6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物及其用途

摘要

本发明提供了式I所示的6，7，8，9‑四氢‑5H‑苯并[7]轮烯‑2‑烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐及其用途。该类化合物对金黄色葡萄球菌的金黄色色素的合成显示出较强的抑制活性。金黄色葡萄球菌的金黄色色素具有帮助金黄色葡萄球菌逃避人体先天免疫系统产生的活性氧的杀害的能力，是决定细菌致病能力的一个关键毒力因子。金黄色色素还可以增加细菌对油酸的抵抗能力，通过提高细菌抗氧化的能力从而增加细菌的毒力。抑制金黄色葡萄球菌的毒力因子金黄色色素合成是新的、有效的抗菌药物策略。本发明的化合物通过靶向抑制金黄色色素的合成，不但有望开发成新型的单一用药方式的抗菌药物，而且还可以开发成与现有抗生素组合给药方式的抗菌药物。

权利要求

1.一种式I所示的6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐，其中，R1为氢或C1～C4直链或支链烷基；R2为C1～C3直链亚烷基，C3～C5亚环烷基，C2～C6直链或支链亚烯基、连烯基和炔基；R3为C1～C3直链或支链烷基，C4～C7环烷基，C5～C6杂环基，取代或未取代的六元芳环基，萘环基；n为1；其中，所述六元芳环基的取代基选自：C1～C6直链或支链烷基；C1～C3直链或支链全氟烷基；卤素；硝基；C1～C4直链或支链烷氧基；取代基的个数为1-4的整数。

2.根据权利要求1所述的式I所示的6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐，其中，所述卤素为F、Cl、Br或I。

3.根据权利要求1所述的式I所示的6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐，其中，R3为苯基或取代苯基，所述苯基的取代基选自：C1～C3直链或支链烷基，C1～C3直链或支链全氟烷基，C1～C3直链或支链烷氧基，F，Cl，Br，I，硝基；所述取代基的数目为1-4的整数。

4.根据权利要求1所述的式I所示的6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐，其中，R3为苯基或取代苯基，所述苯基的取代基选自：F，Cl，Br，甲基，甲氧基，三氟甲基，硝基；取代基的数目为1-2的整数。

5.根据权利要求1所述的式I所示的6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐，其为：(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-甲苯基)丙-2-烯-1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-叔丁苯基)丙-

2-烯-1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(萘-2-基)丙-2-烯-1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(萘-1-基)丙-2-烯-1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(2,4-二氯苯基)丙-2-烯-1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-三氟甲基苯基)丙-2-烯-1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-溴苯基)丙-2-烯-1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-氯苯基)丙-2-烯-1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-硝基苯基)丙-

2-烯-1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(2-硝基苯基)丙-

2-烯-1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(2-氟苯基)丙-2-烯-1-胺；

(E)-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-2-烯-1-胺；

(E)-N-乙基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-2-烯-1-胺；

(E)-N-异丙基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-2-烯-

1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-4-苯基-丁-2-烯-1-胺；

(2E,4E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-5-苯基-戊-2,

4-二烯-1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-环己基-丙-2-烯-

1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-环戊基-丙-2-烯-

1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(噻吩-2-基)-丙-

2-烯-1-胺；

N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-1-[(1R,2R)-2-苯基环丙基]-甲胺；

N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)甲基]-3-苯基-丙-2-炔-1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(呋喃-2-基)-丙-

2-烯-1-胺；

(E)-N,2-二甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-2-烯-1-胺；

(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-丁-2-烯-1-胺；

N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-1-胺；或(E)-N-甲基-N-[(6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-2-烯-1-胺。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的式I所示的6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐在制备抗细菌感染药物中的用途。

7.根据权利要求6所述的用途，所述抗细菌感染药物还包含其它抗细菌感染剂和/或在药学上可接受的辅料。

8.根据权利要求6所述的用途，所述在药学上可接受的辅料选自填充剂、润湿剂、黏合剂、崩解剂、润滑剂、溶剂、增溶剂、防腐剂、矫味剂、着色剂、pH调节剂和抗氧化剂中的一种或多种。

9.根据权利要求1至5中任一项所述的式I所示的6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐在制备金黄色葡萄球菌金黄色色素合成抑制剂中的用途。

10.根据权利要求1至5中任一项所述的式I所示的6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐在制备金黄色葡萄球菌金黄色色素合成抑制剂类抗细菌感染药物中的用途。

11.一种抗细菌感染的药物组合物，该药物组合物包含根据权利要求1至5中任一项所述的式I所示的6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐。

12.根据权利要求11所述的药物组合物，所述药物组合物还包含其它抗细菌感染药物和/或在药学上可接受的辅料。

13.根据权利要求11或12所述的药物组合物，所述在药学上可接受的辅料选自填充剂、润湿剂与黏合剂、崩解剂、润滑剂、溶剂、增溶剂、防腐剂、矫味剂、着色剂、pH调节剂和抗氧化剂中的一种或多种。

14.根据权利要求11所述的药物组合物，所述药物组合物为片剂、胶囊、散剂、颗粒、糖浆剂、溶液、悬浮剂、注射剂或气雾剂。

说明书

6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物及其用途

技术领域

[0001] 本发明属于药物化学和药物治疗学领域，具体涉及6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物及其用途。

背景技术

[0002] 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是严重危害人类生命健康的一种重要病原菌。作为革兰氏阳性菌的代表，它是引起人类化脓感染的病原菌中最常见的，可直接导致局部化脓感染、肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的感染可分医院获得性感染和社区获得性感染，后者的发现更增加了这种致病菌潜在的生物危害性和引起感染爆发的可能性。MRSA(Methicillin-resistant staphylococcus aureus)是具有甲氧西林耐药性的金黄色葡萄球菌，被公认是“超级细菌”。MRSA自1961年进化出来后以惊人的速度在世界范围蔓延。2005年，美国感染MRSA致死人数达19000多人，已超过同期艾滋病死亡人数。欧洲CDC对29个国家的传染疾病调查发现，英国44％的医院存在高耐药性的MRSA。2005年发现，在我国金葡菌感染中，MRSA分离率占
69.2％。在MRSA面前，人类一直保留有目前认为最有效的“杀手锏”，也就是一种名为“万古霉素”的抗生素。万古霉素的副作用很强，有严重致聋性及肾毒性，在临床上很少使用。但现在，当其他抗生素对病原菌都无效时，万古霉素被重新启用。然而，2002年在美国出现了对万古霉素高度耐药的金黄色葡萄球菌(VRSA)，它的出现使金黄色葡萄球菌的感染再次成为非常棘手的临床问题。

[0003] 随着生命科学及医学的发展，人们发现病原菌包括金黄色葡萄球菌具有致病性是因为它们通过产生各种各样的毒力因子(Virulence factor)对细菌的定植、粘附、细胞毒性、免疫逃避等进行帮助，从而使得细菌成功地实施了感染。目前，临床上使用的抗生素的作用机制并不是针对细菌的致病性环节，而是通过直接抑制病原菌最基本的生命活动来抑制细菌的生长或者直接杀死细菌，由此引发的细菌对抗生素的耐药性已经成为抗生素临床应用的瓶颈问题。正是由于各种耐药细菌的出现和蔓延，抗细菌毒力药物(Anti-virulence drugs)正在成为新型抗细菌感染药物研究所关注的热点。目前抗细菌毒力药物主要通过5种途径发挥作用：(1)遏制目标菌的毒素表达；(2)阻断细菌之间的群体感应；(3)抑制毒素分泌和传递；(4)阻断细菌黏附的各个环节；(5)抑制细菌免疫逃避。任何一种具有上述5种效果之一的药物都可以降低细菌的致病性，有效地预防和治疗多种感染疾病。

[0004] 需要强调的是，由于抗细菌毒力药物并不直接影响菌体的存亡，而是消减细菌的致病性或解除其武装，帮助人体的免疫系统有效地清除细菌，因此药物对细菌的选择性压力较小。科学家们预测它能有效降低细菌耐药性的产生、传播和流行，而且对人体的正常菌群(Normal flora)具有较少的影响，可以与其它传统抗生素协同使用，弥补现行传统抗生素的不足之处。另一方面，抗细菌毒力药物对已经产生耐药的菌株可能有效，因为无论对抗生素耐药菌株还是敏感菌株而言，它们在致病性的分子机理方面，一般来说都是类似的。

[0005] 2005年，美国加州大学圣地亚哥分校(UCSD)的Victor Nizet教授发现金黄色葡萄球菌的金黄色色素(Staphyloxanthin)具有帮助金黄色葡萄球菌逃避人体先天免疫系统产生的活性氧的杀害的能力，是决定细菌致病能力的一个关键因子。美国伊利诺大学香槟校区的Eric Oldfield教授等成功发现一个已知的胆固醇合成抑制剂BPH-652能抑制金黄色葡萄球菌内金黄色色素的形成，从而消减金黄色葡萄球菌在小鼠体内的致病能力。也有一些研究报道，金黄色色素可以增加细菌对油酸的抵抗能力，在小鼠皮下感染模型实验中，不能产生色素的突变株引发的脓肿区域较野生型菌株明显减少，暗示色素能够通过提高细菌抗氧化的能力从而增加细菌的毒力。因而，金黄色色素是决定金黄色葡萄球菌致病能力的一个关键因子。这些已有的研究初步证实抑制金黄色葡萄球菌的毒力因子金黄色色素合成是新的、有效的抗菌药物策略。

[0006] 中国是世界上滥用抗生素最为严重的国家之一，由此造成的细菌耐药性问题尤为突出，临床分离的一些细菌对某些抗生素的耐药性已居世界首位。面对严峻的细菌抗生素耐药性，我们亟需发现新型的抗菌药物作用靶点和新型的抗细菌感染药物。因此，研究开发抗金黄色色素合成的抗菌药物具有重要的现实意义和科学价值。

发明内容

[0007] 本发明目的是提供一类对金黄色色素合成具有强效抑制活性并且可用于制备抗细菌感染药物的新型化合物。

[0008] 用于实现上述目的的技术方案如下：

[0009] 一种式I所示的6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐：

[0010]

[0011] 其中，R1为氢或C1～C4直链或支链烷基；R2为C1～C3直链亚烷基，C3～C5亚环烷基，C2～C6直链或支链亚烯基、连烯基和炔基；R3为C1～C3直链或支链烷基，C4～C7环烷基，C5～C6杂环基，取代或未取代的六元芳环基，萘环基；n为1-3的整数。

[0012] 其中，所述六元芳环基的取代基选自：C1～C6直链或支链烷基；C1～C3直链或支链全氟烷基；卤素，例如F、Cl、Br或I；硝基；C1～C4直链或支链烷氧基；所述取代基的个数为1-4的整数。

[0013] 在本发明的一个优选技术方案中，R3为苯基或取代苯基，所述苯基的取代基选自：C1～C3直链或支链烷基，C1～C3直链或支链全氟烷基，C1～C3直链或支链烷氧基，F，Cl，Br，I，硝基；所述取代基的数目为1-4的整数。

[0014] 在本发明的另一个优选技术方案中，R3为苯基或取代苯基，所述苯基的取代基选自：F，Cl，Br，甲基，甲氧基，三氟甲基，硝基；所述取代基的数目为1-2的整数。

[0015] 优选地，所述式I所示的6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐如下：

[0016] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-甲苯基)丙-2-烯-1-胺；

[0017] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-叔丁苯基)丙-2-烯-1-胺；

[0018] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(萘-2-基)丙-2-烯-1-胺；

[0019] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(萘-1-基)丙-2-烯-1-胺；

[0020] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(2，4-二氯苯基)丙-2-烯-1-胺；

[0021] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-三氟甲基苯基)丙-2-烯-1-胺；

[0022] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-胺；

[0023] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-溴苯基)丙-2-烯-1-胺；

[0024] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-氯苯基)丙-2-烯-1-胺；

[0025] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-胺；

[0026] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-硝基苯基)丙-2-烯-1-胺；

[0027] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(2-硝基苯基)丙-2-烯-1-胺；

[0028] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(2-氟苯基)丙-2-烯-1-胺；

[0029] (E)-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-2-烯-1-胺；

[0030] (E)-N-乙基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-2-烯-1-胺；

[0031] (E)-N-异丙基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-2-烯-1-胺；

[0032] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-4-苯基-丁-2-烯-1-胺；

[0033] (2E，4E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-5-苯基-戊-2，4-二烯-1-胺；

[0034] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-环己基-丙-2-烯-1-胺；

[0035] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-环戊基-丙-2-烯-1-胺；

[0036] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(噻吩-2-基)-丙-2-烯-1-胺；

[0037] N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-1-[(1R，2R)-2-苯基环丙基]-甲胺；

[0038] N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)甲基]-3-苯基-丙-2-炔-1-胺；

[0039] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(呋喃-2-基)-丙-2-烯-1-胺；

[0040] (E)-N，2-二甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-2-烯-1-胺；

[0041] (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-丁-2-烯-1-胺；

[0042] N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-1-胺；或(E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-2-烯-1-胺。

[0043] 就本发明所述的具有通式I所示结构的6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物IA～IE及其中间体II～XIV的制备方法而言，具体合成策略分别如下：

[0044] IA的合成：

[0045]

[0046] 式中，R3的含义与前文所述相同，R4为氢或C1～C3直链烷基。

[0047] 1)将1-苯并环庚酮溶于三氟乙酸中，加入三乙基硅烷，50～80℃下搅拌10～20小时。反应结束后，浓缩，将反应液倒入冰水中，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离，得到中间体6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯(中间体II)。

[0048] 2)将中间体II、N-碘代丁二酰亚胺溶于乙酸中，氮气保护、50～80℃下加热反应5～15小时。反应结束后，用饱和硫代硫酸钠溶液在0℃下淬灭反应，加入饱和碳酸氢钠溶液，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离，得到中间体2-碘代-6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯(中间体III)。

[0049] 3)将中间体III、氰化亚铜加入到N，N-二甲基甲酰胺中，加热回流10～20小时。冷却至室温，向体系中加入浓氨水，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离，得到中间体6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-甲腈(中间体IV)。

[0050] 4)将中间体IV的无水四氢呋喃溶液在零下78℃、氮气保护下缓慢滴加到氢化铝锂的无水四氢呋喃混悬液中，滴加完毕后20～30℃下反应过夜。向反应体系中依次加入水、15％氢氧化钠水溶液，水淬灭反应，直接在反应体系中加入无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得中间体(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)甲胺(中间体V)。

[0051] 5)将中间体V溶于四氢呋喃中，加入氢氧化钠搅拌5～10分钟，冰浴下缓慢加入二碳酸二叔丁酯的四氢呋喃溶液。0～30℃下搅拌反应1～3小时。过滤，浓缩，残余物经柱层析分离，得到中间体[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]氨基甲酸叔丁酯(中间体VI)。

[0052] 6)将中间体VI的无水四氢呋喃溶液在0℃、氮气保护下缓慢滴加到氢化铝锂的无水四氢呋喃混悬液中，滴加完毕后加热回流反应10～20小时。反应结束后，向反应体系中依次加入水、15％氢氧化钠水溶液，水淬灭反应，直接在反应体系中加入无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得中间体N-甲基-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)甲胺(中间体VII)。

[0053] 7)将(E)-2-R4-3-R3-丙烯醛溶于甲醇中，冰浴下分批加入硼氢化钠，室温下反应10～30分钟。浓缩，残余物中加入水，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩得中间体(E)-2-R4-3-R3-丙烯醇(中间体VIII)。

[0054] 8)将中间体VIII溶于无水乙醚中，氮气保护、冰浴下加入三溴化磷，20～30℃下反应10～20小时。反应结束后，将反应体系倒入冰的饱和碳酸氢钠溶液中，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，30℃下浓缩得中间体(E)-2-R4-3-R3-丙烯溴(中间体IX)。

[0055] 9)将中间体VII、中间体IX、碳酸钾加入到N，N-二甲基甲酰胺中，20～30℃下反应10～20小时。反应结束后，向反应体系中加入水，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离，得到化合物(E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-2-R4-3-R3-丙-2-烯-1-胺(IA)。

[0056] IB的合成：

[0057]

[0058] 式中，R1和R3的含义与前文所述相同。

[0059] 1)将中间体V、E-3-R3-丙烯醛、分子筛加入到二氯甲烷中，加热回流反应15～30小时。反应结束后，冷却至室温，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离，得到中间体(E，E)-N-(3-R3-丙-2-烯-1-叉基)-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)甲胺(中间体X)。

[0060] 2)将中间体X溶于甲醇中，冰浴下分批加入硼氢化钠，室温下反应10～30分钟。浓缩，残余物中加入水，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得中间体(E)-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-1-基)亚甲基]-3-R3-丙-2-烯-2-胺(目标物IB的一类)。

[0061] 3)将目标物IB溶于无水N，N-二甲基甲酰胺中，冰浴下分批加入氢化钠，搅拌反应10～30分钟。加入R1取代碘，氮气保护、20～30℃下反应10～20小时。反应结束后，向反应体系中加入水，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离，得到化合物(E)-N-R1-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-
3-R3-丙-2-烯-1-胺(目标物IB的另一类)。

[0062] IC的合成：

[0063]

[0064] 式中，R5为(E)-2-(噻吩-2-基)乙烯基或(1R，2R)-2-苯基环丙烷基。

[0065] 1)将R5取代羧酸、二氯亚砜加入到乙醇溶液中，加热回流1～3小时。反应结束后，浓缩，洗涤，得到中间体R5取代羧酸乙酯(中间体XI)。

[0066] 2)将中间体XI溶于无水四氢呋喃中，氮气保护、0℃下缓慢加入二异丁基氢化铝的甲苯溶液，20～30℃下反应10～20小时。反应结束后，加入甲醇淬灭反应，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离，得到中间体R5取代甲醇(中间体XII)。

[0067] 3)将中间体XII溶于无水乙醚中，氮气保护、冰浴下加入三溴化磷，20～30℃下反应10～20小时。反应结束后，将反应体系倒入冰的饱和碳酸氢钠溶液中，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，30℃下浓缩得中间体R5取代溴甲烷(中间体XIII)。

[0068] 4)将中间体VII、中间体XIII、碳酸钾加入到N，N-二甲基甲酰胺中，20～30℃下反应10～20小时。反应结束后，向反应体系中加入水，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离，得到化合物N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-R5-甲胺(IC)。

[0069] ID的合成：

[0070]

[0071] 式中，R3的含义与前文所述相同。

[0072] 1)将3-R3-丙-2-炔-1-醇溶于无水乙醚中，氮气保护、冰浴下加入三溴化磷，20～30℃下反应10～20小时。反应结束后，将反应体系倒入冰的饱和碳酸氢钠溶液中，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，30℃下浓缩得中间体3-溴-1-R3-丙-
1-炔(中间体XIV)。

[0073] 2)将中间体VII、中间体XIV、碳酸钾加入到N，N-二甲基甲酰胺中，20～30℃下反应10～20小时。反应结束后，向反应体系中加入水，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离，得到化合物N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-
5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-R3-丙-2-炔-1-胺(ID)。

[0074] IE的合成：

[0075]

[0076] 式中，R3的含义与前文所述相同。

[0077] 将中间体VII、3-R3-1-溴丙烷、碳酸钾加入到N，N-二甲基甲酰胺中，20～30℃下反应10～20小时。反应结束后，向反应体系中加入水，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离，得到化合物N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-R3-丙-1-胺(IE)。

[0078] 根据上述制备方法的教导，本领域普通技术人员无需创造性劳动即可获得式IA-IE所包含的所有化合物。

[0079] 本发明还提供了上述式I所示的6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐在制备抗细菌感染药物中的用途。优选地，所述抗细菌感染药物还包含其它抗细菌感染剂和/或在药学上可接受的辅料。所述在药学上可接受的辅料可以选自填充剂、润湿剂、黏合剂、崩解剂、润滑剂、溶剂、增溶剂、防腐剂、矫味剂、着色剂、pH调节剂和抗氧化剂中的一种或多种。

[0080] 本发明还提供了上述式I所示的6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐在制备金黄色葡萄球菌金黄色色素合成抑制剂中的用途。

[0081] 本发明还提供了上述式I所示的6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐在制备金黄色葡萄球菌金黄色色素合成抑制剂类抗细菌感染药物中的用途。

[0082] 本发明还提供了一种抗细菌感染方法，该方法包括给予人或哺乳动物所述式I所示的6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐。

[0083] 本发明还提供了一种抗细菌感染方法，该方法包括给予人或哺乳动物所述式I所示的6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐，以及其它抗细菌感染药物。在所述抗细菌感染方法中，所述式I所示的6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐与其它抗细菌感染药物同时或依次分别给予人或哺乳动物。

[0084] 本发明还提供了一种抗细菌感染的药物组合物，该药物组合物包含所述式I所示的6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物或其在药学上可接受的盐。优选地，所述药物组合物还包含其它抗细菌感染药物和/或在药学上可接受的辅料。所述在药学上可接受的辅料可以选自填充剂、润湿剂、黏合剂、崩解剂、润滑剂、溶剂、增溶剂、防腐剂、矫味剂、着色剂、pH调节剂和抗氧化剂中的一种或多种。

[0085] 本发明所述的药物组合物可以采用多种药物剂型，例如片剂、胶囊、散剂、颗粒、糖浆剂、溶液、悬浮剂、注射剂或气雾剂等。

[0086] 本发明提供了具有全新结构的6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物。对金黄色色素抑制活性的测试结果显示，本发明提供的化合物对金黄色色素合成有强效的抑制活性，可用于制备抗细菌感染药物。

[0087] 本发明提供的6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物分子结构较为简单，制备工艺简洁，生产成本低。在对与细菌的致病环节有密切关系的金黄色色素合成抑制实验中均显示出较强的抑制活性，因此，其不但有望开发成新型的单一用药方式的抗菌药物，而且还可以开发成与现有抗生素组合给药的抗菌药物。

附图说明

[0088] 图1为显示本发明化合物IA-8抑制金黄色色素合成的结果的照片，从左至右，IA-8的浓度依次为50μM、10μM、5μM、2.5μM、1.25μM、0.625μM、0.3125μM和0μM；

[0089] 图2为显示本发明化合物IC-1抑制金黄色色素合成的结果的照片，从左至右，IC-1的浓度依次为50μM、10μM、5μM、2.5μM、1.25μM、0.625μM、0.3125μM和0μM；

[0090] 图3为化合物IA-8抑制金黄色色素合成的量效关系曲线图；

[0091] 图4为化合物IA-9抑制金黄色色素合成的量效关系曲线图；

[0092] 图5为化合物IA-6抑制金黄色色素合成的量效关系曲线图。

[0093] 实施发明的最佳方式

[0094] 下面结合具体实施方式对本发明进行进一步详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。对于实施例中所有参数以及其余的说明而言，除另有说明外，都是以质量(克)为单位。

[0095] 实施例1 6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯(中间体II)的制备

[0096]

[0097] 将1克1-苯并环庚酮溶于7.2毫升三氟乙酸中，加入1.5毫升三乙基硅烷，60℃下搅拌过夜。反应结束后，旋蒸浓缩除去部分三氟乙酸，然后将反应液倒入冰水中，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离得到标题化合物，0.91克无色油，收率为90％。

[0098] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.17-6.96(m，4H)，2.79(dd，J＝7.0，4.1Hz，4H)，1.95-1.73(m，2H)，1.65(dd，J＝10.0，4.8Hz，4H)。

[0099] 实施例2 2-碘代-6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯(中间体III)的制备

[0100]

[0101] 将675毫克中间体II、1.14克N-碘代丁二酰亚胺溶于20毫升乙酸中，氮气保护、70℃下加热反应7小时。反应结束后，用适量饱和硫代硫酸钠溶液在0℃下淬灭反应，加入饱和碳酸氢钠溶液，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离得到标题化合物，867毫克无色油，收率为69％。

[0102] 1H-NMR(400MHz，丙酮)δ7.68(d，J＝6.9Hz，1H)，7.42(d，J＝7.9Hz，1H)，6.91(d，J＝7.8Hz，1H)，2.74(t，J＝10.2Hz，4H)，1.83(s，2H)，1.60(s，4H)。

[0103] 实施例3 6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-甲腈(中间体IV)的制备

[0104]

[0105] 将272毫克中间体III、179毫克氰化亚铜加入到10毫升N，N-二甲基甲酰胺中，加热回流过夜。中间体III反应完全后，冷却至室温，向体系中加入浓氨水至溶液澄清，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离，得到标题化合物，122毫克浅黄色固体，收率为71％。

[0106] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.47-7.28(m，2H)，7.16(t，J＝9.9Hz，1H)，2.82(t，J＝9.4Hz，4H)，1.86(s，2H)，1.65(s，4H)。

[0107] 实施例4 (6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)甲胺(中间体V)的制备[0108]

[0109] 将6.3克中间体IV的20毫升无水四氢呋喃溶液，在零下78℃、氮气保护下缓慢滴加到5.6克氢化铝锂的50毫升无水四氢呋喃混悬液中，滴加完毕后室温下反应过夜。向反应体系中依次加入5.6毫升水、5.6毫升15％氢氧化钠水溶液，5.6毫升水淬灭反应，直接在反应体系中加入无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得5.9克浅黄色油状标题化合物，收率为91％。

[0110] 1H-NMR(400MHz，丙酮)δ7.19-6.80(m，3H)，4.59-4.15(m，2H)，2.85-2.71(m，4H)，1.87-1.77(m，2H)，1.66-1.54(m，4H)。

[0111] 实施例5 [(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]氨基甲酸叔丁酯(中间体VI)的制备

[0112]

[0113] 将5克中间体V溶于50毫升四氢呋喃溶液中，加入1.4克氢氧化钠搅拌5分钟，冰浴下缓慢加入7.5克二碳酸二叔丁酯的20毫升四氢呋喃溶液。室温下搅拌反应1小时。过滤，浓缩，残余物经柱层析分离，得到标题化合物，7.1克浅黄色固体，收率为91％。

[0114] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.15-6.83(m，3H)，4.41-4.10(m，2H)，2.87-2.59(m，4H)，1.93-1.74(m，2H)，1.62(d，J＝2.9Hz，4H)，1.46(d，J＝3.7Hz，9H)。

[0115] 实施例6 N-甲基-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)甲胺(中间体VII)的制备

[0116]

[0117] 将8克中间体VI的20毫升无水四氢呋喃溶液在0℃、氮气保护下缓慢滴加到4.4克氢化铝锂的50毫升无水四氢呋喃混悬液中，滴加完毕后加热回流反应12小时。反应结束后，向反应体系中依次加入4.4毫升水、4.4毫升15％氢氧化钠水溶液，4.4毫升水淬灭反应，直接在反应体系中加入无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得标题化合物，5克黄色油状物，收率为90％。

[0118] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.19-6.84(m，3H)，3.87-3.47(m，2H)，2.93-2.64(m，4H)，2.47(d，J＝6.6Hz，3H)，1.83(t，J＝8.2Hz，2H)，1.74-1.47(m，4H)。

[0119] 实施例7 (E)-3-(4-甲苯基)-丙-2-烯-1-醇(中间体VIII-1)的制备

[0120]

[0121] 将100毫克(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛溶于10毫升甲醇中，冰浴下分批加入26毫克硼氢化钠，室温下反应15分钟。浓缩，残余物中加入水，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩得标题化合物，99毫克油，直接投下一步反应，收率为98％。

[0122] 实施例8 (E)-1-(4-甲苯基)-3-溴-丙烯(中间体IX-1)的制备

[0123]

[0124] 将370毫克中间体VIII-1溶于20毫升无水乙醚中，氮气保护、冰浴下加入85微升三溴化磷，室温下反应过夜。反应结束后，将反应体系倒入冰的饱和碳酸氢钠溶液中，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，30℃下浓缩得标题化合物，395毫克白色固体，收率为85％。

[0125] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.27(t，J＝7.4Hz，2H)，7.13(d，J＝7.4Hz，2H)，6.61(d，J＝15.6Hz，1H)，6.34(dt，J＝15.6，7.8Hz，1H)，4.16(d，J＝7.7Hz，2H)，2.34(s，3H)。

[0126] 实施例9 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-甲苯基)丙-2-烯-1-胺(化合物IA-1)的制备

[0127]

[0128] 将105毫克中间体VII、105毫克中间体IX-1、83毫克碳酸钾加入到10毫升N，N-二甲基甲酰胺中，室温下反应过夜。反应结束后，向反应体系中加入水，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离，得到标题化合物，124毫克无色油状物，收率为70％。为了将其纯化，将化合物溶于1毫升乙酸乙酯中，通入氯化氢气体一分钟，将其做成盐酸盐，蒸干溶剂，加入1/100的石油醚/乙酸乙酯混合溶剂，析出白色盐酸盐固体，抽滤，洗涤，得化合物IA-1盐酸盐。1H-NMR为其盐酸盐形式的数据。

[0129] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.39(d，J＝7.8Hz，2H)，7.21(dd，J＝17.3，8.8Hz，5H)，6.86(d，J＝15.6Hz，1H)，6.37-6.15(m，1H)，4.38(s，1H)，4.19(s，1H)，3.98(s，1H)，3.87(s，
1H)，2.93-2.81(m，4H)，2.78(s，3H)，2.34(s，3H)，1.88(s，2H)，1.64(s，4H)；

[0130] MS(ESI)m/z 320.1[M+H]+。

[0131] 实施例10 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-叔丁苯基)丙-2-烯-1-胺(化合物IA-2)的制备

[0132]

[0133] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-3-(4-叔丁苯基)-丙烯醛之外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到123毫克油状标题化合物，收率是82％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0134] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.45(s，4H)，7.28(dd，J＝22.7，8.3Hz，3H)，6.99-6.80(m，1H)，6.37-6.23(m，1H)，4.42(d，J＝12.6Hz，1H)，4.20(d，J＝13.1Hz，1H)，4.10-3.93(m，
1H)，3.89(d，J＝7.8Hz，1H)，2.90(t，J＝19.0Hz，4H)，2.81(s，3H)，1.90(s，2H)，1.66(s，
4H)，1.34(s，9H)；

[0135] MS(ESI)m/z 362.2[M+H]+。

[0136] 实施例11 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(萘-2-基)丙-2-烯-1-胺(化合物IA-3)的制备

[0137]

[0138] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-3-(萘-2-基)-丙烯醛外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到109毫克无色油状标题化合物，收率是72％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0139] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ8.03-7.78(m，4H)，7.75(d，J＝8.7Hz，1H)，7.53(s，2H)，7.27(d，J＝10.4Hz，2H)，7.10(d，J＝15.9Hz，1H)，6.55-6.41(m，1H)，4.45(s，1H)，4.26(s，
1H)，4.09(s，1H)，3.96(s，1H)，2.98-2.75(m，6H)，1.90(s，2H)，1.67(s，4H)；

[0140] MS(ESI)m/z 356.0[M+H]+。

[0141] 实施例12 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(萘-1-基)丙-2-烯-1-胺(化合物IA-4)的制备

[0142]

[0143] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-3-(萘-1-基)-丙烯醛外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到113毫克无色油状标题化合物，收率是75％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0144] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ8.19(d，J＝8.1Hz，1H)，7.98-7.86(m，2H)，7.84-7.71(m，2H)，7.56(dt，J＝18.3，7.2Hz，3H)，7.27(dd，J＝12.6，9.4Hz，3H)，6.56-6.28(m，1H)，4.38(d，J＝45.7Hz，2H)，4.11(s，2H)，2.89(s，7H)，1.90(s，2H)；

[0145] MS(ESI)m/z 356.1[M+H]+。

[0146] 实施例13 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(2，4-二氯苯基)丙-2-烯-1-胺(化合物IA-5)的制备

[0147]

[0148] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-3-(2，4-二氯苯基)-丙烯醛之外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到118毫克油状标题化合物，收率是80％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0149] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.73(d，J＝8.4Hz，1H)，7.55(s，1H)，7.40(d，J＝7.8Hz，1H)，7.25(t，J＝10.5Hz，4H)，6.47-6.34(m，1H)，4.34(d，J＝61.5Hz，2H)，4.02(d，J＝
49.2Hz，2H)，2.98-2.72(m，7H)，1.89(d，J＝5.0Hz，2H)，1.66(s，4H)；

[0150] MS(ESI)m/z 374.0[M+H]+。

[0151] 实施例14 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-三氟甲基苯基)丙-2-烯-1-胺(化合物IA-6)的制备

[0152]

[0153] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-3-(4-三氟甲基苯基)-丙烯醛之外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到114毫克油状标题化合物，收率是77％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0154] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.71(s，4H)，7.26(d，J＝8.6Hz，3H)，7.00(d，J＝15.7Hz，1H)，6.51(dt，J＝15.3，7.5Hz，1H)，4.43(s，1H)，4.25(s，1H)，4.07(s，1H)，3.94(s，1H)，
2.98-2.68(m，6H)，1.90(s，2H)，1.66(s，4H)；

[0155] MS(ESI)m/z 374.0[M+H]+。

[0156] 实施例15 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-胺(化合物IA-7)的制备

[0157]

[0158] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-3-(4-氟苯基)-丙烯醛外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到107毫克无色油状标题化合物，收率是68％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0159] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.66-7.47(m，2H)，7.25(d，J＝8.4Hz，3H)，7.14(t，J＝8.5Hz，2H)，6.91(d，J＝15.8Hz，1H)，6.38-6.20(m，1H)，4.31(d，J＝70.2Hz，2H)，3.95(d，J＝41.8Hz，2H)，2.86(t，J＝11.5Hz，4H)，2.81(s，3H)，1.90(s，2H)，1.67(s，4H)；

[0160] MS(ESI)m/z 324.1[M+H]+。

[0161] 实施例16 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-溴苯基)丙-2-烯-1-胺(化合物IA-8)的制备

[0162]

[0163] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-3-(4-溴苯基)-丙烯醛外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到91毫克无色油状标题化合物，收率是62％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0164] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.54(d，J＝8.2Hz，2H)，7.43(d，J＝8.2Hz，2H)，7.23(d，J＝8.9Hz，3H)，6.87(d，J＝15.6Hz，1H)，6.36(dt，J＝15.2，7.4Hz，1H)，4.30(d，J＝71.2Hz，2H)，3.93(d，J＝49.8Hz，2H)，2.85(d，J＝6.4Hz，4H)，2.79(s，3H)，1.88(s，2H)，1.64(s，
4H)；

[0165] MS(ESI)m/z 384.0[M+H]+。

[0166] 实施例17 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-氯苯基)丙-2-烯-1-胺(化合物IA-9)的制备

[0167]

[0168] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-3-(4-氯苯基)-丙烯醛外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到100毫克无色油状标题化合物，收率是65％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0169] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.53(d，J＝8.4Hz，2H)，7.41(d，J＝8.4Hz，2H)，7.26(d，J＝8.3Hz，3H)，6.91(d，J＝15.9Hz，1H)，6.43-6.29(m，1H)，4.43(d，J＝12.9Hz，1H)，4.21(d，J＝13.0Hz，1H)，4.04(dd，J＝12.9，6.8Hz，1H)，3.97-3.80(m，1H)，2.88(d，J＝6.8Hz，4H)，2.81(s，3H)，1.90(s，2H)，1.66(s，4H)；

[0170] MS(ESI)m/z 340.0[M+H]+。

[0171] 实施例18 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-胺(化合物IA-10)的制备

[0172]

[0173] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-3-(4-甲氧基苯基)-丙烯醛外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到104毫克无色油状标题化合物，收率是67％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0174] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.41(d，J＝7.3Hz，2H)，7.31-7.13(m，5H)，6.88(d，J＝16.2Hz，1H)，6.32-6.21(m，1H)，4.40(s，1H)，4.21(s，1H)，4.01(s，1H)，3.88(s，1H)，2.87(s，4H)，2.80(s，3H)，2.36(s，3H)，1.90(s，2H)，1.67(s，4H)；

[0175] MS(ESI)m/z 336.1[M+H]+。

[0176] 实施例19 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(4-硝基苯基)丙-2-烯-1-胺(化合物IA-11)的制备

[0177]

[0178] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-3-(4-硝基苯基)-丙烯醛外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到112毫克黄色油状标题化合物，收率是74％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0179] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ8.28(d，J＝8.6Hz，2H)，7.77(d，J＝8.6Hz，2H)，7.26(t，J＝10.1Hz，3H)，7.04(d，J＝15.9Hz，1H)，6.67-6.53(m，1H)，4.35(d，J＝65.6Hz，2H)，4.03(d，J＝49.6Hz，2H)，2.98-2.76(m，7H)，1.90(s，2H)，1.66(s，4H)；

[0180] MS(ESI)m/z 351.1[M+H]+。

[0181] 实施例20 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(2-硝基苯基)丙-2-烯-1-胺(化合物IA-12)的制备

[0182]

[0183] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-3-(2-硝基苯基)-丙烯醛外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到103毫克黄色油状标题化合物，收率是68％。该化合物盐酸盐为黄色固体。

[0184] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ8.06(d，J＝8.2Hz，1H)，7.76(q，J＝7.6Hz，2H)，7.61(t，J＝6.7Hz，1H)，7.34(t，J＝12.9Hz，1H)，7.26(t，J＝10.4Hz，3H)，6.32(dt，J＝15.2，7.4Hz，1H)，4.43(s，1H)，4.27(s，1H)，4.08(s，1H)，3.96(s，1H)，2.88(d，J＝9.2Hz，7H)，1.90(d，J＝5.1Hz，2H)，1.67(s，4H)；

[0185] MS(ESI)m/z 351.0[M+H]+。

[0186] 实施例21 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(2-氟苯基)丙-2-烯-1-胺(化合物IA-13)的制备

[0187]

[0188] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-3-(2-氟苯基)-丙烯醛外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到104毫克无色油状标题化合物，收率是66％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0189] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.65(t，J＝7.6Hz，1H)，7.39(d，J＝6.2Hz，1H)，7.24(dd，J＝19.8，10.6Hz，4H)，7.16(t，J＝9.7Hz，1H)，7.06(d，J＝16.0Hz，1H)，6.52-6.38(m，1H)，4.43(d，J＝13.1Hz，1H)，4.23(d，J＝13.0Hz，1H)，4.08(dd，J＝13.0，7.0Hz，1H)，4.01-3.83(m，1H)，2.97-2.63(m，7H)，1.82(d，J＝58.7Hz，2H)，1.66(s，4H)；

[0190] MS(ESI)m/z 324.7[M+H]+。

[0191] 实施例22 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-4-苯基-丁-2-烯-1-胺(化合物IA-14)的制备

[0192]

[0193] 除了将中间体VIII-1换成中间体(E)-4-苯基-丁-2-烯-1-醇外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例8-9，得到89毫克无色油状标题化合物，收率是56％。该化合物盐酸盐为黄色油状物。

[0194] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.36-7.13(m，8H)，6.30-6.18(m，1H)，5.73-5.63(m，1H)，4.33(d，J＝13.0Hz，1H)，4.12(d，J＝12.8Hz，1H)，3.84(dd，J＝13.1，6.7Hz，1H)，3.74-3.60(m，1H)，3.47(t，J＝32.1Hz，2H)，2.84(t，J＝10.0Hz，4H)，2.73(s，3H)，1.90(s，2H)，1.60(d，J＝42.4Hz，4H)；

[0195] MS(ESI)m/z 320.1[M+H]+。

[0196] 实施例23 (2E，4E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-5-苯基-戊-2，4-二烯-1-胺(化合物IA-15)的制备

[0197]

[0198] 除了将中间体VIII-1换成中间体(2E，4E)-5-苯基-戊-2，4-二烯-1-醇外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例8-9，得到111毫克无色油状标题化合物，收率是71％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0199] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.50(d，J＝7.5Hz，2H)，7.40-7.32(m，2H)，7.27(dd，J＝18.1，7.7Hz，4H)，6.98(dd，J＝15.3，10.6Hz，1H)，6.75(dd，J＝28.9，13.4Hz，2H)，5.92(dt，J＝14.8，7.5Hz，1H)，4.39(d，J＝12.8Hz，1H)，4.17(d，J＝13.0Hz，1H)，3.96(dd，J＝13.1，
7.4Hz，1H)，3.87-3.75(m，1H)，2.84(d，J＝30.7Hz，4H)，2.78(s，3H)，1.90(s，2H)，1.67(s，
4H)；

[0200] MS(ESI)m/z 332.0[M+H]+。

[0201] 实施例24 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-环己基-丙-2-烯-1-胺(化合物IA-16)的制备

[0202]

[0203] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-3-(环己基)-丙烯醛外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到53毫克无色油状标题化合物，收率是33％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0204] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.22(d，J＝7.1Hz，3H)，6.02(dd，J＝15.3，6.9Hz，1H)，5.84(t，J＝10.6Hz，1H)，5.53(ddd，J＝26.1，16.2，7.5Hz，1H)，4.34(dd，J＝12.5，4.5Hz，
1H)，4.16(dd，J＝30.2，12.7Hz，1H)，3.80(dd，J＝18.1，10.6Hz，1H)，3.69-3.53(m，1H)，
2.87(s，4H)，2.76(d，J＝24.3Hz，3H)，2.27(d，J＝10.8Hz，1H)，2.13(s，1H)，1.90(s，2H)，
1.84-1.58(m，8H)，1.27(ddd，J＝39.5，18.7，8.3Hz，6H)；

[0205] MS(ESI)m/z 312.1[M+H]+。

[0206] 实施例25 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-环戊基-丙-2-烯-1-胺(化合物IA-17)的制备

[0207]

[0208] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-3-(环戊基)-丙烯醛外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到63毫克无色油状标题化合物，收率是38％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0209] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.22(q，J＝7.5Hz，3H)，6.05(dd，J＝15.2，7.8Hz，1H)，5.60(dt，J＝15.0，7.4Hz，1H)，4.32(s，1H)，4.13(s，1H)，3.80(s，1H)，3.70-3.58(m，1H)，
2.96-2.80(m，4H)，2.75(d，J＝18.2Hz，3H)，2.61(dd，J＝16.1，8.0Hz，1H)，1.90(d，J＝
4.9Hz，4H)，1.80-1.50(m，8H)，1.41(s，2H)；

[0210] MS(ESI)m/z 298.1[M+H]+。

[0211] 实施例26 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(呋喃-2-基)-丙-2-烯-1-胺(化合物IA-18)的制备

[0212]

[0213] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-3-(呋喃-2-基)-丙烯醛外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到51毫克浅黄色油状标题化合物，收率是31％。该化合物盐酸盐为浅黄色固体。

[0214] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.56(s，1H)，7.25(d，J＝9.3Hz，3H)，6.77(d，J＝15.7Hz，1H)，6.52(d，J＝12.2Hz，2H)，6.18(dt，J＝15.4，7.6Hz，1H)，4.41(d，J＝12.8Hz，1H)，4.18(d，J＝12.9Hz，1H)，4.08-3.97(m，1H)，3.93-3.75(m，1H)，2.88(d，J＝5.1Hz，4H)，2.78(s，
3H)，1.90(s，2H)，1.67(s，4H)；

[0215] MS(ESI)m/z 296.6[M+H]+。

[0216] 实施例27 (E)-N，2-二甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-2-烯-1-胺(化合物IA-19)的制备

[0217]

[0218] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-2-甲基-3-苯基-丙烯醛外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到91毫克无色油状标题化合物，收率是57％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0219] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.48-7.10(m，8H)，6.83(d，J＝31.7Hz，1H)，4.39(d，J＝13.0Hz，1H)，4.24(t，J＝11.5Hz，1H)，3.98(t，J＝12.4Hz，1H)，3.81(d，J＝12.8Hz，1H)，
2.93-2.73(m，7H)，2.09-1.93(m，3H)，1.87(d，J＝5.3Hz，2H)，1.64(s，4H)；

[0220] MS(ESI)m/z 304.0[M+H]+。

[0221] 实施例28 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-丁-2-烯-1-胺(化合物IA-20)的制备

[0222]

[0223] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-丁-2-烯-1-醛外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到93毫克无色油状标题化合物，收率是49％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0224] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.22(dd，J＝9.3，7.0Hz，3H)，6.10(dq，J＝13.1，6.5Hz，1H)，5.66(dt，J＝14.0，6.9Hz，1H)，4.35(d，J＝12.9Hz，1H)，4.11(d，J＝12.8Hz，1H)，3.85-
3.74(m，1H)，3.70-3.57(m，1H)，2.94-2.80(m，4H)，2.72(s，3H)，1.97-1.73(m，5H)，1.67(s，
4H)；

[0225] MS(ESI)m/z 244.1[M+H]+。

[0226] 实施例29 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-2-烯-1-胺(化合物IA-21)的制备

[0227]

[0228] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成(E)-肉桂醛外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7-9，得到116毫克无色油状标题化合物，收率是71％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0229] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.53(d，J＝7.0Hz，2H)，7.36(ddd，J＝10.7，10.0，5.3Hz，3H)，7.25(dd，J＝12.0，9.5Hz，3H)，6.93(d，J＝15.8Hz，1H)，6.45-6.27(m，1H)，4.42(s，
1H)，4.24(s，1H)，4.03(s，1H)，3.91(s，1H)，2.91-2.84(m，4H)，2.81(s，3H)，2.01-1.78(m，
2H)，1.66(d，J＝4.0Hz，4H)；

[0230] MS(ESI)m/z 306.0[M+H]+。

[0231] 实施例30 (E，E)-N-(3-苯基-丙-2-烯-1-叉基)-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)甲胺(中间体X-1)的制备

[0232]

[0233] 将525毫克中间体V、264毫克反式肉桂醛、1克分子筛加入到25毫升二氯甲烷溶液中，加热回流反应17小时。反应结束后，冷却至室温，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离，得到标题化合物，416毫克浅黄色固体，收率为72％。

[0234] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.46-7.34(m，3H)，7.27(dt，J＝19.7，7.1Hz，4H)，7.05-6.92(m，4H)，4.57(d，J＝9.6Hz，2H)，2.70(dd，J＝10.2，4.8Hz，4H)，1.74(d，J＝5.0Hz，2H)，
1.55(d，J＝4.2Hz，4H)。

[0235] 实施例31 (E)-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-2-烯-1-胺(化合物IB-1)的制备

[0236]

[0237] 除了将(E)-3-(4-甲苯基)-丙烯醛换成中间体X-1外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例7，得到97毫克黄色油状标题化合物，收率是96％。该化合物盐酸盐为黄色固体。

[0238] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.50(d，J＝7.1Hz，2H)，7.36(dt，J＝20.1，7.0Hz，3H)，7.31-7.13(m，3H)，7.02-6.75(m，1H)，6.42-6.18(m，1H)，4.17(d，J＝13.7Hz，2H)，3.81(dd，J＝30.6，7.2Hz，2H)，2.86(dd，J＝10.6，5.3Hz，4H)，1.89(d，J＝5.5Hz，2H)，1.66(s，4H)；

[0239] MS(ESI)m/z 292.0[M+H]+。

[0240] 实施例32 (E)-N-乙基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-2-烯-1-胺(化合物IB-2)的制备

[0241]

[0242] 将200毫克IB-1溶于10毫升无水N，N-二甲基甲酰胺中，冰浴下分批加入56毫克氢化钠，搅拌反应15分钟。随后加入0.6毫升碘乙烷，氮气保护、室温下反应过夜。反应结束后，向反应体系中加入水，用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离，得到标题化合物，162毫克油状物，收率为74％。该化合物盐酸盐为黄褐色油状物。

[0243] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.61-7.46(m，2H)，7.45-7.32(m，3H)，7.25(t，J＝9.0Hz，3H)，6.91(d，J＝15.8Hz，1H)，6.39-6.23(m，1H)，4.46-4.21(m，2H)，4.10-3.81(m，2H)，3.26(dd，J＝14.4，7.2Hz，2H)，2.99-2.75(m，4H)，1.89(d，J＝5.2Hz，2H)，1.75-1.53(m，4H)，
1.50-1.36(m，3H)；

[0244] MS(ESI)m/z 320.1[M+H]+。

[0245] 实施例33 (E)-N-异丙基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-2-烯-1-胺(化合物IB-3)的制备

[0246]

[0247] 除了将碘乙烷换成2-碘丙烷外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例32，得到158毫克黄色油状标题化合物，收率是69％。该化合物盐酸盐为浅黄色固体。

[0248] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.44(d，J＝6.7Hz，2H)，7.36(dd，J＝15.4，7.6Hz，3H)，7.24(t，J＝7.2Hz，3H)，6.85(d，J＝15.7Hz，1H)，6.21-6.07(m，1H)，4.44(d，J＝13.3Hz，
1H)，4.20(d，J＝13.3Hz，1H)，4.02(dd，J＝13.5，7.5Hz，1H)，3.92(dd，J＝13.6，7.2Hz，1H)，
3.76(dt，J＝13.3，6.6Hz，1H)，2.95-2.74(m，4H)，1.88(d，J＝5.1Hz，2H)，1.73-1.54(m，
4H)，1.55-1.41(m，6H)；

[0249] MS(ESI)m/z 334.0[M+H]+。

[0250] 实施例34 (E)-3-(噻吩-2-基)丙烯酸乙酯(中间体XI-1)的制备

[0251]

[0252] 将1克(E)-3-(噻吩-2-基)丙烯酸、1毫升二氯亚砜加入到10毫升乙醇溶液中，加热回流2小时。反应结束后，浓缩，洗涤，得到标题化合物，1.2克无色油状物，收率为98％。

[0253] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.78(d，J＝15.7Hz，1H)，7.37(d，J＝5.0Hz，1H)，7.29-7.19(m，1H)，7.09-6.97(m，1H)，6.24(d，J＝15.7Hz，1H)，4.25(q，J＝7.1Hz，2H)，1.35-1.31(m，3H)。

[0254] 实施例35 (E)-3-(噻吩-2-基)丙-2-烯-1-醇(中间体XII-1)的制备

[0255]

[0256] 将549毫克中间体XI-1溶于25毫升无水四氢呋喃中，氮气保护、0℃下缓慢加入3.9毫升1.5摩尔/升的二异丁基氢化铝甲苯溶液，室温下搅拌反应过夜。反应结束后，加入甲醇淬灭反应，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离得到标题化合物，368毫克无色油状物，收率为87％。

[0257] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.16(d，J＝2.8Hz，1H)，6.96(d，J＝2.7Hz，2H)，6.75(d，J＝15.7Hz，1H)，6.20(dt，J＝15.6，5.7Hz，1H)，4.28(d，J＝5.7Hz，2H)。

[0258] 实施例36 (E)-1-溴-3-(噻吩-2-基)丙烯(中间体XIII-1)的制备

[0259]

[0260] 除了将中间体VIII-1换成中间体XII-1外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例8，得到471毫克黄色油状标题化合物，收率是88％。

[0261] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.13(s，1H)，6.97-6.83(m，2H)，6.66(t，J＝27.3Hz，1H)，6.22-6.03(m，1H)，4.08-4.05(m，2H)。

[0262] 实施例37 (E)-N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-(噻吩-2-基)-丙-2-烯-1-胺(化合物IC-1)的制备

[0263]

[0264] 除了将中间体IX-1换成中间体XIII-1外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例9，得到68毫克褐色油状标题化合物，收率是42％。该化合物盐酸盐为红褐色油状物。

[0265] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.40(t，J＝20.3Hz，1H)，7.23(t，J＝11.8Hz，4H)，7.04(dd，J＝35.2，15.6Hz，2H)，6.20-6.00(m，1H)，4.40(t，J＝11.6Hz，1H)，4.23-4.15(m，1H)，4.02(dd，J＝13.1，6.9Hz，1H)，3.93-3.75(m，1H)，2.96-2.66(m，7H)，1.90(s，2H)，1.66(s，
4H)；

[0266] MS(ESI)m/z 312.0[M+H]+。

[0267] 实施例38 N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-1-[(1R，2R)-2-苯基环丙基]-甲胺(化合物IC-2)的制备

[0268]

[0269] 除了将(E)-3-(噻吩-2-基)丙烯酸换成(1S，2R)-2-苯基环丙烷羧酸外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例34-37，得到52毫克黄色油状标题化合物，收率是33％。该化合物盐酸盐为黄色油状物。

[0270] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.37-7.04(m，8H)，4.45(t，J＝13.1Hz，1H)，4.24-4.15(m，1H)，3.37(s，1H)，3.17(dd，J＝20.3，12.1Hz，1H)，2.86(d，J＝7.3Hz，7H)，1.90(s，2H)，1.66(s，4H)，1.47(s，1H)，1.16-1.04(m，1H)，1.01-0.82(m，2H)；

[0271] MS(ESI)m/z 320.1[M+H]+。

[0272] 实施例39 1-苯基-3-溴丙炔(中间体XIV-1)的制备

[0273]

[0274] 除了将中间体VIII-1换成3-苯基-丙-2-炔-1-醇外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例8，得到458毫克黄色油状标题化合物，收率是84％。

[0275] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.44(d，J＝4.5Hz，2H)，7.32(s，3H)，4.16(s，2H)。

[0276] 实施例40 N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)甲基]-3-苯基-丙-2-炔-1-胺(化合物ID-1)的制备

[0277]

[0278] 除了将中间体IX-1换成中间体XIV-1外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例9，得到116毫克无色油状标题化合物，收率是71％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0279] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.58(d，J＝7.5Hz，2H)，7.52-7.37(m，3H)，7.28(d，J＝11.3Hz，3H)，4.34(d，J＝49.5Hz，4H)，2.99(s，3H)，2.88(s，4H)，1.90(s，2H)，1.67(s，4H)；

[0280] MS(ESI)m/z 304.0[M+H]+。

[0281] 实施例41 N-甲基-N-[(6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)亚甲基]-3-苯基-丙-1-胺(化合物IE-1)的制备

[0282]

[0283] 除了将中间体IX-1换成(3-溴丙基)苯外，其余所需原料、试剂及制备方法同实施例9，得到121毫克无色油状标题化合物，收率是75％。该化合物盐酸盐为白色固体。

[0284] 1H-NMR(400MHz，MeOD)δ7.35-7.25(m，2H)，7.26-7.10(m，6H)，4.19(d，J＝50.0Hz，2H)，3.13(s，2H)，2.90-2.83(m，4H)，2.80(s，3H)，2.71(t，J＝7.4Hz，2H)，2.18-1.98(m，
2H)，1.89(d，J＝4.9Hz，2H)，1.65(s，4H)；

[0285] MS(ESI)m/z 308.1[M+H]+。

[0286] 实施例42 本发明化合物抑制金黄色色素合成活性的初步筛选实验

[0287] 实验用菌株：新鲜活化的金黄色葡萄球菌Newman野生株(Staphylococcus aureus subsp.aureus str.Newman)及其同源的crtN插入突变株(无金黄色色素合成)。

[0288] 实验用培养基：胰蛋白胨大豆肉汤培养基(Tryptone Soy broth，TSB)，英国Oxid公司产品，加单蒸水配制，121℃、15分钟灭菌后，备用。

[0289] 初筛实验方法：

[0290] (1)化合物的配制：将本发明的化合物用二甲基亚砜(DMSO)溶解，配置成浓度为10mM的母液。取100μL母液加400μL的DMSO稀释至浓度为2mM，混匀后取250μL(2mM)溶液继续加等量DMSO进行2倍稀释，直至溶液浓度为0.0625mM，待用。

[0291] (2)菌株的培养：从TSA平板上挑取Newman菌株单克隆至装有4mL无菌TSB培养基的试管中，37℃、250rpm培养12小时后，备用。

[0292] (3)本发明的化合物抑制金黄色葡萄球菌中金黄色色素合成能力的初筛：取无菌试管，向每支试管中加入新鲜灭菌的TSB培养基3980μL。随后，向试管中分别加入20μL已配制好的浓度为10mM、2mM、1mM、0.5mM、0.25mM、0.125mM、0.0625mM的化合物溶液，使本发明的化合物终浓度分别为50μM、10μM、5μM、2.5μM、1.25μM、0.625μM、0.3125μM。同时，向另一支试管中加入20μL的DMSO溶液(终浓度为0.5％)，作为无化合物的阴性对照。向每支试管中分别加入40μL培养12小时的菌液(接种量∶培养基＝1∶100)，并于37℃、250rpm培养24小时后，取出菌液1.5mL，14000g离心2分钟后，去上清，观察菌株在加入特定浓度的本发明化合物后合成的金黄色色素与阴性对照相比是否有明显减少。

[0293] 图1和2显示了2个本发明化合物抑制金黄色色素合成活性初步筛选实验结果，其中图1为显示本发明化合物IA-8抑制金黄色色素合成的效果的照片，从左至右随着IA-8的浓度依次降低，金黄色色素合成量增加，颜色加深。图2为显示本发明化合物IC-1抑制金黄色色素合成的效果的照片，从左至右随着IC-1的浓度依次降低，金黄色色素合成量增加，颜色加深。

[0294] 实施例43 本发明化合物抑制金黄色色素合成活性的IC50测定实验

[0295] 化合物浓度的选择：根据初筛结果，确定各个化合物抑制金黄色色素合成的能力。对于有较强活性的化合物，如其在初筛最低浓度时仍可强烈抑制色素的产生，则可按初筛类似方法继续实验，直至化合物基本不能抑制金黄色色素的产生。根据实验结果，针对每个化合物设计11个不同的浓度梯度，使其抑制色素合成的能力基本包含0％～100％。

[0296] 菌株的培养：从TSA平板上挑取Newman菌株及crtN突变株单克隆至装有4mL无菌TSB培养基的试管中，37℃、250rpm培养12小时后，备用。

[0297] IC50的测定：取无菌试管，向每支试管中加入新鲜灭菌的TSB培养基3980μL。随后，向试管中分别加入20μL已配制好的11个浓度梯度的本发明化合物。同时，向另两支试管中，分别加入20μL的DMSO溶液(终浓度0.5％)作为无化合物的对照。向加入DMSO溶液的两支试管中分别加入40μL培养12小时的Newman(阴性对照)和crtN突变株(阳性对照)。其余加入化合物的试管中分别加入40μL培养12小时的Newman菌株。所有试管于37℃、250rpm培养12小时后换至30℃、250rpm继续培养36小时以增加色素的积累。完成培养后，取3mL菌液于2mL EP管中，14000g离心2分钟后，去上清，用PBS缓冲液洗涤两次(每次1mL)后，加入300μL甲醇溶液，蜗旋混匀后于55℃水浴锅中加热3分钟提取色素。随后14000g离心2分钟，吸取甲醇提取液于1.5mL EP管，再加入等量甲醇溶液，重复提取两次，合并三次提取的色素。以crtN突变体的甲醇提取液为空白对照，测定450nm波长下各样品的吸光度值，并测定无化合物阴性对照的吸光度值。

[0298] 本发明化合物在各浓度下，色素合成的相对水平＝A450(样品)/A450(阴性对照)*100％。以化合物的摩尔浓度为横座标，以色素合成的相对水平为纵座标，在Graphpad prism 5.0软件中进行抑制剂浓度-抑制率(log(inhibitor)vs response)的曲线拟合，并由软件根据拟合结果计算化合物抑制色素合成的IC50。

[0299] 对合成的6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物，选取金黄色葡萄球菌进行抑制金黄色色素合成活性的IC50测试，活性数据如表1所示，共发现了14个本发明化合物对抑制金黄色色素合成具有强效活性，其中半数有效抑制浓度IC50＜10nM的活性化合物有2个，半数有效抑制浓度10nM＜IC50＜100nM的活性化合物有8个，半数有效抑制浓度100nM＜IC50＜1000nM的活性化合物有4个。

[0300] 表1. 6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物对金黄色色素合成的抑制活性数据(IC50，nM)

[0301]

[0302] 由表1可以看出，本发明的具有结构通式I的6，7，8，9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-烷基胺类化合物大部分具有很强对金黄色色素合成的抑制活性，说明本发明的化合物可以发展为新型的、靶向抑制金黄色葡萄球菌毒力因子金黄色色素合成的抗菌药物。