快速检测敌草快的超分子试剂盒及方法转让专利

申请号 : CN201611181781.4

文献号 : CN106596539B

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发明人 : 刘东晖刘畅毕嘉玮王鹏周志强

申请人 : 中国农业大学

摘要 :

一种快速检测敌草快的超分子试剂盒及方法,所述超分子试剂盒包括试剂1和2,试剂1是由藏红T和羧甲基‑β‑环糊精配置而成的溶液;试剂2是由亚甲基蓝和羧甲基‑β‑环糊精配置而成的溶液。利用本发明的超分子试剂盒,直接可以通过裸眼颜色比对就能定性地对该农药进行检测,克服时间及成本的问题。

权利要求 :

1.一种快速检测敌草快的超分子试剂盒,其特征在于:所述超分子试剂盒包括试剂1和

2,试剂1是由藏红T和羧甲基-β-环糊精配置而成的溶液;试剂2是由亚甲基蓝和羧甲基-β-环糊精配置而成的溶液。

2.如权利要求1的超分子试剂盒,其特征在于:其中试剂1中藏红T与羧甲基-β-环糊精的摩尔比范围为1:1.5至1:2,试剂2中亚甲基蓝与羧甲基-β-环糊精的摩尔比范围为1:1.5至1:2。

3.一种快速检测敌草快的方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)提供如权利要求1或2所述的超分子试剂盒;

(2)分别配置一系列浓度从低到高的敌草快标准水溶液,每一标准水溶液分成两份,分别加入试剂1和2,根据显色反应形成各试剂的标准色带;

(3)提供待检测样品液,分成两份,将试剂1、2分别加入到一份样品液中,根据样品液的颜色与各试剂的标准色带进行比对,得出鉴定结果。

4.如权利要求3所述的方法,其特征在于:在加入试剂1和2之前,先将溶液调配成碱性条件。

5.如权利要求4所述的方法,其特征在于:碱性溶液的pH值为11-12。

说明书 :

快速检测敌草快的超分子试剂盒及方法

技术领域

[0001] 本发明总体涉及农药检测领域,具体涉及检测敌草快的超分子试剂盒及方法。

背景技术

[0002] 根据农业部、工业和信息化部、国家质量监督检验检疫总局公告,自2014年7月1日起,撤销百草枯水剂登记和生产许可、停止生产;2016年7月1日停止水剂在国内销售和使用。而敌草快是全球仅次于草甘膦和百草枯的第三大灭生性除草剂。因此,敌草快作为百草枯的替代农药在我国的使用量会呈现升高的趋势。但是因为敌草快的价格会远高于百草枯,因此一些厂家会追求利润,在敌草快的药剂里掺入百草枯,所以对市场上的敌草快产品质量进行抽检是很有必要的。而且随着敌草快的大量使用以及其极易溶于水的特性,水环境中势必也会存在敌草快,可能会对环境安全产生威胁。因此开发快速检测敌草快的方法不仅能保证农药产品本身的品质,而且还可以保障人民生命安全、环境安全和农产品质量安全。
[0003] 目前,对于这敌草快的分析方法主要是仪器分析,如液相色谱、毛细管电泳、质谱等。然而,仪器分析法需要将样品采集回实验室后,使用昂贵的仪器进行鉴定分析,花费的时间及成本较昂贵,尤其是对于普通群众来说,并没有条件使用复杂精密的仪器。

发明内容

[0004] 本发明的目的是为了克服上述现有技术中的某些或某个缺陷,提供一种超分子试剂盒,并将其应用于快速检测敌草快。
[0005] 根据本发明的第一方面,提供一种快速检测敌草快的超分子试剂盒,所述试剂盒包括试剂1和2,试剂1是由藏红T(Safranine T,ST)和羧甲基-β-环糊精(Carboxymethyl-β-Cyclodextrin,CM-β-CD)配置而成的溶液;试剂2是由亚甲基蓝(Methylene blue,MB)和CM-β-CD配置而成的溶液。
[0006] 在本发明的一个优选实施例中,其中试剂1中ST与CM-β-CD的摩尔比范围为1:1.5至1:2,试剂2中MB与CM-β-CD的摩尔比范围为1:1.5至1:2。
[0007] 根据本发明的第二方面,提供一种快速检测敌草快的方法,包括以下步骤:
[0008] (1)提供本发明第一方面所述的超分子试剂盒;
[0009] (2)分别配置一系列浓度从低到高的敌草快标准水溶液,每一标准水溶液分成两份,分别加入试剂1和2,根据显色反应形成各试剂的标准色带;
[0010] (3)提供待检测样品液,分成两份,将试剂1、2分别加入到一份样品液中,根据样品液的颜色与各试剂的标准色带进行比对,得出鉴定结果。
[0011] 优选情况下,在加入试剂1和2之前,先将溶液调配成碱性条件。进一步优选情况下,碱性溶液的pH值为11-12。在碱性条件下,目标物与超分子试剂反应更加完全,显色反应更明确。
[0012] 本发明首先制备了对敌草快具有特异性的超分子试剂盒,可以通过颜色比对就能对其进行检测,降低分析时间及成本,适宜普通民众使用。

附图说明

[0013] 图1是一系列浓度的敌草快水样分别加入试剂1的照片。
[0014] 图2是一系列浓度的敌草快水样分别加入试剂2的照片。

具体实施方式

[0015] 本发明提供了一种用于快速鉴定检测敌草快的超分子试剂盒及方法,下面结合具体实施方式对本发明做进一步说明。
[0016] 一、试剂
[0017] 藏红T(ST)、亚甲基蓝(MB)和苏木精(HT),均购买于阿拉丁;羧甲基-β-环糊精购买于山东滨州智源生物科技有限公司;敌草快标样,购买于农业部环境保护科研监测所,用时用超纯水稀释成所需浓度的工作溶液。
[0018] 二、超分子试剂盒的制备
[0019] 取0.0088g ST置于25mL容量瓶得到0.001mol/L的ST溶液,0.0093g MB置于25mL容量瓶得到0.001mol/L的MB溶液,0.0850g CM-β-CD置于50mL容量瓶得到0.001mol/L的CM-β-CD溶液。取125μL的ST溶液和250μL的CM-β-CD溶液置于1mL离心管,混合均匀即为试剂1;取125μL的MB溶液和250μL的CM-β-CD溶液置于1mL离心管,混合均匀即为试剂2。
[0020] 三、利用超分子试剂盒快速检测敌草快的方法
[0021] 取八根10mL离心管,分别加入2125μL碱性(pH=12)的超纯水和敌草快标准溶液(1×10-5mol/L、5×10-5mol/L、1×10-4mol/L、2.5×10-4mol/L、5×10-4mol/L、8×10-4mol/L、1×10-3mol/L),然后都加入试剂1(375μL)。取八根10mL离心管,分别加入2125μL碱性(pH=12)的超纯水和敌草快标准溶液(1×10-5mol/L、5×10-5mol/L、1×10-4mol/L、2.5×10-4mol/L、5×10-4mol/L、8×10-4mol/L、1×10-3mol/L),然后都加入试剂2(375μL)。
[0022] 向水样中加入试剂后,混合均匀后静置20min后,观察其颜色变化。结果如图1-2,图中第一个小瓶中均为空白水样,其后7个小瓶中均为含敌草快的样品。结果表明:试剂1加入到敌草快中显示为从低浓度到高浓度为浅红色至橙色至深红色;试剂2加入到敌草快中显示为从低浓度到高浓度为浅蓝色至绿色至墨绿色。试剂1和试剂2加入到敌草快后溶液的颜色均发生变化,尤其是试剂2。从图1-2的结果可以得到结论:对于不同浓度的农药样品,试剂1和试剂2都能够很好地对敌草快进行检测。采用试剂1和试剂2进行组合使用能够相互验证鉴定结果。
[0023] 通过以上步骤分别形成试剂1、2的标准色带。在检测某一样品液时,将样品液分成两份,参照以上步骤将试剂1、2分别加入到一份样品液中,根据样品液的颜色分别与试剂1、2的标准色带进行比对,得出鉴定结果。
[0024] 本领域技术人员应该理解,上文所述具体实施方式仅为了更好地理解本发明,并不用于对本发明进行限制,本发明的保护范围应以权利要求书的限定为准。