一种治疗溃疡性结肠炎复方嗜酸乳杆菌片及其制药用途

摘要

本发明属于医药领域，涉及一种治疗溃疡性结肠炎的复方嗜酸乳杆菌片及制药用途。该复方嗜酸乳杆菌片是由中国株嗜酸乳杆菌、日本株嗜酸乳杆菌、粪链球菌和枯草杆菌组成的复方片剂，每片含嗜酸乳杆菌5×106个。该复方嗜酸乳杆菌片可以用于制备治疗溃疡性结肠炎的药物，也可以用于制备预防痴呆的药物。

权利要求

1.一种复方嗜酸乳杆菌片在制备预防血管性痴呆药物中的应用，其特征在于，该复方嗜酸乳杆菌片是由中国株嗜酸乳杆菌、日本株嗜酸乳杆菌、粪链球菌和枯草杆菌组成的复方片剂，每片含嗜酸乳杆菌5×106个。

2.一种复方嗜酸乳杆菌片在制备治疗血管性痴呆药物中的应用，其特征在于，该复方嗜酸乳杆菌片是由中国株嗜酸乳杆菌、日本株嗜酸乳杆菌、粪链球菌和枯草杆菌组成的复方片剂，每片含嗜酸乳杆菌5×106个。

说明书

一种治疗溃疡性结肠炎复方嗜酸乳杆菌片及其制药用途

技术领域

[0001] 本发明属于医药领域，涉及一种治疗溃疡性结肠炎的复方嗜酸乳杆菌片及制药用途。

背景技术

[0002] 复方嗜酸乳杆菌片，由中国株嗜酸乳杆菌、日本株嗜酸乳杆菌、粪链球菌和枯草杆菌四种菌粉组成的复方片剂。为肠道菌群调整药。可分解糖类产生乳酸，提高肠道酸度，从而抑制肠道致病菌繁殖。

[0003] 复方嗜酸乳杆菌片可以自制，也可以市售采购，复方嗜酸乳杆菌片在中国主要生产企业是由通化金马药业集团股份有限公司生产，其批准文号为：国药准字H10940114，规格为：每片0.5g，每片含嗜酸乳杆菌5×106个。

[0004] 复方嗜酸乳杆菌片的适应症为用于肠道菌群失调引起的肠功能紊乱，如转型急性腹泻等。用法为口服。成人一次1～2片，一日3次。

[0005] 本专利的发明在承担十三五国家重点研发计划项目“肠道微生态调控技术研究和营养健康食品创制及产业化”(项目编号：2016YFD0400605)的科研项目中，对复方嗜酸乳杆菌片进行了系统性研究，在研究中意外发现复方嗜酸乳杆菌片对溃疡性结肠炎、痴呆都具有一定的效果，尤其是在预防血管性痴呆方面具有令人预料不到的优异的疗效，遂对该课题进行系统的实验研究，进而得到了本发明的技术方案。

发明内容

[0006] 本发明的目的提供一种治疗溃疡性结肠炎的复方嗜酸乳杆菌片。

[0007] 本发明的另一目的是提供复方嗜酸乳杆菌片的制备方法。

[0008] 本发明还有一个目的是提供该复方嗜酸乳杆菌片的制药新用途。

[0009] 本发明的目的是通过以下方式实现的：

[0010] 一种治疗溃疡性结肠炎的复方嗜酸乳杆菌片，该复方嗜酸乳杆菌片是由中国株嗜酸乳杆菌、日本株嗜酸乳杆菌、粪链球菌和枯草杆菌组成的复方片剂，每片含嗜酸乳杆菌5×106个。

[0011] 一种复方嗜酸乳杆菌片在制备预防痴呆药物中的应用，该复方嗜酸乳杆菌片是由中国株嗜酸乳杆菌、日本株嗜酸乳杆菌、粪链球菌和枯草杆菌组成的复方片剂，每片含嗜酸乳杆菌5×106个。

[0012] 所述的一种复方嗜酸乳杆菌片在制备预防痴呆药物中的应用，优选该复方嗜酸乳杆菌片在制备预防血管性痴呆药物中的应用。

[0013] 一种复方嗜酸乳杆菌片在制备预防痴呆药物中的应用，优选该复方嗜酸乳杆菌片在制备预防老年性痴呆药物中的应用。

[0014] 一种复方嗜酸乳杆菌片在制备治疗痴呆药物中的应用。

[0015] 所述的一种复方嗜酸乳杆菌片在制备治疗痴呆药物中的应用，优选该复方嗜酸乳杆菌片在制备治疗血管性痴呆药物中的应用。

[0016] 所述的一种复方嗜酸乳杆菌片在制备治疗痴呆药物中的应用，优选该复方嗜酸乳杆菌片在制备治疗老年性痴呆药物中的应用。

[0017] 一种复方嗜酸乳杆菌片在制备治疗腹泻药物中的应用。

[0018] 所述的一种复方嗜酸乳杆菌片在制备治疗腹泻药物中的应用，优选该复方嗜酸乳杆菌片在制备治疗转型急性腹泻药物中的应用。

[0019] 一种复方嗜酸乳杆菌片在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用，该复方嗜酸乳杆菌片是由中国株嗜酸乳杆菌、日本株嗜酸乳杆菌、粪链球菌和枯草杆菌组成的复方片剂，每片含嗜酸乳杆菌5×106个。

[0020] 本发明所述复方嗜酸乳杆菌片由中国株嗜酸乳杆菌、日本株嗜酸乳杆菌、粪链球菌和枯草杆菌组成的复方片剂。

[0021] 说明书附图

[0022] 图1为正常对照组大鼠溃疡性结肠炎模型结肠组织病理学检查结果图(HE染色，×200)。

[0023] 图2为模型组大鼠溃疡性结肠炎模型结肠组织病理学检查结果图(HE染色，×200)。

[0024] 图3为阳性组大鼠溃疡性结肠炎模型结肠组织病理学检查结果图(HE染色，×200)。

[0025] 图4为复方嗜酸乳杆菌片组大鼠溃疡性结肠炎模型结肠组织病理学检查结果图(HE染色，×200)。

具体实施方式

[0026] 以下通过具体实施例对本发明进行进一步阐述：

[0027] 实施例1：对预防血管性痴呆大鼠学习记忆功能障碍的药物筛选实验研究[0028] 本实验通过行为学检测，观察各个药物对血管性痴呆大鼠学习记忆功能障碍的预防作用。

[0029] 1材料和方法

[0030] 1.1实验动物

[0031] 成年健康Wistar雄性大鼠，体重(200±20)g，合格证号为P00102013，由黑龙江中医药大学药物安全性评价中心提供。

[0032] 1.2药品及试剂

[0033] 药物甲：复方嗜酸乳杆菌片，由通化金马药业集团股份有限公司生产，批准文号：6
国药准字H10940114，批号：160415-6，规格：每片0.5g，每片含嗜酸乳杆菌5×10个。购于哈药集团人民同泰连锁药店。

[0034] 药物乙：嗜酸乳杆菌片，自制，由中国株嗜酸乳杆菌制成，规格：每片0.5g，每片含嗜酸乳杆菌5×106个。

[0035] 药物丙：粪链球菌片，自制，由粪链球菌制成，规格：每片0.5g，每片含粪链球菌5×106个。

[0036] 药物丁：枯草杆菌活菌胶囊，由华润紫竹药业有限公司生产，批准文号：国药准字S20030018，批号，151227-3，规格：0.25g(含活菌数不低于2.5×107CFU)。购于哈药集团人民同泰连锁药店。

[0037] 复方苁蓉益智胶囊：由辽源誉隆亚东药业有限责任公司生产，批准文号：国药准字Z20080047，规格：每粒装0.3g。购于哈药集团人民同泰连锁药店。

[0038] 甲磺酸双氢麦角毒碱片：由上海上药信谊药厂有限公司生产，批准文号：国药准字H31021182，规格：1mg。购于哈药集团人民同泰连锁药店。

[0039] 1.3血管性痴呆动物模型的建立

[0040] 在造模手术前4周，将成活大鼠随机分为8组，每组25只，即模型组(灌胃给药生理盐水，剂量：生理盐水l0mL/Kg)、药物甲组(灌胃给药药物甲，剂量：3.0g/Kg)、药物乙组(灌胃给药药物乙，剂量：3.0g/Kg)、药物丙组(灌胃给药药物丙，剂量：3.0g/Kg)、药物丁组(灌胃给药药物丁，剂量：3.0g/Kg)、化学药阳性对照甲磺酸双氢麦角毒碱片组(灌胃给药甲磺酸双氢麦角毒碱，剂量：0.5mg/Kg)、中药阳性对照复方苁蓉益智胶囊组(灌胃给药复方苁蓉益智胶囊，剂量：30mg/Kg)。另加假手术组10只(灌胃给药生理盐水，剂量：生理盐水10mL/Kg)。各组每天灌胃给药1次，连续4周。

[0041] 大鼠术前12h禁食、5h禁水。用12％水合氯醛腹腔注射麻醉，仰卧固定，颈前部去毛消毒后沿颈正中切开，分离暴露左、右侧颈总动脉，套以“0"号丝线双重结扎，逐层缝合。假手术组大鼠除不结扎颈总动脉，其余同模型组。术中大鼠肛温保持在36.5℃～37.5℃，术毕给予注射用青霉素钠水溶液适量局部涂敷，放入笼中饲养，每天腹腔注射青霉素钠30万U/只，连用4d，防治感染。

[0042] 1.4实验动物分组及给药

[0043] 造模手术后1周，将成活大鼠(成活率约为60％)随机分为8组，每组10只，即模型组(灌胃给药生理盐水，剂量：生理盐水l0mL/Kg)、药物甲组(灌胃给药药物甲，剂量：3.0g/Kg)、药物乙组(灌胃给药药物乙，剂量：3.0g/Kg)、药物丙组(灌胃给药药物丙，剂量：3.0g/Kg)、药物丁组(灌胃给药药物丁，剂量：3.0g/Kg)、化学药阳性对照甲磺酸双氢麦角毒碱片组(灌胃给药甲磺酸双氢麦角毒碱，剂量：0.5mg/Kg)、中药阳性对照复方苁蓉益智胶囊组(灌胃给药复方苁蓉益智胶囊，剂量：30mg/Kg)。另加假手术组10只(灌胃给药生理盐水，剂量：生理盐水10mL/Kg)。各组每天灌胃给药1次，连续10周。

[0044] 1.5学习记忆功能检测

[0045] 采用大鼠穿梭箱法检测各组大鼠的学习记忆能力，在连续给药10周后开始检测，每天1次，连续7d，系统参数设为循环次数20次，间隔时间5s，蜂鸣时间5s，电击时间l0s。记录每只大鼠的遭受电击次数，遭受电击的总时间及总的主动逃避时间。

[0046] 1.6统计学数据朴理

[0047] 应用SPSS15.0For Windows统计软件，多组间比较采用方差分析，结果均以 表示。

[0048] 2结果

[0049] 对血管性痴呆大鼠学习记忆功能的影响，实验结果见表1、表2、表3。

[0050] 表1显示，随训练天数的增加，电击次数呈下降趋势。训练前4d，模型组与假手术组比较、给药组与模型组比较，电击次数均无显著性差异。

[0051] 自第5d开始，组间比较出现统计学差异。至训练第7d，模型组与假手术组比较，电击次数显著增加(P<0.01)；与模型组比较，药物甲组有极显著差异(P<0.01)，电击次数有明显的减少；与模型组比较，药物乙组、药物丙组、药物丁组均无显著性差异，电击次数没有明显的减少；与模型组比较，西药阳性组与中药阳性组有显著差异(P<0.05)，电击次数有不同程度的减少。

[0052] 表1大鼠穿梭箱实验电击次数测试结果

[0053]

[0054] 注：与假手术组比较，*P<0.01；与模型组比较，#P<0.05，##P<0.01。

[0055] 表2显示，随训练天数的增加，电击时间呈下降趋势。训练前3d，模型组与假手术组比较、给药组与模型组比较，电击时间均无显著性差异。

[0056] 自第4d开始，组间比较出现统计学差异。自第5d开始，模型组与假手术组比较，电击时间显著增加(P<0.01)；与模型组比较，药物甲组、西药阳性组、中药阳性组的电击时间均显著减少(P<0.05)；与模型组比较，药物乙组、药物丙组、药物丁组均无显著性差异，电击时间没有明显的减少。

[0057] 表2大鼠穿梭箱实验电击时间测试结果

[0058]

[0059] 注：与假手术组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较#P<0.005。

[0060] 表3显示，随训练天数的增加，主动逃避时间呈上升趋势。训练前4d，模型组与假手术组比较、给药组与模型组比较，主动逃避时间均无显著性差异。

[0061] 自第5d开始，组间比较出现统计学差异。模型组与假手术组比较，主动逃避时间显著减少(P<0.01)；与模型组比较，药物甲组、西药阳性组、中药阳性组的主动逃避时间均显著增加(P<0.05，P<0.01)；与模型组比较，药物乙组、药物丙组、药物丁组均无显著性差异，主动逃避时间没有明显的增加。

[0062] 表3大鼠穿梭箱实验主动逃避时间测试结果

[0063]

[0064] 注：与假手术组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较，#P<0.05，##P<0.01[0065] 3结论

[0066] 学习记忆功能障碍是血管性痴呆临床表现的核心症状，是判断血管性痴呆模型成功与否的关键。根据血管性痴呆在临床上可由长期的脑血流低灌注引起，本研究采用永久性结扎双侧颈总动脉的方法复制大鼠的血管性痴呆模型。本实验研究显示，造模手术后第10周，模型组较假手术组出现了明显的学习记忆功能障碍，说明该动物模型制作成功。

[0067] 本实验为预防给药，给药的时间点定在手术前4周和造模手术1周后，目的是在血管性痴呆未形成的前期和血管性痴呆缓慢形成过程的初期对其进行药物干预，从而预防血管性痴呆形成后的学习记忆功能障碍。穿梭箱法是行为学检测方法中的一种重要方法，它通过检测大鼠的主动逃避反应和被动逃避反应，来客观反应大鼠的学习记忆能力。

[0068] 本实验通过对大鼠连续7d的穿梭箱训练，各组表现出了学习记忆能力的差异，模型组较假手术组出现了显著的学习记忆功能障碍，药物甲组较模型组学习记忆功能有明显的改善，即复方嗜酸乳杆菌片对血管性痴呆大鼠的学习记忆功能障碍有显著的预防作用。

[0069] 实施例2：对侧脑室注射Aβ1-42蛋白引起的老年痴呆大鼠症状的改善作用的实验研究

[0070] 1药物、材料与方法

[0071] 1.1药物

[0072] 药物甲：复方嗜酸乳杆菌片，由通化金马药业集团股份有限公司生产，批准文号：国药准字H10940114，批号：160415-6，规格：每片0.5g，每片含嗜酸乳杆菌5×106个。购于哈药集团人民同泰连锁药店。

[0073] 药物乙：嗜酸乳杆菌片，自制，由中国株嗜酸乳杆菌制成，规格：每片0.5g，每片含嗜酸乳杆菌5×106个。

[0074] 药物丙：粪链球菌片，自制，由粪链球菌制成，规格：每片0.5g，每片含粪链球菌5×106个。

[0075] 药物丁：枯草杆菌活菌胶囊，由华润紫竹药业有限公司生产，批准文号：国药准字S20030018，批号，151227-3，规格：0.25g(含活菌数不低于2.5×107CFU)。购于哈药集团人民同泰连锁药店。

[0076] 阳性药：盐酸多奈哌齐片，由陕西方舟制药有限公司生产，国药准字H20030583，5mg×28片/盒；

[0077] 1.2试剂

[0078] Aβ1-42(β-淀粉样肽)购自上海默悉生物科技有限公司；乙酰胆碱酯酶试剂盒，由上海酶联生物科技有限公司生产。

[0079] 1.3Aβ1-42的配制

[0080] 0.1mgAβ1-42溶于50μL生理盐水，浓度为2mg/L，37℃温孵5d，-20℃冰箱保存，切忌反复冻融。

[0081] 1.4痴呆动物模型复制

[0082] 以400mg/Kg剂量腹腔注射水合氯醛麻醉大鼠，将麻醉大鼠固定于大鼠脑立体定位仪上，定位参照George Paxinos所著的第5版大鼠脑立体定位图谱。每只大鼠用微量进样器注射2mg/mL的Aβ1-42试剂l5μL，缓慢注射，注完留针以保证其充分弥散，随后缝合消毒。

[0083] 1.5动物与分组

[0084] SD大鼠，雄性，体重180～220g，SPF级，合格证号为P00102013，由黑龙江中医药大学药物安全性评价中心提供。

[0085] 动物随机分为正常组、模型组、阳性药(多奈哌齐)组，药物甲组，药物乙组，药物丙组，药物丁组，每组10只。正常组SD大鼠于侧脑室注射生理盐水5μL；阳性药对照组、模型组、药物甲组、药物乙组、药物丙组、药物丁组各给药组分别于侧脑室注射Aβ1-42蛋白5μL(10μg)。大鼠术后灌胃给药，多奈哌齐、药物甲组、药物乙组、药物丙组、药物丁各给药组均用生理盐水溶解。给药剂量均为：3mg/Kg，给药体积为0.1mL/10g，每日1次，共给药8d。

[0086] 1.6水迷宫实验

[0087] 以定位航行、空间探索为指标。连续测试4d，观察实验动物寻找并爬上平台所需时间，即潜伏期。最后1d进行空间探索实验，记录动物第1次到达原平台位置的时间、穿越原平台的次数以及在目标象限活动的时间百分比。

[0088] 1.7跳台实验

[0089] 跳台实验装置为有机玻璃箱。板底有铜栅，可通交流电，电压为40伏。底部铜栅上的一角放置橡皮园台为安全区，动物可跳到圆台上躲壁电击。实验开始时，先将动物放入箱内自由活动2分钟，熟悉环境，然后接通铜栅电源，正常情况下动物要跳到橡皮台上回避电击。

[0090] (1)学习测试：大鼠受电击后从起步区直接跳至安全区为“正确反应”，以达到连续10次电击均为正确反应(即10/10)前所需的电击次数(即尝试次数)表示其学习获得能力。
若尝试次数超过30次则不再测试，以30次为最大值计数。

[0091] (2)记忆再现测试：选上述达到10/10标准的大鼠，休息24h后再次同样方法测试，以达10/10标准前的尝试次数表示记忆再现能力。

[0092] 2结果

[0093] 2.1定位航行实验

[0094] 表4对Aβ1-42蛋白引起的老年痴呆大鼠逃避潜伏期的影响( n＝10)

[0095]

[0096] 注：与模型组相比*P<0.05，**P<0.01；

[0097] 结果表明，各组实验动物找到平台的潜伏期随着训练逐渐缩短。模型组从训练第二天开始，动物的潜伏期延长，2～4天的潜伏期与正常组比较差异均有统计学意义(P<0.05，P<0.01)。给予阳性药后，老年痴呆模型大鼠的潜伏期明显减少，与模型组比较，差异有统计学意义(P<0.01)。药物甲组、药物乙组、药物丙组、药物丁组的潜伏期略有减少，但与模型组比较，差异没有统计学意义。

[0098] 2.2空间搜索实验

[0099] 表5对Aβ1-42蛋白引起的老年痴呆大鼠空间搜索能力的影响( n＝10)[0100]

[0101] 注：与模型组相比**P<0.01；

[0102] 模型组动物穿越平台位置的次数及目标象限活动时间的百分比明显低于正常组(P<0.01)；阳性对照组大鼠穿越平台位置的次数均明显增加，目标象限活动时间的百分比显著升高，与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。药物甲组、药物乙组、药物丙组、药物丁组大鼠穿越平台位置的次数略有增加，目标象限活动时间的百分比略有升高，但与模型组比较，没有显著性差异。

[0103] 2.3跳台试验

[0104] 表6各组大鼠跳台实验错误次数比较

[0105]

[0106] 注：与模型组相比**P<0.01；

[0107] 结果显示，造模后与正常组比较，模型组获得记忆和记忆再现动物数均下降、次数均上升，阳性对照组给药后获得记忆和记忆再现动物数有明显增加，获得记忆次数及记忆再现次数明显下降，与模型组比较差异显著(P<0.01)；药物甲组、药物乙组、药物丙组、药物丁组给药后获得记忆和记忆再现动物数没有明显增加，获得记忆次数及记忆再现次数没有明显下降，与模型组比较无显著性差异。提示药物甲组、药物乙组、药物丙组、药物丁组对记忆障碍没有明显改善作用。

[0108] 以上结果综合表明，药物甲组、药物乙组、药物丙组、药物丁组不能明显改善痴呆动物的空间学习记忆能力、行为学特征及脑部病变，对老年痴呆没有明显的治疗作用。

[0109] 实施例3：对大鼠溃疡性结肠炎模型的药物筛选实验研究

[0110] 为了探讨对溃疡性结肠炎的治疗作用，采用三硝基苯磺酸建立大鼠溃疡性结肠炎模型，观察各益生菌对溃疡性结肠炎大鼠血清炎性因子和结肠病理损伤的影响。

[0111] 1材料

[0112] 1.1试药

[0113] 复方嗜酸乳杆菌片，由通化金马药业集团股份有限公司生产，批准文号：国药准字H10940114，批号：160415-6，规格：每片0.5g，每片含嗜酸乳杆菌5×106个。购于哈药集团人民同泰连锁药店。柳氮磺吡啶片，由上海中西三维药业有限公司生产，批准文号：国药准字H31020450，批号：160221，规格：0.25g/片；2，4，6-三硝基苯磺酸，由上海宝曼生物科技有限公司生产，纯度：99％，批号：15122；IL-1试剂盒，由上海康朗生物科技有限公司生产，批号：20160314-5；IL-6ELSIA试剂盒，由北京方程生物科技有限公司生产，批号：20160303；IL-
8ELSIA试剂盒，由上海晶抗生物工程有限公司生产，批号：20160112；戊巴比妥钠注射液，由北京普博斯生物科技有限公司生产，批号：20151212-6；无水乙醇，由山东裕升生物科技有限公司生产，批号：20151116-2。

[0114] 1.2实验动物

[0115] SD大鼠，120只，SPF级，雄性，体重240～260g，购于黑龙江中医药大学药物安全性评价中心，合格证号为P00102013。

[0116] 1.3仪器

[0117] AUY分析天平，由成都一科仪器设备有限公司制造，精度：0.01g；96A酶标仪，由北京贝登医疗设备有限公司制造；生物显微镜，由上海仪圆光学仪器厂制造；RM2235石蜡切片机，由北京科誉兴业科技发展有限公司制造；全自动组织脱水机TP1020，由北京悦泰行科技发展有限公司制造；HI1220烤片机，由德国Leica公司制造；HI1210摊片机，由湖北徕克医疗仪器有限公司制造；EG1150H+C组织包埋机，由上海新振仪器设备有限公司制造；DFC420C病理成像系统，由德国Leica公司制造。

[0118] 2方法

[0119] 2.1动物模型制备及分组

[0120] 雄性SD大鼠，体重240～260g，实验前各组大鼠禁食不禁水48h，用2％戊巴比妥钠腹腔麻醉。取大鼠，用直径2.0mm，长约12cm的硅胶管由肛门轻缓插入8cm，注入2，4，6硝基苯-1磺酸与无水乙醇以1：1比例混匀，按60mg·kg 注入混合药液体积，大鼠头部朝下，肛门朝上手托20s，造模后2d，动物出现懒动、精神差、毛色粗糙、无光泽、凌乱、食欲较差，大便稀或不成形，肛周皮毛被粪便污染，依据上述症状选取造模成功的大鼠30只，按体重随机分成3组，分别为模型对照组、柳氮磺吡啶片组、复方嗜酸乳杆菌片组，每组10只，另取10只大鼠作为正常对照组。

[0121] 2.2给药

[0122] 正常对照组和模型对照组给予蒸馏水10mL·kg-1，其余各组分别灌胃给予柳氮磺吡啶片(剂量：500mg·kg-1)、复方嗜酸乳杆菌片(剂量：5g·kg-1)的药液，1次·d-1，连续14d，末次给药后30min，各组大鼠腹腔注射2％戊巴比妥钠麻醉，腹主动脉取血，5000r·min-1离心10min，取上清液待测。

[0123] 取结肠组织，10％福尔马林固定，HE染色，镜下观察结肠黏膜组织病理学特征，评分标准为：无损伤为0分；肠壁正常或基本正常，腺体及上皮形为1分；上皮覆盖不全或不成熟，黏膜层及黏膜下层大量慢性炎性细胞浸润为2分；明显充血水肿，黏膜层及黏膜下层大量中性粒细胞浸润，隐窝肿坏死及溃疡形成为3分。

[0124] 2.3检测指标

[0125] 采用ELSIA法分别检测血清中IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α含量。

[0126] 2.4统计学方法

[0127] 计量资料均采用 表示，统计学资料用SPSS15.0软件进行统计处理。计量资料采用单因素方差分析，多组间比较用方差分析，两两比较，用q检验，等级资料采用卡方检验。

[0128] 3结果

[0129] 3.1对大鼠溃疡性结肠炎血清炎性因子水平的影响

[0130] 模型对照组血清TNF-α、IL-8水平显著升高(P＜0.05vs正常对照组)，连续给药14d，复方嗜酸乳杆菌片能明显降低三硝基苯磺酸致大鼠溃疡性结肠炎模型血清TNF-α水平(P＜0.05)和IL-8水平(P＜0.01)，实验结果见表7。

[0131] 表7对大鼠溃疡性结肠炎模型血清炎性因子的影响

[0132]

[0133] 注：与正常对照组，*P＜0.05；与模型对照组比较，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。

[0134] 3.2对大鼠溃疡15性结肠炎模型结肠组织病理评分的影响

[0135] 显微镜下结肠组织病理观察：正常对照组动物结肠表面光滑，无糜烂或溃疡，见附图1；模型对照组动物结肠可见明显的充血水肿，黏膜层及黏膜下层大量中性粒细胞浸润，隐窝肿坏死及溃疡形成，见附图2；柳氮磺吡啶片组结肠上皮覆盖不全或不成熟，黏膜层及黏膜下层大量慢性炎性细胞浸润，见附图3；复方嗜酸乳杆菌片组动物黏膜层及黏膜下层少量慢性炎性细胞浸润，见附图4。

[0136] 显微镜下观察结肠组织病理评分：模型对照组镜下评分与正常对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01)；复方嗜酸乳杆菌片组动物结肠黏膜组织病理评分与模型对照组比较有显著性降低(P＜0.05)。结果显示复方嗜酸乳杆菌片能明显减少三硝基苯磺酸致大鼠溃疡性结肠模型结肠病理改变，见表8。

[0137] 表8对大鼠溃疡性结肠炎模型结肠组织病理评分的影响

[0138]

[0139] 注：与正常对照组比较，**P＜0.01；与模型对照组比较，▲P＜0.05。

[0140] 4结论

[0141] 本研究发现复方嗜酸乳杆菌片能明显降低大鼠UC模型血清TNF-α、IL-8炎性因子，明显改善结肠组织病理改变，具有明显的治疗作用。

[0142] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。