一种芒果皮提取物及其制备方法和用途

摘要

本发明属于中药和药物化学领域，具体涉及一种芒果皮提取物及其制备方法和用途。所述芒果皮提取物的总黄酮的重量百分比含量为20～32％，且通过以下方法制备而成：芒果皮原料加乙醇水溶液加热回流提取，提取液过滤、合并、浓缩、过滤、然后通过大孔树脂，先用水洗涤树脂，水洗脱液弃去；再用乙醇水溶液洗脱，收集含有乙醇的洗脱液，减压浓缩，干燥，粉碎，即得。本发明的芒果皮提取物具有抗氧化、扩张血管、降低血清胆固醇、增加冠脉流量、抗心率失常等作用，可用于制备治疗心脑血管疾病的药物。

权利要求

1.一种芒果皮提取物，其特征在于，所述芒果皮提取物的总黄酮的重量百分比含量为

24 30%，且通过以下方法制备而成：芒果皮原料用4 6倍重量的体积浓度45 55%乙醇水溶液~ ~ ~加热回流提取2次，每次提取时间为0.5小时，提取液过滤，合并，浓缩至0.3g原料/mL，过滤后通过大孔树脂柱，芒果皮与大孔树脂的重量比为1:1，上柱流速1BV/h，树脂柱径高比为1:

4；用水洗涤树脂4BV，流速为3BV/h，水洗脱液弃去；然后用体积浓度50 60%乙醇水溶液洗~脱，流速为3BV/h，收集含有乙醇的洗脱液，减压浓缩或喷雾干燥，粉碎，即得所述芒果皮提取物；所述大孔树脂为AB-8大孔树脂或D101大孔树脂。

2.一种芒果皮提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：芒果皮原料用4 6倍重~量的体积浓度45 55%乙醇水溶液加热回流提取2次，每次提取时间为0.5小时，提取液过滤，~合并，浓缩至0.3g原料/mL，过滤后通过大孔树脂柱，芒果皮与大孔树脂的重量比为1:1，上柱流速1BV/h，树脂柱径高比为1:4；用水洗涤树脂4BV，流速为3BV/h，水洗脱液弃去；然后用体积浓度50 60%乙醇水溶液洗脱，流速为3BV/h，收集含有乙醇的洗脱液，减压浓缩或喷雾~干燥，粉碎，即得所述芒果皮提取物；所述大孔树脂为AB-8大孔树脂或D101大孔树脂。

3.一种药物组合物，其含有权利要求1所述芒果皮提取物或者权利要求2所述制备方法制备的芒果皮提取物，以及一种或多种药学上可以接受的辅料。

4.权利要求1所述芒果皮提取物或者权利要求2所述制备方法制备的芒果皮提取物或者权利要求3所述的药物组合物在制备清除自由基、抗氧化、扩张血管、降低血清胆固醇、增加冠脉流量、改善心肌缺血缺氧、改善缺血脑组织损伤、延缓血栓形成或降低血黏度的药物中的用途。

5.权利要求1所述芒果皮提取物或者权利要求2所述制备方法制备的芒果皮提取物或者权利要求3所述的药物组合物在制备通过清除自由基、抗氧化、扩张血管、降低血清胆固醇、增加冠脉流量、改善心肌缺血缺氧、改善缺血脑组织损伤、延缓血栓形成或降低血黏度从而治疗心脑血管疾病的药物中的用途。

说明书

一种芒果皮提取物及其制备方法和用途

技术领域

[0001] 本发明属于中药和药物化学领域，具体涉及一种芒果皮提取物及其制备方法和在制备治疗心脑血管疾病的药物中的用途。

背景技术

[0002] 心脑血管系统疾病是人类最为常见的一类疾病，已成为当今世界人口的第一大死因。在我国，随着人口老龄化加速，人民生活水平提高，生活节奏加快，饮食习惯向高热、高脂化发展，人群中高血压、高血脂、心力衰竭、脑卒中等心血管系统疾病己成为危害人类健康及生命的严重疾病之一。心血管疾病的高发生率与死亡率，引导了药物研发与生产的方向。在世界药品市场中，该类药物的研发、生产和市场状况日益受到制药企业、医药商业企业、投资机构和广大人民的关注。

[0003] 芒果为漆树科植物芒果(Mangifera indica)的果实，含有丰富的营养物质。近年来的研究表明，芒果中因含有类胡萝卜素，黄酮及其衍生物以及酚酸类等活性物质而具有抗氧化，消炎，抑菌，免疫调节，抑制肿瘤以及降血糖等活性，受到人们的广泛关注。

[0004] 专利文献CN201310230247.8涉及芒果粗提物在制备防治心血管疾病的药物和食品用途。该粗提物的主要成分为五倍没食子单宁及芒果苷。所述心血管疾病是因血管内皮细胞损伤所致。

发明内容

[0005] 针对现有技术的不足，本发明提供一种芒果皮提取物及其制备方法和在制备治疗心脑血管疾病的药物中的用途。

[0006] 由此，本发明的第一个目的是提供一种芒果皮提取物，其总黄酮的重量百分比含量为20～32％，且通过以下方法制备而成：芒果皮原料用3～10倍重量的体积浓度45～55％乙醇水溶液加热回流提取1～3次，每次提取时间为0.4～1小时，提取液过滤，合并，浓缩至0.25～0.5g原料/mL，过滤后通过大孔树脂柱，芒果皮与大孔树脂的重量比为1:0.8～1.2，上柱流速0.8～1.2BV/h，树脂柱径高比为1:3～5；用水洗涤树脂3～5BV，流速为2～4BV/h，水洗脱液弃去；然后用体积浓度45～70％乙醇水溶液洗脱，流速为2～4BV/h，收集含有乙醇的洗脱液，减压浓缩或喷雾干燥，粉碎，即得所述芒果皮提取物。

[0007] 优选地，所述芒果皮提取物的总黄酮的重量百分比含量为24～30％，且通过以下方法制备而成：芒果皮原料用4～6倍重量的体积浓度45～55％乙醇水溶液加热回流提取2次，每次提取时间为0.5小时，提取液过滤，合并，浓缩至0.3g原料/mL，过滤后通过大孔树脂柱，芒果皮与大孔树脂的重量比为1:1，上柱流速1BV/h，树脂柱径高比为1:4；用水洗涤树脂4BV，流速为3BV/h，水洗脱液弃去；然后用体积浓度50～60％乙醇水溶液洗脱，流速为3BV/h，收集含有乙醇的洗脱液，减压浓缩或喷雾干燥，粉碎，即得所述芒果皮提取物。

[0008] 优选地，所述大孔树脂为AB-8大孔树脂或D101大孔树脂。

[0009] 本发明的第二个目的是提供一种芒果皮提取物的制备方法，其包括以下步骤：芒果皮原料用3～10倍重量的体积浓度45～55％乙醇水溶液加热回流提取1～3次，每次提取时间为0.4～1小时，提取液过滤，合并，浓缩至0.25～0.5g原料/mL，过滤后通过大孔树脂柱，芒果皮与大孔树脂的重量比为1:0.8～1.2，上柱流速0.8～1.2BV/h，树脂柱径高比为1:3～5；用水洗涤树脂3～5BV，流速为2～4BV/h，水洗脱液弃去；然后用体积浓度45～70％乙醇水溶液洗脱，流速为2～4BV/h，收集含有乙醇的洗脱液，减压浓缩或喷雾干燥，粉碎，即得芒果皮提取物。

[0010] 优选地，所述芒果皮提取物的制备方法，其包括以下步骤：芒果皮原料用4～6倍重量的体积浓度45～55％乙醇水溶液加热回流提取2次，每次提取时间为0.5小时，提取液过滤，合并，浓缩至0.3g原料/mL，过滤后通过大孔树脂柱，芒果皮与大孔树脂的重量比为1:1，上柱流速1BV/h，树脂柱径高比为1:4；用水洗涤树脂4BV，流速为3BV/h，水洗脱液弃去；然后用体积浓度50～60％乙醇水溶液洗脱，流速为3BV/h，收集含有乙醇的洗脱液，减压浓缩或喷雾干燥，粉碎，即得所述芒果皮提取物。

[0011] 优选地，所述大孔树脂为AB-8大孔树脂或D101大孔树脂。

[0012] 一种药物组合物，其含有上述的芒果皮提取物或者上述方法制备的芒果皮提取物，以及一种或多种药学上可以接受的辅料。

[0013] 此外，本发明提供上述的芒果皮提取物或者上述方法制备的芒果皮提取物或者上述的药物组合物在制备清除自由基、抗氧化、扩张血管、降低血清胆固醇、增加冠脉流量、抗心率失常、改善心肌缺血缺氧、改善缺血脑组织损伤、延缓血栓形成或降低血黏度的药物中的用途。

[0014] 优选地，本发明提供上述的芒果皮提取物或者上述方法制备的芒果皮提取物或者上述的药物组合物在制备通过清除自由基、抗氧化、扩张血管、降低血清胆固醇、增加冠脉流量、抗心率失常、改善心肌缺血缺氧、改善缺血脑组织损伤、延缓血栓形成或降低血黏度从而治疗心脑血管疾病的药物中的用途。

附图说明

[0015] 图1为本发明芒果皮提取物对小鼠血清中MDA的影响

[0016] 图2为本发明芒果皮提取物对小鼠血清中NO的影响

[0017] 图3为本发明芒果皮提取物对小鼠血清中SOD的影响

[0018] 图4为本发明芒果皮提取物对豚鼠离体心脏冠脉流量影响

[0019] 图5为给予垂体后叶素前后，本发明芒果皮提取物影响T波高度的变化[0020] 图6为本发明芒果皮提取物对小鼠常压缺氧存活时间影响

[0021] 图7为本发明芒果皮提取物对大鼠实验性脑梗死的保护作用

[0022] 图8为本发明芒果皮提取物对大鼠体内血栓形成时间的影响

[0023] 图9为本发明芒果皮提取物对大鼠全血黏度的影响

[0024] 图10为本发明芒果皮提取物对麻醉犬ICBF的影响

[0025] 图11为本发明芒果皮提取物对麻醉犬ICBR的影响

具体实施方式

[0026] 下面参照实施例进一步详细阐述本发明，但是本领域技术人员应当理解，本发明并不限于这些实施例以及使用的制备方法。而且，本领域技术人员根据本发明的描述可以对本发明进行等同替换、组合、改良或修饰，但这些都将包括在本发明的范围内。

[0027] 制备实施例1：

[0028] 芒果皮原料用4倍重量的体积浓度50％乙醇水溶液加热回流提取2次，每次提取时间为0.5小时，提取液过滤，合并，浓缩至0.3g原料/mL，过滤后通过AB-8大孔树脂柱，芒果皮与AB-8大孔树脂的重量比为1:1，上柱流速1BV/h，树脂柱径高比为1:4；用水洗涤树脂4BV，流速为3BV/h，水洗脱液弃去；然后用体积浓度50％乙醇水溶液洗脱，流速为3BV/h，收集含有乙醇的洗脱液，减压浓缩或喷雾干燥，粉碎，即得芒果皮提取物。该芒果皮提取物中总黄酮的含量为24％。

[0029] 制备实施例2：

[0030] 芒果皮原料用10倍重量的体积浓度55％乙醇水溶液加热回流提取3次，每次提取时间为0.5小时，提取液过滤，合并，浓缩至0.5g原料/mL，过滤后通过D101大孔树脂柱，芒果皮与大孔树脂的重量比为1:1，上柱流速1BV/h，树脂柱径高比为1:4；用水洗涤树脂5BV，流速为4BV/h，水洗脱液弃去；然后用体积浓度70％乙醇水溶液洗脱，流速为4BV/h，收集含有乙醇的洗脱液，减压浓缩干燥，即得芒果皮提取物。该芒果皮提取物中总黄酮的含量为30％。

[0031] 实验实施例1：抗氧化作用

[0032] 取C57BL小鼠40只，雌雄各半，体重20±2g，随机分为4组：空白组、银杏叶提取物对照组、制备实施例1芒果皮提取物低剂量组和高剂量组，每天给药1次，连续给药1周后，腹主静脉取血1mL，离心分离出血清，测定MDA、NO及SOD含量。结果见图1、图2和图3。图1为本发明芒果皮提取物对小鼠血清中MDA的影响(X±s)；注：与空白组比较，*P<0.05,**P<0.01。图2为本发明芒果皮提取物对小鼠血清中NO的影响(X±s)；注：与空白组比较，*P<0.05,**P<0.01。图3为本发明芒果皮提取物对小鼠血清中SOD的影响(X±s)；注：与空白组比较，*P<
0.05,**P<0.01。

[0033] 试验证明，本发明芒果皮提取物能使小鼠血清中SOD含量升高，具有清除氧自由基和抗氧化的能力。

[0034] 实验实施例2：豚鼠离体心脏冠脉流量试验

[0035] 取豚鼠20只，每组5只，随机分为4组；空白组、银杏叶提取物对照组、制备实施例1芒果皮提取物低剂量和高剂量组。击头致昏，迅速取心脏，在4℃任洛氏液中清洗，排除积血。将主动脉套入灌流装置的套管上，并结扎固定，以纯氧饱和的任洛氏液(Ringer-Locke's)恒速灌流。灌流平衡10min后，连续测定3min的每分冠脉流量，以其平均值作为药前值。加药后，记录3min内每分冠脉流量，取极值，作为药后值，计算前后变化率，见图4。图4为本发明芒果皮提取物对豚鼠离体心脏冠脉流量影响(X±s)；注：与空白组比较，**P<0.01。

[0036] 试验证明，本发明芒果皮提取物均可增加豚鼠离体心脏的冠脉流量。

[0037] 实验实施例3：垂体后叶素所致大鼠心肌缺血试验

[0038] 取大鼠40只，雌雄各半，体重180-220g，随机分成4组：空白组、银杏叶提取物对照组、制备实施例1芒果皮提取物低剂量和高剂量组。分别静脉注射给药，给药20min后，乌拉坦5mL/kg.ip麻醉，固定于鼠台上，记录正常II导连心电图后，舌静脉注射垂体后叶素0.8单位/kg，5s注完。分别记录0s,30s,60s,3min的II导连心电图，比较给予垂体后叶素前后，T波高度的变化，进行组间t检验。结果见图5。图5为给予垂体后叶素前后，本发明芒果皮提取物影响T波高度的变化(X±s)；注：与空白组比较，*P<0.05,**P<0.01。

[0039] 试验证明，本发明芒果皮提取物可改善心肌缺血。

[0040] 实验实施例4：小鼠常压缺氧试验

[0041] 取小鼠40只，雌雄各半，体重20±2g，随机分成4组：空白组、银杏叶提取物对照组、制备实施例1芒果皮提取物低剂量和高剂量组。尾静脉注射给药20min后分别放入盛有10g碱石灰的容量为250mL磨口瓶内，加盖密封。观察其存活时间，以呼吸停止为死亡特征。结果见图6。图6为本发明芒果皮提取物对小鼠常压缺氧存活时间影响(X±s)；注：与空白组比较，*P<0.05,**P<0.01。

[0042] 试验证明，本发明芒果皮提取物可延长常压缺氧存活时间。

[0043] 实验实施例5：对实验性大鼠脑梗死损伤的保护

[0044] 取大鼠(雄性，体重300-350g)用戊巴比妥钠40mg/kg ip麻醉，然后在右眼和右耳之间的中点作l.5cm长的切口，分开颞肌，暴露颧突和颞骨，在颧突之头端1～2mm处，用牙科钻开一直径为2mm的小孔，将软脑膜开一小孔，暴露中脑动脉起始部位，用刮刀将脑组织轻轻移开，用微小双极电凝器灼断大脑中动脉，然后将肌肉和皮肤分层缝合。取手术成功的32只大鼠，分成4组：空白组、脑血栓片对照组、制备实施例1芒果皮提取物低剂量组和高剂量组。连续用药15d后，将动物处死，取其大脑，以均等间距横切5个断面，用1％四氮哇蓝(TTG)磷酸缓冲液在37℃染色10min后，分离梗死区与非梗死区，称重，用重量法计算梗死面积。结果见图7。图7为本发明芒果皮提取物对大鼠实验性脑梗死的保护作用(X±s)；注：与空白组比较，*P<0.01。

[0045] 试验证明，本发明芒果皮提取物对大鼠脑梗死模型的损伤有明显的保护作用，使病灶面积显著缩小。

[0046] 实验实施例6：对大鼠体内血栓形成的影响

[0047] 取大鼠40只，雌雄各半，随机分成4组：空白组、脑血栓片对照组、制备实施例1芒果皮提取物低剂量组和高剂量组，各组连续灌胃7d，于末次给药后1h进行体内血栓形成实验(戊巴比妥钠40mg/kg ip麻醉大鼠，切开颈部皮肤，分离右侧颈动脉，在动脉近心端下放置刺激电极，远心端下放连接仪器的温度探头，开通体内血栓形成测定仪，通过刺激电极给予1.5mV直流电刺激7min,以损伤动脉内皮细胞，随着动脉管腔内血栓逐渐形成，血流逐渐被阻断，温度突降，仪器报警，记录堵塞形成时间)最后将各组动物颈总动脉采血，肝素抗凝，测定血液黏度参数。结果见图8和图9。图8为本发明芒果皮提取物对大鼠体内血栓形成时间的影响(X±s)；注：与空白组比较，*P<0.01。图9为本发明芒果皮提取物对大鼠全血黏度的影响(X±s)；注：与空白组比较，*P<0.01。

[0048] 试验说明，本发明芒果皮提取物能够明显延长大鼠体内血栓形成时间，同时各给药组动物的全血黏度均有不同程度的降低，说明芒果皮提取物具有较好的抗血栓和改善血液流变学的作用。

[0049] 实验实施例7：对麻醉犬脑血流量及脑血管阻力的影响

[0050] 取犬20只，每组5只，分成4组：空白组、脑血栓片对照组、制备实施例1芒果皮提取物低剂量组和高剂量组。用戊巴比妥钠30mg/kg iv麻醉，气管插管，分离股动脉，插心导管至腹主动脉，与压力换能器相连，再接于多道生理记录仪记录血压波形，并读取主动脉收缩压(SAP)、舒张压(DAP)、平均动脉压(MAP)和心率(HR)，同时，记录标准II导程心电图；分离颈总动脉和颈外动脉，结扎颈外动脉，将内径3mm的电磁流量计探头放置在颈总动脉上，以电磁流量计测定颈内动脉血流量(ICBF)。颈内动脉血管阻力(ICVR)二MAP/ICBF，手术后稳定20-30min，待上述各项稳定后测正常值，然后进行十二指肠给药。给药后1h和2h分别记录颈内动脉血流量及血管阻力。结果见图10和图11。图10为本发明芒果皮提取物对麻醉犬ICBF的影响(X±s)；注：与空白组比较，*P<0.05,**P<0.01。图11为本发明芒果皮提取物对麻醉犬ICBR的影响(X±s)；注：与空白组比较，*P<0.05,**P<0.01。

[0051] 试验说明，与空白组相比，芒果皮提取物组在各用药时间点，对犬的血压、心电、心律均无明改变，但有增加其ICBF和降低ICVR的作用。

[0052] 最后有必要在此说明的是：以上实施例只用于对本发明的技术方案作进一步详细地说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，本领域的技术人员根据本发明的上述内容作出的一些非本质的改进和调整均属于本发明的保护范围。