邻苯二甲酸二异辛酯在防治辣椒根腐病及青枯病上的应用转让专利
申请号 : CN201610774905.3
文献号 : CN106342805B
文献日 : 2018-08-14
发明人 : 艾希珍 , 段曦 , 毕焕改 , 吴帼秀
申请人 : 山东农业大学
摘要 :
本发明公开了邻苯二甲酸二异辛酯在防治辣椒根腐病及青枯病上的应用。试验证明0.125~0.2ml•L‑1邻苯二甲酸二异辛酯化合物制剂对腐皮镰孢菌（Fusarium solani）的抑制率达到17%~24.9%，对说明化合物有一定的抗辣椒根腐病腐皮镰孢菌活性。本发明化合物结构简单，人工合成容易实现，化合物的活性好，对防治腐皮镰孢菌引起的辣椒根腐病和假单胞杆菌（Ralstonia solanacearum）引起的青枯病有显著的效果，对辣椒植株没有伤害，可用于辣椒的生产中。
权利要求 :
1.邻苯二甲酸二异辛酯在防治辣椒根腐病上的应用。
2.根据权利要求1所述的邻苯二甲酸二异辛酯在防治辣椒根腐病上的应用，其特征在于：所述邻苯二甲酸二异辛酯使用时的最佳浓度为0.125 0.2ml•L-1。
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3.邻苯二甲酸二异辛酯在防治辣椒青枯病上的应用。
4.根据权利要求3所述的邻苯二甲酸二异辛酯在防治辣椒青枯病上的应用，其特征在于：所述邻苯二甲酸二异辛酯使用时的最佳浓度为0.125 0.2ml•L-1。
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说明书 :
邻苯二甲酸二异辛酯在防治辣椒根腐病及青枯病上的应用
技术领域
[0001] 本发明涉及植物化学及应用技术领域，具体为一种邻苯二甲酸二异辛酯在防治辣椒根腐病上的应用。
背景技术
[0002] 腐皮镰孢菌（Fusarium solani）是辣椒根腐病的病原体，属于瘤座孢科、镰孢属。该病菌在土壤里可长期存活达10年以上，病菌以厚垣孢子、菌丝体或菌核随病残体在土壤
中越冬，翌年初越冬病菌借助雨水等传播，从根茎部、根部伤口侵入，在侵染由病部产生的
分生孢子借助雨水传播蔓延。在高温高湿气候条件下容易发生，尤其连续降雨数日后病害
症状明显增多。即连作栽培、排水不良的地块发病严重。在目前的农业生产中，嫁接防治辣
椒根腐病应用最为有效，但其人工成本较高操作复杂，因此迫切需要开发有效制剂。
中越冬，翌年初越冬病菌借助雨水等传播，从根茎部、根部伤口侵入，在侵染由病部产生的
分生孢子借助雨水传播蔓延。在高温高湿气候条件下容易发生，尤其连续降雨数日后病害
症状明显增多。即连作栽培、排水不良的地块发病严重。在目前的农业生产中，嫁接防治辣
椒根腐病应用最为有效，但其人工成本较高操作复杂，因此迫切需要开发有效制剂。
[0003] 辣椒青枯病是由假单胞杆菌（Ralstonia solanacearum）引起的一种细菌性土传病害（Yabuuchi 等，1995），是常见的辣椒根部病害，具有毁灭性的破坏性。该病原菌从寄主植物的根部，入侵木质部导管，通过维管束系统迅速扩张到植物的地上部分，病菌的大量繁
殖引起导管功能丧失，进而引发植物萎蔫，导致植物死亡（Hayward，1994）。病原菌随病残体在土壤中越冬，第二年通过灌溉水、地下害虫、雨水、操作工具等途径传播。调查表明，棚内高温、高湿以及土壤连作带菌是辣椒青枯病发生的首要条件。特别是初夏大雨过后骤晴，钾
肥不足，排水又不及时，这些情况都利于病害的流行（卢金华，1998）。棚内土壤温度达到20~
25 ℃，气温为30 35 ℃，空气相对湿度在95% 100% 时，是辣椒青枯病最适发生及蔓延的。
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殖引起导管功能丧失，进而引发植物萎蔫，导致植物死亡（Hayward，1994）。病原菌随病残体在土壤中越冬，第二年通过灌溉水、地下害虫、雨水、操作工具等途径传播。调查表明，棚内高温、高湿以及土壤连作带菌是辣椒青枯病发生的首要条件。特别是初夏大雨过后骤晴，钾
肥不足，排水又不及时，这些情况都利于病害的流行（卢金华，1998）。棚内土壤温度达到20~
25 ℃，气温为30 35 ℃，空气相对湿度在95% 100% 时，是辣椒青枯病最适发生及蔓延的。
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发明内容
[0004] 本发明针对以上不足之处，提供了一种邻苯二甲酸二异辛酯应用防治辣椒根腐病，试验证明0.125 0.2mlL-1邻苯二甲酸二异辛酯化合物制剂对腐皮镰孢菌（Fusarium
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solani）的抑制率达到17% 24.9%，为辣椒根腐病的防治提供了一种新的思路。
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solani）的抑制率达到17% 24.9%，为辣椒根腐病的防治提供了一种新的思路。
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[0005] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：邻苯二甲酸二异辛酯在防治辣椒根腐病上的应用。
[0006] 进一步得而，所述邻苯二甲酸二异辛酯使用时的最佳浓度为0.125 0.2mlL-1。~
[0007] 所述邻苯二甲酸二异辛酯化合物是从辣椒根系分泌物中分离得到，其分子式为C24H38O4，其结构式如式（Ⅰ）所示：
[0008] ，式（Ⅰ）。本发明植物邻苯二甲酸二异辛酯化合物是首次从枣庄农业科技示范园区的抗病辣椒
砧木和嫁接辣椒根系分泌物中被分离出来的，通过气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术确定了
为邻苯二甲酸二异辛酯化合物，并表征了其具体结构。试验证明0.125 0.2mlL-1邻苯二甲酸
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二异辛酯化合物制剂对腐皮镰孢菌（Fusarium solani）的抑制率达到17% 24.9%，对假单胞
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菌的抑菌率达到29%-49%，说明化合物有一定的抗辣椒根腐病腐皮镰孢菌和假单胞杆菌的
活性。本发明化合物结构简单，人工合成容易实现，化合物的活性好，对防治腐皮镰孢菌引
起的辣椒根腐病和假单胞杆菌（Ralstonia solanacearum）引起的青枯病有显著的效果，对
辣椒植株没有伤害，可用于辣椒的生产中。
砧木和嫁接辣椒根系分泌物中被分离出来的，通过气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术确定了
为邻苯二甲酸二异辛酯化合物，并表征了其具体结构。试验证明0.125 0.2mlL-1邻苯二甲酸
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二异辛酯化合物制剂对腐皮镰孢菌（Fusarium solani）的抑制率达到17% 24.9%，对假单胞
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菌的抑菌率达到29%-49%，说明化合物有一定的抗辣椒根腐病腐皮镰孢菌和假单胞杆菌的
活性。本发明化合物结构简单，人工合成容易实现，化合物的活性好，对防治腐皮镰孢菌引
起的辣椒根腐病和假单胞杆菌（Ralstonia solanacearum）引起的青枯病有显著的效果，对
辣椒植株没有伤害，可用于辣椒的生产中。
附图说明
[0009] 图1所示是不同浓度邻苯二甲酸二异辛酯对根腐病病原菌的抑制作用；
[0010] 图2所示是不同浓度邻苯二甲酸二异辛酯对根腐病和青枯病病原菌的抑制作用；
[0011] 图3所示是使用邻苯二甲酸二异辛酯分别混合镰孢菌菌液和假单胞杆菌菌液处理辣椒苗后，辣椒苗的状态。
具体实施方式
[0012] 下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细描述：
[0013] 一、辣椒根系分泌物的组分分析
[0014] 供试砧木品种为本实验室近年来筛选出的抗性较好的辣椒砧木品种‘卫士’（WS，日本），接穗为‘新丰2号’（XF）辣椒（薄皮类型，安徽省萧县新丰辣椒研究所）。根腐病病原菌为腐皮镰孢菌（Fusarium solani）从山东枣庄农业科技示范园区的辣椒根腐病发病植株中
分离获得，青枯病病原菌为假单胞杆菌（Ralstonia solanacearum）购于广州微生物菌种保
藏中心。邻苯二甲酸二异辛酯购于阿拉丁（Aladdin）公司。
分离获得，青枯病病原菌为假单胞杆菌（Ralstonia solanacearum）购于广州微生物菌种保
藏中心。邻苯二甲酸二异辛酯购于阿拉丁（Aladdin）公司。
[0015] 对砧木、嫁接和自根辣椒的根系分泌物进行分析，列于表1。结果表明，从砧木WS根系分泌物中分离出12种物质，主要包括烃类7种，芳香烃类3种，酯类1种、醇类1种，酯类1种和杂环化合物1种。嫁接后烃类、酯类和醇类物质增加，从嫁接XF/WS根系分泌物中分离出21
种物质，其中烃类12种，芳香烃类3种，酯类2种、醇类2种，酯类1种和杂环化合物1种。而从自根辣椒根系分泌物中只分离出9种物质，未见醇类、酯类和杂环化合物。其中砧木和嫁接辣
椒根系分泌物中独有或者相对含量较高的物质为：3-甲基-3-乙基庚烷、5-丁基壬烷、十四
烷，十六烷、2-甲基十二烷、2,6,10,14,18-五甲基十九烷、邻二甲苯、二亚苯基甲烷、二十七烷醇、二乙基二硫醚、邻苯二甲酸二异辛酯和二苯并呋喃，推测嫁接辣椒根系分泌物对病原
菌生长的抑制作用与上述物质有关。
种物质，其中烃类12种，芳香烃类3种，酯类2种、醇类2种，酯类1种和杂环化合物1种。而从自根辣椒根系分泌物中只分离出9种物质，未见醇类、酯类和杂环化合物。其中砧木和嫁接辣
椒根系分泌物中独有或者相对含量较高的物质为：3-甲基-3-乙基庚烷、5-丁基壬烷、十四
烷，十六烷、2-甲基十二烷、2,6,10,14,18-五甲基十九烷、邻二甲苯、二亚苯基甲烷、二十七烷醇、二乙基二硫醚、邻苯二甲酸二异辛酯和二苯并呋喃，推测嫁接辣椒根系分泌物对病原
菌生长的抑制作用与上述物质有关。
[0016] 表1辣椒根系分泌物的组分分析
[0017]
[0018] 二、化感物质的生物功能鉴定与验证
[0019] 依据砧木、嫁接和自根辣椒的辣椒根系分泌物组分分析结果，推测邻苯二甲酸二异辛酯在增强嫁接辣椒抗病性中发挥重要作用，因此，对该物质的生物功能进行了鉴定和
验证。
验证。
[0020] 1、邻苯二甲酸二异辛酯对根腐病（F. solani）和青枯病菌（R. solanacearum）的抑菌浓度筛选
[0021] 用不同浓度的邻苯二甲酸二异辛酯溶液培养根腐病和青枯病病原菌，去离子水培养的为对照，于3 d后分析根腐病菌落大小和24 h后分析青枯病菌落数量。
[0022] 病原菌抑菌率 的计算方法：
[0023] 真菌抑菌率（%）=（对照皿菌落直径-处理皿菌落直径）/对照皿菌落直径×100。
[0024] 细菌抑菌率（%）=（对照皿菌落数量-处理皿菌落数量）/对照皿菌落数量×100。
[0025] 结果表明，邻苯二甲酸二异辛酯溶液的抑菌率以1.0 ml · L-1的最高，真菌抑菌率为35%，细菌抑菌率为78.75%，0.125、0.15、0.2 ml · L-1和0.5 ml · L-1的其次，真菌
抑菌率分别为，17%、18%、25%、26.5%，细菌抑菌率分别为：29%、33%、49%、65.5%，0.05 ml · L-1的抑菌效果较差，而0.02 ml · L-1的无抑菌效果（图1和图2）。
抑菌率分别为，17%、18%、25%、26.5%，细菌抑菌率分别为：29%、33%、49%、65.5%，0.05 ml · L-1的抑菌效果较差，而0.02 ml · L-1的无抑菌效果（图1和图2）。
[0026] 用相同浓度的邻苯二甲酸二异辛酯溶液配制孢子浓度为5×106 CFU· ml-1的镰孢菌菌液和浓度约为3×108 CFU · ml-1（A600=0.2）的假单胞菌菌液。以‘新丰2号’（XF）自根苗为试材，按照王卉和任欣正（1993）的方法接种，5 d后调查发病率。结果表明，浓度为
0.125 1.0 ml · L-1的邻苯二甲酸二异辛酯处理的辣椒均未发病，但浓度0.5 1.0 ml ·
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L-1的辣椒叶片有失绿现象（图3）。据此认为，邻苯二甲酸二异辛酯的适宜浓度为0.125%-0.2 ml · L-1。
0.125 1.0 ml · L-1的邻苯二甲酸二异辛酯处理的辣椒均未发病，但浓度0.5 1.0 ml ·
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L-1的辣椒叶片有失绿现象（图3）。据此认为，邻苯二甲酸二异辛酯的适宜浓度为0.125%-0.2 ml · L-1。
[0027] 2、邻苯二甲酸二异辛酯对辣椒土传病害发病情况和产量的影响
[0028] 辣椒定植后，分别用0.125 ml · L-1、0.15 ml · L-1、0.2 ml · L-1的邻苯二甲酸二异辛酯灌根， 10 d灌1次，一次20 ml，生育期内共灌3次，以灌清水为对照（CK）。拉秧前调查各处理的发病率。结果表明，邻苯二甲酸二异辛酯处理的辣椒发病率为0，而对照辣椒
的根腐病发病率为34.9%，未见青枯病发病植株（表2）。
的根腐病发病率为34.9%，未见青枯病发病植株（表2）。
[0029] 表2邻苯二甲酸二异辛酯对辣椒根腐病和青枯病发病率的影响 处理 CK 0.125 ml · L-1邻苯二甲酸二异辛酯 0.15 ml · L-1邻苯二甲酸二异辛酯 0.2 ml · L-1邻苯二甲酸二异辛酯根腐病发病率(%) 34.9±0.15b 0.00±0.00a 0.00±0.00a 0.00±0.00a
青枯病发病率(%) 0.00±0.00a 0.00±0.00a 0.00±0.00a 0.00±0.00a
青枯病发病率(%) 0.00±0.00a 0.00±0.00a 0.00±0.00a 0.00±0.00a
[0030] 从表3看出，用邻苯二甲酸二异辛酯灌根处理的辣椒单果重异不显著，但其单株果数显著多于CK，因此，0.125 ml · L-1、0.15 ml · L-1、0.2 ml · L-1的邻苯二甲酸二异
辛酯处理产量分别比CK高19%、25%、31.7%。
辛酯处理产量分别比CK高19%、25%、31.7%。
[0031] 表3 邻苯二甲酸二异辛酯对辣椒产量的影响
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