乙型病毒性肝炎患者肝脏炎症程度的系统，本发明系统根据谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者的血清中乙肝核心抗体含量和谷草转氨酶含量，预测其肝脏的炎症程度，从而判断是否需要进行治疗；经临床验证，本发明系统对谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者肝脏炎症程度的预测准确率高。

[0007] 本发明一方面提供一种预测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者肝脏炎症程度的系统，其特征在于，所述系统包括：

[0008] 检测模块，用于检测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中乙肝核心抗体含量、谷草转氨酶含量和白蛋白含量；

[0009] Inf-index1计算模块，用于根据所述乙肝核心抗体含量、谷草转氨酶含量和白蛋白含量，计算Inf-index1；及，

[0010] 肝脏炎症程度预测模块，用于根据所述Inf-index1预测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者的肝脏炎症程度；

[0011] 其中，所述Inf-index1为炎症指数。

[0012] 其中，所述检测模块包括检测所述乙肝核心抗体含量所需的试剂。

[0013] 特别是，所述检测模块包括检测所述谷草转氨酶含量所需的试剂。

[0014] 尤其是，所述检测模块包括检测所述白蛋白含量所需的试剂。

[0015] 特别是，所述检测模块包括检测所述乙肝核心抗体含量所需的试剂盒。

[0016] 尤其是，所述检测模块包括检测所述谷草转氨酶含量所需的试剂盒。

[0017] 特别是，所述检测模块包括检测所述白蛋白含量所需的试剂盒。

[0018] 尤其是，所述检测模块包括检测所述乙肝核心抗体含量所需的仪器。

[0019] 特别是，所述检测模块包括检测所述谷草转氨酶含量所需的仪器。

[0020] 尤其是，所述检测模块包括检测所述白蛋白含量所需的仪器。

[0021] 特别是，本发明优选采用双抗原夹心法酶联免疫吸附法对谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的乙肝核心抗体含量进行检测。

[0022] 尤其是，其他现有的检测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的乙肝核心抗体含量的方法、试剂和/或试剂盒和/或仪器均适用于本发明。

[0023] 特别是，本发明优选采用酶速率法对谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的谷草转氨酶含量进行检测。

[0024] 尤其是，其他现有的检测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的谷草转氨酶含量的方法、试剂和/或试剂盒和/或仪器均适用于本发明。

[0025] 特别是，本发明优选采用溴甲酚绿法对谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的白蛋白含量进行检测。

[0026] 尤其是，其他现有的检测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的白蛋白含量的方法、试剂和/或试剂盒和/或仪器均适用于本发明。

[0027] 其中，所述Inf-index1经由以下公式计算得到：

[0028] Inf-index1＝A1×log10Anti-HBc+A2×AST-A3×Albumin-A4；

[0029] 其中，所述Anti-HBc为谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中乙肝核心抗体含量，单位为log10IU/mL。

[0030] 特别是，所述AST为谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中谷草转氨酶含量，单位为IU/L。

[0031] 尤其是，所述Albumin为谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中白蛋白含量，单位为g/L。

[0032] 其中，所述A1、A2、A3、A4为系数；A1＝1.251(±10％)；A2＝0.03(±10％)；A3＝0.061(±10％)；A4＝3.845(±10％)。

[0033] 其中，根据所述Inf-index1预测谷丙转氨酶正常或轻度升高的慢性乙型肝炎病毒感染者的肝脏炎症程度包括：

[0034] 根据谷丙转氨酶正常或轻度升高的慢性乙型肝炎病毒感染人群的肝脏炎症程度统计学数据，确定需要进行乙肝治疗的临界值；

[0035] 将所述Inf-index1与所述临界值进行比较处理；

[0036] 当比较结果为Inf-index1大于所述临界值时，预测所述谷丙转氨酶正常或轻度升高的慢性乙型肝炎病毒感染者的肝脏炎症程度达到了需要进行治疗的程度。

[0037] 特别是，所述临界值为0.21，如果所述检测对象的Inf-index1界值≥0.21时，预测该检测对象为明显肝脏炎症患者，其肝脏炎症程度达到了需要进行治疗的程度；如果所述检测对象的Inf-index1界值＜0.21时，预测该检测对象为无明显肝脏炎症患者。

[0038] 其中，所述计算模块的输入连接所述预测模块的输出。

[0039] 特别是，所述预测模块的输入连接所述计算模块的输出。

[0040] 本发明另一方面提供一种获得谷丙转氨酶正常或轻度升高的慢性乙型肝炎病毒感染者肝脏炎症指数的方法，其特征在于，包括：

[0041] 检测谷丙转氨酶正常或轻度升高的慢性乙型肝炎病毒感染者血清中乙肝核心抗体含量、谷草转氨酶含量和白蛋白含量；

[0042] 根据所述乙肝核心抗体含量、谷草转氨酶含量和白蛋白含量，计算Inf-index1；

[0043] 其中，所述Inf-index1为炎症指数。

[0044] 特别是，本发明优选采用双抗原夹心法酶联免疫吸附法对谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的乙肝核心抗体含量进行检测。

[0045] 尤其是，其他现有的检测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的乙肝核心抗体含量的方法、试剂和/或试剂盒和/或仪器均适用于本发明。

[0046] 特别是，本发明优选采用酶速率法对谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的谷草转氨酶含量进行检测。

[0047] 尤其是，其他现有的检测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的谷草转氨酶含量的方法、试剂和/或试剂盒和/或仪器均适用于本发明。

[0048] 特别是，本发明优选采用溴甲酚绿法对谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的白蛋白含量进行检测。

[0049] 尤其是，其他现有的检测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的白蛋白含量的方法、试剂和/或试剂盒和/或仪器均适用于本发明。

[0050] 其中，所述Inf-index1经由以下公式计算得到：

[0051] Inf-index1＝A1×log10Anti-HBc+A2×AST-A3×Albumin-A4；

[0052] 其中，所述Anti-HBc为谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中乙肝核心抗体含量，单位为log10IU/mL。

[0053] 特别是，所述AST为谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中谷草转氨酶含量，单位为IU/L。

[0054] 尤其是，所述Albumin为谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中白蛋白含量，单位为g/L。

[0055] 其中，所述A1、A2、A3、A4为系数；A1＝1.251(±10％)；A2＝0.03(±10％)；A3＝0.061(±10％)；A4＝3.845(±10％)。

[0056] 本发明再一方面提供一种预测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型肝炎病毒感染者肝脏炎症程度的方法，其特征在于，包括：

[0057] 检测谷丙转氨酶正常或轻度升高的慢性乙型肝炎病毒感染者血清中乙肝核心抗体含量、谷草转氨酶含量和白蛋白含量；

[0058] 根据所述乙肝核心抗体含量、谷草转氨酶含量和白蛋白含量，计算Inf-index1；

[0059] 其中，所述Inf-index1为炎症指数。

[0060] 特别是，本发明优选采用双抗原夹心法酶联免疫吸附法对谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的乙肝核心抗体含量进行检测。

[0061] 尤其是，其他现有的检测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的乙肝核心抗体含量的方法、试剂和/或试剂盒和/或仪器均适用于本发明。

[0062] 特别是，本发明优选采用酶速率法对谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的谷草转氨酶含量进行检测。

[0063] 尤其是，其他现有的检测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的谷草转氨酶含量的方法、试剂和/或试剂盒和/或仪器均适用于本发明。

[0064] 特别是，本发明优选采用溴甲酚绿法对谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的白蛋白含量进行检测。

[0065] 尤其是，其他现有的检测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中的白蛋白含量的方法、试剂和/或试剂盒和/或仪器均适用于本发明。

[0066] 其中，所述Inf-index1经由以下公式计算得到：

[0067] Inf-index1＝A1×log10Anti-HBc+A2×AST-A3×Albumin-A4；

[0068] 其中，所述Anti-HBc为谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中乙肝核心抗体含量，单位为log10IU/mL。

[0069] 特别是，所述AST为谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中谷草转氨酶含量，单位为IU/L。

[0070] 尤其是，所述Albumin为谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者血清中白蛋白含量，单位为g/L。

[0071] 其中，所述A1、A2、A3、A4为系数；A1＝1.251(±10％)；A2＝0.03(±10％)；A3＝0.061(±10％)；A4＝3.845(±10％)。

[0072] 其中，根据所述Inf-index1预测谷丙转氨酶正常或轻度升高的慢性乙型肝炎病毒感染者的肝脏炎症程度包括：

[0073] 根据谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型肝炎病毒感染人群的肝脏炎症程度统计学数据，确定需要进行乙肝治疗的临界值；

[0074] 将所述Inf-index1与所述临界值进行比较处理；

[0075] 当比较结果为Inf-index1大于所述临界值时，预测所述谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者的肝脏炎症程度达到了需要进行治疗的程度。

[0076] 特别是，所述临界值为0.21，如果所述检测对象的Inf-index1界值≥0.21时，预测该检测对象为明显肝脏炎症患者，其肝脏炎症程度达到了需要进行治疗的程度；如果所述检测对象的Inf-index1界值＜0.21时，预测该检测对象为无明显肝脏炎症患者。

[0077] 本发明的优点和有益技术效果如下：

[0078] 本发明以乙肝核心抗体含量、谷草转氨酶含量和白蛋白含量作为变量建立的用于预测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型肝炎患者的肝脏炎症程度的系统对包括ALT小于二倍正常上限(≤2ULN)的慢性乙型肝炎患者的肝脏炎症程度具有较好的诊断价值。对222例谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型肝炎患者曲线下面积分析结果显示,在ALT≤2倍正常上限患者中Inf-index1诊断明显肝脏炎症程度(HAI>4)的曲线下面积(area under the curve，AUC)面积为0.779(95％CI:0.717-0.841)；当Inf-index1≥0.21为界值诊断明显肝脏炎症程度以上时(HAI≥5)，其敏感性为62.7％，特异性为82.0％，阴性诊断率
72.5％，阳性诊断率74.4％，准确率73.2％；交叉验证显示：Inf-index1能正确诊断出
73.2％的患者。另对221例HAI≥4的受试者曲线下面积(ROC)的分析结果显示，应用Inf-index1炎症评价模型及确定的cutoff值，其诊断明显炎症程度以上(HAI≥5)的敏感性为
49.5％，特异性为86.6％，阴性诊断率66.5％，阳性诊断率76.1％，准确率70.1％；与验证队列诊断评价指标相当。

附图说明

[0079] 图1为乙肝核心抗体含量与慢乙肝患者肝脏炎症活动度相关性分析图；

[0080] 图2为建模队列组(图2a.)及验证队列组(图2b.)中肝脏炎症模型Inf-index1用于诊断ALT≤2倍正常上限的慢乙肝患者中肝脏明显炎症(HAI>4)受试者曲线下面积分析图。

具体实施方式

[0081] 下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，需要说明的是，本发明的实施例仅仅是为了阐述本发明，而并非为了限制本发明的范围。

[0082] 用于预测谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者肝脏炎症程度的系统的建立及其预测效果

[0083] 1、研究对象

[0084] (1)病例来源：2013年10月至2015年12月，来自全国24家教学医院的443例谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型病毒性肝炎患者；

[0085] (2)入组标准：年龄18-65岁；抗甲型肝炎病毒M免疫球蛋白(抗-HAV-IgM)、抗丙型肝炎病毒(抗-HCV)、抗戊型肝炎病毒M/G免疫球蛋白(抗-HEV-IgM/IgG)、抗EB病毒M球蛋白(抗-EBV-IgM)、抗巨细胞病毒M免疫球蛋白(抗-CMV-IgM)均为阴性；并除外酒精、药物、自身免疫等其他原因所致慢性肝损伤；且：

[0086] a.慢性HBV携带者诊断标准：HBsAg、HBeAg、HBV DNA定量阳性，1年内连续随访3次以上均显示血清ALT在10-40IU/L的正常范围内，AST在10-40IU/L的正常范围内；

[0087] b.非活动性HBsAg携带者诊断标准：血清HBsAg阳性、HBeAg阴性、HBV DNA定量低于检测下限，1年内连续随访3次以上，ALT均在10-40IU/L的正常范围内；

[0088] c.慢性乙型肝炎诊断标准：具有乙型肝炎病史或HBsAg阳性超过6个月，现HBsAg和(或)HBV DNA仍为阳性者，ALT持续或反复升高；

[0089] d.代偿期乙肝肝硬化诊断标准：具有乙型肝炎病史或HBsAg阳性超过6个月，现HBsAg和(或)HBV DNA仍为阳性者；影像学、生化学、血液学或内窥镜检查提示门静脉高压症(如脾功能亢进及食管胃底静脉曲张)证据，但无食管胃底静脉曲张破裂出血、腹水或肝性脑病等严重并发症。

[0090] 2、肝脏穿刺组织病理学检查

[0091] 入组病例均在彩色多普勒引导下按照标准的肝脏穿刺进行肝脏穿刺活检，采用粗针穿刺(16G)，所取肝脏组织检查标本长度在2.0cm以上，包含至少11个完整的汇管区。肝脏组织穿刺标本经固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片后，进行常规作HE染色，特殊染色(包括网状纤维染色、Masson三色染色)，免疫组化染色(HBsAg、HBAg及CK7)。然后病理标本经由三位病理医师组成的专家组采用Ishak评分标准进行盲法阅片。

[0092] 肝脏炎症及纤维判读分期参照Ishak标准，即：没有或轻度炎症(肝脏活动指数(hepatic activity index，HAI)0-4分)，中度炎症(HAI5-6分)，重度炎症(HAI≥7分)；没有或轻度纤维化(F＝0-1)，中度纤维化(F＝2)，明显纤维化(F＝3)，重度纤维化(F≥7)。

[0093] 3、实验室检测

[0094] (1)血液学及生化检查均以各单位在病人肝穿4周内的结果为准。

[0095] (2)血清乙肝表面抗原(HBSAg)的含量检测采用美国罗氏公司试剂盒(RocheHBsAg II assay)，乙型肝炎病毒DNA水平采用美国罗氏公司COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan进行分析(检测范围：2.0×101–1.7×108IU/mL)，乙型肝炎e抗原及e抗体测定采用美国Roche assays进行定性分析。

[0096] (3)Anti-HBc检测

[0097] 采用双抗原夹心法ELISA检测试剂盒(万泰生物药业股份有限公司)检测Anti-HBc；检测仪器：酶联检测仪(Bio-Rad Model 650Microplate Reader)。

[0098] 将CHB患者的血清标本按照下列步骤进行anti-HBc的定量检测。鉴于CHB患者血清anti-HBc水平通常较高，通常将血清标本以含20％牛胎血清的PBS溶液稀释成1：500、1：2500、1:12500和1：62500共4个稀释度进行定量ELISA检测。

[0099] 样品反应：取已包被的酶标板，每孔加入90μL样品稀释液，每孔再加入10μL标本或者标准品，震荡混匀后，置于37℃温箱反应30分钟。

[0100] 酶标记物反应：将酶标板用PBST洗液(20mM PB7.4,150mM NaCl,0.l％Tween20)洗涤5遍，每孔加入100μL酶标记物反应液，置于37℃温箱反应30分钟。

[0101] 显色反应：将酶标板用PBST洗液(20mM PB7.4,150mM NaCl,0.l％Tween20)洗涤5遍，每孔加入TMB显色剂(由北京万泰生物药业股份有限公司提供)各50μL，置于37℃温箱反应15分钟。

[0102] 终止反应及读值检测：待反应完后将酶标板中每孔加入50μL终止液(由北京万泰生物药业股份有限公司提供)，并于酶标仪上检测各孔的OD值。

[0103] 绘制定量标准曲线：对定量标准品的测量值及其对应浓度进行线性回归，绘制出定量标准曲线。

[0104] 计算待测样品的anti-HBc浓度：将待测血清标本测量的OD值利用标准曲线和标本稀释倍数获得anti-HBc的具体浓度。

[0105] (4)AST检测

[0106] 采用AST检测试剂盒(速率法)在全自动生化分析仪(AU-400,Olympus,日本)上测定AST。

[0107] (5)Albumin检测

[0108] 采用白蛋白测定试剂盒(溴甲酚绿法)在全自动生化分析仪(AU-400,Olympus,日本)上测定Albumin。

[0109] 4、统计学方法

[0110] 用SPSS17.0软件进行统计分析；计量资料用均数±标准差表示，采用Kruskal-Wallis and Mann-Whitney U-tests进行分析；分类资料采用Chi-squared test进行分析二元logistic回归用于确定独立影响因素。变量对炎症纤维化的诊断性能用ROC分析进行评价，表示为曲线下面积(area under the curve，AUC)，敏感性，特异性，阳性诊断率，阴性诊断率和准确率。

[0111] 5、结果分析

[0112] (1)本次共入组655例慢性乙型患者，其中转氨酶水平≤2倍正常上限的患者为443例(67.63％)；将443例谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢乙肝患者随机分为建模队列组(222例)及验证队列组(221例)；建模队列中,肝脏炎症活动度为≥5的患者为102例(45.95％)；验证队列中肝脏炎症活动度为≥5的患者为102例(46.15％)；各组患者特点描述见表1：

[0113] 表1.ALT≤2倍正常上限的患者背景资料

[0114]

[0115] (2)443例ALT≤2倍正常上限的慢性乙型肝炎患者肝脏炎症活动度评分(HAI,histological activity index)与乙肝核心抗体含量的关系，结果如图1所示；结果显示在不同转氨酶水平下，肝脏炎症活动度与Anti-HBc水平有较好的相关性，即明显肝脏炎症程度(HAI>4)患者中anti-HBc水平明显高于无或轻度肝脏炎症(HAI≤4)患者。

[0116] (3)单因素及多因素分析建模队列(222例)中ALT≤2倍正常上限患者中Anti-HBc水平与不同程度的肝脏炎症活动度(HAI0-4，HAI>4)的相关性分析，见表2。单因素分析显示，明显肝脏炎症(HAI>4)程度中体质指数、HBV DNA、anti-HBc、谷草转氨酶、谷酰转肽酶、白蛋白、凝血酶原时间、凝血酶原活动度、国际标准化比值及血小板明显高于无或轻度炎症程度(HAI≤4)患者。

[0117] 表2.单因素及多因素分析

[0118]

[0119] 进一步对建模队列中222例ALT正常或ALT≤2倍正常上限的患者进行二元Logistic回归分析，结果显示Anti-HBc(OR＝4.539,P<0.001)，谷草转氨酶(OR＝1.045,P＝0.024)，白蛋白(OR＝0.911,P＝0.033)为肝脏明显炎症程度的独立影响因素。

[0120] 根据慢性乙型肝炎病毒感染者血清中乙肝核心抗体的含量、谷草转氨酶的含量及白蛋白的含量为指标构建了肝脏炎症模型Inf-index1；其公式为：

[0121] Inf-index1＝1.251×log10Anti-HBc+0.03×AST-0.061×Albumin-3.845[0122] (3)建模队列中乙肝核心抗体(Anti-HBc)联合谷草转氨酶(AST)及白蛋白(Albumin)用于区分HAI<4,HAI≥4的受试者曲线下面积(ROC)的分析，见图2。受试者曲线下面积分析结果显示,在ALT≤2倍正常上限患者中Inf-index1诊断明显肝脏炎症程度(HAI>4)的曲线下面积(area under the curve，AUC)面积为0.779(95％CI:0.717-0.841)；当Inf-index1≥0.21为界值诊断明显肝脏炎症程度以上时(HAI≥5)，其敏感性为62.7％，特异性为82.0％，阴性诊断率72.5％，阳性诊断率74.4％，准确率73.2％(图2a)；交叉验证显示：Inf-index1能正确诊断出73.2％的患者，即当以谷丙转氨酶小于二倍正常上限的慢性乙型肝炎患者为检测对象时，根据上述结果，得到检测结果判定标准如下：如果所述检测对象的Inf-index1界值≥0.21时，该检测对象为明显肝脏炎症患者，如果所述检测对象的Inf-index1界值＜0.21时，该检测对象为无明显肝脏炎症患者。

[0123] 6、预测效果

[0124] 采用上述步骤建立的系统对验证队列中乙肝核心抗体(Anti-HBc)联合谷草转氨酶(AST)及白蛋白(Albumin)用于区分HAI<4,HAI≥4的受试者曲线下面积(ROC)的分析，见图2b。由验证队列ROC分析可知，应用建模队列中Inf-index1炎症评价模型及确定的cutoff值，其诊断明显炎症程度以上(HAI≥5)的敏感性为49.5％，特异性为86.6％，阴性诊断率66.5％，阳性诊断率76.1％，准确率70.1％(图2b)；与验证队列诊断评价指标相当。根据上述结果，得到检测结果判定标准如下：如果所述检测对象的Inf-index1界值≥0.21时，该检测对象为明显肝脏炎症患者，如果所述检测对象的Inf-index1界值＜0.21时，该检测对象为无明显肝脏炎症患者；上述结果表明无创模型Inf-index1对包括ALT小于二倍正常上限(≤2ULN)的慢性乙型肝炎患者的肝脏炎症程度具有较好的诊断价值。