一种治疗乙肝病毒携带者的药物制备方法

摘要

本发明涉及一种治疗乙肝病毒携带者的药物制备方法。A、美洲大蠊粉碎，乙醇浸泡得混合液；B、混合液30～50℃超声提取，超声功率20‑30KHz，得乙醇提取液；C、乙醇提取液浓缩得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液；D、乙醇浓缩液加7～10倍水，搅拌、升温、静置使之分层；E、步骤D所得下层水液、过滤、活性炭吸附；F、步骤E所得含活性炭药液装入层析柱中，放出药液，活性炭洗涤，水洗液弃去；洗脱剂洗脱、过滤得洗脱滤液；G、将步骤F所得洗脱滤液浓缩得治疗乙型肝炎病毒携带者用的美洲大蠊提取物浸膏；H、步骤G所得治疗乙型肝炎用的美洲大蠊提取物干燥、粉碎得到用于治疗乙型肝炎病毒携带者的美洲大蠊提取物成品，对治愈乙肝病毒携带者具有显著的效果。

权利要求

1.一种治疗乙肝病毒携带者的药物制备方法，其特征在于，按照以下步骤制备：A、将干燥的美洲大蠊虫体过10-40目筛子粉碎，将所得美洲大蠊粗粉用浓度为60%～

95%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面5～10cm，密闭保存一个星期以上，18个月以下，制得粗粉混合液；

B、步骤A所得粗粉混合液进行超声提取3次：

第一次超声提取：温度30～35℃，超声功率20-25KHz，加粗粉重量5～8倍量浓度60%～

95%的乙醇，提取时间为30～60min；

第二次超声提取：温度35～40℃，超声功率23-28KHz，加粗粉重量3～6倍量浓度60%～

95%的乙醇，提取时间为20～50min；

第三次超声提取：温度40～50℃，超声功率25-30KHz，加粗粉重量3～6倍量浓度60%～

95%的乙醇，提取时间为35～50min，合并提取液，过滤得美洲大蠊虫体乙醇提取液；

C、将步骤B所得乙醇提取液在真空度-0.05～-0.06MPa、温度50～60℃的条件下减压浓缩，至比重为1.05～1.15时，得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液；

D、将步骤C所得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液加入其重量7～10倍量的纯化水，边搅拌边升温至85～95℃，再恒温搅拌45～60分钟，搅拌速度为45～60转/分，然后保温静置4～5小时使之分层；

E、将步骤D所得下层水液放出，收集下层水液，经滤纸过滤后，在所得滤液中加入滤液

0.5-0.8倍量药用活性炭在50℃温度下搅拌45分钟，使其充分吸附；

F、将步骤E所得含活性炭药液装入层析柱中，放出药液，先用药用活性炭20倍量蒸馏水洗涤，水洗液弃去；再用药用活性炭50倍量的洗脱剂洗脱，洗脱剂按重量份数计配比为水：乙酸乙酯：95％乙醇=3：2：2，收集洗脱液，经滤纸过滤，得洗脱滤液；

G、将步骤F所得洗脱滤液在温度50～60℃、真空度-0.05～-0.06MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为1.20～1.30时，得治疗乙型肝炎病毒携带者用的美洲大蠊提取物浸膏；

H、将步骤G所得治疗乙型肝炎用的美洲大蠊提取物在50℃～60℃温度、真空度-0.04～-0.07MPa的条件下真空干燥，粉碎为细粉，即得到用于治疗乙型肝炎病毒携带者的美洲大蠊提取物成品。

2.根据权利要求1所述的一种治疗乙肝病毒携带者的药物制备方法，其特征在于，步骤B中，第一次超声提取：温度30～32℃，超声功率20-22KHz，加粗粉重量5～8倍量浓度60%～

95%的乙醇，提取时间为35～45min。

3.根据权利要求1所述的一种治疗乙肝病毒携带者的药物制备方法，其特征在于，步骤B中，第二次超声提取：温度35～38℃，超声功率23-25KHz，加粗粉重量3～6倍量浓度75%～

95%的乙醇，提取时间为35～45min。

4.根据权利要求1所述的一种治疗乙肝病毒携带者的药物制备方法，其特征在于，步骤B中，第三次超声提取：温度43～45℃，超声功率28-30KHz，加粗粉重量3～6倍量浓度80-95%的乙醇，提取时间为45～50min。

说明书

一种治疗乙肝病毒携带者的药物制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种药物制备方法，尤其涉及一种治疗乙肝病毒携带者的药物制备方法。

背景技术

[0002] 乙肝病毒携带者（AsC）是指感染了乙肝病毒（HBV），没有肝炎症状和体征，肝功能等各项检查正常，1 年内连续随访3 次以上，血清ALT 和AST 均在正常范围，肝组织学检查一般无明显异常的群体。肝组织学检查一般无明显异常的群体。目前中国人口中约有十分之一是乙肝病毒携带者，多数无症状，其中1/3出现肝损害的临床表现，临床中常采用超氧细胞疗法。感染乙肝病毒，根据疾病发展分为三个阶段。慢性乙肝病毒携带者：又称为免疫耐受期。指乙肝病毒表面抗原持续存在6个月以上，无肝病相关症状和体征，转氨酶基本正常。这一人群肝功能正常，乙肝病毒载量很高，HBeAg阳性，具有传染性。慢性乙型肝炎患者：又称为免疫清除期。处于这个时期的患者肝功能异常，ALT高于正常值的2倍，乙肝病毒载量很高，大于105拷贝/ml。非活动性HBsAg携带者：又称表面抗原携带期。这类人群肝功能和乙肝病毒载量正常，HBsAg阳性，HBeAg阴性或者e抗体（HBeAb）阳性。处于此期的患者基本没有传染性，但还存在病情反复的可能。

[0003] 乙肝病毒携带者分为慢性乙肝病毒携带者和非活动性乙肝病毒表面抗原携带者两种情况，代表两个分期，各期乙肝病毒携带者传染性强弱不同。

[0004] 1、慢性乙肝病毒携带者传染性较强，代表免疫清除期之前的乙肝病毒携带者，这类人群的免疫系统无法清除病毒，造成与病毒和平共处的情况，如果肝脏细胞的伤害比较轻微，肝功能没有出现异常，肝脏穿刺作组织学检查也没有明显的改变。但是这类人群体内乙肝病毒复制比较活跃，具有很强的传染性。随着病历的进展，当肝脏的损害达到一定程度，即使肝功能正常也可以诊断为慢性乙肝患者。所以这类慢性乙肝病毒携带者应积极治疗，避免发展为慢性乙型肝炎患者。

[0005] 2．非活动性乙肝病毒表面抗原携带者传染性弱，代表免疫清除期之后的乙肝病毒携带者，此类乙肝病毒携带者机体已经通过免疫清除作用（包括药物的治疗作用），清除掉了血液中的病毒，肝脏的炎症病变已恢复，肝功能没有出现异常，而且没有明显的肝脏纤维化改变。此时乙肝病毒表面抗原转阴或e抗体转为阳性，乙肝病毒DNA为阴性，因此此类乙肝病毒携带者传染性小或无传染性。但是患者肝细胞核中仍可以有乙肝病毒存在，只是停止复制，不再向血液中释放病毒，也就是病毒和病变都不活动而已。此类非活动性乙肝病毒携带者，虽然病情较为稳定，但是如果不注意生活细节，依然存在病情反复的可能。

[0006] 美洲大蠊是蜚蠊科中体积最大的昆虫，性寒味咸，有毒，有辛辣味、有散瘀、消积、解毒、利水、消肿等功能。现代研究发现，美洲大蠊表皮含有巩膜质、甲壳质、溴、锌、镍、猛、钾、钙、钛、氯、硫、硅、铝、镁等元素，肌肉水解 13 种氨基酸，身体贮藏微生素 B1、B2、烟酸和抗坏血酸等，淋巴含海藻糖、海藻糖酶、糖蛋白、肌醇、原儿茶酸葡萄甙等，全体含麦角硫因、龙虾肌碱、胡芦巴碱、甘氨酸、甜菜碱、肛碱、三甲胺、腺嘌呤等。美洲大蠊目前在治疗烧烫伤、口腔溃疡、胃溃疡、痔疮、肛裂、胃炎和消化性胃溃疡、胃溃疡性结肠炎、妇科疾病、尿布疹、过敏性鼻炎、抗肿瘤等方面均有应用。

[0007] 我公司2012年11月10日申请了名称为治疗乙型肝炎用的美洲大蠊提取物的制备方法，专利号为201210446628.5，该申请公开了一种治疗乙型肝炎用的美洲大蠊提取物的制备方法，包括以下步骤：

[0008] A、灭活粉碎：美洲大蠊鲜虫采用 80℃～ 90℃的热水杀死，控温在 60℃ ±5℃范围内烘干，粉碎，过 24 目筛，制得美洲大蠊粗粉；

[0009] B、提取：将步骤 A 所得美洲大蠊粗粉在 75 ～ 80℃温度下进行 3 ～ 5 次回流提取，第一次提取时，加粗粉重量 5 ～ 8 倍量浓度 90% ～ 95% 的乙醇，提取时间为 4 6 ~小时；第二次以后每次加粗粉重量 3 ～ 6 倍量浓度 90% ～ 95% 的乙醇，提取时间为 3~
5 小时；提取过程中，乙醇温度均保持在 75 ～ 80℃ ；提取完成后，合并提取液，过滤得乙醇提取液；

[0010] C、一级浓缩：将步骤 B 所得乙醇提取液在真空度 -0.05 ～ -0.06MPa、温度 50 ～ 60℃的条件下减压浓缩，至比重为 1.05 ～ 1.15 时，得乙醇浓缩液；

[0011] D、脱脂吸附：将步骤 C 所得乙醇浓缩液加入乙醇浓缩液重量 7 ～ 10 倍量的蒸馏水，边搅拌边升温至80 90℃后，搅拌10 ～60 分钟，搅拌速度为20 ～60 转/ 分，然后保~温静置1 ～ 5 小时使油水分层；收集下层水液，经滤纸过滤后，在所得滤液中加入乙醇浓缩液 0.5 1.0 倍量药用活性炭在 40 60℃温度下搅拌 30 60 分钟，使其充分吸附；
~ ~ ~

[0012] E、洗脱：将步骤 D 所得含活性炭药液装入层析柱中，放出药液，先用药用活性炭 10 30 倍量蒸馏水洗涤，水洗液弃去；再用药用活性炭 30 60 倍量的洗脱剂洗脱，收集洗~ ~
脱液，经滤纸过滤，得洗脱滤液；

[0013] F、二级浓缩：将步骤 E 所得洗脱滤液在温度 50 ～ 60℃、真空度 -0.05 ～ -0.06MPa 条件下减压浓缩，浓缩至比重为 1.20 ～ 1.30 时，得治疗乙型肝炎用的美洲大蠊提取物浸膏；G、干燥粉碎：将步骤 F 所得治疗乙型肝炎用的美洲大蠊提取物在 50℃～ 
60℃温度、真空度 -0.04 ～ -0.07MPa 的条件下真空干燥，粉碎为细粉，即得到用于治疗乙型肝炎病的美洲大蠊提取物成品。

[0014] 由于美洲大蠊存在的有效成份很多，普通提取方式针对特定疾病其效果并不能达到最佳，如上所述我公司生产的治疗乙型肝炎用的美洲大蠊提取物针对乙肝病毒携带者虽然有用，但是并不能到达极致，故需要根据不同的疾病对美洲大蠊进行特殊提取，以使其对某种疾病的治疗效果达到最佳。

发明内容

[0015] 本发明目的是提供一种从美洲大蠊中提取治疗乙肝病毒携带者的药物制备方法，采用该制备方法得到的美洲大蠊有效成分对治愈乙肝病毒携带者具有显著的效果。

[0016] 本发明采用以下制备方法实现上述目的：

[0017] A、将干燥的美洲大蠊虫体过10-40目筛子粉碎，将所得美洲大蠊粗粉用浓度为60%～95%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面5～10cm，密闭保存一个星期以上，18个月以下，制得粗粉混合液；

[0018] B、将步骤A所得粗粉混合液在30～50℃的温度下进行3～5次超声提取，超声功率为：20-30KHz，对粗粉混合液进行第一次提取时，加粗粉重量5～8倍量浓度60%～95%的乙醇，提取时间为30～60min；第二次以后每次提取加粗粉重量3～6倍量浓度60%～95%的乙醇，提取时间为2～50min；合并提取液，过滤得美洲大蠊虫体乙醇提取液；

[0019] C、将步骤B所得乙醇提取液在真空度-0.05～-0.06MPa、温度50～60℃的条件下减压浓缩，至比重为1.05～1.15时，得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液；

[0020] D、将步骤C所得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液加入其重量7～10倍量的纯化水，边搅拌边升温至85～95℃，再恒温搅拌10～60分钟，搅拌速度为20～60转/分，然后保温静置1～5小时使之分层；

[0021] E、将步骤D所得下层水液放出，收集下层水液，经滤纸过滤后，在所得滤液中加入步骤C所得乙醇浓缩液0.5 1.0倍量药用活性炭在40 60℃温度下搅拌30 60分钟，使其充分~ ~ ~吸附；

[0022] F、将步骤E所得含活性炭药液装入层析柱中，放出药液，先用药用活性炭10 30倍~量蒸馏水洗涤，水洗液弃去；再用药用活性炭30 60倍量的洗脱剂洗脱，收集洗脱液，经滤纸~
过滤，得洗脱滤液；

[0023] G、将步骤F所得洗脱滤液在温度50～60℃、真空度-0.05～-0.06MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为1.20～1.30时，得治疗乙型肝炎病毒携带者用的美洲大蠊提取物浸膏；

[0024] H、将步骤G所得治疗乙型肝炎用的美洲大蠊提取物在50℃～60℃温度、真空度-0.04～-0.07MPa的条件下真空干燥，粉碎为细粉，即得到用于治疗乙型肝炎病毒携带者的美洲大蠊提取物成品。

[0025] 优选地，步骤B按照以下方法提取，将步骤A所得粗粉混合液进行超声提取3次：

[0026] 第一次超声提取：温度30～35℃，超声功率20-25KHz，加粗粉重量5～8倍量浓度60%～95%的乙醇，提取时间为30～60min；

[0027] 第二次超声提取：温度35～40℃，超声功率23-28KHz，加粗粉重量3～6倍量浓度60%～95%的乙醇，提取时间为20～50min；

[0028] 第三次超声提取：温度40～50℃，超声功率25-30KHz，加粗粉重量3～6倍量浓度60%～95%的乙醇，提取时间为35～50min；

[0029] 更优选地，步骤B中，第一次超声提取：温度30～32℃，超声功率20-22KHz，加粗粉重量5～8倍量浓度60%～95%的乙醇，提取时间为35～45min。

[0030] 更优选地，步骤B中，第二次超声提取：温度35～38℃，超声功率23-25KHz，加粗粉重量3～6倍量浓度75%～95%的乙醇，提取时间为35～45min。

[0031] 更优选地，步骤B中，第三次超声提取：温度43～45℃，超声功率28-30KHz，加粗粉重量3～6倍量浓度80-95%的乙醇，提取时间为45～50min。

[0032] 更优选地，步骤D：将步骤C所得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液加入其重量7～10倍量的纯化水，边搅拌边升温至85～90℃，再恒温搅拌45～60分钟，搅拌速度为45～60转/分，然后保温静置4～5小时使之分层。

[0033] 更优选地，步骤E中，将步骤D所得下层水液放出，收集下层水液，经滤纸过滤后，在所得滤液中加入滤液0.5-0.8倍量药用活性炭在50℃温度下搅拌45分钟，使其充分吸附；

[0034] 更优选地，步骤F中，将步骤E所得含活性炭药液装入层析柱中，放出药液，先用药用活性炭20倍量蒸馏水洗涤，水洗液弃去；再用药用活性炭50倍量的洗脱剂洗脱，收集洗脱液，经滤纸过滤，得洗脱滤液，所述洗脱剂按重量份数计配比为水：乙酸乙酯：95％乙醇=3：2：2。

[0035] 有益效果：

[0036] 1、采用本发明所得方法提取得到的治疗乙肝病毒携带者的美洲大蠊提取物浸膏水中不溶物量低于3%，总氨基酸含量高于60.0%，结合氨基酸含量高于45%。

[0037] 2、采用本发明所述方法制备得到的美洲大蠊有效成分对治愈乙肝病毒携带者具有显著的效果。

[0038] 3、采用本发明所述美洲大蠊提取物浸膏治疗乙肝病毒携带者，可提升人体免疫系统，通过人体自身免疫系统清除乙肝病毒，同时促进肝细胞组织再生，加快坏死肝细胞脱落，快速修复受损肝细胞，治愈乙肝病毒携带者。具体实施例

[0039] 实施例1

[0040] 从美洲大蠊中提取治疗乙肝病毒携带者的药物制备方法，采用以下技术实现：

[0041] A、将干燥的美洲大蠊虫体过10目筛子粉碎，将所得美洲大蠊粗粉用浓度为60%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面5cm，密闭保存18个月，制得粗粉混合液；

[0042] B、将步骤A所得粗粉混合液在30℃的温度下进行3次超声提取，超声功率为：20KHz，对粗粉混合液进行第一次提取时，加粗粉重量5倍量浓度60%的乙醇，提取时间为
30min；第二次以后每次提取加粗粉重量3倍量浓度60%的乙醇，提取时间为2min；合并提取液，过滤得美洲大蠊虫体乙醇提取液；

[0043] C、将步骤B所得乙醇提取液在真空度-0.05MPa、温度50℃的条件下减压浓缩，至比重为1.05时，得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液；

[0044] D、将步骤C所得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液加入其重量7倍量的纯化水，边搅拌边升温至85℃，再恒温搅拌10分钟，搅拌速度为20转/分，然后保温静置1小时使之分层；

[0045] E、将步骤D所得下层水液放出，收集下层水液，经滤纸过滤后，在所得滤液中加入步骤C所得乙醇浓缩液0.5倍量药用活性炭在40℃温度下搅拌30分钟，使其充分吸附；

[0046] F、将步骤E所得含活性炭药液装入层析柱中，放出药液，先用药用活性炭10倍量蒸馏水洗涤，水洗液弃去；再用药用活性炭30倍量的洗脱剂洗脱，收集洗脱液，经滤纸过滤，得洗脱滤液；

[0047] G、将步骤F所得洗脱滤液在温度50℃、真空度-0.05MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为1.20时，得治疗乙型肝炎病毒携带者用的美洲大蠊提取物浸膏；

[0048] H、将步骤G所得治疗乙型肝炎用的美洲大蠊提取物在50℃℃温度、真空度-0.04MPa的条件下真空干燥，粉碎为细粉，即得到用于治疗乙型肝炎病毒携带者的美洲大蠊提取物成品。

[0049] 采用本发明所得方法提取得到的治疗乙肝病毒携带者的美洲大蠊提取物浸膏水中不溶物量1.2%，总氨基酸含量69.3%，结合氨基酸含量53.7%。

[0050] 病例：

[0051] 慢性乙肝病毒携带者30例，男18例，女12例，年龄36-64岁，平均（40±2.5）岁，病程在7个月-5年，平均病程：36±9.5个月。慢性乙肝病毒携带者诊断标准符合中华医学会肝病学分会、感染病学分会修订的《慢性乙型肝炎防治指南》诊断标准。

[0052] 治疗方法：患者在治疗前一个月均未接受过任何关于慢性乙肝病毒携带者的治疗。患者口服本实施例所制备的治疗乙肝病毒携带者的美洲大蠊提取物浸膏，取美洲大蠊提取物浸膏0.2g加入到30ml温水中搅拌均匀，为一天剂量。每天分早、午、晚三次服用，每次服用10ml，连服30天。

[0053] 疗效标准（1）显效：疗程结束后，主要症状消失或基本消失，HBV-DNA和HBeAg恢复正常；（3）有效：症状改善，HBV-DNA和HBeAg趋于正常；（3）无效：主要症状、体征无明显改善，HBV-DNA和HBeAg无明显变化或加重。

[0054] 治疗结果：治疗组显效18例，有效7例，无效5例，治疗过程中,患者未见不良反应，半年后回访无复发。

[0055] 实施例2

[0056] 从美洲大蠊中提取治疗乙肝病毒携带者的药物制备方法，采用以下技术实现：

[0057] A、将干燥的美洲大蠊虫体过40目筛子粉碎，将所得美洲大蠊粗粉用浓度为95%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面10cm，密闭保存7天，制得粗粉混合液；

[0058] B、将步骤A所得粗粉混合液在50℃的温度下进行5次超声提取，超声功率为：30KHz，对粗粉混合液进行第一次提取时，加粗粉重量8倍量浓度95%的乙醇，提取时间为
60min；第二次以后每次提取加粗粉重量6倍量浓度95%的乙醇，提取时间为50min；合并提取液，过滤得美洲大蠊虫体乙醇提取液；

[0059] C、将步骤B所得乙醇提取液在真空度-0.06MPa、温度60℃的条件下减压浓缩，至比重为1.15时，得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液；

[0060] D、将步骤C所得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液加入其重量10倍量的纯化水，边搅拌边升温至95℃，再恒温搅拌60分钟，搅拌速度为60转/分，然后保温静置5小时使之分层；

[0061] E、将步骤D所得下层水液放出，收集下层水液，经滤纸过滤后，在所得滤液中加入步骤C所得乙醇浓缩液1.0倍量药用活性炭在60℃温度下搅拌60分钟，使其充分吸附；

[0062] F、将步骤E所得含活性炭药液装入层析柱中，放出药液，先用药用活性炭30倍量蒸馏水洗涤，水洗液弃去；再用药用活性炭60倍量的洗脱剂洗脱，收集洗脱液，经滤纸过滤，得洗脱滤液；

[0063] G、将步骤F所得洗脱滤液在温度60℃、真空度-0.06MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为1.30时，得治疗乙型肝炎病毒携带者用的美洲大蠊提取物浸膏；

[0064] H、将步骤G所得治疗乙型肝炎用的美洲大蠊提取物在60℃温度、真空度-0.07MPa的条件下真空干燥，粉碎为细粉，即得到用于治疗乙型肝炎病毒携带者的美洲大蠊提取物成品。

[0065] 采用本发明所得方法提取得到的治疗乙肝病毒携带者的美洲大蠊提取物浸膏水中不溶物量0.7%，总氨基酸含量71.4%，结合氨基酸含量57.8%。

[0066] 病例：

[0067] 非活动性乙肝病毒表面抗原携带者30例，男18例，女12例，年龄30-65岁，平均（45±2.5）岁，病程在7个月-6年，平均病程：40±2.5个月。非活动性乙肝病毒表面抗原携带者诊断标准符合中华医学会肝病学分会、感染病学分会修订的《慢性乙型肝炎防治指南》诊断标准。

[0068] 治疗方法：患者在治疗前一个月均未接受过任何关于慢性乙肝病毒携带者的治疗。患者口服本实施例所制备的治疗乙肝病毒携带者的美洲大蠊提取物浸膏，取美洲大蠊提取物浸膏0.22g加入到30ml温水中搅拌均匀，为一天剂量。每天分早、午、晚三次服用，每次服用10ml，连服30天。

[0069] 疗效标准（1）显效：疗程结束后，主要症状消失或基本消失，HBV-DNA和HBeAg恢复正常；（3）有效：症状改善，HBV-DNA和HBeAg趋于正常；（3）无效：主要症状、体征无明显改善，HBV-DNA和HBeAg无明显变化或加重。

[0070] 治疗结果：治疗组显效20例，有效6例，无效4例，治疗过程中,患者未见不良反应，半年后回访无复发。

[0071] 实施例3

[0072] 从美洲大蠊中提取治疗乙肝病毒携带者的药物制备方法，采用以下技术实现：

[0073] A、将干燥的美洲大蠊虫体过20目筛子粉碎，将所得美洲大蠊粗粉用浓度为75%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面8cm，密闭保存12个月，制得粗粉混合液；

[0074] B、将步骤A所得粗粉混合液进行超声提取3次：

[0075] 第一次超声提取：温度30℃，超声功率20KHz，加粗粉重量5倍量浓度75%的乙醇，提取时间为30min；

[0076] 第二次超声提取：温度35℃，超声功率23KHz，加粗粉重量3倍量浓度75%的乙醇，提取时间为20min；

[0077] 第三次超声提取：温度40℃，超声功率25KHz，加粗粉重量3倍量浓度75%的乙醇，提取时间为35min；

[0078] C、将步骤B所得乙醇提取液在真空度-0.05MPa、温度50℃的条件下减压浓缩，至比重为1.05时，得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液；

[0079] D、将步骤C所得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液加入其重量7倍量的纯化水，边搅拌边升温至85℃，再恒温搅拌45分钟，搅拌速度为45转/分，然后保温静置4小时使之分层。

[0080] E、将步骤D所得下层水液放出，收集下层水液，经滤纸过滤后，在所得滤液中加入步骤C所得乙醇浓缩液0.7倍量药用活性炭在50℃温度下搅拌45分钟，使其充分吸附；

[0081] F、将步骤E所得含活性炭药液装入层析柱中，放出药液，先用药用活性炭20倍量蒸馏水洗涤，水洗液弃去；再用药用活性炭45倍量的洗脱剂洗脱，收集洗脱液，经滤纸过滤，得洗脱滤液；

[0082] G、将步骤F所得洗脱滤液在温度55℃、真空度-0.06MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为1.25时，得治疗乙型肝炎病毒携带者用的美洲大蠊提取物浸膏；

[0083] H、将步骤G所得治疗乙型肝炎用的美洲大蠊提取物在55℃温度、真空度-0.07MPa的条件下真空干燥，粉碎为细粉，即得到用于治疗乙型肝炎病毒携带者的美洲大蠊提取物成品。

[0084] 采用本发明所得方法提取得到的治疗乙肝病毒携带者的美洲大蠊提取物浸膏水中不溶物量1.0%，总氨基酸含量72.1%，结合氨基酸含量58.0%。

[0085] 病例：

[0086] 慢性乙肝病毒携带者30例，男18例，女12例，年龄32-70岁，平均（46±2.5）岁，病程在8个月-5年，平均病程：41±6.5个月。慢性乙肝病毒携带者诊断标准符合中华医学会肝病学分会、感染病学分会修订的《慢性乙型肝炎防治指南》诊断标准。

[0087] 治疗方法：患者在治疗前一个月均未接受过任何关于慢性乙肝病毒携带者的治疗。患者口服本实施例所制备的治疗乙肝病毒携带者的美洲大蠊提取物浸膏，取美洲大蠊提取物浸膏0.18g加入到30ml温水中搅拌均匀，为一天剂量。每天分早、午、晚三次服用，每次服用10ml，连服30天。

[0088] 疗效标准（1）显效：疗程结束后，主要症状消失或基本消失，HBV-DNA和HBeAg恢复正常；（3）有效：症状改善，HBV-DNA和HBeAg趋于正常；（3）无效：主要症状、体征无明显改善，HBV-DNA和HBeAg无明显变化或加重。

[0089] 治疗结果：治疗组显效21例，有效6例，无效3例，治疗过程中,患者未见不良反应，半年后回访无复发。

[0090] 实施例4

[0091] 从美洲大蠊中提取治疗乙肝病毒携带者的药物制备方法，采用以下技术实现：

[0092] A、将干燥的美洲大蠊虫体过30目筛子粉碎，将所得美洲大蠊粗粉用浓度为85%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面10cm，密闭保存10个月，制得粗粉混合液；

[0093] B、将步骤A所得粗粉混合液进行超声提取3次：

[0094] 第一次超声提取：温度35℃，超声功率25KHz，加粗粉重量8倍量浓度85%的乙醇，提取时间为60min；

[0095] 第二次超声提取：温度40℃，超声功率28KHz，加粗粉重量6倍量浓度85%的乙醇，提取时间为50min；

[0096] 第三次超声提取：温度50℃，超声功率30KHz，加粗粉重量6倍量浓度85%的乙醇，提取时间为50min；

[0097] C、将步骤B所得乙醇提取液在真空度-0.06MPa、温度60℃的条件下减压浓缩，至比重为1.15时，得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液；

[0098] D、将步骤C所得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液加入其重量10倍量的纯化水，边搅拌边升温至90℃，再恒温搅拌60分钟，搅拌速度为60转/分，然后保温静置5小时使之分层。

[0099] E、将步骤D所得下层水液放出，收集下层水液，经滤纸过滤后，在所得滤液中加入滤液0.8倍量药用活性炭在50℃温度下搅拌45分钟，使其充分吸附；

[0100] F、将步骤E所得含活性炭药液装入层析柱中，放出药液，先用药用活性炭20倍量蒸馏水洗涤，水洗液弃去；再用药用活性炭50倍量的洗脱剂洗脱，收集洗脱液，经滤纸过滤，得洗脱滤液，所述洗脱剂按重量份数计配比为水：乙酸乙酯：95％乙醇=3：2：2。

[0101] G、将步骤F所得洗脱滤液在温度55℃、真空度-0.05MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为1.20时，得治疗乙型肝炎病毒携带者用的美洲大蠊提取物浸膏；

[0102] H、将步骤G所得治疗乙型肝炎用的美洲大蠊提取物在55℃温度、真空度-0.05MPa的条件下真空干燥，粉碎为细粉，即得到用于治疗乙型肝炎病毒携带者的美洲大蠊提取物成品。

[0103] 采用本发明所得方法提取得到的治疗乙肝病毒携带者的美洲大蠊提取物浸膏水中不溶物量0.9%，总氨基酸含量66.3%，结合氨基酸含量51.7%。

[0104] 病例：

[0105] 非活动性乙肝病毒表面抗原携带者30例，男18例，女12例，年龄40-68岁，平均（52±1.5）岁，病程在10个月-6年，平均病程：43±2.5个月。非活动性乙肝病毒表面抗原携带者诊断标准符合中华医学会肝病学分会、感染病学分会修订的《慢性乙型肝炎防治指南》诊断标准。

[0106] 治疗方法：患者在治疗前一个月均未接受过任何关于慢性乙肝病毒携带者的治疗。患者口服本实施例所制备的治疗乙肝病毒携带者的美洲大蠊提取物浸膏，取美洲大蠊提取物浸膏0.2g加入到30ml温水中搅拌均匀，为一天剂量。每天分早、午、晚三次服用，每次服用10ml，连服30天。

[0107] 疗效标准（1）显效：疗程结束后，主要症状消失或基本消失，HBV-DNA和HBeAg恢复正常；（3）有效：症状改善，HBV-DNA和HBeAg趋于正常；（3）无效：主要症状、体征无明显改善，HBV-DNA和HBeAg无明显变化或加重。

[0108] 治疗结果：治疗组显效19例，有效8例，无效3例，治疗过程中,患者未见不良反应，半年后回访无复发。

[0109] 实施例5

[0110] 从美洲大蠊中提取治疗乙肝病毒携带者的药物制备方法，采用以下技术实现：

[0111] A、将干燥的美洲大蠊虫体过30目筛子粉碎，将所得美洲大蠊粗粉用浓度为90%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面5cm，密闭保存3个月，制得粗粉混合液；

[0112] B、将步骤A所得粗粉混合液进行超声提取3次：

[0113] 第一次超声提取：温度30℃，超声功率20KHz，加粗粉重量5倍量浓度90%的乙醇，提取时间为355min；

[0114] 第二次超声提取：温度35℃，超声功率23KHz，加粗粉重量3倍量浓度90%的乙醇，提取时间为35min；

[0115] 第三次超声提取：温度43℃，超声功率28KHz，加粗粉重量3倍量浓度90%的乙醇，提取时间为45min；

[0116] C、将步骤B所得乙醇提取液在真空度-0.05MPa、温度50℃的条件下减压浓缩，至比重为1.05时，得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液；

[0117] D、将步骤C所得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液加入其重量7倍量的纯化水，边搅拌边升温至85℃，再恒温搅拌10分钟，搅拌速度为20转/分，然后保温静置1小时使之分层；

[0118] E、将步骤D所得下层水液放出，收集下层水液，经滤纸过滤后，在所得滤液中加入滤液0.5倍量药用活性炭在50℃温度下搅拌45分钟，使其充分吸附；

[0119] F、将步骤E所得含活性炭药液装入层析柱中，放出药液，先用药用活性炭20倍量蒸馏水洗涤，水洗液弃去；再用药用活性炭50倍量的洗脱剂洗脱，收集洗脱液，经滤纸过滤，得洗脱滤液，所述洗脱剂按重量份数计配比为水：乙酸乙酯：95％乙醇=3：2：2。

[0120] G、将步骤F所得洗脱滤液在温度50～60℃、真空度-0.05～-0.06MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为1.20～1.30时，得治疗乙型肝炎病毒携带者用的美洲大蠊提取物浸膏；

[0121] H、将步骤G所得治疗乙型肝炎用的美洲大蠊提取物在50℃～60℃温度、真空度-0.04～-0.07MPa的条件下真空干燥，粉碎为细粉，即得到用于治疗乙型肝炎病毒携带者的美洲大蠊提取物成品。

[0122] 采用本发明所得方法提取得到的治疗乙肝病毒携带者的美洲大蠊提取物浸膏水中不溶物量1.7%，总氨基酸含量68.2%，结合氨基酸含量56.1%。

[0123] 病例：

[0124] 慢性乙肝病毒携带者30例，男18例，女12例，年龄30-66岁，平均（41±1.5）岁，病程在1-5年，平均病程：42±10.5个月。慢性乙肝病毒携带者诊断标准符合中华医学会肝病学分会、感染病学分会修订的《慢性乙型肝炎防治指南》诊断标准。

[0125] 治疗方法：患者在治疗前一个月均未接受过任何关于慢性乙肝病毒携带者的治疗。患者口服本实施例所制备的治疗乙肝病毒携带者的美洲大蠊提取物浸膏，取美洲大蠊提取物浸膏0.15g加入到30ml温水中搅拌均匀，为一天剂量。每天分早、午、晚三次服用，每次服用10ml，连服30天。

[0126] 疗效标准（1）显效：疗程结束后，主要症状消失或基本消失，HBV-DNA和HBeAg恢复正常；（3）有效：症状改善，HBV-DNA和HBeAg趋于正常；（3）无效：主要症状、体征无明显改善，HBV-DNA和HBeAg无明显变化或加重。

[0127] 治疗结果：治疗组显效22例，有效5例，无效3例，治疗过程中,患者未见不良反应，半年后回访无复发。

[0128] 实施例6

[0129] 从美洲大蠊中提取治疗乙肝病毒携带者的药物制备方法，采用以下技术实现：

[0130] A、将干燥的美洲大蠊虫体过20目筛子粉碎，将所得美洲大蠊粗粉用浓度为90%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面10cm，密闭保存15个月，制得粗粉混合液；

[0131] B、将步骤A所得粗粉混合液进行超声提取3次：

[0132] 第一次超声提取：温度32℃，超声功率22KHz，加粗粉重量8倍量浓度90%的乙醇，提取时间为45min；

[0133] 第二次超声提取：温度38℃，超声功率23-25KHz，加粗粉重量6倍量浓度90%的乙醇，提取时间为45min；

[0134] 第三次超声提取：温度45℃，超声功率28-30KHz，加粗粉重量6倍量浓度90%的乙醇，提取时间为50min；

[0135] C、将步骤B所得乙醇提取液在真空度-0.06MPa、温度60℃的条件下减压浓缩，至比重为1.15时，得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液；

[0136] D、将步骤C所得美洲大蠊虫体乙醇浓缩液加入其重量8倍量的纯化水，边搅拌边升温至85℃，再恒温搅拌50分钟，搅拌速度为50转/分，然后保温静置5小时使之分层。

[0137] E、将步骤D所得下层水液放出，收集下层水液，经滤纸过滤后，在所得滤液中加入步骤C所得乙醇浓缩液0.6倍量药用活性炭在50℃温度下搅拌45分钟，使其充分吸附；

[0138] F、将步骤E所得含活性炭药液装入层析柱中，放出药液，先用药用活性炭20倍量蒸馏水洗涤，水洗液弃去；再用药用活性炭50倍量的洗脱剂洗脱，收集洗脱液，经滤纸过滤，得洗脱滤液，所述洗脱剂按重量份数计配比为水：乙酸乙酯：95％乙醇=3：2：2；

[0139] G、将步骤F所得洗脱滤液在温度50～60℃、真空度-0.05～-0.06MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为1.20～1.30时，得治疗乙型肝炎病毒携带者用的美洲大蠊提取物浸膏；

[0140] H、将步骤G所得治疗乙型肝炎用的美洲大蠊提取物在50℃～60℃温度、真空度-0.04～-0.07MPa的条件下真空干燥，粉碎为细粉，即得到用于治疗乙型肝炎病毒携带者的美洲大蠊提取物成品。

[0141] 采用本发明所得方法提取得到的治疗乙肝病毒携带者的美洲大蠊提取物浸膏水中不溶物量1.2%，总氨基酸含量69.5%，结合氨基酸含量52.8%。

[0142] 病例：

[0143] 非活动性乙肝病毒表面抗原携带者30例，男18例，女12例，年龄35-72岁，平均（48±2.5）岁，病程在1.5-6年，平均病程：50±2.5个月。非活动性乙肝病毒表面抗原携带者诊断标准符合中华医学会肝病学分会、感染病学分会修订的《慢性乙型肝炎防治指南》诊断标准。

[0144] 治疗方法：患者在治疗前一个月均未接受过任何关于慢性乙肝病毒携带者的治疗。患者口服本实施例所制备的治疗乙肝病毒携带者的美洲大蠊提取物浸膏，取美洲大蠊提取物浸膏0.25g加入到30ml温水中搅拌均匀，为一天剂量。每天分早、午、晚三次服用，每次服用10ml，连服30天。

[0145] 疗效标准（1）显效：疗程结束后，主要症状消失或基本消失，HBV-DNA和HBeAg恢复正常；（3）有效：症状改善，HBV-DNA和HBeAg趋于正常；（3）无效：主要症状、体征无明显改善，HBV-DNA和HBeAg无明显变化或加重。

[0146] 治疗结果：治疗组显效22例，有效6例，无效2例，治疗过程中,患者未见不良反应，半年后回访无复发。