一种用于降血脂的药物及其制备方法

摘要

本发明涉及一种用于降血脂的药物及其制备方法。本发明公开了一种用于治疗高脂血症和/或治疗动脉粥样硬化的药物。本发明所述化合物可以增加肝细胞对低密度脂蛋白的摄取率，能够显著降低大鼠的血清总胆固醇、血清甘油三酯、血清低密度脂蛋白胆固醇，作用效果与辛伐他汀相当，表明本发明化合物具有优异的降血脂活性，能够应用于高脂症和动脉粥性硬化的治疗中。

权利要求

1.一种式1化合物，或其药学上可接受的盐：式I中，

A表示杂环基，其任选被选自卤素、氧代、氰基、硝基、羟基、氨基、羧基、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4烷氧基C1-4烷基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基羰基和C1-4烷氧基羰基的基团所取代；

R1表示：羟基、氨基、C1-4烷氧基、C1-4烷基、C3-8环烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基C1-

4烷基；

R2表示：氢、羟基、氨基、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基取代的C1-4烷基、C3-8环烷基、C1-4烷基羰基、C1-4烷氧基羰基；

L表示：-(CR3R4)n-，其中每个R3、R4可以相同或不同，各自独立地选自氢或C1-4烷基；

n表示1、2、3、4或5；

其中所述杂环基表示五元至七元单环杂环烷基，或九元或十元双环杂环烷基；

所述芳基表示C6-14芳基。

2.根据权利要求1所述的化合物，其选自：

3.一种制备根据权利要求1所述的式1化合物或其药学上可接受的盐的方法，所述方法包括以下步骤：步骤一：

该步骤包括使式II化合物与式III化合物在惰性溶剂中反应以制备式IV化合物；

步骤二：

该步骤包括使式IV化合物与式V化合物以及Meldrum’s酸在惰性溶剂中反应以制备式VI化合物；

步骤三：

该步骤包括使式VI化合物与式VII化合物以及碱、催化剂在惰性溶剂中反应以制备式1化合物；

用于该步骤的碱为氢氧化物；

用于该步骤的催化剂为亚铜盐；

任选的步骤四：

在有需要的情况下，使所述式1化合物经历成盐步骤以制备其药学上可接受的盐；

上述步骤中，A、R1、R2、L如权利要求1中所述，X表示卤素；R表示C1-4烷基。

4.一种药物组合物，其包含至少一种根据权利要求1或2所述的式1化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。

5.根据权利要求1或2所述的式1化合物或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于治疗高脂血症。

6.根据权利要求1或2所述的式1化合物或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于治疗动脉粥样硬化。

说明书

一种用于降血脂的药物及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明属于药物化学领域，更具体而言，涉及一类新的具有降血脂活性的杂环化合物、其制备方法及其用于制备降血脂和/或治疗动脉粥样硬化的药物中的用途。

背景技术

[0002] 高脂血症(hyperlipidemia，HLP)是人体内脂质代谢失常，血浆中一种或多种脂质成份异常增高的一种病症。高脂血症可以引起机体抗氧化能力和血液流变学的异常，这些异常因素又可做为高脂血症的一种中间环节或促进因子，造成动脉内皮功能损害，引起内皮细胞功能障碍或血管壁功能和结构的损伤，影响血管功能，加重和促进高脂血症所致的病理改变和临床症状。研究表明，高脂血症是动脉粥样硬化的首要危险因素，它可以引起严重的心脑血管疾病，如高血压、冠心病、脑血管病、老年性痴呆等。因此，如何有效的预防和治疗高脂血症已经成为当前医学研究的热点之一。

[0003] 目前市场上临床主流药物主要有HMG-CoA还原酶抑制剂、烟酸及其衍生物、贝特类药物。HMG-CoA还原酶抑制剂类药物包括洛伐他汀、辛伐他汀、阿托伐他汀、氟伐他汀、普伐他汀等，烟酸及其衍生物有烟酸、阿昔莫司、烟酸肌醇酯，贝特类药物包括非诺贝特、氯贝丁酯、环丙贝特等。这些药物本身都存在一定的缺陷，如非诺贝特，由于几乎不溶于水，只有制成特殊的药物制剂，以保证良好的生物利用度，但由于非诺贝特在水中的不溶性，制剂释放过程中存在再结晶的趋势，影响了生物利用度。

[0004] 综上所述，本领域迫切需要提供新的具有降血脂活性的化合物。

发明内容

[0005] 本发明的目的是提供一类新的具有降血脂活性的化合物。

[0006] 本发明的第一方面，提供了一种式1化合物，或其药学上可接受的盐：

[0007]

[0008] 式I中，

[0009] A表示杂环基，其任选被选自卤素、氧代、氰基、硝基、羟基、氨基、羧基、C1-4烷基、C3-8环烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4烷氧基C1-4烷基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基羰基和C1-4烷氧基羰基的基团所取代；

[0010] R1表示：羟基、氨基、C1-4烷氧基、C1-4烷基、C3-8环烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、芳基、芳基C1-2烷基、杂环基、杂环基C1-2烷基；

[0011] R2表示：氢、羟基、氨基、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基取代的C1-4烷基、C3-8环烷基、C1-4烷基羰基、C1-4烷氧基羰基、芳基、芳基C1-2烷基、杂环基、杂环基C1-2烷基；

[0012] L表示：-(CR3R4)n-，其中每个R3、R4可以相同或不同，各自独立地选自氢或C1-4烷基；

[0013] n表示1、2、3、4或5。

[0014] 在本发明的一个实施方案中，所述杂环基表示五元或六元单环杂芳基，或者九元或十元双环杂芳基。

[0015] 在本发明的一个实施方案中，所述杂环基表示五元至七元单环杂环烷基，或九元或十元双环杂环烷基。

[0016] 在本发明的一个实施方案中，所述芳基表示C6-14芳基。

[0017] 在本发明的一个实施方案中，所述R1表示：羟基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧基C1-4烷基。

[0018] 在本发明的一个实施方案中，所述R1表示：杂环基C1-2烷基。

[0019] 在本发明的一个实施方案中，所述R2表示：C1-4烷基或卤代C1-4烷基。

[0020] 在本发明的一个实施方案中，所述A表示哌嗪-1-基、硫代码啉-1-基。

[0021] 在本发明的一个实施方案中，所述A表示吡啶-2-基。

[0022] 在本发明的一个实施方案中，所述A未被取代。

[0023] 在本发明的一个实施方案中，所述A被选自卤素、氧代、氰基、硝基、羟基、氨基、羧基、C1-4烷基、C3-8环烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4烷氧基C1-4烷基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基羰基和C1-4烷氧基羰基的基团所取代。

[0024] 本发明优选的化合物是：

[0025]

[0026] 作为本发明中的“卤素”，可以例举例如氟、氯、溴、碘。

[0027] 作为本发明中的“烷基”，可以例举直链状或分支链状的碳数为1-4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基。其中，较好是碳数为1-2的烷基。

[0028] 作为本发明中的“环烷基”，可以例举碳数为3-8的环烷基，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基。其中，较好是碳数为5-7的环烷基。

[0029] 作为本发明中的“芳基”，可以例举碳数为6-14的芳族烃基，例如苯基、萘基等。

[0030] 作为本发明中的“杂环基”，可以例举以下的(1)或(2)：

[0031] (1)杂芳基，指含至少1个选自O、N和S的杂原子，任选含1-3个独立选自O、N和S的另外的杂原子的任何五元或六元单环芳环结构；或含至少1个选自O、N和S的杂原子，任选含1-4个独立选自O、N和S的另外的杂原子的九元或十元双环芳环结构。所述杂芳基可连接在环的任何杂原子或碳原子上，以便形成稳定的结构。适宜的杂芳基的实例包括，但不限于吡咯基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡喃基、中氮茚基、吲哚基、异吲哚啉基、吲唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、嘌呤基、喹嗪基、喹啉基、异喹啉基、异噻唑基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、蝶啶基等。

[0032] (2)杂环烷基，指含有选自O、N和S的至少一个杂原子、任选含有独立选自O、N和S的1-3个额外杂原子的任何五元至七元单环、饱和或部分不饱和环结构；或含有选自O、N和S的至少一个杂原子、任选含有独立选自O、N和S的1-4个额外杂原子的九元或十元饱和、部分不饱和或部分芳族双环的环系统。杂环烷基可连于环的任何杂原子或碳原子上，以至产生稳定结构。适当的杂环烷基的实例包括，但不限于，吡咯啉基、吡咯烷基、二氧戊环基、咪唑咪基、咪唑烷基、吡唑啉基、吡唑烷基、哌啶基、二氧六环基、吗啉基、二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基、三噻烷基、二氢吲哚基、色烯基。

[0033] 当依据本发明的化合物具有至少1个手性中心时，它们可相应地以对映体形式存在。当化合物具有2个或更多个手性中心时，它们可相应地以非对映异构体形式存在。应该理解的是，所有这样的异构体及其混合物均包括在本发明范围之内。另外，化合物的某些结晶形式可以多晶形物形式存在，并且这些也意欲包括本发明范围之内。再有，某些化合物可与水(即水合物)或与普通有机溶剂形成溶剂化物，并且这样的溶剂化物也意欲包括本发明范围之内。

[0034] 本发明在其范围内包括本发明化合物的前药。一般，这样的前药将是该化合物的功能性衍生物，其易于在体内转化为所需的化合物。因此。在本发明治疗方法中，术语“给予”将包括用特别公开的化合物或用可能没有特别公开、但在向患者给药后在体内可转化为特定化合物的化合物治疗所描述的多种疾症。选择和制备适宜的前药衍生物的常规程序，在，例如，“Design of Prodrugs”,H.Bundgaard,Elsevier编著，1985中描述。

[0035] 为了应用在药物中，本发明化合物的盐被认为是无毒性的“药学上可接受的盐”。然而，其它的盐可用于制备依据本发明的化合物，或制备它们的药学上可接受的。所述化合物的适宜的药学上可接受的盐包括酸加成盐，其可，例如，通过将所述化合物溶液与药学上可接受的酸诸如盐酸、硫酸、反丁烯二酸、顺丁烯二酸、丁二酸、乙酸、苯甲酸、柠檬酸、酒石酸、碳酸或磷酸的溶液混合形成。此外，当本发明化合物带有酸的部分，则其适宜的药学上可接受的盐可包括碱金属盐，如，钠盐或钾盐；碱土金属盐，如，钙盐或镁盐；以及与适宜的有机配体所形成的盐，如季铵盐。因而，代表性的药学上可接受的盐包括如下：

[0036] 乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、依地酸钙、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、克拉维酸盐、柠檬酸盐、二盐酸盐、依地酸盐、乙磺酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、海巴胺、氢溴酸盐、盐酸盐、羟基萘甲酸盐、碘化物、异硫代硫酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、顺丁烯二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、溴甲烷、甲硝酸盐、甲硫酸盐、粘液酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、N-甲基葡糖胺铵盐、油酸盐、棕榈酸盐、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、硫酸盐、碱式乙酸盐、丁二酸盐、丹宁酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐和戊酸盐。

[0037] 可用于制备药学上可接受的盐的代表性的酸和碱包括如下：

[0038] 酸，包括乙酸、2,2-二氯乙酸、酰化的氨基酸、脂肪酸、褐藻酸、抗坏血酸、L-天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰氨基苯甲酸、(+)-樟脑酸、樟脑磺酸、(+)-(1S)-樟脑-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、肉桂酸、柠檬酸、环己烷氨基磺酸、十二烷基硫酸、乙烷-1，2-二磺酸、乙烷磺酸、2-羟基-乙烷磺酸、甲酸、反丁烯二酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡庚糖酸、D-葡萄糖酸、D-葡萄糖醛酸、L-谷氨酸、α-氧代-戊二酸、乙醇酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、(+)-L-乳酸、(±)-DL-乳酸、乳糖酸、顺丁烯二酸、(-)-L-苹果酸、丙二酸、(±)-DL-扁桃酸、甲烷磺酸、萘-2-磺酸、萘-1，5-二磺酸、1-羟基-2-萘酸、烟酸、硝酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、双羟萘酸、磷酸、L-焦谷氨酸、水杨酸、4-氨基-水杨酸、癸二酸、硬脂酸、丁二酸、硫酸、丹宁酸、(+)-L-酒石酸、硫氰酸、对-甲苯磺酸和十一碳烯酸；和碱，包括氨、L-精氨酸、氢氧化钙、胆碱、丹醇、二乙醇胺、二乙胺、2-(二乙基氨基)-乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-甲基-葡糖胺、海巴胺、1H-咪唑、L-赖氨酸、氢氧化镁、4-(2-羟乙基)-吗啉、哌嗪、氢氧化钾、1-(2-羟乙基)-吡咯烷、仲胺、氢氧化钠、三乙醇胺、氨丁三醇和氢氧化锌。

[0039] 本发明的第二方面，提供了一种制备上述式1化合物或其药学上可接受的盐的方法，所述方法包括以下步骤：

[0040] 步骤一：

[0041]

[0042] 该步骤包括使式II化合物与式III化合物在惰性溶剂中反应以制备式IV化合物。

[0043] 用于该步骤的溶剂可为醇，例如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、异戊醇、辛醇、环己醇、2-甲氧基乙醇、二甘醇或甘油；芳烃，例如苯、甲苯或二甲苯；或它们的混合溶剂。溶剂优选为醇，更优选乙醇。

[0044] 该步骤的反应温度优选为20℃至150℃，更优选50℃至溶剂的回流温度。

[0045] 该步骤的反应时间优选为10分钟至24小时，更优选1小时至5小时。

[0046] 步骤二：

[0047]

[0048] 该步骤包括使式IV化合物与式V化合物以及Meldrum’s酸在惰性溶剂中反应以制备式VI化合物。

[0049] 用于该步骤的溶剂可为醇，例如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、异戊醇、辛醇、环己醇、2-甲氧基乙醇、二甘醇或甘油；芳烃，例如苯、甲苯或二甲苯；或它们的混合溶剂。溶剂优选为醇，更优选乙醇。

[0050] 该步骤的反应温度优选为0℃至150℃，更优选20℃至溶剂的回流温度。

[0051] 该步骤的反应时间优选为30分钟至24小时，更优选1小时至6小时。

[0052] 步骤三：

[0053]

[0054] 该步骤包括使式VI化合物与式VII化合物以及碱、催化剂在惰性溶剂中反应以制备式1化合物。

[0055] 用于该步骤的溶剂可为醇，例如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、异戊醇、辛醇、环己醇、2-甲氧基乙醇、二甘醇或甘油；芳烃，例如苯、甲苯或二甲苯；卤代烃，例如氯仿、二氯甲烷；或它们的混合溶剂。溶剂优选为芳烃，更优选甲苯。

[0056] 用于该步骤的碱可为氢氧化物，例如氢氧化钠、氢氧化钾；碳酸盐，例如碳酸钠、碳酸钾；碳酸氢盐，例如碳酸氢钠、碳酸氢钾；醋酸盐，例如醋酸钠或醋酸钾。碱优选为碳酸氢盐，更优选碳酸氢钾。

[0057] 用于该步骤的催化剂可为亚铜盐，例如碘化亚铜。

[0058] 任选的步骤四：

[0059] 在有需要的情况下，使所述式1化合物经历成盐步骤以制备其药学上可接受的盐。

[0060] 上述步骤中，A、R1、R2、L如上所述，X表示卤素，优选氯或溴；R表示C1-4烷基。

[0061] 本发明的第三方面，提供了一种药物组合物，其包含至少一种本发明所述式1化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。

[0062] 依据常规药用化合技术，通过将一种或多种化合物与药学上可接受的载体精细混合，可制备含一种或多种本文描述的、作为活性成分的本发明化合物的药用组合物。依据所要给药的途径(如，口服、胃肠外)不同，可使用广泛类型的载体。因而，对于液体口服制剂，诸如混悬剂、酏剂和溶液剂，适宜的载体和添加剂包括水、二醇、油、醇、调味剂、防腐剂、稳定剂、着色剂等；对于固体口服制剂，诸如粉剂、胶囊剂和片剂，适宜的载体和添加剂包括淀粉、糖、稀释剂、粒化剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。也可用物质，诸如糖对固体口服制剂进行包衣或进行肠溶包衣，以调节主要吸收部位。对于胃肠外给药，载体将通常由可加入增加溶解性或保存性的灭菌水或其它成分组成。也可利用水性载体连同适当的添加剂一起，制备可注射的混悬剂或溶液剂。

[0063] 优选地，这些组合物以单位剂型呈现，所述单位剂型为诸如片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、灭菌胃肠外溶液剂或混悬剂、计量的气雾剂或液体喷雾剂、滴剂、安瓿、自我注射器装置或栓剂；用于口腔的胃肠外、鼻内、舌下或直肠给药或用于吸入或喷射给药的剂型。或者，组合物可以适宜的、每周给药一次或每月给药一次的形式呈现；例如，活性化合物的不溶性盐，诸如癸酸盐，可适合提供储库制剂，用于肌肉注射。

[0064] 有利的是，可将本发明化合物以单个每日剂量形式给药，或每日总剂量可分成每日两次、三次或四次剂量给药。此外，可以经鼻内的形式经由局部使用适宜的鼻内工具给予本发明化合物，或经由本领域普通技术人员熟悉的透皮贴片给予本发明化合物。为了以透皮传递系统的形式给药，在整个给药方案中给药剂量当然将是连续的而间歇性的。

[0065] 本产品的每日剂量可在很大范围内变化，从每成人每天0.01-1000mg。对于口服给药，优选提供片剂形式的组合物，所述片剂含0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0、100、150、200、250和500毫克的活性成分，为待治疗的患者进行症状的剂量调整。一般在每天约0.01mg/kg-约300mg/kg体重的剂量水平提供药物的有效量。优选地，该范围在从每天约0.5-约5.0mg/kg体重，最优选地，从每天约1.0-约3.0mg/kg体重。按照给药方案，可以每天给予本化合物1-4次。

[0066] 给药的最佳剂量可由本领域专业人员易于确定并且将依具体使用的化合物、给药模式、制剂的强度、给药方式以及疾病状况的进展不同而异。另外，与具体被治疗的患者有关的因素，包括患者年龄、体重、饮食和给药次数，将会产生调整剂量的需求。

[0067] 本发明的第四方面，提供了本发明所述式1化合物或其药学上可接受的盐在治疗高血脂症中的应用，其包括向有需要的个体给予有效量的至少一种本发明所述式1化合物或其药学上可接受的盐。

[0068] 本发明的第五方面，提供了本发明所述式1化合物或其药学上可接受的盐在治疗动脉粥样硬化中的应用，其包括向有需要的个体给予有效量的至少一种本发明所述式1化合物或其药学上可接受的盐。

[0069] 本发明的第五方面，提供了本发明所述式1化合物或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于治疗高血脂症。

[0070] 本发明的第五方面，提供了本发明所述式1化合物或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于治疗动脉粥样硬化。

[0071] 本发明化合物可以增加肝细胞对低密度脂蛋白的摄取率，能够显著降低大鼠的血清总胆固醇、血清甘油三酯、血清低密度脂蛋白胆固醇，作用效果与辛伐他汀相当，表明本发明化合物具有优异的降血脂活性，能够应用于高脂症和动脉粥性硬化的治疗中。

具体实施方式

[0072] 在下文中更详细地描述了本发明以有助于对本发明的理解。

[0073] 所属领域的技术人员将认识到：本发明所描述的化学反应可以用来合适地制备许多本发明的其他化合物，且用于制备本发明的化合物的其它方法都被认为是在本发明的范围之内。例如，根据本发明那些非例证的化合物的合成可以成功地被所属领域的技术人员通过修饰方法完成，如适当的保护干扰基团，通过利用其他已知的试剂除了本发明所描述的，或将反应条件做一些常规的修改。另外，本发明所公开的反应或已知的反应条件也公认地适用于本发明其他化合物的制备。

[0074] 实施例1：1-((3-甲氧基-4-甲基-6-氧代-4,5,6,7-四氢-2H-吡唑[3,4-b]吡啶-2-基)甲基)-3-(哌啶-1-基)脲(化合物I)

[0075]

[0076] 步骤一：将溴甲基肼(2.46g，20.0mmol)添加到2-氰基乙酸甲酯(1.98g，20.0mmol)在乙醇(100mL)中的溶液，并在50℃搅拌混合物2小时。在减压下浓缩反应溶液，获得的残留物通过添加饱和的碳酸氢钠水溶液和乙酸乙酯分离为有机层和水层。用盐水洗涤有机层并在无水硫酸钠上干燥，并在减压下将溶剂蒸馏出。用氯仿重结晶获得的残留物以得到1-(溴甲基)-5-甲氧基-1H-吡唑-3-胺2.93g，收率：72％，含量99％。ESI-MS：205.99[M+H]+。

[0077] 步骤二：将乙醛甲基半缩醛(0.76g，20.mmol)添加到步骤一中制备的1-(溴甲基)-5-甲氧基-1H-吡唑-3-胺(2.05g，10.0mmol)和Meldrum’s酸(2.88g，20.0mmol)的乙醇(40mL)溶液中，并将混合物在加热回流下搅拌5小时。在减压下蒸馏出反应溶液中的溶剂。
用四氢呋喃重结晶获得的残留物以得到2-(溴甲基)-3-甲氧基-4-甲基-4,5-二氢-2H-吡唑[3,4-b]吡啶-6(7H)-酮1.78g，收率：65％，含量98％。ESI-MS：274.01[M+H]+。

[0078] 步骤三：将1-(哌嗪-1-基)脲(0.86g,6.0mmol)、2-(溴甲基)-3-甲氧基-4-甲基-4,5-二氢-2H-吡唑[3,4-b]吡啶-6(7H)-酮(1.37g，5.0mmol)、KHCO3(1.38g,10.0mmol)、CuI(0.19g,1.0mmol)和甲苯(30ml)混合在一起，在加热回流下搅拌6小时。冷却至室温，将所得的反应混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水洗涤，再用无水硫酸钠干燥，减压下浓缩；粗产物用硅胶柱色谱分离纯化，洗脱剂为乙酸乙酯-环己烷(1:2)，得到白色固体的标题化合物
1.42g，产率为84％，含量99％。

[0079] ESI-MS：338.19[M+H]+

[0080] 元素分析：理论值/实测值，C(49.84/49.71)，H(6.87/6.77)，N(29.06/29.19)，O(14.23/14.33)

[0081] 1H NMR(400MHz,DMSO-D6)δ8.09(s,1H),6.05(s,1H),5.95(s,1H),5.61(s,2H),4.08(s,3H),3.17(m,1H),2.65(t,8H),2.51(q,1H),2.31(q,1H),2.11(s,1H),1.31(d,3H)。

[0082] 实施例2：1-((3-((2H-1,2,3-三唑-2-基)甲基)-4-(氟甲基)-6-氧代-4,5,6,7-四氢-2H-吡唑[3,4-b]吡啶-2-基)甲基)-3-硫代吗啉基脲(化合物II)

[0083]

[0084] 按照实施例1的方法，用3-氧代-4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)丁腈代替2-氰基乙酸甲酯，1-氟乙醛甲基半缩醛代替乙醛甲基半缩醛，用1-(硫代吗啉-4-基)脲代替1-(哌嗪-1-基)脲，得到淡黄色固体的标题化合物，三步总产率38％。

[0085] ESI-MS：424.16[M+H]+

[0086] 元素分析：理论值/实测值，C(45.38/45.48)，H(5.24/5.29)，F(4.49/4.53)，N(29.77/29.64)，O(7.56/7.51)，S(7.57/7.55)

[0087] 1H NMR(400MHz,DMSO-D6)δ8.04(s,1H),7.62(d,2H),6.03(s,1H),5.97(s,1H),5.61(s,2H),4.99(s,2H),4.55(q,1H),4.25(q,1H),3.25(m,1H),2.91(t,4H),2.72(t,4H),
2.61(q,1H),2.31(q,1H)。

[0088] 实施例3：1-(3-氯吡啶-2-基)-3-((3-(2-乙氧基乙基)-6-氧代-4-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢-2H-吡唑[3,4-b]吡啶-2-基)甲基)脲(化合物III)

[0089]

[0090] 按照实施例1的方法，用5-乙氧基-3-氧代戊腈代替2-氰基乙酸甲酯，三氟乙醛甲基半缩醛代替乙醛甲基半缩醛，用1-(3-氯-吡啶-2-基)脲代替1-(哌嗪-1-基)脲，得到白色固体的标题化合物，三步总产率35％。

[0091] ESI-MS：461.12[M+H]+

[0092] 元素分析：理论值/实测值，C(46.91/46.78)，H(4.37/4.31)，Cl(7.69/7.78)，F(12.37/12.47)，N(18.24/18.34)，O(10.42/7.32)

[0093] 1H NMR(400MHz,DMSO-D6)δ9.54(s,1H),8.04(s,1H),8.12(d,1H),7.62(d,1H),6.81(q,1H),6.08(s,1H),5.63(s,2H),3.89(q,1H),3.55(t,2H),3.47(q,2H),2.75(t,2H),
2.61(q,1H),2.32(q,1H),1.11(t,3H)。

[0094] 药理试验实施例：本发明化合物降血脂活性测试

[0095] 1.目标化合物对肝细胞低密度脂蛋白摄取的促进作用

[0096] 用化合物I、II、III和阳性对照辛伐他汀(终浓度为5μM)处理脱脂血清饥饿12小时的HepG2细胞24小时，加入荧光标记的低密度脂蛋白(DiI-LDL)20μg/ml，37℃孵育4小时，用磷酸盐缓冲液轻轻洗细胞5次后用异丙醇提取脂质，于酶标仪上测定荧光读数(激发光：520nm；发射光570nm)。然后用0.2M氢氧化钠裂解细胞，测定蛋白含量，计算出荧光/蛋白的数值。实验结果见表1。

[0097] 表1：目标化合物对肝细胞低密度脂蛋白摄取的作用

[0098]化合物 用量 低密度脂蛋白摄取率
空白组(DMSO) - 1
阳性对照辛伐他汀 5μM 1.22*
化合物I 5μM 1.28*
化合物II 5μM 1.21*
化合物III 5μM 1.25*

[0099] 注：与空白组比较，*P＜0.05

[0100] 试验结果表明，本发明3个化合物在5μM浓度下均能显著增加肝细胞HepG2对低密度脂蛋白LDL的摄取。

[0101] 2.目标化合物对肝细胞低密度脂蛋白摄取的剂量依赖性

[0102] 用不同浓度的化合物I(浓度分别为5、10、20μM)处理脱脂血清饥饿12小时的HepG2细胞24小时，按上述方法计算细胞对低密度脂蛋白的摄取率，考察化合物I的剂量与活性之间的关系。实验结果见表2。

[0103] 表2：不同浓度化合物对肝细胞低密度脂蛋白摄取的作用

[0104]化合物 用量 低密度脂蛋白摄取率
空白组(DMSO) - 1
阳性对照辛伐他汀 20μM 1.59**
化合物I 5μM 1.28*
化合物I 10μM 1.41**
化合物I 20μM 1.63**

[0105] 注：与空白组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

[0106] 试验结果表明，本发明化合物I增加HepG2细胞吞噬LDL具有明显的剂量依赖性关系，在20μM浓度下均能非常显著地增加肝细胞HepG2对低密度脂蛋白LDL的摄取(P＜0.01)，且增加LDL摄取的效果与辛伐他汀相当。

[0107] 3.目标化合物口服给药体内降血脂药效研究

[0108] 3.1实验动物

[0109] 雄性SD大鼠，体重200±10g。

[0110] 3.2药物配制

[0111] 化合物I、II、III和辛伐他汀用5％DMSO，2％Tween80及93％的生理盐水配制成15mg/ml的混悬药液，使用前超声混匀；每只动物给予200μl/100g的给药体积，给药剂量为
20mg/kg。

[0112] 3.3实验方法

[0113] 雄性SD大鼠适应性饲养一周后按照其初始血脂和体重水平随机平均分组，每组10只。高脂模型组和给药组给予高脂饲料，给药组以腹腔注射的方式给予20mg/kg的化合物I、II、III，阳性对照组以腹腔注射的方式给予20mg/kg的化合物辛伐他汀，高脂模型组口服给予同等体积的溶剂，正常饲料对照组给予正常饲料。第5日断头取血，用酶法(GPO-PAP法)测定血清总胆固醇(TC)；用酶促终点法(GPO-PAP法)测定血清甘油三酯(TG)；用聚乙烯硫酸盐PVS沉淀法测定血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。实验结果见表3。

[0114] 表3：目标化合物对TC、TG、LDL-C的作用

[0115]组别 TC(mmol/l) TG(mmol/l) LDL-C(mmol/l)
高脂模型组 2.92±0.31 1.45±0.11 1.84±0.41
阳性对照组 2.08±0.27(28.8％)** 1.31±0.09(9.6％)* 1.14±0.29(38.1％)**
化合物I组 1.93±0.24(33.9％)** 1.24±0.08(14.5％)* 1.01±0.31(45.1％)**
化合物II组 2.16±0.28(26.0％)** 1.36±0.10(6.2％)* 1.22±0.28(33.7％)**
化合物III组 2.02±0.24(30.1％)** 1.28±0.12(11.7％)* 1.09±0.25(40.1％)**[0116] 注：与高脂模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

[0117] 试验结果表明，高脂喂养的大鼠给予本发明化合物一段时间后，与高脂模型组相比，TC、TG、LDL-C水平显著下降，且具有显著性差异(P＜0.05或0.01)，下降程度与给予辛伐他汀的阳性对照组类似，提示本发明化合物具有显著的降血脂作用，作用效果与辛伐他汀相当。

[0118] 上述药理试验表明，本发明化合物可以增加肝细胞对低密度脂蛋白的摄取率，能够显著降低大鼠的血清总胆固醇、血清甘油三酯、血清低密度脂蛋白胆固醇，作用效果与辛伐他汀相当，表明本发明化合物具有优异的降血脂活性，能够应用于高脂症和动脉粥性硬化的治疗中。

[0119] 以上描述了本发明优选实施方式，然其并非用以限定本发明。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。