大环内酯类化合物或其盐，及其制备方法与应用转让专利
申请号 : CN201610080717.0
文献号 : CN107033202B
文献日 : 2020-03-13
发明人 : 沈舜义 , 樊钱永 , 张锴婷 , 陈代杰 , 华楠 , 刘珊 , 张芸 , 徐屹军 , 董晓景 , 朱正焱
申请人 : 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
摘要 :
本发明公开了一种大环内酯类化合物或其盐，及其制备方法与应用。本发明所述的大环内酯类化合物或其盐表现出了一定的单独抗MRSA活性，且进一步地在与β‑内酰胺类抗生素共同使用时能够明显地增加β‑内酰胺类抗生素抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的作用。
权利要求 :
1.一种如式I或式II所示的大环内酯类化合物或其盐；
其中，R2为甲基和R1为 R3为被至少两个卤素取代的苯基、或被“未取代的C1～4烷基”取代的苯基；
或，R2为甲基和R1为 R3为 或被“未取代或被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基；
2 1 3
或，R为氢和R为 R为被一个卤素取代的苯基；
或，R2为氢和R1为 R3为取代或未取代的苯基；所述的“取代的苯基”中的取代基为卤素，未取代或被卤素取代的C1～4烷基，和C1～4烷氧基中的一个或多个；
R7为取代或未取代的苯基；R8为氢或C1～4烷基；R6为取代或未取代的苯基；n为1或2；其中，所述的R7中“所述的取代的苯基”中的取代基为卤素、未取代或被卤素取代的C1～4烷基、和C1～4烷氧基中的一个或多个；所述的R6中“所述的取代的苯基”中的取代基为卤素、未取代或被卤素取代的C1～4烷基、和C1～4烷氧基中的一个或多个。
2.如权利要求1所述的大环内酯类化合物或其盐，其特征在于，当R2为甲基和R1为 时，所述的R3为“被至少两个卤素取代的苯基”中，所述的取代基的位置为“3和5位同时取代”或“2、4和5位同时取代”；所述的R3为被“未取代的C1～4烷基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置为4位，所述的“C1～4烷基”为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基；
当R2为甲基和R1为 时，所述的R3为被“未取代或被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置为4位取代；所述的“C1～4烷基”为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基；
当R2为氢和R1为 时，所述的R3为“被一个卤素取代的苯基”中，所述的苯基上的取代基的位置为4位取代；所述的卤素为氟、氯、溴或碘；
当R2为氢和R1为 时，所述的R3为卤素取代的苯基中，所述的卤素为氟、氯、溴或碘；所述的苯基上的取代基的位置为4位取代、“3和5位同时取代”、或“2、4和5位同时取代”；
所述的R3为“未取代或被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置为4位取代；所述的C1～4烷基为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基；所述的R3为被“C1～4烷氧基”取代的苯基时，所述的苯基上的取代基的位置为4位取代，所述的“C1～4烷氧基”为甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基；
当所述的R7为卤素取代的苯基时，所述的卤素为氟、氯、溴或碘；所述的苯基上的取代基的位置为4位取代；
当所述的R7为“未取代或被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基时，所述的苯基上的取代基的位置为4位取代；所述的C1～4烷基为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基；
当所述的R7为被“C1～4烷氧基”取代的苯基时，所述的苯基上的取代基的位置为4位取代，所述的“C1～4烷氧基”为甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基；
当R8为C1～4烷基时，所述的C1～4烷基为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基；
当所述的R6为卤素取代的苯基时，所述的卤素为氟、氯、溴或碘；所述的苯基上的取代基的位置为4位取代、“3和5位同时取代”、或“2、4和5位同时取代”；
6
当所述的R为“未取代或被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置为4位取代；所述的C1～4烷基为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基；
当所述的R6为被“C1～4烷氧基”取代的苯基时，所述的苯基上的取代基的位置为4位取代；所述的“C1～4烷氧基”为甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基。
3.如权利要求2所述的大环内酯类化合物或其盐，其特征在于，当R2为甲基和R1为 时，所述的R3为被“未取代或被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基中，所述的“被卤素取代的C1～4烷基”为三氟甲基；
当R2为氢和R1为 时，所述的R3为“未取代或被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基中，所述的“被卤素取代的C1～4烷基”为三氟甲基；
7
当所述的R 为“未取代或被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基时，所述的“被卤素取代的C1～4烷基”为三氟甲基；
当所述的R6为“未取代或被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基中，所述的“被卤素取代的C1～4烷基”为三氟甲基。
4.如权利要求1所述的大环内酯类化合物或其盐，其特征在于，所述的大环内酯类化合物I选自以下任一化合物：
或所述的大环内酯类化合物II选自以下任一化合物：
5.一种如权利要求1～4任一项所述的大环内酯类化合物I的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将化合物6醇解，得到所述的化合物I，即可；
其中，R1、R2和R3的定义同权利要求1～4任一项所述；R4为C1～4烷羰基。
6.如权利要求5所述的大环内酯类化合物I的制备方法，其特征在于，所述的R4中，所述的C1～4烷羰基为CH3C(O)；
和/或，所述的醇解反应中的醇为甲醇和/或乙醇；
和/或，所述的醇与所述的化合物6的体积质量比为1～20mL/g；
和/或，所述的醇解反应的温度为50℃～80℃。
7.如权利要求6所述的大环内酯类化合物I的制备方法，其特征在于，所述的醇与所述的化合物6的体积质量比为5～10mL/g。
8.一种如权利要求1～4任一项所述的大环内酯类化合物II的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将化合物10a醇解，得到所述的化合物II，即可；
其中，n、R6、R7和R8的定义同权利要求1～4任一项所述，R5为C1～4烷羰基。
9.如权利要求8所述的大环内酯类化合物II的制备方法，其特征在于，所述的R5中，所述的C1～4烷羰基为CH3C(O)；
和/或，所述的醇解反应中的醇为甲醇和/或乙醇；
和/或，所述的醇与所述的化合物6的体积质量比为1～20mL/g；
和/或，所述的醇解反应的温度为50℃～80℃。
10.如权利要求9所述的大环内酯类化合物II的制备方法，其特征在于，所述的醇与所述的化合物6的体积质量比为5～10mL/g。
11.一种如式7a所示的大环内酯类化合物，
其中，R7和R8的定义同权利要求1～4任一项所述。
12.一种如权利要求1～4任一项所述的大环内酯类化合物I、大环内酯类化合物I的盐、大环内酯类化合物II或大环内酯类化合物II的盐在制备抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的药物中的应用。
13.如权利要求12所述的应用，其特征在于，所述的应用为所述的大环内酯类化合物I、大环内酯类化合物I的盐、大环内酯类化合物II或大环内酯类化合物II的盐，与β-内酰胺类抗生素联用在制备抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的药物中的应用。
14.一种药物组合物，其特征在于包括如权利要求1～4任一项所述的大环内酯类化合物I、大环内酯类化合物I的盐、大环内酯类化合物II和大环内酯类化合物II的盐中的一种或多种，以及β-内酰胺类抗生素。
说明书 :
大环内酯类化合物或其盐，及其制备方法与应用
技术领域
[0001] 本发明涉及一种大环内酯类化合物或其盐，及其制备方法与应用。
背景技术
[0002] 细菌耐药问题日益严峻，耐药菌的流行越来越广，尤其是金黄色葡萄球菌(MRSA)。MRSA的定义为：对甲氧西林、苯唑西林、头孢拉定耐药或mec基因阳性的金葡菌。1961年首次分离出MRSA以来，其在世界各地的感染率和分离率逐渐上升，Grundmann等认为全球可能多达5300万人携带MRSA。我国是MRSA流行强度较高地区，防治形势十分严峻。上海地区综合性医院MRSA感染现状调查显示，2008年的住院病人MRSA感染率为2.68％，在检出的金葡菌中占81.85％。因此，亟需人们在控制抗生素滥用的同时，研究开发新型抗菌药物，以征服日趋严重的耐药细菌的感染。
[0003] MRSA感染的治疗是临床十分棘手的难题之一，关键是其对许多抗生素有多重耐药。MRSA的菌株通过过度产生β内酰胺酶导致PBPs(青霉素结合蛋白)性质的改变，因此MRSA几乎对所有的β-内酰胺类抗生素耐药；且在同时还可能对大环内酯类抗生素、氨基糖苷类抗生素等多种抗菌药物表现出耐药性。针对这种耐药机制的新药开发策略主要有两种：一是通过化学修饰方法寻找降低β内酰胺酶适应性的β-内酰胺抗生素；二是通过不具抗菌活性或低抗菌活性的化合物来恢复这类抗生素对MRSA的活性，这类化合物不直接杀死或抑制细菌，不会对细菌产生直接的选择压力，从而可以减少耐药菌株的持续产生。
[0004] 目前，尽管临床上应用的糖肽类抗生素万古霉素和替考拉宁、脂肽类抗生素达托霉素、恶唑烷酮类抗生素利奈唑胺，以及四环类抗生素替加环素等对控制MRSA的感染起到了重要的作用，但是，由于这些抗生素缺少结构类别的多样性，致使MRSA对这些常用抗生素的耐药性发展和传播日趋严重。因此，临床急需作用机制不同且活性强的新结构药物，或对β-内酰胺类抗生素增效作用更强的、作用机制新型的抗菌增效剂。
发明内容
[0005] 本发明所要解决的技术问题是为了克服临床耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药性的问题，而提供了一种大环内酯类化合物或其盐，及其制备方法与应用。本发明所述的大环内酯类化合物或其盐表现出了一定的单独抗MRSA活性，且进一步地在与β-内酰胺类抗生素共同使用时能够明显地增加β-内酰胺类抗生素抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的作用。
[0006] 本发明提供了一种如式I或式II所示的大环内酯类化合物或其盐，
[0007]
[0008] 其中，当R2为甲基和R1为 时，R3为被至少两个卤素取代的苯基、或被“未取代或被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基；
[0009] 当R2为甲基和R1为 时，R3为 或被“未取代或被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基；当R2为甲基和R1为 时，R3为 或被“C1～4烷氧基”取代的苯
基；
基；
[0010] 当R2为氢和R1为 时，R3为被一个卤素取代的苯基、或被“C1～4烷氧基”取代的苯基；
[0011] 当R2为氢和R1为 时，R3为取代或未取代的苯基；所述的“取代的苯基”中的取代基为卤素、未取代或被卤素取代的C1～4烷基、和C1～4烷氧基中的一个或多个；
[0012] 当R2为氢和R1为 时，R3为取代或未取代的苯基；所述的“取代的苯基”中的取代基为卤素，未取代或被卤素取代的C1～4烷基，和C1～4烷氧基中的一个或多个；
[0013] R7为取代或未取代的苯基；R8为氢或C1～4烷基；R6为取代或未取代的苯基；n为1或2；其中，所述的R7中“所述的取代的苯基”中的取代基为卤素、未取代或被卤素取代的C1～4烷基、和C1～4烷氧基中的一个或多个；所述的R6中“所述的取代的苯基”中的取代基为卤素、未取代或被卤素取代的C1～4烷基、和C1～4烷氧基中的一个或多个。
[0014] 当R2为甲基和R1为 时，所述的R3为“被至少两个卤素取代的苯基”中，所述的苯基上的取代基的位置优选“3和5位同时取代”(例如 )，或“2、4和5位同时取代”(例如 )。所述的R3为被“未取代或被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置优选4位；所述的“C1～4烷基”优选甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基；进一步地所述的“被卤素取代的C1～4烷基”优选三氟甲基。
[0015] 当R2为甲基和R1为 时，所述的R3为被“未取代或被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代；所述的“C1～4烷基”优选甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基；进一步地所述的“被卤素取代的C1～4烷基”优选三氟甲基。
[0016] 当R2为甲基和R1为 时，所述的R3为“被C1～4烷氧基取代的苯基”中，所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代；所述的“C1～4烷氧基”优选甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基。
[0017] 当R2为氢和R1为 时，所述的R3为“被一个卤素取代的苯基”中，所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代；所述的卤素优选氟、氯、溴或碘。所述的R3为被“C1～4烷氧基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代；所述的“C1～4烷氧基”优选甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基。
[0018] 当R2为氢和R1为 时，所述的R3为卤素取代的苯基中，所述的卤素优选氟、氯、溴或碘；所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代(如 或 )，“3和5位同时取代”(例如 )，或“2、4和5位同时取代”(例如 )。所述的R3为“未取代或被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代；所述的C1～4烷基优选甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基；进一步地所述的“被卤素取代的C1～4烷基”优选三氟甲基。所述的R3为被“C1～4烷氧基”取代的苯基时，所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代；所述的“C1～4烷氧基”优选甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基。
[0019] 当R2为氢和R1为 时，所述的R3为卤素取代的苯基中，所述的卤素优选氟、氯、溴或碘；所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代(如 或 )，“3和5位3
同时取代”(例如 )，或“2、4和5位同时取代”(例如 )。所述的R为“未取代或
被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代；所述的C1～4烷基优选甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基；进一步地所述的“被卤素取代的C1～4烷基”优选三氟甲基。所述的R3为被“C1～4烷氧基”取代的苯基时，所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代；所述的“C1～4烷氧基”优选甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基。
同时取代”(例如 )，或“2、4和5位同时取代”(例如 )。所述的R为“未取代或
被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代；所述的C1～4烷基优选甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基；进一步地所述的“被卤素取代的C1～4烷基”优选三氟甲基。所述的R3为被“C1～4烷氧基”取代的苯基时，所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代；所述的“C1～4烷氧基”优选甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基。
[0020] 当所述的R7为卤素取代的苯基时，所述的卤素优选氟、氯、溴或碘；所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代(如 或 )。
[0021] 当所述的R7为“未取代或被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基时，所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代；所述的C1～4烷基优选甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基；进一步地所述的“被卤素取代的C1～4烷基”优选三氟甲基。
[0022] 当所述的R7为被“C1～4烷氧基”取代的苯基时，所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代；所述的“C1～4烷氧基”优选甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基。
[0023] 当R8为C1～4烷基时，所述的C1～4烷基优选甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基。
[0024] 当所述的R6为卤素取代的苯基时，所述的卤素优选氟、氯、溴或碘；所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代(如 )，“3和5位同时取代”(例如 )，或“2、4和5位同时取代”(例如 )。
[0025] 所述的R6为“未取代或被卤素取代的C1～4烷基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代；所述的C1～4烷基优选甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基；进一步地所述的“被卤素取代的C1～4烷基”优选三氟甲基。
[0026] 所述的R6为被“C1～4烷氧基”取代的苯基时，所述的苯基上的取代基的位置优选4位取代；所述的“C1～4烷氧基”优选甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基。
[0027] 本发明所述的卤素如未特殊限定，均优选氟、氯、溴或碘。
[0028] 本发明所述的大环内酯类化合物I可任意选自以下任一化合物：
[0029]
[0030]
[0031]
[0032] 本发明所述的大环内酯类化合物II可任意选自以下任一化合物：
[0033]
[0034]
[0035] 本发明还提供了一种所述化合物I的制备方法，其包括以下步骤：将化合物6醇解，得到所述的化合物I，即可；
[0036]
[0037] 其中，R1、R2和R3同前所述，R4为C1～4烷羰基。
[0038] 所述的R4中，所述的C1～4烷羰基优选CH3C(O)。
[0039] 在制备大环内酯类化合物I时，所述的醇解为将化合物6在醇的作用下发生分解反应，本发明中所述的醇既是反应物也是反应溶剂，具体的步骤和条件可参照本领域该类反应的常规进行选择，本发明特别优选如下：
[0040] 在制备化合物I的方法中，所述的醇优选甲醇和/或乙醇；所述的醇与所述的化合物6的体积质量比优选1～20mL/g，进一步优选5～10mL/g。
[0041] 在制备化合物I的方法中，所述的醇解反应的温度优选50℃～80℃。
[0042] 在制备化合物I的方法中，所述的醇解反应的进程可以采用本领域中的常规测试方法(如TLC、HPLC或NMR)进行监控，一般以化合物6消失时为反应终点，优选反应时间1～24小时，进一步优选2小时。
[0043] 在制备化合物I的方法中，所述的反应结束后优选包括以下后处理步骤；柱色谱纯化得到的粗产品，得到纯化后的化合物I即可。所述的柱色谱纯化的条件可以采用本领域中该类操作的常规方法，柱色谱纯化优选快速柱色谱分离(FLASH柱色谱分离)，采用的硅胶的规格优选200～400目硅胶，更优选200～300目硅胶。
[0044] 在所述的化合物I的制备方法中，优选包括以下步骤：在有机溶剂中，缩合剂存在的条件下，将羧酸R3CH2COOH和/或酸酐 与化合物5进行缩合反应，得到所述的化合物6，即可；
[0045]
[0046] 其中，R1、R2、R3和R4同前所述。
[0047] 所述的化合物6的制备方法中，所述的反应可以参照本领域该类反应的常规方法，本发明特别优选如下；
[0048] 在所述的化合物6的制备方法中，所述的有机溶剂优选卤代烃类溶剂，所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，所述的氯代烃类溶剂优选二氯甲烷。所述的有机溶剂与化合物5的体积质量比优选1～20mL/g，进一步优选8～10mL/g。
[0049] 在所述的化合物6的制备方法中，所述的R3CH2COOH和/或酸酐 与所述的化合物5的摩尔比优选1～3，更优选2。所述的缩合剂优选1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl或EDCI，CAS号：25952-53-8)。所述的缩合剂与所述的化合物
5的摩尔比优选2～6，更优选3～4。
5的摩尔比优选2～6，更优选3～4。
[0050] 在所述的化合物6的制备方法中，所述的缩合反应的温度为10℃～60℃，进一步优选15℃～30℃。
[0051] 在所述的化合物6的制备方法中，所述的缩合反应的进程可以采用本领域中的常规测试方法(如TLC、HPLC或NMR)进行监控，一般以化合物5消失时为反应终点，优选反应时间1～36小时，进一步优选24小时。
[0052] 所述的化合物6的制备方法，所述的反应结束后优选包括以下后处理步骤：调节pH至9.0～10.0，萃取，浓缩，即可。所述的调节pH可以采用无机碱，所述的无机碱优选氢氧化钠；所述的无机碱可以以其水溶液的形式参与反应，当无机碱以其水溶液的形式参与反应时，所述的无机碱的水溶液的摩尔浓度优选3mol/L，所述的摩尔浓度是指无机碱的摩尔数与无机碱水溶液总体积的比例。所述的萃取可以采用本领域中萃取操作的常规方法，所述的萃取采用的溶剂优选卤代烃类溶剂，所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，所述的氯代烃类溶剂优选二氯甲烷。所述的浓缩后还可进一步包括干燥的操作。
[0053] 在所述的化合物I的制备方法中，优选包括以下步骤：在有机溶剂中，将化合物4与羧酸R4OH和/或酸酐R4OR4进行缩合反应，得到所述的化合物5，即可；
[0054]
[0055] 其中，R1、R2、R3和R4同前所述。
[0056] 所述的化合物5的制备方法中，所述的反应可以参照本领域该类反应的常规方法，本发明特别优选如下；
[0057] 在所述的化合物5的制备方法中，所述的有机溶剂优选卤代烃类溶剂，所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，所述的氯代烃类溶剂优选二氯甲烷。所述的有机溶剂与化合物4的体积质量比优选1～20mL/g，更优选5mL/g～10mL/g。
[0058] 在所述的化合物5的制备方法中，所述的羧酸R4OH或酸酐R4OR4与所述的化合物4的摩尔比优选1～3，更优选2。
[0059] 在所述的化合物5制备方法中，所述的缩合反应的温度优选10℃～80℃进一步优选15℃～30℃。
[0060] 在所述的化合物5的制备方法中，所述的缩合反应的进程可以采用本领域中的常规测试方法(如TLC、HPLC或NMR)进行监控，一般以化合物4消失时为反应终点，优选反应时间3～6小时，进一步优选4小时。
[0061] 所述的化合物5的制备方法，所述的反应结束后还可包括以下后处理步骤：加水，调节pH至9.0～10.0，有机溶剂萃取，浓缩，即可。所述的调节pH可以采用无机碱，所述的无机碱优选氢氧化钠；所述的无机碱可以以其水溶液的形式参与反应，当无机碱以其水溶液的形式参与反应时，所述的无机碱的水溶液的摩尔浓度优选3mol/L，所述的摩尔浓度是指无机碱的摩尔数与无机碱水溶液总体积的比例。所述的浓缩后还可进一步包括干燥的操作。
[0062] 所述的化合物I的制备方法中，优选包括以下步骤：将化合物3与 进行缩合反应，得到所述的化合物4，即可；
[0063]
[0064] 其中，R1和R2前所述。
[0065] 所述的化合物4的制备方法中，所述的反应可以参照本领域该类反应的常规方法，本发明特别优选如下；
[0066] 在所述的化合物4的制备方法中，所述的缩合反应的溶剂优选卤代烃类溶剂，所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，所述的氯代烃类溶剂优选二氯甲烷。所述的溶剂与所述的化合物3的体积质量比优选1～20mL/g，进一步优选5～10mL/g。
[0067] 在所述的化合物4的制备方法中，所述的化合物3与所述的化合物 的摩尔比值优选1～3，进一步优选1.5。
[0068] 所述的化合物4的制备方法中，所述的缩合反应的温度优选5～50℃，进一步优选15℃～30℃。
[0069] 所述的化合物4的制备方法中，所述的缩合反应优选在酸催化的条件下进行，所述的酸优选有机酸，所述的有机酸优选乙酸；所述的酸与所述的化合物3的摩尔比值优选1～3，进一步优选1。
[0070] 在所述的化合物4的制备方法中，所述的缩合反应的进程可以采用本领域中的常规测试方法(如TLC、HPLC或NMR)进行监控，一般以化合物3消失时为反应终点，优选反应时间2～10小时，进一步优选5小时。
[0071] 在所述的化合物4的制备方法中，所述的反应结束后优选包括以下后处理步骤：除去溶剂、浓缩物溶于有机溶剂A，调节PH为1～2，过滤，调节滤饼的水溶液至PH为9～10，有机溶剂B萃取、浓缩，即可。其中，所述的有机溶剂A优选芳香烃类溶剂，所述的芳香烃类溶剂优选甲苯；所述的有机溶剂A的用量可以将所述的浓缩物溶解即可，所述的有机溶剂A与所述的化合物3的体积质量比优选2.2～5mL/g。所述的调节PH为1～2一般通过加入酸进行调节；所述的酸优选无机酸；所述的无机酸优选盐酸；所述的无机酸可以以其水溶液的形式参与反应；当所述无机酸以其水溶液的形式参与反应时，所述的无机酸水溶液的摩尔浓度优选
2mol/L，所述的摩尔浓度是指无机酸的摩尔量与无机酸的溶液体积的比。所述的调节滤饼的水溶液至PH为9～10可以采用无机碱，所述的无机碱优选氢氧化钠；所述的无机碱可以以其水溶液的形式参与反应，当无机碱以其水溶液的形式参与反应时，所述的无机碱的水溶液的摩尔浓度优选3mol/L，所述的摩尔浓度是指无机碱的摩尔数与无机碱水溶液总体积的比例。所述的有机溶剂B优选卤代烃类溶剂，所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，所述的氯代烃类溶剂优选二氯甲烷。所述的浓缩后还可进一步包括干燥的操作。
2mol/L，所述的摩尔浓度是指无机酸的摩尔量与无机酸的溶液体积的比。所述的调节滤饼的水溶液至PH为9～10可以采用无机碱，所述的无机碱优选氢氧化钠；所述的无机碱可以以其水溶液的形式参与反应，当无机碱以其水溶液的形式参与反应时，所述的无机碱的水溶液的摩尔浓度优选3mol/L，所述的摩尔浓度是指无机碱的摩尔数与无机碱水溶液总体积的比例。所述的有机溶剂B优选卤代烃类溶剂，所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，所述的氯代烃类溶剂优选二氯甲烷。所述的浓缩后还可进一步包括干燥的操作。
[0072] 所述的化合物I的制备方法中，优选包括以下步骤：将化合物2在酸性条件下水解，得到所述的化合物3，即可；
[0073]
[0074] 所述的化合物3的制备方法中，所述的反应可以参照本领域该类反应的常规方法，本发明特别优选如下：
[0075] 在所述的化合物3的制备方法中，所述的酸性条件可以通过加入酸获得，所述的酸优选无机酸；所述的无机酸优选盐酸；所述的无机酸可以以其水溶液的形式参与反应；当所述的无机酸以其水溶液的形式参与反应溶液时，所述的无机酸水溶液的摩尔浓度优选1～3mol/L；所述的摩尔浓度是指无机酸的摩尔量与无机酸的溶液体积的比。所述的酸与所述的化合物2的摩尔比值优选1～10，进一步优选5。所述的反应的温度优选10℃～60℃，进一步优选15℃～30℃。
[0076] 在所述的化合物3的制备方法中，所述的水解反应的进程可以采用本领域中的常规测试方法(如TLC、HPLC或NMR)进行监控，一般以化合物2消失时为反应终点，优选反应时间1～12小时，进一步优选2～4小时。
[0077] 在所述的化合物3的制备方法，在所述的反应结束后优选包括以下后处理步骤：调节pH至9.0～10.0，有机溶剂萃取，浓缩，得到所述的化合物3，即可。所述的调节pH可以采用无机碱，所述的无机碱优选氢氧化钠；所述的无机碱可以以其水溶液的形式参与反应，当无机碱以其水溶液的形式参与反应时，所述的无机碱的水溶液的摩尔浓度优选3mol/L，所述的摩尔浓度是指无机碱的摩尔数与无机碱水溶液总体积的比例。所述的萃取可以采用本领域中萃取操作的常规方法，所述的有机溶剂优选卤代烃类溶剂，所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，所述的氯代烃类溶剂优选二氯甲烷。
[0078] 所述的化合物I的制备方法中，优选包括以下步骤：在有机溶剂中，将化合物1与乙酸肼进行缩合反应，得到所述的化合物2即可；
[0079]
[0080] 所述的化合物2的制备方法中，所述的缩合反应可以参照本领域该类反应的常规进行，本发明特别优选如下：
[0081] 在所述的化合物2的制备方法中，所述的有机溶剂优选醇类溶剂，所述的醇类溶剂优选甲醇和/或乙醇。所述的有机溶剂与所述的化合物1的体积质量比优选1～10mL/g，更优选8mL/g。所述的化合物1与所述的乙酸肼的摩尔比值优选1∶1～1∶50，更优选1∶30。
[0082] 在所述的化合物2制备方法中，所述的缩合反应的温度优选40℃～100℃进一步优选50℃～80℃。
[0083] 在所述的化合物2的制备方法中，所述的缩合反应的进程可以采用本领域中的常规测试方法(如TLC、HPLC或NMR)进行监控，一般以化合物1消失时为反应终点，优选反应时间12～72小时，进一步优选46小时。
[0084] 所述的化合物2的制备方法，所述的反应结束后还可包括以下后处理步骤：调节pH至9.0～10.0，过滤，得到所述的化合物2，即可。所述的调节pH可以采用无机碱，所述的无机碱优选氢氧化钠；所述的无机碱可以以其水溶液的形式参与反应，当无机碱以其水溶液的形式参与反应时，所述的无机碱的水溶液的摩尔浓度优选3mol/L，所述的摩尔浓度是指无机碱的摩尔数与无机碱水溶液总体积的比例。所述的过滤后还可包括用水清洗滤饼的操作；所述的过滤结束后还可进一步包括干燥滤饼的操作。
[0085] 本发明提供一种所述的化合物II的制备方法，其包括以下步骤：将化合物10a醇解，得到所述的化合物II，即可；
[0086]
[0087] 其中，n、R6、R7和R8同前所述，R5为C1～4烷羰基。
[0088] 所述的R5中，所述的C1～4烷羰基优选CH3C(O)。
[0089] 在制备大环内酯类化合物II时，所述的醇解为将化合物10a在醇的作用下发生分解反应，本发明中所述的醇既是反应物也是反应溶剂，具体的步骤和条件可参照本领域该类反应的常规进行选择，本发明特别优选如下：
[0090] 在制备化合物II的方法中，所述的醇优选甲醇和/或乙醇。所述的醇与所述的化合物10a的体积质量比优选1～20mL/g，进一步优选5～10mL/g。
[0091] 在制备化合物II的方法中，所述的醇解反应的温度优选50℃～80℃。
[0092] 在制备化合物II的方法中，所述的醇解反应的进程可以采用本领域中的常规测试方法(如TLC、HPLC或NMR)进行监控，一般以化合物10a消失时为反应终点，优选反应时间1～24小时，进一步优选2小时。
[0093] 在制备化合物II的方法中，所述的反应结束后优选包括以下后处理步骤；柱色谱纯化得到的粗产品，得到纯化后的化合物II即可。所述的柱色谱纯化的条件可以采用本领域中该类操作的常规方法，柱色谱纯化优选快速柱色谱分离(FLASH柱色谱分离)，采用的硅胶的规格优选200～400目硅胶，更优选200～300目硅胶。
[0094] 所述的化合物II的制备方法中，优选包括以下步骤：催化剂存在下，将化合物9a与R6(CH2)nNH2反应，得到所述的化合物10a，即可；
[0095]
[0096] 其中，n、R5、R6、R7和R8同前所述。
[0097] 在制备大环内酯类化合物10a时，所述的反应可为本领域该类反应的常规方法，本发明特别优选如下：
[0098] 在制备化合物10a的方法中，所述的溶剂优选非极性质子溶剂，所述的非极性质子溶剂优选N’N-二甲基甲酰胺。所述的溶剂与所述的化合物9a的体积质量比优选1～50mL/g，进一步优选16mL/g。所述的反应的温度优选10～80℃，更优选60℃。所述的催化剂优选1，8-二氮杂二环十一碳-7-烯(DBU)，所述的催化剂与所述的化合物9a的摩尔比优选1～3，更优选2。所述的R6(CH2)nNH2与所述的化合物9a的摩尔比优选3～5。
[0099] 在制备化合物10a的方法中，所述反应的进程可以采用本领域中的常规测试方法(如TLC、HPLC或NMR)进行监控，一般以化合物9a消失时为反应终点，优选反应时间2～10小时，进一步优选4小时。
[0100] 在制备化合物10a的方法中，所述的反应结束后优选包括以下后处理步骤；加水、过滤，即可。所述的后处理结束后可以直接投入到所述化合物II的制备中。
[0101] 所述的化合物II的制备方法中，优选包括以下步骤：碱性条件下，将化合物8a与N，N-羰基-二咪唑反应，得到所述的化合物9a，即可；
[0102]
[0103] 其中，R5、R7和R8同前所述。
[0104] 在制备大环内酯类化合物9a时，所述的反应可为本领域该类反应的常规方法，本发明特别优选如下：
[0105] 在制备化合物9a的方法中，所述的溶剂优选卤代烃类溶剂，所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，所述的氯代烃类溶剂优选二氯甲烷。所述的溶剂与所述的化合物8a的体积质量比优选2～10mL/g，进一步优选5mL/g。所述的反应的温度优选10～80℃，更优选10～35℃。所述的碱优选4-二甲氨基吡啶(DMAP)，所述的碱与所述的化合物8a的摩尔比优选1～3，更优选2。所述的N，N-羰基-二咪唑(CDI)与所述的化合物8a的摩尔比优选1～3，更优选2。
[0106] 在制备化合物9a的方法中，所述反应的进程可以采用本领域中的常规测试方法(如TLC、HPLC或NMR)进行监控，一般以化合物8a消失时为反应终点，优选反应时间12～48小时，进一步优选24小时。
[0107] 在制备化合物9a的方法中，所述的反应结束后优选包括以下后处理步骤；加水，调节PH至9.0～10.0，有机溶剂萃取，有机层酸洗，浓缩，即可。其中，水的量与所述的化合物8a的体积质量比可以参照本领域常规进行选择，本发明优选1～5mL/g，更优选2mL/g。所述的调节可以采用无机碱，所述的无机碱优选氢氧化钠；所述的无机碱可以以其水溶液的形式参与反应，当无机碱以其水溶液的形式参与反应时，所述的无机碱的水溶液的摩尔浓度优选3mol/L，所述的摩尔浓度是指无机碱的摩尔数与无机碱水溶液总体积的比例。所述的有机溶剂优选卤代烃类溶剂，所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，所述的氯代烃类溶剂优选二氯甲烷。所述的酸洗优选PH为4～5的酸水溶液，所述的酸水溶液优选盐酸水溶液。
[0108] 所述的化合物II的制备方法中，优选包括以下步骤：在有机溶剂中，将化合物7a与羧酸R5OH和/或酸酐R5OR5进行缩合反应，得到所述的化合物8a，即可；
[0109]
[0110] 其中，R5、R7和R8同前所述。
[0111] 所述的化合物8a的制备方法中，除了将化合物4换做化合物7a、用“羧酸R5OH和/或酸酐R5OR5”替换“羧酸R4OH和/或酸酐R4OR4”外，其他的步骤和条件参照上述化合物5的制备方法。
[0112] 本发明还提供了一种大环内酯类化合物7a，
[0113]
[0114] 其中，R7和R8的定义同前。
[0115] 本发明还提供一种所述的化合物7a的制备方法，具体为：除利用 替换外，其余的步骤和条件参照所述的化合物4的制备方法。
[0116] 本发明提供了一种大环内酯类化合物A的制备方法，其为下述任一方式：
[0117] 方式一，包括以下步骤：(1)以上述化合物3与 进行缩合反应；(2)将步骤(1)得到的产物与羧酸R4OH和/或酸酐R4OR4进行缩合反应；(3)在有机溶剂中，缩合剂存在的条件下，将羧酸R3CH2COOH和/或酸酐 与步骤(2)得到的产物进行缩合反应；1 2 3 4
(4)将步骤(3)得到的产物进行醇解即可；其中，R、R、R和R的定义同前所述；
(4)将步骤(3)得到的产物进行醇解即可；其中，R、R、R和R的定义同前所述；
[0118] 方式二，包括以下步骤：(1)以上述化合物3与 进行缩合反应；(2)在有机溶剂中，将步骤(1)得到的产物与羧酸R5OH和/或酸酐R5OR5进行缩合反应；(3)碱性条件下，将步骤(2)得到的产物与N，N-羰基-二咪唑反应；(4)催化剂存在下，将步骤(3)得到的产物与R6(CH2)nNH2反应；(5)将步骤(4)得到的产物进行醇解，即可；其中，R5、R6、R7和R8的定义同前所述。
[0119] 所述的大环内酯类化合物A的制备方法的方式一中，步骤(1)的反应步骤和条件同上述化合物4的制备方法；步骤(2)的反应步骤和条件同上述化合物5的制备方法；步骤(3)的反应步骤和条件同上述化合物6的制备方法；步骤(4)的反应步骤和条件同上述化合物I的制备方法。
[0120] 所述的大环内酯类化合物A的制备方法的方式二中，步骤(1)的反应步骤和条件同上述化合物7a的制备方法；步骤(2)的反应步骤和条件同上述化合物8a的制备方法；步骤(3)的反应步骤和条件同上述化合物9a的制备方法；步骤(4)的反应步骤和条件同上述化合物10a的制备方法；步骤(5)的反应步骤和条件同上述化合物II的制备方法。
[0121] 本发明还提供了由上述大环内酯类化合物A的制备方法制备得到的大环内酯类化合物A。
[0122] 本发明还提供了一种所述的大环内酯类化合物A在制备抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的药物中的应用。所述的应用进一步优选为所述的大环内酯类化合物A与β-内酰胺类抗生素联用在制备抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的药物中的应用。
[0123] 本发明还提供了一种药物组合物，其包括所述的大环内酯类化合物A和β-内酰胺类抗生素。
[0124] 所述本发明中所述的大环内酯类化合物I或II的盐是指本发明的大环内酯类化合物I或II与酸反应形成的盐，所述的酸可以为本领域中常规的无机酸或有机酸；所述的无机酸可为盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；所述的有机酸可为乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。
[0125] 本发明还提供了所述的大环内酯类化合物I、大环内酯类化合物I的盐、大环内酯类化合物II或大环内酯类化合物II的盐在制备抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的药物中的应用。所述的应用进一步优选为所述的大环内酯类化合物I、大环内酯类化合物I的盐、大环内酯类化合物II或大环内酯类化合物II的盐，与β-内酰胺类抗生素联用在制备抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的药物中的应用。
[0126] 本发明还提供了一种药物组合物，其包括所述的大环内酯类化合物I、大环内酯类化合物I的盐、大环内酯类化合物II和大环内酯类化合物II的盐中的一种或多种，以及β-内酰胺类抗生素。
[0127] 本发明还提供了所述的药物组合物在制备抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的药物中的应用。
[0128] 本发明中，所述的β-内酰胺类抗生素是本领域中常规的β-内酰胺类抗生素，是指分子中含有由四个原子组成的β-内酰胺环的抗生素，优选临床最常见的青霉素类抗生素、头孢菌素类抗生素、碳青霉烯类抗生素、头霉素类抗生素和单环β-内酰胺类抗生素中的一种或多种。所述的青霉素类抗生素优选青霉素、青霉素G、青霉素钠、青霉素V钾、氨苄西林、氨苄青霉素、羧苄西林钠、苯唑西林、氯唑西林、双氯西林、氟氯西林、卞星青霉素、呋布西林、阿莫西林、美洛西林、奈夫西林、替卡西林、阿洛西林、哌拉西林和美西林中的一种或多种；进一步优选青霉素钠、氨苄青霉素、羧苄西林钠和苯唑西林钠中的一种或多种。所述的头孢菌素类抗生素优选头孢氨苄、头孢替安、头孢羟氨苄、头孢唑啉、头孢拉啶、头孢克洛、头孢呋辛、头孢匹胺、头孢硫脒、头孢丙烯、头孢曲松、头孢妥伦匹酯、头孢地嗪、头孢他美酯、头孢克肟、头孢泊肟酯、头孢他啶、头孢他啶钾、头孢地尼、头孢拉氧、头孢替唑、头孢噻肟、头孢哌酮、头孢噻吩、头孢孟多、头孢匹罗、头孢吡肟和头孢唑南中的一种或多种；进一步优选头孢拉啶、头孢噻吩、头孢唑啉、头孢氨苄、头孢孟多、头孢替安、头孢克洛、头孢呋辛、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶钾、头孢噻肟、头孢吡肟和头孢地嗪中的一种或多种。所述的碳青霉烯类抗生素优选亚胺培南、美罗培南和帕尼培南中的一种或多种；进一步优选亚胺培南和/或美罗培南。所述的头霉素类抗生素优选头孢西丁、头孢西丁钠、头孢美唑、头孢美唑钠、头孢替坦和头孢米诺中的一种或多种，进一步优选头孢西丁、头孢西丁钠、头孢美唑和头孢美唑钠中的一种或多种。所述的单环β-内酰胺类抗生素优选氨曲南。
[0129] 本发明中，所述的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为本领域中常规的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，优选耐甲氧西林金黄色葡萄球菌模式菌；所述的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌模式菌优选MRSA ATCC43300(Methicillin-resistant Staphylococcus aureusATCC43300，即MRSA ATCC43300)。ATCC为美国模式培养物集存库(American type culturecollection)的简写MRSAATCC43300为其标准模式菌。
[0130] 在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
[0131] 本发明所用试剂和原料均市售可得。
[0132] 本发明的积极进步效果在于：本发明的大环内酯类化合物I或其盐，大环内酯类化合物II或其盐中表现出了一定的单独抗MRSA活性，进一步地在与β-内酰胺类抗生素共同使用时能够明显的增加β-内酰胺类抗生素抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的作用；测试结果显示体外增效作用好，是一类新型的增效剂，能够缓解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)对β-内酰胺类抗生素的耐药性，是一类具有良好市场开发前景的药物。
附图说明
[0133] 图1为化合物SIPI8294的分子立体结构投影图。
[0134] 图2为化合物SIPI8510的分子立体结构投影图。
具体实施方式
[0135] 下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
[0136] 实施例1 9-腙克拉霉素
[0137] 克拉霉素(10g，13.37mmol)溶于甲醇(80ml)中，加入乙酸肼(36.9g，0.4mol)，加热回流46h。旋蒸除去部分甲醇后，加入水(200ml)，用3N NaOH水溶液调节pH至9～10，过滤，滤饼水洗，干燥得白色固体粗品10.7g(收率105.0％)。
[0138] 实施例2 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-腙克拉霉素
[0139] 9-腙克拉霉素(5.1g，2mmol)溶于10ml 1N盐酸水溶液中，室温搅拌4h。加入二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9～10，分液，水层用二氯甲烷(5ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗(10ml)，饱和氯化钠干燥后旋干得粗品3.8g，收率94.7％。
[0140] 实施例3 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氯苯亚乙基腙)克拉霉素(化合物4-2)[0141] 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-腙克拉霉素(9g，15mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入对氯苯乙酮(2.3g，15mmol)和冰乙酸(0.85ml，15mmol)，室温搅拌5h，蒸干除去溶剂；加入适量甲苯(20ml)使油状混合物完全溶解，逐滴加入2N盐酸水溶液至pH 1-2，大量白色固体析出，过滤，滤饼加入水(40ml)和二氯甲烷(40ml)，3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗(20ml)，饱和食盐水洗，干燥后旋干，得产物10.1g，收率90.9％。
[0142] 实施例4 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氯苯亚乙基腙)克拉霉素[0143] 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氯苯亚乙基)腙克拉霉素(10.1g，13.6mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入乙酸酐(2.55ml，27.2mmol)，室温搅拌4h。加水20ml，3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗(20ml)，饱和食盐水洗，干燥后旋干，得产物10.3g。
[0144] 实施例53-脱克拉定糖-3-(4-三氟甲基苯乙酰基)-9-(4-氯苯亚乙基腙)克拉霉素(化合物ZKT-2-4)
[0145] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氯苯亚乙基腙)克拉霉素(1.1g，1.41mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-三氟甲基苯乙酸(0.57g，2.82mmol)，分批加入EDCI(1.08g，5.64mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0146] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.39g，收率30.1％，HPLC纯度90.3％。
[0147] MS(ESI+，m/e)：926[M+H]+
[0148] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.81(d，J＝8.6Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.58(d，J＝8.2Hz，2H，3-苯环2，6-H)，7.48(d，J＝8.1Hz，2H，9-苯环3，5-H)，7.36(d，J＝8.6Hz，2H，3-苯环3，5-H)，5.47(s，1H)，5.21(dd，J＝11.2，2.1Hz，1H)，5.05(d，J＝11.0Hz，1H)，3.89(s，1H)，3.86(d，J＝7.2Hz，1H)，3.80(dd，J＝16.5，9.1Hz，2H)，3.72(dd，J＝9.4，5.9Hz，2H)，3.40(s，
1H)，3.32(s，1H)，3.15(dd，J＝10.1，7.2Hz，1H)，2.95(s，3H)，2.89-2.80(m，1H)，2.73(q，J＝6.5Hz，1H)，2.27(s，6H)，1.97(dtd，J＝15.0，7.5，5.4Hz，1H)，1.66-1.57(m，1H)，1.51(ddd，J＝14.3，7.4，3.9Hz，2H)，1.44(d，J＝13.4Hz，1H)，1.26(d，J＝4.6Hz，6H)，1.20(s，
3H)，1.11(dd，J＝16.0，6.8Hz，7H)，1.02(d，J＝7.0Hz，3H)，0.90(d，J＝6.7Hz，3H)，0.82(t，J＝7.4Hz，3H).
1H)，3.32(s，1H)，3.15(dd，J＝10.1，7.2Hz，1H)，2.95(s，3H)，2.89-2.80(m，1H)，2.73(q，J＝6.5Hz，1H)，2.27(s，6H)，1.97(dtd，J＝15.0，7.5，5.4Hz，1H)，1.66-1.57(m，1H)，1.51(ddd，J＝14.3，7.4，3.9Hz，2H)，1.44(d，J＝13.4Hz，1H)，1.26(d，J＝4.6Hz，6H)，1.20(s，
3H)，1.11(dd，J＝16.0，6.8Hz，7H)，1.02(d，J＝7.0Hz，3H)，0.90(d，J＝6.7Hz，3H)，0.82(t，J＝7.4Hz，3H).
[0149] 13C NMR(100MHz，CDCl3)δ179.78(1-CO)，173.54(3-CO)，170.60(9-N＝C-)，159.74(9-C＝N-)，137.80(9-苯环4-C)，137.16(9-苯环1-C)，135.83(3-苯环1-C)，130.02(3-苯环2，6-C)，129.69(3-苯环4-C)，128.69(9-苯环2，6-C)，128.00(9-苯环3，5-C)，14.86(9-N＝C-CH3).
[0150] 实施例6 3-脱克拉定糖-3-(3，5-二氟苯乙酰基)-9-(4-氯苯亚乙基腙)克拉霉素(化合物ZKT-2-35)
[0151] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氯苯亚乙基腙)克拉霉素(1.1g，1.41mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入3，5-二氟苯乙酸(0.48g，2.82mmol)，分批加入EDCI(1.08g，5.64mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0152] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.4g，收率32％，HPLC纯度92.6％。
[0153] MS(ESI+，m/e)：895[M+H]+
[0154] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.81(d，J＝8.6Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.37(d，J＝8.6Hz，2H，3-苯环2，6-H)，6.93-6.86(m，2H，9-苯环3，5-H)，6.73(tt，J＝8.9，2.2Hz，1H，3-苯环4-H)，5.48(s，1H)，5.22(dd，J＝11.2，2.1Hz，1H)，5.05(d，J＝11.1Hz，1H)，3.89(d，J＝0.7Hz，
1H)，3.86(d，J＝7.2Hz，1H)，3.85-3.76(m，1H)，3.71(d，J＝3.5Hz，1H)，3.68(d，J＝5.7Hz，
2H)，3.41(s，1H)，3.40-3.34(m，1H)，3.29(dd，J＝14.3，7.2Hz，1H)，3.16(dd，J＝10.1，
7.3Hz，1H)，3.10-3.03(m，1H)，2.95(s，3H)，2.86(dd，J＝11.1，6.8Hz，1H)，2.73(q，J＝
6.6Hz，1H)，2.36(d，J＝3.8Hz，1H)，2.29(d，J＝4.7Hz，9H)，2.26-2.21(m，1H)，2.02-1.91(m，1H)，1.65-1.54(m，3H)，1.54-1.48(m，1H)，1.45(t，J＝9.7Hz，1H)，1.26(d，J＝5.1Hz，
6H)，1.20(s，3H)，1.16-1.10(m，9H)，1.02(d，J＝7.0Hz，3H)，0.95(d，J＝6.7Hz，3H)，0.83(t，J＝7.4Hz，3H).
1H)，3.86(d，J＝7.2Hz，1H)，3.85-3.76(m，1H)，3.71(d，J＝3.5Hz，1H)，3.68(d，J＝5.7Hz，
2H)，3.41(s，1H)，3.40-3.34(m，1H)，3.29(dd，J＝14.3，7.2Hz，1H)，3.16(dd，J＝10.1，
7.3Hz，1H)，3.10-3.03(m，1H)，2.95(s，3H)，2.86(dd，J＝11.1，6.8Hz，1H)，2.73(q，J＝
6.6Hz，1H)，2.36(d，J＝3.8Hz，1H)，2.29(d，J＝4.7Hz，9H)，2.26-2.21(m，1H)，2.02-1.91(m，1H)，1.65-1.54(m，3H)，1.54-1.48(m，1H)，1.45(t，J＝9.7Hz，1H)，1.26(d，J＝5.1Hz，
6H)，1.20(s，3H)，1.16-1.10(m，9H)，1.02(d，J＝7.0Hz，3H)，0.95(d，J＝6.7Hz，3H)，0.83(t，J＝7.4Hz，3H).
[0155] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ179.78(1-CO)，173.52(3-CO)，170.28(9-N＝C-)，164.31(3-苯环3，5-C)，159.76(9-C＝N-)，137.54(9-苯环4-C)，137.07(9-苯环1-C)，135.85(3-苯环1-C)，128.70(9-苯环2，6-C)，128.01(9-苯环3，5-C)，14.88(9-N＝C-CH3)
[0156] 实施例73-脱克拉定糖-3-(2，4，5-三氟苯乙酰基)-9-(4-氯苯亚乙基腙)克拉霉素(化合物ZKT-2-245)
[0157] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氯苯亚乙基腙)克拉霉素(1.1g，1.41mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入2，4，5-三氟苯乙酸(0.54g，2.82mmol)，分批加入EDCI(1.08g，5.64mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0158] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.51g，收率40％，HPLC纯度94.1％。
[0159] MS(ESI+，m/e)：912[M+H]+
[0160] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.81(d，J＝8.6Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.36(d，J＝8.6Hz，2H，9-苯环3，5-H)，7.17(dd，J＝17.0，8.6Hz，1H，3-苯环6-H)，6.94(td，J＝9.5，6.6Hz，1H，
3-苯环3-H)，5.48(s，1H)，5.22(dd，J＝11.1，2.0Hz，1H)，5.06(d，J＝11.0Hz，1H)，3.93(d，J＝7.2Hz，1H)，3.89(s，1H)，3.81(dt，J＝21.5，8.9Hz，1H)，3.76-3.60(m，4H)，3.41(s，1H)，
3.30-3.21(m，1H)，3.18(dd，J＝10.1，7.3Hz，1H)，2.95(s，3H)，2.87(td，J＝13.6，6.8Hz，
1H)，2.73(q，J＝6.7Hz，1H)，2.42(dd，J＝16.6，8.0Hz，1H)，2.29(s，9H)，2.24(dd，J＝7.6，
3.3Hz，1H)，1.96(ddd，J＝15.1，7.6，5.5Hz，1H)，1.61(t，J＝12.9Hz，2H)，1.56-1.47(m，
1H)，1.45(d，J＝14.2Hz，1H)，1.39-1.17(m，12H)，1.14(dd，J＝13.3，6.8Hz，6H)，1.02(dd，J＝6.7，4.6Hz，6H)，0.83(t，J＝7.3Hz，3H).
3-苯环3-H)，5.48(s，1H)，5.22(dd，J＝11.1，2.0Hz，1H)，5.06(d，J＝11.0Hz，1H)，3.93(d，J＝7.2Hz，1H)，3.89(s，1H)，3.81(dt，J＝21.5，8.9Hz，1H)，3.76-3.60(m，4H)，3.41(s，1H)，
3.30-3.21(m，1H)，3.18(dd，J＝10.1，7.3Hz，1H)，2.95(s，3H)，2.87(td，J＝13.6，6.8Hz，
1H)，2.73(q，J＝6.7Hz，1H)，2.42(dd，J＝16.6，8.0Hz，1H)，2.29(s，9H)，2.24(dd，J＝7.6，
3.3Hz，1H)，1.96(ddd，J＝15.1，7.6，5.5Hz，1H)，1.61(t，J＝12.9Hz，2H)，1.56-1.47(m，
1H)，1.45(d，J＝14.2Hz，1H)，1.39-1.17(m，12H)，1.14(dd，J＝13.3，6.8Hz，6H)，1.02(dd，J＝6.7，4.6Hz，6H)，0.83(t，J＝7.3Hz，3H).
[0161] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ179.77(1-CO)，173.51(3-CO)，169.90(9-N＝C-)，159.75(3-苯环2-C)，148.54-147.87(3-苯环4，5-C)，137.16(9-苯环4-C)，135.83(9-苯环1-C)，128.69(9-苯环2，6-C)，128.00(9-苯环3，5-C)，14.87(9-N＝C-CH3).
[0162] 实施例8 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氟苯亚乙基腙)克拉霉素
[0163] 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-腙克拉霉素(9g，15mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入对氟苯乙酮(2.1g，15mmol)和冰乙酸(0.85ml，15mmol)，室温搅拌5h，蒸干除去溶剂；加入适量甲苯(20ml)使油状混合物完全溶解，逐滴加入2N盐酸水溶液至pH 1-2，大量白色固体析出，过滤，滤饼加入水(40ml)和二氯甲烷(40ml)，3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用20ml二氯甲烷抽提，合并二氯甲烷层，20ml水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干，得产物10g，收率90.1％。
[0164] 实施例9 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氟苯亚乙基腙)克拉霉素[0165] 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氟苯亚乙基)腙克拉霉素(10g，13.5mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入乙酸酐(2.53ml，27mmol)，室温搅拌4h。加水(20ml)，3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗(20ml)，饱和食盐水洗，干燥后旋干，得产物10.2g。
[0166] 实施例10 3-脱克拉定糖-3-(4-三氟甲基苯乙酰基)-9-(4-氟苯亚乙基腙)克拉霉素(化合物ZKT-3-4)
[0167] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氟苯亚乙基腙)克拉霉素(1.05g，1.37mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-三氟甲基苯乙酸(0.56g，2.74mmol)，分批加入EDCI(1.04g，5.48mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0168] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.36g，收率28.9％，HPLC纯度89.6％。
[0169] MS(ESI+，m/e)：910[M+H]+
[0170] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.87(dd，J＝8.9，5.5Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.59(d，J＝8.2Hz，2H，3-苯环3，5-H)，7.48(d，J＝8.1Hz，2H，9-苯环3，5-H)，7.08(t，J＝8.7Hz，2H，3-苯环2，6-H)，5.52(s，1H)，5.21(dd，J＝11.2，2.2Hz，1H)，5.05(d，J＝11.1Hz，1H)，3.89(d，J＝
1.1Hz，1H)，3.88-3.80(m，2H)，3.79-3.69(m，3H)，3.41(s，1H)，3.32(s，1H)，3.15(dd，J＝
10.1，7.2Hz，1H)，2.96(s，3H)，2.95-2.91(m，1H)，2.84(dt，J＝13.5，6.8Hz，1H)，2.73(q，J＝6.7Hz，1H)，2.29(d，J＝9.0Hz，9H)，2.25(dd，J＝7.7，3.5Hz，1H)，2.02(s，1H)，2.01-1.91(m，1H)，1.66-1.57(m，1H)，1.51(ddd，J＝11.3，9.1，6.5Hz，2H)，1.44(d，J＝13.9Hz，1H)，
1.26(d，J＝6.8Hz，6H)，1.20(s，3H)，1.14(d，J＝7.5Hz，3H)，1.10(d，J＝6.1Hz，3H)，1.03(d，J＝7.0Hz，3H)，0.91(d，J＝6.8Hz，3H)，0.82(t，J＝7.4Hz，3H).
1.1Hz，1H)，3.88-3.80(m，2H)，3.79-3.69(m，3H)，3.41(s，1H)，3.32(s，1H)，3.15(dd，J＝
10.1，7.2Hz，1H)，2.96(s，3H)，2.95-2.91(m，1H)，2.84(dt，J＝13.5，6.8Hz，1H)，2.73(q，J＝6.7Hz，1H)，2.29(d，J＝9.0Hz，9H)，2.25(dd，J＝7.7，3.5Hz，1H)，2.02(s，1H)，2.01-1.91(m，1H)，1.66-1.57(m，1H)，1.51(ddd，J＝11.3，9.1，6.5Hz，2H)，1.44(d，J＝13.9Hz，1H)，
1.26(d，J＝6.8Hz，6H)，1.20(s，3H)，1.14(d，J＝7.5Hz，3H)，1.10(d，J＝6.1Hz，3H)，1.03(d，J＝7.0Hz，3H)，0.91(d，J＝6.8Hz，3H)，0.82(t，J＝7.4Hz，3H).
[0171] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ179.64(1-CO)，173.55(3-CO)，170.62(9-N＝C-)，165.17(9-苯环4-C)，159.81(9-C＝N-)，137.81(9-苯环1-C)，134.91(3-苯环1-C)，130.20(3-苯环2，6-C)，129.71(9-苯环2，6-C)，128.63(3-苯环3，5-C)，125.58(9-苯环3，5-C)，115.55(3-苯环4-CF3)，14.98(9-N＝C-CH3)
[0172] 实施例11 3-脱克拉定糖-3-(2，4，5-三氟苯乙酰基)-9-(4-氟苯亚乙基腙)克拉霉素(化合物ZKT-3-245)
[0173] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氟苯亚乙基腙)克拉霉素(1.05g，1.37mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入2，4，5-三氟苯乙酸(0.56g，2.74mmol)，分批加入EDCI(1.04g，5.48mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0174] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.54g，收率43.9％，HPLC纯度96.8％。
[0175] MS(ESI+，m/e)：896[M+H]+
[0176] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.90-7.83(m，2H，9-苯环2，6-H)，7.17(ddd，J＝10.2，8.6，6.9Hz，1H，3-苯环6-H)，7.12-7.04(m，2H，9-苯环3，5-H)，6.94(td，J＝9.5，6.6Hz，1H，3-苯环3-H)，5.52(s，1H)，5.22(dd，J＝11.2，2.2Hz，1H)，5.06(d，J＝11.0Hz，1H)，3.94(d，J＝
7.2Hz，1H)，3.89(d，J＝1.2Hz，1H)，3.84(dd，J＝10.1，7.0Hz，1H)，3.70(dd，J＝6.9，3.3Hz，
3H)，3.41(s，1H)，3.33(s，1H)，3.29-3.22(m，1H)，3.18(dd，J＝10.1，7.2Hz，1H)，2.95(s，
3H)，2.87(dd，J＝11.1，6.8Hz，1H)，2.73(dd，J＝13.6，6.6Hz，1H)，2.42(ddd，J＝11.8，8.7，
4.6Hz，2H)，2.30(d，J＝3.3Hz，9H)，2.24(d，J＝3.3Hz，1H)，1.97(ddd，J＝14.3，7.5，2.2Hz，
2H)，1.68-1.57(m，2H)，1.56-1.39(m，3H)，1.28(s，3H)，1.26(d，J＝6.9Hz，3H)，1.20(s，
3H)，1.14(dd，J＝12.7，6.8Hz，8H)，1.02(dd，J＝6.8，4.5Hz，6H)，0.84(d，J＝7.3Hz，3H).[0177] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ179.63(1-CO)，173.51(3-CO)，165.16(9-N＝C-)，162.68(9-苯环4-C)，159.80(9-C＝N-)，157.32(3-苯环2-C)，154.90(3-苯环4-C)，150.89(3-苯环
5-C)，129.07(9-苯环2，6-C)，128.63(9-苯环3，5-C)，14.97(9-N＝C-CH3)
7.2Hz，1H)，3.89(d，J＝1.2Hz，1H)，3.84(dd，J＝10.1，7.0Hz，1H)，3.70(dd，J＝6.9，3.3Hz，
3H)，3.41(s，1H)，3.33(s，1H)，3.29-3.22(m，1H)，3.18(dd，J＝10.1，7.2Hz，1H)，2.95(s，
3H)，2.87(dd，J＝11.1，6.8Hz，1H)，2.73(dd，J＝13.6，6.6Hz，1H)，2.42(ddd，J＝11.8，8.7，
4.6Hz，2H)，2.30(d，J＝3.3Hz，9H)，2.24(d，J＝3.3Hz，1H)，1.97(ddd，J＝14.3，7.5，2.2Hz，
2H)，1.68-1.57(m，2H)，1.56-1.39(m，3H)，1.28(s，3H)，1.26(d，J＝6.9Hz，3H)，1.20(s，
3H)，1.14(dd，J＝12.7，6.8Hz，8H)，1.02(dd，J＝6.8，4.5Hz，6H)，0.84(d，J＝7.3Hz，3H).[0177] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ179.63(1-CO)，173.51(3-CO)，165.16(9-N＝C-)，162.68(9-苯环4-C)，159.80(9-C＝N-)，157.32(3-苯环2-C)，154.90(3-苯环4-C)，150.89(3-苯环
5-C)，129.07(9-苯环2，6-C)，128.63(9-苯环3，5-C)，14.97(9-N＝C-CH3)
[0178] 实施例12 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-三氟甲基苯亚乙基腙)克拉霉素
[0179] 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-腙克拉霉素(9g，15mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入对三氟甲基苯乙酮(2.8g，15mmol)和冰乙酸(0.85ml，15mmol)，室温搅拌5h，蒸干除去溶剂；加入适量甲苯(20ml)使油状混合物完全溶解，逐滴加入2N盐酸水溶液至pH 1-2，大量白色固体析出，过滤，滤饼加入水(40ml)和二氯甲烷(40ml)，3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗(20ml)，饱和食盐水洗，干燥后旋干，得产物10.3g，收率89％。
[0180] 实施例13 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-三氟甲基苯亚乙基腙)克拉霉素
[0181] 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-三氟甲基苯亚乙基)腙克拉霉素(10.3g，13.3mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入乙酸酐(2.49ml，26.6mmol)，室温搅拌4h。加水20ml，3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗(20ml)，饱和食盐水洗，干燥后旋干，得产物10g。
[0182] 实施例14 3-脱克拉定糖-3-(4-氟苯乙酰基)-9-(4-三氟甲基苯亚乙基腙)克拉霉素(ZKT-4-F)
[0183] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-三氟甲基苯亚甲基腙)克拉霉素(1.1g，1.35mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-氟苯乙酸(0.416g，2.66mmol)，分批加入EDCI(1.04g，5.4mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0184] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.61g，收率50％，HPLC纯度91.7％。
[0185] MS(ESI+，m/e)：910[M+H]+
[0186] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.97(d，J＝8.2Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.66(d，J＝8.3Hz，2H，3-苯环2，6-H)，7.31(dd，J＝8.6，5.4Hz，2H，9-苯环3，5-H)，7.01(t，J＝8.6Hz，2H，3-苯环3，5-H)，5.40(s，1H)，5.21(dd，J＝11.1，2.2Hz，1H)，5.04(d，J＝11.0Hz，1H)，3.90(s，
1H)，3.87(d，J＝7.2Hz，1H)，3.78(dd，J＝10.3，7.1Hz，1H)，3.74(d，J＝3.5Hz，1H)，3.69(d，J＝15.2Hz，1H)，3.63(d，J＝15.2Hz，1H)，3.40(s，1H)，3.32(s，1H)，3.16(dd，J＝10.1，
7.2Hz，1H)，3.05(dq，J＝12.0，6.1Hz，1H)，2.98(s，3H)，2.85(ddd，J＝17.9，12.7，6.5Hz，
1H)，2.78-2.70(m，1H)，2.31(d，J＝13.6Hz，9H)，2.24(dd，J＝7.6，3.3Hz，1H)，2.03-1.91(m，1H)，1.67-1.48(m，3H)，1.45(d，J＝13.4Hz，1H)，1.27(d，J＝8.6Hz，6H)，1.21(s，3H)，
1.13(dd，J＝6.8，4.1Hz，6H)，1.03(d，J＝7.0Hz，3H)，0.89(d，J＝6.8Hz，3H)，0.82(t，J＝
7.4Hz，3H).
1H)，3.87(d，J＝7.2Hz，1H)，3.78(dd，J＝10.3，7.1Hz，1H)，3.74(d，J＝3.5Hz，1H)，3.69(d，J＝15.2Hz，1H)，3.63(d，J＝15.2Hz，1H)，3.40(s，1H)，3.32(s，1H)，3.16(dd，J＝10.1，
7.2Hz，1H)，3.05(dq，J＝12.0，6.1Hz，1H)，2.98(s，3H)，2.85(ddd，J＝17.9，12.7，6.5Hz，
1H)，2.78-2.70(m，1H)，2.31(d，J＝13.6Hz，9H)，2.24(dd，J＝7.6，3.3Hz，1H)，2.03-1.91(m，1H)，1.67-1.48(m，3H)，1.45(d，J＝13.4Hz，1H)，1.27(d，J＝8.6Hz，6H)，1.21(s，3H)，
1.13(dd，J＝6.8，4.1Hz，6H)，1.03(d，J＝7.0Hz，3H)，0.89(d，J＝6.8Hz，3H)，0.82(t，J＝
7.4Hz，3H).
[0187] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ180.07(1-CO)，173.63(3-CO)，171.20(9-N＝C-)，159.53(3-苯环4-C)，159.09(9-C＝N-)，142.04(9-苯环1-C)，131.45(3-苯环2，6-C)，129.52(9-苯环2，6-C)，126.98(9-苯环3，5-C)，125.72(9-苯环4-CF3)，115.70(3-苯环3，5-C)，14.94(9-N＝C-CH3)
[0188] 实施例15 3-脱克拉定糖-3-(4-甲氧基苯乙酰基)-9-(4-三氟甲基苯亚乙基腙)克拉霉素(ZKT-4-O)
[0189] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-三氟甲基苯亚甲基腙)克拉霉素(1.1g，1.35mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-甲氧基苯乙酸(0.45g，2.66mmol)，分批加入EDCI(1.04g，5.4mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0190] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.53g，收率42.5％，HPLC纯度90.4％。
[0191] MS(ESI+，m/e)：922[M+H]+
[0192] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.97(d，J＝8.2Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.65(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环3，5-H)，7.25(d，J＝8.6Hz，2H，3-苯环2，6-H)，6.85(d，J＝8.6Hz，2H，3-苯环3，5-H)，5.41(s，1H)，5.22(dd，J＝11.1，2.1Hz，1H)，5.03(d，J＝11.0Hz，1H)，3.90(s，1H)，3.88(d，J＝7.2Hz，1H)，3.80(s，1H)，3.78(s，3H)，3.74(d，J＝3.6Hz，2H)，3.62(d，J＝8.4Hz，
1H)，3.40(s，1H)，3.28(s，1H)，3.15(dd，J＝10.1，7.2Hz，1H)，3.08-3.00(m，1H)，3.00-2.94(m，3H)，2.92-2.79(m，2H)，2.74(dd，J＝12.9，5.8Hz，1H)，2.31(d，J＝15.0Hz，9H)，2.26-
2.18(m，1H)，1.97(dtd，J＝14.8，7.4，5.2Hz，2H)，1.68-1.59(m，1H)，1.58-1.48(m，2H)，
1.45(d，J＝13.7Hz，1H)，1.27(d，J＝6.9Hz，3H)，1.25(s，3H)，1.21(s，3H)，1.12(dd，J＝
9.5，6.9Hz，6H)，1.03(d，J＝7.0Hz，3H)，0.90(d，J＝6.7Hz，3H)，0.82(t，J＝7.4Hz，3H).[0193] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ180.10(1-CO)，173.72(3-CO)，171.66(9-N＝C-)，159.50(3-苯环4-C)，158.98(9-C＝N-)，142.059-苯环1-C)，130.57(3-苯环2，6-C)，129.81(9-苯环2，6-C)，125.77(9-苯环3，5-C)，125.69(9-苯环4-CF3)，114.12(3-苯环3，5-C)，55.40(3-苯环4-OCH3)，14.94(9-N＝C-CH3)
1H)，3.40(s，1H)，3.28(s，1H)，3.15(dd，J＝10.1，7.2Hz，1H)，3.08-3.00(m，1H)，3.00-2.94(m，3H)，2.92-2.79(m，2H)，2.74(dd，J＝12.9，5.8Hz，1H)，2.31(d，J＝15.0Hz，9H)，2.26-
2.18(m，1H)，1.97(dtd，J＝14.8，7.4，5.2Hz，2H)，1.68-1.59(m，1H)，1.58-1.48(m，2H)，
1.45(d，J＝13.7Hz，1H)，1.27(d，J＝6.9Hz，3H)，1.25(s，3H)，1.21(s，3H)，1.12(dd，J＝
9.5，6.9Hz，6H)，1.03(d，J＝7.0Hz，3H)，0.90(d，J＝6.7Hz，3H)，0.82(t，J＝7.4Hz，3H).[0193] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ180.10(1-CO)，173.72(3-CO)，171.66(9-N＝C-)，159.50(3-苯环4-C)，158.98(9-C＝N-)，142.059-苯环1-C)，130.57(3-苯环2，6-C)，129.81(9-苯环2，6-C)，125.77(9-苯环3，5-C)，125.69(9-苯环4-CF3)，114.12(3-苯环3，5-C)，55.40(3-苯环4-OCH3)，14.94(9-N＝C-CH3)
[0194] 实施例16 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氟苯亚甲基腙)克拉霉素
[0195] 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-腙克拉霉素(9g，15mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入对氟苯甲醛(1.9g，15mmol)和冰乙酸(0.85ml，15mmol)，室温搅拌5h，蒸干除去溶剂；加入适量甲苯(20ml)使油状混合物完全溶解，逐滴加入2N盐酸水溶液至pH 1-2，大量白色固体析出，过滤，滤饼加入水(40ml)和二氯甲烷(40ml)，3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗(20ml)，饱和食盐水洗，干燥后旋干，得产物9.8g，收率92.3％。
[0196] 实施例172’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氟苯亚甲基腙)克拉霉素[0197] 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氟苯亚甲基)腙克拉霉素(9.8g，13.8mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入乙酸酐(2.57ml，27.6mmol)，室温搅拌4h。加水20ml，3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷层，20ml水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干，得产物10.1g。
[0198] 实施例183-脱克拉定糖-3-(4-氟苯乙酰基)-9-(4-氟苯亚甲基腙)克拉霉素(ZKT-5-F)
[0199] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氟苯亚甲基腙)克拉霉素(1g，1.33mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-氟苯乙酸(0.41g，2.66mmol)，分批加入EDCI(1.02g，
5.32mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
5.32mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0200] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.52g，收率46.4％，HPLC纯度94.5％。
[0201] MS(ESI+，m/e)：846[M+H]+
[0202] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.28(s，1H)，7.76(dd，J＝8.5，5.6Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.30(dd，J＝8.3，5.5Hz，2H，9-苯环3，5-H)，7.11(t，J＝8.6Hz，2H，3-苯环2，6-H)，7.00(t，J＝8.6Hz，2H，3-苯环3，5-H)，5.65(s，1H)，5.20(dd，J＝11.1，1.9Hz，1H)，5.01(d，J＝
11.0Hz，1H)，4.10(dq，J＝14.0，6.8Hz，1H)，3.90-3.79(m，2H)，3.74-3.59(m，3H)，3.40(s，
1H)，3.29(s，1H)，3.16(dd，J＝10.1，7.3Hz，1H)，3.05(q，J＝6.7Hz，1H)，2.86(s，3H)，2.82(dd，J＝11.1，6.8Hz，1H)，2.77-2.70(m，1H)，2.37-2.31(m，1H)，2.29(s，6H)，2.21(dd，J＝
7.3，3.3Hz，1H)，2.02(s，1H)，1.96(ddd，J＝14.5，7.6，2.0Hz，1H)，1.66-1.44(m，4H)，1.28(d，J＝5.4Hz，3H)，1.24(d，J＝6.9Hz，3H)，1.18(d，J＝5.2Hz，3H)，1.16-1.09(m，8H)，1.06(d，J＝6.9Hz，3H)，0.87(d，J＝6.7Hz，3H)，0.81(t，J＝7.3Hz，3H).
11.0Hz，1H)，4.10(dq，J＝14.0，6.8Hz，1H)，3.90-3.79(m，2H)，3.74-3.59(m，3H)，3.40(s，
1H)，3.29(s，1H)，3.16(dd，J＝10.1，7.3Hz，1H)，3.05(q，J＝6.7Hz，1H)，2.86(s，3H)，2.82(dd，J＝11.1，6.8Hz，1H)，2.77-2.70(m，1H)，2.37-2.31(m，1H)，2.29(s，6H)，2.21(dd，J＝
7.3，3.3Hz，1H)，2.02(s，1H)，1.96(ddd，J＝14.5，7.6，2.0Hz，1H)，1.66-1.44(m，4H)，1.28(d，J＝5.4Hz，3H)，1.24(d，J＝6.9Hz，3H)，1.18(d，J＝5.2Hz，3H)，1.16-1.09(m，8H)，1.06(d，J＝6.9Hz，3H)，0.87(d，J＝6.7Hz，3H)，0.81(t，J＝7.3Hz，3H).
[0203] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ183.90(1-CO)，173.67(3-CO)，171.18(9-N＝C-)，163.45(9-苯环4-C)，157.64(3-苯环4-C)，131.04(3-苯环2，6-C)，130.17(9-苯环2，6-C)，116.23(s)，116.01(9-苯环3，5-C)，115.68(3-苯环3，5-C)
[0204] 实施例19 3-脱克拉定糖-3-(4-氯苯乙酰基)-9-(4-氟苯亚甲基腙)克拉霉素(ZKT-5-C1)
[0205] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氟苯亚甲基腙)克拉霉素(1g，1.33mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-氯苯乙酸(0.45g，2.66mmol)，分批加入EDCI(1.02g，
5.32mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
5.32mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0206] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.59g，收率51.7％，HPLC纯度92.1％。
[0207] MS(ESI+，m/e)：862[M+H]+
[0208] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.28(s，1H)，7.76(dd，J＝8.7，5.5Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.27(d，J＝7.2Hz，4H，9-苯环3，5-H 3-苯环2，6-H)，7.10(t，J＝8.6Hz，2H，3-苯环3，5-H)，
5.65(s，1H)，5.19(dd，J＝11.1，2.1Hz，1H)，5.01(d，J＝11.0Hz，1H)，4.10(dq，J＝14.0，
7.0Hz，1H)，3.88-3.80(m，2H)，3.69(d，J＝3.8Hz，1H)，3.66(d，J＝2.8Hz，1H)，3.63(s，1H)，
3.40(s，1H)，3.30(s，1H)，3.15(dd，J＝10.1，7.2Hz，1H)，3.00-2.91(m，1H)，2.86(s，3H)，
2.85-2.80(m，1H)，2.73(dd，J＝14.5，7.5Hz，1H)，2.36-2.30(m，1H)，2.27(d，J＝13.6Hz，
6H)，2.20(dt，J＝10.1，7.4Hz，1H)，2.14-2.03(m，1H)，1.96(tdd，J＝15.0，7.6，2.2Hz，1H)，
1.65-1.44(m，4H)，1.27(s，3H)，1.24(d，J＝6.9Hz，3H)，1.19(s，3H)，1.11(t，J＝6.4Hz，
6H)，1.06(d，J＝7.0Hz，3H)，0.89(d，J＝6.7Hz，3H)，0.81(t，J＝7.4Hz，3H).[0209] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ183.89(1-CO)，173.64(3-CO)，170.94(9-N＝C-)，165.70(9-苯环4-C)，157.64(9-C＝N-)，133.42(3-苯环2，6-C)，132.24(9-苯环2，6-C)，130.93(3-苯环3，5-C)，116.22(9-苯环3，5-C)
5.65(s，1H)，5.19(dd，J＝11.1，2.1Hz，1H)，5.01(d，J＝11.0Hz，1H)，4.10(dq，J＝14.0，
7.0Hz，1H)，3.88-3.80(m，2H)，3.69(d，J＝3.8Hz，1H)，3.66(d，J＝2.8Hz，1H)，3.63(s，1H)，
3.40(s，1H)，3.30(s，1H)，3.15(dd，J＝10.1，7.2Hz，1H)，3.00-2.91(m，1H)，2.86(s，3H)，
2.85-2.80(m，1H)，2.73(dd，J＝14.5，7.5Hz，1H)，2.36-2.30(m，1H)，2.27(d，J＝13.6Hz，
6H)，2.20(dt，J＝10.1，7.4Hz，1H)，2.14-2.03(m，1H)，1.96(tdd，J＝15.0，7.6，2.2Hz，1H)，
1.65-1.44(m，4H)，1.27(s，3H)，1.24(d，J＝6.9Hz，3H)，1.19(s，3H)，1.11(t，J＝6.4Hz，
6H)，1.06(d，J＝7.0Hz，3H)，0.89(d，J＝6.7Hz，3H)，0.81(t，J＝7.4Hz，3H).[0209] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ183.89(1-CO)，173.64(3-CO)，170.94(9-N＝C-)，165.70(9-苯环4-C)，157.64(9-C＝N-)，133.42(3-苯环2，6-C)，132.24(9-苯环2，6-C)，130.93(3-苯环3，5-C)，116.22(9-苯环3，5-C)
[0210] 实施例203-脱克拉定糖-3-(4-甲氧基苯乙酰基)-9-(4-氟苯亚甲基腙)克拉霉素(ZKT-5-O)
[0211] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氟苯亚甲基腙)克拉霉素(1g，1.33mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-甲氧基苯乙酸(0.44g，2.66mmol)，分批加入EDCI(1.02g，5.32mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0212] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.39g，收率34.2％，HPLC纯度90.4％。
[0213] MS(ESI+，m/e)：858[M+H]+
[0214] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.27(s，1H)，7.76(dd，J＝8.6，5.6Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.24(d，J＝8.6Hz，2H，9-苯环3，5-H 3-苯环2，6-H)，7.11(t，J＝8.6Hz，2H)，6.84(d，J＝
8.6Hz，2H，3-苯环3，5-H)，5.65(s，1H)，5.20(dd，J＝11.1，2.0Hz，1H)，5.01(d，J＝11.0Hz，
1H)，4.10(dq，J＝13.9，6.9Hz，1H)，3.87(d，J＝7.2Hz，1H)，3.84(s，1H)，3.78(s，3H)，3.71(d，J＝3.4Hz，1H)，3.64(d，J＝15.1Hz，1H)，3.58(d，J＝15.1Hz，1H)，3.40(s，1H)，3.26(s，
1H)，3.15(dd，J＝10.1，7.3Hz，1H)，3.07-2.98(m，1H)，2.87(s，3H)，2.83(dd，J＝11.1，
6.8Hz，1H)，2.73(q，J＝6.9Hz，1H)，2.38-2.30(m，1H)，2.27(d，J＝12.6Hz，6H)，2.24-2.16(m，1H)，1.96(dtd，J＝15.0，7.5，5.5Hz，1H)，1.67-1.57(m，1H)，1.57-1.43(m，3H)，1.26(s，
3H)，1.24(d，J＝7.0Hz，3H)，1.19(s，3H)，1.13(d，J＝7.6Hz，3H)，1.11(d，J＝6.2Hz，3H)，
1.06(d，J＝7.0Hz，3H)，0.88(d，J＝6.7Hz，3H)，0.81(t，J＝7.4Hz，3H).
8.6Hz，2H，3-苯环3，5-H)，5.65(s，1H)，5.20(dd，J＝11.1，2.0Hz，1H)，5.01(d，J＝11.0Hz，
1H)，4.10(dq，J＝13.9，6.9Hz，1H)，3.87(d，J＝7.2Hz，1H)，3.84(s，1H)，3.78(s，3H)，3.71(d，J＝3.4Hz，1H)，3.64(d，J＝15.1Hz，1H)，3.58(d，J＝15.1Hz，1H)，3.40(s，1H)，3.26(s，
1H)，3.15(dd，J＝10.1，7.3Hz，1H)，3.07-2.98(m，1H)，2.87(s，3H)，2.83(dd，J＝11.1，
6.8Hz，1H)，2.73(q，J＝6.9Hz，1H)，2.38-2.30(m，1H)，2.27(d，J＝12.6Hz，6H)，2.24-2.16(m，1H)，1.96(dtd，J＝15.0，7.5，5.5Hz，1H)，1.67-1.57(m，1H)，1.57-1.43(m，3H)，1.26(s，
3H)，1.24(d，J＝7.0Hz，3H)，1.19(s，3H)，1.13(d，J＝7.6Hz，3H)，1.11(d，J＝6.2Hz，3H)，
1.06(d，J＝7.0Hz，3H)，0.88(d，J＝6.7Hz，3H)，0.81(t，J＝7.4Hz，3H).
[0215] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ183.91(1-CO)，173.68(3-CO)，171.64(9-N＝C-)，158.97(9-苯环4-C)，157.59(9-C＝N-)，130.94(3-苯环2，6-C)，130.64(9-苯环2，6-C)，116.22(9-苯环3，5-C)，116.00(3-苯环3，5-C)，55.20(3-苯环4-OCH3)
[0216] 实施例21 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氯苯亚甲基腙)克拉霉素
[0217] 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-腙克拉霉素(9g，15mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入对氯苯甲醛(2.1g，15mmol)和冰乙酸(0.85ml，15mmol)，室温搅拌5h，蒸干除去溶剂；加入适量甲苯(20ml)使油状混合物完全溶解，逐滴加入2N盐酸水溶液至pH 1-2，大量白色固体析出，过滤，滤饼加入水(40ml)和二氯甲烷(40ml)，3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗(20ml)，饱和食盐水洗，干燥后旋干，得产物9.9g，收率91.1％。
[0218] 实施例22 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氯苯亚甲基腙)克拉霉素[0219] 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氯苯亚甲基)腙克拉霉素(9.9g，13.7mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入乙酸酐(2.56ml，27.4mmol)，室温搅拌4h。加水(20ml)，3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗(20ml)，饱和食盐水洗，干燥后旋干，得产物10.1g。
[0220] 实施例23 3-脱克拉定糖-3-(4-三氟甲基苯乙酰基)-9-(4-氯苯亚甲基腙)克拉霉素(ZKT-6-4)
[0221] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氯苯亚甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.96mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-三氟甲基苯乙酸(0.8g，3.92mmol)，分批加入EDCI(1.5g，7.83mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0222] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.53g，收率29.6％，HPLC纯度90.4％。
[0223] MS(ESI+，m/e)：912[M+H]+
[0224] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.71(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.60(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环3，5-H)，6.91(t，J＝8Hz，2H 3-苯环2，6-H)，6.76-6.72(m，1H，3-苯环4-H)[0225] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ183.93(1-CO)，173.37(3-CO)，170.43(9-N＝C-)，157.43(9-C＝N-)，137.74(3-苯环1-C)，136.77(9-苯环4-C)，133.12(3-苯环2，6-C)，129.92(9-苯环2，6-C)，129.13(9-苯环3，5-C)，125.43(3-苯环3，5-C)
[0226] 实施例24 3-脱克拉定糖-3-(3，5-二氟苯乙酰基)-9-(4-氯苯亚甲基腙)克拉霉素(ZKT-6-35)
[0227] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氯苯亚甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.96mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入3，5-二氟苯乙酸(0.8g，3.92mmol)，分批加入EDCI(1.5g，7.83mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0228] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.56g，收率33.1％，HPLC纯度90.4％。
[0229] MS(ESI+，m/e)：980[M+H]+
[0230] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.72(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.41(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环3，5-H)，6.91(t，J＝8Hz，2H 3-苯环2，6-H)，6.76-6.72(m，1H，3-苯环4-H)[0231] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ183.93(1-CO)，173.34(3-CO)，170.07(9-N＝C-)，164.29(3-苯环3-C)，164.16(3-苯环5-C)，157.25(9-C＝N-)，137.22(9-苯环4-C)，136.76(3-苯环
1-C)，133.06(9-苯环1-C)，129.27(9-苯环2，6-C)，129.12(9-苯环3，5-C)，112.69(3-苯环
2，6-C)，103.68(3-苯环4-C)，
1-C)，133.06(9-苯环1-C)，129.27(9-苯环2，6-C)，129.12(9-苯环3，5-C)，112.69(3-苯环
2，6-C)，103.68(3-苯环4-C)，
[0232] 实施例25 3-脱克拉定糖-3-(2，4，5-三氟苯乙酰基)-9-(4-氯苯亚甲基腙)克拉霉素(ZKT-6-245)
[0233] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氯苯亚甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.96mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入2，4，5-三氟苯乙酸(0.8g，3.92mmol)，分批加入EDCI(1.5g，7.83mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0234] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.69g，收率39.2％，HPLC纯度93.8％。
[0235] MS(ESI+，m/e)：998[M+H]+
[0236] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.71(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.41(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环3，5-H)，7.20-7.18(m，1H 3-苯环6-H)，6.96-6.93(m，1H，3-苯环3-H)[0237] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ183.95(1-CO)，173.33(3-CO)，169.68(9-N＝C-)，157.43(3-苯环2-C)，136.73(9-C＝N-)，133.12(3-苯环4-C)，129.29(3-苯环5-C)，129.12(9-苯环
2，6-C)，128.63(9-苯环3，5-C)，119.38(3-苯环6-C)，119.32(3-苯环1-C)
2，6-C)，128.63(9-苯环3，5-C)，119.38(3-苯环6-C)，119.32(3-苯环1-C)
[0238] 实施例26 3-脱克拉定糖-3-(4-氟苯乙酰基)-9-(4-氯苯亚甲基腙)克拉霉素(ZKT-6-F)
[0239] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氯苯亚甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.96mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-氟苯乙酸(0.6g，3.92mmol)，分批加入EDCI(1.5g，
7.83mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
7.83mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0240] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.62g，收率41.9％，HPLC纯度91.1％。
[0241] MS(ESI+，m/e)：962[M+H]+
[0242] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.72(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.41(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环3，5-H)，7.31(dd，J＝5.2，5.6Hz，2H 3-苯环2，6-H)，7.03(t，J＝10.2Hz，2H，3-苯环3，5-H)
[0243] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ183.92(1-CO)，173.43(3-CO)，170.98(9-N＝C-)，163.38(3-苯环4-C)，160.93(9-C＝N-)，157.97(9-苯环4-C)，136.74(3-苯环2，6-C)，133.14(9-苯环2，6-C)，130.92(9-苯环3，5-C)，115.51(3-苯环3，5-C)
[0244] 实施例27 3-脱克拉定糖-3-(4-氯苯乙酰基)-9-(4-氯苯亚甲基腙)克拉霉素(ZKT-6-C1)
[0245] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氯苯亚甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.96mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-氯苯乙酸(0.67g，3.92mmol)，分批加入EDCI(1.5g，
7.83mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
7.83mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0246] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.55g，收率31.7％，HPLC纯度90.8％。
[0247] MS(ESI+，m/e)：878[M+H]+
[0248] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.71(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.41(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环3，5-H)，7.30-7.27(m，4H 3-苯环2，6-H 3-苯环3，5-H)
[0249] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ183.95(1-CO)，173.41(3-CO)，170.75(9-N＝C-)，157.40(9-C＝N-)，136.64(9-苯环4-C)，133.37(3-苯环4-C)，130.86(3-苯环2，6-C)，129.28(3-苯环3，5-C)，129.13(9-苯环2，6-C)，128.73(9-苯环3，5-C)
[0250] 实施例28 3-脱克拉定糖-3-(4-甲氧基苯乙酰基)-9-(4-氯苯亚甲基腙)克拉霉素(ZKT-6-O)
[0251] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-氯苯亚甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.96mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-甲氧基苯乙酸(0.65g，3.92mmol)，分批加入EDCI(1.5g，7.83mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0252] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.44g，收率25.7％，HPLC纯度88.8％。
[0253] MS(ESI+，m/e)：874[M+H]+
[0254] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.71(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.41(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环3，5-H)，7.31(t，J＝11.2Hz，2H 3-苯环2，6-H)，6.86(d，J＝8.8Hz，2H，3-苯环3，
5-H)
5-H)
[0255] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ183.82(1-CO)，173.43(3-CO)，171.34(9-N＝C-)，158.86(3-苯环4-C)，157.25(9-C＝N-)，136.64(9-苯环4-C)，133.06(3-苯环2，6-C)，130.38(9-苯环2，6-C)，128.18(9-苯环3，5-C)，113.38(3-苯环3，5-C)，55.20(3-苯环4-OCH3)[0256] 实施例29 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-三氟甲基苯亚甲基腙)克拉霉素
[0257] 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-腙克拉霉素(9g，15mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入对三氟甲基苯甲醛(2.6g，15mmol)和冰乙酸(0.85ml，15mmol)，室温搅拌5h，蒸干除去溶剂；加入适量甲苯(20ml)使油状混合物完全溶解，逐滴加入2N盐酸水溶液至pH 1-2，大量白色固体析出，过滤，滤饼加入水(40ml)和二氯甲烷(40ml)，3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗(20ml)，饱和食盐水洗，干燥后旋干，得产物10.2g，收率89.9％。
[0258] 实施例302’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-三氟甲基苯亚甲基腙)克拉霉素
[0259] 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-三氟甲基苯亚甲基)腙克拉霉素(10.2g，13.5mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入乙酸酐(2.53ml，27mmol)，室温搅拌4h。加水20ml，3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗(20ml)，饱和食盐水洗，干燥后旋干，得产物10.3g。
[0260] 实施例31 3-脱克拉定糖-3-(4-三氟甲基苯乙酰基)-9-(4-三氟甲基苯亚甲基腙)克拉霉素(ZKT-7-4)
[0261] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-三氟甲基苯亚甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.87mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-三氟甲基苯乙酸(0.76g，3.74mmol)，分批加入EDCI(1.43g，7.48mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0262] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.45g，收率25.4％，HPLC纯度89.1％。
[0263] MS(ESI+，m/e)：946[M+H]+
[0264] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.89(d，J＝8Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.70(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环3，5-H)，7.60(d，J＝10.8Hz，2H 3-苯环2，6-H)，7.49(d，2H3-苯环3，5-H)[0265] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ184.66(1-CO)，173.39(3-CO)，170.43(9-N＝C-)，157.05(9-C＝N-)，137.89(9-苯环1-C)，137.70(3-苯环1-C)，132.49(9-苯环4-C)，132.16(3-苯环
4-C)，129.99(3-苯环2，6-C)，129.91(9-苯环2，6-C)，125.78(9-苯环3，5-C)，125.70(3-苯环3，5-C)，125.47(9-苯环4-CF3)，125.26(3-苯环4-CF3)
4-C)，129.99(3-苯环2，6-C)，129.91(9-苯环2，6-C)，125.78(9-苯环3，5-C)，125.70(3-苯环3，5-C)，125.47(9-苯环4-CF3)，125.26(3-苯环4-CF3)
[0266] 实施例32 3-脱克拉定糖-3-(3，5-二氟苯乙酰基)-9-(4-三氟甲基苯亚甲基腙)克拉霉素(ZKT-7-35)
[0267] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-三氟甲基苯亚甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.87mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入3，5-二氟苯乙酸(0.64g，3.74mmol)，分批加入EDCI(1.43g，7.48mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0268] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.51g，收率30.1％，HPLC纯度91.6％。
[0269] MS(ESI+，m/e)：914[M+H]+
[0270] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.89(d，J＝8Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.70(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环3，5-H)，6.91(d，J＝6Hz，2H 3-苯环2，6-H)，7.49(m，1H 3-苯环4-H)
[0271] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ184.66(1-CO)，173.37(3-CO)，170.10(9-N＝C-)，164.29(3-苯环3-C)，161.83(3-苯环5-C)，157.25(9-C＝N-)，137.92(9-苯环4-C)，137.21(3-苯环1-C)，132.49(9-苯环1-C)，128.28(9-苯环2，6-C)，125.79(9-苯环3，5-C)，125.56(3-苯环
4-CF3)，112.76(3-苯环2，6-C)，103.68(3-苯环4-C)
4-CF3)，112.76(3-苯环2，6-C)，103.68(3-苯环4-C)
[0272] 实施例33 3-脱克拉定糖-3-(2，4，5-三氟苯乙酰基)-9-(4-三氟甲基苯亚甲基腙)克拉霉素(ZKT-7-245)
[0273] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-三氟甲基苯亚甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.87mm01)溶于8ml二氯甲烷中，加入2，4，5-三氟苯乙酸(0.71g，3.74mmol)，分批加入EDCI(1.43g，7.48mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0274] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.49g，收率28.1％，HPLC纯度94.9％。
[0275] MS(ESI+，m/e)：932[M+H]+
[0276] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.89(d，J＝8Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.70(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环3，5-H)，7.22-7.18(m，1H 3-苯环6-H)，6.98-6，92(m，1H 3-苯环3-H)
[0277] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ184.67(1-CO)，173.36(3-CO)，169.71(9-N＝C-)，157.15(3-苯环2-C)，137.90(9-C＝N-)，128.27(3-苯环4-C)，125.79(3-苯环5-C)，125.75(9-苯环2，6-C)，119.38(9-苯环3，5-C)，119.20(3-苯环6-C)，119.02(3-苯环1-C)
[0278] 实施例34 3-脱克拉定糖-3-(4-氟苯乙酰基)-9-(4-三氟甲基苯亚甲基腙)克拉霉素(ZKT-7-F)
[0279] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-三氟甲基苯亚甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.87mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-氟苯乙酸(0.58g，3.74mmol)，分批加入EDCI(1.43g，7.48mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0280] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.55g，收率33％，HPLC纯度91.5％。
[0281] MS(ESI+，m/e)：896[M+H]+
[0282] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.89(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.71(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环3，5-H)，7.34-7.28(m，2H 3-苯环2，6-H)，7.05-7.00(m，2H3-苯环3，5-H)[0283] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ184.66(1-CO)，173.46(3-CO)，171.08(9-N＝C-)，163.38(3-苯环4-C)，160.93(9-C＝N-)，137.92(9-苯环1-C)，132.49(9-苯环4-C)，132.16(3-苯环
2，6-C)，129.40(9-苯环2，6-C)，125.79(9-苯环3，5-C)，125.56(9-苯环4-CF3)，115.58(3-苯环3，5-C)
2，6-C)，129.40(9-苯环2，6-C)，125.79(9-苯环3，5-C)，125.56(9-苯环4-CF3)，115.58(3-苯环3，5-C)
[0284] 实施例35 3-脱克拉定糖-3-(4-氯苯乙酰基)-9-(4-三氟甲基苯亚甲基腙)克拉霉素(ZKT-7-C1)
[0285] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-三氟甲基苯亚甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.87mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-氯苯乙酸(0.64g，3.74mmol)，分批加入EDCI(1.43g，7.48mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0286] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.58g，收率34.1％，HPLC纯度89.6％。
[0287] MS(ESI+，m/e)：912[M+H]+
[0288] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.89(d，J＝7.8Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.69(d，J＝8Hz，2H，9-苯环3，5-H)，7.33-7.28(m，4H 3-苯环2，6-H 3-苯环3，5-H)
[0289] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ184.66(1-CO)，173.43(3-CO)，170.05(9-N＝C-)，157.09(9-C＝N-)，137.90(9-苯环1-C)，133.49(9-苯环4-C)，132.48(3-苯环4-C)，132.15(3-苯环1-C)，130.83(3-苯环2，6-C)，128.72(9-苯环2，6-C)，128.26(3-苯环3，5-C)，125.78(3-苯环3，5-C)，125.56(9-苯环4-CF3)
[0290] 实施例36 3-脱克拉定糖-3-(4-甲氧基苯乙酰基)-9-(4-三氟甲基苯亚甲基腙)克拉霉素(ZKT-7-O)
[0291] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-三氟甲基苯亚甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.87mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-甲氧基苯乙酸(0.62g，3.74mmol)，分批加入EDCI(1.43g，7.48mmol)，室温搅拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗，饱和食盐水洗，干燥后旋干得粗品。
[0292] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用4g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.57g，收率33.6％，HPLC纯度93.1％。
[0293] MS(ESI+，m/e)：908[M+H]+
[0294] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.89(d，J＝8Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.70(d，J＝8.4Hz，2H，9-苯环3，5-H)，7.27(t，J＝10.8Hz，2H 3-苯环2，6-H)，6.92-6.86(m，2H 3-苯环3，5-H)[0295] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ184.64(1-CO)，173.54(3-CO)，171.34(9-N＝C-)，158.96(3-苯环4-C)，157.05(9-C＝N-)，137.92(9-苯环4-C)，132.92(9-苯环1-C)，132.14(3-苯环
2，6-C)，129.72(9-苯环2，6-C)，128.26(9-苯环3，5-C)，114.63(3-苯环3，5-C)，55.28(3-苯环4-OCH3)。
2，6-C)，129.72(9-苯环2，6-C)，128.26(9-苯环3，5-C)，114.63(3-苯环3，5-C)，55.28(3-苯环4-OCH3)。
[0296] 实施例37 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-甲氧基苯亚乙基腙)克拉霉素的制备[0297] 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-腙克拉霉素(9g，15mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入对甲氧基苯乙酮(2.25g，15mmol)和冰乙酸(0.85ml，15mmol)，室温搅拌5h，蒸干除去溶剂；加入适量甲苯(20ml)使油状混合物完全溶解，逐滴加入2N盐酸水溶液至pH 1-2，大量白色固体析出，过滤，滤饼加入水(40ml)和二氯甲烷(40ml)，3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗(20ml)，饱和食盐水洗，干燥后旋干，得产物10g，收率90.6％。
[0298] 实施例38 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-甲氧基苯亚乙基腙)克拉霉素的制备
[0299] 3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-甲氧基苯亚乙基)腙克拉霉素(10g，13.6mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入乙酸酐(2.55ml，27.2mmol)，室温搅拌4h。加水(20ml)，3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷层，水洗(20ml)，饱和食盐水洗，干燥后旋干，得产物10.2g。
[0300] 实施例39 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-O-(咪唑羰氧基)-9-(4-甲氧基苯亚乙基腙)克拉霉素的制备
[0301] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-羟基-9-(4-甲氧基苯亚乙基腙)克拉霉素(10.2g，13mmol)溶于50ml二氯甲烷中，依次加入CDI(4.2g，26mmol)、DMAP(3.17g，26mmol)，室温搅拌反应24h；加水(20ml)，用3N NaOH调节pH至9-10，分液，水层用二氯甲烷(20ml)抽提，合并有机层，水洗，pH4-5酸洗(15ml)，饱和食盐水洗，干燥后旋干，得产物9.3g，收率82％。
[0302] 实施例40 3-脱克拉定糖-3-O-(苯甲胺甲酰基)-9-(4-甲氧基苯亚乙基腙)克拉霉素(ZKT-101)
[0303] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-O-(咪唑羰氧基)-9-(4-甲氧基苯亚乙基腙)克拉霉素(0.5g，0.57mmol)溶于8ml DMF，依次加入DBU(0.23ml，1.15mmol)和苄胺(0.31ml，2.87mmol)，60℃反应4h，冷却反应，加水(10ml)，过滤得滤饼。
[0304] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用2g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.35g，收率70.8％，HPLC纯度91％。
[0305] MS(ESI+，m/e)：869[M+H]+
[0306] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.85(d，J＝8.7Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.31(d，J＝3.9Hz，5H，3-苯环2，6-H 9-苯环3，5-H 3-苯环4-H)，6.91(d，J＝8.7Hz，2H，3-苯环3，5-H)，5.66(s，
2H)，5.24(d，J＝10.6Hz，1H)，4.88(d，J＝11.0Hz，1H)，4.39-4.28(m，2H)，3.97(d，J＝
7.2Hz，1H)，3.89(s，1H)，3.84(s，3H)，3.73(s，1H)，3.45(s，1H)，3.19-3.11(m，1H)，2.95(s，
3H)，2.89-2.78(m，2H)，2.71(d，J＝6.8Hz，2H)，2.30(s，9H)，2.02(s，1H)，2.01-1.93(m，
1H)，1.66-1.57(m，1H)，1.50-1.35(m，3H)，1.25(d，J＝6.2Hz，6H)，1.21(s，3H)，1.17-1.06(m，12H)，1.01(d，J＝6.8Hz，3H)，0.83(t，J＝7.2Hz，3H).
2H)，5.24(d，J＝10.6Hz，1H)，4.88(d，J＝11.0Hz，1H)，4.39-4.28(m，2H)，3.97(d，J＝
7.2Hz，1H)，3.89(s，1H)，3.84(s，3H)，3.73(s，1H)，3.45(s，1H)，3.19-3.11(m，1H)，2.95(s，
3H)，2.89-2.78(m，2H)，2.71(d，J＝6.8Hz，2H)，2.30(s，9H)，2.02(s，1H)，2.01-1.93(m，
1H)，1.66-1.57(m，1H)，1.50-1.35(m，3H)，1.25(d，J＝6.2Hz，6H)，1.21(s，3H)，1.17-1.06(m，12H)，1.01(d，J＝6.8Hz，3H)，0.83(t，J＝7.2Hz，3H).
[0307] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ179.13(1-CO)，173.88(9-N＝C-)，161.03(9-C＝N-)，160.30(9-苯环4-C)，156.7l(3-苯环4-C)，138.73(3-CO)，131.47(3-苯环l-C)，128.74(9-苯环l-C)，128.32-127.80(9-苯环2，6-C 3-苯环2，6-C)，55.45(9-苯环OCH3)，14.84(9-N＝C-CH3)
[0308] 实施例41 3-脱克拉定糖-3-O-(4-氟苯甲胺甲酰基)-9-(4-甲氧基苯亚乙基腙)克拉霉素(ZKT-102)
[0309] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-O-(咪唑羰氧基)-9-(4-甲氧基苯亚乙基腙)克拉霉素(0.4g，0.46mmol)溶于10ml DMF，依次加入DBU(0.14ml，0.92mmol)和4-氟苄胺(0.26ml，2.3mmol)，60℃反应5h，冷却反应，加水(10ml)，过滤得滤饼。
[0310] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用2g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.26g，收率63.4％，HPLC纯度90.1％。
[0311] MS(ESI+，m/e)：887[M+H]+
[0312] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.85(d，J＝8.9Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.28(dd，J＝5.9，2.2Hz，2H，3-苯环2，6-H)，7.01(dt，J＝8.5，2.9Hz，2H，9-苯环3，5-H)，6.92(d，J＝8.8Hz，
2H，3-苯环3，5-H)，5.64(s，1H)，5.45(t，J＝6.0Hz，1H)，5.29-5.20(m，1H)，4.88(d，J＝
11.1Hz，1H)，4.37(dd，J＝14.7，6.2Hz，1H)，4.26(dd，J＝14.7，5.9Hz，1H)，3.96-3.89(m，
2H)，3.84(s，4H)，3.73(d，J＝2.4Hz，1H)，3.44(s，1H)，3.13(dd，J＝9.9，7.4Hz，1H)，3.03(dd，J＝13.6，6.1Hz，1H)，2.95(s，3H)，2.88-2.79(m，1H)，2.72(dd，J＝13.4，6.5Hz，1H)，
2.29(s，3H)，2.24(s，6H)，2.04-1.89(m，2H)，1.68-1.58(m，1H)，1.56-1.40(m，3H)，1.28-
1.23(m，6H)，1.21(s，3H)，1.13(td，J＝14.1，5.2Hz，12H)，1.01(d，J＝7.0Hz，3H)，0.84(t，J＝7.3Hz，3H).
2H，3-苯环3，5-H)，5.64(s，1H)，5.45(t，J＝6.0Hz，1H)，5.29-5.20(m，1H)，4.88(d，J＝
11.1Hz，1H)，4.37(dd，J＝14.7，6.2Hz，1H)，4.26(dd，J＝14.7，5.9Hz，1H)，3.96-3.89(m，
2H)，3.84(s，4H)，3.73(d，J＝2.4Hz，1H)，3.44(s，1H)，3.13(dd，J＝9.9，7.4Hz，1H)，3.03(dd，J＝13.6，6.1Hz，1H)，2.95(s，3H)，2.88-2.79(m，1H)，2.72(dd，J＝13.4，6.5Hz，1H)，
2.29(s，3H)，2.24(s，6H)，2.04-1.89(m，2H)，1.68-1.58(m，1H)，1.56-1.40(m，3H)，1.28-
1.23(m，6H)，1.21(s，3H)，1.13(td，J＝14.1，5.2Hz，12H)，1.01(d，J＝7.0Hz，3H)，0.84(t，J＝7.3Hz，3H).
[0313] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ179.14(1-CO)，173.81(9-N＝C-)，161.03(9-C＝N-)，160.29(9-苯环4-C)，156.69(3-苯环4-C)，134.57(3-CO)，131.46(3-苯环1-C)，129.66(9-苯环1-C)，128.94-128.54(9-苯环2，6-C 3-苯环2，6-C)，55.44(9-苯环OCH3)，14.83(9-N＝C-CH3)
[0314] 实施例42 3-脱克拉定糖-3-O-(4-甲氧基苯甲胺甲酰基)-9-(4-甲氧基苯亚乙基腙)克拉霉素(ZKT-103)
[0315] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-O-(咪唑羰氧基)-9-(4-甲氧基苯亚乙基腙)克拉霉素(0.4g，0.46mmol)溶于8ml DMF，依次加入DBU(0.14ml，0.92mmol)和4-甲氧基苄胺(0.3ml，2.3mmol)，60℃反应5h，冷却反应，加水(10ml)，过滤得滤饼。
[0316] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用2g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.27g，收率65.3％，HPLC纯度89.8％。
[0317] MS(ESI+，m/e)：899[M+H]+
[0318] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.85(d，J＝8.9Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.22(d，J＝8.4Hz，2H，3-苯环2，6-H)，6.92(d，J＝8.9Hz，2H，9-苯环3，5-H)，6.83(d，J＝8.5Hz，2H，3-苯环3，5-H)，5.64(s，1H)，5.34(t，J＝5.7Hz，1H)，5.25(dd，J＝11.0，1.7Hz，1H)，4.88(d，J＝11.0Hz，
1H)，4.28(ddd，J＝30.2，14.5，5.9Hz，2H)，3.94(d，J＝7.3Hz，1H)，3.90(s，1H)，3.84(s，
3H)，3.78(d，J＝5.0Hz，3H)，3.74(d，J＝2.5Hz，1H)，3.45(s，1H)，3.13(dd，J＝9.7，7.7Hz，
1H)，3.08-2.99(m，1H)，2.96(s，3H)，2.88-2.79(m，1H)，2.76-2.68(m，1H)，2.30(s，3H)，
2.26(s，6H)，1.98(dtd，J＝15.0，7.5，5.4Hz，1H)，1.69-1.58(m，1H)，1.56-1.44(m，2H)，
1.41(d，J＝14.1Hz，1H)，1.26(d，J＝8.8Hz，7H)，1.21(s，3H)，1.13(dd，J＝6.2，2.9Hz，6H)，
1.10(d，J＝7.5Hz，3H)，1.01(d，J＝6.9Hz，3H)，0.84(t，J＝7.3Hz，3H).
1H)，4.28(ddd，J＝30.2，14.5，5.9Hz，2H)，3.94(d，J＝7.3Hz，1H)，3.90(s，1H)，3.84(s，
3H)，3.78(d，J＝5.0Hz，3H)，3.74(d，J＝2.5Hz，1H)，3.45(s，1H)，3.13(dd，J＝9.7，7.7Hz，
1H)，3.08-2.99(m，1H)，2.96(s，3H)，2.88-2.79(m，1H)，2.76-2.68(m，1H)，2.30(s，3H)，
2.26(s，6H)，1.98(dtd，J＝15.0，7.5，5.4Hz，1H)，1.69-1.58(m，1H)，1.56-1.44(m，2H)，
1.41(d，J＝14.1Hz，1H)，1.26(d，J＝8.8Hz，7H)，1.21(s，3H)，1.13(dd，J＝6.2，2.9Hz，6H)，
1.10(d，J＝7.5Hz，3H)，1.01(d，J＝6.9Hz，3H)，0.84(t，J＝7.3Hz，3H).
[0319] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ179.19(1-CO)，173.86(9-N＝C-)，161.03(9-C＝N-)，160.28(9-苯环4-C)，159.2l(3-苯环4-C)，131.49(3-CO)，130.80(3-苯环2，6-C)，129.33(9-苯环2，6-C)，55.43(9-苯环OCH33-苯环OCH3)，14.85(9-N＝C-CH3)
[0320] 实施例43 3-脱克拉定糖-3-O-(4-甲基苯甲胺甲酰基)-9-(4-甲氧基苯亚乙基腙)克拉霉素(ZKT-104)
[0321] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-O-(咪唑羰氧基)-9-(4-甲氧基苯亚乙基腙)克拉霉素(0.4g，0.46mmol)溶于8ml DMF，依次加入DBU(0.14ml，0.92mmol)和4-甲基苄胺(0.27ml，2.3mmol)，60℃反应4.5h，冷却反应，加水(10ml)，过滤得滤饼。
[0322] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用2g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.31g，收率75.4％，HPLC纯度93.1％。
[0323] MS(ESI+，m/e)：883[M+H]+
[0324] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.85(d，J＝8.8Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.18(d，J＝7.7Hz，2H，3-苯环2，6-H)，7.11(d，J＝7.7Hz，2H，9-苯环3，5-H)，6.92(d，J＝8.8Hz，2H，3-苯环3，5-H)，5.65(s，1H)，5.36(t，J＝5.7Hz，1H)，5.24(d，J＝10.7Hz，1H)，4.88(d，J＝11.0Hz，1H)，
4.31(qd，J＝14.8，6.2Hz，2H)，3.94(d，J＝7.2Hz，1H)，3.90(s，1H)，3.84(s，3H)，3.74(d，J＝1.6Hz，1H)，3.45(s，1H)，3.13(dd，J＝9.5，7.9Hz，1H)，3.08-2.99(m，2H)，2.96(s，3H)，
2.83(dt，J＝17.5，6.8Hz，1H)，2.72(d，J＝6.7Hz，1H)，2.31(d，J＝6.3Hz，6H)，2.25(s，6H)，
2.00-1.93(m，1H)，1.69-1.58(m，1H)，1.58-1.47(m，1H)，1.42(s，1H)，1.36(d，J＝23.4Hz，
1H)，1.29-1.20(m，9H)，1.18-1.06(m，12H)，1.01(d，J＝6.8Hz，3H)，0.84(t，J＝7.2Hz，3H).[0325] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ179.19(1-CO)，173.88(9-N＝C-)，161.03(9-C＝N-)，
160.30(9-苯环4-C)，156.62(3-CO)，137.38(3-苯环4-C)，135.63(9-苯环l-C)，131.49(3-苯环2，6-C)，129.52(9-苯环2，6-C)，55.46(9-苯环OCH3)，14.86(9-N＝C-CH3)[0326] 实施例44 3-脱克拉定糖-3-O-(β-苯乙胺甲酰基)-9-(4-甲氧基苯亚乙基腙)克拉霉素(ZKT-105)
4.31(qd，J＝14.8，6.2Hz，2H)，3.94(d，J＝7.2Hz，1H)，3.90(s，1H)，3.84(s，3H)，3.74(d，J＝1.6Hz，1H)，3.45(s，1H)，3.13(dd，J＝9.5，7.9Hz，1H)，3.08-2.99(m，2H)，2.96(s，3H)，
2.83(dt，J＝17.5，6.8Hz，1H)，2.72(d，J＝6.7Hz，1H)，2.31(d，J＝6.3Hz，6H)，2.25(s，6H)，
2.00-1.93(m，1H)，1.69-1.58(m，1H)，1.58-1.47(m，1H)，1.42(s，1H)，1.36(d，J＝23.4Hz，
1H)，1.29-1.20(m，9H)，1.18-1.06(m，12H)，1.01(d，J＝6.8Hz，3H)，0.84(t，J＝7.2Hz，3H).[0325] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ179.19(1-CO)，173.88(9-N＝C-)，161.03(9-C＝N-)，
160.30(9-苯环4-C)，156.62(3-CO)，137.38(3-苯环4-C)，135.63(9-苯环l-C)，131.49(3-苯环2，6-C)，129.52(9-苯环2，6-C)，55.46(9-苯环OCH3)，14.86(9-N＝C-CH3)[0326] 实施例44 3-脱克拉定糖-3-O-(β-苯乙胺甲酰基)-9-(4-甲氧基苯亚乙基腙)克拉霉素(ZKT-105)
[0327] 2’-O-乙酰基-3-脱克拉定糖-3-O-(咪唑羰氧基)-9-(4-甲氧基苯亚乙基腙)克拉霉素(0.4g，0.46mmol)溶于8ml DMF，依次加入DBU(0.14ml，0.92mmol)和苯乙胺(0.29ml，2.3mmol)，60℃反应2.5h，冷却反应，加水(10ml)，过滤得滤饼。
[0328] 粗品加10ml甲醇加热回流2h。用2g 200～300目硅胶拌样后FLASH柱层析分离得产物0.29g，收率71.9％，HPLC纯度92.3％。
[0329] MS(ESI+，m/e)：883[M+H]+
[0330] 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.85(d，J＝8.8Hz，2H，9-苯环2，6-H)，7.31(t，J＝7.3Hz，2H，3-苯环2，6-H)，7.23(t，J＝7.3Hz，1H，3-苯环4-H)，7.18(d，J＝7.0Hz，2H，9-苯环3，5-H)，6.92(d，J＝8.9Hz，2H，3-苯环3，5-H)，5.65(s，1H)，5.25(dd，J＝11.1，2.1Hz，1H)，4.99-
4.91(m，1H)，4.87(d，J＝11.1Hz，1H)，4.00(d，J＝7.3Hz，1H)，3.97-3.91(m，1H)，3.89(s，
1H)，3.84(s，3H)，3.79(d，J＝1.9Hz，1H)，3.64(dq，J＝13.5，6.9Hz，1H)，3.44(s，1H)，3.32-
3.21(m，2H)，3.17(dd，J＝10.0，7.4Hz，1H)，2.96(s，3H)，2.83(t，J＝6.9Hz，2H)，2.72(dd，J＝13.2，6.3Hz，1H)，2.45-2.35(m，1H)，2.33-2.26(m，9H)，2.22(d，J＝5.6Hz，1H)，2.05-
1.94(m，1H)，1.62(dd，J＝20.5，8.4Hz，2H)，1.51(ddd，J＝14.2，11.2，7.2Hz，1H)，1.41(d，J＝14.1Hz，1H)，1.27(s，3H)，1.26(d，J＝5.6Hz，4H)，1.21(s，3H)，1.18(d，J＝6.1Hz，3H)，
1.08(t，J＝6.3Hz，6H)，1.02(d，J＝7.0Hz，3H)，0.84(t，J＝7.3Hz，3H).
4.91(m，1H)，4.87(d，J＝11.1Hz，1H)，4.00(d，J＝7.3Hz，1H)，3.97-3.91(m，1H)，3.89(s，
1H)，3.84(s，3H)，3.79(d，J＝1.9Hz，1H)，3.64(dq，J＝13.5，6.9Hz，1H)，3.44(s，1H)，3.32-
3.21(m，2H)，3.17(dd，J＝10.0，7.4Hz，1H)，2.96(s，3H)，2.83(t，J＝6.9Hz，2H)，2.72(dd，J＝13.2，6.3Hz，1H)，2.45-2.35(m，1H)，2.33-2.26(m，9H)，2.22(d，J＝5.6Hz，1H)，2.05-
1.94(m，1H)，1.62(dd，J＝20.5，8.4Hz，2H)，1.51(ddd，J＝14.2，11.2，7.2Hz，1H)，1.41(d，J＝14.1Hz，1H)，1.27(s，3H)，1.26(d，J＝5.6Hz，4H)，1.21(s，3H)，1.18(d，J＝6.1Hz，3H)，
1.08(t，J＝6.3Hz，6H)，1.02(d，J＝7.0Hz，3H)，0.84(t，J＝7.3Hz，3H).
[0331] 13CNMR(100MHz，CDCl3)δ179.19(1-CO)，173.87(9-N＝C-)，161.03(9-C＝N-)，160.30(9-苯环4-C)，156.58(3-CO)，138.64(3-苯环4-C)，131.49(9-苯环1-C)，128.84(3-苯环2，6-C)，128.23(9-苯环2，6-C)，55.46(9-苯环OCH3)，14.86(9-N＝C-CH3)。
[0332] 发明人在之前的工作中，以克拉霉素为原料并将其他反应底物进行相应的调整，按照本发明所述的化合物I的制备方法制得了化合物SIPI8294和SIPI8510，并对上述两个化合物进行了单晶X射线衍射实验，数据证明两个化合物的晶体为9位亚腙均为EE构型。
[0333] SIPI8294的单晶X-射线结构测定结果如下：
[0334] 衍射实验：SIPI8294晶体呈无色透明块状，衍射实验用晶体大小为0.25×0.28×0.34mm，属正交晶系，空间群P212121，晶胞参数：a＝14.1087(2)，b＝14.6439(2)，α＝β＝γ＝90.0°，晶胞体积 晶胞内不对称单位数
Z＝4。
Z＝4。
[0335] 用Bruker SMART APEX-II衍射仪收集衍射强度数据，CuKα辐射，石墨单色器，单导管直径φ＝0.50mm，晶体与CCD探测器距离d＝60.3mm，管压40kV，管流30mA，扫描方式：ω扫描，收集总衍射点数为27587个，独立衍射点数为9874个，可观察点数(甲2≥2σ|F|2)为9505个。
[0336] 结果表明：晶态下分子排列属第一类空间群，故样品应具有旋光活性，Flack系数为0.06(3)，可确定晶体中化合物SIPI8294的9位亚腙为EE构型，其绝对构型如下述结构式所示，分子立体构型投影图如图1所示。晶态下分子间存在氢键联系，分子以范德华力和氢键维系其在空间的稳定排列。
[0337]
[0338] SIPI-8510的单晶X-射线结构测定结果：
[0339] 衍射实验：SIPI-8510晶体呈无色透明柱状，衍射实验用晶体大小为0.10×0.12×0.15mm，属三斜晶系，空间群P1，晶胞参数：a＝9.8189(1)，b＝11.0611(1)，
α＝87.7820(1)，β＝84.960(1)，γ＝63.9760(1)°，晶胞体积
晶胞内不对称单位数Z＝1。
α＝87.7820(1)，β＝84.960(1)，γ＝63.9760(1)°，晶胞体积
晶胞内不对称单位数Z＝1。
[0340] 用Bruker SMART APEX-II衍射仪收集衍射强度数据，CuKα辐射，石墨单色器，单导管直径φ＝0.50mm，晶体与CCD探测器距离d＝60.3mm，管压40kV，管流30mA，扫描方式：扫描，收集总衍射点数为8741个，独立衍射点数为5550个，可观察点数(|F|2≥2σ|F|2)。
[0341] 结果表明：晶态下分子排列属第一类空间群，故样品应具有旋光活性，Flack系数为0.04(3)，可确定晶体中化合物的9位亚腙为EE构型，其绝对构型如下述结构式所示，分子立体构型投影图如图2所示。晶态下分子间存在氢键联系，分子以范德华力和氢键维系其在空间的稳定排列。
[0342] 据此，本领域技术人员可以很明确地确定由本发明所述的制备方法制备得到的化合物I、化合物II和化合物7a的9位亚腙均为EE构型。
[0343] 效果实施例1化合物增效β-内酰胺类抗生素抗MRSA活性
[0344] 1.材料与仪器：
[0345] 1.1实验菌株：
[0346] 标准菌株(均购自美国模式菌株收集中心ATCC)
[0347] 耐甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌ATCC 43300
[0348] 1.2培养基
[0349] LB液体培养基：胰蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化钠10g/L
[0350] LB固体培养基：在所述的LB液体培养基的基础上另加15g/L纯化琼脂粉。
[0351] 1.3材料及试剂：
[0352]试剂名称 规格 来源
琼脂粉 生化试剂 北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司
胰蛋白胨 工业级 英国Oxoid公司
酵母提取物 工业级 美国Difco公司
NaCl 分析纯 国药集团化学试剂有限公司
无水乙醇 分析纯 国药集团化学试剂有限公司
二甲亚砜 分析纯 国药集团化学试剂有限公司
NaOH 分析纯 国药集团化学试剂有限公司
琼脂粉 生化试剂 北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司
胰蛋白胨 工业级 英国Oxoid公司
酵母提取物 工业级 美国Difco公司
NaCl 分析纯 国药集团化学试剂有限公司
无水乙醇 分析纯 国药集团化学试剂有限公司
二甲亚砜 分析纯 国药集团化学试剂有限公司
NaOH 分析纯 国药集团化学试剂有限公司
[0353] 1.4实验仪器：
[0354]
[0355] 2.实验方法：
[0356] 2.1稀释实验接种物的制备
[0357] 采用生长方法制备相当于0.5麦氏单位的标准化接种物，再用MHB培养基按1∶150稀释，得到用于实验的初始菌液，并在15min内接种，用于测定药物MIC实验。
[0358] 2.2药物单独作用下的MIC测定
[0359] 抗生素和新型化合物单独最低抑菌活性(MICs)的测定采用微量稀释法，参照CLSI M07-A9标准制备倍比稀释的抗菌药物。以不含药物的CAMHB接种管为阳性对照，不接种细菌的培养物作为阴性对照，使每管最终菌液浓度约为0.25-0.5×106CFU/ml。将培养物置于37℃，培养16-20h后，观察细菌的生产情况，并判读药物单独的最低抑菌浓度(MICs)。
[0360] 2.3联合抑菌实验MIC的测定
[0361] 联合抑菌试验中组合药物倍比稀释方法(棋盘法)：采用微量稀释法，固定待测化合物的终浓度，再按照M07-A9操作步骤依次将组合药物中的待测抗生素倍比稀释，以含单一抗生素或单一待测红霉素衍生物的培养液位阳性对照，不接种细菌的培养物为阴性对照，使培养液最终菌弄度约为0.25-0.5×106CFU/ml。将培养物置于37℃，培养16-20h后，观察细菌的生长情况，判读各组合药物中抗生素的MICs。
[0362] 2.4FIC值得计算
[0363] FIC指数＝A药联合时MIC/A药单测时MIC+B药联合时MIC/B药单测时MIC
[0364] 判断标准：FIC≤0.5为协同作用，0.5-1为相加作用，1-2为无关作用，＞2为拈抗作用。
[0365] 3.统计学分析
[0366] 以上实验均重复3次，实验结果采用t-test组间数据进行差异显著性分析。P值小于0.05具有显著性差异。
[0367] 4.测定方法：
[0368] 受试菌：耐甲氧西林金葡菌MRSAATCC 43300，mecA阳性；根据美国临床标准化委员会(Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)的临床试验标准，苯唑西林MIC法用以检测mecA介导的苯唑西林耐药。
[0369] 实验测定项目：(1)大环内酯类新化合物及苯唑西林单独使用时对MRSA ATCC43300的MIC值；(2)对28个大环内酯类新化合物以8μg/ml、4μg/ml、2μg/ml和1μg/ml的浓度梯度分别与苯唑西林联用，测定不同浓度下苯唑西林的MIC。
[0370] MIC的测定方法参照CLSI M07-A9《需氧菌的稀释法抗菌药物敏感性试验》执行标准，第九版。
[0371] 稀释试验接种物的制备：采用生长方法制备相当于0.5麦氏单位的标准化接种物，再用MHB培养基按1∶150稀释，并在15min内接种，用于测定药物MIC。
[0372] 抗生素和新型化合物单药最低抑菌活性(MIC)的测定采用宏量稀释法，参照M07-A9标准制备倍比稀释的抗菌药物。以不含药物的CAMHB接种管为阳性对照，不接种细菌的培养物作为阴性对照，使每管最终菌液浓度约为0.25×106～0.5×106CFU/ml。
[0373] 联合抑菌试验中组合药物倍比稀释方法：采用微量稀释法，固定待测酰内酯类衍生物的终浓度，再按照M07-A9操作步骤依次将组合药物中的待测抗生素倍比稀释。以含单一抗生素或单一待测酰内酯类衍生物的培养液为阳性对照，不接种细菌的培养物为阴性对照，使培养液最终菌浓约为0.25×106～0.5×106CFU/ml。
[0374] 将培养物置于37℃，培养16～20h后，观察细菌的生长情况。并判读药物单独的MIC以及组合药物中抗生素的MIC，以MIC报告之。
[0375] 抗菌药物联合用药可以出现4种结果：1)无关作用：两种药物联合作用的活性等于其单独活性；2)拈抗作用：两种药物联合作用显著低于二者单独抗菌活性；3)累加作用：两种药物联合作用时的活性等于两种单独抗菌活性之和；4)协同作用：两种药物联合作用显著大于二者单独作用的总和。判断其是否有增效作用采用分级抑菌浓度FIC(fractional inhibitory concentration)指数判断。
[0376] FIC指数＝(A药联合时MIC/A药单测时MIC)+(B药联合时MIC/B药单测MIC)
[0377] FIC指数≤0.5为协同作用；0.5～1为相加作用；1～2为无关作用；＞2为拈抗作用。
[0378] 5大环内酯类化合物活性结果
[0379] 表1中，化合物SIPI-8294结构详见专利CNl04337826A第24页；化合物SIPI-8555和SIPI-8556结构详见专利CNl04341471第10页。
[0380] 表1大环内酯类化合物苯唑西林联用抗MRSA ATCC43300的MIC(μg/ml)
[0381]
[0382]
[0383] a以联合抑菌试验计算分级抑菌浓度(fractional inhibitory concentration，FIC)指数。
[0384] 表1中出现的MIC值的两组不同数据(例如64/128)，是在实验中出现的原始数据，表示其在MIC的测试中符合实验规范。
[0385] 在自身抗MRSA活性方面，有20个化合物活性优于阳性对照SIPI-8294(64μg/ml)，其中7个化合物MIC小于16μg/ml，即显示出一定的单独抗MRSA活性，最优的为ZKT-6-C1，达到4/8μg/ml，ZKT-5-F、ZKT-5-Cl和ZKT-6-245次之，为8μg/ml。
[0386] 在增效苯唑西林抗MRSA活性方面，联用浓度为1-8μg/ml的范围内，除ZKT-7-4和ZKT-7-35外，其余25个化合物均显示出不同程度的增效作用，22个化合物活性显著优于SIPI-8294，15个化合物显著优于化合物SIPI-8555和SIPI-8556。其中ZKT-2-245和ZKT-3-245为最优，联用浓度为1μg/ml时，苯唑西林的MIC为8/16μg/ml，增效16倍；联用浓度为2μg/ml时，苯唑西林的MIC为1/2μg/ml，增效128倍；联用浓度为4μg/ml时，苯唑西林的MIC可降至
0.25μg/ml和0.0625μg/ml，增效512-2048倍，是目前所有化合物中在任意一联用浓度梯度下增效活性最优的化合物。
0.25μg/ml和0.0625μg/ml，增效512-2048倍，是目前所有化合物中在任意一联用浓度梯度下增效活性最优的化合物。
[0387] 总结不同的联用浓度下增效活性最优的MIC及对应的化合物数量(表2)：当大环内酯类新化合物与苯唑西林的联用浓度为1μg/ml时，苯唑西林MIC为8-16μg/ml的化合物有7个；当联用浓度为2μg/ml时，苯唑西林MIC＜4μg/ml的化合物有10个；当联用浓度为4μg/ml时，苯唑西林MIC≤1μg/ml的化合物有7个；当联用浓度为8μg/ml时，苯唑西林MIC＜11μg/ml的化合物有5个。不仅在原有基础上使增效活性提高了几个数量级，而且增效活性优异的化合物数量也显著增多。
[0388] 表2各联用浓度梯度下增效活性最优的MIC及对应的化合物数量
[0389]