利用维生素B2提高乙偶姻产量的方法

摘要

本发明公开了一种利用维生素B2提高乙偶姻产量的方法，包括如下步骤：将保藏编号为CGMCC NO.7096的多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)CJX‑518培养获得的种子按生物量为0.1～0.4的接种密度接入发酵培养基中，在32～42℃、搅拌转速100～300rpm条件下发酵，在发酵0～24h时加入1～10g/L维生素B2，继续发酵，得到含乙偶姻的发酵液；CJX‑518在添加维生素B2的发酵培养基中培养，能提高乙偶姻的产量。

权利要求

1.一种利用维生素B2提高乙偶姻产量的方法，其特征是包括如下步骤：将保藏编号为CGMCC NO.7096的多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa) CJX-518培养获得的种子按生物量为0.1 0.4的接种密度接入发酵培养基中，在32 42℃、搅拌转速100 300rpm条件下~ ~ ~发酵，在发酵0 24h时加入1 10g/L维生素B2，继续发酵，发酵的总时间72h，得到含乙偶姻的~ ~

发酵液；所述发酵培养基按g/L配方:葡萄糖 5-10，酵母粉 1，蛋白胨 10，NaCl 5，K2HPO4 1，KCl 0.5, MgSO4•7H2O 0.7, FeSO4•7H2O 0.0003, MnSO4•H2O 0.005,pH 7.00。

说明书

利用维生素B2提高乙偶姻产量的方法

技术领域

[0001] 本发明属于发酵工程技术领域，涉及一种利用维生素B2提高乙偶姻产量的方法。

背景技术

[0002] 乙偶姻是一种风味添加剂，可广泛应用于制药行业、化工行业等。保藏编号为CGMCC NO.7096的多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)CJX-518在生物代谢过程中主要产生2,3-丁二醇，也有少量的乙偶姻产生，目前，有研究报道通过外源添加维生素C来促进2,3-丁二醇的产量，但利用外源添加维生素B2来提高乙偶姻产量的报道尚未见到。

发明内容

[0003] 本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种利用维生素B2提高乙偶姻产量的方法。

[0004] 本发明的技术方案概述如下：

[0005] 一种利用维生素B2提高乙偶姻产量的方法，包括如下步骤：

[0006] 将保藏编号为CGMCC NO.7096的多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)CJX-518培养获得的种子按生物量为0.1～0.4的接种密度接入发酵培养基中，在32～42℃、搅拌转速100～300rpm条件下发酵，在发酵0～24h时加入1～10g/L维生素B2，继续发酵，得到含乙偶姻的发酵液；

[0007] 所述发酵培养基按g/L配方:葡萄糖5-10，酵母粉1，蛋白胨10，NaCl 5，K2HPO4 1，KCl 0.5,MgSO4·7H2O 0.7,FeSO4·7H2O 0.0003,MnSO4·H2O 0.005,pH 7.00，余量为水。

[0008] 本发明的优点：

[0009] 保藏编号为CGMCC NO.7096的多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)CJX-518在添加维生素B2的发酵培养基中培养，能提高乙偶姻的产量。

附图说明

[0010] 图1为维生素B2对保藏编号为CGMCC NO.7096的多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)CJX-518发酵过程中乙偶姻产量的影响。

具体实施方式

[0011] 本发明涉及的多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus  polymyxa)，命名为Paenibacillus polymyxa CJX-518。并保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号:CGMCC NO.7096。保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏时间为2013年1月8日，并存活。以下将多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)CJX-518保藏编号为CGMCC NO.7096简称CJX-518。

[0012] 下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。

[0013] 种子培养基(g/L)：葡萄糖5，淀粉30，酵母粉2，蛋白胨4，NaCl 0.5，K2HPO4 1.5，MgSO4·7H2O 0.5，pH自然。

[0014] 各实施例的种子是将CJX-518在种子培养基培养获得。

[0015] 实施例1

[0016] 一种利用维生素B2提高乙偶姻产量的方法，包括如下步骤：

[0017] 同时进行三组实验，分别为1-1组；1-2组和1-3组：

[0018] 分别将CJX-518种子按生物量为0.2的接种密度接入发酵培养基中，在37℃、搅拌转速200rpm条件下发酵，1-1组在发酵0h时加入1g/L维生素B2；1-2组在发酵12h时加入1g/L维生素B2；1-3组在发酵24h时加入1g/L维生素B2，继续发酵，使发酵的总时间72小时，得到含乙偶姻的发酵液；

[0019] 空白组为将CJX-518种子按生物量为0.2的接种密度接入发酵培养基中，在37℃、搅拌转速200rpm条件下发酵，使发酵的总时间72小时，得到含乙偶姻的发酵液；

[0020] 1-1组乙偶姻的产量是3.7g/L；1-2组乙偶姻的产量是3.8g/L和1-3组乙偶姻产量是4g/L。其中1-3组的乙偶姻产量见图1。

[0021] 空白组乙偶姻产量是1.8g/L。

[0022] 三个实验组和一个空白组发酵培养基按g/L配方:葡萄糖5，酵母粉1，蛋白胨10，NaCl 5，K2HPO4 1，KCl 0.5,MgSO4·7H2O 0.7,FeSO4·7H2O 0.0003,MnSO4·H2O 0.005,pH 7.00，余量为水。

[0023] 图1中：PP(PP为Paenibacillus polymyxa简写)为空白组；PP+Vb2(1-3组)，从图中可以看出，在发酵16h时有乙偶姻产生，在在发酵24h时，加入Vb2，发酵总时间在72h时，乙偶姻产量为4g/L。

[0024] 实施例2

[0025] 一种利用维生素B2提高乙偶姻产量的方法，包括如下步骤：

[0026] 实验组是将CJX-518种子按生物量为0.1的接种密度接入发酵培养基中，在32℃、搅拌转速100rpm条件下发酵，在发酵0h时加入5g/L维生素B2，继续发酵，使发酵的总时间72小时，得到含乙偶姻的发酵液；

[0027] 空白组为将CJX-518种子按生物量为0.1的接种密度接入发酵培养基中，在32℃、搅拌转速100rpm条件下发酵，使发酵的总时间72小时，得到含乙偶姻的发酵液；

[0028] 所述发酵培养基按g/L配方:葡萄糖8，酵母粉1，蛋白胨10，NaCl 5，K2HPO4 1，KCl 0.5,MgSO4·7H2O 0.7,FeSO4·7H2O 0.0003,MnSO4·H2O 0.005,pH 7.00，余量为水。

[0029] 乙偶姻的产量3.9g/L，空白组乙偶姻产量是1.92g/L

[0030] 实施例3

[0031] 一种利用维生素B2提高乙偶姻产量的方法，包括如下步骤：

[0032] 将CJX-518种子按生物量为0.4的接种密度接入发酵培养基中，在42℃、搅拌转速300rpm条件下发酵，在发酵24h时加入10g/L维生素B2，继续发酵，使发酵的总时间72小时，得到含乙偶姻的发酵液；

[0033] 空白组为将CJX-518种子按生物量为0.4的接种密度接入发酵培养基中，在42℃、搅拌转速300rpm条件下发酵，使发酵的总时间72小时，得到含乙偶姻的发酵液；

[0034] 所述发酵培养基按g/L配方:葡萄糖10，酵母粉1，蛋白胨10，NaCl 5，K2HPO4 1，KCl 0.5,MgSO4·7H2O 0.7,FeSO4·7H2O 0.0003,MnSO4·H2O 0.005,pH 7.00，余量为水。

[0035] 乙偶姻的产量是3.87g/L，空白组乙偶姻产量是1.7g/L。