用于治疗疾病诸如糖尿病的吡咯烷GPR40调节剂转让专利
申请号 : CN201580023783.8
文献号 : CN106458987B
文献日 : 2019-09-24
发明人 : 孙崇庆
申请人 : 百时美施贵宝公司
摘要 :
权利要求 :
1.式(II)化合物或其立体异构体、互变异构体或药用盐:其中:
X为O;
环B独立地为4至7元饱和杂环,所述杂环含碳原子和环B中所示的氮原子;且环B取代有
0-4个R2;
1
R独立地为苯基或杂芳基,所述杂芳基选自吡咯基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基和哒嗪基;其中所述苯基和杂芳基各自取代有0-3个R6;
R2在每次出现时独立地为C1-4烷基;
R3独立地选自:C1-6烷基、取代有0-1个R10的C1-6烷氧基和卤代C1-4烷基;
R4a独立地选自:H、C1-4烷基和C1-4烷氧基;
R5在每次出现时独立地选自:卤素、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基和卤代C1-6烷氧基;
R6在每次出现时独立地选自:卤素和C1-4烷氧基;且R10在每次出现时独立地为C1-4烷氧基。
2.权利要求1的式(II)化合物或其立体异构体、互变异构体或药用盐,其中:环B独立地选自:
R1独立地为取代有0-3个R6的苯基或取代有0-2个R6的杂芳基;其中所述杂芳基选自:吡唑基、吡啶基、嘧啶基和吡嗪基;
2
R在每次出现时独立地为C1-4烷基;
R3独立地选自:C1-4烷基、取代有0-1个R10的C1-4烷氧基和卤代C1-4烷基;
R4a独立地选自:H、C1-4烷基和C1-4烷氧基;
R6在每次出现时独立地选自:卤素和C1-4烷氧基;和
10
R 在每次出现时独立地为C1-4烷氧基。
3.根据权利要求1至2中任一项的式(II)化合物或其立体异构体、互变异构体或药用盐,其中:环B独立地选自:
R1在每次出现时独立地为取代有0-3个R6的苯基、取代有0-2个R6的吡啶基、取代有0-2个R6的吡嗪基或取代有0-2个R6的嘧啶基;和2
R在每次出现时独立地为C1-4烷基。
4.根据权利要求1至2中任一项的式(II)化合物或其立体异构体、互变异构体或药用盐,其中:R1在每次出现时独立地为取代有0-3个R6的苯基或取代有0-2个R6的吡啶基;
R3在每次出现时独立地选自:取代有0-1个C1-4烷氧基的C1-4烷氧基和卤代C1-4烷基;和R6在每次出现时独立地选自:卤素和C1-4烷氧基。
5.式(III)和(IIIa)的化合物或其立体异构体、互变异构体或药用盐:其中:
R1在每次出现时独立地为取代有0-3个R6的苯基或者取代有0-2个R6的吡啶基;
R2在每次出现时独立地为C1-4烷基;
R3在每次出现时独立地为:取代有0-1个C1-4烷氧基的C1-4烷氧基和卤代C1-4烷基;
R4a在每次出现时独立地选自:H和C1-4烷基;和R6在每次出现时独立地选自:卤素和C1-4烷氧基。
6.具有以下结构的化合物或其立体异构体、互变异构体或药用盐:
7.具有以 下结构的 化合物或其立体异构体、互 变异构体或 药用盐 :
8.具有以 下结构的 化合物或其立体异构体、互 变异构体或 药用盐 :
9.具有以 下结构的 化合物或其立体异构体、互 变异构体或 药用盐 :
10.具有以下结构的化合物或其立体异构体、互变异构体或药用盐:
11.具有以下结构的化合物或其立体异构体、互变异构体或药用盐:
12.具有以下结构的化合物或其立体异构体、互变异构体或药用盐:
13.药物组合物,其包含药用载体和权利要求1-12中任一项的化合物或其立体异构体、互变异构体或药用盐。
14.权利要求13的药物组合物,其还包含一种或多种其它的选自以下的合适的治疗剂:抗糖尿病剂、抗高血糖剂、抗高胰岛素血症剂、抗视网膜病变剂、抗神经病变剂、抗肾病变剂、抗动脉粥样硬化剂、抗缺血剂、抗高血压剂、抗肥胖剂、抗血脂异常剂、抗再狭窄剂、抗胰腺炎剂、降脂剂、厌食剂和食欲抑制剂。
15.权利要求13的药物组合物,其还包含一种或多种其它的选自以下的合适的治疗剂:抗高血脂剂、抗高甘油三酯血症剂和抗高胆固醇血症剂。
16.权利要求13的药物组合物,其还包含二肽基肽酶-IV抑制剂和/或钠-葡萄糖转运体-2抑制剂。
17.权利要求1-12中任一项的化合物在制备用于预防、调节或治疗非酒精性脂肪性肝炎的药物中的用途。
18.权利要求17的用于所述用途的化合物,其中权利要求1-12中任一项的化合物与一种或多种其它治疗剂同时、分开或依序使用。
说明书 :
用于治疗疾病诸如糖尿病的吡咯烷GPR40调节剂
技术领域
背景技术
症后胰岛素分泌不足有关的渐增胰岛素抗性。已证明游离脂肪酸(FFA)主要通过增强葡萄
糖-刺激胰岛素分泌(GSIS)来影响自β细胞的胰岛素分泌。已知β细胞中所表达的G-蛋白偶
联受体(GPCR)响应血浆葡萄糖水平的变化来调节胰岛素释放。GPR40(也称为脂肪酸受体1
(FFAR1))为膜-结合FFA受体,其优先地在胰岛中且具体而言在β细胞中表达并介导中链到
长链脂肪酸诱导的胰岛素分泌。GPR40还在其中活化促进例如GLP-1、GIP、CCK和PYY等肠促
胰岛素激素的分泌的肠内分泌细胞中表达。为借助增强的血糖控制降低2型糖尿病的医疗
负担,GPR40调节剂化合物有希望发挥肠促胰岛素效应以促进GSIS以及与宽范围的抗糖尿
病药物的潜在组合。
发明内容
征及其组成病症、葡萄糖代谢障碍、肥胖症及其它疾病(malady)。
具体实施方式
0-2个R的吡嗪基、取代有0-2个R的嘧啶基或取代有0-2个R的噻唑基;和
素血症剂、抗视网膜病变剂、抗神经病变剂、抗肾病变剂、抗动脉粥样硬化剂、抗缺血剂、抗高血压剂、抗肥胖剂、抗血脂异常剂、抗高血脂剂、抗高甘油三酯血症剂、抗高胆固醇血症
剂、抗再狭窄剂、抗胰腺炎剂、降脂剂、厌食剂和食欲抑制剂。
列汀(vildagliptin)、利格列汀(linagliptin)、阿格列汀(alogliptin)和“BMS DPP4i”的
成员)和/或钠-葡萄糖转运体-2(SGLT2)抑制剂(例如选自达格列净(dapagliflozin)、卡格
列净(canagliflozin)、依帕列净(empagliflozin)和瑞格列净(remagliflozin)的成员)。
员)。
它类型的治疗剂组合给药治疗有效量的至少一种本发明化合物。
(dyslipidemia)、高脂血症、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、低的高密度脂蛋白(HDL)、高的低密度脂蛋白(LDL)、非心脏缺血、胰腺炎、脂质失调症以及例如NASH(非酒精性脂肪性肝
炎)、NAFLD(非酒精性脂肪肝疾病)和肝硬化的肝病、包括溃疡性结肠炎和克罗恩病的炎性
肠病、乳糜泻、骨关节炎、肾炎、牛皮癣、特应性皮炎和皮肤炎症。
种本发明化合物和/或至少一种其它类型的治疗剂组合给药治疗有效量的至少一种本发明
化合物。
疗有效量的至少一种本发明化合物。
治疗有效量的至少一种本发明化合物。
疗有效量的至少一种本发明化合物。
治疗有效量的至少一种本发明化合物。
治疗有效量的至少一种本发明化合物。
药治疗有效量的至少一种本发明化合物。
发明化合物。优选地,第二治疗剂为,例如,DPP4抑制剂(例如选自沙格列汀、西他列汀、维格列汀、利格列汀和阿格列汀的成员)。
过注射给药。可任选地与本发明的GPR40受体调节剂组合使用的其它类型的抗糖尿病剂可
为一种、两种、三种或更多种抗糖尿病剂或抗高血糖剂,所述抗糖尿病剂或抗高血糖剂可以
同一剂型口服给药、以分开的口服剂型给药或通过注射给药以产生其它药理学益处。
制剂(例如西他列汀、沙格列汀、阿格列汀、利格列汀和维格列汀);双胍类(例如二甲双胍和苯乙双胍);磺酰基脲类(例如格列本脲(glyburide)、格列美脲(glimepiride)和格列吡嗪
(glipizide));葡萄糖苷酶抑制剂(例如阿卡波糖(acarbose)、米格列醇(miglitol));PPAR
γ激动剂,例如,噻唑烷二酮类(例如罗格列酮(rosiglitazone)和吡格列酮
(pioglitazone));PPARα/γ双重激动剂(例如莫格列扎(muraglitazar)、替格列扎
(tesaglitazar)和阿格列扎(aleglitazar));葡糖激酶活化剂;GPR119受体调节剂(例如
MBX-2952、PSN821和APD597);GPR120受体调节剂(例如如在Shimpukade,B.et
al.J.Med.Chem.2012,55(9),4511-4515中所述);SGLT2抑制剂(例如达格列净、卡格列净、
依帕列净和瑞格列净) ;MGAT抑制剂 (例如如 在Ba rlind ,J .G .e t
al.Bioorg.Med.Chem.Lett.,23(9):2721-2726(2013)中所述);胰淀素(amylin)类似物(例
如普兰林肽(pramlintide))和/或胰岛素。
(phendimetrazine)、芬特明(phentermine)、奥利司他(orlistat)、西布曲明
(sibutramine)、氯卡色林(lorcaserin)、普兰林肽、托吡酯(topiramate)、MCHR1受体拮抗
剂、胃泌酸调节素(氧基ntomodulin)、纳曲酮(naltrexone)、胰淀素肽、NPY Y5受体调节剂、NPY Y2受体调节剂、NPY Y4受体调节剂、西替司他(cetilistat)、5HT2c受体调节剂等。本发明的GPR40受体调节剂还可与胰高血糖素-样肽-1受体(GLP-1 R)的激动剂(例如艾塞那肽
(exenatide)、利拉鲁肽(liraglutide)、GPR-1(1-36)酰胺、GLP-1(7-36)酰胺、GLP-1(7-
37))组合使用,所述药物可经由注射、鼻内或通过经皮或含服装置给药。
合任一其它实施方案或多个实施方案来描述其它实施方案。还应当理解的是,实施方案的
每一个别要素为其自身独立的实施方案。此外,实施方案的任一要素意欲与任一实施方案
的任一和所有其它要素组合以描述其它实施方案。
或空间群排列上不同的化合物。除非另外指明,否则所有手性(对映异构体和非对映异构
体)和外消旋形式均在本发明范围内。术语"手性"是指镜像配对体具有非可重叠性的分子,
而术语"非手性"是指与它们的镜像配对体可重叠的分子。术语"外消旋混合物"和"外消旋
体"是指两个对映异构体物质的等摩尔混合物,其不具有旋光性。
Z-)几何异构体,且其可分离成异构体的混合物或分开的异构体形式。
的所有方法均视为本发明的部分。在制备对映异构体或非对映异构体产物时,其可通过常
规方法(例如通过层析或分段结晶)进行分离。
形式。可将游离碱或酸转化成盐;可将盐转化成游离化合物或另一种盐;可将本发明异构体
化合物的混合物分离成单独的异构体。本发明化合物、其游离形式和盐可以多种互变异构
体形式存在,其中氢原子转置到分子的其它部分上且由此分子的原子之间的化学键发生重
排。应当理解的是,可存在的所有互变异构体形式均包括在本发明内。
基(Me)、乙基(Et)、丙基(例如正-丙基和异丙基)、丁基(例如正-丁基、异丁基、叔丁基)和戊基(例如正-戊基、异戊基、新戊基)。当使用“C0烷基”或“C0亚烷基”时,其意欲表示直接键。
链和直-链饱和脂族烃基团的“氟烷基”。
地,“卤代烷基硫基”或“硫代卤代烷氧基”表示具有指定数量碳原子的经硫桥进行连接的如上文所定义的卤代烷基;例如三氟甲基-S-和五氟乙基-S-。
基、环丁烯基、环戊基、环戊烯基、环己基、环庚烯基、环庚基、环庚烯基、金刚烷基、环辛基、环辛烯基、环辛二烯基、[3.3.0]二环辛烷、[4.3.0]二环壬烷、[4.4.0]二环癸烷(十氢萘)、[2.2.2]二环辛烷、芴基、苯基、萘基、茚满基、金刚烷基、蒽基和四氢萘基(四氢萘)。如上文所示,桥接环还包括在碳环的定义内(例如[2.2.2]二环辛烷)。除非另外指定,否则优选的
碳环为环丙基、环丁基、环戊基、环己基、苯基、茚满基和四氢萘基。当使用术语“碳环”时,其意欲包括“芳基”。当一个或多个、优选地一个至三个碳原子连接两个非相邻碳原子时,则产生桥接环。优选的桥为一个或两个碳原子。应当注意的是,桥总是将单环转化成三环。当环
桥接时,针对环所列举的取代基还可存在于桥上。
且第二环为饱和的、部分不饱和的或不饱和的5元或6元碳环。二环碳环基团可在任一碳原
子处连接至其侧基,从而得到稳定的结构。如果所得化合物是稳定的,则本文所述的二环碳
环基团可在任一碳上被取代。二环碳环基团的实例为,但不限于,萘基、1,2-二氢萘基、1,2,
3,4-四氢萘基和茚满基。
John Wiley&Sons,Inc.,New York,1997中。“C6-10芳基”是指苯基和萘基。
为N或NR,其中R为H或另一取代基)。杂环可在任何杂原子或碳原子处连接至其侧基,从而得
到稳定的结构。如果所得化合物是稳定的,则本文所述的杂环基可在碳或氮原子上被取代。
杂环中的氮可任选地被季铵化。优选地,当杂环基中的S和O原子总数超过1时,则这些杂原
子彼此不相邻。优选地,杂环中的S和O原子总数不大于1。当使用术语“杂环”时,其意欲包括杂芳基。
2,4-三唑基、1,2,5-三唑基、1,3,4-三唑基和呫吨基。本发明还包括含有例如上述杂环的稠
合环和螺环化合物。
在所述两个稠合环中,一个环为5元或6元单环芳香族环,其包含5元杂芳基环、6元杂芳基环
或苯并环,其各自稠合至第二环。第二环为饱和的、部分不饱和的或不饱和的5元或6元单
环,且包含5元杂环、6元杂环或碳环(条件是当第二环为碳环时第一环并非苯并环)。
当杂环基中的S和O原子总数超过1时,则这些杂原子彼此不相邻。优选地,杂环中的S和O原
子总数不大于1。
2,4-噻二唑基、异噻唑基、嘌呤基、咔唑基、苯并咪唑基、二氢吲哚基、苯并二氧杂环戊基和苯并二噁烷基。杂芳基为取代的或未取代的。所述氮原子可为取代的或未取代的(即如果被
定义,则为N或NR,其中R为H或另一取代基)。所述氮和硫杂原子可任选地被氧化(即N→O和S
(O)p,其中p为0、1或2)。
两个碳原子、一个氮原子、两个氮原子和碳-氮基团。应当注意的是,桥总是将单环转化成三环。当环桥接时,针对环所列举的取代基还可存在于桥上。
Protecting Groups in Organic Synthesis,Fourth Edition,Wiley(2007)and The
Peptides:Analysis,Synthesis,Biology,Vol.3,Academic Press,New York(1981)中列举
的那些,通过引用的方式将披露内容并入本文中。胺保护基团的实例包括但不限于以下类
型:(1)酰基类型,例如甲酰基、三氟乙酰基、邻苯二甲酰基和对-甲苯磺酰基;(2)芳族氨基甲酸酯类型,例如苄基氧基羰基(Cbz)和取代的苄基氧基羰基、1-(对-联苯)-1-甲基乙氧基
羰基和9-芴基甲基氧基羰基(Fmoc);(3)脂族氨基甲酸酯类型,例如叔丁基氧基羰基(Boc)、
乙氧基羰基、二异丙基甲氧基羰基和烯丙基氧基羰基;(4)环状烷基氨基甲酸酯类型,例如
环戊基氧基羰基和金刚烷基氧基羰基;(5)烷基类型,例如三苯基甲基和苄基;(6)三烷基甲
硅烷,例如三甲基甲硅烷;(7)含有硫醇的类型,例如苯基硫羰基和二硫杂琥珀酰基;和(8)
烷基类型,例如三苯基甲基、甲基及苄基;以及取代的烷基类型,例如2,2,2-三氯乙基、2-苯基乙基和叔丁基;以及三烷基甲硅烷类型,例如三甲基甲硅烷。
的双键(例如C=C、C=N或N=N)。
此,所显示和要求保护的氮原子视为均涵盖所显示氮及其N-氧化物(N→O)衍生物。
述基团可任选地取代有至多三个R基团,且在每次出现时R独立地选自R的定义。
的其余部分上的原子时,则上述取代基可经由该取代基中的任一原子来键合。
和/或其它问题或并发症,并与合理的益处/风险比相称。
性基团(例如羧酸)的碱金属盐或有机盐。药用盐包括由(例如)无-毒的无机或有机酸形成
的母体化合物的常规无-毒盐或季铵盐。例如,上述常规无-毒盐包括衍生自例如以下无机
酸的那些:盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸;以及由例如以下有机酸制备的盐:乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、磺胺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸和羟乙磺酸等。
量量的适合碱或酸反应来制备上述盐;通常,优选如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈等非水性介质。合适盐的列表可参见Allen,L.V.,Jr.,ed.,Remington:The Science and
Practice of Pharmacy,22nd Edition,Pharmaceutical Press,London,UK(2012),通过引
用的方式将其披露内容并入本文中。
述前药衍生物的实例可参见:
al.,eds.,Harwood Academic Publishers(1991);
选地口服给药上述前药。肠胃外给药可用于酯自身具有活性的情形或在血液中发生水解的
那些情形。式I化合物的生理学上可水解酯的实例包括C1-6烷基、C1-6烷基苄基、4-甲氧基苄基、茚满基、邻苯二甲酰基、甲氧基甲基、C1-6烷酰基氧基-C1-6烷基(例如乙酰氧基甲基、新戊酰基氧基甲基或丙酰基氧基甲基)、C1-6烷氧基羰基氧基-C1-6烷基(例如甲氧基羰基-氧基甲
基或乙氧基羰基氧基甲基、甘氨酰基氧基甲基、苯基甘氨酰基氧基甲基、(5-甲基-2-氧代-
1,3-二氧杂环戊烯-4-基)-甲基)的酯和用于例如青霉素和头孢菌素技术中的其它公知的
生理学上可水解酯。上述酯可通过本领域中已知的常规技术来制备。上述酯可通过本领域
中已知的常规技术来制备。
(第二版,reproduced(2006));Testa,B.et al.,Hydrolysis in Drug and Prodrug
Metabolism.Chemistry,Biochemistry and Enzymology,VCHA and Wiley-VCH,Zurich,
Switzerland(2003);Wermuth,C.G.,ed.,The Practice of Medicinal Chemistry,第三
版,Academic Press,San Diego,CA(2008)中。
含在本发明化合物中的同位素的实例包括如下元素的同位素:氢,例如2H(也表示为用于氘
的’D’)和3H;碳,例如11C、13C和14C;氮,例如13N和15N;氧,例如15O、17O和18O。本发明的某些同位素-标记化合物(例如引入放射性同位素的那些)可用于药物和/或底物组织分布研究中。放
射性同位素氚(3H)和碳-14(14C)因其易于引入且易于检测而尤其可用于此目的。用例如氘
(2H)等较重同位素取代可因较强代谢稳定性而提供某些治疗优点,例如,活体内半-衰期延
长或剂量要求降低,且因此在某些环境下可优选。用正电子发射同位素(例如11C、15O和13N)取代可在正电子发射断层扫描(PET)研究中用于检查底物受体占据情况。本发明的同位素-
标记化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术来制备,或者可通过与本文所述方
法类似的方法使用适当的同位素-标记试剂替代以其它方式使用的未-经标记试剂来制备。
无-序配置存在。溶剂化物可包含化学计量或非化学计量量的溶剂分子。“溶剂化物”涵盖溶液-相和可分离溶剂化物。实例性溶剂化物包括但不限于水合物、乙醇合物、甲醇合物和异
丙醇合物。溶剂化方法是本领域公知的。
固体提供。可以采用冻干提供作为固体的本发明化合物。
来合成本发明化合物。优选方法包括但不限于下文所述的那些方法。在适于所用试剂和物
质且适于所要实现转化的溶剂或溶剂混合物中实施反应。有机合成领域技术人员应当理解
的是,分子上存在的官能团应与所提出的转化保持一致。有时这需要进行判断以修改合成
步骤的顺序或选择一种特定程序方案而非另一种以获得本发明的期望化合物。
人员容易地识别。对本领域技术人员显而易见的是与反应条件相容的取代基的限制,然后
必须使用替代方法。
和工作实施例中。下文方法中的保护和去保护可通过本领域中熟知的程序来实施(例如参
见Wuts,P.G.M.et al.,Protecting Groups in Organic Synthesis,第四版,Wiley
(2007))。有机合成和官能团转变的一般方法参见:Trost,B.M.et al.,eds.,
Comprehensive Organic Synthesis:Selectivity,Strategy&Efficiency in Modern
Organic Chemistry,Pergamon Press,New York,NY(1991);Smith,M.B.et al.,March’s
Advanced Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms,and Structure.第六版,Wiley&
Sons,New York,NY(2007);Katritzky,A.R.et al.,eds.,Comprehensive Organic
Functional Groups Transformations II,第二版,Elsevier Science Inc.,Tarrytown,
NY(2004);Larock,R.C.,Comprehensive Organic Transformations,VCH Publishers,
Inc.,New York,NY(1999)及其中的参考文献。
Katritzky et al.,eds.,Comprehensive Heterocyclic Chemistry,Pergamon Press
Inc.,New York(1996);Bellina,F.et al.,Tetrahedron,62:7213(2006);Wolfe,J.P.,
Eur.J.Org.Chem.,571(2007);Deng,Q.-H.et al.,Organic Letters,10:1529(2008);
Pisaneschi,F.et al.,Synlett,18:2882(2007);Najera,C.et al.,Angewandte Chemie,
International Edition,44(39):6272(2005);Sasaki,N.A.,Methods in Molecular
Medicine,23(Peptidomimetics Protocols):489(1999);Zhou,J.-Q.et al.,Journal of
Organic Chemistry,57(12):3328(1992);Coldham,I.et al.,Tetrahedron Letters,38
(43):7621(1997);Schlummer,B.et al.,Organic Letters,4(9):1471(2002);Larock,
R.C.et al.,Journal of Organic Chemistry,59(15):4172(1994);Galliford,C.V.et
al.,Organic Letters,5(19):3487(2003);Kimura,M.et al.,Angewandte Chemie,
International Edition,47(31):5803(2008);Ney,J.E.et al.,Adv.Synth.Catal.,347:
1614(2005);Paderes,M.C.et al.,Organic Letters,11(9):1915(2009);Wang,Y.-G.et
al.,Organic Letters,11(9):2027(2009);Cordero,F.M.et al.,Journal of Organic
Chemistry,74(11):4225(2009);Hoang,C.T.et al.,Journal of Organic Chemistry,74
(11):4177(2009).Luly,J.R.et al.,Journal of the American Chemical Society,105:
2859(1983);Kimball,F.S.et al.,Bioorganic and Medicinal Chemistry,16:4367
(2008);Bertrand,M.B.et al.,Journal of Organic Chemistry,73(22):8851(2008);
Browning,R.G.et al.,Tetrahedron,60:359(2004);Ray,J.K.et al.,Bioorganic and
Medicinal Chemistry,2(12):1417(1994);Evans,G.L.et al.,Journal of the American
Chemical Society,72:2727(1950);Stephens,B.E.et al.,Journal of Organic
Chemistry,74(1):254(2009);Spangenberg,T.et al.,Organic Letters,11(2):261
(2008);和Qiu,X.-L.et al.,Journal of Organic Chemistry,67(20):7162(2008)。
Phos预催化剂和碱如LiHMDS置换中间体A中的LG,或者任选经由未催化置换中间体A中的
LG。中间体G可以经由在碱如叔丁醇钠的存在下使用钯催化剂如Pd(OAc)2、膦配体如1,1′-
二(二-叔丁基膦基)二茂铁将吡咯烷F偶联至中间体E来合成。中间体G中的氰基可以在甲醇
的存在下经由酸如氢氯酸转化成甲基酯、然后经由LiOH水解,或者直接经由KOH水解,得到
式(I)化合物。
解(当P.G.为Boc基团时),得到中间体F。
病学组成部分(component)的综合征。代谢异常的特征通常为高血糖症和由胰岛素分泌缺
乏或减少和/或胰岛素分泌失效引起的碳水化合物、脂肪和蛋白质代谢变化。血管综合征由
导致心血管、视网膜和肾脏并发症的血管异常组成。外周和自主神经系统异常也是糖尿病
综合征的部分。显著地,糖尿病是由疾病造成的全球死亡的第四主要病因,是发达国家肾衰
竭的最大病因,是工业化国家视力丧失的主要病因,且在发展中国家的流行率增加最快。
设易于引起对胰岛分泌不足的获得性胰岛损伤或耗竭和/或遗传因素。
基酸、激素和FFA等其它刺激物也调控胰岛素分泌。因此,在正常环境下,响应食物摄取的来自β细胞的胰岛素分泌是由例如葡萄糖、氨基酸和FFA等营养素和如促胰岛素胰高血糖素样
肽1(GLP-1)等激素的复合刺激物诱发。还已知脂肪酸刺激若干肠饱食激素(包括胆囊收缩
素(CCK)、GLP-1和肽YY(PYY))的分泌。
表达的膜结合FFA受体。GPR40(例如人类GPR40 RefSeq mRNA ID NM_005303;例如,小鼠
GPR40RefSeq mRNA ID NM_194057)为位于染色体19q13.12处的GPCR。GPR40为由中链到长
链脂肪酸活化,且由此诱发信号传导级联,从而导致β细胞中[Ca2+]i的水平增加和胰岛素
分泌的后续刺激(Itoh et al.,Nature,422:173-176(2003))。已显示GPR40的选择性小分
子激动剂促进GSIS,并减少小鼠中的血糖(Tan et al.,Diabetes,57:2211-2219(2008))。
简言之,当在葡萄糖耐受性测试之前向正常小鼠或因遗传突变而易患糖尿病的小鼠给药
GPR40的活化剂时,观测到葡萄糖耐受性得以改善。在这些经治疗小鼠中还观测到血浆胰岛
素水平短暂增加。还已显示,GPR40激动剂恢复来自新生STZ大鼠胰脏β细胞中的GSIS,这表
明GPR40激动剂将在具有受损β细胞功能和质量的糖尿病中有效。已知脂肪酸刺激若干肠饱
食激素(包括胆囊收缩素(CCK)、GLP-1和肽YY(PYY))的分泌,且已显示GPR40与分泌上述激
素的细胞共位(Edfalk et al.,Diabetes,57:2280-2287(2008)Luo et al.PLoS ONE,7:1-
12(2012))。还已知脂肪酸在神经元发育和功能中起作用,且已报导GPR40为脂肪酸对神经
元的效应的潜在调节剂(Yamashima,T.,Progress in Neurobiology,84:105-115(2008))。
发明的GPR40调节剂化合物促进GSIS的促胰岛素效应以及与宽范围的抗糖尿病药物的潜在
组合。
性质,包括口服生物可用度、半衰期和清除率;(b)药学性质;(c)剂量需求;(d)降低血液药物浓度峰谷特性的因素;(e)增加受体处活性药物浓度的因素;(f)降低临床药物-药物相互
作用倾向的因素;(g)降低不良副作用的可能的因素,包括对其它生物靶标的选择性;以及
(h)改善治疗指数且具有较小低血糖症倾向。
包括但不限于年龄、性别、体重、家族史或胰岛素抗性体征(例如黑色棘皮病、高血压、血脂异常或多囊性卵巢综合征(PCOS))。
断为患有该疾病状态时。
比增加患有临床疾病状态的风险的因素来选择用于预防性疗法的患者。“预防”疗法可分为
(a)初级预防和(b)二级预防。将初级预防定义为治疗尚未呈现临床疾病状态的个体,而将
二级预防定义为预防相同或类似临床疾病状态的二次发生。
的活性成分的组合量,无论是组合给药、连续给药还是同时给药。
(zeocin)和500μg/mL G418。为实施基于荧光成像板读数仪(FLIPR)的钙通量测定来测量细
胞内Ca2+反应,以20,000个细胞/20μL培养基/孔的密度将表达GPR40的细胞平铺在384孔板
(BD Biocoat编号356697)上的酚红和无血清DMEM(Gibco编号21063-029)中,并温育过夜。
使用BD试剂盒编号80500-310或80500-301,在37℃利用20μL/孔具有1.7mM丙磺舒
(probenecid)和Fluo-3的汉克斯缓冲盐溶液(Hank’s buffered salt solution)将细胞温
育30min。将化合物溶于DMSO中,并用测定缓冲液稀释至期望浓度,并以3×溶液(20μL/孔)
添加至细胞中。运行荧光/发光读数仪FDSS(Hamamatsu)来读取细胞内Ca2+响应。
(Gibco目录编号12430-047)、10%合格的FBS(Sigma,目录编号F2442)、200μg/ml潮霉素
(Invitrogen,目录编号16087-010)和1.5μg/ml杀稻瘟菌素(Invitrogen,目录编号R210-
01)的生长培养基中常规培养细胞。将约1200万个至1500万个细胞置于具有生长培养基的
T175组织培养摇瓶(BD Falcon 353112)中,并在37℃利用5%CO2温育16-18小时(过夜)。翌
日,用含有1000ng/mL四环素(Fluka Analytical,目录编号87128)的生长培养基交换测定
培养基,以在具有5%CO2的37℃温育器将GPR40表达诱导18-24小时。诱导后,用PBS(Gibco,目录编号14190-036)洗涤细胞,并用Cell Stripper(Cellgro,目录编号25-056-CL)进行分
离。将10-20mL生长培养基加入到摇瓶中,且将细胞收集于50mL管(Falcon,目录编号
352098)中,并以1000RPM旋转5分钟。抽吸培养基,且将细胞再悬浮于10mL来自Cisbio IP-
One试剂盒(Cisbio,目录编号62IPAPEJ)的1×IP-One刺激缓冲液中。将细胞稀释至在刺激
缓冲液中的1.4x 106个细胞/mL中。
通过Echo acoustic纳米分配器(Labcyte,型号ECHO550)将20nL稀释的化合物转移至测定
板(来自Perkin Elmer的proxi-plate,目录编号6008289)中。然后通过Thermo(SN 836
330)Combi Drop将14μL稀释的细胞加入到该测定板中,并在室温温育45分钟。然后将3μL与来自Cisbio IP-One试剂盒的染料D2偶联的IP1加入到该测定板中,接着加入3μL来自该试
剂盒的Lumi4-Tb穴状化合物(cryptate)K。将该板在室温再温育1小时,然后在Envision
(Perkin Elmer型号2101)上以HTRF方案读数。以测试化合物的活化百分比(100%=最大响
应)对测试化合物在一定浓度范围内的活化数据绘图。针对背景进行校正[(低对照的样品
读数平均值)/(高对照的平均值-低对照的平均值)](低对照为不具有任何化合物的DMSO)
后,测定EC50值。EC50被定义为产生50%最大响应的测试化合物浓度,并使用4参数逻辑方程拟合数据来进行量化。以0.625μM的最终浓度相对于BMS标准参考化合物计算所观测到的最
大Y值(Ymax%)。
具有下式:
GIP、CCK和胰淀素)的产生/分泌。
发症、与糖尿病有关的大血管并发症、心血管疾病、代谢综合征及其各种组成病状、炎性疾
病及其它疾病。因此,据信本发明化合物可用于预防、抑制或治疗糖尿病、高血糖症、葡萄糖耐量受损、妊娠糖尿病、胰岛素抗性、高胰岛素血症、视网膜病变、神经病变、肾病变、糖尿病性肾病、急性肾损伤、心肾性综合征、急性冠状动脉综合征、伤口愈合延迟、动脉粥样硬化及其后遗症(急性冠状动脉综合征、心肌梗塞、心绞痛、外周血管疾病、间歇性跛行、心肌缺血、中风、心力衰竭)、代谢综合征、高血压、肥胖症、脂肪肝疾病、血脂异常、高血脂、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、低HDL、高LDL、血管再狭窄、外周动脉疾病、脂质失调症、例如NASH(非酒精性脂肪性肝炎)、NAFLD(非酒精性脂肪肝疾病)和肝硬化等肝病、神经变性疾病、认知损
伤、痴呆及治疗与糖尿病相关的副作用、脂质营养不良及由皮质类固醇治疗造成的骨质疏
松症。
(2001)。
悬浮液形式);经鼻,包括向鼻膜给药,例如通过吸入喷雾;局部,例如以乳膏剂或软膏剂形式;或经直肠,例如以栓剂形式。它们可单独给药,但通常使用基于所选给药途径和标准药
学实践选择的药物载体给药。
质,包括(即)佐剂、赋形剂或媒介物,例如稀释剂、防腐剂、填充剂、流动调控剂、崩解剂、润湿剂、乳化剂、悬浮剂、增甜剂、矫味剂、芳香剂、抗细菌剂、抗真菌剂、润滑剂和分散剂,这取决于给药模式和剂型的性质。
期给药途径;以及所靶向的治疗适应症。药用载体包括水性和非水性液体介质以及各种固
体和半固体剂型。上述载体还可包括除活性剂外的诸多不同成分和添加剂,上述其它成分
出于本领域技术人员公知的各种原因包括于制剂中,例如,稳定活性剂、粘合剂等。关于合
适的药用载体和载体选择中所涉及的因素的描述可参见多个容易获得的来源,例如Allen,
L.V.,Jr.et al.,Remington:The Science and Practice of Pharmacy(2 Volumes),22nd
Edition,Pharmaceutical Press(2012)。
250mg/天。在恒速输注期间,静脉内最优选剂量应为约0.01mg/kg/分钟至约10mg/kg/分钟。
本发明化合物可以单一日剂量给药,或者可以每日两次、三次或四次的分开剂量给药总日
剂量。
药物载体)的混合物形式进行给药。
量存在。
组合使用或与一种或多种其它治疗剂(例如抗糖尿病剂或其它药学活性物质)组合使用。
射给药。可任选地与本发明的GPR40受体调节剂组合使用的其它类型抗糖尿病剂可为一种、
两种、三种或更多种抗糖尿病剂或抗高血糖剂,所述抗糖尿病剂或抗高血糖剂可以同一剂
型口服给药、以分开的口服剂型给药或通过注射给药以产生其它药理学益处。
剂(DPP4i;例如,西他列汀、沙格列汀、阿格列汀、维格列汀)、双胍类(例如二甲双胍、苯乙双胍)、磺酰基脲类(例如格列本脲、格列美脲、格列吡嗪)、葡萄糖苷酶抑制剂(例如阿卡波糖、米格列醇)、PPARγ激动剂(例如噻唑烷二酮类(例如罗格列酮、吡格列酮)、PPARα/γ双重激动剂(例如莫格列扎、替格列扎、阿格列扎)、葡糖激酶活化剂(如Fyfe,M.C.T.et al.,Drugs of the Future,34(8):641-653(2009)中所述,且通过引用方式将该其并入本文中)、其它
11
GPR40受体调节剂(例如TAK-875)、GPR 9受体调节剂(例如MBX-2952、PSN821、APD597)、
GPR120受体调节剂(例如如Shimpukade,B.et al.,J.Med.Chem.,55(9):4511-4515(2012)
中所述)、钠-葡萄糖转运体-2(SGLT2)抑制剂(例如达格列净、卡格列净、依帕列净、瑞格列
净)、11b-HSD-1抑制剂(例如MK-0736、BI35585、BMS-823778和LY2523199)、MGAT抑制剂(例
如如Barlind,J.G.et al.,Bioorg.Med.Chem.Lett.,(2013),doi:10.1016/
j.bmcl.2013.02.084)中所述)、胰淀素类似物(例如普兰林肽)和/或胰岛素。关于用于治疗
糖尿病的当前和新出现疗法的综述可参见:Mohler,M.L.et al.,Medicinal Research
Reviews,29(1):125-195(2009),and Mizuno,C.S.et al.,Current Medicinal
Chemistry,15:61-74(2008)。
糖素-样肽-1受体(GLP-1R)的激动剂(例如艾塞那肽、利拉鲁肽、GPR-1(1-36)酰胺、GLP-1
(7-36)酰胺、GLP-1(7-37))组合使用(如Habener的美国专利第5,614,492号中所披露,通过
引用的方式将该专利的披露内容并入本文中),所述药剂可经由注射、经鼻内或通过经皮或
含服装置给药。关于用于治疗肥胖症的当前和新出现疗法的综述可参见:Melnikova,I.et
al.,Nature Reviews Drug Discovery,5:369-370(2006);Jones,D.,Nature Reviews:
Drug Discovery,8:833-834(2009);Obici,S.,Endocrinology,150(6):2512-2517(2009);
and Elangbam,C.S.,Vet.Pathol.,46(1):10-24(2009)。
用。
得尽管将活性成分组合成单一剂量单元,但仍使活性成分之间的物理性接触最小化(即减
少)。例如,可对其中一种活性成分包覆肠溶性包衣。通过以肠溶性包衣包覆其中一种活性
成分,可能不仅使所组合活性成分间的接触最小化,且还可能控制其中一种组分在胃肠道
中的释放,以使得所述其中一种组分不在胃中释放而是在肠中释放。其中一种活性成分还
可使用会影响在整个胃肠道内的持续释放且还用于使所组合活性成分间的物理性接触最
小化的物质包覆。此外,可另外以肠溶性包衣包覆持续释放的组分,以使得仅在肠中释放该
组分。另一方式可涉及调配组合产品,其中一种组分使用持续和/或肠释放聚合物包覆,且
另一组分也使用聚合物(例如低粘度等级的羟基丙基甲基纤维素(HPMC)或本领域中已知的
其它适当物质)包覆,从而进一步分离活性组分。聚合物包衣用于形成阻隔与另一组分交互
作用的另一个屏障(barrier)。
式以及其它形式。
合给药时,各组分可同时给药或在不同时间点以任意顺序依序给药。因此,可分开给药各组
分但时间足够接近以提供期望的治疗效应。
抗糖尿病活性的药学研究。例如,本发明化合物可用作测定中的参考以比较其已知活性与
具有未知活性的化合物。这将确保实验者适当地实施测定且提供比较依据,尤其在测试化
合物为参考化合物的衍生物的情形下。当研发新测定或方案时,可使用本发明化合物测试
其有效性。
insert),其说明所述药物组合物可用于治疗多种与GPR40有关的疾病或病症(如先前所定
义)。在另一实施方案中,药品说明书说明所述药物组合物可与第二治疗剂组合使用(如先
前所定义)以用于治疗多种与GPR40有关的疾病或病症。所述制品可进一步包含:(d)第二容
器,其中组分(a)和(b)位于第二容器内且组分(c)位于第二容器内或位于其外侧。位于第一
和第二容器内意指相应容器将物品容纳于其边界内。
容器外侧,或者其可在与第一容器并无任何物理连接方式下置于第二容器内侧。可替换地,
药品说明书位于第二容器外侧。当位于第二容器外侧时,优选地,药品说明书经由胶带、胶
水、钉或另一连接方法发生物理连接。可替换地,其可毗邻或接触第二容器外侧且并无物理
连接。
(United States Food and Drug Administration))确定。优选地,药品说明书具体列举已
批准使用药物组合物的适应症。药品说明书可由任意材料制得,人们可在该材料上阅读其
中或其上所含有的信息。优选地,药品说明书为上面形成(例如印刷或施加)有期望信息的
可印刷材料(例如纸、塑料、纸板、箔、粘着剂背衬纸或塑料等)。
定,否则使用本文所披露的方案和其它方法来制备、分离和表征本申请所述的化合物或者
可使用所述方案和其它方法进行制备。
转换光谱仪实施1H-nOe实验。
参照残余溶剂峰(CD3SOCD2H为2.49ppm,CD2HOD为3.30ppm,CHD2CN为1.94,CHCl3为7.26ppm,CDHCl2为5.32ppm)。
交的PCT/US2013/070213)(780mg,2.79mmol)在CH2Cl2(10mL)中的搅拌溶液中添加Et3N
(0.778mL,5.58mmol),接着滴加甲磺酰氯(0.326mL,4.19mmol)。添加后,所得浑浊溶液于0
℃搅拌1h。LC-MS显示反应完成。反应混合物以EtOAc稀释,以水(2x)、饱和NaHCO3水溶液、盐水(2x)洗涤,干燥(Na2SO4)并浓缩至干燥。所得油状剩余物经高真空干燥得到所需产物(2R,
3S,4R)-4-甲氧基-3-甲基-2-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)吡咯烷-1-羧酸苄酯(1.0g,
2.81mmol,100%产率),其立即用于下文描述的反应中。
灭并且以EtOAc萃取(3x)。合并的萃取物以水、盐水洗涤,干燥(Na2SO4)并浓缩至干燥。粗产物通过快速色谱纯化(以EtOAc/己烷洗脱(0-35%,20min;35%,5min;35-70%,15min))。所
需各馏分经收集、浓缩并高真空干燥得到(2S,3S,4R)-2-(氰基甲基)-4-甲氧基-3-甲基吡
咯烷-1-羧酸苄酯(641mg,2.201mmol,79%产率),为无色油状物。C16H20N2O3的LC-MS分析计
算值:288.15,测量值[M+H]289.2。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.50-7.33(m,5H),5.26-5.08(m,
2H),3.85-3.66(m,2H),),3.61-3.47(m,2H),3.36(s,3H),3.06-2.69(m,2H),2.49(t,J=
7.0Hz,1H),1.21-0.98(m,3H).
温剧烈搅拌14h。LC-MS显示反应完成。反应混合物经过滤并且催化剂以EtOAc洗涤。合并的
滤液浓缩至干燥。所得剩余物经高真空干燥10min,得到2-((2S,3S,4R)-4-甲氧基-3-甲基
吡咯烷-2-基)乙腈(41mg,0.253mmol,91%产率),为无色油状物。C8H14N2O的LC-MS分析计算
1
值:154.21,测量值[M+H]155.1。H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.40(dt,J=5.1,3.4Hz,1H),3.30
(br,s,1H),3.24(s,3H),3.06-2.94(m,2H),2.89(q,J=6.2Hz,1H),2.56-2.40(m,2H),1.82
(td,J=6.7,3.6Hz,1H),1.07-1.01(m,3H).
啶-4-酮和7.8L的水。向反应器中加入1.2Kg的D-(+)-葡萄糖、1.0L的pH 7.0磷酸盐缓冲液
和0.5L的pH 7.4Tris-卤化物缓冲液,并将混合物搅拌10min。向该溶液添加烟酰胺腺嘌呤
二核苷酸(6.64g)和20g的葡萄糖脱氢酶(GDH-105,Codexis)。将反应温度逐渐增加至30℃
并且将溶液搅拌36小时。将反应混合物冷却至10℃并且以NaOH将pH调节至11。将所得溶液
搅拌1小时并且将其通过10μm滤布过滤。将固体以水洗涤并且抽吸干燥3小时。将剩余物溶
解在20L的MTBE中并且不溶性物质经过滤除去。有机层浓缩至3.0Kg重并添加5.0L的庚烷。
溶液于45℃浓缩至5Kg重,接着在结晶期间搅拌1h。将混合物过滤并且固体经干燥得到
0.785Kg的1C,为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.33-7.24(m,5H),3.48(s,2H),3.14-
3.13(m,1H),2.88-2.77(m,2H),2.05(dd,J=2.8,12Hz,1H),1.99-1.87(m,1H),1.73-1.58
(m,4H),0.95(d,J=6.4,3H).
洗15min,并且将氢气压(4kg)施加至该高压釜。反应混合物在氢气下搅拌15小时,并且溶液
过滤通过 垫,接着以甲醇洗涤。将各滤液合并且蒸发得到0.545Kg的1D,为无色半
固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.80(br s,2H),3.00-2.82(m,3H),2.51-2.44(m,1H),2.12
(t,J=11.2Hz,1H),1.76-1.70(m,2H),1.35-1.30(m,2H),0.97(d,J=6.5Hz,3H).
物冷却至室温,且固体经过滤并以EtOAc洗涤。滤液浓缩至具有一些白色固体的淡黄色油状
物。弃去该黄色油状物并以水稀释并且溶液以EtOAc萃取(2x)。合并的有机层以水和盐水洗
涤,经MgSO4干燥,过滤,并浓缩得到1E(4.43g,21.20mmol,83%产率),为黄色油状物。
C6H6BrNO的LC-MS分析计算值:188.02,测量值[M+H]187.9,189.9。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ
7.98(d,J=5.5Hz,1H),7.02(dd,J=5.5,1.5Hz,1H),6.94(d,J=1.8Hz,1H),3.92(s,3H).
分离各层。水层以EtOAc萃取且合并的有机萃取物以盐水洗涤,经MgSO4干燥,并浓缩。粗产
物通过硅胶色谱纯化得到1F(2.15g,9.18mmol,86%产率),为白色固体。C6H5BrClNO的LC-MS
分析计算值:220.92,测量值[M+H]223.8。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(s,1H),7.05(s,1H),
3.91(s,3H).
持16小时。将反应混合物冷却至室温,并且伴随搅拌经15min添加水(6.8L)和乙酸乙酯
(2.25L)。将各层分离并且水层以2.25L的乙酸乙酯反萃取。合并的有机层以1.5N HCl水溶
液(1.8L)洗涤。水层以乙酸乙酯反萃取,并且合并的水层以10%碳酸氢钠经pH调节至8,且
混合物以乙酸乙酯(2.25L)萃取。将各层分离并且水层以乙酸乙酯反萃取。合并的有机层以
盐水连续萃取,经硫酸钠干燥,过滤,并蒸发得到0.4Kg的1G,为深棕色半固体。1H NMR
(400MHz,DMSO-d6)δ7.99(s,1H),6.35(s,1H),4.70(d,J=5.2Hz,1H),3.80(s,3H),3.47-
3.37(m,2H),2.77-2.71(m,1H),2.49-2.39(m,1H),1.90-1.86(m,1H),1.59-1.56(m,2H),
1.49(d,J=5.5Hz,1H),0.95(d,J=7.0Hz,3H).
2.454mmol)在DMF(7mL)中的溶液以一份添加NaH(60%在矿物油中)(147mg,3.68mmol)。所
得悬浮液于室温搅拌20min,然后于0℃冷却。添加2,5-二氯吡嗪(804mg,5.40mmol)并且所
得棕色混合物于室温搅拌4h。LC-MS显示所需产物形成为主要产物。反应混合物于0℃冷却
并通过滴加水而淬灭。混合物在EtOAc和水之间分配。分离的水相以EtOAc(2x)萃取。合并的
EtOAc萃取物以水(2x)、盐水洗涤,干燥(Na2SO4)并浓缩得到浅棕色油状物。粗产物通过快速色谱纯化(以EtOAc/己烷洗脱(0-10%,15min;10-20%,10min;20%,10min))。所需各馏分
经收集、浓缩并真空干燥得到1H(825mg,2.234mmol,91%产率),为白色固体。C16H18Cl2N4O2的LC-MS分析计算值:368.081,测量值[M+H]369.1和371.1。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10-
7.97(m,3H),6.28(s,1H),4.82(td,J=9.2,4.4Hz,1H),3.92(s,3H),3.62-3.52(m,2H),
3.01-2.87(m,1H),2.67(dd,J=12.3,9.7Hz,1H),2.35-2.11(m,2H),1.91-1.75(m,1H),
1.09-0.98(d,J=6.6Hz,3H).
0.099mmol)的微波小瓶中添加1B(18.29mg,0.119mmol)在二噁烷(0.6mL)中的溶液,接着添
加乙酸钯(II)(2.219mg,9.89μmol)、叔丁醇钠(23.75mg,0.247mmol)和1,1′-二(二-叔丁基
膦基)二茂铁(94mg,0.198mmol)。小瓶经密封并在微波辐射下于100℃加热1h。LC-MS表明形
成所需的产物。在冷却至室温后,反应混合物以水稀释并以DCM萃取(3x)。合并的萃取物以
盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩得到深色油状剩余物,其通过快速色谱纯化(以EtOAc/己烷
洗脱(0-30%,20min;30%,10min;30-50%,10min))。所需各馏分经收集、浓缩并真空干燥
得到所需产物1I(40mg,0.078mmol,79%产率),为棕色油状物。C24H31ClN6O3的LC-MS分析计
算值:486.215,测量值[M+H]487.3。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.00(s,1H),7.85(s,1H),7.40
(s,1H),6.30(s,1H),4.66(td,J=9.0,4.0Hz,1H),4.07-3.97(m,1H),3.92(s,3H),3.76-
3.46(m,4H),3.43(s,3H),3.10-2.75(m,3H),2.71-2.55(m,2H),2.34-2.12(m,2H),1.93-
1.63(m,2H),1.15-0.98(m,6H)。
后,将反应混合物浓缩以除去大部分的EtOH。剩余水相以1N HCl水溶液调节至pH 6。所得悬
浮液以水稀释并以DCM萃取(3x)。合并的萃取物以盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩至干燥得
到粗产物,其通过制备型HPLC纯化(0.1%TFA-MeOH-H2O)( Luna Axia
5μ30x 100,梯度60-90%,经10min,在90%保持5min)。所需各馏分收集并浓缩除去挥发物。
剩余水相以NaHCO3饱和水溶液调节至pH 6,然后以DCM(3x)萃取。合并的萃取物以盐水洗
涤,干燥(MgSO4)并浓缩得到玻璃状剩余物,其在CH3CN/水中冻干得到所需产物实施例1
(16.8mg,0.032mmol,40.0%产率),为白色冻干物。C24H32ClN5O5的LC-MS分析计算值:
505.21,测量值[M+H]506.5。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01(d,J=0.9Hz,1H),7.83(d,J=
1.3Hz,1H),7.48(br.s.,1H),6.30(s,1H),4.71-4.58(m,1H),4.08-3.98(m,1H),3.93(s,
3H),3.72(br.s.,1H),3.64-3.52(m,4H),3.41(s,3H),3.05-2.89(m,2H),2.87-2.77(m,
1H),2.73-2.62(m,1H),2.56-2.43(m,1H),2.32-2.15(m,3H),1.83(m,1H),1.08(m,6H)
.hGPR40EC50=72nM。hGPR40IP1EC50=14nM。
中的溶液于室温添加咪唑(8.66g,127mmol)和TBS-Cl(9.17g,60.8mmol)。反应混合物于室
温搅拌过夜。反应混合物以10%Na2CO3水溶液(75mL)洗涤。将各层分离并且水层以CH2Cl2
(75mL)萃取。合并的有机层浓缩成小体积,然后添加甲苯,并且将各馏分浓缩至~75mL。甲
苯相以水洗涤,然后直接用于后续步骤。向冷却至0℃的(2S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷
基)氧基)吡咯烷-2-羧酸甲酯在甲苯中的溶液添加水(25mL),接着添加NaDCC(6.69g,
30.4mmol)。30min后,反应混合物过滤经过 以甲苯(30mL)洗涤,并分离各相。有
机相以水洗涤,冷却至0℃并添加NEt3(9.3mL,66mmol)。于0℃将反应混合物搅拌1h,然后于
室温搅拌过夜。有机溶液以水洗涤(2x),干燥(MgSO4),并浓缩。粗物质不经纯化直接用于后续步骤。向(R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3,4-二氢-2H-吡咯-5-羧酸甲酯在
CH2Cl2(101mL)中的溶液于-10℃添加2,6-二甲基吡啶(11.8mL,101mmol),接着滴加氯甲酸
苄酯(7.9mL,56mmol),并将反应混合物温热至室温并搅拌过夜。将乙二胺(0.50mL,
7.4mmol)添加至反应混合物,其于室温搅拌15min,然后以1N柠檬酸水溶液(60mL)和1N HCl
水溶液(50mL)洗涤。有机层以水、1.5N KH2PO4水溶液和盐水洗涤。有机层经干燥(Na2SO4)、过滤,并浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化得到2A(16.3g,41.6mmol,82%产率),为无色油状
物。C20H29NO5Si的LC-MS分析计算值:391.55,测量值[M+H]392.0。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ
7.40-7.29(m,5H),5.69-5.62(m,1H),5.20-5.11(m,2H),4.94(dt,J=7.7,3.2Hz,1H),3.98
(dd,J=12.4,8.0Hz,1H),3.79(dd,J=12.2,3.4Hz,1H),3.71-3.62(m,3H),0.88(s,9H),
0.07(d,J=3.3Hz,6H).
经由滴加漏斗滴加MeLi在Et2O(29.1mL,46.5mmol)中的1.6M溶液。将溶液搅拌1h,然后经由
滴加漏斗滴加2A(7.00g,17.9mmol)在Et2O(20.4mL)中的溶液。反应混合物于-45℃搅拌
45min,然后经由插管转移至剧烈搅拌的NH4Cl饱和水溶液中并且搅拌30min。有机层经分离
并以NH4Cl饱和水溶液洗涤。合并的水层以己烷萃取。合并的有机层经干燥(MgSO4)并浓缩。
粗物质通过硅胶色谱纯化得到2B(5.11g,12.5mmol,70%产率),为无色油状物。C21H33NO5Si
的LC-MS分析计算值:407.58,测量值[M+H]408.2。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(两个旋转异构
体)7.40-7.27(m,5H),5.21-5.00(m,2H),4.01-3.90(m,1H),3.87-3.80(m,1.6H),3.77-
3.71(s and m,1.8H),3.57(s,1.6H),3.36-3.28(m,1H),2.33-2.25(m,1H),1.11(dd,J=
7.2,2.2Hz,3H),0.86(s,9H),0.08-0.01(m,6H).
应混合物于室温搅拌1h。反应混合物以EtOAc稀释并以水和盐水洗涤,干燥(MgSO4),并浓
缩。粗物质通过硅胶色谱纯化得到2C(3.61g,12.3mmol,98%产率),为无色油状物,其在静
置时结晶成白色固体。C15H19NO5的LC-MS分析计算值:293.32,测量值[M+H]294.0。1H NMR
(400MHz,CDCl3)δ7.41-7.27(m,5H),5.25-4.97(m,2H),4.09-3.96(m,1H),3.95-3.87(m,
1H),3.86-3.70(m,3H),3.69-3.57(m,2H),3.10-2.83(m,1H),2.37(td,J=6.9,2.9Hz,1H),
1.12(d,J=7.3Hz,3H).
混合物搅拌30min,然后添加烯丙基溴(0.18mL,2.1mmol)。反应混合物加热至室温并搅拌
1h。反应混合物以水淬灭并以EtOAc稀释。将各层分离并且有机层以水洗涤(4x)。有机层以
盐水洗涤,干燥(MgSO4),并浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化得到2D(0.446g,1.34mmol,97%
产率),为无色油状物。C18H23NO5的LC-MS分析计算值:333.38,测量值[M+H]334.0。1H NMR
(500MHz,CDCl3)δ(两个旋转异构体)7.41-7.27(m,5H),5.90-5.77(m,1H),5.29-4.99(m,
4H),4.09-3.90(m,3H),3.86and 3.80(2dd,J=11.3,5.6Hz,1H),3.73and 3.57(2s,3H),
3.67-3.61(m,1H),3.46(ddd,J=11.0,6.1,4.7Hz,1H),2.59-2.44(m,1H),1.14(dd,J=
7.2,1.1Hz,3H).
中的1M溶液。15min后,反应混合物于室温搅拌2.2h。再添加BH3·THF(1M在THF中)(0.2mL,
0.2mmol)并且再搅拌反应混合物15min。添加水(4.1mL)和高硼酸钠·4H2O(1.29g,
8.37mmol)。搅拌2h后,反应混合物以EtOAc稀释,以盐水洗涤,干燥(MgSO4),并浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化得到2E(2.17g,6.18mmol,75%产率),为无色油状物。C18H25NO6的LC-MS分析计算值:351.39,测量值[M+H]352.0。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(两个旋转异构体)7.43-
7.27(m,5H),5.26-5.00(m,2H),4.18-3.98(m,1H),3.84-3.76(m,1H),3.75和3.61(two s,
3H),3.73-3.66(m,2H),3.61-3.50(m,4H),2.62-2.50(m,1H),2.04-2.00(m,1H),1.77
(quind,J=5.7,2.9Hz,2H),1.12(d,J=7.2Hz,3H).
(3.9mL,62mmol)。反应混合物于50℃搅拌18h。混合物经过滤并浓缩。粗产物通过硅胶色谱
纯化得到2F(2.71g,7.42mmol,81%产率)。C19H27NO6的LC-MS分析计算值:365.42,测量值[M+
1
H]367.0。H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.41-7.27(m,5H),5.24-4.99(m,2H),4.08-3.94(m,1H),
3.89-3.76(m,1H),3.73,3.58(2s,3H),3.57-3.53(m,1H),3.51-3.42(m,3H),3.40(t,J=
6.2Hz,2H),3.32,3.3(2s,3H),2.49(dtd,J=6.9,4.7,2.2Hz,1H),1.76(quind,J=6.3,
2.1Hz,2H),1.13(dd,J=7.2,3.0Hz,3H).
THF中的2M溶液。反应混合物加热至室温并搅拌17h。将反应混合物冷却至0℃,小心地以
NH4Cl饱和水溶液淬灭,并以EtOAc/水稀释。将各层分离并且有机层以盐水洗涤,干燥
(MgSO4),并浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化得到2G(3.25g,9.15mmol,81%),为无色油状
物。C18H27NO5的LC-MS分析计算值:337.41,测量值[M+H]338.0。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ
7.40-7.28(m,5H),5.14(s,2H),4.41-4.31(m,1H),3.85-3.70(m,3H),3.69-3.61(m,1H),
3.57-3.47(m,3H),3.46-3.39(m,2H),3.34-3.26(m,3H),2.06-1.94(m,1H),1.81(quin,J=
6.4Hz,2H),1.09(dd,J=9.9,7.2Hz,3H).
(3x)冲洗。反应混合物在氢气(1atm)下于室温搅拌3.5h。混合物经 过滤并浓缩
得到的2H(2.03g,9.99mmol,100%产率)。C10H21NO3的LC-MS分析计算值:203.28,测量值[M+
H]204.1。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ3.63(dd,J=11.1,3.4Hz,1H),3.55-3.49(m,2H),3.47(t,
J=6.3Hz,2H),3.43(td,J=6.3,2.1Hz,2H),3.31(s,3H),3.06-3.00(m,1H),2.98-2.90(m,
1H),2.85-2.76(m,1H),1.85(dt,J=6.9,3.4Hz,1H),1.83-1.75(m,2H),1.05(d,J=7.2Hz,
3H).
合溶剂中的搅拌悬浮液中于室温经5min滴加氯甲酸苄酯(0.843mL,5.61mmol)。添加后,混
合物于室温剧烈搅拌1h,LC-MS显示反应不完全。添加约0.2mL的氯甲酸苄酯。再搅拌一个小
时后,反应混合物以水淬灭。混合物以EtOAc萃取(3x)。合并的萃取物以水、盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩。粗产物通过快速色谱纯化(以己烷/EtOAc洗脱(0%-50%,20min;50%,
10min;50-100%,15min;100%,10min))。将所需的各馏分收集、浓缩并真空干燥得到2I
(0.954g,2.80mmol,60%产率),为无色油状物,C18H27NO5的LC-MS分析计算值:337.19,测量
值[M+H]338.1。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.43-7.32(m,5H),5.20-5.14(m,2H),4.43(dd,J=
7.9,3.1Hz,1H),3.86-3.76(m,2H),3.71-3.64(m,1H),3.59-3.50(m,3H),3.48-3.42(m,
2H),3.34(s,2H),2.06-1.96(m,1H),1.83(quin,J=6.1Hz,2H),1.14-1.07(m,3H),1.16-
1.07(m,3H).
5.65mmol),接着经5min滴加甲磺酰氯(0.330mL,4.24mmol)。添加后,所得浑浊溶液于0℃搅
拌1h。LC-MS显示反应完成。反应混合物以EtOAc稀释,以水(2x)、NaHCO3饱和水溶液、盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩至干燥,所得剩余物经真空干燥得到(2R,3S,4R)-4-(3-甲氧基丙氧
基)-3-甲基-2-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)吡咯烷-1-羧酸苄酯,为油状剩余物,其立即用
于下文描述的反应中。
水淬灭,并以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以水(2x)、盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩至干
燥,粗产物通过快速色谱纯化(以EtOAc/己烷洗脱(0-60%,15min;60%,10min;60-100%,
10min))得到2J(830mg,2.372mmol,84%产率),为无色油状物。C19H26N2O4的LC-MS分析计算
值:346.189,测量值[M+H]347.1。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.49-7.32(m,5H),5.30-5.06(m,
2H),3.85-3.41(m,8H),3.35(s,3H),3.04-2.71(m,2H),2.53-2.34(m,1H),1.84(quin,J=
6.2Hz,2H),1.19-0.96(m,3H).
Degussa型)。在以氢气冲洗(3x)后,悬浮液于室温在氢气气囊下剧烈搅拌16h。LC-MS显示反
应完成。混合物经过滤并且催化剂以EtOAc洗涤。合并的滤液浓缩至干燥。所得剩余物经真
空干燥30min得到2K(251mg,1.12mmol,90%产率),为淡黄色油状物。C11H20N2O2的LC-MS分析计算值:212.152,测量值[M+H]213.4。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.48(m,1H),3.43-3.34(m,
4H),3.29-3.22(m,4H),3.09-3.01(m,1H),2.99-2.85(m,2H),2.58-2.37(m,2H),1.88-1.69
(m,3H),1.05-1.01(m,3H).
(55.4mg,0.15mmol)的微波小瓶添加2K(35.0mg,0.165mmol)在二噁烷(0.8mL)中的溶液,接
着添加1,1′-二(二-叔丁基膦基)二茂铁(142mg,0.300mmol)、乙酸钯(II)(3.37mg,
0.015mmol)和叔丁醇钠(36.0mg,0.375mmol)。反应混合物经氩气流鼓泡1min,然后将小瓶
密封并在微波辐射下于100℃加热1h。LC-MS显示形成所需产物。在冷却至室温后,反应混合
物以水稀释,以DCM(3x)萃取。合并的DCM萃取物以盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩得到深色
油状剩余物,其通过快速色谱纯化(以EtOAc/己烷洗脱(0-30%,20min;30%,10min;30-
50%,10min))。将所需的各馏分收集、浓缩并经高真空干燥得到2L(81mg,0.13mmol,84%产
率),为棕色油状物。C27H37ClN6O4的LC-MS分析计算值:544.256,测量值[M+H]545.3。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.00(s,1H),7.84(s,1H),7.39(s,1H),6.30(s,1H),4.66(td,J=8.9,
4.0Hz,1H),4.01(d,J=8.1Hz,1H),3.92(s,3H),3.81(br.s.,1H),3.69-3.41(m,8H),3.36
(s,3H),3.09-2.78(m,3H),2.73-2.52(m,2H),2.33-2.10(m,2H),1.92-1.74(m,3H),1.09
(m,6H).
后,反应混合物经浓缩以除去挥发物。剩余水相以1N HCl水溶液调节至pH 6。所得白色悬浮
液以水稀释,以DCM(3x)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩至干燥。合并
的粗产物通过制备性HPLC纯化(0.1%TFA-MeOH-H2O)( Luna Axia 5μ
30x 100,梯度60-100%,经12min,在100%保持3min)。所需各馏分收集并浓缩除去挥发物。
剩余水相悬浮液以NaHCO3饱和水溶液调节至pH 6,然后以DCM萃取(3x)。DCM萃取物以盐水
洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩得到玻璃状剩余物,其在CH3CN/水冻干得到实施例2(15.8mg,
0.027mmol,22%产率),为灰白色冻干物。C27H38ClN5O6的LC-MS分析计算值:563.251,测量值[M+H]564.2。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01(s,1H),7.83(s,1H),7.47(s,1H),6.30(s,1H),
4.65(td,J=9.0,4.1Hz,1H),4.07-3.97(m,1H),3.93(s,3H),3.80(d,J=2.2Hz,1H),3.67-
3.43(m,8H),3.41-3.31(m,3H),3.06-2.78(m,3H),2.68(t,J=10.9Hz,1H),2.48(d,J=
7.3Hz,1H),2.33-2.08(m,2H),1.98-1.74(m,4H),1.08(m,6H)。hGPR40EC50=43nM。
hGPR40IP1EC50=4nM。
US2013/070213)、苯甲酸(174mg,1.42mmol)和Ph3P(373mg,1.42mmol)在THF(6mL)中的搅拌
溶液中于室温经5min缓慢地滴加ADDP(0.28mL,1.4mmol)。添加后,所得黄色溶液于室温搅
拌1h。反应混合物浓缩至干燥。剩余物通过硅胶纯化得到3A(198mg,0.554mmol,47%产率),
为白色泡沫。C21H24FNO3的LC-MS分析计算值:357.42,测量值[M+H]358.2.
(134mg,5.60mmol)。所得黄色溶液于室温在氩气下搅拌16h。反应混合物经部分浓缩以除去
THF/MeOH,然后在冰浴中冷却。添加1M HCl水溶液以调节pH~3-4。产物以CH2Cl2萃取(3x)。
合并的有机萃取物以盐水洗涤,干燥(MgSO4),并浓缩。所得剩余物通过硅胶色谱纯化得到
3B(120mg,0.474mmol,85%产率),为白色泡沫。C14H20FNO2的LC-MS分析计算值:253.31,测量值[M+H]254.1.
中)(104mg,2.61mmol)。所得悬浮液于室温搅拌30min,然后于0℃冷却。向该不均匀混合物
中添加2,5-二氯吡嗪(518mg,3.47mmol)(来自Combi-Block的试剂为约65%纯的,基于HPLC
和LC-MS)。所得棕色混合物于室温搅拌2h。LCMS显示反应没有完全。反应混合物于0℃冷却,添加60mg的NaH(60%在矿物油中)。于室温搅拌15min,添加150mg的2,5-二氯吡嗪。反应混
合物于室温再搅拌2.5小时。冷却至0℃,反应混合物通过滴加水再淬灭。所得混合物在
EtOAc和水之间分配。分离的水相以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以水(2x)、盐水洗涤,干
燥(Na2SO4)并浓缩得到浅棕色固体。粗产物通过快速色谱纯化(以EtOAc/己烷洗脱(0-10%,
20min;10%,10min;10-20%,10min))。将所需的各馏分收集、浓缩并经高真空干燥得到3C
(225mg,0.609mmol,35.1%产率),为白色固体。C18H21ClFN3O2的LC-MS分析计算值:365.131,
1
测量值[M+H]366.0。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(d,J=1.3Hz,1H),8.04(d,J=1.3Hz,1H),
6.95(dd,J=12.1,8.8Hz,1H),6.54(dd,J=7.4,3.0Hz,1H),6.43(dt,J=8.9,3.2Hz,1H),
4.79(td,J=9.6,4.4Hz,1H),4.01(q,J=7.0Hz,2H),3.54-3.37(m,2H),2.97-2.81(m,1H),
2.60(dd,J=12.1,10.1Hz,1H),2.35-2.12(m,2H),1.88(br.s.,1H),1.43(t,J=7.0Hz,
3H),1.05(d,J=6.6Hz,3H).
微波小瓶添加在二噁烷(0.7mL)中的1B(16.86mg,0.109mmol),接着添加乙酸钯(II)
(2.455mg,10.93μmol)、1,1′-二(二-叔丁基膦基)二茂铁(104mg,0.219mmol)和叔丁醇钠
(26.3mg,0.273mmol)。将反应小瓶密封并在微波辐射下于100℃加热1h。LC-MS显示形成所
需产物。反应混合物以水稀释,以DCM萃取(3x)。合并的萃取物以盐水洗涤,干燥(MgSO4)并
浓缩得到深色油状剩余物。粗产物通过快速色谱纯化(以EtOAc/己烷洗脱(0-30%,20min;
30%,10min;30-50%,10min))得到3D(21mg,0.043mmol,39.7%产率),为白色泡沫。
C26H34FN5O3的LC-MS分析计算值:483.26,测量值[M+H]484.4。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.85
(s,1H),7.40(d,J=1.3Hz,1H),6.94(dd,J=12.2,8.9Hz,1H),6.55(dd,J=7.4,3.0Hz,
1H),6.42(dt,J=8.8,3.1Hz,1H),4.61(m,1H),4.06-3.93(m,3H),3.73(dt,J=4.0,2.2Hz,
1H),3.63-3.53(m,2H),3.47-3.43(m,2H),3.43(s,3H),3.05(dd,J=16.4,3.9Hz,1H),
2.95-2.77(m,2H),2.69-2.54(m,1H),2.30-2.08(m,2H),1.91-1.58(m,2H),1.44-1.39(m,
3H),1.16-1.02(m,6H).
产物。在冷却至室温后,反应混合物经浓缩以除去挥发物。剩余水相以1N HCl水溶液调节至
pH 5-6。所得悬浮液以DCM萃取(3x)。合并的DCM萃取物浓缩至干燥。所得剩余物通过制备性
HPLC纯化(0.1%TFA-MeOH-H2O)( Luna Axia 5μ30x 100(50-100%B保
持12min,100%B保持3min)。将所需的各馏分浓缩以除去挥发物。剩余水相以NaHCO3水溶液
调节至pH 5-6,然后以DCM萃取(3x)。合并的DCM萃取物以盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩。剩余物在CH3CN/H2O中冻干得到实施例3(8.0mg,0.016mmol,38%产率),为灰白色粉末。
C26H35FN4O5的LC-MS分析计算值:502.259,测量值[M+H]503.2。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.79(d,J=1.5Hz,1H),7.46(d,J=1.3Hz,1H),6.97-6.83(m,1H),6.59-6.51(m,1H),6.49-6.42
(m,1H),4.63-4.50(m,1H),4.08-3.88(m,4H),3.75-3.66(m,1H),3.56(s,1H),3.40-3.45
(m,2H),3.38(s,3H),2.98-2.75(m,2H),2.68-2.51(m,3H),2.48-2.39(m,1H),2.31-2.01
(m,2H),1.82-1.69(m,1H),1.36(t,J=6.9Hz,3H),1.04(dd,J=9.1,7.2Hz,6H)。hGPR40EC50
=42nM。hGPR40IP1EC50=21nM。
0.256mmol)的微波小瓶添加3A(85mg,0.232mmol)、1,1′-二(二-叔丁基膦基)二茂铁
(220mg,0.465mmol)、乙酸钯(II)(5.22mg,0.023mmol)和叔丁醇钠(55.8mg,0.581mmol),接
着添加二噁烷(1.3mL)。反应混合物通过氩气流鼓泡1min,然后小瓶经密封并在微波辐射中
于100℃加热1h。LC-MS显示形成所需产物。在冷却至室温后,反应混合物以水稀释,以DCM
(3x)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤,干燥(MgSO4)和浓缩得到深色油状剩余物。粗产物通
过快速色谱纯化(以EtOAc/己烷洗脱(0-30%,20min;30%,10min;30-50%,10min))。将所
需的各馏分收集、浓缩并经高真空干燥得到2-((2S,3S,4R)-1-(5-(((3R,4R)-1-(5-乙氧
基-2-氟苯基)-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡嗪-2-基)-4-(3-甲氧基丙氧基)-3-甲基吡咯烷-
2-基)乙腈(58.5mg,0.092mmol,39.5%产率),为棕色油状物。C29H40FN5O4的LC-MS分析计算
值:541.306,测量值[M+H]542.2。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.78-7.73(s,1H),7.30(d,J=
1.3Hz,1H),6.84(dd,J=12.1,8.8Hz,1H),6.45(dd,J=7.5,2.9Hz,1H),6.32(dt,J=8.8,
3.1Hz,1H),4.51(td,J=9.5,4.2Hz,1H),3.97-3.80(m,3H),3.75-3.65(m,1H),3.58-3.32
(m,6H),3.27(s,3H),3.00-2.87(m,1H),2.84-2.68(m,2H),2.54-2.40(m,2H),2.22-2.01
(m,2H),1.86-1.63(m,3H),1.41-1.28(m,3H),1.25-1.14(m,2H),1.08-0.84(m,6H).
冷却至室温后,反应混合物经浓缩以除去挥发物。剩余水相以1N HCl水溶液调节至pH 5-6。
所得悬浮液以水稀释并以DCM萃取(3x)。合并的萃取物以盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩至
干燥,粗产物通过制备性HPLC纯化(0.1%TFA-MeOH-H2O)( Luna Axia
5μ30x 100,梯度70-100%,经12min,在100%保持3min)。所需各馏分收集并浓缩除去挥发
物。剩余水相以NaHCO3饱和水溶液调节至pH 6,然后以DCM萃取(3x)。DCM萃取物以盐水洗
涤,干燥(MgSO4)并浓缩得到玻璃状剩余物,其在CH3CN/水冻干得到深色冻干物(30.5mg)。
HPLC和LC-MS显示产物为主要对映异构体(88%)和次要对映异构体(12%)的非对映异构体
混合物。
体)浓缩至干。剩余物在DCM和水之间分配,以NaHCO3饱和水溶液调节至pH 6。DCM萃取物以
盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩。所得剩余物在CH3CN/水中冻干得到所需产物2-((2S,3S,
4R)-1-(5-(((3R,4R)-1-(5-乙氧基-2-氟苯基)-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡嗪-2-基)-4-
(3-甲氧基丙氧基)-3-甲基吡咯烷-2-基)乙酸(19.97mg)。C29H41FN4O6的LC-MS分析计算值:
560.301,测量值[M+H]561.4。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.74(d,J=1.3Hz,1H),7.38(d,J=
1.1Hz,1H),6.84(dd,J=12.1,8.8Hz,1H),6.45(dd,J=7.4,3.0Hz,1H),6.32(dt,J=8.8,
3.2Hz,1H),4.60-4.42(m,1H),3.91(q,J=6.9Hz,3H),3.74-3.65(m,1H),3.59-3.32(m,
8H),3.26(s,3H),2.91(dd,J=16.3,3.5Hz,1H),2.85-2.69(m,2H),2.50(dd,J=12.0,
10.2Hz,1H),2.38(d,J=7.3Hz,1H),2.22-1.99(m,2H),1.87-1.64(m,4H),1.33(t,J=
6.9Hz,3H),1.02-0.90(m,6H)。hGPR40EC50=45nM。
分(次要非对映异构体)浓缩至干。剩余物在DCM和水之间分配,以NaHCO3饱和水溶液调节至
pH 6。DCM萃取物以盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩。所得剩余物在CH3CN/水中冻干得到2-(1-(5-(((3R,4R)-1-(5-乙氧基-2-氟苯基)-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡嗪-2-基)-4-(3-甲氧
基丙氧基)-3-甲基吡咯烷-2-基)乙酸(2.25mg),为灰白色冻干物。C29H41FN4O6的LC-MS分析
计算值:560.301,测量值[M+H]561.4。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.69(s,1H),7.70(s,1H),
7.43(s,1H),6.84(dd,J=12.1,8.8Hz,1H),6.45(dd,J=7.4,3.0Hz,1H),6.32(dt,J=8.8,
3.1Hz,1H),4.51(d,J=4.4Hz,1H),4.29(d,J=3.5Hz,1H),3.91(q,J=6.9Hz,2H),3.76-
3.68(m,2H),3.52(td,J=6.3,1.2Hz,2H),3.44-3.31(m,4H),3.25(s,3H),3.12(d,J=
4.4Hz,1H),2.78(d,J=2.4Hz,1H),2.69-2.33(m,4H),2.22-2.04(m,2H),1.77(quin,J=
6.3Hz,2H),1.50(br.s.,1H),1.33(t,J=6.9Hz,3H),1.07(d,J=7.0Hz,3H),0.97(d,J=
6.6Hz,3H)。hGPR40EC50=837nM。
一缩二碳酸二叔丁酯(1.953g,8.95mmol)和碳酸氢钠(1.503g,17.90mmol)在THF(15mL)和
水(15mL)中的混悬液于室温剧烈搅拌16h。反应混合物以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以
盐水洗涤,干燥(Na2SO4)并浓缩。粗产物通过快速色谱纯化(以EtOAc/己烷洗脱(0至50%梯
度))得到(2R,4R)-2-(羟基甲基)-4-甲氧基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.3g,5.62mmol,94%产
率),为无色油状物。C11H21NO4的LC-MS分析计算值:231.147,测量值[M+H]232.0.
酰氯(0.653mL,8.43mmol)。添加后,反应混合物于0℃搅拌40min。TLC和LC-MS显示反应完
成。反应混合物以CH2Cl2稀释并以1N HCl水溶液、NaHCO3饱和水溶液、盐水洗涤,干燥
(MgSO4)并浓缩。所得剩余物经高真空干燥得到所需产物(2R,4R)-4-甲氧基-2-(((甲基磺
酰基)氧基)甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.65g,5.33mmol,95%产率),其立即用于下文描
述的反应。
灭并以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以水、盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩至干燥,粗产物
通过快速色谱纯化(以EtOAc/己烷(0-50%梯度)洗脱)。将所需的各馏分收集、浓缩并高真
空干燥得到所需产物(2S,4R)-2-(氰基甲基)-4-甲氧基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1g,
4.16mmol,78%产率),为白色泡沫。C12H20N2O3的LC-MS分析计算值:240.147,测量值[M+H]
241.0。
示反应完成。反应混合物经浓缩得到所需产物,为白色固体,其与己烷一起研磨。固体经过
滤并以己烷洗涤得到2-((2S,4R)-4-甲氧基吡咯烷-2-基)乙腈盐酸盐(0.65g,3.68mmol,
88%产率),为白色固体。C7H12N2O的LC-MS分析计算值:140.095,测量值[M+H]141.1。
添加6C(27.9mg,0.158mmol),接着添加1,1′-二(二-叔丁基膦基)二茂铁(136mg,
0.287mmol)、乙酸钯(II)(3.22mg,0.014mmol)、叔丁醇钠(48.3mg,0.502mmol)和二噁烷
(1mL)。反应混合物通过氮气流鼓泡1min,然后将小瓶密封并在微波辐射下于100℃加热1h。
LC-MS显示形成所需产物。反应混合物以水稀释,以DCM萃取(3x)。合并的萃取物以盐水洗
涤,干燥(MgSO4)并浓缩得到深色油状剩余物。粗产物通过快速色谱纯化(以EtOAc/己烷洗
脱(0-30%,20min;30%,5min;30-50%,10min))。将所需的各馏分收集、浓缩并高真空干燥得到2-((4R)-1-(5-(((3R,4R)-1-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡
嗪-2-基)-4-甲氧基吡咯烷-2-基)乙腈(40mg,0.082mmol,57.2%产率),为灰白色泡沫,其
含有约20%的另一种对映异构体)。C23H29ClN6O3的LC-MS分析计算值:472.199,测量值[M+H]
473.1和475.1.
却至室温后,反应混合物经浓缩以除去挥发物。剩余水相以1N HCl水溶液调节至pH 6。所得
悬浮液以水稀释并以DCM萃取(3x)。合并的萃取物以盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩至干燥,
粗产物通过制备性HPLC纯化(0.1%TFA-MeOH-H2O)( Luna Axia 5μ
30x 100,梯度50-90%,经12min,在90%保持3min)。将2种非对映异构体完全分离。将峰跑
在后面的各馏分收集并浓缩得到浅黄色水溶液,其转移至小瓶,添加CH3CN,冷冻并冻干得
到油状棕色剩余物。HPLC检查显示冻干的产物为约85%纯的。产物再次经制备性HPLC纯化
(0.1%TFA-MeOH-H2O)( Luna Axia 5μ 30x 100,梯度50-90%,经
12min,在90%保持3min)。所需各馏分经浓缩以除去挥发物。剩余水相经NaHCO3饱和水溶液
调节至pH 6,然后以DCM萃取(3x)。合并的DCM萃取物以盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩。剩余物在CH3CN/水中冻干得到所需产物2-((2R,4R)-1-(5-(((3R,4R)-1-(5-氯-2-甲氧基吡啶-
4-基)-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡嗪-2-基)-4-甲氧基吡咯烷-2-基)乙酸(3.97mg,7.99μ
mol,9.45%产率),为灰白色冻干物。C23H30ClN5O5的LC-MS分析计算值:491.194,测量值[M+
H]492.15。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91(s,1H),7.74(d,J=1.5Hz,1H),7.39(d,J=1.3Hz,
1H),6.21(s,1H),4.55(td,J=9.1,4.4Hz,1H),4.37-4.25(m,1H),4.06(br.s.,1H),3.82
(s,3H),3.58-3.35(m,4H),3.31(s,3H),2.97(dd,J=16.1,3.5Hz,1H),2.88-2.78(m,1H),
2.68(dd,J=16.2,8.3Hz,1H),2.56(dd,J=12.2,9.8Hz,1H),2.21-2.02(m,4H),1.74(d,J
=10.6Hz,1H),1.62-1.38(m,1H),0.99(d,J=6.6Hz,3H).hGPR40EC50=150nM。
hGPR40IP1EC50=44nM。
3min)。将峰跑在前面的各馏分收集并浓缩得到黄色水溶液,将其转移至小瓶并添加CH3CN。
将混合物冷冻并冻干得到油状剩余物。HPLC显示冻干样品为约89%纯的。产物通过制备性
HPLC再次纯化(上述相同的条件)。所需的馏分经浓缩以除去挥发物。剩余水相经NaHCO3饱
和水溶液调节至pH 6并以DCM萃取(3x)。合并的DCM萃取物以盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩
至干燥,剩余物在CH3CN/水中冻干得到2-((2S,4R)-1-(5-(((3R,4R)-1-(5-氯-2-甲氧基吡
啶-4-基)-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡嗪-2-基)-4-甲氧基吡咯烷-2-基)乙酸(2.95mg,5.82
μmol,6.88%产率).C23H30ClN5O5的LC-MS分析计算值:491.194,测量值[M+H]492.1。1H NMR
(400MHz,CDCl3)δ7.91(s,1H),7.72(d,J=1.1Hz,1H),7.43(d,J=1.3Hz,1H),6.21(s,1H),
4.56(td,J=9.2,4.3Hz,1H),4.31(dd,J=7.0,3.3Hz,1H),4.10-4.00(m,1H),3.82(s,3H),
3.66(dd,J=10.3,5.1Hz,1H),3.48(d,J=12.1Hz,2H),3.35(dd,J=10.2,3.0Hz,1H),
3.29-3.22(m,3H),2.96(dd,J=15.7,3.4Hz,1H),2.87-2.78(m,1H),2.61-2.40(m,2H),
2.38-2.28(m,1H),2.24-2.05(m,2H),2.04-1.95(m,1H),1.84-1.67(m,1H),1.60-1.38(m,
1H),0.99(d,J=6.8Hz,3H)。hGPR40EC50=3233nM.
US2013/070213)(500mg,1.246mmol)和碳酸氢钠(220mg,2.62mmol)在CH2Cl2(3mL)和水
(3mL)中的搅拌的混悬液中于室温经5min滴加氯甲酸苄酯(0.187mL,1.308mmol)。添加后,
混合物于室温搅拌1.5h。LC-MS显示反应没有完全。添加额外量的氯甲酸苄酯(0.2mL)并且
让反应混合物再搅拌30min。反应混合物通过添加水来淬灭并且混合物以EtOAc(3x)萃取。
合并的萃取物以水和盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩。粗产物通过快速色谱纯化(以己烷/
EtOAc洗脱(0%-50%,20min;50%,10min))。将所需的各馏分收集、浓缩并真空干燥得到所
需产物(2R,4R)-2-(羟基甲基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-羧酸苄酯(370mg,1.208mmol,97%
产率),为无色油状物。C14H16F3NO3的LC-MS分析计算值:303.108,测量值[M+H]304.5。
3min滴加甲磺酰氯(0.143mL,1.830mmol)。添加后,所得浑浊溶液于0℃搅拌60min。LC-MS显
示形成了所需产物。反应混合物以EtOAc稀释,以水、NaHCO3饱和水溶液和盐水洗涤,干燥
(MgSO4)并浓缩至干燥,所得油状剩余物经高真空干燥得到(2R,4R)-2-(((甲基磺酰基)氧
基)甲基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-羧酸苄酯,为油状剩余物,其直接用于下文描述的反应
中。
取(3x)。合并的萃取物以水、盐水洗涤(2x),干燥(MgSO4)并浓缩至干燥,粗产物通过快速色谱纯化(以EtOAc/己烷洗脱(0-40%,20min;40%,10min))得到所需产物(2R,4R)-2-(氰基
甲基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-羧酸苄酯(96mg,0.271mmol,22.17%产率),为油状剩余物。
C15H15F3N2O2的LC-MS分析计算值:312.109,测量值[M+H]313.1。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ
7.39-7.22(m,5H),5.17-4.98(m,2H),4.12-4.00(m,1H),3.88(d,J=8.4Hz,1H),3.42(t,J
=10.6Hz,1H),3.01-2.76(m,3H),2.54-2.39(m,1H),2.10-1.96(m,1H).
(3x)后,悬浮液在氢气气囊下于室温剧烈搅拌16h。LC-MS显示反应完成。混合物经过滤并且
催化剂以EtOAc洗涤。合并的滤液浓缩至干燥。所得剩余物经高真空干燥30min得到2-((2R,
4R)-4-(三氟甲基)吡咯烷-2-基)乙腈(90mg,0.505mmol)(含有位置的杂质),为油状剩余
物。C7H9F3N2的LC-MS分析计算值:178.072,测量值[M+H]179.1.
添加1,1′-二(二-叔丁基膦基)二茂铁(154mg,0.325mmol)、乙酸钯(II)(3.65mg,
0.016mmol)和8C(34.7mg,0.195mmol)在二噁烷(0.7mL)中的溶液,接着添加叔丁醇钠
(39.0mg,0.406mmol)。混合物以氩气流鼓泡1min,然后将小瓶密封并于100℃在微波辐射下
加热1h。LC-MS显示反应完全并形成所需产物。将反应混合物冷却至室温并以水稀释,以DCM
萃取(3x)。合并的萃取物以盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩得到深色油状剩余物。粗产物通
过快速色谱纯化(以EtOAc/己烷洗脱(0-30%,20min;30%,5min;30-50%,10min))。将所需
的各馏分收集、浓缩并经高真空干燥得到2-((4R)-1-(5-(((3R,4R)-1-(5-氯-2-甲氧基吡
啶-4-基)-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡嗪-2-基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-2-基)乙腈(60mg,
0.113mmol,69.4%产率),为灰白色泡沫,其含有比例为3:1的两个非对映异构体)。
C23H26ClF3N6O2的LC-MS分析计算值:510.176,测量值[M+H]511.5和513.5。
2.5h,LC-MS显示反应完成。在冷却至室温后,反应混合物经浓缩以除去挥发物。剩余水相以
1N HCl水溶液调节至pH 6。所得悬浮液以水稀释并以DCM萃取(3x)。合并的萃取物以盐水洗
涤,干燥(MgSO4)并浓缩至干燥。粗产物通过制备性HPLC纯化(0.1%TFA-MeOH-H2O)(
Luna Axia 5μ 30 x 100,梯度60-95%,经15min,在95%保持3min)。
两个非对映异构体经分离。将峰跑在后面的各馏分收集并浓缩。剩余水相以NaHCO3饱和水
溶液调节至pH 6并以DCM萃取(3x)。合并的萃取物以盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩。所得剩
余物在CH3CN/水中冻干得到2-((2R,4R)-1-(5-(((3R,4R)-1-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-
3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡嗪-2-基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-2-基)乙酸(主要对映异构体)
(22.45mg,0.040mmol,34.3%产率),为灰色冻干物。C23H27ClF3N5O4的LC-MS分析计算值:
529.17,测量值[M+H]530.15。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91(s,1H),7.78(d,J=1.5Hz,1H),
7.37(d,J=1.3Hz,1H),6.21(s,1H),4.58(td,J=9.1,4.2Hz,1H),4.48(t,J=8.6Hz,1H),
3.82(s,3H),3.69-3.60(m,1H),3.52-3.34(m,3H),3.16(dd,J=17.6,8.1Hz,1H),2.97-
2.77(m,2H),2.56(dd,J=12.3,9.7Hz,1H),2.45-2.25(m,2H),2.22-2.00(m,4H),1.73(dd,
J=13.0,2.4Hz,1H),0.99(d,J=6.6Hz,3H)。hGPR40EC50=955nM.
3min)。将峰跑在前面的各馏分收集并浓缩。剩余水相以NaHCO3饱和水溶液调节至pH 6,并
以DCM萃取(3x)。合并的萃取物以盐水洗涤,干燥(MgSO4)并浓缩。所得剩余物在CH3CN/水中
冻干得到2-((2R,4R)-1-(5-(((3R,4R)-1-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-3-甲基哌啶-4-基)
氧基)吡嗪-2-基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-2-基)乙酸(5.28mg,9.86μmol,8.40%产率),为灰
白色冻干物。C23H27ClF3N5O4的LC-MS分析计算值:529.17,测量值[M+H]530.15。1H NMR
(400MHz,CDCl3)δ7.91(s,1H),7.76(d,J=1.5Hz,1H),7.41(d,J=1.3Hz,1H),6.21(s,1H),
4.59(td,J=9.2,4.4Hz,1H),4.33(dd,J=7.7,2.9Hz,1H),3.82(s,3H),3.67-3.53(m,2H),
3.48(dd,J=12.2,1.9Hz,2H),3.13(dd,J=16.1,3.3Hz,1H),3.01-2.89(m,1H),2.89-2.78
(m,1H),2.66-2.51(m,2H),2.45(dd,J=16.2,8.5Hz,1H),2.23-1.95(m,4H),1.81-1.68(m,
1H),0.99(d,J=6.6Hz,3H)。hGPR40 EC50=84nM.