防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂、方法及应用

摘要

本发明提供了一种防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂、方法及应用，以重量份数计，由以下原料组成：辛菌胺醋酸盐为2％～25％，表面活性剂为5％～8％，防冻剂为4％～8％，余量为水，组分的重量份数之和为100％。首先将辛菌胺母药与乙酸反应制得辛菌胺醋酸盐母药后，将辛菌胺醋酸盐与表面活性剂、防冻剂及水按配方进行预混合，充分混合搅拌，过滤，然后包装入库。本发明对靶标病害防治效果更为彻底，且对使用者和环境生物更为安全。本发明对人体及环境生物更加友好的生态效益。室内活性和田间防治效果试验研究结果均表明，辛菌胺醋酸盐水剂对食用菌细菌性腐烂病表现出优异的抑菌活性，可作为田间防治的有效药剂加以推广使用。

权利要求

1.一种防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂，其特征在于，以重量份数计，由以下原料组成：辛菌胺醋酸盐为2g，表面活性剂脂肪醇聚氧乙烯醚为5g，防冻剂乙二醇为5g，水为88g；

或辛菌胺醋酸盐为5g，表面活性剂脂肪胺聚氧乙烯醚为6g，防冻剂乙二醇为4g，水为

85g；

或辛菌胺醋酸盐为10g，表面活性剂烷基多糖苷为5g，防冻剂丙三醇为5g，水为80g；

或辛菌胺醋酸盐为15g，表面活性剂牛脂胺聚氧乙烯醚为7g，防冻剂丙三醇为6g，水为

72g；

或辛菌胺醋酸盐为20g，表面活性剂多苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚为6g，防冻剂乙二醇为

7g，水为67g；

或辛菌胺醋酸盐为25g，表面活性剂脂肪酸聚氧乙烯醚酯为8g，防冻剂乙二醇为8g，水为59g。

2.如权利要求1所述的防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂的制备方法，其特征在于，首先将辛菌胺母药与乙酸反应制得辛菌胺醋酸盐母药后，将辛菌胺醋酸盐与表面活性剂、防冻剂及水按配方进行预混合，充分混合搅拌，过滤，然后包装入库。

3.如权利要求1所述的防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂用于防治食用菌细菌性腐烂病的应用。

说明书

防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂、方法及应用

技术领域

[0001] 本发明属于农药技术领域，涉及辛菌胺醋酸盐，具体涉及一种防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂、方法及应用。

背景技术

[0002] 我国的食用菌产量从1978年的6万吨(占全球的5.7％)，上升到2013年的3169.68万吨(中国食用菌协会统计数据)，直接产值1707亿元，间接产值6828亿元，从业人口逾2000万，产量已占全球总产量75％以上。食用菌已经成为我国粮、菜、果、油之后的第五大农作物，占种植业总产值的5％，远远超过棉花、糖料、蚕桑和茶叶。食用菌也是美国、英国、法国、韩国、日本、加拿大等发达国家广泛栽培的特色作物，在世界范围内具有重要的市场地位。近年来，随着食用菌产业的迅速发展、食用菌栽培规模的不断增大，食用菌病虫害也越来越猖獗。食用菌在栽培过程中，菌丝暴露在外，作为良好的营养基质，为病虫害的发生提供了便利的条件。据相关统计，我国进入商品化栽培的食用菌共有50多个品种，用于大面积栽培的品种有30多种，其中易受病虫害危害的品种有20多种。病虫害能使食用菌生产减产20％～30％，严重时甚至绝收。由此可见，研究食用菌重要病虫害防治策略具有重要的生产实践指导意义。

[0003] 由假单胞菌(Pseudomonas tolaasii)引起的食用菌细菌性腐烂病是食用菌生产上的重要病害，可引起30％～80％的产量损失。假单胞菌广泛存在于培养料、覆土、空气中的尘土中，带菌的土壤是初侵染源，菇蝇和浇水均可引起病害传播。病菌侵染食用菌子实体，使菌盖或菌柄出现淡黄色水渍状病斑，在高温高湿条件下，病斑扩展迅速，引起菌盖或菌柄呈淡黄色水渍状腐烂，并散发出难闻的恶臭气味，病菇失去经济价值，不能食用，造成严重经济损失。

[0004] 辛菌胺及其衍生物辛菌胺醋酸盐(辛菌胺醋酸盐是辛菌胺的一种存在形式，有效成分为辛菌胺)是我国开发的低毒、广谱性杀菌剂，属氨基酸类内吸性杀菌剂，对多种植物真菌、细菌和病毒病害均表现出优良的防治效果。可抑制病菌的菌丝生长及孢子萌发，破坏细胞膜，抑制呼吸系统，凝固蛋白质，使酶变性。据报道，该类物质对假单胞菌属、黄单胞菌属、欧文氏菌属、棒形杆菌属等多种植物病原细菌具有非常优异的抑菌活性，是细菌病害防治有限药剂品种中的一个重要品种。

[0005] 我国食用菌病原鉴定及病害防治技术研究起步较晚，相关的登记药剂种类也十分有限。目前，国内尚没有专门登记用于防治食用菌细菌性腐烂病的有效药剂品种。国内食用菌种植中存在大部分农户分散种植类型，专业化程度不高，大部分操作依靠手工，再加上无菌化条件较差，极易感染细菌性腐烂病。生产上急需开发有效药剂用以控制病害发生蔓延。有研究表明，农用链霉素、春雷霉素对食用菌细菌性腐烂病菌表现出较好的抑制活性。由于农用链霉素的禁限用，生产上可有效防治食用菌细菌性腐烂病的药剂十分有限。急需开发作用机理独特，活性优异的杀菌剂。辛菌胺及辛菌胺醋酸盐正是这样的一种药剂，作用机理独特，与常规杀菌剂无交互抗药性，且对多种植物病原细菌表现出较高的生物活性。因此，可作为食用菌细菌性腐烂病防治的有效药剂加以开发，以有效防止病害大爆发造成的重大经济损失。

[0006] 根据辛菌胺醋酸盐理化性质及防效表现，适宜将辛菌胺醋酸盐加工成水剂。目前，我国登记的辛菌胺醋酸盐制剂大部分也是水剂。

[0007] 基于以上研究背景，有必要开发辛菌胺醋酸盐水剂，用于食用菌细菌性腐烂病防治领域。具有重要的生产实践意义。

发明内容

[0008] 针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于，提供一种防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂、方法及应用，用于防治塑料大棚、玻璃温室等室内条件下栽培的食用菌细菌性腐烂病。以达到更加有效地防治病害，同时对人体及环境生物更加友好的生态效益。

[0009] 为了解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案予以实现：

[0010] 一种防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂，包括以下原料：辛菌胺醋酸盐、表面活性剂、防冻剂和水。

[0011] 本发明还具有如下区别技术特征：

[0012] 具体的，以重量份数计，由以下原料组成：以重量份数计，由以下组分组成：辛菌胺醋酸盐为1％～30％，表面活性剂为1％～15％，防冻剂为1％～10％，余量为水，组分的重量份数之和为100％。

[0013] 优选的，以重量份数计，由以下原料组成：辛菌胺醋酸盐为2％～25％，表面活性剂为5％～8％，防冻剂为4％～8％，余量为水，组分的重量份数之和为100％。

[0014] 具体的，所述的表面活性剂为烷基酚聚氧乙烯醚、多苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚、蓖麻油聚氧乙烯醚、脂肪醇聚氧乙烯醚、牛脂胺聚氧乙烯醚、失水山梨醇脂肪酸酯、失水山梨醇脂肪酸酯聚氧乙烯醚、环氧乙烯环氧丙烷嵌段共聚物、脂肪酸聚氧乙烯醚酯、脂肪胺聚氧乙烯醚、三硅氧烷聚醚和烷基多糖苷中的一种以上组合。

[0015] 具体的，所述的防冻剂为乙二醇、丙二醇、丙三醇和二乙二醇中的一种以上组合。

[0016] 如上所述的防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂的制备方法，首先将辛菌胺母药与乙酸反应制得辛菌胺醋酸盐母药后，将辛菌胺醋酸盐与表面活性剂、防冻剂及水按配方进行预混合，充分混合搅拌，过滤，然后包装入库。

[0017] 如上所述的防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂用于防治食用菌细菌性腐烂病的应用。

[0018] 本发明与现有技术相比，具有如下技术效果：

[0019] 本发明的辛菌胺醋酸盐水剂，相对于常规的药剂，对靶标病害防治效果更为彻底，且对使用者和环境生物更为安全。本发明的辛菌胺醋酸盐水剂可达到更加有效地防治病害，同时对人体及环境生物更加友好的生态效益。室内活性和田间防治效果试验研究结果均表明，辛菌胺醋酸盐水剂对食用菌细菌性腐烂病表现出优异的抑菌活性，可作为田间防治的有效药剂加以推广使用。

附图说明

[0020] 图1是辛菌胺醋酸盐水剂的制备工艺图。

[0021] 图中的助剂是指表面活性剂和防冻剂。目前只有辛菌胺母药登记，没有辛菌胺醋酸盐母药登记，已登记辛菌胺醋酸盐产品均是将辛菌胺母药与乙酸反应制得辛菌胺醋酸盐。因此，本发明也是通过辛菌胺母药与乙酸反应制备辛菌胺醋酸盐母药，用于辛菌胺醋酸盐水剂加工及室内活性试验测定。

[0022] 以下结合实施例对本发明的具体内容作进一步详细解释说明。

具体实施方式

[0023] 遵从上述技术方案，需要说明的是：

[0024] (1)公布号为CN105724383A的中国专利：一种防止果树腐烂病的新型涂剂提到的果树腐烂病病原菌为黑腐皮壳菌属真菌(Valsa sp.)，如苹果腐烂病病原为(Valsa ceratosperma)，梨树腐烂病病原为黑腐皮壳(Valsa ambiens)、桃树腐烂病菌(Valsa leucostoma)；本发明食用菌细菌性腐烂病病原为假单胞菌(Pseudomonas tolaasii)，是一种细菌。两者虽然病害名称上都叫腐烂病，但病原在分类地位上差异很大(这也是植物病害中常见的同名不同病原现象，需要注意区别)，防治药剂上具有很大差别，不具有可比性。本发明属新用途发明，具备创造性。

[0025] (2)本发明与公布号为CN105724383A的中国专利在使用方法上差异巨大，按公布号为CN105724383的中国专利涂抹使用，不符合病害发生规律，满足不了生产实际要求。果树腐烂病一般采用涂抹方式进行，公布号为CN105724383A的中国专利也是采用的涂抹。而本发明涉及的食用菌细菌性腐烂病菌(假单胞菌，Pseudomonas tolaasii)广泛存在于培养料、覆土、空气中的尘土中，带菌的土壤是初侵染源，病菌侵染食用菌子实体。对覆土或子实体消毒处理是关键，如果采用涂抹处理，操作很不方便，效率低，且施药很不均匀，无法达到理想防治效果。因此，本发明基于生产实际出发，采用的方法是喷雾。与公布号为CN105724383A的中国专利具有很大差别。

[0026] (3)本发明与公布号为CN105724383A的中国专利相比，缺少多种关键组分，更为经济、有效和环保，具备创造性。本发明与公布号为CN105724383A的中国专利相比，缺少了很多制成涂抹剂的关键性组分，如；丙烯酸树脂溶液，树脂，热稳定剂，塑化促进剂等。而本发明的组分为喷雾使用剂型水剂的常规组分。两者差异巨大，且水剂组分中只有少量的表面活性剂和防冻剂，相对使用大量塑化剂的涂抹剂也更为环保。本发明在少使用多种助剂条件下，仍然能达到理想的防治效果，更为经济、有效和环保，具备创造性。

[0027] (4)现有技术并不能很好地防治食用菌细菌性腐烂病，生产上该病害发生严重，急需急需开发相关产品用以满足生产实际需求。

[0028] 以下给出本发明的具体实施例，需要说明的是本发明并不局限于以下具体实施例，凡在本申请技术方案基础上做的等同变换均落入本发明的保护范围。

[0029] 此外，还需要说明的是：

[0030] 辛菌胺与乙酸反应生成辛菌胺醋酸盐的反应方程式如下所示：

[0031]

[0032] 1摩尔辛菌胺与3摩尔乙酸反应生成1摩尔辛菌胺醋酸盐。辛菌胺实验式C20H45N3，分子量为327.59，辛菌胺醋酸盐实验式C26H57N3O6，分子量为507.75，乙酸实验式为CH3COOH，分子量为60.05。

[0033] 以下给出本发明的具体实施例，需要说明的是本发明并不局限于以下具体实施例，凡在本申请技术方案基础上做的等同变换均落入本发明的保护范围。

[0034] 实施例1：

[0035] 本实施例给出一种防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂，由以下组分组成：辛菌胺醋酸盐为2g，表面活性剂脂肪醇聚氧乙烯醚为5g，防冻剂乙二醇为5g，水为88g。

[0036] 如图1所示，本实施例的防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂的制备方法，首先将辛菌胺母药与乙酸反应制得辛菌胺醋酸盐母药后，将辛菌胺醋酸盐与表面活性剂、防冻剂及水按配方进行预混合，充分混合搅拌，过滤，然后包装入库。

[0037] 本实施例的防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂用于防治食用菌细菌性腐烂病的应用。

[0038] 实施例2：

[0039] 本实施例给出一种防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂，由以下组分组成：辛菌胺醋酸盐为5g，表面活性剂脂肪胺聚氧乙烯醚为6g，防冻剂乙二醇为4g，水为85g。

[0040] 本实施例的的制备方法与实施例1基本相同。

[0041] 本实施例的防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂用于防治食用菌细菌性腐烂病的应用。

[0042] 实施例3：

[0043] 本实施例给出一种防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂，由以下组分组成：辛菌胺醋酸盐为10g，表面活性剂烷基多糖苷为5g，防冻剂丙三醇为5g，水为80g。

[0044] 本实施例的的制备方法与实施例1基本相同。

[0045] 本实施例的防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂用于防治食用菌细菌性腐烂病的应用。

[0046] 实施例4：

[0047] 本实施例给出一种防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂，由以下组分组成：辛菌胺醋酸盐为15g，表面活性剂牛脂胺聚氧乙烯醚为7g，防冻剂丙三醇为6g，水为72g。

[0048] 本实施例的的制备方法与实施例1基本相同。

[0049] 本实施例的防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂用于防治食用菌细菌性腐烂病的应用。

[0050] 实施例5：

[0051] 本实施例给出一种防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂，由以下组分组成：辛菌胺醋酸盐为20g，表面活性剂多苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚为6g，防冻剂乙二醇为7g，水为67g。

[0052] 本实施例的的制备方法与实施例1基本相同。

[0053] 本实施例的防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂用于防治食用菌细菌性腐烂病的应用。

[0054] 实施例6：

[0055] 本实施例给出一种防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂，由以下组分组成：辛菌胺醋酸盐为25g，表面活性剂脂肪酸聚氧乙烯醚酯为8g，防冻剂乙二醇为8g，水为59g。

[0056] 本实施例的的制备方法与实施例1基本相同。

[0057] 本实施例的防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂用于防治食用菌细菌性腐烂病的应用。

[0058] 实施例7：

[0059] 本实施例给出一种防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂，其他组分和辛菌胺醋酸盐含量与实施例1相同，区别仅仅在于：将实施例1中的5g表面活性剂脂肪醇聚氧乙烯醚，替换为5g表面活性剂烷基酚聚氧乙烯醚，或者5g表面活性剂多苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚，或者5g表面活性剂蓖麻油聚氧乙烯醚，或者5g表面活性剂脂肪醇聚氧乙烯醚，或者5g表面活性剂牛脂胺聚氧乙烯醚，或者5g表面活性剂失水山梨醇脂肪酸酯，或者5g表面活性剂失水山梨醇脂肪酸酯聚氧乙烯醚，或者5g表面活性剂环氧乙烯环氧丙烷嵌段共聚物，或者5g表面活性剂脂肪酸聚氧乙烯醚酯，或者5g表面活性剂脂肪胺聚氧乙烯醚，或者5g表面活性剂三硅氧烷聚醚，或者5g表面活性剂烷基多糖苷。表面活性剂为市售普通的表面活性剂。

[0060] 本实施例的的制备方法与实施例1基本相同。

[0061] 本实施例的防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂用于防治食用菌细菌性腐烂病的应用。

[0062] 实施例8：

[0063] 本实施例给出一种防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂，其他组分和辛菌胺醋酸盐含量与实施例1相同，区别仅仅在于：将实施例1中的5g防冻剂乙二醇，替换为5g防冻剂丙二醇，或者替换为5g防冻剂丙三醇，或者替换为5g防冻剂二乙二醇。防冻剂为市售普通的防冻剂。

[0064] 本实施例的的制备方法与实施例1基本相同。

[0065] 本实施例的防食用菌细菌性腐烂病的辛菌胺醋酸盐水剂用于防治食用菌细菌性腐烂病的应用。

[0066] 应用效果：

[0067] 室内活性测定效果：

[0068] 试验药剂为质量分数为46％的辛菌胺醋酸盐母药(通过如实施例1中的加工方法，用辛菌胺母药与乙酸反应制备而来)；对照药剂为质量分数为91％二氯异氰尿酸钠原药(国外报道二氯异氰尿酸钠对食用菌细菌性腐烂病菌具有良好活性)。病原菌为食用菌细菌性腐烂病菌(Pseudomonas tolaasii)。

[0069] 用电子天平称取适量辛菌胺醋酸盐母药和二氯异氰尿酸钠原药，分别用0.1％吐温-80水溶液溶解成母液，进一步用0.1％吐温-80水溶液将母液稀释成5个系列浓度梯度药液备用。并设不含药剂的处理作为空白对照，对照为0.1％吐温-80水溶液。

[0070] 试验方法参照《NYT 1156.16-2008农药室内生物测定试验准则 杀菌剂第16部分：抑制细菌生长量试验 浑浊度法》，具体操作如下：

[0071] 1、培养基准备：

[0072] NA(nutrient agar)培养基(用于菌种活化、常规培养制备菌悬液)：1L NA培养基含聚蛋白胨5g，酵母粉1g，牛肉浸膏3g，蔗糖15g，琼脂17g，用10mol/L的NaOH调至pH7.0。

[0073] NB(nutrient broth)液体培养基(用于室内活性测定)：1L NB培养基含聚蛋白胨5g，酵母粉1g，牛肉浸膏3g，蔗糖15g，用10mol/L的NaOH调至pH7.0。

[0074] 将50mL上述培养基分装于100mL的广口三角瓶中，封口灭菌备用。

[0075] 2、药剂处理：

[0076] 按试验设计浓度在灭菌后冷却的NB培养基中定量加入相应药液，将生产在NA培养基平板上的菌种用灭菌水稀释为1×107个孢子/mL浓度的菌悬液，向各处理培养基中分别接种100uL菌液，置于28～30℃条件下振荡培养，转速为120r/min。

[0077] 3、调查及结果计算：

[0078] 开始培养前分别测定各处理的浑浊度，待对照处理达到对数生长期时，测定并记载各处理的浑浊度。与不加药对照浑浊度增加值相比，计算细菌生长抑制率。

[0079] 细菌生长抑制率(％)＝[(对照区浑浊度增加值－处理区浑浊度增加值)/对照区浑浊度增加值]×100

[0080] 将药剂浓度对数值及对应的细菌生长抑制率几率值作回归分析，用DPS数据处理软件求出毒力回归方程，计算各药剂的EC50、EC90及95％的置信限。

[0081] 4、结果：

[0082] 室内活性测定结果表明(详见表1和表2)，供试药剂辛菌胺醋酸盐和对照药剂二氯异氰尿酸钠对食用菌细菌性腐烂病菌的活性随着药液浓度的升高而增强。供试药剂辛菌胺醋酸盐对食用菌细菌性腐烂病菌的EC50值为1.5126mg/L，对照药剂二氯异氰尿酸钠对食用菌细菌性腐烂病菌的EC50值为3.3354mg/L。可见，辛菌胺醋酸盐对食用菌细菌性腐烂病菌的室内活性明显优于对照药剂二氯异氰尿酸钠。因此，可将辛菌胺醋酸盐开发成防治食用菌细菌性腐烂病的药剂。

[0083] 表1 辛菌胺醋酸盐对食用菌细菌性腐烂病菌的室内活性测定结果

[0084]

[0085] 表2 辛菌胺醋酸盐对食用菌细菌性腐烂病菌的室内活性测定结果总表[0086]

[0087] 田间应用效果：

[0088] 试验设在山西省运城市盐湖区东郭镇政府界村简易菇房内进行，双孢蘑菇采用床架式栽培，层架6层，每层面积12平方米。

[0089] 10％辛菌胺醋酸盐水剂(即实施例3中的配方)设置有效成分用药量为0.6克/平方米、0.8克/平方米、1.0克/平方米，对照药剂选取20％二氯异氰尿酸钠可溶粉剂(市场上购买农业部登记合格产品)，有效成分用药量为0.8克/平方米、1.2克/平方米、1.6克/平方米。于覆土后5～9天，均匀喷雾覆土。每平方米用药水量为1升。每处理设置4次重复，每次重复3平方米(为1小区)。并设清水处理为对照。

[0090] 参考农业部公布的食用菌农药田间药效试验准则规定调查方法，第1潮菇采收时调查防效，每小区随机调查2平方米，调查记录培养料上的病菇数，累计各小区的病菇数，计算防治效果。

[0091] 防治效果(％)＝[(对照区病菇数－处理区病菇数)/对照区病菇数]×100[0092] 试验结果(详见表3)表明，10％辛菌胺醋酸盐水剂对食用菌细菌性腐烂病具有良好的防治效果，高剂量达农业部对杀菌剂防效80％以上的防效要求。在用药量更少的条件下，防效明显优于对照药剂20％二氯异氰尿酸钠可溶粉剂。

[0093] 表3 辛菌胺醋酸盐对食用菌细菌性腐烂病的田间防治效果

[0094]

[0095] 室内活性和田间防治效果试验研究结果均表明，辛菌胺醋酸盐水剂对食用菌细菌性腐烂病表现出优异的抑菌活性，可作为田间防治的有效药剂加以推广使用。